Высокомолекулярные азотосодержащие органические вещества, молекулы которых построены из остатков аминокислот. Существует 10 12 видов белков

Вид материалаДокументы

Содержание


Каталитическая функция
Транспортная функция
Защитная функция
Гормональная функция
Питательная (резервная).
Распределительная хроматография
Ионообменная хроматография
Ультрацентрифугирование (гравиметрический метод)
Подобный материал:
Белки – высокомолекулярные азотосодержащие органические вещества, молекулы которых построены из остатков аминокислот. Существует 1012 видов белков. В организме человека ~ 50 тыс. различных белков. Все белки состоят из структурных блоков, которые представлены остатками аминокислот. Всего 20 аминокислот. Набор аминокислот в белке определяется наследственной информацией, записанной в ДНК.


Функции:

- Строительная, структурная функция. Белки образуют основу протоплазмы любой живой клетки, в комплексе с липидами они являются основным структурным материалом всех клеточных мембран, всех органелл.

- Каталитическая функция. Практически все биохимические реакции катализируются белками-ферментами.

- Двигательная функция (сократительная). Любые формы движения в живой природе (работа мышц, движение ресничек и жгутиков у простейших) осуществляются белковыми структурами клеток.

- Транспортная функция. Белок крови гемоглобин транспортирует кислород от легких к тканям и органам. Есть белки крови, транспортирующие липиды, железо, стероидные гормоны. Перенос многих веществ через клеточные мембраны осуществляют особые белки-переносчики.

- Защитная функция. Важнейшие факторы иммунитета – антитела и система комплемента являются белками. Процесс свертывания крови, защищающий организм от чрезмерной кровопотери происходит с участием белков фибриногена, тромбина и других факторов свертывания, тоже являющихся белками. Внутренние стенки пищевода, желудка выстланы защитным слоем слизистых белков – муцинов. Основу кожи, предохраняющей тело от многих внешних воздействий, составляет белок коллаген.

- Гормональная функция. Ряд гормонов по своему строению относится к белкам (инсулин) или пептидам (АКТГ, окситоцин, вазопрессин).

- Опорная функция. Сухожилия, суставные сочленения, кости скелета образованы в значительной степени белками.

- Питательная (резервная). Белки способны образовывать запасные отложения для развития плода (овальбумин яиц, казеин молока, многие белки семян).


Методы выделения белков (в порядке следования в процессе):

Гомогенизация – измельчение биологического природного материала – волковые мельницы, ножевые, ультразвуковые гомогенезаторы.

Экстракция – извлечение белков, приводя их в растворенное состояние, солевой раствор 8-10 %

Фракционирование (хим. перегонка с целью разделения смеси жидкостей с разными температурами кипения на составные части):

- высаливание (фракционирование солевыми растворами) – процесс заключается в том, что у каждого белка свой номинал концентрации соли щелочных и земельных металлов в растворе при котором он выпадает – тем самым, повышая концентрацию соли в растворе можно поочередно выделять различные белки.

- органические растворители, осаждение спиртом (метиловый и этиловый спирт) – процесс схож с высаливанием, только вместо соли спирт, и ведется при температуре около 5 С0 во избежание процесса денатурации (характерное для белков изменение строения свойств при изменении физических и химических условий среды).

- осаждение ионами тяжелых металлов (осаждение) – метод основан на взаимодействии ионов тяжелых металлов (Hg, Zn, Ca, Ba, Pb и т.д.) с реакционноспособными аминокислотными радикалами белковой молекулы.

- электрофорез – состоит в способности белков с разной скоростью перемещаться под действием электрического поля.

- хроматография – сорбирование

Адсорбационная хроматография – разделение белков основано на различной их сорбированности.

Распределительная хроматография – в разной степени растворения белков

Афинная хроматография – основана на избирательном отборе схожих по свойствам белков.

Ионообменная хроматография - это полимерные органические соединения содержащие функциональные группы способные к ионному обмену. Используется в форматологии, в клинической биохимии

Гель-хромотография – способ разделения по различным молекулярным массам


Методы очистки белков:

-Диализ – промывают через мембрану, пропускающую только низкомолекулярные соединения, задерживая белок.

-Этродиализ – остатки ионов после диализа попадают на электроды, по которым протекает ток.

-Ультрафильтрация – продавливают через мембрану (см. выше), при этом белок становется концентрированным.

-Кристаллизация – основан на медленном достижении критической точки осаждения белка путем увеличения температуры.

-Гельфильтрация – используют спец. гель, который разбухая удерживает низкомолекулярные соединения.


Методы определения молекулярной массы белков:

-Вискозиметрия – определение вязкости

- Ультрацентрифугирование (гравиметрический метод) – состоит в том, что под действием центробежной силы белок оседает – этот фактор назвали фактором разделения

-Светорассеяние – определяется по отношению к длине волны, если размер равен L/20, то точечный дипольный излучатель, определив мол. массу, если больше L/20 можно определить размер дипольных излучателей.

-Рентгеноструктурный анализ - методы исследования структуры вещества по распределению в пространстве и интенсивностям рассеянного на анализируемом объекте рентгеновского излучения.


Формы белковых молекул:

-Глобулярные (шарообразные) – гемоглобин, обулин …

-Фибрелярные (нитевидные) – калоген…


Аминокислотный состав белков:

В состав белков входят аминокислоты.

аминокислота – альфа-аминокислота…

R=H глицин

R=CH3 оланин

R=CH2OH серин

R=CH2SH цистеин


Физико-химические свойства белков.

-Высокая вязкость растворов (коллоид)

-Незначительная диффузия

-Набухает в больших пределах

-Оптическая активность

-Подвижность в электрическом поле

-Низкое осмотическое давление

-Способность поглощать УФ лучи при длине волны 250-300 един.

-Амфотерность

-Гидрофильные свойства

-Способность к денатурации (нарушение общего плана структуры белка, которая приводит к потере характерных свойств при 50-60 С0 потеря растворимости увеличение вязкости)

-Изоэлектрическая точка – значение pH при котором суммарный заряд молекулы белка равен 0.


Структурная организация белка:

-Первичная структура – последовательность в расположение аминокислотных остатков в полипептидной цепи.

-Вторичная структура – укладка полипептидной цепи в спираль. Не хаотично, а в соответствие с программой заложенной в первичной структуре. Альфа-спираль строение глобулярных белков. Закручивается по часовой стрелке. Через каждые 5 витков идет повторение последовательности остатков аминокислот, а совпадают они через каждые 3,8 витков.

-Третичная структура – ориентирование полипептидной спирали, содержит уникальную информацию, все свойства молекулы белка связаны с 3-ой структурой.

- Четвертичная структура - подразумевают способ укладки в пространстве отдельных полипептидных цепей, обладающих одинаковой (или разной) первичной, вторичной или третичной структурой, и формирование единого в структурном и функциональном отношениях макромолекулярного образования.


Классификация белков.

При делении на группы учитывают и их состав (строение), физико-химические свойства (растворимость, щёлочность), происхождение и роль в организме. Делят на простые - протеины, состоящие только из аминокислот, и сложные - протеиды, в состав молекулы которых входят, кроме аминокислот, и другие соединения.

Простые:

альбумины,

глобулины,

гистоны,

глутелины,

проламины,

протамины,

протеиноиды.

Сложные:

гликопротеиды (содержащие, кроме аминокислот, углеводы),

липопротеиды (содержащие липиды),

нуклеопротеиды (в их состав входят и нуклеиновые кислоты),

фосфопротеиды (содержащие фосфорные кислоты)

хромопротеиды (имеющие пигментные металлосодержащие группы).