Санiтарна мiкробiологiя як наука
Информация - Медицина, физкультура, здравоохранение
Другие материалы по предмету Медицина, физкультура, здравоохранение
ки обСФктiв навколишнього середовища
До обСФктiв навколишнього середовища вiдносяться грунт, вода, повiтря, харчовi продукти, предмети вжитку тощо. Усi вони мiстять, в основному, сапрофiтну мiкрофлору. Сюди можуть потрапляти i патогеннi мiкроорганiзми. Проте вони знаходяться в зовнiшньому середовищi не постiйно i в невеликiй кiлькостi. Для виявлення патогенних мiкроорганiзмiв необхiднi спецiальнi дослiдження з використанням елективних поживних середовищ, складних методик та обладнання. Тому такi дослiдження застосовуються лише при виникненнi загрози зараження.
Найчастiше санiтарно-гiгiСФнiчний стан обСФктiв довкiлля оцiнюють за непрямими мiкробiологiчними показниками, якi дозволяють визначити ступiнь потенцiйноСЧ небезпеки. До них вiдносять загальне мiкробне число (загальне мiкробне забруднення), та забрудненiсть обСФкта видiленнями людини i тварин, яку визначають кiлькiсним пiдрахунком санiтарно-показових мiкроорганiзмiв, показникiв фекального та повiтряно-крапельного забруднення (iндекс).
2.1 Загальна характеристика методiв санiтарно-мiкробiологiчних дослiджень
Для визначення кiлькостi мiкроорганiзмiв використовують рiзнi методи:
- прямий пiдрахунок пiд мiкроскопом у рахувальних камерах (застосовуСФться рiдко);
- кiлькiсний посiв на щiльнi середовища з наступним пiдрахунком колонiй, якi виросли;
- титрацiйний посiв на рiдкi поживнi середовища;
- спецiальнi методи, якi враховують особливостi дослiджуваного матерiалу.
Кiлькiсть санiтарно-показових мiкроорганiзмiв у дослiджуваному матерiалi виражають у виглядi титру чи iндексу.
Титр - це найменший обСФм дослiджуваного матерiалу (в мiлiлiтрах) чи вагова кiлькiсть (у грамах), в яких виявлена одна клiтина санiтарно-мязового мiкроорганiзму.
РЖндекс - кiлькiсть клiтин санiтарно-показового мiкроорганiзму в 1 л (i г) дослiджуваного матерiалу.
Вiдповiдно, для грунту i харчових продуктiв:
РЖндекс - величина, обернена титру, тому перерахунок його в iндекс i навпаки можна здiйснювати за формулою (для рiдин):
РЖндекс частiше визначають шляхом застосування мембранних фiльтрiв чи посiву рiзних розведень дослiджуваних субстратiв на щiльнi поживнi середовища, на яких потiм пiдраховують колонiСЧ.
Вибiр того чи iншого санiтарно-показового мiкроорганiзму залежить вiд обСФкта дослiдження та конкретноСЧ задачi. Нерiдко одночасно визначаСФться присутнiсть i ведеться кiлькiсний пiдрахунок двох i бiльше санiтарно-показових мiкроорганiзмiв.
Загальне мiкробне число (загальна мiкробна забрудненiсть) обСФкта характеризуСФться кiлькiстю мiкроорганiзмiв в 1 мл води, iншоСЧ рiдини чи в 1 г твердоСЧ речовини.
Визначення мiкробного числа СФ непрямим методом i дозволяСФ зробити висновок про можливе зараження дослiджувано тварин. Кiлькiсть СЧх збiльшуСФться по мiрi забруднення навколишнього середовища i зменшуСФться при його самоочищеннi. Таким чином, бактерiальна забрудненiсть субстрату, яка визначаСФться цим методом, виявляСФться значно меншою, нiж за прямим пiдрахунком (не дають росту мертвi клiтини та живi, що втратили здатнiсть розмножуватись; не ростуть термофiли та психрофiли, анаероби, гриби; не завжди розбиваються конгломерати, i одна колонiя виростаСФ iз декiлькох клiтин). .Кiлькiсть мiкроорганiзмiв, якi виростають на МПА виявляСФться в багато разiв меншою, нiж СЧхнiй справжнiй вмiст у дослiджуваному обСФктi.
Сапрофiтнi мiкроорганiзми - головнi збудники псування харчових продуктiв, тому при оцiнцi якостi цих продуктiв визначають мiкробне число.
При незначному мiкробному забрудненнi обСФкта робиться висiв цiльного матерiалу. При масивному забрудненнi необхiдно робити розведення, з яких потiм здiйснювати висiв на середовища.
Для приготування розведень беруть ряд пробiрок, у кожнiй з яких мiститься 9 мл стерильноСЧ води чи фiзiологiчного розчину. До першоСЧ пробiрки вносять 1 мл дослiджуваного матерiалу, ретельно перемiшують новою пiпеткою шляхом багаторазового наповнювання пiпетки i переносять 1 мл до другоСЧ пробiрки (розведення 10~2) i т. д. (рис. 1).
РЖснуСФ кiлька методiв визначення загального мiкробного числа: метод прямого пiдрахунку i метод кiлькiсного посiву рiзних розведень зразкiв i проб дослiджуваного обСФкта.
Прямий пiдрахунок мiкроорганiзмiв у дослiджуваному обСФктi проводиться пiд мiкроскопом у рахувальних камерах ГоряСФва чи в камерах, спецiально сконструйованих для пiдрахунку бактерiй. За допомогою цього методу визначають загальну кiлькiсть живих та мертвих клiтин. Завчасно, дослiджувану пробу обробляють так, щоб одержати гомогенну суспензiю. Для полегшення пiдрахунку бактерiй додають барвник, частiше за все еритрозин. Можна здiйснювати прямий пiдрахунок i на мембранних фiльтрах, через якi пропускають речовину чи суспензiю. ЗастосовуСФться вiн у надзвичайних випадках, коли потрiбна негайна вiдповiдь вiдносно кiлькiсного вмiсту бактерiй, наприклад, при аварiях систем водопостачання, оцiнцi ефективностi роботи очисних споруд тощо. Метод простий i доступний для використання в санiтарно-бактерiологiчних лабораторiях, проте маСФ ряд недолiкiв. За його допомогою важко вiдрiзнити мiкроорганiзми вiд стороннiх часток, точно визначити кiлькiсть мiкроорганiзмiв, оскiльки вони часто утворюють великi скупчення (конгломерати), неможливо диференцiювати живi мiкроорганiзми та мертвi, санiтарне значення яких нео