Книги, научные публикации
Pages: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | ... | 13 | СПРАВОЧНИК Лабораторные методы исследования в клинике Под редакцией профессора В.В.Меньшикова МОСКВА ДМЕДИЦИНА" 1987 ББК 53.4 М51 УДК 61б-074/-078:061.6 В. В. МЕНЬШИКОВ, Л. Н. ДЕЛЕКТОРСКАЯ, Р. П. ...
-- [ Страница 3 ] --400Ч коэффициент пересчета ко Рабочий калибровочный раствор готовят личества стеркобилиногена на 100 г кала.
разведением основного раствора раствором ед Но р ма л ь н ые в е л и ч и н ы. В норме кого натра 0,5 г/л в 1000 раз. Стабилен при на 100 г кала выделяется 75Ч350 мг стеркобили комнатной температуре в течение недели. Рабо ногена. В норме каловые массы содержат бес чий раствор содержит 0,2 мг фенолсульфофта цветный стеркобилиноген и стеркобилин, прида леина в 100 мл и эквивалентен по окраске ющий испражнениям обычную коричневатую ок 0,346 мг/100 мл раствору стеркобилиногена раску. Оба этих вещества относятся к группе (уробилиногена). Точность приготовления мож уробилиноидов Ч производных билирубина. Об но контролировать измерением оптической плот разуются уробилиноиды в результате восстанов ности раствора на спектрофотометре: при длине ления билирубина при действии клеточных де волны 562 нм оптическая плотность должна гидрогеназ и ферментов бактерий. Неизменен быть 0,38.
ный билирубин является нормальной составной По д г о т о в к а обра з ца. Исследуют частью кала грудных детей.
кал в первые 2 ч после дефекации. Переносят Кл и н и ч е с к о е з на ч е ние. У взрослых 10 г кала в ступку. Отмеривают в цилиндре людей неизмененный билирубин в кале может 190 мл воды. Из отмеренного количества нали появиться при ускоренной перистальтике, в ре вают 20Ч30 мл в ступку и растирают кал, посте зультате чего билирубин не успевает восстано пенно добавляя остальную воду. Суспензию ос виться, и при подавлении жизнедеятельности тавляют до оседания. В коническую колбу вме бактерий кишечника приемом больших доз анти стимостью 500 мл наливают 100 мл 200 г/л рас биотиков и сульфаниламидов. Нарушение по твора сульфата железа и надосадочную жид ступления билирубина в кишечник при заболе кость из ступки. К оставшемуся в ступке калу ваниях печени или механическом препятствии доливают еще воды из цилиндра, растирают, оттоку желчи в результате закупорки или сдав опять дают отстояться и надосадочную жид ления общего желчного протока приводит к сни кость переносят в колбу. Процедуру повторяют жению или полному отсутствию стеркобилина до полного использования всей воды из цилин в кале, что отражается на окраске испражне дра. Затем в колбу приливают 100 мл 100 г/л ний. Полное отсутствие стеркобилина можно раствора едкого натра, встряхивают и ставят установить только при химическом исследова колбу в темное место на 3 ч. Содержимое колбы нии. Усиленное желчеотделение или повышен хорошо смешивают и фильтруют, а затем 5 мл ный распад эритроцитов приводят к увеличе фильтрата разводят водой до 50 мл.
нию стеркобилина в кале. Установить это можно, Ход опр е д е л е ния. В 10 мл разведен исследуя количество стеркобилина, выделенное ного фильтрата растворяют 100 мг аскорбиновой с каловыми массами за сутки.
кислоты и по 1,5 мл этой жидкости помещают в 2 пробирки (опытная и холостая пробы). АММИАК, АМИНОКИСЛОТЫ. Прин В пробирку с холостой пробой прибавляют цип. Формалин с солями аммония образует 4,5 мл свежеприготовленной смеси, состоящей гексаметилентетрамин;
освобождаемые кислые из одного объема реактива Эрлиха (1,5 мл) и радикалы солей аммония оттитровывают 0,1 п двух объемов (3 мл) насыщенного раствора раствором щелочи в присутствии фенолфтале ацетата натрия. В опытную сначала приливают ина.
1,5 мл реактива Эрлиха, а затем немедленно Ре а кт ивы. 1. 30 % раствор хлорида же добавляют 3 мл насыщенного раствора ацетата леза (РеСЬ). 2. 1Ч2 % спиртовой раствор фе натрия. нолфталеина. 3. Гидроксид кальция [Са(ОНЬ] Через 5 мин измеряют экстинкцию обеих в порошке. 4. 0,1 н. НС1. 5. Формалин, разведен проб против воды на ФЭК при длине волны ный 1:2 и нейтрализованный 0,1 н. раствором 500Ч590 нм (зеленый светофильтр) в кювете гидрокснда натрия (щелочи).
с длиной оптического пути 1 см или на спек- Ход ис с л е д о в а ния. Растирают 10 г трофотометре при длине волны 562 нм. Рабочий кала, постепенно добавляя 90 мл дистиллиро 6!) ванной воды. Затем переливают в колбу и при ты, но иногда для изучения клеточных элементов встряхивании добавляют 2 мл 30 % хлорида и дифференцирования простейших прибегают к железа. Спустя 10 мин вносят 25 капель раство- изучению фиксированных окрашенных препа ра фенолфталеина. В эту смесь приливают 10 мл ратов.
дистиллированной воды, в которой растворены Влажные препараты приготовляют в четырех 2 г гидроксида кальция, до появления красного вариантах. Первый из них, так называемый окрашивания смеси. Через 10 мин смесь филь- нативный препарат, представляет собой суспен труют и доводят до 100 мл дистиллированной зию кала. Для его изготовления на предметное водой. Смесь должна быть прозрачной;
мутность стекло наносят 1Ч2 капли воды или изотоничес появляется при излишке гидроксида кальция. кого раствора хлорида натрия и растирают в ней 25 мл фильтрата выливают в колбу и нейтрали- с помощью стеклянной палочки небольшой ко зуют 0,1 н. HCI до бледно-розовой окраски. мочек кала до получения равномерной суспен Затем добавляют 5 мл формалина, после чего зии. Этот препарат, покрытый покровным стек фильтрат обесцвечивается. Далее проводят тит- лом, рассматривают сначала под малым, а затем рование 0,1 н. раствором гидроксида натрия до под большим увеличением (8Х 10 и 40 X 10).
появления бледно-розовой окраски. Количество В нативном препарате дифференцируется боль щелочи, пошедшей на титрование, умножают шинство элементов кала: мышечные волокна, на 4, получая количество аммиака на 10 г кала. растительная клетчатка, нейтральный жир, жир Но р ма л ь н ые в е л ич ины. В нормаль- ные кислоты, мыла, лейкоциты, эритроциты, ки ных условиях количество аммиака в 10 г фе- шечный эпителий, слизь, яйца гельминтов, про кальных масс соответствует приблизительно стейшие, кристаллы.
4 мл 0,1 н. раствора гидрата натрия. Для второго препарата кал аналогично рас Кл и н и ч е с к о е з н а ч е н и е Количест- тирают на предметном стекле, но не с водой, во аммиака в кале отражает интенсивность а с раствором Люголя двойной крепости. В та гниения в толстом кишечнике. Практически пи- ких препаратах можно обнаружить крахмал, щевой белок расщепляется и всасывается в тон- йодофильную флору, а также дифференциро кой кишке, а гнилостному распаду подвергается вать цисты простейших.
чаще белок, выделяемый стенкой толстого ки- Третий препарат изготовляют в виде густой шечника. Следовательно, увеличение аммиака водной эмульсии, к которой прибавляют каплю в кале говорит о гиперсекреции и воспалитель- раствора Судана III. Эти препараты применя ной экссудации в толстых кишках, но так как ются для обнаружения жира и продуктов его распад белка до аммиака требует длительного расщепления.
времени, то при учащенной дефекации его коли- На четвертом препарате кал растирают с чество в испражнениях даже при колитах может каплей глицерина;
последний служит для про быть нормальным. светления яиц гельминтов и помогает их об наружить. Однако для обнаружения яиц гель РАСТВОРИМАЯ СЛИЗЬ. Принцип. Му минтов таких препаратов обычно недостаточно.
цин осаждается уксусной кислотой.
С этой целью прибегают либо к методам кон Ре а кт ив. 5% водный раствор ледяной центрации обследуемого материала, либо к про уксусной кислоты.
смотру ряда нативных препаратов.
Ход ис с л е д о в а ния. В пробирку к Ре а кт ив ы. 1. Раствор Люголя двойной 2,5 мл 10 % водной суспензии каловых масс крепости: йода 1 г, йодида калия 2 г, воды 50 мл.
приливают 7,5 мл 5 % уксусной кислоты. Появ Растворяют йод и йодид калия в небольшом ко ление через 20 мин хлопьев и просветления личестве воды, а потом прибавляют остальную жидкости говорит о присутствии нерастворимой воду. 2. Раствор Судана III (реактив Састгоф слизи.
фа): спирта 10 мл, ледяной уксусной кислоты Кл и н и ч е с к о е з на ч е ние. Раствори 90 мл, судака III до получения ярко-красной мая слизь в кале свидетельствует о раздражении окраски. 3. Реактив Гехта: смешивают перед или воспалении верхних отделов толстого ки употреблением равные объемы 1 % нейтральной шечника.
красной и 0,2 % бриллиантового зеленого.
4. 0,5 % раствор метиленового синего.
2.2.4. Микроскопия Детрит составляет основной фон при микро скопии нормального кала. Он представляет со Микроскопическое исследование дает воз- бой массу мелких частичек различной величины можность определить мельчайшие остатки пи- н формы, состоящую из продуктов распада кле щи, по которым можно судить о степени ее пере- ток, остатков пищевых веществ и бактерий. Эти варивания. При микроскопии выявляются отде- частички не поддаются распознаванию. Чем пол ляющиеся в просвет кишечника клеточные эле- нее происходит переваривание пищи, тем больше менты: лейкоциты, эритроциты, макрофаги, ки- в кале детрита и тем меньше в нем дифферен шечный эпителий, опухолевые клетки, а также цируемых элементов.
небольшие комочки слизи;
наконец, при микро- Мышечные и соединительные волокна Ч скопии обнаруживаются яйца гельминтов и па- единственные остатки белковой пищи, распозна разитирующие в кишечнике простейшие. ваемые при микроскопии.
Пр и г о т о в л е ни е пр е па р а т о в. Мышечные волокна, вернее их обрывки, име Для полного микроскопического исследования ют различный вид в зависимости от степени воз кала приготовляют ряд препаратов. В боль- действия на них протеолитических ферментов, шинстве случаев используют влажные препара- Не подвергшиеся перевариванию мышечные во локна имеют цилиндрическую форму и различ- микроскопии благодаря резкому преломлению ную длину;
края их как бы обрублены под пря- ими света. Рыхлая соединительная ткань, не мым углом. Они довольно ярко окрашены в зо- обладающая такими оптическими свойствами лотисто-желтый или коричневый цвет;
только н имеющая вид бесформенных комочков с не в ахолическом кале они лишены окраски желч- четкими, разволокненными краями, может иметь ным пигментом и выглядят серыми. Наиболее сходство с комочками слизи.
характерной отличительной особенностью непе- Чтобы отличить рыхлую соединительную реваренных остатков мышечных волокон явля- ткань от слизи, к препарату прибавляют каплю ется поперечная исчерченность. По мере перева- уксусной кислоты. Соединительная ткань при ривания мышечных волокон поперечная исчер- этом набухает и теряет свою волокнистую струк ченность сменяется продольной, которая также туру. После такой обработки волокнистая струк затем исчезает и мышечное волокно становится тура слизи выступает более' отчетливо. Кроме бесструктурным. Одновременно с изменением того, в отличие от слизи соединительноткан внутренней структуры меняются и очертания ные волокна обладают двойным лучепреломле волокон: они укорачиваются, углы на концах нием. Обнаружить эту особенность соединитель закругляются, они как бы обтачиваются с по- ной ткани можно с помощью поляризационного верхности.
микроскопа или поляризационной насадки к Мелкие обрывки мышечных волокон, поте- простому микроскопу. Следует иметь в виду, рявших исчерченность и приобретших непра- что в кале может встретиться еще ряд двояко вильную форму, с достоверностью определить преломляющих веществ: сырой крахмал, жир при простой микроскопии не представляется ные кислоты, кристаллы оксалатов кальция и возможным. Для выявления белкового харак- трипельфосфатов, растительные волокна.
тера таких неоформленных глыбок или частиц Кл инич е с ко е значение. Наличие можно использовать простые химические про- непереваренной соединительной ткани в кале бы Ч биуретовую и ксантопротеиновую. При указывает на недостаточность функции желуд первой комочек кала размешивают на предмет- ка. К неперевариваемой соединительной ткани ном стекле с 10 % раствором едкого кали и при- причисляют остатки костей, хрящей и сухожи бавляют 1Ч2 капли 1 % раствора медного купо- лий;
эти находки не патологические.
роса. Частички белка приобретают лиловое ок- Растительная клетчатка и крахмал являются рашивание. Для проведения ксантопротеиновой остатками углеводной пищи, распознаваемыми пробы кал смешивают с крепкой азотной кис- при микроскопическом исследовании. Для обна лотой и подогревают. Белковые частицы окра- ружения растительной клетчатки используют шиваются в желтый цвет. нативный препарат, причем в. большинстве При исследовании кала здорового человека, случаев оказывается достаточным просмотр пре принявшего с пищей 150 г мяса за день, можно парата под малым увеличением (80Ч100 раз).
обнаружить в поле зрения препарата при малом Различают перевариваемую и непереваривае увеличении микроскопа 1Ч2 обрывка изменен- мую растительную клетчатку. Перевариваемая ных мышечных волокон. Среди них встречаются клетчатка состоит из клеток, имеющих тонкую, единичные волокна, сохранившие поперечную легко разрушающуюся оболочку. Через эту исчерченность. При обильном потреблении мяса оболочку даже при сохранении ее целости могут количество бесструктурных мышечных волокон проникать пищеварительные ферменты, рас может быть несколько больше. щепляющие содержимое клеток. Клетки непере Кл и н и ч е с к о е з на ч е ние. Появление вариваемой клетчатки отличаются толстыми большого количества мышечных волокон, осо- двухконтурными оболочками, а кусочки расти бенно сохранивших поперечную исчерченность, тельной ткани Ч толстыми межклеточными свидетельствует о недостаточности желудочного перегородками.
или панкреатического переваривания. Основным Пищеварительные органы человека не выра ферментом, переваривающим мышечные во- батывают ферментов, способных расщепить локна, является трипсин панкреатического сока. оболочки растительных клеток. Некоторые мик Следовательно, обилие мышечных волокон в робы толстого кишечника (клостридии, В. cellu кале (креаторея) служит в большинстве случаев losae dissolvens, В, mesentericus vulgatus) обла признаком недостаточности поджелудочной дают такими ферментами и потому расщепляют железы. Но покрывающая мышечные волокна клетчатку. При нормальном темпе продвижения и склеивающая их между собой сарколемма пищи по желудочно-кишечному тракту микробы растворяется преимущественно желудочным переваривают примерно /4 всей клетчатки, если соком. Поэтому при желудочной ахилии в ки- она принята не в избыточном количестве. Чем шечник попадает часть мышечных волокон, больше каловые массы находятся в толстом покрытых слоем сарколеммы, которая плохо кишечнике, тем больше сказывается воздействие поддается действию трипсина, поэтому мышеч- микробов на клетчатку, тем меньше ее остается.
ные волокна остаются неизмененными. В таких При запорах кал содержит значительно меньше случаях при микроскопическом исследовании клетчатки, чем при нормальном стуле и поно обнаруживаются группы поперечнополосатых сах.
мышечных волокон (по 2Ч3 и более в препара- Растительные клетки соединены между собой те), тесно прилегающих друг к другу. слоем пектина, для растворения которого не Соединительная ткань. Соединительноткан- обходимы сначала кислая реакция желудочного ные волокна Ч преимущественно эластическая сока, а затем слабощелочная Ч двенадцати ткань связок и сосудов Ч обнаруживаются при перстной кишки. При отсутствии НС1 в же 7!
лудочиом соке клетки перевариваемой клетчатки жении пищевого химуса. Поражения поджелу (например, картофеля, моркови) не разъеди- дочной железы, значительно отражающиеся нa няются и в кале обнаруживаются их группы. переваривании жиров и белков, относительно В нормально оформленном кале перевариваемая мало сказываются на усвоении крахмала, если клетчатка, как правило, отсутствует. они не сопровождаются поносами. Недостаток Для каждого растения характерны особый амилазы компенсируется амилолитическими вид клеток, их величина, форма, окраска. Круп- ферментами других отделов пищеварительного ные овальные клетки картофеля относятся к тракта и бактерий.
перевариваемой клетчатке. Они выделяются в Остатки жировой пищи Ч нейтральный жир нативном препарате в виде бесцветных овалов и продукты его расщепления Ч распознаются на желтом или коричневатом фоне детрита. Рас- микроскопически в нативных и окрашенных полагаются они либо поодиночке, либо неболь- препаратах. Наиболее часто употребляется шими группами по 2Ч3Ч4 клетки. Неопытный окраска Суданом III. Поступивший с пищей микроскопист может, рассматривая такие груп- нейтральный жир, если он принят в умеренном пы под малым увеличением, спутать их с ко- количестве (не более 100Ч-150 г), усваивается мочками слизи. Отличие их от слизи состоит почти полностью Ч на 90Ч98 %. Степень усвое в том, что очертания картофельных клеток ния жира зависит и от его качества: чем четкие округлые, в то время как очертания ниже точка плавления жира, тем полнее он комочков слизи расплывчаты и форма их неопре- усваивается.
деленна. Препаровальными иглами переваримая Нейтральный жир обнаруживается в натив клетчатка расщепляется легко, слизь растяги- ном препарате в виде бесцветных, резко пре вается. Наиболее убедительно дифференцирова- ломляющих свет капель. Чаще всего последние ние их в препарате, окрашенном раствором имеют округлую форму, но могут, сливаясь друг Люголя. До просмотра препарат должен по- с другом, образовывать небольшие лужицы стоять с раствором 5Ч10 мин;
за это время неправильной формы с округлыми, гладкими йод проникает внутрь клеток и окрашивает очертаниями. Тугоплавкие жиры имеют вид глы зерна крахмала в зависимости от стадии их бок неправильной формы, легко меняющих свои переваривания в синий, фиолетовый или розо- очертания при надавливании на покровное вый цвет. стекло. Поскольку мелкие капли нейтрального Исследование на присутствие крахмала про- жира могут остаться незамеченными, а круп изводят в препарате, обработанном раствором ные капли можно спутать с пузырьками Люголя. Неокрашенные крахмальные зерна воздуха, то значительно легче отличать нейт распознать в кале обычно не удается, так как ральный жир с помощью окраски Суданом III.
их форма и характерная эксцентрическая слои- Нейтральный жир при этом окрашивается в стость обычно не сохраняются. Под влиянием оранжево-красный цвет.
йода крахмальные зерна в зависимости от ста- Жирные кислоты встречаются в виде капель дии их переваривания окрашиваются по-разно- (легкоплавкие жирные кислоты), кристаллов, му: неизмененный крахмал приобретает сине- реже глыбок (тугоплавкие жирные кислоты).
черный цвет, продукты постепенного его рас- Кристаллы жирных кислот имеют форму тонких тепления Ч амилодекстрин Ч фиолетовый, игол, заостренных с обоих концов;
часто они эритродекстрин Ч красно-бурый цвет;
даль- группируются по 2Ч3Ч4 вместе, образуя не нейшие стадии расщепления, начиная с ахро- большие пучки. Иногда такие нглы, распола декстрина, уже не окрашиваются йодом. Зерна гаясь радиально, как бы венчиком окружают крахмала могут располагаться как свободно, капли жира или жирных кислот. После нагре чаще в виде обломков, так и внутри расти- вания нативного препарата и последующего тельных клеток, находясь там в разных стадиях его остывания капли нейтрального жира не переваривания. Обилие крахмала в кале и пере- изменяются. Капли жирных кислот, а также вариваемой клетчатки сопровождается обычно глыбки, превратившиеся при нагревании в кап богатой йодофильной флорой. Принадлежащие ли, по мере остывания меняют свой вид, стано к ней микробы, питаясь за счет расщепляемых вятся неровными, бугристыми и частично пре ими углеводов, откладывают внутри себя грану- вращаются в характерные игольчатые кристал лы, окрашивающиеся йодом. Вызываемое этой лы. Однако этот процесс у легкоплавких жирных флорой брожение углеводов приводит к образо- кислот происходит медленно, что может затруд ванию органических кислот, придающих калу нить дифференцирование их от капель нейт кислую реакцию. рального жира.
Кл и н и ч е с к о е з на ч е ние. При нор- Мыла обнаруживаются в виде кристаллов мальном пищеварении крахмал в кале отсут- и желто-коричневых глыбок, не окрашивающих ствует. Серия амилолитических ферментов, воз- ся суданом III на холоду. Кристаллы мыл похо действующая на него по ходу пищеваритель- жи на иглы жирных кислот, но короче последних..
ного тракта, начиная с птиалина слюны и кончая Их форма напоминает маленькие вытянутые ферментами бактерий в толстом кишечнике ромбики. При нагревании нативного препарата (главным образом в слепой кишке), приводит они в отличие от кристаллов жирных кислот к полному его расщеплению. не сплавляются в капли. Однако сплавление Диа г но с т и ч е с к о е з на че ние. Не- кристаллов мыл может произойти, если перед полное переваривание крахмала встречается нагреванием прибавить 1Ч2 капли уксусной преимущественно при заболеваниях тонкого ки- кислоты, под действием которой мыла рас шечника и связанном с ними ускоренном продви- щепляются с освобождением жирных кислот.
Для суждения об общем количестве жировых Ускоренное продвижение пищевого химуса элементов препарат с 1Ч2 каплями уксусно- по тонкому кишечнику приводит к недостаточно спиртового раствора Судана III, накрытый по- му усвоению всех пищевых продуктов, в том кровным стеклом, осторожно подогревают до числе и жира, поэтому если наряду с жиром начала кипения. Жирные кислоты и мыла пре- в кале обнаруживаются непереваренные мы вращаются при этом в капли, которые наряду шечные волокна и крахмал, то надо подумать с каплями нейтрального жира окрашиваются и об ускоренной перистальтике как причине Суданом. Подогрев исследуют под микроскопом, нарушения всасывания жира.
Сравнивая число окрашенных судаком капель Элементы, отделяемые стенкой кишечника, до и после нагревания, можно составить сужде- составляют вторую группу объектов микроско ние о количестве капель, прибавившихся за пического исследования. Кроме слизи, это эри счет жирных кислот и мыл. Если в нативном троциты, лейкоциты, тканевые макрофаги, препарате кристаллы жирных кислот не обна- клетки кишечного эпителия, клетки злокачест руживались, то увеличение числа капель можно венных опухолей. Плоский эпителий, захваты отнести преимущественно за счет мыл. ваемый изредка при прохождении плотных Кл и н и ч е с к о е з на ч е ние. При нор- каловых масс через анальное отверстие, не мальном пищеварении кал совсем или почти имеет диагностического значения.
совсем не содержит нейтрального жира. Остатки Слизь, обнаруживаемая лишь микроскопи жировой пищи выделяются преимущественно чески, происходит из тех отделов кишечника, в виде мыл. Нарушение усвоения жира связано где каловые массы еще настолько жидки, что в большинстве случаев с недостаточной актив- при перистальтике она с ними перемешивается.
ностью липазы либо с недостаточным поступле- В случае оформленного кала происхождение нием в кишечник желчи. Однако если жир только микроскопически обнаруживаемой слизи заключен в соединительную ткань (жировая следует отнести к тонкому кишечнику или слепой клетчатка), то для его освобождения необходи- кишке. При кашицеобразном и жидком стуле мо достаточное переваривание в желудке соеди- происхождение мелких частиц слизи определить нительной ткани, поэтому нарушение указанного труднее, однако отсутствие одновременно види процесса может привести к стеаторее. мой невооруженным глазом слизи говорит При полном выключении секреции поджелу- скорее против ее происхождения из толстого дочной железы в кале обнаруживается почти кишечника. Вообще же чем мельче комочки исключительно нейтральный жир. Активность слизи и чем теснее они перемешаны с калом, кишечной липазы невелика и действие ее практи- тем выше место их выделения.
чески мало сказывается на усвоении жира. Видимые невооруженным глазом слизистые Бактерии кишечника также мало влияют на комочки следует подвергать микроскопическому процесс расщепления жира. Небольшое коли- исследованию. Комочки слизи предварительно чество жирных кислот, которое образуется в осторожно промывают водой, освобождая от условиях выключения панкреатического пере- кала. Эритроциты в этом случае гемолизируют варивания, полностью усваивается кишечником ся. Под малым увеличением микроскопа слизь и в кале жирные кислоты не обнаруживаются. имеет вид светлых комочков или тяжей с не Недостаточное поступление в кишечник четкими, неправильными очертаниями, вкрап желчи или ее полное отсутствие также резко ленных в основную коричневую или желтую сказывается на усвоении жиров. Жиры не- массу.
растворимы в воде и не смачиваются водными Для отличия слизи от элементов кала можно растворами ферментов. Под действием желчных применить окраску по Гехту (на мазок кала кислот желчь активирует липазу и переводит наносят 1Ч2 капли реактива). Через несколько жир в состояние тонкой эмульсии, более доступ- минут слизь окрашивается в светло-красный ной действию ферментов, чем крупные капли. цвет, остальная масса Ч в зеленый, кроме обо Выпадение этих процессов приводит только к лочек и ядер растительных клеток, приобре частичному расщеплению жира. Образующиеся тающих нловато-красную окраску.
жирные кислоты также требуют для своего Клетки кишечного эпителия обычно находят растворения и всасывания присутствия гидро- вкрапленными в комочки слизи. Иногда клетки тропных желчных кислот, а для своего омыле- оказываются хорошо сохранившимися, чаще они ния Ч щелочей. При недостатке или отсутствии деформированы вследствие пропитывания их в кишечнике желчи в кале находят много ней- мылами или начавшегося переваривания. Еди трального жира и жирных кислот;
количество ничные клетки кишечного эпителия можно встре мыл зависит от содержания щелочей. Наихуд- тить и в нормальном кале как следствие физио шие условия для усвоения жира создаются при логического слущивания. Большие группы опухолях головки поджелудочной железы. подобных клеток следует расценивать как Всасывание жиров из кишечника происходит признак воспаления слизистой оболочки кишеч по лимфатическим путям при активной сократи- ника. Отличить эпителий тонкой и толстой тельной деятельности ворсинок, поэтому жиро- кишки затруднительно. Полупереваренные клет вой стул может наблюдаться также при наруше- ки, окрашенные желчным пигментом, скорее нии лимфооттока в случае паралича tunicae можно отнести к тонкой кишке, клетки, найден muscularis mucosae, а также при туберкулезе ные в круглых комках слизи,Ч к толстой.
и опухолях мезентериальных лимфатиче- Лейкоциты. Единичные в поле зрения лейко ских узлов, находящихся на пути оттока циты могут обнаруживаться и в нормальном лимфы. кале. Увеличение числа лейкоцитов, особенно скопление их в слизи, свидетельствует о воспа- клеток Ч прежде всего полиморфизм: разные лительном процессе. Значительные скопления величина и форма, беспорядочное расположение лейкоцитов (гной) являются признаком язвен- иногда в виде тяжей на волокнистой соедини ного поражения толстого кишечника (дизенте- тельнотканной основе. Клетки чаще крупные с рия, туберкулез, рак, язвенный колит и т. п.);
большим ядром, содержащим ядрышки;
прото обильное выделение гноя без слизи может быть плазма нередко вакуолизирована с признаками при прорыве в кишечник парапроктального жировой дегенерации.
абсцесса. Обнаружение опухолевых клеток в кале В остром периоде бактериальной дизентерии представляет большую трудность. Более эффектив большое количество лейкоцитов в слизи (90 % и ным при подозрении на опухоль будет прове более) представляют собой сегментоядерные дение ректороманоскопии с цитологическим или нейтрофилы с неизмененными ядрами При амеб- гистологическим исследованием материала с подозрительных участков.
ной дизентерии сегментоядерные нейтрофилы составляют 20Ч40 %. Остальные 60Ч80 % Кристаллические образования в кале обна составляют нейтрофилы с пикнотическими и руживаются нередко. Кристаллы трипельфосфа псевдопикнотическими ядрами. В небольшом тов (фосфорнокислая аммиак-магнезия), чаще количестве обнаруживаются эпителиальные в форме гробовых крышек, встречаются в резко клетки, мононуклеары, макрофаги, эозинофи- щелочном кале при усилении гнилостных про лы;
последних больше при амебной дизентерии цессов. При неправильном сборе кала они могут Эозинофилы в кале, помимо амебной дизенте- попасть в него из мочи. От других кристаллов рии, встречаются иногда при гельминтозах, и образований отличить трипельфосфаты помо Отличить их от других видов лейкоцитов можно гает хорошая растворимость их в уксусной и в нативном препарате по относительно круп- кислоте.
ной, резко преломляющей свет зернистости. Оксалаты кальция (щавелевокислая известь) Макрофаги в нативном препарате, а также в виде октаэдров (лпочтовые конверты) встре чаются при употреблении в пищу большого при окраске раствором Люголя отличаются от лейкоцитов большим размером, крупным ядром количества овощей. В норме HCI желудка круглой или овальной формы, содержанием в превращает оксалаты кальция в хлорид каль протоплазме продуктов фагоцитоза (обломки ция, поэтому их присутствие в кале может слу клеток, эритроциты, капли жира). При нали- жить признаком понижения кислотности желу чии фагоцитированных эритроцитов их иногда дочного сока. Кристаллы оксалатов кальция принимают за дизентерийную амебу. Для отли- нерастворимы в уксусной кислоте, под действием чия макрофагов от цист простейших, с которыми серной кислоты постепенно превращаются в они имеют некоторое сходство, следует прибег- кристаллы гипса.
нуть также к окраске раствором Люголя, при Кристаллы холестерина, попадающего в ки которой в цистах простейших в отличие от мак- шечник с желчью, не имеют особого диагности рофагов заметна темноокрашенная оболочка. ческого значения. Они представляют собой Макрофаги в кале обнаруживаются при воспа- бесцветные плоские таблички в форме ромба лении толстой кишки, особенно при бактериаль- или параллелограмма с отломленными углами, ной дизентерии. часто ступенеобразно наслаивающиеся друг на Эритроциты в неизмененном виде обнаружи- друга.
ваются в кале при кровотечениях из толстой Кристаллы Шарко Ч Лейдена встречаются кишки, преимущественно из дистальных ее отде- в тех случаях, когда в кале имеется много лов вследствие язвенных процессов, распада эозинофилов, в частности при амебной дизенте опухоли, наличия свищей и трещин заднего рии, некоторых гельмннтозах и кишечной лока прохода, геморроя. Если от момента кровотече- лизации синдрома Леффлера. По виду они ния до выделения крови с калом проходит зна- нисколько не отличаются от тех, которые имеют чительное время или если кровь выделяется из ся в мокроте при бронхиальной астме. Это проксимальных отделов толстой кишки, то эрит- бесцветные удлиненные октаэдры разной вели роциты в большинстве случаев разрушаются и чины, напоминающие форму двустороннего изредка могут сохраниться в виде теней. В этом копья. Чаще всего они находятся в слизи, иногда случае распознать их при микроскопии нелегко, непосредственно в кале. В последнем случае особенно если они единичные и не располагают- они хорошо окрашиваются эозином (слизь пре ся скоплениями. Как и при полном распаде пятствует проникновению в них краски).
эритроцитов, вопрос о наличии крови в таких При профузных поносах в слизи находя!
случаях решается химическим исследованием. иногда кристаллы билирубина, не успевшего Эритроциты в воде гемолизируются, поэтому восстановиться в стеркобилин из-за быстрого нативный препарат следует готовить на изотони- прохождения его по кишечному тракту. Они ческом растворе хлорида натрия. имеют вид очень мелких заостренных с двух Клетки злокачественных опухолей могут концов игольчатых кристаллов оранжевого цве быть обнаружены в кале при опухоли прямой та, располагающихся большей частью группами.
кишки. При более высокой локализации опухоли Кристаллы гематоидина, встречающиеся в клетки подвергаются изменениям, препятствую- кале после кишечных кровотечений, несколько щим их распознаванию. Эти клетки можно опре- похожи на кристаллы билирубина. Форма их делить, если они не единичны, а обнаружи- также бывает игольчатой или ромбической, но ваются группами в виде обрывков ткани с ха- цвет красновато-коричневый.
рактерным атипизмом. Особенность опухолевых Из нерастворимых лекарственных препара тов в кале чаще всего обнаруживается сульфат ные особенности своей структуры, позволяющие бария, применяемый при рентгенологическом отличать патогеннее формы от непатогенных, исследовании желудочно-кишечного тракта. а затем н совсем растворяются. Во-вторых, при Мельчайшие крупинки этого вещества, покры- остывании уменьшается, а затем исчезает по вая все поле зрения, делают кал непригодным движность простейших Ч важный вспомога для микроскопического исследования. тельный фактор при их дифференцировании.
Препараты висмута образуют в кишечнике Следует заметить, что сохранение кала в соединения, выпадающие в виде темно-бурых, термостате не допускается, так как в условиях почти черных кристаллов, имеющих форму искусственного подогревания простейшие очень прямоугольников, ромбов или точильных брусков. быстро подвергаются дегенеративным измене После приема карболена в кале обнаружи- ниям, затрудняющим их распознавание.
ваются частички угля, имеющие угловатую не- В оформленном кале, как правило, встре правильную форму, окрашенные в черный цвет чаются только цисты, однако в комках слизи, и не поддающиеся действию растворителей. При находящихся на его поверхности, иногда можно соответствующей дозе карболена кал приобре- найти и вегетативные формы. Поэтому опреде тает черный цвет. Сходное окрашивание кала ление вегетативных форм простейших, находя наблюдается и после приема препаратов железа, щихся в слизи, следует производить по возмож превращающихся в кишечнике под действием ности быстро.
сероводорода в сернистое железо или в закись Иногда для обнаружения простейших, железа черного цвета. Крупинки этих соедине- особенно амеб, используют материал, получен ний имеют вид аморфных зерен или глыбок ный при ректороманоскопии. В этих случаях разной величины. особенно нужно помнить о необходимости пра вильного обращения с полученным незначитель Лит е р а т у р а : Алексеев-Беркман И. А, ным количеством материала. За время транспорти Клиническая копрология.Ч Л., 1954;
Герман И.
ровки в лабораторию, расположенную даже в Клиническая копрология.Ч Бухарест, 1977;
том же здании, эта капля успевает остыть, а Михайлова Н. Д. Пособие по копрологическим иногда и высохнуть. Поэтому лучше всего под исследованиям.Ч Л., 1962;
Henry К- /-, Cannon готовить все необходимое для исследования в О. С, Winkelman I. W. Clinical chemistry. Prin том же помещении, где проводится эндоскопия.
ciples and technics. New York, 1974, p. 1354Ч Смазывания ректоскопа вазелиновым маслом 1369.
или жиром делают последующую микроскопию затруднительной.
Для обнаружения в кале простейших прибе 2.2.5. Обнаружение простейших гают к ряду методов. Трудности, сопряженные с обнаружением цист простейших, могут быть Обнаружение и дифференцирование про- в известной степени преодолены путем примене стейших Ч один из наиболее сложных разделов ния методов концентрации. Культивирование исследования испражнений. Отличие патоген- простейших н заражение ими животных, приме ных форм простейших от непатогенных требует няемые в основном с научными целями, ввиду известного опыта и тщательности в работе. сложности методики малопригодны в повседнев Выше уже указывалось на важность пра- ной практической работе. Выделение простей вильного сбора материала для обнаружения ших с калом происходит непостоянно. Поэтому в нем простейших. Здесь следует учитывать, не следует ограничиваться при их поисках что большинство этих одноклеточных орга- однократным исследованием. Последнее нужно низмов встречается в двух формах: вегетатив- повторить 4Ч5 раз через 2Ч3 дня.
ной Ч активной, подвижной, жизнедеятельной, Унифицированные методы определения про легко поддающейся вредным воздействиям (в стейших с помощью нативного мазка н мазка частности, охлаждению) и потому быстро поги- с раствором Люголя (1974). Пр и н ц и п.
бающей после выделения из кишечника, и в Движущиеся простейшие обнаруживаются при виде устойчивых к внешним воздействиям цист. исследовании суспензии каловых масс в изото Существование вегетативных форм требует ническом растворе хлорида натрия с помощью более или менее жидкой среды, поэтому они микроскопа. Препарат в этом растворе служит обнаруживаются преимущественно в жидком, прежде всего для выявления вегетативных форм полужидком, слизистом кале. При неблаго- простейших, которые распознаются по характе приятных условиях для их жизнедеятельности ру движения. Препарат суспензии каловых масс (например, уплотнение каловых масс) они пре- в растворе Люголя в основном используют для вращаются в цисты. В оформленном кале дифференцирования цист простейших.
простейшие, как правило, встречаются лишь в Ре а кт ивы. 1. 0,85 % раствор хлорида инцистированном состоянии. натрия. 2. Раствор Люголя (йодид калия Ч 3 г, Кал для отыскания в нем вегетативных форм кристаллический йод Ч 1,5 г, дистиллированная должен исследоваться сразу после его выделе- вода Ч 100 мл). Раствор стабилен при хранении ния, еще в теплом состоянии. Необходимость в темной посуде при комнатной температуре этого вызывается двумя причинами. Во-первых, в течение 1 мес.
в остывшем кале вегетативные формы простей- Спе циа ль ное оборудование:
ших быстро гибнут и мертвыми быстро под- микроскоп.
даются действию протеолитических ферментов. Ход ис с л е д о в а ния. На предметное Вследствие этого они сначала теряют характер- стекло наносят 0,1 мл (2 капли) изотонического раствора хлорида натрия и на расстоянии Ход ис с л е д ов а ния. Консервант раз 3 см Ч 0,1 мл раствора Люголя. На кончик ливают в пенициллиновые флаконы до половины деревянной палочки берут частицу кала и их объема, исследуемый материал от больного эмульгируют ее в капле изотонического раствора немедленно после взятия переносят во флаконы хлорида натрия. Затем той же палочкой берут в количестве, составляющем '/з объема, занято частицу кала и эмульгируют ее в капле раствора го консервантом. Затем содержимое флаконов Люголя, Обе капли накрывают покровным суспендируют при помощи стеклянной палочки.
стеклом и просматривают сначала при малом Флакон закрывают пробкой и пробку закрепля увеличении микроскопа (7 X 20), а затем при ют липкой лентой. На флакон крепят этикетку, большом (7 X 40). на которой записаны данные об обследуемом.
Эмульсия каловых масс должна быть не Перед исследованием консервированный мате слишком густой, так как тогда будет трудно риал не перемешивать!
исследовать препарат под микроскопом при Каплю осадка пипеткой переносят на пред большом увеличении. В то же время частица метное стекло и растирают до получения суспен кала, взятая для приготовления препарата, не зии. В том случае, если использован консервант должна быть слишком маленькой, так как в Барроу, добавляют каплю красителя. Затем этом случае количество простейших может ока- каплю накрывают покровным стеклом и микро заться недостаточным для их обнаружения. скопируют препарат при большом увеличении.
Препарат считается правильно приготовленным Оце нка ре з у ль т а т ов. Исследуют лишь в том случае, если через него четко виден 2Ч3 препарата, отмечая всех обнаруженных печатный шрифт. простейших. Структуры простейших при приме Оценка результатов. Исследуют нении консервантов окрашиваются в синий 2Ч3 препарата, отмечая всех замеченных про- цвет красителем. Внутренняя структура балан стейших. В сомнительных случаях или при полу- тидиев в консервированном материале стано чении отрицательного результата анализ повто- вится незаметной, и балантидиев обнаруживают ряют;
на протяжении 1Ч2 нед проводят не лишь по войлокообразному слою ресничек по менее 3 анализов. Метод позволяет наряду с периферии клетки.
непатогенными простейшими выявить Enta- Пр и ме ч а н и е. При отсутствии тионина moeba histolitica и Balantidium coli, а также нлн азура возможно применение 0,01 % условно-патогенную Lamblia intestinalis. раствора метиленового синего.
Унифицированный метод формалин-эфирно Пр и ме ч а н и я. 1. Жидкие каловые мас го обогащения (1974). Принцип. Формалин сы исследуют не более чем через 30 мин эфирная обработка позволяет выделять и кон после дефекации, оформленные Ч не более центрировать цисты простейших.
чем через 2 ч после дефекации. 2. В фека Реакт ивы. 1. Раствор формалина: фор лиях не должно быть посторонних приме малин концентрированный 10мл, хлорид натрия сей Ч воды, мочи и т, п. 3. Для сбора 0,85 г, вода дистиллированная до 100 мл. 2.
кусочков кала пригодны только деревянные Эфир серный. 3. Раствор Люголя.
палочки, так как со стеклянных соскальзыва Сп е ц и а л ь н о е об ор у д ов а ние :
ют кусочки слизи, в которых часто находят микроскоп.
ся паразиты. 4. Деревянные палочки сжига Ход ис с л е д о в а ния. В пробирки на ют после одноразового использования.
ливают по 6 мл раствора формалина. Частицы кала величиной с горошину тщательно суспенди Унифицированный метод с применением руют в пробирки с раствором формалина. Затем консервантов '(1974). Принцип. Простейшие в пробирку добавляют 2 мл эфира, закрывают фиксируются в каловых массах консервирую- ее резиновой пробкой, перемешивают содержи щим раствором, поэтому морфологические приз- мое пробирки и центрифугируют в течение 3 мин наки простейших длительное время остаются при 1500 об/мин.
без изменений. После центрифугирования слой кала, обра Ре а кт ив ы. 1. Консервант Барроу: зовавшийся между слоями формалина и эфира, а) консервирующий раствор: хлорид натрия аккуратно отделяют от стенок пробирки дере 0,7 г, формалин концентрированный 5 мл, спирт вянной палочкой и сливают надосадочную этиловый % % 12,5 мл, фенол кристаллический жидкость. Осадок собирают пипеткой и пере 2 г, вода дистиллированная 100 мл;
б) крася- носят каплю на предметное стекло, добавляют щий раствор: 0,01 % раствор тионина или азура. каплю раствора Люголя, накрывают покровным Консервант Барроу используют только в том стеклом и микроскопируют при малом и большом случае, когда исследование материала возможно увеличении микроскопа. При необходимости в срок не более 1 мес. 2. Консервант Сафара- возможно хранение суспензии каловых масс в лиева: сульфат цинка 1,65 г, формалин кон- формалине в течение 1Ч2 сут.
центрированный 10 мл, фенол кристаллический Оце нка р е з у л ь т а т о в. При исследо 2,5 г, уксусная кислота концентрированная 5 мл, вании препарата отмечают всех обнаруженных метиленовый синий 0,2 г, вода дистиллирован- простейших. Метод позволяет выявить цистные ная 100 мл. Консервантом Сафаралнева поль- их формы. Основные формы простейших пред зуются тогда, когда материал должен храниться ставлены ниже.
до исследования более 1 мес. Класс корненожек (Rhizopoda): к классу Сп е ц и а л ь н о е о б о р у д о в а ние : корненожек относятся амебы. Характерной осо микроскоп. бенностью вегетативной стадии этого одно клеточного организма является отсутствие выздоравливающих от острого амебиаза, у стра оболочки, вследствие чего тело не имеет постоян- дающих хронической формой заболевания и у ной формы. При неблагоприятных условиях тело носителей.
амебы покрывается оболочкой и она превра- Отличия просветной формы от тканевой щается в цисту Ч устойчивую форму, способную следующие: она меньше размером Ч обычно сохранять жизнеспособность вне организма 12Ч25 мкм, изредка еще меньше. Движение человека. В цисте ядро делится на 2Ч4Ч совершается более медленно, хотя иногда частей. Попав в кишечник человека, циста под наблюдается выбрасывание псевдоподий. В про влиянием пищеварительных ферментов осво- топлазме эритроцитов нет и содержится бождается от своей оболочки. Протоплазма ее небольшое количество бактерий.
делится с образованием одноядерных вегетатив- Цисты Е. histolytica правильной круглой ных особей, количество которых соответствует формы, бесцветны, диаметр их в среднем 10Ч числу ядер цисты. 12 мкм. Протоплазма слегка зерниста, ядра Из паразитирующих в кишечнике человека (1Ч4) без окраски плохо различимы. В некото амеб наиболее часто встречаются патогенная рых цистах можно заметить хроматоидные Entamoeba histolytica Ч возбудитель дизенте- тела Ч короткие, бесцветные, сильно преломляю рии и непатогенные Entamoeba hartmanni, щие свет палочки с закругленными концами, Entamoeba coli, Endolimax папа, Jodamoeba которым приписывается роль запасного пита buschlii. тельного материала. Эритроцитов цисты никогда Главная задача, возникающая при обнару- не содержат.
жении амеб,Ч различить патогенную дизенте- В препарате, окрашенном раствором Люго рийную от непатогенных форм. Поэтому лабора- ля, можно обнаружить у цисты ясно различи торный работник должен быть знаком с морфо- мую двухконтурную оболочку, ядра и глико логическими особенностями этих видов простейших. геновую вакуоль. Ядра выглядят как колечки, Entamoeba histolytica, В свежем нативном в центре которых в виде блестящей точки распо препарате дизентерийная амеба имеет вид почти ложена кариосома. Зрелая циста содержит бесцветного неопределенной формы комочка. ядра. Хроматоидные тела не окрашиваются Ядра в ней не видно. Протоплазма ясно делится йодом.
на зоны: наружную Ч гомогенную эктоплазму Наиболее характерным признаком дизенте и внутреннюю Ч эндоплазму. Первая примерно рийной амебы является строение ее ядра. Оно в 2 раза меньше второй. имеет округлую форму с диаметром 3Ч8 мкм При движении амебы псевдоподии возни- и располагается в эндоплазме эксцентрично.
кают из эктоплазмы, а затем в образовавшееся В центре ядра находится округлая или много выпячивание постепенно вливается эндоплазма. угольная, правильной формы, около 0,5 мкм Характер движения является одной из типичней- в поперечнике, кариосома, окруженная светлой ших особенностей дизентерийной амебы. Псевдо- зоной. Пространство между кариосомой и обо подия выбрасывается ею мгновенно, а при лочкой не содержит никаких зерен. Дизенте перемещении в нее эндоплазмы движение стано- рийную амебу необходимо отличать от обнару вится поступательным. Все это отличает живаемых в кишечнике непатогенных форм.
дизентерийную амебу от кишечной, у которой Entamoeba hartmanni Ч непатогенная аме нет деления на эндо- и эктоплазму;
форма ба, имеющая наибольшее сходство с E.hisiolytica меняется очень медленно, и при образовании в строении тела, но отличающаяся значительно псевдоподий тело не перемещается в пространстве. меньшей величиной. Вегетативные формы ее Е. histolytica встречается в кишечнике в двух имеют размер от 5 до 12 мкм. Размер 4-ядер формах: тканевой и просветной. Тканевая фор- ных цист Ч от 5 до 10 мкм. Движения ее совер ма, называемая также Е.histolytica forma mag-- шаются медленно, эритроцитов она не фаго па, получила свое название вследствие того, цитирует.
что она проникает в ткани хозяина и, поселяясь Entamoeba coli Ч наиболее часто встречаю там, вызывает изъязвление стенки кишечника. щийся в кишечнике вид амеб. В нативном препа Ее встречают в кале при остром амебиазе. рате вегетативная форма имеет размер 29Ч30 мкм Размер этой амебы колеблется в значительных в округлившемся состоянии и до 60 мкм в пределах (от 16 до 60 мкм). В состоянии покоя, вытянувшемся. В протоплазме нет деления на когда форма тела приближается к округлой, эндо- и эктоплазму, она не содержит эритро размер ее 20Ч30 мкм, а в вытянутом состоянии цитов. В больших щелевидных вакуолях имеется длина может быть в 2 раза больше. Наличие значительное количество разнообразных вклю в протоплазме амеб эритроцитов является чений: бактерии, грибы, лейкоциты, крахмальные очень важным диагностическим признаком, так зерна, цисты других простейших. Движения как непатогеиные формы никогда их не содер- медленные, не имеют поступательного характе жат. Бактерии в протоплазме живой тканевой ра. В отличие от Е.histolytica ядро заметно формы встречаются как исключение. Обычно они и в нативном и еще лучше в окрашенном йодом проникают в тело амебы только после ее гибели. препарате. Цисты E.coli круглой формы, крупнее Просветная форма, или Е.histolytica forma цист дизентерийной амебы: их диаметр в сред minuta, обитает в просвете кишечника (отсюда нем около 19Ч20 мкм. Двухконтурная оболочка и ее название). В стенку кишечника она не толще, чем у Е. histolytica. Ядер от 1 до 8, внедряется, поэтому не вызывает ее изъязвления они могут быть заметны и в неокрашенных и соответствующей клинической картины. Про- препаратах, но лучше видны после окраски светная форма амебы обнаруживается у лиц, йодом.
Стадия 4-ядерной цисты очень кратковре- ных с испражнениями могут быть выведены менна и поэтому наблюдается редко в отличие и вегетативные формы. Как правило, последние от Е. histolytica;
нахождение 8-ядерных цист легко обнаруживаются в желчи при дуоденаль подтверждает их принадлежность к виду Е. coli. ном зондировании.
В связи с тем что ядра лежат в разных плоско- Вегетативные формы лямблий при рассматри стях сферического тела цисты, то увидеть и вании их с передней поверхности имеют груше правильно подсчитать их можно только, работая видную форму, в профиль Ч ложкообразную.
микрометрическим винтом. При окраске йодом Это зависит от того, что на передней поверх можно заметить в ядре кариосому, а в прото- ности тела паразита имеется вдавление, пред плазме незрелых (IЧ2-ядерных) цист Ч боль- ставляющее собой присоску, с помощью которой шую гликогеновую вакуоль. он прикрепляется к клеткам кишечного эпителия.
Endolimax папа Ч непатогенная амеба ма- Питаются лямблии осмотически всей поверх лого размера (в среднем около 7 мкм). В препа- ностью тела. Длина последнего 10Ч20 мкм, рате свежевыделенного кала при температуре ширина 8Ч10 мкм.
человеческого тела (на нагревательном столике) Живые лямблии находятся в состоянии движения ее довольно активны, напоминают непрерывного движения, преимущественно движения Е. histolytica, но при остывании колебательного, осуществляемого четырьмя па препарата они быстро прекращаются. Прото- рами жгутиков. Несмотря на то что в нативном плазма, делящаяся на эндо- и эктоплазму, ни- препарате внутреннее строение лямблии нераз когда не содержит эритроцитов, в ее вакуолях личимо и жгутики едва заметны вследствие заметно лишь большое количество включенных быстрого их мелькания, облик паразита, особен микробов. Ядро в нативном препарате незаметно. но движущегося, настолько характерен, что Цисты круглой или чаще овальной формы спутать его ни с чем невозможно. Поэтому размером 8Ч16X6Ч8 мкм содержат 1Ч4 для диагностики, как правило, достаточно рас ядра. Как в не окрашенном, так и в окрашен- смотрения нативного препарата.
ном йодом препарате их трудно отличить от На окрашенных препаратах выявляется мелких цист дизентерийной амебы. довольно сложное внутреннее строение лямблий.
Jodamoeba btltschlii Ч непатогенная амеба Они полностью билатерально симметричны.
размером от 8 до 20 мкм. Движения медленные, Посередине тела по его длине проходят два быстро прекращающиеся при остывании препа- параллельных нитевидных опорных образова рата,- Псевдоподии образуются из эктоплазмы;
ния Ч аксостили. По обе стороны от них сим эндоплазма зернистая, ее вакуоли содержат метрично расположены 2 ядра и 4 пары блефа бактерии, крахмал и другие частицы, но никогда робластов Ч точечных телец, от которых отходит в них нет эритроцитов. В неокрашенных препа- такое же число жгутиков. Имеется только одно ратах ядро обычно незаметно, при окраске гема- непарное образование Ч парабазальное тело, токсилином оно довольно большого размера с отходящее в форме запятой от середины аксо тонкой оболочкой и большой кариосомой. По- стиля;
назначение его неизвестно.
следняя лежит в центре ядра, занимая примерно При исследовании кала наиболее важно половину его, и окружена светлой зоной. уметь обнаружить и отличить цисты лямблий, Более характерными особенностями отли- обнаружение которых позволяет нередко поста чаются цисты этой амебы. Они имеют различную, вить диагноз лямблиоза без дуоденального часто неправильную форму, довольно толстую зондирования. В иативном препарате цисты двухконтурную оболочку и, как правило, одно лямблий выглядят овальными, реже круглыми, ядро. Наиболее характерен их вид при окраске бесцветными, светопреломляющими образова раствором Люголя. На фоне зеленовато-желтой ниями длиной 10Ч14 мкм с двухконтурной протоплазмы резко выступает ясно контуриро- прозрачной оболочкой.
ванная большая гликогеновая вакуоль, интенсивно Более ясная картина получается при окраске окрашенная в красновато-коричневый цвет. Она раствором Люголя. В таком препарате ясно занимает около половины протоплазмы. Изредка видны оболочка цисты, аксостиль, 2 или 4 ядра, гликогеновых вакуолей бывает 2 или 3. лежащие у одного из полюсов, блефаробласты, Класс жгутиковых (Flagellata). Lamblia жгутики. Все это образует сложный, но характер intestinalis. Лямблии, как и описываемые ниже ный рисунок.
трихомонады, относятся к классу жгутиковых.
Trichomonas hominis. Кишечные трихомона Общей особенностью последних является нали- ды во многом похожи на влагалищные. Они чие на поверхности тела одного или нескольких имеют овальную или грушевидную форму, жгутиков, с помощью которых они переден: длина их 10Ч15 мкм. На переднем коние тела гаются. В отличие от амеб тело жгутиковых расположены 3Ч5 жгутиков, на заднем Ч один.
покрыто оболочкой, наличие которой обусловли- От переднего конца к заднему тянется ундули вает постоянство их формы. рующая перепонка, которая находится в непре Лямблии паразитируют в тонком кишечнике рывном движении, по ней как бы пробегают человека, преимущественно в двенадцатиперст- одна за другой волны, начинающиеся у передне ной кишке, а также в желчном пузыре. Суще- го конца. Благодаря жгутикам и ундулирующей ствование вегетативной особи лямблии требует перепонке тело паразита находится в непрерыв жидкой среды, поэтому, попадая в толстый ном движении: то поступательном, то колеба кишечник, лямблии инцистируются и в кале тельном, то вращательном. Движение ундули находятся только цисты. Лишь при профузных рующей перепонки хорошо заметно в нативном поносах или после действия сильных слабитель- препарате под большим увеличением микроско па и позволяет определить вид простейшего. В. coli образует цисты сферической формы Цист трихомонада не образует. Вопрос о пато- диаметром 50Ч60 мкм. Они покрыты бесцветной генности кишечных трихомонад окончательно двухконтурной оболочкой. В окрашенных препа не решен. ратах у них виден макронуклеус и одна сократи Chilomastix mesnlli Ч непатогенный жгути- тельная вакуоль (нефункционирующая).
коносец, грушевидной формой тела напоминаю- Класс споровиков (Sporozoa). Blastocystis щий трихомонады. Отличается от последних hominis, В кале нередко встречается образо отсутствием ундулирующей перепонки, наличием вание, похожее на цисты простейших и могу спиральной борозды, проходящей через все тело щее быть принято за них. Это бластомицет от переднего конца к заднему. Жгутиков четыре, (гриб) Blastocystis hominis. Он обнаруживается расположены они у переднего конца, три из чаще в жидком, чем нормальном, кале, но явля них направлены кпереди к обусловливают быстрое ется, по-видимому, безвредным обитателем вращательное движение простейшего, и один кишечника, Бластоцисты легко отличить от цист жгутик лежит вдоль ротового отверстия. По- простейших при окраске йодом. Они имеют следнее находится в переднем конце и по длине почти правильную круглую форму, различную равно '/зЧ1/2 тела. Длина Chilomastix mes- величину Ч от 5 до 30 мкм в диаметре. Вся nili 13Ч24 мкм, ширина 6:Ч10 мкм. На окрашен- центральная часть их тела занята большой ном препарате видно круглое ядро, расположен- вакуолью Ч гомогенной, круглой, не окраши ное в передней части тела, с несколькими вающейся йодом. Протоплазма оттеснена 'к пе зернами хроматина и одной кариосомой. В прото- риферии и окружает вакуоль тонким слоем в плазме много пищевых вакуолей, наполненных виде кольца.
бактериями. Аксостиля нет. Цисты формой напоминают лимон размером 7Ч9 X 5Ч6 мкм.
2.2.6. Обнаружение гельминтов В окрашенных йодом цистах видны одно ядро, извивающийся жгутиковый аппарат и фибрил лы, окаймляющие цнтостом. В СССР встречается несколько десятков видов червей, паразитирующих в кишечнике Класс ресничных (Ctliata). Balantidium coli.
Балантидий Ч единственная ресничная инфузо- человека. Действие гельминтов на организм рия, паразитирующая в кишечнике человека и человека многообразно и различно. Они могут вызывающая заболевания различной тяжести Ч вызывать токсические и токсико-аллергические от легких Колитов до тяжелых язвенных пора- явления (аскариды, трихинеллы), оказывать механическое воздействие, травмируя стенку жений. Встречается и носительство у здоровых людей. В. coli Ч самый крупный из обнаружи- кишечника;
паразиты (например, анкилостомы) ваемых в кишечнике человека простейших орга- могут вызывать кровотечения, приводящие к низмов. Размер его овального тела 50Ч90 X малокровию, а также способствовать проникно X 30Ч65 мкм, однако встречаются особи, дости- вению патогенных микробов из содержимого гающие 150Ч200 мкм. кишечника;
они могут закрыть просвет как Эту инфузорию вследствие больших разме- кишок, так и выводных протоков печени и под ров легко увидеть и отличить даже под малым желудочной железы (аскариды);
развиваясь в увеличением микроскопа благодаря ее большой тканях органов (эхинококк, цистицерк), они подвижности. Передвижение В. coli, совершае- сдавливают и разрушают эти органы. Наконец, мое с помощью ресничек, настолько быстрое, все гельминты используют питательные вещества что паразит то и дело исчезает из поля зрения из кишечника хозяина, что может привести к и препарат приходится передвигать, чтобы за истощению макроорганизма (цепни) и авитами ним уследить. Подвижность его сохраняется нозу, в частности к авитаминозу В|2 при инвазии довольно долго и после остывания кала. широким лентецом (анемия типа пернициозной).
Для обнаружения вегетативных форм В. coli Некоторые инфекционные заболевания, напри обычно используют нативный препарат. Форма мер бактериальная дизентерия, протекают тяже тела В. coli яйцевидная, несколько суженная лее и труднее поддаются лечению при наличии к переднему концу, где помещается воронко- в кишечнике гельминтов.
образное углубление Ч перистом играющее Гельминтологическое исследование Ч важ роль рта и пищевода. Все тело инфузории ная составная часть общего анализа кала, а покрыто ресничками, располагающимися парал- нередко проводится как самостоятельное. При лельными рядами, идущими по длине тела исследовании обнаруживают гельминты и их несколько наискосок. Перистом также покрыт яйца. Первые выявляются в большинстве слу ресничками, загоняющими внутрь его пищевые чаев макроскопическим путем;
микроскопи частички. В средней части тела расположено ческий метод позволяет обнаружить как большое бобовидной формы ядроЧмакро- яйца, так и мелкие особи червей или их нуклеус, в углублении которого лежит малень- личинки.
кий пузырьковидный микронуклеус (они лучше Паразитирующие у человека черви при видны на окрашенных препаратах). В прото- надлежат к одному из двух подтипов Ч круглых плазме имеются 2, (реже 1Ч3) пульсирующие (нематод) и плоских (плятод). Последние в сократительные вакуоли, служащие примитив- свою очередь делятся на ленточных червей Ч ными органоидами выделения, а также несколь- цестод и сосальщиков Ч трематод.
ко пищеварительных вакуолей, содержащих Макрогельминтологическое исследование бактерии, эритроциты, лейкоциты, зерна крах- производят для проверки результатов дегель мала и другие продукты питания паразита. минтизации, а также в тех случаях, когда пред полагается наличие паразита, не выделяющего осядут на дно, мутную надосадочную жидкость яиц в просвет кишечника. осторожно сливают, а на осадок снова наливают Для макроскопического исследования, в воду и размешивают содержимое сосуда. После особенности после изгнания паразитов, следует вторичного осаждения крупных частиц воду осмотреть все выделенное количество фекалий, снова сливают;
такое промывание осадка повто На поверхности оформленного кала можно ряют до тех пор, пока надосадочная жидкость увидеть остриц. Членики вооруженного и нево- не станет прозрачной. Можно оставить раз оруженного цепней могут располагаться как на бавленный водой кал для отстаивания и на поверхности, так и внутри каловых масс. Зрелые сутки, но в таком случае к нему прибавляют членики (проглоттнды) невооруженного цепня для консервирования формалин (примерно по обладают способностью к самостоятельному 10 мл на 1 л воды). Отмытый осадок просматри движению и могут выползать из анального вают на темном фоне, как при первом способе.
отверстия и вне дефекации. Одного осмотра их В случае поисков очень мелких гельминтов достаточно для установления характера пара- (трихостронгилиды, трихинеллы, стронгилоиды зита. и т. п.) чашку Петри ставят на столик микро Для выяснения видовой принадлежности скопа и просматривают ее содержимое под ма члеников цепней их помещают, слегка сдавли- лым увеличением.
вая, между двумя предметными стеклами и Некоторые мелкие гельминты, как карлико рассматривают на свет. Обычно при таком спо- вый цепень и др., иногда всплывают из осадка.
собе можно различить форму-матки в членике, Поэтому при обнаружении на поверхности воды что достаточно для распознавания вида парази- белых комочков их следует выловить пипеткой та. Если картина недостаточно ясна, членики с насаженным на нее баллоном и просмотреть просветляют, подержав их немного в глицерине. под лупой или микроскопом.
Эту манипуляцию следует производить очень Сравнительные данные о яйцах гельминтов осторожно и аккуратно. При сдавлении зрелого приведены в табл. 22.
членика (а отрываются и выделяются именно Унифицированные методы исследования зрелые членики) из него выдавливаются в боль- гельминтов, их фрагментов и яиц (1974). Обна шом количестве яйца. При попадании в чело- ружение гельминтов. Пр и н ц и п. При иссле веческий организм находящиеся в яйцах онкосферы довании водной эмульсии каловых масс гель (зародыши) разносятся по тканям, где превра- минтов обнаруживают на темном фоне.
щаются в финны. Последние, попадая в мозг, Ре а кт ив : глицерин.
глаз и т. д., могут вызывать тяжелые поражения Ход ис с л е д о в а ния. Готовят водную (цистицеркоз). Поэтому нужно следить за тем, эмульсию каловых масс, затем тщательно про чтобы жидкость с выдавленными яйцами не сматривают отдельные небольшие порции в попала на руки или окружающие предметы. черных фотографических кюветах или в чашках Все предметы, бывшие в соприкосновении с Петри на темном фоне. Пинцетом извлекают зараженными яйцами материалом, должны все обнаруженные белые частицы. Крупные тщательно дезинфицироваться. Наиболее дей- образования рассматривают под лупой между ственным дезинфекционным средством, помимо двумя предметными стеклами. Если предпола кипячения, является 5 % раствор карболовой гают обнаружение мелких форм гельминтов кислоты, в котором яйца тениид погибают в или головок цестод после лечения, то обнару течение 2 ч. женные частицы исследуют под лупой в капле Аскариды вследствие своего большого раз- глицерина.
мера обычно обнаруживаются без обработки Оце нка р е з у л ь т а т о в исследо фекалий. Членики крупных цестод хорошо выде- в а ния. Определение вида нематод возможно ляются при суспендировании кала с небольшим лишь по целым экземплярам, реже Ч по круп количеством воды. ным фрагментам. Цестоды отличают по зрелым Однако одного осмотра кала недостаточно членикам, гермафродитным членикам и ско для обнаружения мелких гельминтов, а также лексам.
для нахождения головки цепней и лентецов, Пр и ме ч а н и е. При отсутствии глицери что важно при изгнании. С целью более деталь на возможно исследование в капле воды.
ных поисков испражнения размешивают с водой и затем либо просматривают полученную взвесь, Обнаружение яиц гельминтов методом тол либо процеживают ее через сито. стого мазка (метод Като). Пр и н ц и п. При В первом случае можно применить один из просветлении глицерином и подкрашивании двух методов. Более простой состоит в том, малахитовым зеленым в толстом мазке обнару что кал размешивают с относительно небольшим живают яйца гельминтов.
количеством воды до жидкой консистенции и Ре а кт ив ы. 1. 3 % водный раствор мала затем всю полученную массу просматривают хитового зеленого. 2. Глицерин. 3. 6 % водный невооруженным глазом или с помощью лупы, раствор фенола. 4. Смесь Като: 6 мл 3 % вод наливая ее небольшими порциями тонким слоем ного раствора малахитового зеленого, 500 мл в темные кюветы или в чашки Петри, поставлен- глицерина, 500 мл 6 % раствора фенола. Стаби ные на черный фон. лен при хранении в закрытой посуде при комнат При втором способе испражнения размеши- ной температуре. 5. Целлофановые покровные вают с 2Ч3 л воды в большом цилиндре или пластинки по Като размером 20 X 40 мм. Хра стеклянной банке. Через 1Ч2 ч, когда крупные нят в смеси Като (3Ч5 мг смеси на 100 пласти частицы, в числе которых будут и гельминты, нок). Готовы к употреблению через 24 ч.
8 Спе циа л ь но е об ору д ов а ние : ном шкафу при 100 С в течение 1Ч2 ч;
10 г микроскоп. порошка растворяют в 1 л воды).
Ход ис с л е д о в а ния. Кусочек кала Специальное оборудование.
наносят на предметное стекло, покрывают пластин- 1. Сушильный шкаф. 2. Микроскоп. 3. Склянки кой Като и придавливают так, чтобы кал разма- с крышками вместимостью 30Ч50 мл. 4. Целло зывался по стеклу в пределах пластинки. Мазок фановая пластинка по Като. 5. Пастеровские оставляют при комнатной температуре для пипетки.
осветления, затем микроскопируют его. Время Ход ис с л е д о в а ния. Метод 1: в склян просветления должно быть не более 1 ч. В жар- ку к 20Ч30 мл раствора детергента добавляют кое время года мазок мнкроскопируют через порцию кала, так чтобы соотношение раствора 30 мин. Чтобы избежать резкого высыхания и кала было примерно 1 : 20. Кал держат в препарата, на пластинку в некоторых случаях растворе не менее суток. В образовавшийся на кладут влажную губку. дне склянки осадок, состоящий из трех слоев, Оце нка ре з у л ь т а т ов. Подсчиты- где средний слой составляют яйца гельминтов, вают обнаруженные яйца гельминтов во всем вводят пастеровскую пипетку и набирают 1Ч мазке с учетом их видовой принадлежности. капли жидкости из среднего слоя, переносят Метод выявляет заражение аскаридами, власо- на предметное стекло. Каплю покрывают пла главами, трематодами, тениидами и другими стинкой Като и препарат микроскопируют. На видами, иногда анкилостомами и карликовым одном стекле должно быть не менее 2 препара тов.
цепнем.
Обнаружение яиц гельминтов методом обога- Метод 2: кал суспендируют в растворе детер щения. Пр и н ц и п. Используемый для подго- гента (соотношение по массе 1 ;
10). Через товки суспензии каловых масс флотационный 30. мин содержимое пробирки перемешивают в раствор имеет большую относительную плот- течение 1Ч2 мин и центрифугируют при 1000Ч ность, чем яйца гельминтов. Яйца всплывают на 1500 об/мин. На одном стекле готовят два поверхность, из образующейся пленки делают препарата из осадка.
препараты и микроскопируют. Оце нка ре з у л ь т а т ов. При исследо Ре а к т ив ы. 1. Флотационный раствор по вании учитывают все яйца гельминтов, обна Калантарян: водный раствор нитрата натрия руженные в препаратах. Метод позволяет (на 1 л воды 1 кг вещества) кипятят до диагностировать заражение всеми видами гель образования пленки и, не фильтруя, помещают минтов.
в сухие бутылки. Относительная плотность Пр и ме ч а н и я. 1. Кроме Лотоса, мож раствора 1,38. 2. Возможно использование но использовать и другие порошки, но при флотационного раствора по Брудастову и Крас- условии подбора соответствующей концен ноносу: 900 г нитрата натрия и 400 г нитра- трации раствора, для чего берут максималь та калия при подогревании растворяют в 1 л ную навеску, растворяющуюся без осадка. 2.
воды. Относительная плотность раствора Кал следует помещать в раствор детергента 1.47Ч1,48. не более чем через 1 ч после дефекации.
Сп е ц и а л ь н о е о б о р у д о в а ние. Обнаружение яиц гельминтов в перианально I. Микроскоп. 2. Химические стаканы вмести- ректальных соскобах с помощью деревянного мостью 200 мл. шпателя. Пр и н ц и п. Яйца гельминтов счи Ход ис с л е д о в а ния. В 100Ч200 мл щают деревянным шпателем с перианальных одного из флотационных растворов размеши- складок.
вают 5Ч10 г кала. Удаляют стеклянной пало- Реакт ивы. 1. 50% раствор глицерина.
чкой с поверхности всплывшие крупные частицы. 2. 1 % раствор гидрокарбоната натрия (NaHCO ).
К поверхности солевого раствора прикладывают Сп е ц и а л ь н о е о б ор у д о в а ние :
предметное стекло. Предметное стекло должно микроскоп.
полностью соприкасаться с поверхностью раст- Ход ис с л е д о в а ния. Соскоб произво вора. Раствор отстаивают 20Ч30 мин, затем дят с поверхности перианальных складок у ануса предметное стекло снимают и просматривают и в нижних отделах прямой кишки шпателем.
под микроскопом без покровного стекла всю Соскоб делают до дефекации утром или вечером пленку, прилипшую к поверхности предметного (через 2Ч3 ч после того, как больной лег стекла. Чтобы избежать высыхания препарата, спать). Шпатель перед соскабливанием смачи пленку можно смешать с 2 каплями 50 % раст- вают в 50 % растворе глицерина или в 1 % вора глицерина. растворе гидрокарбоната натрия. Материал со Оце нка ре з у ль т а т ов. Отмечают шпателя помещают с помощью покровного все яйца гельминтов, найденные в препарате. стекла на предметное стекло в каплю 50 % Можно обнаружить яйца аскарид, власоглавов, глицерина и, накрыв покровным стеклом, микро анкилостомид, тениид, трематод. скопируют. Шпатель после взятия соскоба сжи Обнаружение яиц гельминтов методом Кра- гают.
сильиикова (применение детергентов). Пр ин- Оце нк а р е з у л ь т а т о в. Метод приме цип. Поверхностно-активные вещества, кото- няют для диагностики тениаринхоза и энтеро рые находятся в составе детергентов, осво- биоза.
бождают яйца гельминтов от каловых масс Обнаружение личинок гельминтов по методу и концентрируют яйца в осадке. Бермана. Пр и н ц и п. Метод основан на спо Ре а кт ив. 1 % раствор стирального поро- собности личинок гельминтов мигрировать по шка Лотос" (порошок высушивают в сушиль- направлению к теплу.
Ре а к т и в ы не требуются. жира при легком прижатии покровного стекла Сп е ц и а л ь н о е обору д ов а ние. 1. меняют свою форму, в то время как яйца гель Микроскоп. 2. Металлическая сетка. 3. Штатив. минтов при этом не изменяются.
4. Зажимы. 5. Резиновые трубки. 6. Центри- Растительные клетки иногда по величине фуга. и наличию двухконтурной оболочки могут напо Т е х н и к а ис с л е д ов а ния. Стеклян- минать яйца гельминтов, но контуры их обычно ную воронку с резиновой трубкой на узком неправильные, а отдельные клетки, встречаю конце укрепляют в штативе (трубка зажата щиеся в одном препарате, имеют различные зажимом). Металлическую сетку с 5Ч10 г кала величину и форму. Одинаковыми по размеру помещают в воронку, заполняют воронку водой и форме, похожими на яйца гельминтов оказы (40Ч50 С) так, чтобы вода касалась нижней ваются споры некоторых грибов, хорошо части сетки. Через 4 ч, когда личинки перейдут сохраняющиеся в кале. Споры сморчка по форме в теплую воду и скопятся в нижней части очень похожи на яйца власоглава, споры под трубки, зажим открывают и сливают воду в березовика и подосиновика напоминают яйца центрифужные пробирки. Центрифигируют 2Ч3 острицы, крупные споры некоторых растений мин, надосадочную жидкость сливают, а осадок похожи на онкосферы цепней. Но все они значи помещают на предметное стекло и микроскопи- тельно меньшего размера, чем яйца гельминтов, руют. н не имеют характерного содержимого (напри Оце нка р е з у л ьт а т о в. Метод приме-,мер, крючьев в онкосферах цепней).
няют при диагностике стронгилоидоза. Из элементов, еще более похожих на яйца Обнаружение личинок гельминтов при куль- паразитических червей человека, следует упомя тивировании их на фильтровальной бумаге нуть яйца Hetetodera marioni Ч мелкой немато (метод Харада и Мори). Пр и нц и п. В тепле ды, паразитирующей на корнеплодах. Они на влажной фильтровальной бумаге из похожи на яйца трихостронгилид, но отличаются яиц анкилостом развиваются филяриевидные бобовидной формой, а также тем, что на по личинки. люсах между оболочкой и содержимым яйца Сп е ц и а л ь н о е обору дов а ние : (шарами дробления) расположены бесцветные микроскоп. образования неправильно овальной формы.
Ход ис с л е д о в а ния. На фильтроваль- Эти яйца являются транзитными. Встречают ную бумагу (15 X 1,5 см) наносят 0,5 г кала. ся в кале и крупные яйца мучного клеща, по Бумагу помещают в пробирку, на 1/4 заполнен- размерам приближающиеся к яйцам печеночной ную водой так, чтобы свободный от кала конец двуустки. Они овальные, светло-желтые с тонкой был под водой, а другой выступал из пробирки оболочкой и без крышечки.
и был зажат пробкой. Пробирка 5Ч6 дней Некоторое сходство с личинками червей стоит в термостате при 28С. Личинки, появив- (например, строигилоида) могут иметь расти шиеся из яиц, оседают на дне пробирки. Бума- тельные волоски.
гу извлекают из пробирки и уничтожают, жид- Сравнительные данные о яйцах гельминтов кость исследуют с помощью лупы. Для уточне- см. в табл. 18.
ния можно центрифугировать жидкость и микроскопировать осадок.
Оце нк а ре з у л ь т а т ов. Под лупой Лит е р а т у р а. Бурдасов А. Н., Руста выявляют филяриевидные личинки анкилостомы мов Б. Р., Краснонос Л. Я.Ч В кн.: Актуальные проблемы медицинской паразитологии и тропи или некаторов.
ческой медицины. Тбилиси, 1970, с. 185;
Калап Пр и ме ч а н и я. 1. В теплое время года тарян Е. В.ЧМед. паразитол., 1938, № 1, пробирки можно держать при комнатной е. 142;
Красильников А. А.Ч Мед. паразитол., температуре, время инкубации в этих 1970, № 3, с. 318;
№ 6, с. 678;
Майорова Л. А., условиях 8Ч10 дней. 2. Кал для исследова Москвитина М. Г. Предложения по унификации ния нужно брать не более чем через 1 ч после методов лаб. диагн. гельминтозов.Ч В кн.: Уни дефекации.
фицированные методы клин. лаб. исследований/ Ошиб ки, в о з мо жн ые пр и опре- /Под ред. В. В. Меньшикова. М., 1972, вып. 4, д е л е ни и я и ц гельминтов. -Неопытный с. 275;
Махмудова Ш. А.Ч Мед. паразитол., микроскопист может при исследовании кала на 1968, № 2, с. 180;
Михайлова Н, Д. Пособие яйца гельминтов быть введен в заблуждение по копрологическнм исследованиям.Ч Л., 1962;
присутствием в препарате элементов, близко их Подъяпольская В. П., Капустин В. Ф. Глистные напоминающих. Это растительные клетки, ка- болезни человека.Ч М., 1958;
Сафаралиев Р. С.
пельки жира, пузырьки воздуха и т. д. Отличи- Медицинская паразитология и паразитарные тельными признаками яиц гельминтов являются болезни.Ч М., 1963;
Соловьев М. М., Москви правильная, большей частью овальная или тина М. Г. Предложения по унификации методов округлая форма, наличие ясно выраженной лаб. диагностики простейших кишечника.Ч оболочки, определенный размер, характерное В кн.: Унифицированные методы клин. лаб.
внутреннее содержимое. Пузырьки воздуха отли- исследований/Под ред. В. В. Меньшикова. М., чаются от яиц гельминтов очень резкими 1974, вып. 5, с. 275;
Katoh Katsuya.Ч Мед.
контурами и прозрачной серединой. Капли паразитол., 1970, № 6, с. 733.
2.3. ЖЕЛУДОЧНАЯ СЕКРЕЦИЯ Исследование желудочной секреции склады- ка желудка. Необходимым условием полного вается из двух основных этапов Ч желудочного извлечения желудочного содержимого является зондирования, проводимого с использованием введение зонда на глубину, рассчитанную стимуляторов секреции желудка, результатом следующим образом: рост пациента в санти которого является получение желудочного со- метрах минус 100. В случае необходимости держимого в различные периоды секреторной положение зонда можно контролировать рентге деятельности желудка, и исследования получен- нологически. После введения зонда полностью ного желудочного содержимого. Результатом извлекают содержимое желудка натощак, что правильного проведения обоих этапов исследо- составляет отдельную порцию для исследова вания являются данные, позволяющие досто- ния. Надо стремиться, чтобы от введения зонда верно оценивать секреторную деятельность до извлечения порции натощак прошло не более желудка. 5 мин, т. е. длительности латентного периода Общие требования к зондовому исследова- возбуждения желудочных желез. Затем в тече нию желудочной секреции: получение чистого кие часа собирают секрет желудка, выделяю желудочного сока, максимально достоверное щийся в результате стимулирующего влияния изучение работы желез желудка в различные зонда и аспирации (базальный секрет), а потом периоды секреторного цикла, применение аде- уже начинают активную стимуляцию работы кватного поставленным целям стимулятора слизистой оболочки желудка, после чего желу желудочной секреции, изучение качественного дочный сок собирают также в течение часа.
и количественного состава желудочного сока, Аспирацию базалыюго и стимулированного сока простота выполнения и правильная оценка проводят по 5 мин через 10-минутные интервалы противопоказаний к данному исследованию. или непрерывно, отмечая при этом 15-минутные порции желудочного секрета. Таким образом, за каждый час получают 4 порции желудочного 2.3.1. Методы желудочного зондирования сока, которые составляют так называемое часовое напряжение соответствующего периода Метод исследования толстым зондом надо желудочной секреции. Полученные порции расценивать как устаревший, так как одномо- желудочного сока подвергают физико-хими ментность получения желудочного содержимого ческому исследованию.
не позволяет достоверно оценить желудочную Метод зондирования желудка по Н. И. Ле секрецию ни с качественной, ни с количествен- порскому. Пр и н ц и п. Получение чистого ной стороны. Преимущество многомоментного желудочного сока натощак и после стимуляции исследования желудочной секреции тонким секреции введением в желудок капустного сока зондом заключается в получении чистого же- или 7 % отвара сухой капусты. Влияние их на лудочного сока на протяжении длительного вре- желудочную секрецию одинаково. В практи мени, т. е. на различных этапах секреторной ческой медицине чаще пользуются 7 % отваром деятельности желудка. сухой капусты.
Унифицированная методика зондирования Пр и г о т о в л е н и е у н и ф и ц и р о в а н желудка при многомоментном исследовании ног о с т и м у л я т о р а же л у д о ч н о й желудочной секреции (1974). Пр и н ц и п с е к р е ц и и о т в а р а из с у х о й ка пу з о н д и р о в а н и я т о н к и м з ондом. По- ст ы (1974): 21 г сухой капусты заливают 500 мл лучение чистого желудочного секрета путем воды и кипятят 30Ч40 мин, пока не останется активной аспирации на различных этапах сек- приблизительно 300 мл жидкости. Отвар проце реторной деятельности желудка.
живают через 2 слоя марли и хранят в холо Об о р у д о в а ние. 1. Тонкий зонд (полая дильнике. Окончательная стандартизация сти резиновая трубка диаметром 4Ч5 мм, длиной мулятора достигается последующим титрова около 1,5 м с метками на расстоянии 50Ч55 см нием. 10 мл отвара титруют 0,1 н. раствором и 70Ч75 см от слепого конца зонда. 2 Пробир- едкого натра в присутствии 1Ч2 капель 1 % ки. 3. Штативы для пробирок. 4. Лоток. 5. Ворон- спиртового раствора фенолфталеина до легкого ка. 6. Шприц вместимостью 20 мм или водо- потемнения, в качестве контроля используют струйный насос стандартной конструкции, или исходный отвар сухой капусты. Количество аспирационный вакуум-отсос. 7. Один из актив- щелочи, пошедшей на титрование, умножают ных стимуляторов желудочной секреции. на 10. Полученная величина является титром Ход з о н д и р о в а н и я. Зондирование приготовленного отвара. Титр отвара для сти лучше проводить в специальном помещении. муляции желудочной секреции должен быть 20;
Исследование начинают утром натощак после если он больше, то отвар разбавляют кипяче 14-часового голодания. Конец тонкого зонда ной водой, если меньше, то кипятят до получения помещают в глубине глотки на корень языка нужной концентрации.
н предлагают пациенту сделать несколько не- Ход и с с л е д о в а ни я. После аспирации торопливых глотательных движений, благодаря содержимого желудка натощак через зонд при чему зонд продвигается по пищеводу. Введение помощи воронки в желудок вводят 200 мл отвара зонда до первой метки свидетельствует о том, капусты, подогретого до 37С, через 10 мин что внутренний конец его находится в области извлекают 10 мл содержимого (контрольная дна желудка, а продвижение зонда до второй порция), а еще через 15 мин аспирируют из метки указывает на то, что он достиг привратни- желудка все содержимое, затем в течение часа с интервалами 15 мин собирают чистый желу- гнилостного запаха свидетельствует о наруше дочный сок, который наряду с порцией натощак нии эвакуации из желудка.
подвергают исследованию (всего 5 порций же- Примеси. Обычно в желудочном соке при лудочного сока). месей практически нет, за исключением неболь Субмаксимальный гистаминовый тест (моди- шого количества слизи. Остатки пищевых масс, фицированный метод Лямблеиа). Пр инцип. которые могут быть обнаружены, говорят о Получение чистого желудочного сока до и после нарушении эвакуации из желудка, а примесь стимуляции секреции введением раствора гиста- большого количества слизи Ч о поражении его мина. слизистой оболочки.
Ход ис с л е д о в а ния. После аспирации Химическое исследование. Определение кис желудочного содержимого натощак в течение лотности. Пр инцип. Определение концен часа собирают базальный секрет с интервалами трации свободной, связанной НС1 и общей кис 15 мин, затем пациенту вводят подкожно гиста- лотности методом нейтрализации при титрова мнна дигидрохлорид 0,008 мг/кг (0,08 мг на нии щелочью в присутствии индикаторов, 10 кг) или гистамина фосфат 0,01 мг/кг, далее меняющих окраску в зависимости от рН среды.
на протяжении часа получают четыре 15-минут- Диметиламиноазобензол меняет окраску с крас ные порции желудочного сока, отделяющегося ной на желтую в диапазоне рН от 2,4 до 4,0, в ответ на введение гистамина. ализаринсульфоновокислый натр Ч с желтой на Максимальный гистамнновый тест Кейя в фиолетовую в зоне рН от 5,0 до 6,8, а фенол модификации Е. С. Рысса и А. Р. Лужис. фталеин приобретает красную окраску при Пр инцип. Получение чистого желудочного рН более 8,2.
сока до и после стимуляции секреции макси- Посуда и об ору д ов а ние. 1. Бю мальной дозой гистамина на фоне антигистамин- ретки вместимостью 20;
25 или 50 мл. 2. Штатив ных препаратов. Бунзеиа. 3. Химические стаканы вместимостью Ход ис с л е д ов а ния. После аспирации 50 мл. 4. Пипетки Мора или градуированные желудочного сока натощак в течение 30 мии на 5 мл. 5. Воронки. 6. Пробирки. 7. Фильтры собирают базальный секрет, затем внутри- бумажные.
мышечно вводят 2 мл 2 % раствора супрастина Метод Михаэлиса. Ре а кт ивы. 1. 1% (или другого блокатора Hi-рецепторов гистами- спиртовой раствор фенолфталеина. 2. 0,5 % на) и продолжают еще 30 мин собирать базаль- спиртовой раствор диметиламиноазобензола, ный секрет. Далее вводят подкожно дигидро- 3. 0,1 н. раствор едкого натра.
хлорид гистамина 0,025 мг/кг и после этого в Ход ис с л е д о в а ния. В химический течение часа продолжают собирать желудочный стакан отмеривают 5 мл профильтрованного сок, отмечая 15-минутные интервалы. желудочного сока, затем вносят каплю раствора диметиламиноазобензола и каплю раствора Пр и ме ч а н и е. Как эффективные сти фенолфталеина. Титруют из бюретки раствором муляторы секреции, позволяющие получить едкого натра, предварительно отметив уровень чистый желудочный сок и не дающие по реактива в бюретке (1 уровень). При появлении бочных эффектов, применяют также гастрии желто-оранжевой окраски (цвет семги) отме (2 мкг/кг) и его синтетический аналог пента чают II уровень, а при первом появлении гастрин (6 мкг/кг) подкожно.
лимонно-желтой окраски Ч III уровень, затем продолжают титровать до перехода окраски в стойко розовый цвет Ч IV уровень.
2.3.2. Исследование Расчет. Количество щелочи, пошедшей на желудочного содержимого титрование до первого изменения окраски (раз ница между II и I уровнем), определяет концен Исследование желудочного сока включает трацию свободной HCI в желудочном соке.
определение физических свойств, химическое и Количество щелочи, пошедшей на все титрова микроскопическое исследование. ние, от красной окраски диметиламиноазобензо Физические свойства. Количество. Измеряют ла в резко кислой среде до красной окраски каждую порцию желудочного сока и высчиты- фенолфталеина в щелочной среде, т. е. разница вают,его объем во все фазы секреторного цикла. между IV и I уровнем, соответствует общей Объем сока натощак не должен превышать кислотности. Количество щелочи, пошедшей на 50 мл, в условиях базальной секреции объем титрование до уровня, означающего среднее сока за час может быть 50Ч100 мл, при иссле- арифметическое между III и IV уровнем, со довании по Лепорскому после стимуляции часо- ответствует концентрации всей HCI (т. е. сумме вой объем секреции 50Ч110 мл, при субмакси- свободной и связанной), а концентрацию свя мальной стимуляции гистамином Ч 100Ч140 мл занной HCI находят по разности между всей за час, а в ответ на максимальную стимуляцию HCI и свободной НС1. Разность между общей за час выделяется 180Ч220 мл желудочного кислотностью и всей НС1 называют кислотным сока.
остатком, который определяется содержанием в Цвет. Обычно желудочное содержимое бес- желудочном соке органических кислот и кислых цветное, желтая или зеленоватая окраска желу- солей фосфорной кислоты. Таким образом, все дочного сока говорит о примеси желчи, а красно- кислореагирующие вещества определяют в ватая или коричневатая Ч о примеси крови.
одной порции.
Запах. Нормальный желудочный сок запаха Пр име р расче т а. Уровень I в бюрет практически не имеет, появление неприятного ке Ч 4, уровень II Ч 5,4 (желто-оранжевая окраска), уровень III Ч 6 (лимонно-желтый Микрохимический способ определения кис цвет), уровень IV Ч 6,8 (стойкий розовый), лотности. Обору д ов а ние ;
микробюретка.
среднее арифметическое между III и IV уро- Ре а к т ив ы те же, что и для метода Ми внем Ч 6,4. хаэлнса.
Для титрования было взято 5 мл желудочно- Ход ис с л е д о в а ния. В стакан для го сока;
расчет ведется на 100 мл, поэтому титрования помещают 1 мл профильтрованного количество щелочи, потраченной на разных эта- сока и 5 мл дистиллированной воды. Титруя пах титрования, умножают на 20 (если титруют из микробюретки, определяют концентрацию 10 мл сока, то умножают соответственно на 10). свободной НС1 и общую кислотность по методу Михаэлиса.
1. Свободная HCI: 5,4 Ч 4 = 1,4 X 20 = Расчет. 1. Содержание свободной HCI = 28.
равно количеству щелочи, пошедшей на титро 2. Общая кислотность: 6,8 Ч 4 = 2,8 X вание до желто-оранжевой окраски (цвет семги) X 20 = 56.
диметиламиноазобензола, умноженному на 100.
3. Сумма свободной и связанной HCI: 6,4 Ч 2. Общей кислотности соответствует количе Ч 4 = 2,4 X 20 = 48.
ство щелочи, пошедшей на все титрование, 4. Связанная HCI: 48 Ч 28 = 20.
уменьшенное на 0,05 (индикаторная поправка) 5. Кислотный остаток: 56 Ч 48 = 8.
и умноженное на 100. При низкой кислотности Унифицированное определение кислотности индикаторная поправка должна быть равна методом Тепффера (1974). Ре а кт ив ы. 1. 1% 0,03 мл.
спиртовой раствор фенолфталеина. Интервал Пр име ч а ние. Метод применяют в тех' перехода окраски при рН 8,2Ч10,0. 2. 0,5 % случаях, когда объем полученного желудоч спиртовой раствор 4-диметиламиноазобензола.
ного сока небольшой.
Интервал перехода окраски при рН 2,9Ч4,0.
3. 1 % водный раствор ализаринсульфоновокис- Спо с о б ы в ыр а же н и я кис лот но лого натра. Интервал перехода окраски при сти. Традиционным способом выражения кис рН 4,3Ч6,3. 4. 0,1 н. раствор едкого натра. лотности желудочного сока являются титра Ход и с с л е д о в а н и я В 2 стакана ционные единицы (ТЕ) Чобъем 0,1 н. едкого, отмеривают по 5 мл профильтрованного желу натра, необходимый для нейтрализации кислых дочного сока. В первую порцию вносят по 2 кап- валентностей в 100 мл желудочного сока. По ли диметиламиноазобензола и фенолфталеина следние годы концентрацию НС1 в желудочном и определяют концентрацию свободной HCI и соке более принято выражать в миллимолях общую кислотность. Во вторую порцию желу- на 1 л желудочного секрета. Известно, что дочного сока прибавляют каплю ализаринсуль- 1 мл 0,1 н. раствора едкого натра эквивалентен фоновокислого натра и титруют до перехода 1 мл 0,1 н. раствора НС1 (1 ТЕ), или 0,1 ммоль желтой окраски в слабо-фиолетовую. В зоне HCI, отсюда концентрация HCI в 100 мл сока, перехода этого индикатора нейтрализуются выраженная в миллимолях НС1, в 10 раз мень кислореагирующие вещества, кроме связанной ше, чем в титрационных единицах.
HCI, которую находят по разности между объ- Приме р. Если концентрация HCI 40 ТЕ, емом щелочи, пошедшей на нейтрализацию всех то это соответствует концентрации 4 ммоль в кислых валентностей желудочного сока (титро- 100 мл сока, или 40 ммоль в 1 л сока. Таким вание с фенолфталеином), и объемом, пошед- образом, числовое значение концентрации HCI, шим на титрование с ализаринсульфоновокис- выраженное в титрационных единицах, совпа лым натром. Все полученные величины умно- дает с числовым значением концентрации НС1, жают на 20 для пересчета на 100 мл желудочно- выраженным в миллимолях на 1 л (40 ТЕ = го сока. = 40 ммоль/л НС1).
Метод определения кислотности в одной Но р м а л ь н ы е в е л и ч и н ы. Общепри порции желудочного сока с тремя индикаторами. нятое представление о нормальной концентра Ре а кт ив ы. 1. 0,5% спиртовой раствор ди- ции HCi в желудочном соке является весьма метиламиноазобензола. 2. 1 % спиртовой относительным, однако Ю. И. Фншзон-Рысс раствор фенолфталеина. 3. 0,5 г метилового в своей монографии приводит наиболее харак красного;
0,5 г майгрюнвальда;
100 мл 50 % терные величины концентрации кислоты в зави спирта. 4, 0,1 н. раствор едкого натра. симости от фазы секреторного периода и метода Ход ис с л е д о в а ния. К 5 мл про- стимуляции желудочной секреции.
фильтрованного желудочного сока добавляют Натощак: общая кислотность Ч до 40 ТЕ по капле реактивов 1 и 2, титруют едким натром (40 ммоль/л), свободная HCI Ч до 20 ТЕ до желто-оранжевой окраски (цвет семги), (20 ммоль/л).
затем прибавляют каплю реактива 3, при этом В условиях базальной секреции: общая окраска изменяется на розово-фиолетовую, ти- кислотность от 40 до 60 ТЕ (40Ч60 ммоль/л), труют едким натром до появления зеленого свободная НС1 от 20 до 40 ТЕ (20Ч40 ммоль/л);
цвета, а затем до стойкой розовой окраски. при исследовании по методу Н. И. Лепорского Общую кислотность и свободную HCI рас- после энтеральной стимуляции капустным отва считывают так же, как в описанных выше ме- ром концентрация HCI остается такой же, как тодах, а концентрации связанной НС1 соответ- и в условиях базальной секреции. При примене ствует количество щелочи, пошедшей на титро- нии в качестве стимуляции субмаксимальных вание за время изменения зеленой окраски до доз гистамина концентрация общей HCI от стойкой розовой. до 100 ТЕ (80Ч100 ммоль/л), свободной HCI Ч от 65 до 85 ТЕ (65Ч85 ммоль/л), а при исполь- acid output (пиковая кислотная продукция), зовании в качестве стимулятора максимальной который вычисляют при проведении максималь дозы гистамина общая кислотность колеблется ного гистаминового теста, беря две смежные от 10.0 до 120 ТЕ (100Ч120 ммоль/л), а свобод- порции желудочного сока, полученные за 30 мин ная HCI Чот 90 до ПО ТЕ (90Ч110 ммоль/л). и отличающиеся наибольшей концентрацией Определение дебита НС1. Дебит HCI отра- HCI. Показатели 15-минутной продукции скла жает валовое количество выделенной желудком дывают, а полученный результат удваивают НС1 за определенный промежуток времени. (для пересчета получасового дебита HCI на Наиболее часто вычисляют за час исследования часовой).
в различные фазы желудочной секреции. Разли- Вычислять ВАО, МАО и РАО целесообраз чают дебит: 1) свободной НС1;
2) связанной нее всего на основании данных о концентрации НС1;
3) НС1 (кислотная продукция). Последний HCI, полученных при титровании с использо показатель определяют, исходя из цифр общей ванием рН-метра.
кислотности. При этом более правильно титро- Но р ма л ь н ые в е л ич ины. Количество вать желудочный сок под контролем рН-метра НС1 натощак не более 2 ммоль, свободной до рН 7,0. Дебит-час определяют только при НС1 не более 1 ммоль. В условиях базальной условии получения всего желудочного содержи- секреции дебит-час HCI колеблется от 1,5 до мого за час. 5,5 ммоль, свободной НС1 Ч от I до 4 ммоль.
Величину кислотовыделеиия вычисляют по В период стимуляции желудочной секреции по двум формулам, которые несколько отличаются методу Н. И. Лепорского дебит-час НС1 колеб друг от друга в зависимости от выражения лется от 1,5 до 6 ммоль, свободной HCI Ч дебита (в миллиграммах или миллиэквивален- от I до 4,5 ммоль. При субмаксимальиой стиму тах, т. е. миллимолях) НС1. ляции гистамином дебит-час HCI Ч от 8 до Для расчета дебита НСl в миллиграммах 14 ммоль, свободной НС1 Ч от 6,5 до 12 ммоль.
применяют следующую формулу: В ответ на максимальную стимуляцию гиста мином часовая кислая продукция бывает от 18 до 26 ммоль, а дебит-час свободной HCI Ч от 16 до 24 ммоль.
где и Ч дебит HCl (мг);
v Ч объем порции Определение дефицита НС1. Пр инцип.
желудочного сока (мл);
Е Ч концентрация НС1 Определение дефицита HCI основывается на (в титрационных единицах);
0.0365 Ч количе- титровании анацидного желудочного сока 0,1 н.
ство миллиграммов HCI в 1 мл сока при концен- раствором этой кислоты до появления ее в трации ее, равной 1 ТЕ. Число слагаемых опреде- свободном виде.
ляется числом порций за время исследования. Ре а кт ив ы. 1. 1 % спиртовой раствор Для расчета дебита НС1 в миллимолях (для диметиламиноазобензола. 2. 0,1 н. раствор HCI.
НС1 эти величины совпадают) применяют дру- Ход ис с л е д о в а ния. К 5 мл (или гую формулу: 10 мл) желудочного сока добавляют каплю раствора диметиламиноазобензола и титруют раствором НС1 до появления розовой окраски.
Полученный результат умножают на 20 или 10 в зависимости от объема титруемого сока.
где D Ч дебит HCI (ммоль), а остальные обо- Количество HCI, затраченное на титрование значения те же, что и в предыдущей формуле, 100 мл сока, будет соответствовать ее дефициту.
так как числовые значения концентрации НС1, Кл и н и ч е с к о е з на че ние. Макси выраженные в титрационных единицах на 100 мально возможный дефицит НС1 составляет мл и в миллимолях на I л желудочного сока, 40 ТЕ. Такой дефицит указывает на полное совпадают. прекращение секреции HCI (абсолютная, дей Для облегчения подсчета дебит-часа НС1 ствительная или целлюлярная ахлоргидрия).
можно пользоваться номограммой. Линейкой Если дефицит выражается меньшей величиной, соединяют нанесенные на противоположных то НС1 выделяется, но из-за нейтрализации ветвях кривой цифры, соответствующие объему не может быть обнаружена (относительная, и кислотности данной порции желудочного мнимая или химическая ахлоргидрия).
сока. В месте пересечения линейки с верти- Определение молочной кислоты. Пр и нц и п.
кальной линией находят значение дебита, выра- Методы основаны на изменении окраски раст женное в миллиграммах HCI или в миллимолях вора за счет образования лактата железа.
HCI (для HCI числовые значения миллиэкви- Проба с карболовой кислотой. Ре а кт ивы.
валентов и миллимолей совладают). 1. 1 % раствор карболовой кислоты. 2. 10 % В нашей стране принято определять дебит раствор хлорного железа.
свободной HCI. За рубежом ориентируются на Ход ис с л е д о в а ния. К 2Ч3 мл раст дебит, вычисляемый на основании величин вора карболовой кислоты приливают каплю общей кислотности. Часовой дебит HCI базаль- хлорного железа;
раствор приобретает фиоле ной секреции обозначают как ВАО Ч basal acid товое окрашивание. Затем по каплям прили output (базальная кислотная продукция). Ана- вают предварительно профильтрованный желу логичный показатель при максимальной гиста- дочный сок, который опускается на дно про мнновой стимуляции получил название МАО Ч бирки, где появляется желтоватое окрашивание.
maximal acid output. Есть еще показатель Пр и ме ч а н и я. 1. Присутствие свободной продукции, получивший название РАО Ч peak НС1 снижает чувствительность пробы, поэто му при ее наличии следует проводить иссле- Таблица 23. Таблица Туголукова для пере дование с эфирной вытяжкой из желудочного счета показателей переваривания белкового сока, которую готовят следующим образом: субстрата (2 % раствор сухой плазмы) иа содер 5Ч10 мл профильтрованного желудочного жание пепсина в 0,01 мл желудочного сока или сока тщательно взбалтывают с 3Ч5 мл эфи- уропепсина в 1 ил мочи ра. Эфирный слой отсасывают пипеткой в Показа- Содержание Показа- Содержание химический стаканчик, затем выпаривают тель пе- пепсина или тель пе- пепсина или на водяной бане и остаток растворяют ревари- уропепсина ревари- уропепсина в 2Ч3 мл воды, с этим раствором проводят вания - (мг) вания (мг) описанную выше пробу. 2. Пробу можно про водить без карболовой кислоты, внося только раствор хлорного железа. В этом случае сла- 1 0,005 20 0, бо-желтое окрашивание при наличии молоч- 2 0,008 21 0, ной кислоты становится более интенсивным. 3 0,010 22 0, 4 0,015 23 0, Кл и н и ч е с к о е з на ч е ние. Молочная 5 0,017 24 0, кислота в желудочном содержимом обычно от б 0,020 25 0, сутствует, а начинает образовываться в резуль 7 0,025 26 0, тате усиленной жизнедеятельности палочек мо 0, 8 0,027 лочнокислого брожения при отсутствии или 9 0,030 28 0, очень низкой концентрации свободной НС1, 10 0,035 29 0, Существует мнение, что она может быть про 11 0,037 30 0, дуктом метаболизма раковых клеток.
12 0,040 31 0, Исследование ферментообразующей функ 13 0,045 32 0, ции унифицированным методом Туголукова 14 0,047 33 0, (1974). Принцип. Определение протеолити 15 0,050 34 0, ческой активности желудочного сока по количе 16 0,055 35 1, ству расщепленного белка.
17 0,062 36 1, Реактивы. 1.2% раствор сухой плазмы 18 0,067 37 1, на 0,1 н. растворе НС1. 2. 10 % раствор трихлор 19 0,075 Ч уксусной кислоты.
Оборудование. 1. Центрифужные пробирки (точно градуированные). 2. Пробирки химические. 3. Пипетки вместимостью 1;
2 и 10 мл.
4. Микропипетки вместимостью 0,1 мл. 5, Цент сока, полученный результат умножают на 10 рифуга. 6. Термостат.
(для выражения концентрации фермента в мил Ход ис с ле д ов а ния. Желудочный сок, лиграмм-процентах) или на 100 (для выражения профильтрованный через бумажный фильтр, концентрации фермента в граммах на 1л).
разводят в 100 раз (9,9 мл воды н 0,1 мл желу Но р ма л ь н ые в е л и ч и н ы. Подан дочного сока, отмеренного микропипеткой). В ным В. Н. Туголукова, концентрация пепсина одну градуированную центрифужную пробирку в желудочном соке натощак составляет 0Ч помещают 1мл разведенного сока (опыт), в дру 2100 мг % (0Ч21 г/л), а после стимуляции гую Ч 1 мл предварительно прокипяченного энтеральным раздражителем (например, отва разведенного сока (контроль). В обе пробирки ром капусты) Ч 2000Ч4000 мг % (20Ч40 г/л).
добавляют по 2 мл 2 % раствора сухой плазмы Фармакопейный препарат пепсина, которым и ставят их в термостат при 37 С на 20 ч. По про пользовался В. Н. Туголуков для составления шествии этого времени в каждую пробирку при таблицы, содержит 1 % кристаллического пеп ливают по 2 мл 10 % трихлоруксусной кислоты, сина. Следовательно, истинная концентрация перемешивают стеклянной палочкой до однород пепсина натощак 0Ч21 мг % (0Ч0,21 г/л), а ной суспензии и центрифугируют 10 мин при после энтеральной стимуляции Ч 20Ч40 мг % 1500 об/мин.
(0,2Ч0,4 г/л). Концентрация пепсина, опреде Расчет. По разнице величин осадка в ленная методом Туголукова, при субмаксималь контроле и опыте определяют степень перевари ной стимуляции гистамина составляет 50Ч65 мг % вания белка с последующим пересчетом на коли (0,5Ч0,65 г/л), а при максимальной Ч 50Ч чество пепсина. Показатель переваривания 75 мг% (0,5Ч0,75 г/л).
субстрата вычисляют по формуле:
Унифицированный метод определения про теолнтической активности по Ансоиу и Мирско му н модификации М. П. Черникова (1974).
Пр инцип. Метод основан на способности пеп где М Ч показатель переваривания;
А Ч объем сина расщеплять белковую молекулу гемоглоби осадка в контроле;
В Ч объем осадка в опыте;
на с освобождением тирозина и триптофана, не 40 Ч постоянная величина, установленная осаждаемых трихлоруксусной кислотой.
экспериментальным путем. Реактивы. 1. 0,1 М глициновый буфер рН Пересчет показателя переваривания на со- 1,5: глицина 7,505 г и хлорида натрия 6,85 г ра держание фермента производят с помощью створяют в воде, доводя объем до 1 л;
к 73 мл табл. 23. В связи с тем что для исследования приготовленного раствора добавляют 67 мл 0,1 М берут 0,1 мл разведенного в 100 раз желудочного раствора НС1. Тщательно перемешивают, вели чину рН определяют потенциометрически. Хра- Ход исследования. В мешочек из нят в холодильнике. 2. 1 % раствор гемоглобина в тонкой резины помещают 0,15 г метиленового си 0,1 М глициновом буфере рН 1,5. 3. Калибровоч- него, перевязывают кетгутом. Концы нити корот ные растворы пепсина: для стандартного раство- ко обрезают. Больной проглатывает мешочек не ра 7,5 мг лиофилизированного кристаллическо- посредственно перед завтраком и собирает мочу го пепсина растворяют в 1 л воды. Полученная через 3;
5 и 20 ч. Определяют время появления концентрация пепсина в растворе равна 7,5 мкг/мл. и интенсивность окраски мочи метиленовым си Из этого раствора готовят разведения в 2;
4 и ним в голубой, синий или зеленый цвет.
8 раз и получают растворы с содержанием пеп- Но р ма л ь н ые по к а з а т е л и. Первая сина 3,75;
1,87 и 0,94 мкг/мл. 4. 10 % раствор порция мочи не окрашена, вторая окрашена в трихлоруксусной кислоты. 5. 0,1 н. раствор HCI. бледно-зеленый, третья Ч в интенсивно-зеленый Сп е ц и а л ь н о е обору дов а ние. или синий цвет.
I. Секундомер. 2. Спектрофотометр.
Пр име ч а ния. 1. При отсутствии окрас Ход ис с л е д о в а ния. Опытная проба:
ки мочу необходимо прокипятить, так как в центрифужную пробирку наливают 1 мл ра метиленовый синий иногда может выделять створа гемоглобина и 1 мл разведенного в 10 или ся в виде бесцветных соединений, из которых 100 раз желудочного сока. Инкубируют при освобождается при нагревании. 2. Для 37 С 10 мин (точно по секундомеру). Затем облегчения расфасовки метиленового сине добавляют 3 мл 10 % раствора трихлоруксусной го можно пользоваться прописью шариков кислоты и оставляют при комнатной температуре пилюль: Methyleni caerulei 0,15 г;
Butyri на I ч. Центрифугируют 10 мин при 1500 об/мин.
cacao 0,3 г. Шарики хранят в холодильнике.
Измеряют оптическую плотность надосадочной 3. Вместо метиленового синего в качестве жидкости при длине волны 280 им против ди индикатора можно использовать 0,4 г йоди стиллированной воды.
да калия. Последний после переваривания Холостую пробу проводят так же, как опыт кетгута появляется в слюне (в норме через ную, но без добавления трихлоруксусной кис 35Ч45 мин) и может быть обнаружен в лоты.
реакции с раствором крахмала.
Расчет. Концентрацию пепсина в иссле дуемом соке определяют по калибровочному Кл и н и ч е с к о е з на ч е ние. При от графику;
активность пепсина выражают в ми сутствии в желудочном соке пепсина или НС1, крограммах на 1 мл желудочного содержимого.
способной активировать этот фермент, кетгут не По с т р о е ние к а л и б р о в о ч н о г о переваривается и изменения окраски мочи или г ра фика. Пробы с калибровочными раство появления йодида калия в слюне не происходит.
рами пепсина ставят так же, как опытные, беря Десмоидная проба является простым способом вместо желудочного содержимого 1 мл соответ ориентировочной диагностики ахлоргидрии;
ствующего раствора пепсина.
особенно удобна она при массовых обследова Из экстинкции калибровочных проб вычи ниях населения.
тают экстинкцию холостой пробы. Строят кали В клинической практике при массовых об бровочную кривую, откладывая на оси ординат следованиях для определения количества НС полученную разницу экстинкции, а на оси аб широкое распространение получили препараты сциссЧ содержание пепсина (мкг/мл). Для гастротест (лCilak, Швейцария) и аиидотест вычисления активности пепсина в желудочном (лChinoin, Венгрия). В состав гастротеста вхо содержимом значения, найденные по калибро дит красящее вещество 3-фенил-азо-2,6-диами вочному графику, умножают на степень разве иопиридин, а в ацидотесте красящим веществом дения желудочного сока.
является 2,4-диамино-4-этоксиазобензол. О ко Но р ма л ь н ые в е л и ч и ны. Актив личестве кислоты судят по окраске мочи. Коло ность пепсина должна быть выведена на донорах риметрию проводят визуально при помощи в каждой лаборатории, так как она зависит от цветной шкалы. Подробно правила работы с активности кристаллического пепсина, испол^ь препаратами изложены в приложенных к ним зуемого для построения калибровочного гра инструкциях.
фика.
В качестве беззондового метода можно использовать определение уропепсииа. Уропеп син определяют методом Туголукова;
исследова 2,3.3. Беззондовые методы ние осуществляют в той же последовательности, как и при изучении протеолитической активности Беззондовые методы дают ориентировочное желудочного сока, но вместо последнего берут представление о желудочной секреции и при I мл мочи. Результат выражают в протеолити меняются при наличии противопоказаний к ческой активности часовой или суточной мочи.
фракционному зондированию.
Но р ма л ь н ые в е л и ч и ны. За сутки Десмоидная проба Сали. Пр инцип.
38Ч96 мг, часовое напряжение натощак Ч Выявление окраски мочи метиленовым синим в 2Ч3 мг/ч.
результате попадания его в желудок из десмоид ного мешочка при растворении кетгута под дей- Лит е р а т у р а. Фишэон-Рысс Ю. И. Со ствием НС1 и пепсина. временные методы исследования Джелудочной Ре а кт ив ы. 1. Метиленовый синий. 2. Тон- секреции.Ч Л., 1972;
Anson M. I.Ч J. Physiol., кая резинка. 3. Кетгут № 5.
1939, vol. 22, p. 79.
2.4. МОКРОТА Мокрота Ч выделяемый при кашле патоло- ства или случайные рнмеси могут также влиять гически измененный трахеобронхиальный сек- на окраску мокроты.
рет;
в носовой части глотки и в полости рта к Запах. Обычно свежевыделенная мокрота нему обычно примешивается слюна и секрет запаха не имеет. Гнилостный запах она приобре слизистой оболочки носа. тает при абсцессе, гангрене легкого, а также при Собирание мокроты. Свежевыделенную мо- гнилостном бронхите в результате присоедине кроту собирают в чистую сухую широкогорлую ния гнилостной инфекции;
появлению запаха склянку. Больным следует указать на то, что способствует нарушение оттока мокроты.
исследованию подлежит только мокрота, отде- Консистенция. Различают жидкую, густую и ляющаяся при кашле, а не при отхаркивании. вязкую мокроту. Реологические свойства мокро Чтобы предотвратить примешивание к мокроте ты зависят от ее состава, а также эластичности содержимого полости рта, перед выделением и вязкости слизи.
мокроты больной должен тщательно прополо- Деление на слои. При обильном отделении скать рот кипяченой водой. Желательно как не очень густой мокроты она при стоянии рассла можно скорее исследовать собранную мокроту;
ивается. При гнилостном бронхите, гангрене если же такой возможности нет, хранить ее сле- легких, бронхоэктазах мокрота обычно разде дует в холодильнике или прохладном месте. ляется на три слоя: верхний Ч пенистый, состо Наиболее достоверное представление о состоя- ящий из слизисто-гиойных комков со значитель нии дыхательных путей можно получить, иссле- ным содержанием пузырьков воздуха;
сред дуя содержимое трахеоброихиального де- ний Ч мутноватая желтовато-зеленая жид рева, полученное при бронхоскопии. кость и нижний Ч непрозрачная масса желтова Для обеззараживания мокроты и посуды, того цвета.
в которой она находилась, используют 5 % ра- Разделение мокроты на два слоя часто на створ хлорамина. Обеззараживаемый материал блюдается при абсцессе легких: верхний слой со выдерживают в растворе не менее 4 ч. стоит из серозной жидкости, а нижний Ч из непрозрачной зеленовато-желтой гнойной мас сы, содержащей клеточные элементы. Все опи 2.4.1. Физические свойства санное позволяет сделать заключение о характе (определение характера ре мокроты.
и общих свойств мокроты) Характер. Состав мокроты неоднороден;
ее характер зависит от патологического процесса.
Для исследования мокроту помещают в При описании характера мокроты преобладаю чашку Петри и рассматривают на светлом и тем- щий компонент выносят на второе место. Разли ном фоне. чают следующие виды мокроты:
Количество. Объем отделяющейся за сутки 1) слизистая мокрота Ч бесцветная, тягу мокроты колеблется в широких пределах: он мо- чая, вязкая (особенно вязкой Ч стекловид жет быть небольшим (1Ч2 мл), например при нойЧ она бывает при бронхиальной астме);
остром бронхите, бронхиальной астме, и весьма 2) гнойная мокрота Ч без примеси слизи значительным (более 200Ч300 мл), что наибо- встречается очень редко (например, при вскры лее характерно для заболеваний, сопровожу тии эмпиемы плевры в полости бронха), так как дающихся образованием полости в органах ды- при прохождении через дыхательные пути к мо хания. Для определения количества выделенной кроте обычно примешивается слизь;
за сутки мокроты ее собирают и выливают потом 3) слизисто-гнойная и гнойно-слизистая в градуированную стеклянную посуду. мокрота встречается наиболее часто;
она обра Цвет. Окраска мокроты определяется ее зуется при многих заболеваниях бронхов и лег составом, она может быть бесцветной или иметь ких и представляет мутную вязкую массу, в кото желтоватый оттенок, особенно при примеси рой тесно смешаны слизь и гной;
гноя;
зеленоватый цвет свидетельствует о застое 4) кровянистая мокрота, содержащая про гнойной мокроты и объясняется присутствием жилки или сгустки крови;
иногда примесь крови фермента вердопероксидазы, содержащейся в бывает измененной и ее присутствие можно за нейтрофильных лейкоцитах и освобождающейся подозрить лишь по цвету мокроты (например, при их распаде с последующим превращением ржавая мокрота при крупозной пневмонии);
железопорфириновой группы фермента. Желтый 5) серозная мокрота Ч прозрачная пени цвет мокрота может иметь из-за присутствия стая, жидкая, иногда слегка розоватого цвета;
большого количества эозинофилов. Ржавый можно наблюдать при отеке легкого.
цвет мокроты чаще бывает при крупозной пнев- Кл и н и ч е с к о е з наче ние. Результа монии в связи с появлейием гематина, освобож- ты макроскопического исследования мокроты с дающегося при распаде эритроцитов, прони- заключением о ее характере позволяют сделать кающих в просвет альвеол в процессе диапедеза. вывод о характере патологического процесса.
Черный цвет мокроты зависит от примеси к ней Опре д е л е ние р е а к ции. Исследова частиц угольной пыли. Присутствие билирубина ние проводят с помощью индикаторной бумаги может окрашивать мокроту в желтый или зеле- для определения рН в интервале от 5,0 до 9,0 или новатый цвет. Некоторые лекарственные веще- на рН-метре.
Кл инич е с к о е з на ч е ние. Величина Клиниче с кое значение. Билиру рН во многом определяется характером и интен- бин в мокроте может появиться при прорыве в сивностью воспаления бронхов. Реакция мокро- легкое абсцесса печени, но в незначительных ко ты, как правило, слабощелочная, кислой она личествах билирубин находят н при пневмонии.
становится при разложении мокроты или при примешивании к ней желудочного содержимого.
Важно определение рН мокроты для решения 2.4.3. Микроскопия вопроса об источнике кровотечения.
Посуда и обору дова ние. I. Чашки Петри. 2. Покровные и предметные стекла.
3. Препаровальные иглы или металлические 2.4.2. Химическое исследование палочки с плоскими концами. 4. Микроскоп.
Для микроскопического исследования мок роты прежде всего готовят неокрашенные (на Определение белка. Для исследования при тивные) препараты мокроты. Полноценность годна мокрота, собранная не ранее 12 ч до мо исследования зависит от правильного приготов мента исследования;
при сборе мокроты надо ления и количества просмотренных препаратов.
следить, чтобы к ней не примешивалось содер Материал для исследования выбирают из раз жимое полости рта и носоглотки.
ных мест и переносят металлической иглой на Принцип тот же, что и при исследовании предметное стекло, затем покрывают покровным белка в моче.
стеклом так, чтобы мокрота не выступала за его Ре а к т и в ы. l.Te же, что для определения края.
белка в моче любым количественным методом.
Препараты должны быть тонкими, элементы 2.3% раствор уксусной кислоты.
в них должны располагаться однослойно. Ми Ход и с с л е д о в а н и я. В широкую кроскопию проводят сначала при малом увели пробирку помешают 10 мл мокроты, приливают 20 мл 3 % раствора уксусной кислоты и несколь- чении микроскопа (объектив 8Х, окуляр 10Х), ко раз сильно встряхивают. Содержимое фильт- просмотр с малым увеличением дает представле руют через бумажный фильтр. Фильтрат прове- ние о качестве выбранного материала, позволяет обнаружить скопление клеток, кристаллических ряют на полноту осаждения муцина, добавляя к небольшому его количеству 2Ч3 капли уксус- образований, найти эластические волокна, спирали Куршмана, элементы новообразования.
ной кислоты. Если при этом появляется муть, то Дальнейшее исследование производится при осаждение муцина повторяют. После полного большом увеличении микроскопа (объектив 40Х, удаления муцина проводят одну из качественных реакций на белок, а при наличии белка опреде- окуляр 10Х).
ляют его количество, учитывая разведение мо- При этом в мокроте можно обнаружить в большем или меньшем количестве лейкоциты кроты (см. определение белка в моче).
и среди них по более темной окраске и наличию Кл и н и ч е с к о е з н а ч е н и е. Следы белка содержатся во всякой мокроте. Наиболь- в цитоплазме обильной, четкой, преломляющей свет зернистости различить эозинофилы, нали шие концентрации белка (более 3 %) можно чие которых характерно для бронхиальной наблюдать при отеке легкого, когда источником астмы и других аллергических состояний. Эри белка является плазма крови. Значительные троциты в мокроте имеют вид желтоватых дис концентрации белка можно обнаружить при крупозной пневмонии и туберкулезе. На основа- ков. Единичные эритроциты встречаются в каж дом виде мокроты, большое же их количество нии исследования количества белка в мокроте пытались дифференцировать бронхит и туберку- характерно для кровянистой мокроты и встреча ется при инфаркте легкого, легочных крово лез легких, когда не находили микобактерий.
Однако наблюдения носили разноречивый ха- течениях, застое в малом круге кровообра рактер, и в настоящее время считают, что опре- щения.
деление белка в мокроте не может иметь боль- В мокроте всегда можно обнаружить эпите лий. Плоский эпителий попадает в мокроту из шого диагностического значения.
Определение билирубина (метод Обермайе- полости рта и носоглотки. Большое число клеток ра Ч Поппера). П р и и ц и п. Образование би- говорит о недостаточно хорошем туалете полости ливердина. рта перед взятием мокроты для исследования.
Ре а к т ив. Смесь следующего состава: во- Обнаружение в мокроте цилиндрического мерцательного эпителия, выстилающего слизи ды 625 мл, 95 % этилового спирта 125 мл, натрия хлорида 75 г, калия йодида 12 г, 10 % йодной на- стую оболочку гортани, трахеи и бронхов, свиде стойки 3,5 мл. тельствует о поражении соответствующих отде Ход и с с л е д о в а н и я. К 10--15 мл мо- лов. Клетки имеют удлиненную форму, расшире кроты прибавляют равный объем этилового ние с одного конца, где расположено округлое спирта, смешивают, фильтруют, на фильтрат ядро, и мерцательные реснички. Располагаются эти клетки группами, и в свежевыделенной наслаивают реактив, при наличии билирубина на границе появляется зеленое или синеватое мокроте можно наблюдать активное движение кольцо. ресничек. При воспалительных процессах (брон хиты, пневмонии, профессиональные заболева ния легких) в мокроте встречаются альвеоляр ные макрофаги Ч клетки гистиоцитарной систе См. с. 48Ч50. мы. Это крупные клетки округлой формы с нали чием в цитоплазме включений. Если альвеоляр- видные образования. Обломки их напоминают ные макрофаги содержат гемосидерин, то их вид пунктирной линии, состоящей из сероватых, называют сидерофагами или образно клетками преломляющих свет палочек. Обнаруживают в сердечных пороков, так как они могут по- мокроте при распаде петрифицированного очага явиться при застое крови в легких, при деком- как результат туберкулезного процесса, абсцес пенсированных пороках сердца. С достоверно- са легкого, новообразования. Элементы распада стью выявить эти клетки можно реакцией обра- петрифицированного очага носят название зования берлинской лазури. тетрады Эрлиха и включают: 1) обызвествлен Реакция образования берлинское лазури. ные эластические волокна;
2) обызвествленный Ре а кт ив ы. 1. 2Ч5 % раствор HCI. 2. 5 % ра- казеозный детрит;
3) кристаллы холестерина, створ желтой кровяной соли. 4) микобактерии туберкулеза.
Ход р е а к ции. Кусочек мокроты поме- Для обнаружения эластических волокон щают на предметное стекло, прибавляют 1 Ч мокроту нагревают до гомогенного состояния 2 капли реактива № 1 и 1Ч2 капли реактива с равным объемом 10 % раствора КОН, затем № 2. Перемешивают стеклянной палоч'кой и по- центрифугируют, предварительно перемешав крывают покровным стеклом. Излишек реактива после добавления 2Ч3 капель 2 % спиртового отсасывают фильтровальной бумагой. При про- раствора эозина. Из осадка делают препараты.
изводстве этой реакции нельзя пользоваться При такой обработке разрушаются слизь и кле металлическими палочками. точные элементы, а эластические волокна окра Гемосидерин, лежащий внутриклеточно, шиваются эозином и имеют вид блестящих ров окрашивается в голубой или сине-зеленый цвет, ных двухконтурных нитей, но этот способ не Эти клетки обнаруживают в мокроте при застой- имеет существенных преимуществ перед иссле ных явлениях в легком, инфарктах легкого, кро- дованием нативных препаратов. Посторонние воизлияниях. волокна и нити тоже могут окраситься эозином Пылевыми клетками называют макрофаги и мешать распознаванию эластических волокон.
с фагоцитированными частицами пыли. При Окраска эластических волокон резорцин хронических воспалительных процессах альвео- фуксином Вейгерта. Пр и н ц и п. Окраска спе лярные макрофаги часто подвергаются дегене- цифическая для эластических волокон.
ративным изменениям. Жирно перерожденные Ре а кт ивы. 1. Фуксин основной. 2. Ре клетки (или клетки с жировой дистрофией, зорцин. 3. Хлористое железо. 4. 96 % этиловый липофаги, жировые шары) имеют разную вели- спирт. 5. 25 % HCI.
чину, округлую форму и цитоплазма их заполне- 0,5 г основного фуксина и 1 г резорцина на каплями жира, которые при добавлении к растворяют в 50 мл дистиллированной воды, препарату капли раствора Судана III окраши- нагревают до кипения и постепенно приливают ваются в оранжевый цвет. Скопление таких кле- раствор из 2 г хлористого железа в 10 мл воды.
ток характеризует хронические заболевания Смесь кипятят 5 мин, осторожно встряхивая, (туберкулез, абсцедирующая пневмония, акти- после охлаждения фильтруют. Фильтр с осадком номикоз, эхинококк легкого и др.). Иногда в переносят в колбу, заливают 70 мл 96 % этило мокроте можно обнаружить спирали Куршма- вого спирта и, осторожно нагревая, доводят до на Ч образования, состоящие из слизи и имею- кипения, осадок краски при этом должен раство щие осевую часть Ч извитую, резко преломляю- риться, после удаления фильтра к охлажден щую свет нить и окружающую ее нежную сли- ному раствору добавляют 1мл 25 % HCI. Ра зистую мантию. Спирали Куршмана чаше всего створ красителя сразу готов к употреблению;
встречаются при бронхиальной астме;
в резуль- хранить его можно в течение нескольких меся тате спазма бронхов слизистый секрет, который цев.
в них находится, уплотняется и при разрешении Ход ис с ле дова ния. Препараты мок приступа кашлевыми толчками выталкивается, роты фиксируют в 96 % этиловом спирте в тече закручиваясь в спиралевидные образования.
ние 2 мин, затем, слив спирт, помещают их на Спирали Куршмана можно встретить и при 15 мин в бюксу с раствором красителя (резор других патологических процессах (пневмония, цин-фуксин Вейгерта). После окраски препара абсцесс легкого, опухоль), сопровождающихся ты ополаскивают водой и выдерживают 2 мин в обструктивным компонентом.
96 % этиловом спирте. Высушенные препараты Эластические волокна, встречающиеся в микроскопируют с малым увеличением. Эласти мокроте при деструктивных процессах в легких, ческие волокна окрашиваются в красновато являются элементами соединительной ткани. фиолетовый цвет, и в препаратах бывают видны В нативном препарате эластические волокна не только древовидные, ветвящиеся волокна, но имеют вид блестящих, двухконтурных, волокни- и их обрывки.
стых образований с дихотомическим делением Из кристаллических образований в мокроте на концах, иногда рисунок их повторяет строе- можно встретить кристаллы ШаркоЧЛейдена в ние альвеол. При кавернозном туберкулезе в виде вытянутых блестящих ромбов различной результате наложения на волокна капель жир- величины. Кристаллы ШаркоЧЛейдена обра ных кислот и мыл они становятся более грубыми зуются из белковых продуктов при распаде и имеют бугристые утолщения, за что получили эозинофилов, поэтому в свежевыделенной мок название коралловидных. Находка эта весьма роте их можно обнаружить не всегда, несмотря редкая. на наличие эозинофилов. Характерно нахожде Обызвествленные эластические волокна Ч ние этих кристаллов, так же как спиралей Курш грубые, пропитанные солями извести палочко- мана н эозинофилов, для бронхиальной астмы.
Кристаллы гематоидина золотисто-желтого шого числа препаратов. Проводить цитологиче цвета, имеют форму ромбов, звезд, пучков и ское исследование при подозрении на опухоль встречаются при кровоизлияниях в некротиче- и давать заключение должен специалист-ци ской ткани. Кристаллы холестерина имеют вид толог.
бесцветных прямоугольной формы табличек с Цитологическая диагностика опухолей тре выломанным углом. Образуются при разложении бует специальной подготовки, так как в мокро жира в замкнутой полости и встречаются при те больных с. воспалительными процессами и абсцессе, гангрене, туберкулезе и новообразова- доброкачественными новообразованиями в лег ниях легкого. ких (пневмосклероз, бронхоэктатическая бо В гнойной мокроте иногда встречаются лезнь, пневмония, аденома) встречаются метапла пробки Дитриха (макроскопически это желтова- зированные клетки больших размеров с выра то-серые образования величиной от булавочной женными признаками атипии. В таких случаях головки до просяного зерна, микроскопически Ч следует обращать внимание на окружающий детрит с бактериями, иглами жирных кислот и фон и отыскивать клетки и структуры, харак каплями нейтрального жира);
эти образования терные для рака, или, наоборот, скопление мак характерны для застоя мокроты в полостях рофагов или моноцитарных элементов, имеющих главным образом при абсцессе легкого, бронхо- морфологические признаки, сходные с трудно эктазах. дифференцируемыми клетками.
Элементы эхинококка в виде крючьев или Плоскоклеточный рак. Клетки плоскокле обрывков хитиновой оболочки пузыря иногда точного рака с ороговением располагаются раз с эозинофилами и кристаллами ШаркоЧЛей- розненно или скоплениями в виде тканевых дена можно найти в гнойной части мокроты при клочков и очень редко в виде луковиц. Клетки вскрывшемся эхинококке легкого. очень полиморфны. Ядра крупные, плотные, ги Друзы актиномицетов макроскопически перхромные, форма разнообразная, распределе имеют вид мелких желтоватых зёрнышек, содер- ние хроматина неравномерное. В клетках, нахо жащихся в гнойной части мокроты. Микроско- дящихся в состоянии некробиоза, ядра разру пически это сплетение тонкого мицелия, концы шаются. Иногда даже в четко очерченной клетке которого заканчиваются колбообразными взду- видны лишь контуры бывшего ядра. Цитоплаз тиями. Характерно при этом присутствие в мок- ма многих клеток плотная, блестящая. При роте ксантомных (жирно перерожденных) кле- плоскоклеточном раке с ороговением нередко ток. Друзы актиномицетов находят в мокроте отмечается раннее ороговение, и в таких случаях при актиномикозе легкого. Препарат, в котором в молодых клетках с нежным ядром цитоплазма обнаружены друзы, рекомендуется красить по становится плотной, блестящей. Клетки плоско Грану (см. ниже). При этом нити мицелия клеточного рака без ороговения чаще распола грамположительны, колбообразные вздутия Ч гаются скоплениями, округлые, круглые. Ядра грамотрнцательны. занимают большую часть клетки, обычно в цент Миелиновыё образования, встречающиеся ре, нежный хроматин распределен равномерно.
главным образом в слизистой или гнойно-слизи- Цитоплазма скудная, негомогенная.
стой мокроте, имеют различную форму (округ- Железистый рак. Клетки в препарате пред лые, овальные, почкообразные) и величину. ставлены в виде железистых структур. Круп Миелин может лежать свободно, а может за- ные или средних размеров клетки имеют округ полнять цитоплазму макрофагов. Миелин явля- лую, овальную или призматическую форму, ется конечным продуктом аутолиза клеток, Ядра, занимающие большую часть клетки и состоит из фосфолипидов, Суданом III не окра- расположенные эксцентрично, полиморфны шивается. Самостоятельного диагностического Хроматин ядер нежный, мелкоглыбчатый или значения, по-видимому, он не имеет.
мелкопетлистый, расположен равномерно.
Об н а р у же н и е в мо к р о т е к л е т о к Встречаются дву- и трехъядерные клетки, в з л о к а ч е с т в е н н ых о п у х о л е й п р и ядрах можно наблюдать множественные, гипер м и к р о с к о п и ч е с к о м ис с л е д о в а - трофированные ядрышки. Цитоплазма или нии. Предварительно просматривают под мик- обильна и вакуолизирована, или расположена роскопом неокрашенные (нативные) препараты, узким ободком вокруг ядра.
которые делают тонкими, осторожно распреде- Аденоматоз. Клетки мелкие, кубической или ляя материал на предметном стекле препаро- призматической формы с ядрами округлой фор вальными иглами. Препараты, в которых обна- мы, занимающими большую часть клетки. Кон руживают клетки с признаками атипии, красят туры ядер четкие, ровные, нежный хроматин рас по Романовскому, гематоксилин-эозином или положен равномерно. Цитоплазма или вытянута каким-либо другим методом, позволяющим в одну сторону, или еле заметная, скудная.
изучать клеточные структуры. Недифференцированный рак. При недиффе Признаки злокачественности клеток Ч по- ренцированном мелкоклеточном раке клетки лиморфизм их размеров, нарушение ядерно-ци- опухоли располагаются плотными группами, топлазматического соотношения в сторону уве- следующими друг за другом по тяжу слизи, или личения ядра, изменение формы ядра, наличие в отдельными скоплениями. Клетки округлые, не нем множественных ядрышек неправильной больших размеров. Ядра их крупные, плотные, формы, митоз клеток. Для подтверждения гиперхромные, занимают почти всю клетку, диагноза необходимо искать групповое располо- ядрышек практически не содержат. Иногда жение клеток с перечисленными признаками, встречаются и крупные клетки, расположенные что связано с необходимостью изучения боль- разрозненно или в виде плотных структур, имею щих разнообразные формы (треугольную, полу- счетчик, предназначенный для подсчета лейко лунную и др.). цитарной формулы. Критерии оценки: до 25 эри При недифференцированном полиморфно- троцитов на 1000 лейкоцитов Ч мало (1), от клеточном раке клеточные элементы располо- до 50 эритроцитов Ч среднее количество (2) и жены чаще разрозненно. Встречаются как не- более 50Ч много (3), Оценивают н фиксируют большие клетки с полиморфными ядрами, так и результат в том же порядке, что и в предыдущих гигантские с ядром, занимающим почти всю показателях. После этого суммируют цифровые клетку, нередко можно встретить многоядерные показатели четырех описанных выше компонен клетки. Хроматин ядра компактный, со смазан- тов (количество мокроты, ее характер, число ным рисунком, иногда просматриваются ядрыш- лейкоцитов и число эритроцитов) и ставят итог ки. Цитоплазма либо обильна и вакуолизиро- против слова всего.
Pages: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | ... | 13 | Книги, научные публикации