Ecological Studies, Hazards, Solutions, 2006, Vol

Вид материалаДокументы

Содержание


Москва 119992, Московский гос. университет, биологический факультет
Воздействие Hg на организм животных. 1. Общее введение
Подобный материал:
1   ...   15   16   17   18   19   20   21   22   ...   33

Москва 119992, Московский гос. университет, биологический факультет



Мирно вбирается яд отрав

М. Кузмин (1872-1936)


Данный цикл работ продолжает предыдущие работы автора, посвященные изучению воздействия некоторых металлов на гидробионтов (Факты и концепции экологии. 4. К изучению действия кадмия, меди и свинца на Mytilus galloprovincialis // Ecological Studies, Hazards, Solutions. 2004. Vol. 7. С. 119-121; Сульфат кадмия: действие на мидий // Токсикологический вестник. 2004. № 6. С. 36-37). Цикл состоит из трех публикаций. Первая публикация – общее введение о действии ртути на организмы, с особым вниманием к водным животным. Во второй публикации сообщается о способности загрязнения воды ртутью подавлять фильтрационную активность черноморских мидий Mytilus galloprovincialis. В третьей публикации исследуется вопрос о том, способны ли мидии M. galloprovincialis восстанавливать фильтрационную активность после кратковременного контакта со ртутью в использованной концентрации. Все части работы оформлены в виде самостоятельных небольших публикаций, каждая из которых представляет собой независимую публикацию со своей постановкой задачи и своим библиографическим списком. Каждая из них может читаться независимо от другой.

Воздействие Hg на организм животных. 1. Общее введение

Считается, что первичное воздействие ртути на клетки – связывание с сульфгидрильными группами на поверхности мембранных белков (Luckey, Venugopal, 1977, цит. по Leland, Kuwabara, 1985). Ртуть имеет крайне высокое сродство к сульфгидрильным группам. Как полагают, одно из существенных повреждений, наносимых ртутью – то, что изменяется проницаемость мембран.

Воздействие ртути более подробно изучено на позвоночных животных, в особенности на млекопитающих и рыбах. Так, наблюдали селективный некроз нефрона морского языка (hogchokers) Trinectes maculatus (семейство Солеевые или Косоротые, Soleidae, подотряд Soleoidei) (Trump et al., 1975, цит. по: Leland, Kuwabara, 1985) после инъекции 16 мг/кг HgCl2.

Изучалось внутриклеточное распределение соединений ртути, опять же главным образом на позвоночных, в особенности на млекопитающих. В печени крыс после инъекции неорганической ртути, ртуть была найдена в лизосомах. После инъекции метилртути, метилруть была связана с микросомами, а в лизосомах нашли неорганическую ртуть (Magos, 1973, цит. по Leland, Kuwabara, 1985).

На рыбах выявлено воздействие ртути на параметры иммунного ответа. Снижение числа лимфоцитов обнаружено при действии хлорида ртути (181 мкг/мл в воде, 96 ч) на Barbus conchonius (Gill, Pant, 1985, цит по: Anderson, Zeeman, 1995). В результате воздействия ртути (9 ppb в воде, 3 недели) увеличивалась уязвимость (susceptibility) голубых гурами (blue gourami, Trichogaster trichopterus) к вирусу IPNV (infectious pancreatic necrosis virus) (Roales, Perlmetter, 1977, цит по: Anderson, Zeeman, 1995).

Используя методы лимнокорралей или лимнозагонов (limnocorrals), которые изолируют в пластиковом мешке часть водной экосистемы, изучали воздействие ртути на фитопланктон и зоопланктон (Kuiper, 1977) и на первичную продуктивность (Blinn et al., 1977).

Показано и подробно изучено нарушающее действие тяжелых металлов на эмбриональное развитие морских двустворчатых моллюсков (Малахов, Медведева 1991). Cведения о биологическом воздействии ртути приведены в книгах О.Ф.Филенко (1988) и Б.А.Флерова (1989). Воздействие HgCl2 (0.01 - 10 мг/л) вызывало смену статического состояния на динамичное у молоди медицинской пиявки (Флеров, 1989, с. 102). Воздействие ртути на мидий Mytilus galloprovincialis, в особенности на фильтрационную активность мидий, было изучено недостаточно. О некоторых исследованиях автора в этом направлении сообщается ниже.

Литература

Малахов В.В., Медведева Л.А. Эмбриональное развитие двустворчатых моллюсков в норме и при воздействии тяжелых металлов.- М.: Наука. 1991.-132 с.

Филенко О.Ф. Водная токсикология. Изд-во МГУ. Черноголовка. 1988. 156 с.

Флеров Б.А. Эколого-физиологические аспекты токсикологии пресноводных животных. Л. Наука. 1989. 144 с.

Anderson D., Zeeman M. Immunotoxicology in fish. In: Rand G. (Ed.) Fundamentals of Aquatic Toxicology (2nd edition). Taylor & Francis. Philadelphia. 1995. P. 371-404.

Blinn D., Tompkins T., Zaleski L. Mercury inhibition on primary productivity using large volume plastic chambers 'in situ'. J. Phycol. 13: 58-61. 1977

Kuiper J. An experimental approach in studying the influence of mercury on a North sea coastal plankton community. Helgol. Wiss. Meeresunters. 30: 652-665. 1977.

Leland H., Kuwabara J. Trace Metals. In: G.Rand, S.Petrocelli (Eds) Fundamentals of Aquatic Toxicology. Hemisphere Publishing Corporation. New York. 1985. P.374-415.


Воздействие Hg на организм животных. 2. Нарушение фильтрационной активности мидий Mytilus galloprovincialis и ингибирование изъятия водорослей из воды

Проводили опыты по характеристике фильтрации воды Mytilus galloprovincialis. Сравнивали варианты опыта, в которых в воду добавляли сернокислую ртуть окисную (HgSO4 10 мг/л), с контролем, где использовали чистую морскую воду без добавок соединений ртути. Использовали метод, описанный ранее (Остроумов, 2001в). В сосуды вносили суспензию водорослей Monochrysis lutheri, выращенную на среде Голдберга (Кабанова 1968).

Общая биомасса 10 моллюсков составляла 70.8 г (сырая масса с раковинами) в варианте с добавленной ртутью. В контрольном варианте без ртути биомасса 10 моллюсков составляла 64.8 г (сырая масса с раковинами).

Проводили инкубацию (температура 26.6˚ С) моллюсков в морской воде (из Севастопольской бухты) в объеме 300 мл в каждом сосуде.

Опыт начинали одновременной добавкой водорослей в оба сосуда. После добавки водорослей объем воды в каждом сосуде, как отмечалось, составлял 300 мл. Измеряли оптическую плотность (OD) при 700 нм в обоих сосуда (длина оптического пути в кювете 10 мм). Результаты измерений приведены в таблице.


№ изме-рения

Время от начала опыта, мин

А

OD в сосуде с Hg

(опыт)

В

OD в сосуде без Hg

(контроль)

(А/В) · 100%

Визуальные наблюдения

1

1

-

0.201

112.44%

разницы между сосудами не заметно

2

0.226

-

2

4

-

0.142

148.59%

заметна некоторая разница: цвет интенсивнее и мутность выше в сосуде А

5

0.211

-

3

9

-

0.160

128.75%

разница заметна. в сосуде В есть зеленые пеллеты, в сосуде А пока пеллет не видно. Окраска воды и мутность значительнее в сосуде А

10

0.206

-

4

14

-

0.089

219.10%

то же

15

0.195

-

5

19

-

0.084

244.05%


то же

20

0.205

-

6

24

-

0.076

273.68%

то же

25

0.208

-

7

29

-

0.078

265.38%

В сосуде А приоткрыты створки только 3 из 10 мидий, зеленых пеллет нет, вода мутная и зеленоватая; в сосуде В приоткрыты все мидии, заметны зеленые пеллеты, вода прозрачная

30

0.207

-


Таким образом, добавление HgSO4 10 мг/л приводило к заметному ингибированию фильтрации воды мидиями Mytilus galloprovincialis и подавлению извлечения ими из воды клеток водорослей Monochrysis lutheri.

Ранее были показаны сходные эффекты при воздействии и других поллютантов (Остроумов 2000а,б,в; 2001а,б; 2004; 2005 ).

В аналогичных условиях мы проводили опыт по проверке того, может ли добавление SnCl2·H2O 15 мг/л приводить к ингибированию фильтрации воды мидиями и извлечения ими водорослей из воды. В проведенном нами опыте ингибирование не было обнаружено (подробнее опыт описан в отдельном сообщении).

Приношу глубокую благодарность всем, кто помогал в работе: Г.Е.Шульману, Г.А.Финенко, З.А.Романовой, А.А.Солдатову и другим сотрудникам Института биологии южных морей НАНУ.

Литература

Кабанова Ю.Г. 1968. Океанический фосфор как источник питания фитопланктона // Тр. ин-та океанологии. 1968. Вып.1. с. 16-24.

Остроумов С.А. Биологические эффекты поверхностно-активных веществ в связи с антропогенными воздействиями на биосферу. М.: МАКС-Пресс. 2000а. 116 с.

Idem. Тетрадецилтриметиламмонийбромид // Токсикологический вестник. 2000б. № 3. С.34-35.

Idem. Синтетические моющие средства "Лотос-Экстра" и "Tide-Lemon" // Токсикологический вестник. 2000в. № 4. С.35-37.

Idem.Синтетическое моющее средство Лоск-Универсал//Токсикол.вестн.2001а.№ 3.С.40-41.

Idem. Avon Herbal Care // Токсикол. вестн. 2001б. № 5. С.29-31.

Idem. Методика биотестирования: Методика оценки потенциальной опасности химических веществ по их способности снижать фильтрационную активность гидробионтов (на примере двустворчатых моллюсков) // Ecological Studies, Hazards, Solutions, 2001в. Vol. 5. C.137-138.

Idem. Влияние синтетических поверхностно-активных веществ на гидробиологические механизмы самоочищения водной среды // Водные ресурсы 2004, т.31. № 5. С. 546 - 555.

Idem. О некоторых вопросах поддержания качества воды и ее самоочищения // Водные ресурсы. 2005. т.32. № 3. С. 337-347.


Воздействие Hg на организм животных. 3. Отсутствие реабилитации мидий Mytilus galloprovincialis после переноса из воды, загрязненной ртутью, в чистую воду

Как написано выше (часть 2 этого цикла из трех частей), было установлено, что ртуть ингибирует фильтрационную активность мидий Mytilus galloprovincialis.

Цель данной работы – проверить, происходит ли реабилитация моллюсков, подвергавшихся воздействию ртути, после промывки и последующего переноса в чистую воду.

Режим воздействия ртути описан в предыдущей работе (Остроумов - см. выше). После окончания инкубации моллюсков в среде, содержащей ртуть (в течение 30 мин, 26.6 ºС), их дважды промыли чистой морской водой, моллюски внесли в свежую морскую воду (100 мл), поместили при температуре 15ºС на 3 ч.

Затем проверили способность моллюсков фильтровать воду по ранее описанной методике (Остроумов 2001в). Подопытные моллюски - выборка 1 - (ранее подвергавшиеся воздействию ртути, 10 моллюсков, общий сырой вес с раковинами 70.8 г) и контрольная выборка 2 (10 моллюсков, общий сырой вес с раковинами 64.8 г) поместили в сосуды со свежей морской водой, в оба сосуда одновременно добавили суспензию водорослей Monochrysis lutheri. Культуру водорослей Monochrysis lutheri выращивали на среде Голдберга (Кабанова 1968).

Суммарный объем воды в каждом из сосудов после добавки водорослей составлял 300 мл. Температура 25,0ºС.

Результаты измерения оптической плотности при 700 нм (длина оптического пути 10 мм) в сосудах представлены ниже в таблице.

Табл. 1. Оптическая плотность при 700 нм суспензии водорослей Monochrysis lutheri в ходе инкубации совместно с мидиями Mytilus galloprovincialis, ранее находившимися в воде, содержащей ртуть. После окончания контакта с ртутью мидии держали в чистой морской воде 3 ч, затем измеряли их способность к фильтрационную активности

№ изме-рения

Время от начала опыта, мин

А

OD в сосуде с мидиями, имевшими контакт с Hg (опыт)

В

OD в сосуде с мидиями, не имевшими контакта с Hg

(контроль)

(А/В) · 100%

Визуальные наблюдения

1

1

-

0.270

102.96%

Разницы между сосудами не заметно, в обоих сосудах вода зеленоватая

2

0.278

-

2

5

-

0.229

117.90%

Начинает возникать некоторая разница: цвет интенсивнее и мутность чуть выше в сосуде А

6

0.270

-

3

10

-

0.186

140.32%

Разница заметна. в сосуде В есть зеленые пеллеты, в сосуде А пока пеллет не видно. Окраска воды и мутность значительнее в сосуде А

11

0.261

-

4

15

-

0.141

182.98%

В сосуде А пеллет нет, вода зеленоватая, мутная; в сосуде В заметны зеленые пеллеты, вода более прозрачная

16

0.258

-

5

20

-

0.125

200.00%

То же

21

0.250

-

6

25

-

0.122

186.07%

То же

26

0.227

-

7

30

-

0.125

186.40%

В сосуде А пеллет нет, вода зеленоватая, мутная, мидии приоткрыты; в сосуде В есть зеленые пеллеты, вода едва зеленоватая, прозрачная; мидии приоткрыты

31

0.233

-

8

35

-

0.125

188.80%

То же

36

0.236

-

9

50

-

0.108

213.89%

В сосуде А то же (пеллет нет, вода зеленоватая, мутная); в сосуде В зеленые пеллеты, вода прозрачная, с едва заметным желтовато-зеленоватым оттенком

51

0.231

-

10

60

-

0.109

204.59%

То же

61

0.223

-


Результаты опыта доказывают, что в условиях опыта реабилитации моллюсков, ранее контактировавших со ртутью, не произошло. Несмотря на перенос в чистую воду, способность фильтровать воду остается подавленной.

Обе группы мидий перенесли в чистую морскую воду и инкубировали при 15ºС в течение 22 ч. На следующий день повторно проверили, произошло ли восстановление способности фильтровать воду у подопытных мидий. К моменту начала этого опыта прошло 25 ч после окончания инкубации подопытных мидий в воде, содержащей ртуть (с учетом первой инкубации в течение 3 ч). Результаты этого опыта приведены в табл. 2.


Табл. 2. Оптическая плотность при 700 нм суспензии водорослей Monochrysis lutheri в ходе инкубации совместно с мидиями Mytilus galloprovincialis, ранее находившимися в воде, содержащей ртуть. После окончания контакта с ртутью мидии держали в чистой морской воде 25 ч, затем измеряли фильтрацию воды

№ изме-рения

Время от начала опыта, мин

А

OD в сосуде с мидиями, имевшими контакт с Hg

(опыт)

В

OD в сосуде с мидиями, не имевшими контакта с Hg

(контроль)

(А/В) · 100%

Визуальные наблюдения

1

1

-

0.233

127.90%

Разницы между сосудами не заметно, в обоих сосудах вода зеленоватая

2

0.298

-

2

6

-

0.204

144.61%

Начинает возникать некоторая разница: в сосуде В появились зеленые пеллеты; в сосуде А нет пеллет

7

0.295

-

3

11

-

0.181

150.28%

Разница заметна. в сосуде В есть зеленые пеллеты, в сосуде А пока пеллет не видно. Окраска воды и мутность значительнее в сосуде А. В соседе В заметно движение струй воды, индуцированное мидиями; в сосуде А - нет

12

0.272

-

5

21

-

0.161

165.84%

То же

22

0.267

-

6

32

-

0.219

112.79%

То же. В сосуде В часть пеллет распались, что вызвало некоторое помутнение воды

33

0.247

-

7

42

-

0.180

143.33%


В сосуде А пеллет нет, вода зеленоватая, мутная; в сосуде В есть зеленые пеллеты, вода более прозрачная;

43

0.258

-

8

53

-

0.143

173.43%

В сосуде А пеллет практически нет

54

0.248

-

9

111

-

0.110

196.36%

Практически то же

112

0.216

-

10

197

-

0.106

195.28 %

То же

198

0.207

-


Из табл. 2 видно, что у мидий после контакта со ртутью восстановления способности фильтровать воду практически не произошло.

В дальнейшем подопытных мидий держали при 15ºС, каждый день меняя воду. Через 5 суток все мидии, контактировавшие со ртутью, погибли. В контрольной выборке, которую содержали при таких же условиях (15ºС, каждый день меняли воду) погибла только 1 мидия.

Таким образом, в условиях опыта после воздействия ртути реабилитации способности мидий фильтровать воду не произошло. Результаты опыта дополнительно указывают на высокую опасность загрязнения воды ртутью (напр., Филенко, 1988).

Приношу благодарность всем, кто помогал в работе: Г.Е.Шульману, Г.А.Финенко, З.А.Романовой, А.А.Солдатову и другим сотрудникам ИНБЮМ НАНУ.

Библиография

Кабанова Ю.Г. 1968. Океанический фосфор как источник питания фитопланктона// Тр. ин-та океанологии. 1968. Вып.1. с. 16-24.

Idem. Биологические эффекты поверхностно-активных веществ в связи с антропогенными воздействиями на биосферу. М.: МАКС-Пресс. 2000а. 116 с.

Idem. Тетрадецилтриметиламмонийбромид // Токс. вестник. 2000б. № 3. С.34-35.

Idem. Синтетические моющие средства "Лотос-Экстра" и "Tide-Lemon" // Токсикологический вестник. 2000в. № 4. С.35-37.

Idem. Синтетическое моющее средство Лоск-Универсал//Токс.вестник.2001а. №3.С.40-41.

Idem. Avon Herbal Care // Токсикол. вестн. 2001б. № 5. С.29-31.

Idem. Методика биотестирования: Методика оценки потенциальной опасности химических веществ по их способности снижать фильтрационную активность гидробионтов (на примере двустворчатых моллюсков) // Ecological Studies, Hazards, Solutions, 2001в. Vol. 5. C.137-138.

Idem. Влияние синтетических поверхностно-активных веществ на гидробиологические механизмы самоочищения водной среды // Водн. ресурсы 2004, т. 31. № 5. С. 546 - 555.

Idem. О некоторых вопросах поддержания качества воды и ее самоочищения // Водные ресурсы. 2005. т.32. № 3. С. 337-347.

Филенко О.Ф. Водная токсикология. - Черноголовка, 1988.-156 с.