Geum.ru

Российского Фонда Фундаментальных Исследований. Настоящий сборник тезисов доклад

Вид материалаДоклад
Участники VII научной сессии МБС СПбГУ
Подобный материал:
1   ...   6   7   8   9   10   11   12   13   14
Шапошникова Т.Г., Адонин Л.С., Матвеев И.В.*, Подгорная О.И.* Определение заряда мажорного белка р45/47 мезоглеи сцифомедузы Aurelia aurita (Cnidaria)

* ЦИН РАН


Мезоглея кишечнополостных выполняет те же основные функции, что и рыхлые соединительные ткани других многоклеточных животных. Структура основного вещества мезоглеи сцифомедузы A. aurita значительно изменяется на протяжении жизненного цикла. Белок 45/47 кДа (р45/47) является одним из мажоров мезоглеи взрослой медузы. Полученные против этого белка поликлональные антитела (RA45/47) на срезах зрелых медуз взаимодействуют с мезоглеальными и эпидермальными клетками, а также с эластическими волокнами. Весьма вероятно, что мезоглеальные клетки (как и клетки эпидермы) секретируют белок, который включается в состав внеклеточного матрикса.

В результате частичного белкового сиквенса белка р45/47 были получены последовательности трех пептидов из центральной части белка. На их основе были сконструированы праймеры и получен ряд клонов. Концевые последовательности клонов послужили основанием для конструкции новых праймеров. Следующие шаги RACE ПЦР дали возможность просеквенировать и собрать часть последовательности ДНК данного белка из имеющейся кДНКовой библиотеки мРНК. Эта часть последовательности состоит из 1041 нуклеотида и ей соответствует полипептид из 347 аминокислот. Полученная аминокислотная последовательность была проанализирована различными компьютерными программами, которые определяют предполагаемую изоэлектрическую точку и точку максимальной растворимости белка. Компьютерный анализ показал, что эти точки располагаются в районе рН 2 - 3.

Для подтверждения результатов компьютерного анализа в настоящей работе проведено разделение белков мезоглеи в условиях кислого электрофореза по Чокли, который используется для разделения сильно положительно заряженных белков. В мезоглее медузы были выявлены пять дискретных зон. На иммуноблоте с антителами RA45/47 против мажорного белка мезоглеи р45/47 с высокой степенью аффинности взаимодействует самая нижняя зона. Имеется также очень слабое связывание с несколькими верхними зонами. Для определения молекулярной массы белков, разделяющихся в «кислых» условиях, зоны белков вырезали из геля, готовили пробы и проводили с ними SDS-электрофорез по Лэммли. Молекулярный вес белка из нижней зоны оказался равным 45 кДа. На иммуноблоте этот белок также взаимодействует с антителами RA45/47, в то время как белки из других зон с данными антителами не связываются. Таким образом, экспериментальные данные подтверждают, что исследуемый белок имеет высокий положительный заряд.

Работа выпонена при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (грант № 05-04-49578-а).

Участники VII научной сессии МБС СПбГУ


Адонин Л.С.
Иванова Т.С.
Петрова Е.А.

Алешина Г.М.
Иванов М.В.
Петровский П.П.

Амосова А.П.
Иванюкович А.А.
Подгорная О.И.

Андерсон Е.А.
Квитко К.В.
Полевщиков А.В.

Андреев В.М
Козлова М.А.
Полоскин А.В.

Андреева Т.Ф.
Козминский Е.В.
Полякова Н.А.

Андронов Е.Е.
Кокряков В.Н.
Полякова Н.В.

Анцулевич А.Е.
Комендантов А.Ю.
Примаков И.М.

Арбенин А.Ю.
Костюченко Р.П.
Раилкин А.И.

Аристов Д.А.
Кошелева А.Н.
Родэ Л.Ю.

Артамонова В.С.
Краснодембская А.Д.
Слюсарев Г.С.

Артемьева А.К.
Краснодембский Е.Г.
Слюсарев С.Г.

Бакаленко Н.И.
Крупенко Д.Ю.
Смирнов П.Д.

Балашова Н.Б.
Кудрявцев И.В.
Смуров А.О.

Барабанова Л.В.
Кузнецов И.Б.
Спетницкая Н.А.

Бахмет И.Н.
Кузнецова Е.С.
Стариков И.Ю.

Беляева Д.В.
Кулакова М.А.
Старков А.И.

Березанцева М.С.
Кулева Н.В.
Старунов В.В.

Бесядовский А.Р.
Лайус Д.Л.
Стогов И.А.

Бодров С.Ю.
Латкин Д.С.
Стогов И.И.

Болотов А.Е.
Лезин П.А.
Студенов И.И.

Бухвалов Ю.О.
Лоскутова З.И.
Сухачев А.Н.

Вербицкая А.Н.
Магомедова З.М.
Сухих Н.А.

Воробьев К.П.
Максимович Н.В.
Тараховская Е.Р.

Гагаринова Н.Г.
Манылов О.Г.
Теровская Е.В.

Галактионов К.В.
Мартынов Ф.М.
Титов С.Ф.

Галактионов Н.К.
Маслов Ю.И.
Тихомиров И.А.

Галеева В.Р.
Матвеев И.В.
Федоров Г.К.

Ганжа Е.В.
Махров А.А.
Филиппов А.А.

Гапонова И.Н.
Медведева В.П.
Филиппова Н.А.

Генельт-Яновский Е.А.
Мигунова А.В.
Футикова Т.И.

Герасимова А.В.
Миронова А.П.
Хайтов В.М.

Герасимова Е.И.
Михайлова К.А.
Халаман В.В.

Гимельбрант Д.Е.
Мовчан Е.А.
Харазова А.Д.

Гогорев Р.М.
Могиленко Д.А.
Цыбатова Е.В.

Дашко О.Ю.
Морозов В.Ю.
Чикадзе С.З.

Дондуа А.К.
Морозов Е.А.
Чужекова Т.А.

Дукаревич М.М.
Мухачёв Е.В.
Чунаев А.С.

Дукельская А.В.
Мухина Ю.И.
Шапошникова Т.Г.

Дьячков И.С.
Нестеренко А.Ю.
Шатских Е.В.

Дякин А.Ю.
Нестерович А.С.
Шевченко К.Г.

Елисеева Е.А.
Николаев К.Е.
Шишарина М.А.

Ересковский А.В.
Николаева М.А.
Шунатова Н.Н.

Ефремова С.М.
Новикова Е.Л.
Шунькина К.В.

Жеребцова Ю.В.
Паскерова Г.Г.
Юрова М.Н.

Задевалова М.И.
Обухов Д.К.
Юрцева А.О.

Зайцева М.А.
Осипов Д.В.
Яковис Е.Л.

Знаменская О.С.
Островский А.Н.