Состояние естественной резистентности и иммунологической реактивности у новорожденных телят при колибактериозе
Информация - Медицина, физкультура, здравоохранение
Другие материалы по предмету Медицина, физкультура, здравоохранение
лица 2.12
Динамика накопления иммуноглобулина М в сыворотке крови телят (n=16)
Определяемая величина Средняя арифметическая, мг/млДисперсияСреднее квадратическое отклонениеСредняя арифметическая ошибкаРtpТочность прямых измеренийДоверительный интервал, мг/млОтносительная ошибка (погрешность), %Телята до приема молозива0,4950,00170,040,0240,053,1820,0760,42-0,5715,3Телята суточного возраста1,1150,0070,0270,0150,053,1820,0481,07-1,164,3Телята 2-3-дневного возраста1,82250,010,10,0170,053,1820,541,28-2,362,96Телята 9-10-дневного возраста2,02750,0170,130,190,053,1820,601,43-2,632,96
Значение Е. coli в патогенезе диареи новорожденных телят и исключительная важность кормления их молозивом, увеличивающем резистентность к колиинфекции указывали Th. Smith and R. B. Little, 1922; Th. Smith and R.B. Little, 1922b еще в 20-х годах нашего столетия. Первоначальным фактором, связанным с восприимчивостью телят к Е. coli инфекции, является отсутствие в их сыворотке иммуноглобулинов [С. С. Gay, S. M. Parish, T. C. McGuire 1982].
Таблица 2.13
Динамика накопления иммуноглобулина А в сыворотке крови телят (n=16)
Определяемая величинаСредняя арифметическая, мг/млДисперсияСреднее квадратическое отклонениеСредняя арифметическая ошибкаРtpТочность прямых измеренийДоверительный интервал, мг/млОтносительная ошибка (погрешность), %Телята до приема молозива0,03750,010,10,0020,053,1820,0060,032-0,04416,0Телята суточного возраста0,52750,060,240,0150,053,1820,0480,48-0,579,09Телята 2-3-дневного возраста0,7050,030,190,0110,053,1820,0350,67-0,744,96Телята 9-10-дневного возраста0,770,060,240,0140,053,1820,0450,72-0,815,84
У некоторых телят, которые получали молозиво, этот дефицит имеет место подчеркивал C. C. Gay, 1984. По-видимому, некоторые из этих телят утрачивали способность к абсорбции иммуноглобулинов из молозива в течение 4-6 ч после рождения. Факторы, контролирующие абсорбцию гамма глобулинов у новорожденных телят и потеря гаммаглобулинов из их сыворотки, не известны. Потеря гаммаглобулинов из сыворотки телят случается при экскреции в мочу и фецес при нормальном катаболизме. Количество гаммаглобулинов, экскретирующихся в фецес, заметно увеличивается у телят при диареи.
Телята меньше 2-недельного возраста не продуцируют антител после энтеробактериальной О-антигенной (Е. coli) инокуляции. Способность реагировать на антигенную инокуляцию зависит от возраста телят и естественно от иммуногена [С. С. Gay, 1971].
Глобулиновая фракция молозива, ответственная за защиту телят не была идентифицирована, несмотря на то, что различные антитела, имеющиеся в молозиве, трансформируются в сыворотку неонатальных телят [R. Aschaffenburg, S. Bartlett, S. K. Kon, P. Terry, S. Y. Thompson and D. M. Walker, 1949a; R. Aschaffenburg, S. Bartlett, S. K. Kon, D. M. Walker, C. Briggs, E. Cotchin and R. Lovell, 1949b].
Антигены приготовили из трех серотипов Е. coli. Серотипы О78:К80; О119:К69; О137:К79 были изолированы от телят с инфекционной диареей в учхозе Кетросу района Анений Ной. Бактерии выращивали на МПА 8-10 ч при 37 С в бактериальных матрацах. Клетки смывали из агара стерильным физиологическим раствором хлорида натрия и бактериальную суспензию автоклавировали при 120 С в течение 2 ч для разрушения К-антигена. Густую отмытую суспензию смешивали с ацетоном в отношении 1:5 до появления коагуляции (свертывания). Плотную часть материала отбирали на воронке Бюхнера промытой один раз ацетоном и затем высушенной эфиром. Препарат был высушен на воздухе и сохраняли при 4 С.
Сухой порошок применяли для приготовления суспензии антигена, добавляя 1 мг высушенных ацетоном бактерий к 1 мл барбиталового буферам [E. Neter, 1957].
Молозиво получали от 23 коров при первом доении после отела.
Двадцать три пробы цельного молока получали от коров средней лактации, сравнивая уровень антител с уровнем в молозиве из того же стада (коровника). Молочную сыворотку приготовляли из молозива и молока и тестировали на антитела, тем же методом что и сыворотку крови. Пробы крови отбирали у телят вскоре после рождения с интервалом 12-24 ч. Кровь выдерживали при комнатной температуре до появления сгустка и сыворотку отделяли в течение 6 ч. Пробы сыворотки крови, молозива и молока хранили при 20 С до тестирования.
2.2.7.1. Серологический тест. Сыворотку инактивировали при 56 С в течение 30 мин для разрушения комплементной активности. Все сыворотки, в том числе молозивные и молочные, абсорбировали с эритроцитами барана, исключая какие либо антитела к эритроцитам. Агглютинирующие антитела определяли по методу E. Neter, E. A. Gorzynski, R. M. Gino, O. Westphal and O. Luderwitz, 1956, за исключением того, что эритроциты барана были утилизированы и был приготовлен антиген, высушенный ацетоном.
Антиглобулиновый тест применяли для определения титра не агглютинирующих антител [E. Neter, 1957] используя антиглобулиновую (бычью) сыворотку. Все титрации проводили в двукратном разведении, ранг серии от 2-2 до 2-11, применяя 0,1 мл разведенной сыворотки и 0,1 мл 2 % суспензии антигена с эритроцитами барана, которые были промыты 3 раза после антигенной абсорбции.
Агглютинационный тест учитывали после 10-120 минутной выдержки при комнатной температуре.
Антиглобулиновый тест определяли после инкубации в термостате при 37 С в течение 1 ч и выдержки в холодильнике при 4 С в течение 12 ч.
Высшее сывороточное разведение, которое имело хорошо выраженную агглютинацию, учитывали как титр этой сыворотки. Чувствительность антител к 2-меркаптоэтанолу определяли инкубированием сыворотки на 0,1М растворе CH2SHCH2OH, при 37 С в течение 30 мин. Резистентность к этой обработке была взята как показание, что антитела не являются макроглобулинами.
2.2.7.2 Абсорбционный тест. Определение специфичности антител аб