«Эраконд»

Вид материала

Отчет

Содержание 1. Изучение влияния профилактического применения кефира с БАД «ЭРАКОНД» на окислительно-антиокислительный статус организма. 1.1. Методы исследования и постановка опыта. ТБК-активных продуктов (суммарное содержание малонового диальдегида и гидроперекисей) 1.2. Полученные результаты. 2. Изучение влияния профилактического применения кефира с БАД «ЭРАКОНД» на неспецифическую резистентность организма при действии 2.1. Методы исследования и постановка опыта. 2.2. Полученные результаты. 3. Изучение гепатозащитного действия кефира с БАД «ЭРАКОНД» при остром токсическом СС14-гепатозе. 3.1. Методы исследования и постановка опыта. 3.2. Полученные результаты. Список литературы.

Подобный материал:

• Отчет по научно-исследовательской работе на тему: «Оценить эффективность использования, 255.75kb.

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «ПЯТИГОРСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ АКАДЕМИЯ ФЕДЕРАЛЬНОГО АГЕНТСТВА ПО ЗДРАВООХРАНЕНИЮ И СОЦИАЛЬНОМУ РАЗВИТИЮ»




М.В. Гаврилин 2011 г.




ОТЧЕТ

Медико-биологическое обоснование применения БАД «Эраконд» (экстракт люцерны) при изготовлении кисломолочных продуктов (кефира)

Пятигорск 2011

Введение.

Для люцерны характерен широкий спектр биологически активных веществ. Она содержит большое количество хорошо усвояемого белка, витамины (А, Д, Е. К, тиамин, фолиевая кислота, рибофлавин и др.), каротин, пектиновые вещества. Люцерна богата хлорофиллом, содержит также флавоноиды, сапонины, свободные аминокислоты, ферменты (пероксидаза и др.) и другие биологически активные вещества. Люцерна отличается высоким содержанием минеральных веществ, особенно кальция, магния, фосфора, калия и микроэлементов (железо, марганец, молибден, селен и др.). (1,10) Люцерна издавна используется в народной медицине как тонизирующее, гепатопротекторное, антидиабетическое, улучшающее аппетит, нормализующее деятельность кишечника и улучшающее обмен веществ средство, является хорошим кормом для животных (1,10).

«ЭРАКОНД» представляет собой водный экстракт люцерны, содержащий разнообразные биологически-активные вещества люцерны.

По заключению Института Питания РАМН «ЭРАКОНД» обладает общеукрепляющим действием, повышает неспецифическую резистентность организма, т.е. поддерживает в физиологических границах функциональную активность органов и систем (является иммуномодулятором). «ЭРАКОНД» также обладает антитоксическим, гепатопротекторным действием, что важно для предупреждения развития различных заболеваний. «ЭРАКОНД» рекомендован в качестве пищевого профилактического и оздоровительного средства в рамках Противораковой программы, а также в качестве профилактической добавки в школьное питание.

Кроме профилактических свойств, добавка «ЭРАКОНД» придает различным пищевым продуктам интересные вкусовые качества, изделия дольше сохраняют свои свойства и свежесть, а также исключается применение синтетических ароматизирующих и вкусовых добавок.

На основании этого предлагается использовать «ЭРАКОНД» в качестве биологически-активной добавки при производстве разнообразных продуктов питания, в том числе кисломолочных продуктов, таких как кефир, ряженка, молочных коктейлей, сыров, творожной массы, мороженного и т.д.

Настоящее исследование направлено на оценку безопасности и эффективности использования для профилактики здоровья БАД «ЭРАКОНД» при производстве кефира.

На основании сведений о химическом составе и биологической активности БАД «ЭРАКОНД» для оценки полезности применения кефира с добавкой «ЭРАКОНД» были проведены следующие исследования: изучение антиоксидантного, иммуномодулирующего, гапатопротекторного и антитоксического действия кефира с БАД «ЭРАКОНД».

Для оценки безопасности применения БАД «ЭРАКОНД» проведено исследование острой токсичности кефира с БАД «ЭРАКОНД».

1. Изучение влияния профилактического применения кефира с БАД «ЭРАКОНД» на окислительно-антиокислительный статус организма.

Как показано, эффекты многих БАД- парафармацевтиков реализуются путем инициации универсальных механизмов адаптационно-приспособительных реакций организма на воздействие раздражителей самой различной природы, в том числе за счет поддержания функции антиоксидантных систем (16).

При недостаточности в организме системы антиоксидантной защиты нарушается равновесие между образованием свободных радикалов и их детоксикацией при помощи антиоксидантов ферментативной и неферментативной природы (5,9). В результате этого развивается «оксидантный стресс», который является одним из общих механизмов повреждения тканей организма. За счет поддержания функции антиоксидантных систем организма можно повысить его устойчивость к действию повреждающих факторов.

В связи с этим является очень важной оценка влияния БАД «ЭРАКОНД» с одной стороны на активность систем генерирования свободных радикалов и образование продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ), а с другой стороны – на активность антиоксидантных ферментов, обеспечивающих утилизацию активных форм кислорода, пероксида водорода и липоперекисей.


1.1. Методы исследования и постановка опыта.

Исследования были проведены на белых беспородных половозрелых крысах-самцах, массой 180-200 г., содержащихся в стандартных условиях вивария Пятигорской государственной фармацевтической академии.

При определении дозы кефира с БАД «ЭРАКОНД» исходили из максимальной дневной дозы для взрослого человека (1г или 14 мг/кг), которая в отношении экспериментальных животных была увеличена в 10 раз (10г или 140-150 мг/кг), т.к. они обладают более высокой (в 6-10 раз выше) интенсивностью метаболических процессов.

40% раствор БАД «ЭРАКОНД» добавляли в кефир непосредственно перед введением животным с учетом рассчитанной дозировки и объема вводимого кефира (1-2 мл на одну крысу) и тщательно перемешивали при 30-35С.

Кефир с БАД «ЭРАКОНД» вводили перорально опытной группе животных в течение 14 дней. За сутки до забоя для стимуляции процессов свободно-радикального перекисного окисления липидов перорально вводили 50% масляный раствор СС1₄ в дозе 0,15 мл /100г. В качестве контрольной группы служили животные, которые на протяжении 14 дней получали только кефир, а затем за сутки до забоя – четыреххлористый углерод. Результаты, полученные в опытной и контрольной группах животных, сравнивали с группой здоровых интактных крыс.

Для оценки окислительно-антиокислительного статуса организма в сыворотке крови и гомогенате печени определяли содержание ТБК-активных продуктов (суммарное содержание малонового диальдегида и гидроперекисей), которые являются одними из конечных продуктов перекисного окисления липидов и активность каталазы, одного из важнейших антиоксидантных ферментов, разрушающих пероксид водорода.

Содержание ТБК-активных продуктов в гомогенате определяли методом Охкавы и соавт (18) и выражали в нмоль/мг белка. Гомогенат печени готовили на физиологическом растворе на холоду (250 мг печени на 2 мл физ раствора). Белок в гомогенате печени определяли методом Лоури в модификации Миллера (13). Определение содержания ТБК-активных продуктов в сыворотке крови проводили по методу (19,20) и выражали в нмоль/мл. Активность каталазы в гомогенате и сыворотке крови определяли по реакции с молибденовым реактивом, используя в качестве субстрата пероксид водорода, и рассчитывали в % снижения оптической плотности по отношению к контрольной пробе, в которую не добавляли биологический материал.

Статистическая обработка результатов проводилась по компьютерной программе «Microsoft Excel» с использованием критерия Стьюдента (2).

1.2. Полученные результаты.

Результаты исследования представлены в таблице 1.

Таблица 1

Влияние профилактического применения кефира с БАД «ЭРАКОНД» на окислительно-антиокислительный статус организма экспериментальных животных.

Группы животных, n =8-10	ТБК-активные продукты печени, нмоль/мг	ТБК-активные продукты крови, нмоль/мл	Каталаза печени, %	Каталаза крови, %
Интактные животные	0,0670,08	1,280,08	687,0	554,5
Контроль (кефир +СС14)	0,130,02 +48%,Ри0,001	1,680,12 +24%, Ри0,01	265,4 -:62%, Ри0,01	185,3 -67%, Ри0,01
Опыт (кефир + БАД + СС14)	0,080,008 -38%,Рк0,05	1,320,08 -21%, Рк0,01	412,9 +57%, Рк0,05 Ри0,01	455,0 +150%, Рк0,01

Ри – уровень достоверной разницы по отношению к интактной группе животных;

Рк – уровень достоверной разницы по отношению к контрольной группе животных.

Как видно из представленных в таблице данных, введение экспериментальным животным повреждающего фактора (четыреххлористого углерода) на фоне применения только кефира без добавки «ЭРАКОНД»(контрольная группа) привело к усилению интенсивности свободно-радикального процесса перекисного окисления липидов, а именно содержание ТБК-активных продуктов (малоновый диальдегид+гидроперекиси) в крови достоверно увеличилось на 24%, в печени – на 48%. При этом отмечалось снижение эффективности систем ферментативной антиоксидантной защиты, т.к. наблюдалось достоверное снижение активности каталазы в печени на 62% и в крови – на 67%.

Профилактическое применение кефира с БАД «ЭРАКОНД» препятствовало нарушению окислительно-антиокислительного статуса организма, вызванного введением СС1₄. В печени и крови наблюдалось снижение по сравнению с контролем содержания ТБК-активных продуктов соответственно на 38% и 21%. Хотя снижение перекисных продуктов в печени оказалось статистически недостоверным, в то же время этот показатель в опытной группе также достоверно не отличался от его уровня у интактных животных. Содержание ТБК-активных продуктов в сыворотке крови опытных животных также достигло уровня интактных крыс, достоверно не отличаясь от значений у этой группы животных.

Наблюдалась нормализация активности каталазы в крови животных опытной группы, получавших кефир с БАД «ЭРАКОНД», активность этого фермента увеличилась по сравнению с контролем на 150%. В печени также достоверно повысилась по сравнению с контролем активность исследуемого антиоксидантного фермента на 57%.

Т.о. профилактическое применение кефира с БАД «ЭРАКОНД» препятствует усилению свободно-радикального перекисного окисления липидов, вызванного воздействием повреждающего фактора, и поддерживает нужный уровень активности ферментативной антиоксидантной системы.

2. Изучение влияния профилактического применения кефира с БАД «ЭРАКОНД» на неспецифическую резистентность организма при действии повреждающего фактора.

Повышение резистентности организма к инфекциям, стрессорным и агрессивным воздействиям химической и физической природы при применении БАД-парафармацевтиков в большинстве случаев обусловлено их положительным влиянием на различные звенья иммунной системы организма, среди которых важнейшим звеном, выступающим в качестве «первой линии обороны», являются клеточные и гуморальные факторы неспецифической защиты (16). Способность усиливать неспецифические факторы резистентности – одна их характерных черт иммуномодуляторов.

Неспецифические факторы защиты являются важным компонентом единой целостной системы защиты и предохранения организма от многих болезней как инфекционной, так и неинфекционной природы. Среди неспецифических факторов особая роль в антимикробном действии принадлежит ферменту лизоциму, который разрушает клеточную стенку бактерий и других клеток, вызывая их гибель и способствуя фагоцитозу. Гуморальные факторы неспецифической резистентности состоят из разнообразных белков, содержащихся в крови и жидкостях организма. К ним относятся белки системы комплемента, интерферон, трансферрин, -лизины, фибронектин и др (4,6).

Большое значение в неспецифической резистентности имеют клетки, способные к фагоцитозу, который является важнейшей защитной реакцией организма. Фагоциты захватывают бактерии, грибы, вирусы и инактивируют их посредством набора ферментов и способности секретировать пероксид водорода и другие перекисные соединения, образующие активный кислород (4,6).

В связи с этим проведено исследование влияния кефира с БАД «ЭРАКОНД» на неспецифические факторы резистентности для обоснования полезности его применения как общеукрепляющего и иммуномодулирующего средства.

2.1. Методы исследования и постановка опыта.

Постановку опыта см. в 1.1. При производстве кефира используются молочнокислые бактерии, способные нормализовать микрофлору кишечника и тем самым поддерживать достаточно высокую эффективность неспецифических механизмов защиты. Учитывая это, в постановку опыта было внесено следующее дополнение: кроме групп животных, используемых в предыдущем экспериментальном исследовании, была введена дополнительная контрольная группа, которой вводился только СС1₄ в качестве повреждающего химического агента за сутки до забоя.

Для оценки изменения гуморальных факторов неспецифической резистентности в опытной и контрольных группах животных в сравнении со здоровыми интактными крысами, проводили определение активности лизоцима и содержания -лизинов в сыворотке крови, общей бактерицидной активности сыворотки крови, как интегрального показателя состояния сывороточных гуморальных факторов защиты.

При исследовании фагоцитоза определяли фагоцитарную активность и фагоцитарный индекс лейкоцитов и процент завершенности фагоцитоза.

Определение активности лизоцима проводили нефелометрическим методом Дорофейчук,1968 (7) по лизису тест-культуры и вычисляли процент активности по разнице % светопропускания испытуемой смеси до и после инкубации. Определение бактерицидной активности сыворотки крови проводили фотонефелометрическим методом Бухарина О.В., Созыкина В.Л., 1979 по лизису суточной культуры кишечной палочки и выражали в % (3). Определение содержания -лизинов проводили по методу Бухарина О.В., Фролова Б.А., Луды А.П., 1977 по редукции культуры Bac. Subtilis штамма 86 сывороткой крови испытуемых животных в определенных условиях до и после инкубации и выражали в % активности(17).

Фагоцитарную активность нейтрофилов крови определяли по методу Иванова А.И., Чухловина Б.А., 1967 в отношении E.сoli по трем показателям: фагоцитарная активность, фагоцитарный индекс, процент завершенности фагоцитоза (8). Результаты выражали в %.

Статистическая обработка результатов проводилась по компьютерной программе «Microsoft Excel» с использованием критерия Стьюдента (2).

2.2. Полученные результаты.

Результаты проведенного исследования представлены в таблице 2 и 3.

Таблица 2

Влияние профилактического применения кефира с БАД «ЭРАКОНД» на некоторые факторы неспецифической резистентности.

Группы животных, n =8-10	Лизоцим сыворотки крови,%	Бактерицидная активность сыворотки крови,%	-лизины сыворотки крови,
Интактные животные	39,11,23	57,43,98	47,51,52
Контроль 1 (СС14)	48,01,63 +23%, Ри0,001	19,81,91 -66%, Ри0,001	24,11,68 -49%, Ри0,001
Контроль 2 (кефир+СС14)	44,81,97 +15%, Ри0,05	33,12,22 -42%, Ри0,001 +67%,Рк10,001	25,82,01 -46%, Ри0,001 Рк10,05
Опыт (кефир+БАД+СС14)	39,41.8 -14%,Рк20,01 Ри0,05	44,92.29 +127%, Рк10,001 +36%, Рк20,01	33,91,71 +41%, Рк10,001 +31%, Рк20,01

Р_и – уровень достоверной разницы по отношению к интактным животным;

Р_к1- уровень достоверной разницы по отношению к контрольной группе1;

Р_к2-уровень достоверной разницы по отношению к контрольной группе 2.


Как видно из таблицы 2 четыреххлористый углерод, как высокореакционный химический агент, вызывающий усиление свободно-радикального перекисного окисления липидов, оказывает выраженное отрицательное действие на факторы неспецифического гуморального иммунитета. Его введение экспериментальным животным привело к резкому снижению (-66%) бактерицидной активности крови и снижению -лизинов на 49%. При этом наблюдалось достоверное увеличение активности лизоцима в сыворотке крови на 23%, что может отражать напряжение в работе данного звена защиты при воздействии повреждающего фактора.

Применение кефира без добавки «ЭРАКОНД» снижало напряжение в активности антимикробного фермента лизоцима, активность лизоцима хотя и была увеличена на 15%, но достоверно не отличалась от уровня интактных животных. Бактерицидная активность сыворотки крови при этом снижалась в меньшей степени, чем при введении только СС1₄ (на 42%), но содержание -лизина не отличалось от его уровня в контрольной группе 1. Использование кефира с БАД «ЭРАКОНД» в значительной степени усилило положительное влияние кефира на показатели неспецифического гуморального иммунитета, что особенно проявилось в отношении бактерицидной активности сыворотки крови и содержания в ней -лизинов. Бактерицидная активность была выше на 127% по сравнению с контрольной группой 1, тогда как применение одного кефира увеличило этот показатель только на 67%. Разница в бактерицидной активности между контрольной группой 2 и опытными животными оказалась достоверной: опытные значения были выше на 36%.

В отличие от контрольной группы 2, которой вводили только кефир, в опытной группе увеличилось содержание -лизинов на 31%по отношению к контрольной группе2 и на 41% по отношению к контрольной группе 1. Отмечалось достоверное снижение активности лизоцима по сравнению с контролем 1, которая достигла уровня интактных значений.

Таблица 3

Влияние профилактического применения кефира с БАД «ЭРАКОНД» на фагоцитарную активность лейкоцитов.

Группы животных, n =8-10	Фагоцитарная активность лейкоцитов	Фагоцитарный индекс лейкоцитов	Процент завершенности фагоцитоза
Интактные животные	62,32,99	0,820,05	44,52,51
Контроль 1 (СС14)	45,61,59 -27%, Ри0,001	0,620,04 -24%, Ри0,01	30,01,37 -33%, Ри0,001
Контроль 2 (кефир +СС14)	512,27 -18%,Ри0,01 Рк10,05	0,700,03 -15%, Ри0,05 Рк10,05	33,52,96 -25%, Ри0,05 Рк10,05
Опыт (кефир+БАД+СС14)	68,53,11 +50%, Рк10,001 +34%, Рк20,001	0,970,04 +56%, Рк10,001 +39%, Рк20,001	42,22,38 +46%, Рк10,001 +26%, Рк20,05

Р_и – уровень достоверной разницы по отношению к интактным животным;

Р_к1- уровень достоверной разницы по отношению к контрольной группе1;

Р_к2-уровень достоверной разницы по отношению к контрольной группе 2.


Изучение такого важнейшего клеточного фактора неспецифической резистентности, как фагоцитоза, показало, что под влиянием СС1₄ наблюдается снижение всех исследованных показателей фагоцитоза примерно в равной степени: фагоцитарная активность лейкоцитов снизилась на 27%, фагоцитарный индекс лейкоцитов – на 24% и процент завершенности фагоцитоза, как показатель эффективности внутриклеточных систем разрушения чужеродных частиц, -на 33% (табл.3). При применении кефира без добавки «ЭРАКОНД» вышеперечисленные показатели функциональной активности фагоцитов снизились по сравнению с интактными животными в меньшей степени (-18%, -15%, -25% соответственно), но в тоже время они достоверно не отличались от значений этих показателей в контрольной группе 1. Профилактическое введение кефира с БАД «ЭРАКОНД» перед применением СС1₄ значительно повысило исследованные показатели фагоцитоза, как по сравнению с контрольной группой 1 (+50%, +56% и +46% соответственно), так и по сравнению с контрольной группой 2 (+34%, +39% и +26% соответственно). При этом фагоцитарная активность и фагоцитарный индекс лейкоцитов, а также процент завершенности фагоцитоза оказались даже несколько выше этих же показателей у интактных животных.

Выявленные нами достоверные отличия между гуморальными (табл.2) и клеточными (табл.3) факторами неспецифической резистентности в контрольной (группа 2) и опытной группах животных свидетельствуют о том, что выраженное защитное и стимулирующее действие в отношении этих факторов обусловлено добавлением в кефир БАД «ЭРАКОНД». При этом восстановление клеточных факторов неспецифической защиты под влиянием «ЭРАКОНД» происходило в значительной степени более эффективно, чем восстановление исследованных гуморальных факторов.

Т.о. профилактическое применение кефира с БАД «ЭРАКОНД» способствует сохранению на высоком уровне неспецифических клеточных и гуморальных факторов иммунитета при действии повреждающего химического фактора, что обусловлено иммуномодулирующим действием «Долюцара».

3. Изучение гепатозащитного действия кефира с БАД «ЭРАКОНД» при остром токсическом СС1₄-гепатозе.

Наличие в люцерне широкого спектра биологически активных соединений, таких как витамины, флавоноиды, пектины, каротины и др., а также сведений о гепатозащитном действии «Долюцара», явилось обоснованием для изучения гепатозащитной активности кефира с БАД «ЭРАКОНД».


3.1. Методы исследования и постановка опыта.

Гепатозащитное действие кефира с БАД «ЭРАКОНД» было изучено на белых беспородных крысах-самцах, массой 220-250 г на модели острого токсического поражения печени четыреххлористым углеродом: 3 х кратное через день введение 50% раствора СС1₄ в дозе 0,15 мл /100 г массы тела.

Кефир с БАД «ЭРАКОНД» готовили, как описано в 1.1 и вводили перорально в дозе 150 мг долюцара на кг массы тела за 14 дней до начала воспроизведения модели острого поражения печени и затем ежедневно в течение еще 5 дней (всего 19 дней) на фоне воспроизведения СС1₄-поражения печени. Исследуемый продукт вводили утром в одно и то же время, до кормления животных. В случае совместного его введения с СС1₄ кефир давали за 1 час до введения гепатотоксина. Забой животных производили через 24 часа после последнего введения CCl₄ (контрольная группа животных) или совместного введения с исследуемым продуктом (опытная группа животных). Одновременно проводили забой интактных животных, голодавших в течение 12 – 14 час.

Эффективность гепатозащитного действия оценивали по нормализации биохимических показателей функционального состояния печени, которые являются наиболее информативными тестами, доказывающими эффективность соединений, испытываемых в качестве гепатопротекторов: активности аланинаминотрансферазы (АлАт), щелочной фосфатазы (ЩФ) и содержанию общего билирубина в сыворотке крови, содержанию триглицеридов в гомогенате печени.

Активность ЩФ в сыворотке крови определяли по методу Bessey O.A., Lowry O.H., Brock M.I. (15), используя при этом стандартные наборы реактивов производства «Laсhema». Активность фермента выражали в международных единицах на литр сыворотки (мкатал/л), которые означают число микромолей 4-нитрофенола, высвобождаемого в 1 л сыворотки за 1 час при 37С.

Активность АлАт в сыворотке крови определяли по методу Reitman S. и Frankel S. (11) c учетом методических указаний по применению унифицированных лабораторных методов исследования и выражали в ммолях пировиноградной кислоты (ПВК) на 1 л сыворотки за 1 час инкубации при 37С, используя стандартные наборы реактивов производства «LaChema».

Для определения билирубина в сыворотке крови использовали метод Йендрашика (11) с использованием стандартного набора реактивов «LaChema». Содержание общего билирубина выражали в мкмолях на 1 л сыворотки.

Количество триглицеридов в гомогенате печени (мкмоль/г) измеряли по Gottfried S. P., Rosenberg B. в модификации Сентебовой (12,14). Стандартный раствор триолеина для определения содержания триглицеридов содержал 80% воды для устранения ошибки экстрагирования. Гомогенат печени для определения триглицеридов готовили на 0,85 % растворе натрия хлорида в соотношении 1:9 в 4,5 мл физиологического раствора.

Статистическая обработка результатов проводилась по компьютерной программе «Microsoft Excel» с использованием критерия Стьюдента (2).

3.2. Полученные результаты.

Результаты исследования представлены в таблице 4.

Таблица 4

Влияние лечебно-профилактического введения кефира с БАД «ЭРАКОНД» на некоторые биохимические показатели функционального состояния печени при остром СС1₄-гепатозе.

Группы животных, n =8-10	АлАт сыворотки крови, ммоль/лчас	ЩФ сыворотки крови, мккат/л	Общий билирубин сыворотки крови,мкмоль/л	Триглицериды печени, мкмоль/г
Интактные животные	0,550,049	0,220,013	12,21,40	16,03,4
Контроль (СС14+кефир)	1,000,036 +82%, Ри0,01	0,460,052 +109%, Ри0,001	17,61,20 +31%, Ри0,05	37,63,8 +57%, Ри0,01
Опыт (СС14+кефир+БАД)	0,800,047 -20%, Рк0,05 Ри0,05	0,280,038 -40%, Рк0,05	14,10,9 -20%, Рк0,05	15,50,9 -60%, Рк0,001

Как видно из таблицы 4, в контрольной группе животных (СС1₄-гепатоз) наблюдалось повышение активности АлАт и ЩФ в сыворотке крови на 82% и 109% соответственно, повышение содержания в крови общего билирубина на 31% и содержания триглицеридов в печени на 57%, что свидетельствовало о развитии цитолиза и холестаза гепатоцитов, о нарушении детоксицирующей функции печении и ее жировой дистрофии.

Лечебно-профилактическое применение кефира с БАД «ЭРАКОНД» привело к нормализации активности щелочной фосфатазы и содержания общего билирубина в сыворотке крови, а также содержания триглицеридов в печени, снизив эти показатели соответственно на 40%, 31% и 60%. Выявлено также достоверное снижение на 20% по сравнению с контролем активности аланинаминотрансферазы, но активность этого фермента осталась достоверно выше уровня интактных значений.

Т.о. добавление к кефиру БАД «ЭРАКОНД» способствовало проявлению в достаточной степени выраженной гепатозащитной активности данного продукта в условиях острого токсического СС1₄-гепатоза.

Выводы.

1. Профилактическое применение кефира с БАД «ЭРАКОНД» оказывает положительное влияние на окислительно-антиокислительный статус организма, снижая после введения четыреххлористого углерода содержание перекисных ТБК-активных продуктов в печени и крови на 38% и 21% соответственно и повышая активность антиоксидантного фермента каталазы в печени и крови на 57% и 150% соответственно.
   
2. Профилактическое применение кефира с БАД «ЭРАКОНД» способствует усилению нормализующего действия кефира в отношении гуморальных факторов неспецифической резистентности при действии повреждающего химического агента, повышая бактерицидную активность сыворотки крови на 36%, -лизинов – на 31% и нормализуя активность лизоцима.
   
3. Профилактическое применения кефира с БАД «ЭРАКОНД» способствует усилению действия кефира в отношении нормализации функциональной активности фагоцитов при действии повреждающего химического агента, эффективно восстанавливая фагоцитарную активность и фагоцитарный индекс лейкоцитов, а также значительно повышая (+26%) процент завершенности фагоцитоза.
   
4. Лечебно-профилактическое применение кефира с БАД «ЭРАКОНД» эффективно защищает печень от повреждающего действия четыреххлористого углерода, нормализуя показатели холестаза, жировой дистрофии и антитоксической функции печени и снижая показатель цитолиза гепатоцитов на 20%.
   
5. В связи с инициацией универсальных механизмов адаптационно-приспособительных реакций организма на воздействие повреждающих агентов, кефир с БАД «ЭРАКОНД» способен поддерживать в физиологических границах функциональную активность многих органов и систем организма и может быть рекомендован для профилактики здоровья как общеукрепляющее, иммуномодулирующее и антиоксидантное средство.
   
6. Для предупреждения различных заболеваний очень важным является выявленное антитоксическое и гепатопротекторное действие кефира с БАД «ЭРАКОНД».
   

Список литературы.

1. Бабаскина Л.И. Фармакологическое иследование родов люцерна, люпин, вика семейства бобовых, перспектива их практического использования. Автореф. дисс. на соиск. уч. ст. д.ф.н. – М., 1998. – 48 с.
   
2. Беленький М.П. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта.- 2-е изд., перераб. и доп. - Л.: Медицина, 1963.-149 с.
   
3. Бухарин О.В., Созыкин В.Л. Фотонефелометрический метод определения бактерицидной активности сыворотки крови // Факторы естественного иммунитета. – Оренбург, 1979. – С. 43-45.
   
4. Бухарин О.В., Созыкин В.Л. Факторы естественного иммунитета. -Оренбург.- С.43-45.
   
5. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. - М.: Наука,1972.- 252 с.
   
6. Воробьев А.А., Быков А.С., Пашков Е.П., Рыбакова А.М. Микробиология: Учебник. - М.: Медицина, 1994.-288 с.
   
7. Дорофейчук В.Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом // Лаб. дело. – 1968. – №1. – С. 28-30.
   
8. Иванов А.И., Чухловин Б.А. К методике определения поглотительной и переваривающей способности нейтрофилов // Лаб. дело. – 1967. – №10. – С. 610-613.
   
9. Итоги науки и техники. Проблемы анализа эндогенных продуктов перекисного окисления липидов. Сер. Биофизика. – М.: ВИНИТИ, 1986. –135 с.
   
10. Казаков А.Л., Чеченов Ш.Ш. Люцерна – перспективный источник лечебно-профилактических средств. Материалы 53-й регион. конф. по фармации, фармакологии и подготовке кадров. Пятигорск, 1998. – С. 16-17.
    
11. Колб В.Г., Камышников В.С. Справочник по клинической химии. – Минск: Беларусь, 1982. – 336 с.
    
12. Методические указания по применению унифицированных клинических лабораторных методов исследования /Под ред. М.И. Прохоровой. - Л.: Изд-во ЛГУ, 1982. - 272 с.
    
13. Мешкова Н.П., Северина С.Е. Практикум по биохимии. – М.:Изд-во Московс. ун-та, 1979. – С.157-158.
    
14. Сентебова Н.А., Салицкая Н.В. Предложения по унификации методов определения триглицеридов в сыворотке крови //Унификация лабораторных методов исследования. – М.: 1978. – Вып.8. –С.67-75.
    
15. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования /Под ред. Кост Е.А. – М.: Медицина, 1975. – 383 с.
    
16. Тутельян В.А., Суханов Б.П. Австриевских А.Н., Позняковский В.М. Биологически активные добавки в питании человека (оценка качества и безопасности, эффективность, характеристика, применение в профилактической и клинической медицине). – Томск: Изд-во НТЛ, 1999. – 296 с.
    
17. Ускоренный нефелометрический метод определения -лизоцима в сыворотке крови по О.В. Бухарину, Б.А. Фролову и А.П. Луде. – Томск. – Изд-во Томского университета, 1974. – гл. 3: Методы определения -лизинов. – С. 54-57.
    
18. Ohkawa H., Ochihi N., Vagi K. Assay for lipid peroxides in animal tissues by thyobarbituric acid reaction // Anal. Biochem.- 1979.-Vol.95, №2.- P. 351-538.
    
19. Vchiyama M. et al. Biochem. Med. – 1980. – v. 23. – p. 302.
    
20. Vchiyama M., Mihara M. Analyt. Biochem. – 1978. v. 86. – p.271.