Девятая Всероссийская медико-биологическая конференция молодых исследователей

Вид материалаДокументы

Содержание


Т.В. Левашова, н.с. ФГУ РНИИ геронтологии Росздрава. Москва, Россия
Влияние цитокинов на развитие эпилептиформной активности нейронов гиппокампа
Ассоциация полиморфизма в гене асе и уровня максимального потребления кислорода человека
Кафедра общей биологии и генетики. Уфа, Россия
Личностно-психологические особенности больных с дисциркуляторной энцефалопатией
Подобный материал:
1   ...   11   12   13   14   15   16   17   18   ...   31

Т.В. Левашова, н.с.

ФГУ РНИИ геронтологии Росздрава. Москва, Россия


Определение минорных субпопуляций Т-лимфоцитов имеет немаловажное значение, поскольку позволяет получить новую информацию о состоянии иммунореактивности организма у пациентов разных возрастных групп с наличием тех или иных заболеваний. Однако для этого используется метод трех/четырехцветной цитометрии, который малодоступен для клинических лабораторий. В связи с этим целью нашего исследования была адаптация рутинного метода двухцветной проточной цитометрии со стандартным набором моноклональных антител (МКАТ) к одновременному выявлению минорных субпопуляций гамма/дельта и альфа/бета Т-лимфоцитов. Определение субпопуляций проводили на приборе FACScan фирмы Becton Dickinson (США) и с помощью МКАТ фирм «Сорбент» (Москва) и Beckman Coulter (США). Использовались стандартные комбинации МКАТ: CD3/CD8, CD3/CD16, CD3/CD4 с двумя вариантами окрашивания (PE/FITC и FITC/PE) и разработанные нами дополнительные комбинации CD3PE/(CD4+CD8)FITC и CD3PE/(CD4+CD8+CD16)FITC. Кроме этого была использована комбинация МКАТ к гамма/дельта Т-клеточному рецептору (ТКР), окрашенному PE, с МКАТ CD3 и CD16, окрашенных FITC. Использование комбинации МКАТ CD3PE/(CD4+CD8)FITC и CD3PE/(CD4+CD8+CD16)FITC позволило определить местоположение субпопуляции CD3+CD4-CD8- на гистограмме и выявить субпопуляцию с фенотипом CD3hiCD4-CD8-CD16low, которая соответствует естественным киллерным Т-клеткам, а также субпопуляцию с фенотипом CD3lowCD4-CD8-CD16-. Определение на Т-клетках минорных субпопуляций гамма/дельта ТКР позволило установить, что субпопуляция CD3lowCD4-CD8-CD16- соответствует гамма/дельта Т-лимфоцитам, а субпопуляция CD3hiCD4-CD8-CD16low — альфа/бета Т-лимфоцитам. Приведенные доказательства дают возможность предложить метод определения клеток минорных субпопуляций Т-лимфоцитов уже при первичном иммунологическом обследовании используя лишь стандартные комбинации МКАТ. Зная количество CD3+ клеток и сумму CD4 и CD8 клеток, можно высчитать количество клеток с фенотипом CD3+CD4-CD8-. Среди них альфа/бета Т-клетки могут быть определены комбинацией CD3/CD16, а гамма/дельта Т-клетки – путем вычитания из общего количества CD3+CD4-CD8- клеток CD3+CD16+. Таким путем можно определить Т-клетки минорных субпопуляций при стандартной двухцветной цитометрии без использования дорогостоящих импортных антител и выявить диагностическую ценность этих клеток на большом количестве исследований при различных заболеваниях и на разных этапах болезни.


ВЛИЯНИЕ ЦИТОКИНОВ НА РАЗВИТИЕ ЭПИЛЕПТИФОРМНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙРОНОВ ГИППОКАМПА


С.Г. Левин, н.с., М.Е. Бурковецкая, асп.

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН,

лаборатория экспериментальной нейробиологии. Пущино, Россия


В последнее время появляются клинические данные и эксперименты на животных, указывающие на участие цитокинов в патогенезе некоторых форм эпилепсии. Тем не менее, роль этих эндогенных иммуномодуляторов в механизмах развития судорожной активности нейронов мозга во многом остается неясной.

В связи с этим мы поставили целью работы изучить сравнительную роль антивоспалительного цитокина интерлейкина-10 (ИЛ-10) и про-воспалительного цитокина фактора некроза опухоли–альфа (ФНО-альфа) в механизмах развития вызванных кратковременными эпизодами гипоксии эпилептиформных разрядов в пирамидных нейронах поля СА1 в срезах гиппокампа крысы.

В экспериментах использовали 2-месячных самцов крыс Вистар (n = 60). Регистрацию активности начинали через 5 ч от начала суперфузии, поскольку по данным литературы уровень экспрессии некоторых цитокинов в срезах гиппокампа повышен в более короткие периоды времени после приготовления среза.

ИЛ-10 и ФНО-альфа не влияли на амплитуду популяционного спайка, регистрируемого от пирамидных нейронов поля СА1 в ответ на электрическую стимуляцию глутаматергических аксонов как в контрольных («негипоксических»), так и «пост-гипоксических» срезах гиппокампа. Три 3-х минутных эпизода гипоксии приводили к трансформации нормального паттерна активности нейронов в эпилептиформный: снижению порога генерации вызванных пачек популяционных спайков и увеличению числа популяционных спайков в пачке в пирамидных нейронах поля СА1. ИЛ-10 устранял развитие эпилептиформной активности, но эффективность эффекта зависела от дозы. ФНО-альфа оказывал слабо-выраженное угнетающее действие на развитие эпилептиформной активности.

Результаты проведенных исследований являются первым экспериментальным доказательством протектирующего действия анти-воспалительного цитокина ИЛ-10 на развитие вызванных гипоксией эпилептиформных событий в гипокампе.

Работа выполнена при поддержке РФФИ (проект № 05=04=48907).


АССОЦИАЦИЯ ПОЛИМОРФИЗМА В ГЕНЕ АСЕ И УРОВНЯ МАКСИМАЛЬНОГО ПОТРЕБЛЕНИЯ КИСЛОРОДА ЧЕЛОВЕКА


Е.В. Леконцев, асп., О.В. Гумерова, асс., Е.В. Воробьева, ст.преп.

Башкирский государственный педагогический университет,

Естественно-географический факультет,

Кафедра общей биологии и генетики. Уфа, Россия


Ангиотензин превращающий фермент (АСЕ) является одним из основных компонентов, регулирующих деятельность сердечно-сосудистой системы. В интроне 16 гена АСЕ (17q23) найден полиморфизм, обусловленный инсерцией (I) или делецией (D) Alu-элемента (Rigat et. all., 1992). Имеется три полиморфных генотипа – I/I, I/D, D/D. Целью исследования явилось изучение ассоциации данного полиморфизма с уровнем физической работоспособности, одним из показателей которого является максимальное потребление кислорода (МПК).

Среди исследованных 70 человек у лиц с высокими показателями МПК наблюдается более высокая частота встречаемости аллеля I (46,2%, 10,1%, Р=0,036) и снижение частоты встречаемости гетерозиготного генотипа I/D (14,3%, 88,9%, Р=0,014) по сравнению с контролем. В группе с низкими значениями МПК установлено достоверное повышение частоты встречаемости гомозиготного генотипа D/D (87,8% 14,2%, Р=0,014).

Т.о, установлено влияние полиморфизма в гене АСЕ на уровень МПК. Министерство образования и науки РФ «Выбор федеральных экспериментальных площадок для реализации проектов 2003-2004 гг» № 1.6.


ЛИЧНОСТНО-ПСИХОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ БОЛЬНЫХ С ДИСЦИРКУЛЯТОРНОЙ ЭНЦЕФАЛОПАТИЕЙ


Л.А. Леонидова, асп.

Санкт-Петербургский государственный университет,

Медицинский факультет,

Кафедра психиатрии и наркологии. Санкт-Петербург, Россия


Целью исследования было изучение личностно-психологических особенностей и психического состояния больных с дисциркуляторной энцефалопатией (ДЭ). Обследованы 2 группы сравнения: 20 больных (возраст36,9±2,4г) с ДЭ II стадии, ассоциированной с антифосфолипидным синдромом и 35 больных (54,96,4г), у которых нарушение мозгового кровообращения было обусловлено общепринятыми причинами (артериальной гипертензией, дислипидемией). В обследовании были использованы Торонтская алекситимическая шкала (TAS), методика «Индекс жизненного стиля» (ИЖС) для изучения системы психологической защиты личности, а также опросник качества жизни SF-36 и «Руководство по оценке психических расстройств в общемедицинской практике» PRIME-MD (Primary care evaluation of mental desorders, R.L.Spitzen, Y.B.W.Williams et.al., 1992). В структуре личности обследованных больных обращает на себя внимание наличие алекситимического радикала как фактора риска развития психосоматических расстройств. Его выраженность в обеих группах достоверно превышает нормативный показатель по шкале TAS (68,0+4,3 балла в первой и 69,1+9,3 балла во второй группе, p<0,05). Наибольший удельный вес в клинической картине в первой группе больных имеют генерализованное тревожное расстройство, дистимия и панические атаки, во второй - большое депрессивное расстройство (61,5%). У пациентов обеих групп преобладают сочетанные психические расстройства, при этом у больных первой группы преобладает тревожный компонент, а во второй группе – депрессивный компонент. Отмечено существенные повышение по сравнению с общепопуляционными показателями напряженности таких механизмов психологической защиты, как регрессия и реактивные образования (гиперкоменсация), особенно в первой группе больных ДЭ, что отражает наличие психической дезадаптации и преобладание незрелых вариантов защитных реакций. Качество жизни при ДЭ достоверно снижено по всем параметрам, особенно заметно ограничивающее влияние на ролевое функционирование физического состояния больных (p<0,01). Таким образом, независимо от этиологии ДЭ характеризуется личностно-психологическими особенностями, предрасполагающими к психосоматическим расстройствам, признаками психической дезадаптации, при этом патогенетические факторы основного заболевания обусловливают феноменологические особенности этих расстройств.