Директор Инженерной Академии Док вет наук, проф. Е. Б. Никитин 2009 г. Автор: преподаватель И. В. Тимофеева Кафедра «Прикладная биотехнология» методические указанияСодержаниеМетодические указания к практическим работам1. Лаборатория клеточной биотехнологии и правила работы в ней1.1 Подготовка лаборатории клеточной биотехнологии к работе1.2 Правила работы с культурами клеток2. Ведение лабораторных записейМетоды стерилизацииСтерилизация питательных средДробная стерилизация (тиндализация) и пастеризацияСтерилизация фильтрованиемСтерилизация стеклянной посудыПодготовка посуды к стерилизации.Стерилизация инструментов и приборовСтерилизация газообразными веществамиСтерилизация облучениемСпособы стерилизации питательных сред, посуды и других лабораторных материаловПрактическая работа № 2Материалы и оборудование.Ход работы.Практическая работа № 3 Выделение протопластов из мезофилла листаМатериалы и оборудование.Ход работы.Получение жизнеспособных протопластовТаблица 1. Среды для культивирования протопластов табака и картофеля, рН 5,7Практическая работа № 4Культивирование животных клеток.Питательные среды и условия культивированияСистемы культивирования клетокПроточные культурыСуспензионные культурыКультивирование органовПрактическая работа №5Получение моноклональных антителПрактическая работа № 6Выделение чистых культур.Получение накопительной культурыВыделение чистой культурыВыделение чистой культуры из отдельной колонииА — шпатель Дригальского; БВыделение чистой культуры из одной клеткиКапельный метод ЛинднераВыделение отдельных клеток с помощью микроманипулятораОпределение чистоты выделенной культурыКлонирование методом лимитирующих разведений.Клонирование в полужидком агар-агаре.Клонирование с помощью проточного цитофлуориметра.Замораживание и оттаивание гибридомных клетокМетоды выявления антител, синтезируемых гибридомными клеткамиПервый этап скринированияИммуноферментный метод.Радиоиммунологический метод
