Состояние процессов перекисного окисления липидов при остром панкреатите
Дипломная работа - Биология
Другие дипломы по предмету Биология
пределение активности каталазы
определение активности ГПО
определение активности ГР
определение активности ГSТ
определение активности Г6ФД
определение активности АХЭ
определение ЦП в плазме крови модифицированным методом Ревина
.Исследование компонентов неферментативной АОС:
определение содержания ГSH
метод раздельного определения АсК и дегидро-АсК в эритроцитах
.Исследование функционального состояния эритроцитарной мембраны:
определение осмотической резистентности эритроцитов
.- определение проницаемости эритроцитарных мембран
2. Собственные исследования
2.1 Материалы и методы исследования
Обследовали 15 человек обоего пола с установленным диагнозом ОП, проходивших лечение в ГКБ №2. Возраст пациентов составлял 23-57 лет. Помимо базисного лечения (антибактериальная, инфузионная, противовоспалительная терапия) они получали препарат Ронколейкин (рекомбинантный ИЛ-2) в дозировке 500 000 МЕ.
Препарат вводился внутривенно капельно в 400 мл 0,9% раствора NaCl с добавлением 4-5 мл 10% раствора альбумина двукратно по 25 000 МЕ с интервалом 2 суток между введениями.
У пациентов до и после лечения в сыворотке крови определяли уровень МДА (стандартным набором реактивов для определения ТБК-активных продуктов (ТБКАП) в сыворотке крови) фирмы Агат-Мед по методу Mihara M. (72, 73).
Принцип метода заключается в том, что в липидных системах в результате процессов ПОЛ образуется МДА, взаимодействие которого с ТБК приводит к образованию хромогена с максимумом поглощения в красной области видимого спектра при длине волны 535 нм (22).
Расчет МДА проводили по формуле:
поджелудочный железа панкреатит пищеварение
С =D535 - D570 16 ,0,156
где:
С- содержание ТБК-активных продуктов в опытной пробе, мкмоль/л;
D535- оптическая плотность опытной пробы при 537 нм;
D570- оптическая плотность опытной пробы при 570 нм;
0,156- коэффициент молярной экстинкции комплекса МДА-ТБК в л/мкмоль/см;
16- коэффициент разведения сыворотки.
Согласно этому методу, нормальные величины: 2,2-4,8 мкмоль/л или 0,022-0,047 ед. опт. плотности.
Статистическую обработку результатов проводили методами вариационного анализа и разностными методами: достоверность результатов определяли по критерию Стьюдента (31).
2.2 Результаты и обсуждение
Согласно полученным нами результатам уровень ТБКАП в сыворотке крови пациентов не превышал верхней границы нормы (рис. 7, табл. 3). У пациентов в начале лечения уровень ТБКАП составлял 1,99 0,62, после лечения 3,17 0,91 (рис. 8).
Таблица 3. Содержание ТБКАП в сыворотке крови пациентов с ОП (мкмоль/л).
До леченияПосле леченияРазностный методn = 5n = 5?x = 2,22x = 1,99x = 3,17?S = 1,61? = 1,39? = 0,91t = 1,38Sx = 0,62Sx = 0,91
После лечения препаратом ИЛ-2 статистически достоверных различий в уровне конечных продуктов ПОЛ обнаружено не было (p>0,05). Поэтому мы можем только предполагать наличие некоторой тенденции к увеличению уровня МДА у пациентов с ОП на фоне комплексной терапии в комплексе с Ронколейкином. Это позволяет предположить, что у пациентов принимающих Ронколейкин имеется достаточный резерв АОС, в то время как литературные данные (22) показывают, что у больных ОП имеется тенденция к увеличению ПОЛ и истощению ресурсов АОС и, как следствие, развитию ОС.
Таким образом, у обследуемых больных не наблюдали повышения уровня ТБКАП (конечных продуктов ПОЛ, в частности, МДА) в сыворотке крови как в начале, так и по окончании лечения.
Важно отметить, что рассасывание очага воспаления и регенерация некротизированных участков ткани ПЖ не сопровождается при данном комплексе терапевтических воздействий массивным выходом в кровь продуктов СРО, которые могут привести к активации ЦИК, повреждению эритроцитов, гиперактивации циркулирующих в крови лейкоцитов, повреждению эндотелия сосудов, окислению липопротеидов, нарушению микроциркуляции, вторичному повреждению других органов и формированию синдрома эндогенной интоксикации, которая является частым осложнением ОП (22).
Рисунок 7. Уровень ТБКАП пациентов с ОП, принимавших Ронколейкин (мкмоль/л).
Рисунок 8. Содержание ТБКАП у пациентов с ОП, принимавших Ронколейкин (рассчитанное с применением различных статистических методов).
Выводы
У пациентов, получавших комплексную терапию ИЛ-2, не было отмечено накопления в сыворотке ТБКАП, выходящего за пределы нормы для среднестатистической популяции.
.Ронколейкин может применяться как иммуномодулятор, регулирующий ПОЛ и поддерживающий АОС, однако необходимы дальнейшие исследования в области прменения ИЛ-2.
.Метод определения ТБКАП может использоваться для оценки состояния больных ОП, как один из основных показателей состояния АОС и процессов ПОЛ.
Литература
- Алферов В.А. Пути оптимизации диагностики и лечения острого панкреатита: автореф. дис. тАж к.м.н. - Челябинск, 1993. - 18с.
- Альперович Б.И., Казанцев Н.И., Мерзликин Н.В. Причины летальности при остром панкреатите и пути ее снижения. // Сов. медицина. - 1991. - №8. - С.61-63.
- Андреев А.А. Патогенетические факторы нарушения перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы и антиоксидантная терапия пострадавших с сочетанной травмой: автореф. дис. тАж к.м.н. - М., 1999. - 23с.
- Арчаков А.И., Мохосеев И.М. Модификация белков активным кислородом и их распад. // Биохимия. - 1989. - №2. - С.179-185.
- Атанов