
Приблизительно можно определить количествожидкой крови,образовавшей следы на вещественном доказательстве.
Имеется возможность отличать кровь плодаили младенца от крови взрослого человека.
В последние годы появились научныеоснования для определения половой принадлежности крови в пятнах.
Исследование крови важно при отравлениинекоторыми ядами, таккак состояние красящего вещества крови — гемоглобина — уточняетдиагностику.
Установление наличия крови. Присутствие крови на вещественных доказательствах устанавливаютпри помощимикроспектрального анализа.
Из методов спектрального исследования вданном случае пользуются абсорбционным спектральным анализом. Электромагнитное излучение,как известно, состоит из волн света разной длины. Попадая надиспергирующий(преломляющий) элемент — призму или дифракционную решетку, это излучение разлагается на монохроматическиесоставляющие. Образуется электромагнитный спектр, в котором имеются: видимая зона, воспринимаемая глазом в виде семицветов — красного,оранжевого, желтого, зеленого, голубого, синего и фиолетового; инфракрасная иультрафиолетовая. Если на пути излучения между источником света и спектральнымприбором поместить вещество, способное поглощать волны света определенной длины, то нафоне электромагнитного спектра возникают затемнения — либо сплошное, либо в видевертикальных линий или полос (сплошной, линейчатый, полосатый спектрыпоглощения). Упомянутые затемнения располагаются в определенных участках спектраизлучения, характерны и постоянны для того или иного вещества.
Рис. 38. Спектры крови (из книги М. А.Бронниковой и А. С. Гаркави, Методика и техника судебно-медицинской экспертизывещественных доказательств, М, 1963)
К таким веществам относится красящеевещество крови —гемоглобин, содержащийся в красных кровяных тельцах — эритроцитах. Гемоглобину и егопроизводным свойственны спектры поглощения в виде полос, образующиеся, в частности, и в видимойзоне спектра излучения (рис. 38).
При исследовании следов на вещественныхдоказательствах вцелях экономии объекта пользуются не спектральным, а микроспектральным анализом, производимым при помощимикроспектроскопа, который вставляют в тубус микроскопа (в отечественной промышленностимикроспектроскоп носит название насадка АУ-16 или СПО-1).
Рис. 39. Кристаллыгемохро-могена
Для этого исследования достаточно оченьнебольшого количестваобъекта — либочастицы высохшей крови ничтожной величины, либо частицыпредмета-носителя,пропитанной или помаранной кровью.
Приступая к исследованию,судебно-медицинский эксперт, во-первых, не знает, кровью ли образованы следы, имеющиесяна вещественном доказательстве, во-вторых, если это действительно кровь,неизвестно, в каком состоянии находится гемоглобин. Поэтому объект обрабатывают реактивами, которые в случаекровяного происхождения пятна переводят гемоглобин в состояние, свойственное значительно измененнойкрови, — вгемохромоген.
Если гемохромоген получить не удается, чтоможет объясняться далеко зашедшим разложением крови, обработку производят другимиреактивами с целью получения гематопорфирина.
Гемохромоген образуется при действии накровь раствора едкойщелочи и восстановителя, а гематопорфирин — при действии концентрированнойсерной кислоты.
Применение некоторых реактивов, напримерреактива Такаяма, вызывает выпадение в препарате кристаллов гемохромогена (рис.39).
Для гемохромогена характерен спектрпоглощения, состоящий из двух полос в желто-зеленой области видимой зоны электромагнитного спектра(л)=565 —554*
15 и 536 —523mм), для гематопорфирина— спектрпоглощения тоже издвух полос в оранжево-желтой и желто-зеленой части спектра (Л = 608— 594 и 572— 548 mм); между ними отмечается затемнение,сливающееся с полосой в желто-зеленой области, которое считают третьейполосой поглощениякислого гематопорфирина (А, = 584 — 572mм).
Обнаружение обоих спектров поглощения илиодного из них с полной достоверностью свидетельствует о происхождении исследуемого следа открови.
Определение видовой принадлежности.Установить наличие крови на предмете, подлежащемэкспертизе, весьма важно для следствия. Однако следы крови могут и не иметьотношения к преступлению.
Если экспертизе подвергают вещественныедоказательства,изъятые в связи с убийством или нанесением человеку телесных повреждений,необходимо выяснить, является ли обнаруженная кровь человеческой.
При расследовании дел о браконьерстве,например незаконном отстреле лося, требуется определить, не от лося липроизошла кровь, выявленная на том или ином предмете, и т. д.
Таким образом, при производстве экспертизыобязательноопределяют видовую принадлежность крови. С этой целью широко применяют один изиммунологическихметодов, а именно метод белковой преципитации. Реакцию преципитации у насименуют реакцией Чистовича-Уленгута, за рубежом — реакцией Уленгута.
Принцип метода преципитации заключается втом, что при взаимодействии раствора белка, в том числе и белка крови, соспециально приготовленной для обнаружения данного белка сывороткойобразуется осадок (преципитат).
Исходя из требований практики, выпускаютсыворотки,преципитирующие (осаждающие) белок человека, рогатого скота, лося, лошади,свиньи, собаки, кошки и птицы, а также сыворотки, позволяющиедифференцироватьбелок крупного и мелкого рогатого скота.
Кроме того, могут быть приготовленысыворотки, преципитирующие белки и других представителей животного мира, в том числерыб.
Преципитирующие сыворотки изготовляютпутем иммунизации(повторные инъекции) кроликов нормальной сывороткой крови. Для получениясыворотки, преципитирующей белок человека, кролику вводят сывороткучеловеческой крови,для приготовления сыворотки, преципитирующей белок лошади, — сыворотку крови лошади и т.д.
Чтобы выяснить видовую принадлежностькрови, вырезаютмаленький кусочек материала вещественного доказательства со следом крови икусочек из расположенного рядом участка материала без крови (контроль, позволяющийубедиться в том, что в материале отсутствует белок не кровяногопроисхождения). Эти кусочки размельчают ножницами, помещают в отдельныепробирки, кудаприливают незначительное количество физиологического раствора хлориданатрия, и оставляют на определенный срок (от нескольких часов донескольких суток, взависимости от растворимости крови) в рефрижераторе при температуре от +4до +8. Полученныевытяжки отделяют от материала (отсасывают пастеровскими пипетками),центрифугируют или фильтруют, до полной прозрачности. При помощи пробы с азотной кислотой,проводимой в целях экономии объекта капиллярным способом, устанавливают,перешел ли в раствор белок из следа крови, и в положительном случае разводятэту вытяжку физиологическим раствором до содержания белка приблизительно1:1000; вытяжку из контрольного участка предмета-носителя не разводят. К обеимвытяжкам, а также к физиологическому раствору, которым производилиэкстрагирование объектов, добавляют сыворотку, преципитирующую белок человека, к другимпорциям тех же ингредиентов — сыворотку, преципитирующую, например, белок лошади, к третьимпорциям — сыворотку,преципитирующую белок другого животного (свиньи, собаки и т. д.). Если осадок ввиде диска белого цвета образуется только при взаимодействии вытяжки из следа крови исыворотки, преципити-рующей белок человека, а в жидкостях, находящихся во всехостальных пробирках, осадки отсутствуют, эксперт делает вывод, что кровь вследе на вещественном доказательстве произошла от человека. Выпадение осадка лишь в пробиркес вытяжкой из следа крови, куда была добавлена сыворотка, преципитирующая белоклошади, свидетельствует о том, что кровь принадлежит лошади, и т.д.
Рис. 40.Реакция преципитации в геле (агаре):
а) вытяжка из пятна крови, 6) вытяжка из контрольного участка, в) сыворотка, преципитирующая белокчеловека
Перед применением преципитирующихсывороток проверяют титр (крепость) и специфичность (действие, в пределах определенного срока иразведений, только с белком человека или животного того или иного вида) каждойиз них.
Реакцию преципитации осуществляют вспециальных пробирках с коническим нижним концом; преципитирующуюсыворотку опускаютпастеровской пипеткойна дно пробирки с вытяжкой, т. е. подслаивают под последнюю.
Помимо описанной реакциипреципитации в жидкойсреде имеется ее модификация — реакция в гелеобразной среде. На стекло тонким слоем наносятрастительноестудневидное вещество — агар; по застывании в нем делают три лунки, куда помещают вытяжкуиз следа крови, вытяжку из контрольного участка материала вещественного доказательства и сыворотку,преципитирующую тот или иной вид белка. Если применена сыворотка,преципитирующая белок человека, а след на вещественном доказательстве былобразован человеческой кровью, между лунками с вытяжкой из следа ипреципитирующей сывороткой через определенный срок появится осадок в виде полосы (иногданесколько полос) белого цвета (рис. 40). То же произойдет при взаимодействиивытяжки из следа крови свиньи и сыворотки, преципитирующей белок свиньи, и т.д. Вместо вытяжек из следа крови и контрольного участка предмета-носителя влунки можно помещатьнепосредственно соответствующие кусочки материала вещественного доказательства,добавляя к ним каплифизиологического раствора.
Реакция преципитации в геле менеечувствительна, чем реакция в жидкой среде, но в некоторых случаях обладаетпреимуществами. Она может быть проведена с мутными объектами и дает перспективыуспешного и более доступного дифференцирования крови филогенетически близких животных, напримеркрупного и мелкогорогатого скота; лося и быка.
Для определения видовой принадлежностикрови существуют и другие реакции, но они не получили распространения вотечественной судебно-медицинской практике, требования которой, какправило, полностью удовлетворяются применением реакции преципитации(преципитирующие сыворотки, изготовляемые в нашей стране, обладают высокимикачествами, а схема реакции преципитации хорошо разработана).
Установление групповой принадлежности.Выяснение происхождения крови на вещественномдоказательстве от человека или животного имеет большее значение, чем простоконстатация факта присутствия неизвестно от кого произошедшей крови. Однако внастоящее время судебно-медицинская экспертиза располагает еще большими возможностями: имеютсянаучные данные, позволяющие разрешить вопрос, может ли принадлежать кровь тому илииному человеку —потерпевшему, подозреваемому или она произошла не от них. Разрешение его основано наданных об антигенной дифференцировке человеческого организма. Уже вначале XX столетия стало известно о существовании определенной закономерностиво взаимодействии крови различных людей: сыворотка одних агглютинирует(соединяет в гроздевидные конгломераты) эритроциты других. Вначале были открыты четыре группыкрови. Вещества, обусловливающие реакцию агглютинации, получилиназвания агтлютиногены (антигены) — в эритроцитах, агглютинины (антитела) -в сыворотке. Первыеобозначают прописными латинскими буквами, вторые — малыми буквами греческого алфавита. Приняты международныеобозначения групп: Осф, Ар, Ва, АВО. В нашей судебно-медицинской практикебуквенные обозначения до сих пор дополняют цифровыми (эту цифровую классификациюпредложил Янский) —Оар(1), Ар(П), Ва(Ш), АВО (IV). Агглютинация происходит в том случае, когда вовзаимодействие вступают одноименные агглютиногены и агглютинины: А и а, В и р.Символ ло в группе АВ указывает на отсутствие в сыворотке крови этой группыагглютининов аир. Агглютиноген О обнаруживается специальными сывороткамианти-О(Н), изготовляемыми путем иммунизации коз дизентерийной спиртовой вакцинойГригорьева-Шига, или экстрактами из семян некоторых растений, содержащимифитагглютинин (лектин) анти-Н. Выяснено, что реагенты, выявляющие агглютиноген 0,агглютинируют не только эритроциты группы 0(1), но и в подавляющем большинствеслучаев эритроциты групп А (II) и В (III), а также нередко и эритроциты группыAB(IV). Таким образом, в группах А(П), В(III) и AB(IV) наряду с основными агглютиногенами— А и В можетприсутствовать ещеагглютиноген, который обозначают прописной латинской буквой Н или именуютсопутствующим агглютиногеном 0.
В дальнейшем в крови человека открываливсе новые и новые антигены и антитела. На смену учению о группах крови пришло учение обизосерологических системах. Четыре описанные группы вошли в эритроцитарнуюизосерологическую систему АВО, три группы: М, N и MN, ранее известные подназванием типы крови, — в систему MNSs и т. д. В настоящее время насчитывается еще несколькоэритроцитарных изосерологических систем: Р, Rh (резус), Ласерен, Даффи, Келл,Кидд, Диего и т. д., в которые входит много антигенов. Кроме того,оказалось, что всыворотке крови содержатся особые антигены, которые позволили разделитьчеловеческую кровь еще и на сывороточные изосерологические системы — -Cm,-Ос, Нр и др. Одна система— Льюис является какбы промежуточной: входящие в нее антигены свойственны сыворотке, ноодновременно фиксированы и на эритроцитах. Возможность различныхсочетаний групповых факторов стала исчисляться сотнями тысяч, и появиласьреальная перспектива достигнуть в будущем индивидуальной диагностикикрови.
Групповые антигены изосерологическойсистемы АВО, MNSs и Rh содержатся не только в крови, но и в фиксированных клетках тканейтела.
Таковы достижения гематологии ииммунологии, но не все они имеют одинаковое значение для судебно-медицинскойэкспертизы вещественных доказательств в силу различных причин: затруднения вполучении тех или иных стандартных сывороток для выявления соответствующих групповых антигенов;чрезмерно большая или, наоборот, малая частота встречаемости какого-либоантигена в крови населения данной страны; неустойчивость его в высохшей крови ипр.
Основное место в судебно-медицинскихисследованиях занимает изосерологическая система АВО; иногда в следах крови определяют группы системР, Льюис (в распоряжении экспертов имеются необходимые для этого стандартныесыворотки отечественного производства), Gm и др.
Pages: | 1 | ... | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | ... | 50 |