Файзуллаева Нигора Яхъяевна иммунологические изменения и иммунокоррекция герпетических инфекций у женщин репродуктивного возраста 14. 00. 36 Аллергология и иммунология автореферат

Вид материала

Автореферат

Содержание Научный руководитель: - доктор медицинских наук Общая характеристика работы Научная новизна Практическая значимость Основные положения, выносимые на защиту Реализация результатов исследования. Структура и объем работы Основное содержание работы В первой главе Во второй главе «Материалы и методы исследования» Результаты исследований и их обсуждение Рис.1 Частота встречаемости инфекций у обследованных нами женщин. Рис.3 Показатели иммунитета у женщин с ВПГ Рис.4 Неспецифические факторы защиты Рис.5 Уровень цитокинов у женщин с ВПГ Рис.6 Показатели иммунитета у женщин с ЦМВ Рис.7 Неспецифические факторы защиты у женщин с ЦМВИ Рис.8 Уровень цитокинов и интерферона у женщин с ЦМВИ Рис.9 Иммунологические параметры при микст инфекции (ВПГ+ЦМВ) Рис.11 Уровень СRP, С3 и С4 при герпетических инфекциях. ... Полное содержание

Подобный материал:

• Клинико иммунологические особенности аллергодерматозов на фоне урогенитальной инфекции, 335.48kb.
• Иммунокоррекция в хирургии механических желтух доброкачественного генеза 14. 00., 396.02kb.
• Иммунологические аспекты перинатальной патологии у недоношенных детей 14. 00. 36 аллергология, 874.04kb.
• Особенности клинического течения и диагностики урогенитальных инфекций, обусловленнных, 284.85kb.
• Генетические и иммунологические параллели у больных раком легкого и бронхиальной астмой, 396.78kb.
• Консервативное лечение миомы матки у женщин позднего репродуктивного возраста препаратом, 69.46kb.
• Образовательный стандарт послевузовской профессиональной подготовки специалистов Специальность:, 1035.98kb.
• Собрания Российской Федерации Доклад Оположении детей в Российской Федерации Москва, 3799.15kb.
• Системный анализ параметров вектора состояния организма женщин репродуктивного возраста, 689.14kb.
• На правах рукописи, 279.48kb.

АКАДЕМИЯ НАУК РЕСПУБЛИКИ УЗБЕКИСТАН

ИНСТИТУТ ИММУНОЛОГИИ

На правах рукописи

УДК: 612.017.1:618.17:619.9-022.7

Файзуллаева Нигора Яхъяевна


ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ И ИММУНОКОРРЕКЦИЯ ГЕРПЕТИЧЕСКИХ ИНФЕКЦИЙ У ЖЕНЩИН РЕПРОДУКТИВНОГО ВОЗРАСТА


14.00.36 – Аллергология и иммунология


Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Ташкент – 2007

Работа выполнена в Институте иммунологии АН РУз.

Научный руководитель: - доктор медицинских наук

Арипова Тамара Уктамовна

Официальные оппоненты: - доктор медицинских наук, профессор

Исмаилова Гули Аминджановна

- доктор медицинских наук

Аралов Неъматилла


Ведущая организация: Ташкентский педиатрический медицинский

институт


Защита диссертации состоится “____“___________2007г. в ______часов на заседании Специализированного совета К 015.89.01 при Институте Иммунологии АН РУз по адресу: 700060, Ташкент, ул. Я.Гулямова, 74.


С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института иммунологии АН РУз.


Автореферат разослан “_____”____________ 2007 г.


Ученый секретарь

Специализированного совета,

кандидат медицинских наук Камалов Зайнитдин Сайфутдинович


ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ


Актуальность проблемы. Герпесвирусные инфекции являются широко распространенными заболеваниями человека. Так, вирусами простого герпеса инфицировано 65-90% взрослого и детского населения планеты [Марданлы С.Г. с соавт., 2005]. Они способны поражать практически все органы и системы организма хозяина, вызывая латентную, острую и хроническую формы инфекции [Вестморленд Д, 2000]. Рецидивирующее течение герпеса обусловлено особенностями взаимодействия вируса с иммунной системой макроорганизма. После первичного заражения вирус простого герпеса сохраняется в латентном состоянии в нервных ганглиях на протяжении всей жизни, периодически вызывая обострения различной локализации у 30-50% пациентов, что свидетельствует о неспособности иммунной системы санировать организм от вирусов [Цинзерлинг А.В. 1993; Туки Пат А., Пекхем Катрин С., 2000; Рахманова А.Г., Кирпичникова Г.И., Неверов В.А., Ремезов А.П. 2003].

Иммунореактивность организма играет решающую роль на всех стадиях развития любой воспалительной реакции, в том числе возникающей в ответ на различные микроорганизмы [Лебедев В.В. и соавт.,2000].

Вирусы семейства Herpesviridae обладают способностью не только персистировать, но и репродуцироваться в клетках иммунной системы, обуславливая гибель или снижение функциональной активности иммуноцитов, что способствует развитию вторичных иммунодефицитных состояний [Марданлы С.Г. с соавт., 2005]. В определенных условиях вирус герпеса может размножаться в Т- и В-лимфоцитах, что приводит к поражению иммунокомпетентных клеток и нарушению генетических механизмов, контролирующих иммунные реакции на уровне клеток и медиаторов. В основе специфического противогерпетического иммунодефицита лежит уникальная способность активных и размножающихся герпес-вирусов, прежде всего вируса простого герпеса, вырабатывать белки, блокирующие рецепторы I и II классов системы HLA, что приводит к разрушению каскада передачи сигналов пролиферации и дифференцировки во всей системе специфического иммунного ответа, включая подсистемы антителогенеза, интерферона и гаплотипоспецифических цитотоксических лимфоцитов с фенотипом CD8+ [Туки Пат А., Пекхем Катрин С., 2000]. Рецидивирование инфекции обычно наблюдается при специфических комбинированных иммунодефицитах лимфоидного типа [Mosarski, 1993]. Вирусная инвазия контролируется системой интерферонов – специфических иммуноглобулинов, вырабатываемых В-лимфоцитами и Т-киллерами. Действие интерферонов не ограничивается нарушением репродукции вируса. Они выступают в качестве иммуномодуляторов эффекторного звена фагоцитоза, влияя на прямую цитотоксическую реакцию Т-лимфоцитов и опосредованный антителами лизис инфицированных клеток Т-лимфоцитами, макрофагами, полиморфноядерными лейкоцитами [N.Noraz с соавт.,1997].

В настоящее время не существует методов лечения, позволяющих элиминировать ВПГ или ЦМВ из организма человека. Поэтому терапия направлена на подавление репродукции герпетического вируса, формирование адекватного иммунного ответа, т.е. коррекцию нарушений неспецифического и специфического звеньев иммунитета и его длительное сохранение с целью блокады реактивации герпетического вируса [Рахманова А.Г.с соавтр., 2003].

В связи с вышесказанным изучение механизма иммунологических нарушений, усовершенствование методов их диагностики и иммунокоррекции при герпесвирусных инфекциях у женщин репродуктивного возраста является актуальным.

Связь диссертационной работы с тематическими планами НИР.

Исследования выполнялись с 2003 по 2005 годы в рамках гранта ГНТП П-14.1.37. «Частота и разнообразие дефектов иммунной системы у женщин репродуктивного возраста при вирусных инфекциях (TORCH – инфекциях)».

Цель исследования. Целью настоящей работы явилось изучение механизмов иммунологических нарушений при некоторых герпетических инфекциях и обоснование применения иммунокорригирующей терапии у женщин репродуктивного возраста.

В соответствии с намеченной целью были поставлены следующие задачи:

1. Изучить структуру заболеваемости бактериально-вирусно-паразитарными инфекциями у обследованных нами женщин репродуктивного возраста.

2. Изучить особенности клеточного и гуморального иммунитета у женщин с герпесвирусной инфекцией; провести анализ клеточного механизма апоптоза и пролиферативных лимфоцитов.

3. Изучить уровни медиаторов иммунного ответа у женщин с герпесвирусной инфекцией: баланс провоспалительных и противовоспалительных цитокинов.

4. Определить особенности интерферонового статуса у обследованных женщин в зависимости от различных видов герпесвирусной инфекции.

5. Провести сравнительное изучение эффективности иммунокорригирующих препаратов с различным механизмом действия у женщин с вирусными инфекциями

6. Проанализировать отдаленные результаты проведенных иммунокорригирующих мероприятий. Дать оценку эффективности препаратов при лечении женщин с герпетическими инфекциями.

Научная новизна. Результаты исследований позволили раскрыть механизмы повреждения различных звеньев системы иммунитета под воздействием вирусной инфекции.

Впервые изучена роль концентрации белков острой фазы и С3-,С4-компонентов комплемента при герпесвирусной инфекции. Установлено, что их повышенный уровень отражает неспособность иммунной системы инициировать активационный процесс.

Впервые охарактеризованы особенности медиаторов иммунной системы типов Th1 и Th2 при герпесвирусных инфекциях, таких как вирус простого герпеса (ВПГ) и цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) – в отдельности и при их смешанных формах.

Впервые изучена роль интерферонового статуса при герпесвирусных инфекциях у женщин репродуктивного возраста. Показано, что картина иммунитета при вирусной инфекции характеризуется активацией клеточного апоптоза (CD95), натуральных киллерных клеток и супрессией пролиферативных лимфоцитов (СD25).

Выявлено, что сочетанное применение препаратов циклоферона с полиоксидонием, имеет значительный клинико-иммунологический эффект у женщин с герпесвирусной инфекцией

Практическая значимость. В результате проведенных исследований выявлены особенности иммунореактивности женщин репродуктивного возраста при некоторых герпесвирусных инфекциях, что может явиться дополнительным критерием их диагностики и послужить основой для проведения соответствующей иммунокоррекции.

Положительное влияние схемы лечения с применением иммуномодуляторов с различным механизмом действия на динамику параметров иммунной системы дает основание рекомендовать их при вирусных инфекциях.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Среди множества форм инфекций частота встречаемости вируса простого герпеса (ВПГ) у обследованных нами женщин составила 35,8% (104), цитомегаловируса - 25,5% (74), хламидиоза – 11,1% (32), токсоплазмоза – 4,5% (15). Сочетанная форма двух инфекций (ВПГ + ЦМВ) встречалась у 17,9% женщин (52), а трех и больше – у 5,2% женщин (13).

2. При вирусе простого герпеса, ЦМВ инфекции и при их микст форме у женщин репродуктивного возраста отмечается дисбаланс в состоянии иммунной системы. При ЦМВИ и микст форме наблюдается однонаправленный характер иммунного ответа, однако более выраженный при микст форме.
   
   3. Использование сочетания циклоферона и полиоксидония в комплексном лечении вирусных инфекций повышает качество патогенетической терапии и способствует восстановлению нарушенных параметров иммунной системы.
      

Реализация результатов исследования. Материалы диссертации внедрены в практические занятия студентов Ургенчского мединститута МЗ РУз и в научно-практическую деятельность Института иммунологии АН РУз.

Апробация. Материалы диссертационной работы представлены и доложены на Республиканской научной конференции молодых ученых (Ташкент, 2003). Основные положения диссертации доложены на II Всемирном Конгрессе по иммунопатологии и аллергии, Москва, 14-17 мая 2004 г.; на заседании Общества иммунологов и аллергологов Узбекистана, Ташкент, 2004 г.; на юбилейной конференции Института иммунологии, Ташкент, 20-22 сентября. 2005 г.; на Ученом Совете Института иммунологии АН РУз 2006 г.; на межвузовском научном семинаре при Институте иммунологии АН РУз 2007г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 2 журнальные статьи, 3 тезиса докладов и 2 методические рекомендации.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 140 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, собственных исследований, обсуждения, выводов, практических рекомендаций. Список использованной литературы состоит из 240 библиографических названий (в том числе 140 на русском и 100 на других языках). Работа иллюстрирована 24 таблицами и 8 рисунками.


ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Во введении раскрываются актуальность темы, цель и задачи исследования, научная новизна и научно - практическая значимость, формулируются положения, выносимые на защиту, дается обоснование практического внедрения полученных результатов.

В первой главе «Обзор литературы» подробно анализируются литературные данные по изучению роли иммунной системы у женщин репродуктивного возраста с бактериально-вирусно-паразитарными инфекциями. Приводятся данные отечественной и зарубежной литературы по вопросам этиотропного и иммунокорригирующего лечения.

Во второй главе «Материалы и методы исследования» нами были проанализированы данные за период с 2003 по 2005 гг. по результатам обследования 290 женщин репродуктивного возраста, которые находились под наблюдением в ООО «Тибдиагностика» Института иммунологии АН РУз. Из них 230 женщин с наличием герпетических инфекций в возрасте от 18 до 39 лет. Контрольную группу составили 30 практически здоровых женщин репродуктивного возраста. Диагноз устанавливали на основании комплекса клинико-лабораторных данных, включающих типичную симптоматику заболеваний, ПЦР и ИФА диагностику и соответствующие иммунологические анализы и т.д. Все больные в период обострения патологического процесса получали общепринятую патогенетическую и симптоматическую (противовирусные и противовоспалительные препараты, эубиотики и местное наружное применение препаратов) терапию.

Исследования иммунного статуса и других клинико-лабораторных показателей проводились у пациентов в период прохождения ими обследования и лечения в амбулаторных условиях.

Иммунологические исследования проводились изучением количественного определения лимфоцитов с фенотипом CD3, CD4, CD8, СD16, CD20, CD25, CD95 в периферической крови с помощью моноклональных антител (ООО «Сорбент», Москва, Россия) по методу Гариба Ф.Ю. с соавт.(1995). Уровень Ig-нов в сыворотке крови определяли по методу Manchini. Фагоцитоз изучали по методу Кудрявцевой В.П. Уровень цитокинов: ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-4, и INF и уровни СRP и С3, С4 компонента комплемента определяли в сыворотке крови методом ИФА («Цитокин» и «Протеиновый контур» НИИ ОЧБП, СПб.). Концентрацию ЦИК определяли в сыворотке крови методом нефелометрии (ПЭГ-6000) (Ташкент, “Нихол”).

Использованные препараты и предлагаемые схемы иммунокоррекции: Циклоферон (12,5% раствор) – препарат акридонового ряда, разработанный фирмой «Полисан» (Санкт-Петербург), является индуктором альфа и гамма-интерферонов и относится к группе низкомолекулярных синтетических индукторов интерферона, обладает мягким пролонгированным иммунокорригирующим эффектом.

Препарат циклоферон (12,5% раствор) в количестве 10 ампул на курс лечения назначали внутримышечно по схеме 1,2,4,6,8,11,14,17,20 и 23 дни. Иммунный статус определяли через четыре недели после проведенной иммунокоррекции.

Полиоксидоний является сополимером N - окси 1,4-этиленпиперазина и (N – карбоксиэтил) – 1,4 – этиленпиперазиний бромида с молекулярной массой 100 КД. Относится к классу водорастворимых производных гетероцепных алифатических полиаминов. Данный класс соединений не имеет аналогов в мире, как по структуре, так и по свойствам.

Полиоксидоний был получен и подробно исследован в ГНЦ – Института иммунологии МЗ РФ. Выпускается ООО «Иммафарма» (г. Москва, Россия) в дозе 6 мг. Показал хороший эффект при клинических испытаниях у больных хроническими обструктивными заболеваниями легких, туберкулезом, пиодермиями, гнойно-септическими процессами после хирургических вмешательств, атопическим дерматитом, воспалительными заболеваниями урогенитального тракта, герпесвирусными инфекциями, ВИЧ.

Препарат полиоксидоний (6 мг/сутки) назначали внутривенно капельно N 10 (на физиологическом растворе NaCl 0,9% - 200,0) через день. Иммунный статус определяли через четыре недели после проведенной иммунокоррекции.

Полученные данные подвергали статистической обработке на персональном компьютере Pentium-IV по программам, разработанным в пакете EXCEL с использованием библиотеки статистических функций с вычислением среднеарифметической (М), среднего квадратичного отклонения (σ), стандартной ошибки (m), относительных величин (частота, %), критерия Стьюдента (t) с вычислением вероятности ошибки (Р). Различия средних величин считали достоверными при уровне значимости Р<0,05. При этом придерживались существующих указаний по статистической обработке данных клинических и лабораторных исследований (Зайцев В. М. и соавт., 2003).

Результаты исследований и их обсуждение.

В третьей главе анализируются данные по изучению частоты встречаемости отдельных нозологий среди 290 обследованных нами женщин с TORCH-инфекциями, которые представлены в диаграмме (Рис.1).





Рис.1 Частота встречаемости инфекций у обследованных нами женщин.




Рис.2 Распределение обследованных женщин во возрасту

При анализе возрастного аспекта было выявлено, что большинство обследованных женщин было в возрасте от 20 до 30 лет (Рис. 2).

Как видно из данных диаграммы, наиболее часто встречающимися являются: вирус простого герпеса (ВПГ) – 104 женщины и цитомегаловирусная инфекция – 74 женщины, затем – хламидиоз – 32 женщины и токсоплазмоз – 13 женщин. Смешанные формы ВПГ и ЦМВ встречались у 52 обследованных женщин. У 15 женщин наблюдалось наличие 3-х и более форм вирусной инфекции (ВПГ+ЦМГ+хламидиоз + токсоплазмоз).

При изучении анамнеза обследованных женщин было выявлено, что у 31,7% (73) наблюдались заболевания желудочно-кишечного тракта. Частые респираторные заболевания встречались у 36% женщин (83). Эутиреоидное состояние щитовидной железы наблюдалось у 69 женщин (30%). 12% женщин (28) перенесли инфекционные заболевания. У 67% женщин (154) наблюдались заболевания органов малого таза. У 29,1% (67) женщин отмечалось вторичное бесплодие, у 19,5% (45) - невынашивание беременности.

Результаты исследований показали, что у женщин с ВПГ обнаружились значительные изменения некоторых параметров иммунной системы по сравнению с показателями контрольной группы. (Рис.3).



Рис.3 Показатели иммунитета у женщин с ВПГ

Так, наряду с достоверным снижением количества CD3+-клеток (P<0,01) наблюдалось снижение уровня CD4+-лимфоцитов в 1,3 раза (P<0,01). Кроме того, наблюдалось снижение числа CD25+ клеток в 1,6 раза (P<0,01), а число CD95+-лимфоцитов, при этом, было повышенным (Р<0,05). Концентрация IgA была достоверно повышена (P<0,01), а уровни IgG (P<0,05) и IgМ (P<0,01) были снижены. Со стороны неспецифического фактора защиты было выявлено резкое снижение фагоцитарной активности нейтрофилов (P<0,05) и повышение числа клеток с фенотипом CD16 (P<0,01).

Концентрация ЦИК у женщин с ВПГ была повышена в 1,6 раза по сравнению с данными контрольной группы (P<0,01). (Рис.4)




Рис.4 Неспецифические факторы защиты


Снижение продукции ИФН (P<0,05) свидетельствуют о недостаточности клеточного звена иммунитета, что согласуется с результатами анализа числа клеток, экспрессирующих зрелые маркеры Т-лимфоцитов, а повышение уровня ИЛ-1 и ИЛ-4 (P<0,01) является отражением активности воспалительного процесса (Рис.5).


Рис.5 Уровень цитокинов у женщин с ВПГ

При изучении состояния иммунной системы у женщин с ЦМВ наблюдалось снижение количества лимфоцитов с фенотипом CD3, CD4, CD16 и CD25 (P<0,01). При этом число Т-супрессоров/цитотоксических лимфоцитов и лимфоцитов с рецептором к апоптозу было достоверно повышено (P<0,001) (Рис.6).



Рис.6 Показатели иммунитета у женщин с ЦМВ

При изучении факторов неспецифической защиты было выявлено, что число NK-клеток (СD16+) и фагоцитарная активность нейтрофилов достоверно снижены и составили в среднем 7,3 ± 0,7% против 12,9 ± 0,46% (P<0,01) и 43,7 ± 1,2% против 58,6 ± 1,3% (P<0,01) (соответственно), а уровень циркулирующих иммунных комплексов достоверно повышен (69,8 ± 2,8 ус. ед. против 34,6 1,2 усл.ед. P<0,001) (Рис.7).



Рис.7 Неспецифические факторы защиты у женщин с ЦМВИ

Повышенный уровень ЦИК активирует систему комплемента по альтернативному пути, что способствует индукции синтеза ИЛ-4. В свою очередь ИЛ-4 снижает экспрессию FcR, угнетая тем самым антитело-зависимую клеточную цитотоксичность и антитело- зависимый фагоцитоз [Ярилин А.А., 1999].

Исследование концентрации медиаторов иммунного ответа у женщин с цитомегаловирусом обнаружило, что уровни цитокинов Th1 профиля у них были ниже значений контрольной группы :ИЛ-2 - в 3 раза (P<0,001), ИНФ -в 7 раз (P<0,001), ИНФγ - в 20 раз (P<0,001), ИНФα - в 2,5 раза (P<0,001). Напротив, уровень ИЛ-4 был в 6 раз выше (P<0,001) по сравнению со значением контрольной группы. Как известно, ИЛ-4 является антагонистом ИНФγ, подавляет продукцию ИЛ-1 (Рис 8).



Рис.8 Уровень цитокинов и интерферона у женщин с ЦМВИ


Анализ проведенных исследований у женщин с микст инфекцией (ВПГ + ЦМВИ) выявил определенный механизм иммунных нарушений. Было установлено угнетение Т-клеточного звена (CD3,CD4) иммунитета у данного контингента женщин и снижение активности NK-клеток (P<0,05) (Рис.9).

Наряду с этим, получены данные об активации гуморальной системы иммунитета (увеличение числа В-лимфоцитов (P<0,01), повышение уровней ЦИК и иммуноглобулинов G и A (P<0,001).). Была выявлена апоптотическая активность лимфоцитов с Fas- рецептором (CD95) (P<0,01). Полученные данные, показывают связь степени нарушений в иммунной системе с сочетанной вирусной активностью.

Как видно из приведенных данных, микст инфекция оказывает разнонаправленное действие на продукцию различных цитокинов (Рис.10).




Рис.9 Иммунологические параметры при микст инфекции (ВПГ+ЦМВ)




Рис.10 Уровень цитокинов при микст инфекции (ВПГ+ЦМВ)


Чаще всего их иммуносупрессивное влияние выражено в снижении уровня интерферонов и некотором усилении продукции ИЛ-4 (P<0,05). Содержание провоспалительного цитокина ИЛ-1 повышено (P<0,01). При наличии микст инфекции ИЛ-2 продуцируется в значительных количествах в ответ на стимуляцию антигенами вируса (P<0,05).

Концентрация некоторых белков плазмы крови, имеющих общее название «белки острой фазы», резко увеличивается в ответ на инфекцию. К этим белкам относится С-реактивный белок (СRP). Важное свойство СRP – способность связываться с микроорганизмами. Образовавшийся комплекс активирует систему комплемента, что характеризует развитие иммунного ответа по альтернативному пути, что приводит к хронизации процесса [Чиркин В.В. с соавт.2003]. В наших исследованиях уровень СRP, компонентов комплемента С3 и С4 в сыворотке крови был достоверно повышенным (P<0,001) по сравнению со значениями контрольной группы (Рис. 11).



Рис.11 Уровень СRP, С3 и С4 при герпетических инфекциях.


Повышенная продукция факторов этой системы при хронизации патологического процесса отражает чаще всего его генерализованный характер и в определенной мере некоторую недостаточность иммунной защиты. В данном случае организм уже не способен адекватно защитить себя, несмотря на то, что очень активно работают все механизмы саморегуляции на всех уровнях.

Полученные нами данные указывают на необходимость применения корригирующих воздействий в комплексе терапевтических мероприятий.

В четвертой главе работы показано иммунокорригирующее действие различных препаратов: циклоферона, полиоксидония и сочетанного действия циклоферона + полиоксидония.

Среди многочисленных цитокинов, обладающих регуляторными функци­я­ми, особое место отводится интерферонам, защищающим организм от инфици­рования вирусами, бактериями и простейшими. По современным представлениям [Исаков В.А., 2003], индукторы синтеза интерферона способны индуцировать в организме продукцию эндогенного интерферона. Одним из таких препаратов является циклоферон, который обладает следующими свойствами:

1. под его действием вырабатывается эндогенный интерферон, не обладающий антигенностью;

2. при его применении не возникает побочных эффектов;

3.однократное введение препарата обеспечивает его длительную циркуляцию в организме;

4. обеспечивается синергидный эффект при взаимодействии с другими лекарственными препаратами.

5. противовирусное действие цик­лоферона связано с достоверным снижением репродуктивных возмож­ностей вирусной ДНК и РНК.

Анализ результатов проведенных исследований по изучению механизма влияния циклоферона на состояние иммунной системы у больных женщин герпетическими инфекциями (ВПГ, ЦМВИ и их сочетанные формы) показал, что параметры клеточного иммунитета подвергаются незначительному изменению. Так, наблюдается некоторое повышение числа Т-лимфоцитов (CD3+) и Т-хелперов/индукторов (CD4+) (Таблица 1).

Достоверные изменения наблюдались в интерфероновом статусе. Уровень сывороточного ИНФ у женщин с ВПГ повысился в 2,9 раза (P<0,01), при ЦМВИ – более чем в 5 раз (P<0,01) , при микст инфекции – в 1,7 раза (P<0,05). Содержание ИНФγ при ВПГ повысилось в 2,2 раза, по сравнению с исходными данными (P<0,01), при ЦМВИ – в 13 раз (P<0,001), при микст инфекции – в 2,8 раза (P<0,01). Концентрация ИНФα у женщин с ВПГ почти достигла контрольных значений (P<0,01). У женщин с ЦМВИ уровень ИНФα повысился в 1,6 раза (P<0,01), а при микст инфекции – в 1,5 раза (P<0,01). Циклоферон оказал положительное влияние и на цитокиновый статус. Наблюдалось снижение содержания ИЛ-1 при ВПГ(P<0,05) и при микст форме (P<0,01), а при ЦМВИ – повышение его уровня (P<0,05). В отношении содержания ИЛ-2 наблюдалось его повышение у женщин с ВПГ и ЦМВИ (P<0,01), и снижение при микст инфекции (P<0,01). Влияние циклоферона на уровень ИЛ-4 характеризовалось достоверным снижением его у женщин с ЦМВИ (P<0,01). Включение циклоферона в базисное лечение женщин с герпесвирусной инфекцией не только вызвало клинический эффект, но и способствовало восстановлению основных параметров клеточного иммунитета и цитокинового статуса. Однако, восстановления изученных параметров иммунной системы до нормативных значений не наблюдалось.

Для восстановления работы иммунной системы женщин с герпетическими инфекциями в комплексную терапию нами был включен синтетический препарат полиоксидоний. Как видно из таблицы 1, многие параметры клеточного и гуморального иммунитета у женщин с герпесвирусной инфекцией имели положительную динамику. Исследование неспецифических факторов защиты показало, что уровень CD16+-клеток при ВПГ снизился, а при ЦМВИ и микст инфекции повысился. Фагоцитоз, достоверно сниженный до лечения, после лечения– достоверно отличался от исходных данных (P<0,01).

Таблица 1

ВЛИЯНИЕ ЦИКЛОФЕРОНА, ПОЛИОКСИДОНИЯ И ИХ СОЧЕТАНИЯ НА ПАРАМЕТРЫ ИММУННОЙ

СИСТЕМЫ У ЖЕНЩИН С ГЕРПЕСВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ

Иммунолог. показатели	Циклоферон			Полиоксидоний			Циклоферон+ полиоксидоний
	ВПГ	ЦМВ	ВПГ+ ЦМВ	ВПГ	ЦМВ	ВПГ+ ЦМВ	ВПГ	ЦМВ	ВПГ+ ЦМВ
CD3	↑*	↑*	↑*	↑*	↑*	↑*	↑***	↑***	↑**
CD4	↑*	↑*	↑**	↑*	↑*	↑**	↑***	↑***	↑***
CD8	↔	↓*	↔	↔	↓*	↓*	↔	↓**	↓***
CD16	↓*	↑*	↑*	↓*	↑*	↑*	↓*	↑**	↑*
CD19	↔	↓*	↓*	↔	↔	↓*	↓*	↓**	↓*
CD25	↓*	↑*	↑*	↔	↑**	↔	↑**	↑***	↑**
CD95	↓*	↓*	↓*	↔	↓*	↓*	↓**	↓**	↓**
Fag	↑*	↑*	↑*	↑*	↑*	↑*	↑**	↑**	↑**
ЦИК	↓*	↓*	↓*	↓*	↓*	↓*	↓**	↓***	↓**
IgG	↔	↑*	↓*	↔	↑*	↓*	↔	↑**	↓**
IgA	↔	↓*	↓*	↔	↓*	↓*	↓*	↓**	↓**
IgM	↔	↔	↓*	↔	↑*	↔	↔	↑**	↓*
ИНФ	↑**	↑*	↑*	↑**	↑*	↔	↑***	↑**	↑*
ИНФγ	↑*	↑*	↑*	↑*	↑*	↔	↑**	↑**	↑*
ИНФα	↑*	↑**	↑*	↑*	↑*	↓*	↑**	↑**	↑**
ИЛ-1	↓*	↑*	↓*	↓*	↑*	↓*	↓*	↑*	↓*
ИЛ-2	↑*	↑*	↓*	↑*	↑**	↓*	↑*	↑**	↓*
ИЛ-4	↓**	↓***	↓**	↓*	↓*	↓*	↓*	↓**	↓*

Примечание: ↑ - повысилось, ↓- снизилось, ↔ - осталось без изменения.

*- P<0,05; **P<0,01; *** P<0,001

Уровень ЦИК достоверно снизился во всех группах. (P<0,01). Концентрация Ig G повысилась у женщин с ЦМВИ (P<0,05) и снизилась при микст инфекции (P<0,05). Наблюдалась положительная динамика в содержании активационных маркеров (P<0,05). Кроме того, было выявлено снижение количества лимфоцитов, экспрессирующих рецептор для Fas-зависимого апоптоза CD95 (P<0,01) во всех группах. Как известно, клеточные взаимодействия координируются цитокинами. Включение иммунокорригирующего препарата в комплексное лечение способствовало активации макрофагов, которые при взаимодействии с антигеном через продукцию цитокинов запускают иммуногенез [Евсегнеева И.В. с соавт., 2005; Lynch D.H. et al.,1995]. Как видно из данных таблицы 1, прослеживается положительная динамика в содержании провоспалительных и противовоспалительных цитокинов (P<0,001). Следовательно, включение полиоксидония в базисную терапию женщин с герпесвирусной инфекцией способствует восстановлению многих параметров клеточного и гуморального иммунитета. Увеличение активности NK-клеток и обусловленных ими регуляторных функций под влиянием полиоксидония, по-видимому, происходит через усиление экспрессии CD16 на их поверхности. Повышение цитотоксичности NK-клеток через активацию перфоринового пути может быть одним из механизмов иммуномодулирующего действия полиоксидония при лечении больных герпесвирусами [Хаитов Р.М., 2002]. Однако, как показали наши исследования, полного восстановления нарушенных звеньев системы иммунитета под влиянием полиоксидония не наблюдается.

Полученные нами результаты по изучению влияния сочетанного действия интерферониндуцирующего и иммуномодулирующего препаратов – циклоферона и полиоксидония, свидетельствовуют о положительной динамике изученных параметров иммунной системы при герпесвирусной инфекции. Важным фактом является подавление процесса апоптоза под воздействием полиоксидония. Вследствие активации АПК и Th1 происходит повышение уровня ИФН, что является доказательством преодолевания «иммунологического паралича» [Дьяконова В.А с соавт., 2004; Дунда Н.И. с соавт., 2006]. Происходит восстановление нарушенных параметров иммунитета.

Таким образом, использование сочетанного действия циклоферона и полиоксидония в комплексной терапии герпетических инфекций позволяет сформировать стойкий положительный иммунный ответ, сокращает длительность и частоту рецидивов и удлиняет ремиссию.


ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Выводы

1.Среди обследованных женщин с герпесвирусными инфекциями основную квоту составляют женщины с ВПГ (45,2%). Их иммунный статус характеризуется снижением содержания CD3+-, CD4+-,CD25+-лимфоцитов, повышением количества CD16+- и CD95+-клеток и увеличением содержания IgA. Отмечается снижение фагоцитарной активности нейтрофилов и повышение уровня ЦИК.

2.Частота встречаемости цитомегаловирусной инфекции составляет 32,2%., которая сопровождается низким содержанием в периферической крови CD3+-, CD4+-, CD16+-, СD25+-лимфоцитов и повышенным количеством СD8+-, СD20+ и CD95+-клеток. Состояние неспецифических факторов защиты характеризуется снижением фагоцитарной активности нейтрофилов и повышением уровня ЦИК.

3.Сочетанное течение ВПГ и ЦМВ характеризуется более выраженным дисбалансом таких параметров иммунной системы как уровень Т-лимфоцитов, Т-хелперов/индукторов, Т-супрессоров/цитотоксических лимфоцитов и NK-клеток. В этой группе женщин наблюдается наиболее высокий уровень лимфоцитов с рецептором к апоптозу и повышается концентрация IgA, IgM и IgG. Отмечается достоверное повышение содержания уровня С-реактивного белка (CRP) и компонентов комплемента C3 и C4.

4. Уровень интерферонов и интерлейкинов при ВПГ, ЦМВ и их микст формах имеет свои особенности: при ВПГ отмечается снижение уровня ИНФ, ИНФα, ИНФγ и ИЛ-2, повышение концентрации ИЛ-1 и особенно

ИЛ-4; при ЦМВ – наиболее низкая концентрация ИНФ, ИНФγ и ИЛ-2, низкое содержание ИНФα и ИЛ-1 и повышенный уровень ИЛ-4; при микст-инфекциях – снижение содержания ИНФ, ИНФα, ИНФγ и повышение концентрации ИЛ-1,ИЛ-2 и ИЛ-4.

5. Иммунокоррекция герпетических инфекций как циклофероном, так и полиоксидонием способствовует положительной динамике нарушенных иммунологических параметров. Однако, их полного восстановления до уровня контрольных значений не происходит.

6.Сочетанное применение интерферониндуцирующего препарата циклоферона и иммуномодулирующего препарата полиоксидония у женщин с герпесвирусными инфекциями способствует улучшению общего состояния и восстановлению нарушенных звеньев иммунной системы до нормативных значений.


Практические рекомендации

1.У женщин с герпесвирусной инфекцией при оценке клинического течения и назначения терапии следует учитывать состояние иммунного статуса. Для выявления выраженности и характера иммунодефицитных состояний рекомендуется комплексное обследование иммунного статуса: клеточный иммунитет (CD3+, CD4+,CD8+, CD16+), гуморальный иммунитет (IgG, IgA, IgM, ФАН и ЦИК), цитокиновый статус (ИНФ, ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-4).

2. С целью коррекции иммунодефицитного состояния при герпесвирусных инфекциях и достижения стойкой клинической ремиссии заболевания рекомендуется назначать: Циклоферон, 12,5% раствор, внутримышечно по схеме (10 ампул) 1,2,4,6,8,11,14,17,20 и 23 дни. Полиоксидоний - внутривенно, капельно, используя дозу 6 мг через день, №10.


СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Журнальные статьи:

1.Особенности иммунной системы у женщин репродуктивного возраста при хронической хламидийной и сопутствующих микст инфекций. /Файзуллаева Н.Я., Камалов З.С., Алимова М.Т., Арипова Т.У. //Ж.Теоретической и клинической медицины.-2004.№3.-С.60-63

2.Особенности иммунологических изменений у женщин репродуктивного возраста при ВПГ до и после иммунокоррекции полиоксидонием. /Арипова Т.У., Камалов З.С., Алимова М.Т., Файзуллаева М.Я.,Казимова Г.В. // Ж. Теоретической и клинической медицины.-2005.№4.-С.22-26

Тезисы и методические рекомендации:

3.Особенности клеточного звена иммунитета продукции интерферонов и других цитокинов у больных с ВПГ. /Камалов З.С., Арипова Т.У., Пулатова Н.Я., Алимова М.Т., Казимова Г.В.// Ж.Теоретической и клинической медицины.-2003.№3.-С.30

4.Влияние полиоксидония на некоторые иммунологические показатели женщин репродуктивного возраста при микст-инфицировании (ЦМВ + ВПГ). /Арипова Т.У., Камалов З.С., Алимова М.Т., Файзуллаева Н.Я., Казимова Г.В., Салихова Н.Н. //Ж. Аллергология и иммунология.-2005.т.6.№3.-С.392-393

5.Иммунологический профиль женщин репродуктивного возраста при ВПГ и ЦМВ инфекциях. /Арипова Т.У., Камалов З.С., Алимова М.Т., Файзуллаева Н.Я., Казимова Г.В., Салихова Н.Н. // Научные труды I съезда физиологов СНГ.2005. т.2. С.-137

6.Нормативные значения основных показателей иммунной системы у женщин репродуктивного возраста. /Арипова Т.У. Камалов З.С., Алимова М.Т., Файзуллаева Н.Я., Салихова Н.Н. //Методические рекомендации. Ташкент.-2006.-19с.

7.Состояние иммунной системы у женщин репродуктивного возраста при герпесвирусной инфекции до и после иммунокоррекции полиоксидонием. /Арипова Т.У. Камалов З.С., Алимова М.Т., Файзуллаева Н.Я., Казимова Г.В., Салихова Н.Н. // Методические рекомендации. Ташкент.-2006.-20с.

Тиббиёт фанлари номзоди илмий даражасига талабгор
Н.Я.Файзуллаеванинг 14.00.36 - аллергология ва иммунология ихтисослиги бўйича "Репродуктив ёшдаги аёллар герпетик инфекциясида иммунологик ўзгаришлар ва уларнинг иммунокоррекцияси" мавзусидаги номзодлик диссертациясининг

РЕЗЮМЕСИ

Таянч сўзлар: оддий герпес вируси, цитомегаловирус, микст инфекцияси, ҳужайравий ва гуморал иммунитет, цитокинлар, иммунокоррекция.

Тадқиқот объектлари: репродуктив ёшдаги аёллар.

Ишнинг мақсади: репродуктив ёшдаги аёлларда иммуно-коррекциянинг самарали ўтказиш учун баъзи бир герпетик инфекцияларда иммунологик ўзгаришлар механизмини ўрганиш.

Тадқиқот усули: клиник, иммунологик.

Олинган натижалар ва уларнинг янгилиги: текшириш натижалари иммунитет тизими турли бўғинларининг вирус инфекцияси таъсири остида шикастланиш механизмларини ёритиб берди. Биринчи марта ОГВ ва ЦМВИ алоҳида-алоҳида ва уларнинг аралаш формаларида иммун тизим медиаторларининг Th1 ва Th2 типлари хусусиятлари тавсифи келтирилди. Вирус инфекцияларда иммунитетнинг ҳужайравий апоптози, табиий киллер ҳужайралари фаоллигининг ортиши ҳамда пролифератив лимфоцитлар супрессияси билан кечиши кўрсатилди. Циклоферон ва полиоксидоний препаратларини комплекс қўлланилиши клиник-иммунологик самарага эга эканлиги аниқланди.

Амалий аҳамияти: герпесвирус инфекцияли репродуктив ёшдаги аёлларда иммунореактивлик хусусиятлари аниқланди, бу эса ташхис учун қўшимча мезон ҳамда тегишли иммунокоррекция ўтказишга асос бўлишлиги кўрсатилди.

Татбиқ этиш даражаси ва иқтисодий самарадорлиги: изланиш натижалари ЎзР ССВ Ургенч тиббиёт институти талабаларни амалиёт машғулотларига, ҳамда ЎзР ФА Иммунология институти илмий ва амалий фаолиятига тадбиқ этилди.

Қўлланиш соҳаси: тиббиёт.


РЕЗЮМЕ

диссертации Файзуллаевой Н.Я. на тему: «Иммунологические изменения и иммунокоррекция герпетических инфекций у женщин репродуктивного возраста» на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по специальности 14.00.36.- аллергология и иммунология


Ключевые слова: вирус простого герпеса, цитомегаловирус, микст инфекция, клеточный и гуморальный иммунитет, цитокины, иммунокоррекция

Объект исследования: женщины репродуктивного возраста.

Цель работы: изучение механизмов иммунологических нарушений при некоторых герпетических инфекциях и обоснование применения иммунокорригирующей терапии у женщин репродуктивного возраста.

Методы исследования: клинические, иммунологические

Полученные результаты и их новизна: раскрыты механизмы повреждения различных звеньев иммунитета при вирусных инфекциях. Впервые изучены особенности медиаторов иммунной системы типов Th1 и Th2 при герпесвирусных инфекциях (ВПГ, ЦМВИ и их смешанные формы ) у женщин репродуктивного возраста. Для герпетических инфекций характерна активация клеточного апоптоза, натуральных киллерных клеток и супрессия пролиферативных лимфоцитов. Комплексное применение препаратов циклоферона с полиоксидонием имеет значительный клинико-иммунологический эффект.

Практическая значимость: выявленные особенности иммунореактивности женщин репродуктивного возраста при герпесвирусных инфекциях, являются дополнительным критерием их диагностики и основой для соответствующей иммунокоррекции.

Степень внедрения и экономическая эффективность: полученные результаты внедрены в практические занятия студентов Ургенчского мединститута МЗ РУз и в научно-практическую деятельность Института иммунологии АН РУз.

Область применения: медицина.

RESUME


Thesis of Fayzullaeva N.Ya on the scientific degree competition of the candidate of medical in speciality 14.00.36 - Allergology and immunology subject: “Immunological changes and immunological correction of herpetic infections in women of childbearing age“.

Key words: herpes simplex virus; cytomegalovirus; mixed infection; cellular; humoral immunity, cytokine, immunological correction.

Subjects of the inquiry: women of childbearing age.

Aim of the inquiry: research of the mechanisms of immunological abnormalities, caused by the effect of herpetic infections and substantiation of application of immune correcting therapy in women of childbearing age.

Methods of inquiry: clinical, immunological.

The results achieved and their novelty: the mechanisms of damage of various components of immune system under effect of viral infections were revealed. The features of immune system mediators of Th1 and Th2 types in case of herpetic viral infections such as herpes simplex virus (HSV) and cytomegalovirus infection (CMVI) and their mixed forms were characterized for the first time. Activation of cellular apoptosis of natural killer cells and suppression of proliferative lymphocytes are typical for herpetic infections. Complex application of preparations such as cyclopheron + polyoxidonium has significant clinical and immunological effect.

Practical value: revealed features of immunoreactivity of childbearing age women in cases of herpetic viral infections are additional criteria of their diagnostics and will be the basis for respective immunological correction.

Degree of embed and economic effectivity: obtained results were introduced to the practical lessons for students of Urgench Medical Institute of the Ministry of Public Health of the Republic of Uzbekistan and to the research and practical activity of the Institute of Immunology of the Academy of Sciences of The Republic of Uzbekistan.

Sphere of usage: medicine


Соискатель __________________