Инструкция по применению плотной среды Хейфлика

Вид материалаИнструкция

Содержание


Приготовление среды
Техника исследования
Условия и срок хранения
Подобный материал:
Инструкция по применению плотной среды Хейфлика.


Питательная среда Хейфлика предназначена для выделения из ис­следуемого материала и культивирования Mycoplasma spp. (в том чис­ле М.pneumonial, M.hominis).

ФОРМА ВЫПУСКА:

Набор для приготовления питательной среды включает.
  1. флакон с агаризованной питательной основой (200 мл).
  2. флакон с дрожжевым экстрактом (25 мл).
  3. флакон с жидкой стерильной сывороткой лошадиной крови (50 мл).
  4. флакон с насыщенным раствором холестерола (1 мл).
  5. флакон с 2,5 % раствором ацетата таллия на бидистиллированной
    воде (6 мл).
  6. флакон с 20 % раствором глюкозы.
  7. флакон с натриевой солью бензилпенициллина (300000 ЕД).

ПРИГОТОВЛЕНИЕ СРЕДЫ:

Все нижеприведенные манипуляции необходимо проводить в строго асептических условиях в боксе, предназначенном для бактериологических исследований.
  1. Вскрыть флакон с агаризованной основой и заменить резиновую
    пробку на ватно-марлевую.
  2. Расплавить агаризованную основу среды на водяной бане (не кипятить!).
  3. Добавить в расплавленную и охлажденную до 60 °С питательную основу следующие ингредиенты:
  • 20 мл дрожжевого экстракта;
  • 15 мл 20 % раствора глюкозы;
  • 0,2 мл насыщенного раствора холестерола;
  • 6 мл 2,5 % раствора ацетата таллия.



  1. Во флакон с порошком натриевой соли бензилпенициллина добавить 3 мл стерильной дистиллированной воды, тщательно растворить и
    внести в питательную среду.
  2. Сыворотку крови лошади в количестве 50 мл осторожно (без обра­
    зования пены) прилить к среде по стенке колбы в последнюю очередь
    во избежание тепловой денатурации.
  3. Готовую среду разлить в чашки Петри.

ТЕХНИКА ИССЛЕДОВАНИЯ:

Исследуемый материал засевают на поверхность среды микробиоло­гической петлей или стерильным ватным тампоном. Посевы инкубиру­ют при температуре 37 °С до 8 суток, периодически просматривая чаш­ки. Через 8 суток инкубации проводят окончательный учет результата.

УСЛОВИЯ И СРОК ХРАНЕНИЯ:

Срок годности питательной основы среды и сыворотки лошадиной крови в герметично укупоренных флаконах при температуре + 4 °С - 6 месяцев.

Срок годности насыщенного раствора холестерола в герметично уку­поренном флаконе при комнатной температуре - 6 месяцев.

Срок годности 20 % раствора глюкозы в герметично укупоренных флаконах при комнатной температуре - 1 год.

Срок годности натриевой соли бензилпенициллина (порошок) в гер­метично укупоренном флаконе при температуре + 4 + 8 °С - 1 год.

Готовая среда, разлитая в чашки Петри, хранится при температуре + 4°С не более недели.

Селекционирующая добавка в виде сухого порошка имеет срок хра­нения 1 год (в герметично укупоренном флаконе).

Раствор селекционирующей добавки хранению не подлежит.