Темы диссертаций по экономике » Математические и инструментальные методы экономики

СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДА ЗАМОРАЖИВАНИЯ СПЕРМЫ БЫКОВ В СОЛОМИНКАХ НА ОСНОВЕ ИССЛЕДОВАНИЯ РЕЖИМОВ ОХЛАЖДЕНИЯ тема диссертации по экономике, полный текст автореферата

Автореферат

Ученая степень	кандидат биологических наук
Автор	Малиновская, Вера Александровна
Место защиты	Дубровицы
Год	1987
Шифр ВАК РФ	08.00.13

Автореферат диссертации по теме "СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДА ЗАМОРАЖИВАНИЯ СПЕРМЫ БЫКОВ В СОЛОМИНКАХ НА ОСНОВЕ ИССЛЕДОВАНИЯ РЕЖИМОВ ОХЛАЖДЕНИЯ"

ft- 2&Ш

ВСЕСОЮЗНЫЙ ОРДЕНА ТГУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЖИВОТНОВОДСТВА (ВИЖ)

На оравах рукописи МАЛИНОВСКАЯ Вера Александровна

УДК 636.082.453.6

СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДА ЗАМОРАЖИВАНИЯ СПЕРМЫ БЫКОВ В СОЛОМИНКАХ НА ОСНОВЕ ИССЛЕДОВАНИЯ РЕЖИМОВ ОХДАВДВНИЯ

0S.00.I3 - физиология человека в животных (физиология сельскохозяйственных животных)

АВТОРЕФЕРАТ диссертация на соискание ученое степени кандидата биологических наук

Дубровины Московское области 1987 г.

Работа выпонена в отделе биолога восярожэведення и искусственного осеменения животных Всероссийского научно-ио-следовательского института плененного дела.

Научный руководитель: доктор биологических наук,

профессор Е.М.Платов

Официальные оппоненты: доктор биологических наук В.П.Кононов кандидат биологичесюгх наук И.Х.1абибудлин

Ведущее учреждение: Литовский научно-исследовательский институт животноводства и ветеринарии.

Защита диссертации состоятоя а.^ 19в& г.

на заседании спедиашгавровааного Совета Д 020.16.02 при Всесоюзном ордена Трудового фасного Знамени научно-иооледо-ватедьскоы институте животноводства.

Адрес: 142012, Дубровицы Подольского района Московской области.

Автореферат разослан

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Ученый секретарь спепракзированного Совета канд ид ат бнодо гяче ских наук

I. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуадщость теш. В настоящее время перед агропромышленным комплексом налей страны стоит задача интенсификации сельского хозяйства, решение которой в практике разведения при искусственном осеменении животных связано с наиболее эффективным использованием высокоценных производителей.

Одним из важных резервов повышения интенсивности использования производителей является улучшение качества замороженной и оттаянной спермы, а также снижение числа биологически поноценных сперматозоидов в дозе дня осеменения. Достичь этого можно путем совершенствования технологических приемов замораживания спермы. -

Обеспечить высокую выживаемость сперматозоидов при замораживании споообна модификация режима охлаждения сперш. Оптимальный режим снижает неблагоприятное действие физико-химических изменений, происходящих при замерзании. Поэтому изучение различных условий замораживания и их влияния на физиологическую устойчивость сперматозоидов после замораживания и оттаивания имеет как научное, так и практическое значение.

1.2. и?ль и ??.пачи исследований. Целью работы было повышение биологической поноценности оттаянных сперматозоидов для более-эффективного использования выдающихся бнков-производителей в современной селекции при искусственном осеменении коров замороженной спелой.

При выпонения работы были поставлены следующие задачи;

I. Изучить основные параметры, характеризующие теплофизичес-кие процессы в сперме в период кристализации, при охлаждении объекта с различными скороотями.

. I чльнщ П.

5 С"/1 .! Ч V. I -,

2. Изучить влияние защитных компонентов среды на основные параметры тешюфиэическях процессов в сперме при охлаждении с различными скоростями*

3. Изучить влияние скорости охлаждения в разных температурных зонах замораживания на физиологиче скую устойчивость сперматозоидов после оттаивания.

4. Установить влияние гинерконцентрации веществ, возникающей во время замораживания, на качество спермы после оттаивания.

5 Разработать оптимальный режим охлаждения сперма и испытать его по оплодотворяоде И способности сперматозоидов в практических условиях.

1.3. Натчная новизна. Впервые изучено влияние различных скоростей охлаждения спермы в соломинках на термические процессы, сопровождающие кристалообразование. Впервые при изучении защитного действия хфиощютекторов (глицерина и жетка) установлено, что жеток в отличие от глицерина, при оптишльной скорости охлаждения в соломинке не влияет на температуру переохлаждения и кристализации объекта. Установлено влияние скорости охлаждения спермы в различных температурных зонах на физиологическую устойчивость сперматозоидов после оттаивания, что послужило научным обоснованием оптимального режима замораживания спермы в соломинках.

1.4. Практическая значимость работы состоит прежде всего в том, что на основе изучения процессов охлаждения в сперме оптимизирован режим замораживания, дано теоретическое объяснение теплофизических процессов в различных температурных интервалах охлаждения спермы.

Применение разработанного режима замораживания спермы по-

зволит более интенсивно использовать в селекционной практике ценных быков-производителей за счет повышения качества и снижения брака оттаянной спермы, а также тменыпения количества подвижных сперматозоидов в дозе до 10 или* без изменения результативности искусственного осеменения коров н толок.

На зашипг стшпля^ея реэтльтатн иссддов^ниЦ. показывающие, что физиологическая устойчивость сперматозоидов зависит от режима замораживания, защитное действие которого обусловлено оптимальными скоростями охлаждения, имещими строго определенное значение в различных температурных интервалах.

1.5. Дттпп^иштд -работы. По материалам исследований опубликованы 3 печатных работы и оформлено рационализаторское предложение.

Материалы диссертации доложены одобрена и отмечены призом на ИХУП, Ш>Ш научно-производственных конференциях аспирантов и молодых ученых ШХа (май 1984, 1985 гг.), на совещании эоовет-специалистов Центральной станции искусственного осеменения животных и ВШО по племделу в животноводстве (ишь 1967 г.).

Материалы диссертации экспонировались на выставках "Научно-технический прогресс в племенном деле" на Всесоюзной совещании работников сельского хозяйства (племзавод-кохоз "Ленинский луч", июль 1985 г.), на совещании партийных, советских и хозяйственных работников Нечерноземных областей (г.Ко строка, июль 1965 г.), на Всесоюзной координационной совещании по совершенствованию хомогорской породы скота (ВДНХ СССР, октябрь 1985 г.).

1.6. Объем работы. Диссертация изложена на 153 страницах машинописного текста и состоит еэ введения, обзора литературы, методики и результатов исследований, выводов, практических пред-

ложений "в списка литературы, которой включает 230 работ, в том числе 123 - иностранных авторов. Диссертация илюстрирована 12 таблицами, I фотографией, и 17 рисунками.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования проведены в отделе биологии воспроизведения и искусственного осеменения животных ЕШИплем, а также на Центральной станции искусственного осеменения животных БНПО Агропро-ма СССР и в кохозе "Заветы Ильича" Домодедовского района Московской области*

Для опытов использовали сперму гоштинсНЕриэ ских быков. Содержание и кормление животных соответствовало "Инструкции со организации л технологии работы станций и племпредцриятий по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных" МСХ СССР, 1981 г* Было заморожено и оценено 100 аякулятов свежевзятой спермы.

В научно-производственных опытах было осеменено 500 телок черно-пестрой породи спермой быков, закрепленных по селекционному плану за кохозом "Заветы Ильича".

Для создания опытных режимов охлаждения спермы было сконструировано устройство для замораживания спермы быков в соломинках, признанное рационализаторским (удостоверение Л 3 от 26 марта 1985 года).

Изучение теплофизичесгак процессов, сопровождающих кристализацию води при замораживании спермы в соломинко, а также изучение влияния скоростей охлаждения и компонентов защитной среда на эти процессы проводили методом термического анализа. Б опытах использовали модельные раствора, в состав которых входила саха-

роза (126) о 0;б или-12 ойьешшыи11роцевтами(гшюрина и 0;20 или 40 объемными процентами жетка в различных коиЗинадиях..

Измерение температуры объекта; а также;запись термограмм: охлаждения проводили > о: помощь хромель-копелевой: термопары. и; электронного потенциометра КСД-4 о записываниям устройством. Во всех модельных, опытах проводили 9-15 измерении*

На рно.1 представлена' характерная термограмла охлаждения водного раствора. }

На термогра!лах; определяли значения температуры переохлаж-

(Т2),. глубину; переохлаждения, ( а Т) л время формирования г кристалической решетки (I )..

В опытах; по изучению влияния скорости охлаждения - на физиологическую устойчивость сперматозоидов сперму, замораживали Х по методу разделенного зякулята.. Для разбавления применяли сахаро-зо-жеточно-глицериновую и лактозо-жеточно-комплексонатво-би-карбонатную - (ХКВ) - среды.

Модельные. растворы или разбавленную средой Х сперму расфасовывали ' в полипропиленовые - соломинки.. Модельные раствори охлаждали ХХ в устройстве ^ с валянными; скоростями' снижения температуры. Сперму

---Бремя, мим.

Рис..X..Схематическое изображение кривой охлаждения^ водных растворов _

дения (Т^),. температуру формирования;кристалическоДрешетки>

охлаждали в 2 этапа: сначала замедленно в устройстве, затем в газовой среде над жидким азотом но Литовской технологии. Контролем во всех опытах служили образцы спермы, замороженные без первоначального замедления. Сперму оттаивали в водяной бане при температуре ЗЭ

Качественную оценку оттаянной спермы в разных опытах в зависимости от поставленных задач, проводили по подвижности, абсолютному показателю живучести при 4

Сравнительную оценку подвижности в различных сериях опытов проводили по разнице значений подвижности опытных и контрольного вариантов, выраженную в процентах. Сравнительную оценку живучести проводили по относительному показателю живучести (В.К.Милованов, 1963).

Число сперматозоидов с поврежденной ащюсомой оценивали с по-дощью акроскопического метода (И.И.Соколовская и др., 1981).

Скорость.поступательного движения сперматозоидов определяли визуально под микроскопом, фиксируя время перемещения сперматозоидов в раздавленной капле тощиной 40 мкм с помощью электронного седувдомора-сумматора.

При изучении влияния гиперконцентрированных растворов на жизнеспособность сперматозоидов во время замедленного замораживания сперму охлаадади с временными задержкамив течение 0,10,20,30 и 40 минут при -5

Оплодотворяющую способность сперш, замороженной в оптимальном режиме, проверяли в производственных условиях при осеменении телок.

Сперму охлаждали в оптимальном разработанном режиме:

от О до -5

В I опыте осеменили 60 телок спермой, замороженной с сахарозо--жеточно-глидериновой средой, во 2 опыте - 168 и при производственном испытании - 273 теки спермой, замороженной с ХКБ средой.

Оценку оплодотворяющей способности спермы проводили по фактической стельности, которую устанавливали при ректальном исследовании животных через 2-2,5 месяца после осеменения.

Все цифровые показатели материалов, полученных в опытах,обрабатывали по Н.А.Плохинскому (1961) и Б.А.Доспехову (1985).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Изучение параметров, характеризующих теплофизи-ческие процессы в сперме при замораживании

При глубоком охлаждении спермы важное значение имеет начальная стадия процесса замерзания, в которой происходит фазовый переход воды в лед. Одним из факторов, определяющих характер этих изменений, является скорость охлаждения спермы. Анализ термограмм охлаждения модельного раствора показал, что охлаждение спермы в соломинке проходит с выраженным пиком переохлаждения* Результаты проведенного анализа представлены в табл.1.'

Нз табл.! видно, что при изменении скорости охлаждения от 2,0 до 4,0 град/мин. параметры Тр Т2 и Ь достоверно снижались (Р<0,01...0,05). Повышение скорости охлаждения до 6,0-9,0 град/

дота, ш влияло на изученные теплофизяческие параметры. При этом изменение Т^ значительно коррелировало с Т2 (г =0,79 при уровне значимости Р< 0,01. Уравнение регрессии у = 0,05+0,53Х). Величина л Т изменялась не значительно при увеличении скорости охлаждения, что было обусловлено аналогичными по характеру изменениями параметров Т^ и Т2.

Таблица I

Параметры термограш охлаждении модельного раствора в зависимости от скорости снижения температуры в начальных стадиях замораживания

Скорость охлаждения град/мин., в интервале температур

Параметры тешогвамм

температура 1 температура I время форыи-

р-5. ! -I дения, ! I кристшшпес-1 таличе ской I кой решетки, (решетки, -Ь, {

1,0 1,0 -7,2
р,55 Су - 29,9!! -3,7^0,54 С V =56, СУ =32,7?

2,0 2,5 -6,3
0,4Э Су =3 9,2^ -3,2^,35 =42,2* 1,8*р,1 Су *4Щ,1$

2,5 6,0 -6,8^0,57 Су =32,51 -3,5+0,29 СУ =30,б 1,6
Р,И

4,0 5,0 -6,4
0,36 Су=19,4 -4,7*р,23 Су-22,7* о,енр,о! Су=Й6^

6,0 9,0 -8,540,46 Су -4,710,076 СУ =5,355 0,0*0,05 Су-2,5Я

Степень взаимосвязи между Т^ и Л. определялась коэффициент-том корреляции Г л0,29 (Р< 0,01; уравнение рехрессии у=1 ,94+0,081); коэффициент корреляции между Т2 и "Ь равняся 0,36 (Р<0,01; уравнение регрессии у =1,81чОД2Х). Низкая взаимосвязь мевду температурными и временным параметрами термограш.

указывает на то что время, i , которое характеризует-продожиЧ тельность фазового перехода Х воды в лед, определяется такими факторами; как скорость охлаждения образца; теплоемкость и теплопроводность :разбавителя,- что согласуется о данными, приведенными Н.С.Пушкарем и др.(1977), полученными при замораживании. клеток другого типа.,

3.2. Влияние криопротекторов на теплофиэические параметры .термограш при различных скоростях охлаждения спермы

В модельных опытах изучала влияние глицерина и жетка на теплофизические параметры. термограмм Х охлаждения. Медленное и быстрое охлаждения, осуществляли со скоростями1 и 5 град/мин. соответственно..

Из табл.2 видно, что при замораживании сахарозного раствора без криопротектора:скорость:охлаждения оказывала:заметное -влияние^на все исследуемые параметры - с высокой, степенью достоверности ; (Р< 0,001).. При - введении В' раствор глицерина - влияние -скорости охлаждения снизилось. Разнили между,значениями^ при: медленном и быстром охлаждении сахарозного раствора с 6 объемными процентами глицерина не обнаружили.Цри.введении в раствор 12^ глицерина-снижение-значенийТ2 и *Ь было достоверным.

Из проведенного анализа следует,. что глицерин в растворе -способствовал переохлаждению, снижал температуру и: цремя формирования кристалической"решетки, что согласуется о данными других авторов (О.Смит, 1963;:Н.С.Пушкарь,и др.,1Э77;;В.И.Вишневский: и др., 1971-1981). Крометого глицерин.снижал влияние скорости охлаждения па изучавшиеся параметры терыограмм.

Анализ данных-таблицы З покаэал. что жеток оказывал дейстЧ

Таблица 2

Влияние глицерина на параметры термограмм охлаждения модальных растворов (п. =у-1П

Значения

глицерина в 12>-н0м растворе сахарозы, 1 раствора 1 от 0 до | -Ю

о медленное -2,3*0,30 -i.EaP.io 2,0+0,20

быстрое -5,0ip,50 -2.4
0,08 0,7
р,04

6 медленное быстрое -9,5*0,10 -9,5j0,30 -б,9
0,05 -6,0^0,60 1,3+0,10 0,6*0,07

12 медленное -I0,6i0(31 -8,3lP,30 I,IiQ,I2

быстрое -12,1+0,26 -9,4+0,28 0,5
0,05

Таблица 3

Влияние жетка на параметры термограмм охлаждения модэлышх растворов (а >11)

Количество; Охлаждение жетка в раствораиот 12%-ном 0 до -10

Зн^рнря изучаэ?ш; параметров

температура 1 температура ! время форми-пересхлаще-1 формирования ! рования ния, Тт 1 яристаличес-! кристали-Oq * ! кой pemgTKH, 1 ческой ре-1 То> С Г тетки, t минл I А_!

медленное быстрое

-2,3
0,30 -5,0j0,50

-2.4J0.08

2,0
0,20 0,7iP,04

медленное быстрое

-5,3
0,50 -6, Су}, 51

-3,1*0,03 -3,4^0,13

2,IiP.32 0,9*0,11

медленное быстрое

-6,CWD,30 ~5,6
0,50

-2,9
0,03 -2,9*0,04

1,740,15 0,4ji)t05

вие, аналогичное глицерину, только при медленном охлаждении и-не - влиял на изученные.параметры при увеличении - скорости падения температуры. Как видно из таблицы* введение -в модельный раствор жетка (20 об.;0 вызывало,достоверное (Р<0,001) снижение;значений Т^ и Т2 при медленном охлаждении.

Проведенные исследования показали, что определяющая роль в изменении условий - кристалообразования при охлаждении- спермы, принадлежала глицерину. Жеток оказывает свое защитное действие' при температурах выше 0

3.3. Физиологическая устойчивость сперштозоидов быка при различных режимах охлаждения спермы в соломинках

Влияние скорости охлаждения на сохранность сперматозоидов является одним из важных вопросов в изучении механизмов криозаЧ щиты при замораживании спермы..

В исследованиях по изучению влияния скорости охлаждения мы руководствовались гипотезой основанной на анализе работ ряда авторов; (Е.М.Платов, Т.М.Лаятева,. 1973-75 гг., ВС.Мшюванов с соавт.,1974 г., В.И.Вишневский-с соавт., 1973-60 гг., П.Мазур с соавт., 1963-80 гг..и др*>, которая отражает оптимальные условия охлаждения.спермы.

Согласно этой гипотезе, в начальный период (от 0 до-Ю

Нами было, исследовано 16 вариантов режимов с замедленными скоростями охлаздения в начальных стадиях. На рис.2 представлены те варианты медленных режимов | в которых образца спермы имели

к ЮЙ95 64 9 % *

Рис.2. Кривые охлавдения спермы при замораживании в медленных режимах

Рис.3. Оптимальные режимы охлаждения спермы

качественные показатели (подвижность и живучесть) ниже контрольного значениял Цифры на кривых показывают значения относительного показатели живучести оттаянной спермы в условных единицах, соответствующие тому или иному варианту.

В результате анализа качественных показателей спермы было установлено, что замедление скорости охлаждения до 0,5-6,0 град/ мин. в зоне температур 0...-Ю

На рис.3 представлены етшвальные режимы замораживания спермы в соломинках. Охлаждение спермы от О до -5

В оптимальных вариантах подвижность и выживаемость спермы были на 10 и 20% соответственно выше контрольных значений.

Аналогичную зависимость установили и при оценке целостности акросомы и средней скорости поступательного движения сперматозоидов (рис.З и 4).

Для характеристики режимов охлаждения от 0 до -50

||зо-з 3 го

0.09 0,10 ((1а

иб 234 407 Параметр пориболы, мииугройС

Рис._Влияние;скорости.охлаждения,спермы - на устойчивость акросомы сперматозоидов при ; замораживании

0,06- 0,10 412

г.34 4,07

Параметр параболы, мни^гроОС Рис.5.Влияние скорости охлаждения спермы на

среднюю скорость постутательного движения-сперматозоидов после оттаивания

дали в установленных оптимальных вариантах режимов, параметр параболы которых соответствовал 0,06-0,1 мин.^/град.С. Влияние режима на устойчивость акросомы характеризовалось коэффициентом корреляции С =0,77, а на скорость движения сперштозоидов -Г = -0,52.

При замораживании спермы в безглицериновой среде лучшее качество оттаянная сперма имела также в оптимальных вариантах*

Методом дисперсионного анализа было показано, что в оптимальном диапазоне режимов охлаждения наблюдавшаяся вариабельность качественных показателей оттаянных сперматозоидов не зависела от скорости охлаждения и была обусловлена другими факторами* Применение оптимальных скоростей охлаждения позволяет обеспечить высокую выживаемость сперматозоидов после замораживания и оттаивания.

3*4. Влияние гиперконцентращга веществ, возникающей во время замораживания, на физиологическую устойчивость сперматозоидов после оттаивания

В результате изучения влияния замедленного охлаждения на качество спермы мы установили оптимальную температурную границу применения замедленной скорости охлаждения. На диаграмме (рис.6) представлены результаты опытов, в которых регистрировали конечную температуру, до которой охлаждали сперму с заданной медленной скоростью.

Анализ данных позволил установить 2 выраженные тенденции. Во-первых, увеличение скорости охлаждения от 0,5 до 8 град/мин. в указанных температурных интервалах приводило к достоверному повышению живучести оттаянных сперматозоидов с 0,91 до 1,12 усл.ед. Во-вторых, увеличение температурной зоны медленного охлаждения до -30

сперматозоидов'до 0,75 усл.ед. Оптимальная граница применения: медленного охлаждения соответствовала.-15

Рис.6-Влияние скорости.охлаждения.и.температуры, до которой охлаждалась сперма^с заданной;скоростью от О С, на: выживаемость сперматозоидов при инкубации:

Нами было предположено, что одной из основных причин снижения . подвижности и живучести > сперматозоидов при > медленном охлаждении.является губительное действиеХгипертонии растворов, возникающей: в результатл образования льда. Проявляется .так .называемый "эффект растворов";,. который " приводит к: обезвоживанию клеток под

действием осмотического градиента между клетками и окружающим раствором с гиперт оничной концентрацн ей.

На рисл 7 и 8 представлены результаты анализа качественных показателей спермы, замороженной с временными задержками при -5

Как видно из графиков, подвижность и живучесть сперматозоидов, .замороженных в среде с 14 объемными процентами глицерина,изменялась незначительно при увеличении времени выдержки при -5

Теоретические расчеты, сделанные с применением метода построения диаграммы фазового равновесия (Н.С.Пушкарь и др.,1977) показали, что при содержании в среде 7 объемных процентов глицерина При -5

ЧЧЧ мочальная концентрация глицерина с среде - 7% мочальная комцектроция глицерина о среое- 4%

30 40 Ьремя,мин.

Ряс.7. Влияние времени экспозиции при -5

подвижность сперматозоидов после оттаивания-

зл0,6 -I

ЧЧ начальная концентрация

глицерина в средеЧ' начальная концентрация глицерина а срейе-14%

30 40 Время, пин.

Рио.8. Влияние времени экспозиции при -5

живучесть сперматозоидов после оттаивания

3.5. Влияние оптимальной скорости охлаждения в начальных стадиях замораживания ва оплодотворяющую способность сперматозоидов после оттаивания

Проверка оплодотворящей способности спермы, замороженной в соломинках во оптимальному режиму, была проведена в 2-х опытах с применением сахарозо-жеточно-глицериновой и ХКБ сред.

В I опыте для разбавления спермы применили сахарозо-жеточно--глицериновую среду. Всего осеменили 60 телок, из них 38 - спермой, замороженной в оптимальном режиме (опытная группа), и 22 - в режиме Литовской технологии (контрольная группа). Анализ результатов проведенного ошта показал, что эффективность осеменения телок опытной группы была на 83? выше..чем контрольной (63
7,8^ и 55
Ю,6^ соответственно). Однако полученная разница статистически недостоверна.

В таблице 4 представлены результаты 2-го опыта с применением ЖБ среды.

Таблица 4

Влияние оптимального режима замораживания сперты при различном содержании подвижных клеток в дозе на стельность телок

Режим замораживания 1 Число подвижных I сперматозоидов | в дозе, мн. 1 1 ! ! Г ) Осеменено телок I Из них |-> 1 число яиЧ ] вотных стали стельными *

Опытный Контрольный 5 30 24 19 14 63+6,2 58
10,1

Опытный Контрольный 10 30 29 22 18 73^,1 62
9,0

Опытный Контрольный 20 35 ' 20 25 15 71
7,7 75
9,7

Из-таблицы видно, что в опытней группах ври осеменении телок спермой, содержавшей в дозе 5иЮ мн. подвижных сперматозоидов, стельность составила 63 и 73S, что на;5 и 11%'соответственно выше, чем в контрольных титлах (разница статистические недостоверна), При осеменении телок спермой,. содержавшей в дозе 20мн* подвижных клеток,. стельность была почти на одном уровне.,

В таблице 5 представлены результаты производственного испытания эффективности замораживания; спермы в оптимальном режиме.

Таблица 5

Результаты научно-производственного опыта по осеменению, телок спермой, замороженной в оптимальном режиме1

Число подвижных Юсемене- t Из них стали г Режим замо- I сперматозоидов I но те- I стельными раживания }в дозе, мн.. J лок j ^сдо %

J [ I ВОТНЫХ [

Опытный: 10 165 118 72+3,5

Контрольный 20 100 82 76
1,1

Как видно из таблицы. 5, замораживание спермы в оптимальном разработанном режиме позволяет получить высокие результаты осеменения при снижении, содержания подвижных.клеток в дозе в 2 раза. Подученная между грушами разница по результатам осеменения статистически недостоверна.(id = 0,7),.

Оценка - эффективности применения, оптимального режима -замораживания по проценту брака оттаянной спермы (табл.6) позволила установить, что при замораживании спермы в оптимальных, вариантах режимов выбраковка оттаянных спермодоз снижается на IIJS.

Расчет ожидаемого экономического эффекта показал; что применение оптимального режима замораживания позволит снизить число

Таблица 6

Эффективность применения оптимальных режимов замораживания спермы по проценту брака оттаянных спермодоз после биологической оценки

Режим замораживания

Из них выбраковано:

число I %

Контрольный

28 13,1

Опытный {по 5 оптимальным вариантам)

подвижных сперматозоидов в дозе до 10 шт. без значительного сни-

жения результативности осеменения коров и телок, что приведет к уменьшению затрат на содержание одного быка, а следовательно, и к снижению себестоимости одной дозы замороженной спермы, в среднем, по РСФСР на 0,17 руб.

1. Замерзание спермы быка в соломинке подчиняется общей закономерности охлаждения биологических объектов. Термограмма охлаждения-спермы имеет вид типичной бахметьевской кривой с выраженным пиком переохлаждения. Значения температуры переохлаждения при замораживании образцов с одной и той же скоростью имеют высокую степень изменчивости (Су=19,4-32,5). При эамораживатга спермы в соломинках температура формирования кристалической решетки зависела от точки переохлаждения. Температура кристалообразования снижалась при снижении точки переохлаждения.

2. Криозащигное действие глицерина обусловлено его значительным влиянием ва термические процессы, проходящие при эамораживаЧ

нш спекли. Глицерин способ ствовал паре охлаждению спермы, снижал температуру и уменьшал время формирования кристалической решетки, стабилизировал начало процесса фазового перехода за счет снижения изменчивости переохлаждения Жеток, в отличие от глицерина, при оптимальной скорости охлаждения спермы в соломинке не влиял на температуру переохлаждения и формирования кристалической решетки.

3. Физиологическую устойчивость сперматозоидов повышает режим замораживания, защитное действие которого обусловлено оптимальными скоростями охлаждения в различных температурных интервалах: 0,..-5

-5,..-Ю

-Ю...-15

-15...-50

4. Основной причиной отрицательного влияния медленных скоростей охлаждения на физиологическую устойчивость оттаянных сперматозоидов является длительное воздействие на сперматозоиды гипер-тоничных концентраций, возникающих при замедлении скорости охлаждения до 0,5-1,0 град/мин. в интервале температур 0...-50

5. Применение оптимального режима замораживания позволяет на 10-20% повысить качественные показатели сперматозоидов после оттаивания и на Ш снизить шбраковку оттаянной спермы. Оптимальный режим замораживания спермы в соломинках дает возможность применять снижение концентрации сперматозоидов в дозе без уменьшения эффективности искусственного осеменения.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

I. Рекомендовать для племпредприятий, работающих по Литовской

технологии замораживания спермы быков, режим охлаждения с оптимальными скоростями снижения температуры в интервалах: от 0 до -5

Список работ по теме диссертации

1. Платов Е.М., Деряженцэв В.И., Малиновская В.А. Новое в технологии замораживания спермы быков // Повышение продуктивности крупного рогатого скота. - М.,1981.-С.138-146. (Сб.науч.-произв. стат. ВНИИплем).

2. Малиновская В.А. Оптимальные режимы замораживания спермы быков в соломинках //Совершенствование методов воспроизводства

и искусственного осеменения с.-х. животных. -М. ,1983.Ч С.100-108. (Сб.науч.-произв. стат. ВНИИплем).

3. Малиновская В.А. Влияние компонентов среды и режимов замораживания на кристализацию и физиологические показатели спермы быков //Биология воспроизведения и технология искусственного . осеменения с.-х* животных. -М., 1986. - С.37-45. (Сб.тр.ВНИИплем).

Moctimtu типография M 4 пСалои*

Похожие диссертации

• Управление рисками инвестиционной деятельности металургических предприятий
• Управление реорганизацией сельскохозяйственных предприятий
• Управление организацией овощного сегмента аграрного рынка
• Организация управленческого учета в свеклосахарном производстве
• Формирование учетно-экономической информации о затратах в экспериментальном производстве