Geum.ru
Темы диссертаций по экономике » Логистика

ИЗУЧЕНИЕ ОПРЕДЕЛЯЕМЫХ IN VITRO ГЕНЕТИЧЕСКИХ ПРИЗНАКОВ ШТАММОВ КОРОНАВИРУСА - ВОЗБУДИТЕЛЯ ТРАНСМИССИВНОГО ГАСТРОАНТЕРИТА СВИНЕЙ тема диссертации по экономике, полный текст автореферата



Автореферат



Ученая степень кандидат биологических наук
Автор Дерябина, Елена Григорьевна
Место защиты Киев
Год 1968
Шифр ВАК РФ 08.00.06

Автореферат диссертации по теме "ИЗУЧЕНИЕ ОПРЕДЕЛЯЕМЫХ IN VITRO ГЕНЕТИЧЕСКИХ ПРИЗНАКОВ ШТАММОВ КОРОНАВИРУСА - ВОЗБУДИТЕЛЯ ТРАНСМИССИВНОГО ГАСТРОАНТЕРИТА СВИНЕЙ"

яданА. ЯВИНА И ОГДВНА ДРУЖБЫ НАРОДОВ АКАДой НШ . УКРАИНСКОЙ ССР

ОРЦВНА ПУДОВОГО КРАСНОГО 8НАМЕНИ ЖС1ИТУТ ДОРОЗДЖОПМ . И ВИРУООЙОГИИ пени Д.К; 8АВОЖИНОП)

На правах рукотии

Л-22062,

ДВШБШАВявнаГрвгорьевна

УДК 619:576.656.ООб.ОГ :в8в.4

иятошв дарвдшгаак № чИтв тжтоеских пришлю

ШТАММОВ КОРОНАШГУСА - ВЭЭБУдатЭИ ТРШСКИССИШОГО .'"Х ГАСТРОЭДТЕРИТА СБИНВЯ " /'.*

08.00.06 - вируоояогая

А ВТОР В в ВРАТ

диссертации на соискание ученой степени л вняидата (дологических наук

Киев - 1668

Работа выпонена в лаборатории нале ку лирной биологии . игенетики никроорганивиов Украинского научно-и с следовательского ветеринарногоинститута Сиого отцеленияВАСХВДЛ.

Научный руководитель -

Официальные оппонент:

Ведущая организация,

кандидат ветеринарных наук В.А. КРАСНОБАЕВ Г

доктор йжологичвскжх лаух В.С.ДЯЧЕНКО ; . .''V.;

доктор иедвдиехмх жаук В.П.ШРОБОКСФ

-Всвсоювныйгосударстввннцй научно-контрольный, институт Эетпрепаратой Гооагропроиа СССР /г.Москва /.

Ващята диссертации соотоитоя

____ чао. на васецании специализированнм^о совета.

1В8 г.

Д~ ОД 1 по вадатв докторских диссертаций при Институте щировяологии и вирусологии ии. акад. Д.К.Заболотного АН УССР по адресу: вбе148т Киев-148, ул.Эаболотного, 20, ШВ.

; - С диссертацией модно овнакомиться в библиотеке Инотиту-Та юироОкологии 'л вирусолога* АН УОСР.

Автореферат равосяан Ябуг&с^1АВе года. .'..-'

Ученые секретарь ог^чк алиаирове^нного ? совета

Э.А.КОВАЛЕНКО

- _ Х-. I :

ОБЩАЯ JCAPAKTRPHCTVKA РАБОТО . ' ' ' ' :

:-А Актуаяыюсть проблемы^ коронавярус трансмиссивного гасгро-' ' Х ' энтерита свиней /ТС/ является возбудителем наиболее опасного.

и губительного п условиях промышленногосвйновояства~диарейно-' " . ' Хго заболевания молодняка, пГС поражает животшх всех возрастов, ' г но наиболее тяжело протекает и рнэинает високую /до 100 %/ смертность срепи поросят моложе 15-днепного возраста. Поучение биолог ; гии возбудителя, его генетических признаков является очень вах-1шм, .поскольку позволяет подвести научную основу для совершенСТ- ; копаняя существу

Знание генетических.признаков позволяет виявить сходство 1 и различия медау штаммами вирусов,', судить об их разнообразии, 1 и вменениях при адаптации и'аттенуацтг, проводить ди^еренциацкю ' межи/, близкими 'штампами вирусов, осуществлять контроль оа сос- ' !" тоянием штаммов в ходе работ по созданию вакцин и при их проиа-" водстве /Генлон ю.з., 19G7; Kantoch \1Р78 /. ; ;

Исследования по изучению определяемая in vifro. свойств штаммов вируса 1ГС различного происхождения," приведенное sa ру- т . : . бежом, выявили наиболее существенные для их характеристики при. внари: термостабильность, устойчивость к кислым рН,* раэличным .' ' ' . протеазам, , размер бляшек и температурная чувствительность

размножения. . Х ' Х Х Х ' ' /л'V'"*i "."'Л '.'

У':'.~''-*.. По ряду из них-били обнаружены рапличая между вирулентны- '

; ми и аттенуироваге

' допаний говорить о налички указаниях коррелятивных свявей у: 7 lAude Х et : al. , \Я79, tsot ; Aocseirt , tO; Х fttjn&ud . aV . " . 15/. Это, однако, не помешало исполь-

. -зояанио получена-л результатов в оценочной и селекционной рабо- ! ."., те по созданию новых"'пакгажмх штаммов. Работы СЬеПуХ-у';.\,- у':.--:. - *... /1РВ5/ с вирулентными штатами и_ вакцинными' золятами В1ТС . '. снова стш

тнвнл свяаео. В Соретском Союзе к началу выпонения нашей ра~ ' 4 '

"Цитр иуш

Мое г. ГД.Г.^" .па ь^л**кэз.

гкг;,. - ХV!. А,

боты систематические исслецованияс ВТГСподанномувопросу .от--су тств об ал и. Рассмотренныевше обстоятельства делали их прове- дение крайне актуальными.. ХХ . : ' Х ''/.'У:.!':.

Х Работа посвящена развитию этого направления исследований и ваклюается в научении определяемых In vitro генетических признаков достаточно' бол ъшогоколичества'штаммов вирусаТГС различного происхождения, вккчоя референтные, вирулентные и аттенуи-- ров&шше штаыьы,"*а также вакцинные иволяты, в той числе иа применяешь в СССР живых и инактяеированной вакцин. ' . ..;1;.1: Сель-и задачи Исследований. Целью работы являлось изучение ' . существующего ^ разнообразия вирулентных и аттенуированннх праймов вируса TTC на основе характеристик их по комплексу определяемых in vitrO. генетических'признаков для выявления наличия, степени и пределов изменчивости по иэучаёшм прпанакаи. - - : > ; д

5 Способ достижения цели ' сравнение ' характеристик комплекса научаемых признаков референтных, вирулентных и аттенуированннх штампов и вакцинных иволятов ВТГСрааличкогО/происхожценис ис-Польвованием вкспёриментапьн'о обоснованного; метода определения каждого: прианака, *;по ввсияющего шксимально'вштить'воеможныераэ личия; предварительная адаптация к.,одной:клеточной системе всех -иву чаемых, штаммов ииволятов, имеющих/различную длительность и историю пассажей;паралельное изучение двух линий референтного штамма Пурдио ВТГС, полученных ив равных источников, а также аттенуировенного штамма и двух вакцинных иволятов -производных одного штамма /ТО/, ' * ииеюах раануо. историю пассажей и систе-И1 культивирования,* - изучение одних л тех же признаков неклонй-рованных популяций штаммов и вэделеиных иа них хломовых линия ^

Для достижения укаааннойцеля Оши поставлены следующие задачи:; * .'Х.'Х " '. ' Х Х Х У- '. 'ХХ * Х * ''У^^Т'H-'^'f-у V- t/ разработать експериментально обоснованные методы определения каждого изучаемого признака и критерии его оценки;

,2/ охарактеризовать.по комплексу определяемых i(i VitrD , Х .V генетических признаков, леклонировшшые референтные, вирулентные и аттенуированные штамм и вакцинные иаолга ВТГС, включая иао-ЛЯШ иа применяемых В.СССР вакции; ; У ./Л'.У-

v 8/ провести клонирование и ивучить характеристики клоновых линий вирулентных и аттенуированнш; штаммов по комплексу, техже Прививков.. С ; .' -v1.*'; : -:<-''"Н-

'. v Научная новизна. Разработаны экспериментально обоснованные метода и критерии оценки определяемых in vrtro . Х Тг

и рН 3,0 генетических признаков штаммов вируса TTC.

Покавана необходимость определения комплекса генетических признаков при оценке штаммов как неклонпрованного, так и клонированного вируса TTC.

Впервые по комплексу генетических Признаков, определяемых П viirO , охарактеризованл штаммы и изоляты на применяемых

в СССР живых /ВПШ-5 и Рима/ и ш ак т нэ и рои анн о й /М-43/ вакцин.'

Теоретическое и пракгическо^зн^екие работ;), Полученные . результаты могут найти примененле в качестве основи при-иауче- > нии изменчивости штаммов вируса TTC приатсенуации в различных системах культивирования. Они.могут быть использованы при отбо-^ ре, оценке л характеристике штаммов вируса TTC в исследованиях по совершенствованию сушсгЬуюирх и создание новых вакцинных -штаммов, методов диагностики и диагностических препаратов; Полученные нашше свидетельствуют о невоемошостя использования . S, т50, тг : ,. рН 3,0 и пЧР - признаков, определяемых ri vHto л в качестве лабораторних маркеров для дифференциации вирулентных и аттенуированкых штаммов ВТГС, что подтверждает точку врения об отсутствии корреляции.между ними и патогенностью. Показано существование различи по генетическим признакам, определяемым Itl Ч²гО между штаммами-ВТГС, имеющими общее происхождение, что мотет быть использовано' при их ди}ферⳳциации. ..

Апробация работы. Материала диссертации доложены, обсуждении одобрены на Конференциях молодых ученых УкрИИШ в 1933 и -19G5 гг., на конференции в ВДВ АН УССР, посвященной 60-летию образования СССР в 1962 г., на кбóференциях: "Ветеринарные проСледа Промчшлешого свиноводства'4 в 1863,; 1Ш5 л 1B7 гг., на УШ Международном конгрессе по'болезням свиней в 964 г, /Тент, Бельгия/ и па Симпозиуме, посвященном 75-летию Института им-Ш-Леффле-. ра в 1665 г. /о.Римс, ПДР/. :

' Публикация научных исследований. По материалам диссертации опубликовано. 14 печатных работ"....

Объем и структура работы." Диссертация изложена на / 3 С страницах,машинописного текста и вккчает: введение, обзор лихе- ; ратуры, собственные исследования, обсуждение результатов, выводы^ практическое ' вначение работы,' список литературы, приложения. Работа содержит 9 рисунков, 17 таблиц; Список испольаоваттой

:. литературы вкшаео 147 источников, иэ них 118 - иностранных.

: Х Х . . попошш, гшоси?.ые на зш11у

\-1, Целесообразность использования при характеристике втаи~' мов комМекса определяемых Нг уНго генетических привнахов.

2. При характеристике штаммов вируса 1ГС по генетическил л

: признакам необходимо использовать как неклонированну.ю, так и : ;

Х клонированную популяции вируса. V'.'*й-'- *.'

' 3. Существенные различия по 5 , Т50 , Тг , рН 3,0 и ТЧР г ' ;1 V приан^ам,' определяемый 1п )[11го , могут быть выявлены как/Х -'среди вирулентных, так и среди аттенуированных итамыов,вируса ',*.-. -ТГС. Вирулентные и. аттенуированниё отамш ВТГС могут обладать . Ь адинаковдаи характеристиками' этих признаков. ; '

4 Невозможность использования изученных генетических пра-:' ";;, внаков, оп'рецеляешх Ц у'^ГО , в качестве лабораторных марке' рои для ди^ренциации' вирулентних и аттену йрованных штаммов , ' , вируса'ТГС. \ ' ' Х' ( Х^К/Л"' .-^У'^ у;'"''

; 5. Возможность использования 3 , Тб0 , 1г , 3,0 и - . ".'.. 1ЧР - прианаков при эталонизации штаммов ВТГС раал.йчного происхождения." ' ' /.'Х'..'Х.;'. Х V :Х Х V- Х ' Х СОБСТНЕИНЬЕ ИССЛЕДОВАНИЯ .'ХХ Х ."/

'' - 'VМатериала и методы исследований' Х Х ' .

Вирус, культуры клеток и спецы. В работе использовали еле- ;'.-/ дующие вирусные материалы/табл. 1/. Все штаммы и иаоляты из вак- ' цин были адаптированы к культуре клеток СПЭ9 до появления ста-СИЛЬНОГО ЦГ|Д И ПОСТСШИНЫХ ТИТрОО ИНфеКЦИОННОСТИ в данной систе- ' ые. В качестве ВТГС ОНИ бЫЛИ ИДеНТИфИЦИрОВаНЫ серологически . в

* реакции нейтрализации с референтными антисыворотками, электрон-П0иИКр0СК0НИЧеСКИа. ПО чувствительности К растворителям ЛИПИДОВ /хлороформ/ и по влияние Ш Ыд на термокнактивацио.

^ V Все исследования проведены'на монослойной культуре "клеток Х почки свиного эмбриона /СП9Е/, получаемой из лаборатории куль- " тур,клеток УкрНИШ. Культуру клеток выращивали на смеси сред > В 199 я 5^-ного гемогидролиэата с 10 сыворотки КРС; антибио-- :".. тики /пеницилин и стрептомици1|/ добавляли в концгнтрации *Х : 100 ннг/ыл я 100- ед./мл. В качестве подяерниааюшей испольэова- ^ : ли ту *е среду Сев добавления сыворотки. Г > Г.;,'-. :"-.

:' :.; Y ;ч\- '.V ; , Х Тайлица  V. < '

ОСщие.сведения об испольоованних штаммак вяруса TTC . .

-V -j..- --.Vi" , :Мувй-. . ; . :Твтр Вирулен- .

Штамм . Х Откуда подучен :0оратор-:м,.о _пДй Х :цион-

---А'.--..

У-.-. Х Х : - :най .Дv : ^ТОДсят или ..,-.

; 4 ; ' '; : Хra/- ; поросл- ,

- -' \ -V: :гнотооио-. :

ЦУ.РЦЬЧ ' ВПйО! ветпрепа- . музей- . культура ППС, : /ЧССР/-m ратов. ;. ХХ на - ЩД на 8-5 tO4

* Х < ;.vv '..-,;-, Х сутки -.-Г.'

; ПурдЫо-115 Исследовательская ' , : культура №т&

п .л станция вируса- лавора- Щ1Д на 2-8 Х л логин и иммуно- г торнай сутки - .. lv- Сг . -

* -.-' логмя в Тиверваль- ' - ''.-

Гриньоне.Франц-ля И;'' 'г

Шиауока ВПШ ветпрепа- ыувей- культура ППС, : 0' - v1-: Раюв '; .ч : ный ЩЩ на Э-5. 10*

J 1 >v

- + ^ -

4 - . --5'

.~-AV" .....

сутки ..........(:"*-.

М-42 -. . Х ВГОНИ ветпрепа- му вей- ' культура ППС

-..-л-' ратов. Х. Х -..'. имй . ЦЩ на 2-4

f .'Д.Vi-- СУТКИ : v - tor*

Дм : : j Исследоаатепьс- лабора- культура кле- - л -.-Щ1 яая станция виру- торнай токЯРть- Х Х 10" ' сологии и имму- Ц[Щ на 2-4

НОЛОГИИ В Тивер- Х V..1- СУТКИ валь-Гриньоне,

' . . . вранция Л; \ - ; .; ^^'..О-:'';-1 :<;'.;

Окинв ВП0С1 ветпрепа- иаолят культура ППС,' Х :'У-: ^ - , -; Х Х. . ратов . Х , ; ив ЦГЩ на 4-5 :,--л - : .ваяци- сутки 'Л.-. КР-100 - .

Х /Л-;;',-:- ^ Х/'.; " -*: "

' Т0<кОД1О9 'ВГНКИ ветпрепа ' лабора- кулиура ПС, У ' ^

рахов . : шторный :ЦГЩ на 2-4 : 1 10Р '

СУТКИ;;

РгмоКоммерческая ,се-'иаолят " культура ППС,. ' ' .Х: "." рия лиофилиэиро- из Х Х" ЦГД на 2-4 Х . л Х V

'...;*""-'ванной вирус- " вакцина сутки 1Сг-1Сг..' ^ - :

-г .вакцины Римо-ТГС. '.Д -, сер.Т 104-01.78 ОТ ; Х . ЗО.О.ТеЛ'ДР/ . < Х " Х

'.v-.ВГЩИ ветпрегтара- иаоляг культура ППС, Х = Х Х -тов - лиофилизи-'".. на Ц1|Д на 2-3 , tO^-ICr - ; ., Х ' ропанная вирус- .Х вакнк- Х . сутки Х - > Х;

".'вакцина Омской ни . - - Ха-., г-.-^ ->.::

ХХ виоДаГпжи.оь/ВПпКИ/ . . ~Х /,:'..; -

. : Титрование ии}еуционности. вирусных материалов на культуре ..клеток проводили по ЦГЩ и методом бляшек. Титр инфекционности т.>'.. рассчитывали по методу Ашмарина-Кербера и выражали в логарифмах ~

Х ОДбО/ил -ИЛИ БСЖУл" соответственно. . )

Изучение циклов репродукции проводили .путем определения',' Х

г ;' урожая Секционного вируса через 0, 2, 4 ... 48 ч после инокуляция па результатам титрования инфекционности вируса по ЦОД-Л : Определение кривых инактивации при 60

: /для ДО 3,0 - в течение 5 - 120 мин/ и необработанного вируса.': . : . Полученные 'данные служили основой плй выбора режима при оцен-

. . . ке признаков как генетических маркеров.' . Х ' , Х';... ' Х

: \ - Генетические признаки определяли при следующих режимах: ! - прионах/термостабкльнэсть при 50

Х экспозиции ЭО мин; Тг - признак /устойчивость к обработке трип-

V стш/ - 0,25 % раствор фермента, эксповиция 80 мин, температу-^ ра 8?

V Ман-Илъвейна, рН 3,0, вкспозиция 60 мин," температура 36

; ' : хем сравнительного титрования обработанного' и контрольного ма-

-V териасв. у.;-''Г.;' ., "^"у-. :'' -Ч"' '" - 1

признак /равмер негативных колоний/ изучали после'' 120 ч инкубирования инъецированного моносдол при 87

- рыгнем, содержащим 1,35 % агара! Для каждого штамма вируса ТГХ5 измеряла диаметр не менее 200 бляшек. Подсчитанные бляшки'распределяли по классам в соответствии с диаметром и выражали это рас- .

: пределение,в процентах, после чего определяли средний диаметр бляшек каждого ггамма.По реаультатам подсчета строили графики -. : кривые распределения бляшек по размерам. - 'Х . . / Х \ ~ ':'. Г Г Х'.:'.' Температурную чувствительность репродукции вируса при 40

^ ; Клонирование вируса проводили рандомно; методом отбляшки -- х блшке о подращиванием. Кратность клонирования > 3-6 рае. По-%*ученеие кл5Ш проверяли по тому же кошлексу генетических -При- V / внаков, что я пехлонированний вирус.!'/' - ''Х'. "*'ХХХХ'."ХХХ'.-'г''-.' Х '.

- у С^атиотичсскую обрабосту^ результатов проводили по методикам,

описанию Н.П.Ашмаринм и А А. Воробьевым /1965/. Все опити проводили не менее, чем в трех повторностях. Значимость рааличий для виртлеотшх ттаидав определяли по сравнению ;со штаммом Tl-tt5; ^ " пля аттенуироеанных - с ТО^ОД^. Х V- :

.'.' '.-.-"v.'-Х'. Х ' Результаты исследований - -л" '.-''''

Генетические признаки яекяонирозаннвд атаммбв вируса TTC.* *" " -S- признак И sy ч t?;iS-признак О некриярованнах'штамдав .и вакцинных изолятов ВТГС. Результаты представлены в таблице 2.

; . . S - гривне* леклонировачннх таммов и изолятов иа . Х l/syj Х . вакцин вируса TTC ...'"J-:.

Штамм, : Всего '.-в т.ч./t бляшек диаметром мм ' : Средни Я

иаолят. ;тано 'Ч- -Ч-Ч:Ч " 'ячижиа hj-

".V йяяюек "

:таЩек :t st-2 >. û2-8 3-4

ПЧ : 499 7,20 88,90 3,02 О О 1.46+0,01 П-115 ; 206 30,25 53,39 13,35 ! О . О , 1,Эз]ю,(И , < Шиауока . 690 ' 22S0 71,40 б,80 О 0 1,3140,03 ' v 650 1 83 20,90 43.85, 29,30 .4,12 - 2,63*0,0* л-42 . 321, 45,t7 43,2? . 3,74 2,82' О 1,1440,04 ; Охийа .635 10,30 72,0- 17,70 О; 0 1,5040,03 ТО^СЦ^ 1019 8,73 53,72 27,64 0,41 1,4? t,90,03 PfMC 900 36,0 44,70 14,50 . 4,80 0,50 1,39*0,06 ВПИИ-б 416 9,64 44,60 30,81 13.S0 1,45 1 ,69*0,0*

Для Оошинегва и ученных штаммов и вакцинных иаолятов была / характергааварвженная враэличаой-степени гетерогенность по пулями .to' размеру, бракуемых. ими бляшек Наиболее однородные Оляпки . образовывал ива линии теима'Пурдъг - ТО * П-115. В vac популя- " . циях отсутствовали часта^, осЕраауювде бляшки крупнее 8 ж,средний диаметр их был* практически одинаковый. Однако у вируса ли >

*нии ПЧ количество '. бляшек диаметром мм составляло около

90 #,. в то времзг как; у/ вируса.-линии П-115 их количество лишь vl' 'несколько, превышало 50 %t Достаточно однородные по размер, бляшки образовывали также вирулентный штамм Шивуока я иаолят иэ вак,' цик>| Окина - более 70 $ их бляшек относится к классу 1-2 мм,. среднил аиаметр то: составляет 1,MiO,3 vw и 1,50*0,03 им, соответственно. : : 'у-V ;'.*: Наиболее гетерогенные по размеру бляски (fopumpossji вирулеят Hirt ятамм Д^л низких пассажей, в культуре клеток - в его сощгля-

...;цмм встречались' бляшки от1 до ш диаметром| причем" бляшки основного класса /^2-3 им/ составляли немногий более 40 Для этого штамма бця характерен и наибольший средний диаметр Йляаек -- 2,63+0,04 мм. Саше мекие' бляшки /средний диаметр 1,14  Л'* 0,04 чк/ образовывал вирулентна втанм М-42. Его популяция ока-валась достаточно однородной по.этому признаку около РО % об-

равуедах шк бляшек имело диамехр менее 2 мч. , Х

'Х".Х... Среди производных:штокма ТО штамм. ТО^СД^ и золят иа . ..;'; г; вакцины ВГНКИ-5 имели сходные . характеристики Б - признака как по Х

Х процентному распределению ф-оркмруемях ими Сдягсек та* и по сред-

нему их диаметру . Б популяции иаолята ип вакцины Риме преобладали бляшки более меткого размера, что отразилось и на уменаденви

' ' среднего диаметра бляшек /с 1,80 г 1,89 ым до 1,29 мм /. /

: Таким образом, размер бляшек позволил сукить о степени од-'. - .нороцности или гетерогенности по'нугяций йаучаемих штаммов ' и : Х И80ЯЯТ0В. В рясе случаев он позволял.осуаествить ди|4оренциацио

шташов друг от другз, в том числе итакоя Риме, ТОз^ОД^ я

&ШК1-5, имевших общее происхождение. Вместе с тем, Х> в - признак в культуре клеток СП83 не позволяет дифференцировать вирулент- Х Х :.;..' ние и аттекуированные втамми ВТГС,-поскольку среди в-ирулентных; штаммов быяя выявленл штаммы, образующие как наиболее крупные ' /, так и наиболее мекие /Ы-42 / блясии. '!Х.ХХХ \ . .-'".-' Генетические признаки, свяаанныо с бековой оболочкой; м-..-.^'- '..

' ' 'Все наученные пгсаты и вакщтные иабяяты ВТГС бши охарак- ,

териаовады по Ъф , Тг-' и гН 3,0- привнакам, связанным с бея-' новой оболочкой /габд. 3 ; у. 5 ' '/

--; - пртэнах. Прогревание при 60

тфжЦйбШ15с1ГЯ2следуемых .штаммов и вакцинных изолятоа вируса от 0,94 до 3,Ш 1д'. Каидолее термостабильной оказалась линия .">..'_ ГН.штамма Пурдш, наиболее термол'абишиы бал штамм М-42.' Две '.'..:' линии вирулентного штамма ПурдьЬ /Щ и П-115/ существенно'раа- . . личачись между, собой по данному признаку /р.с 0,01/. Ив других ;; вирулентных Етаммов наиболее термостабишш АТздИ,34р,21Ц/. ; Х оказася штамм Шизу ока. ШтаммТ^, был; умеренно термостабильным /а 1^=1,6440,821ч /. Различия по -."Ьрйкнаку '№*от-"все-ми ивучёиныш вярулент^ ЗТС ркааались суще-

Х стаецяымя /р/. 0,01 "ли р /.0,05 /." '' '.'Х Х'..'.. - '^ч--'

- <.. ,... Среди.производных штамма ТО штамм ТОд^ОД^ и иволят иа'

Таблица 3

.Характеристика генетических признаков штаммов и иеолягаа

, вируса ТГС, связанных с бековой оболочкой

Штамм, иэолят - йт50 / д : ЩДбс/и/йТг /ц адоо/к/ ; дрН 3,0 .

Ш 0,е40,га 1,4740,43 0,07*0,12 ,

11-115 3,2510,05 0,0740,30 0,9740,2В

Шизу ока ' 1,3440,21 ., -- 1,2140,1Р 2,3040,17

Чг 1 ,(>140,32 1,33+0,22 1,0140,21 ,

К-Ц з.ое+о.се ; 1,0840,12 . 2,2540,17

Окина ,5д40,зз : 1,8440,14 : 2,3140,23 .

ГСээОЧез 3,40+0,31 , 2,2440,43 1,0640,14

Риме 2,3540,17 1,9210,44 1,2440, 

ВГНК4-5 . 3,4340.40 ' 2,1)540,80 1.3740,14

вакцина Риме характеризовались практически одинаковой стабильность / Т^г.-Ф-г^ЭЗ 1д /. Изолят из вакцины ВШКЯ-5 показал значительно меньшую стабильность / д 1^=3,4340,40 д А Иаолят

- из вакцина. Окина характеризовася , максимальной "стабильностью к , прогреванию1 по сравнению с другими аггенуироваиными штаммами 7

,, / й Т50"1,5640,33 1д /, однако различия в термостабилъности меА-...;: ду аттенуированннми штаммами не являются значимыми / рû 0,05 /.

; Полученные результаты свидетельствуЬт-о выраженной ивменчи-. Х вости вируса ТГС по Т&0 - праонпку /термостабильности/, в тон .'.'л. числе и межсу двумя вариантами одного штамма;;:- Т.-'Л Г.

.: Тг- - прионпк Обработка трипсином ивучаеных втаммов и ' -. вакцинных изолятов вируса'ЯГС* приводила к снижению их' инфекцион-". ности от'^1,0 до 3,0 Ц-с Наиболее стабильныл к этому ферменту ' '

- оказася штамм Пурдьо /линия П-115/ - дТг около 0,7;1<( .4

. Вторая линия донного штамма /ПЧ/ била более чувствительна к об- . ; работке трипсином / л Тг - порядка 1,5 /, ко это различие несущественно /р \ 0,00 /. Наиболее чувствительным к трипсину Ли. иэолят з вакпкны ВПШ-5 / д Тг примерно 3,0 . Ьд /. Ос-тальнне произиодн.че штамма ТО окапались белее устойчивым* /дТг порядке 2,0 Ц /, однако раеличин между ниш не бти значимыми /р ^ г.;.:-:;

. Снижение титра инфекциоииостл при обработке трипсином вак- . ? ГИШШГО. ияолятч Окина и вирулентного гстамма М-42 было грактичёс-

" кн одинаковым, составляя ,04*0,14 lлj и t,68*0,12 -Ц , ,соот-Х ветственно. У вирулентного штамма низких;пассажей Дщ и виру- Х . . лентного вируса ГСизуока оно составляло 1,33+0,11 lg и 1,2t<

0,19 ' /соответственно. Различие по ТГ - признаку между . * " ~ . ' вирулентными штаммами П-113 и М-42 оказалось значимым,тор'-,

. . да как о остальными изученными вирулентные штаммами било несу- '.

-явственным / р û0,05 /.Х - "

;; * Таким образом, чувствительность к трипсину может бить ис-.

. пользована при характеристике штаммов и изолятов вируса ТГС и - ' в одном случае /штамм М-42/ позволила дифгренцйровать виру лен т- Д шй вакцинний штамм от других изученл;л вирулентных штаммов ви-; ' Х руса тгс. '..ХХХ Х';'Х Х. . 0 .

V .:; : fH 3,0 - признак . Обработка при рН 3,0 приводила к' сниже-." ' 1 юно титра ин^екционности изученных штаммов , и вакцинных иволятов

В1ГС от О,в? до 2,3-1 Lq .' Максимальной устойчивостью обладали ' обе дянка штамма Пурдыо, практически одинаково высокую лабиль- . . ность показали вакцинный изолятОкина и вирулентные штаммы И]л-

.*; вуока и М-42 / А рН 8,0 - от 2,25 д до 2,34.Lg /. У вирулен-' . ного штамма Bgg AfH 3,0 составила 1,0140,24 tq . Все производ-. ; ные штамма ТО практически не различались по устойчивости' к . . |Я 3,0 / л (Й 3,0 составляет от Г,й Ч до 1,37! I9 /, .

. Таким образом, исследования показали существование измен-.':. чивости между штаммами ВТГС различного происхождения по рН 3,0 -:-' признаку и позволили дифференцировать;иоолят из вакцины Окина . : j .'';; от других вакцинных иэолятоз - Риме и ВГНКЧ-5 и' аттенуироеанно-Х : го штамма ТОддЗЦ^, а такае вирулентные штаммы Шизуока и М-42 от вирулентного вируса П-115. ; ; 'л';.'.;'=;. :-;"'= '-;' Г ;'-. : .

'"'/ На основании полученных результатов при изучении признака, -- ' связанных с бековой оболочкой, определены критерии их оценки

/табл.4/ и возможности использования для характеристики и д- ' "';':-'л Х. ференца аци и штаммов и изолятов иэ вакцкя. вируса ТГС; Сопоставление характеристик вирулентных и аттену йрованных штаммов по .-:/' - каждому'из этих признаков укававает на необходимость их опреде-' ленияв комплексе. Наибольшее вначение для дифференциации ат-^ --У. тенуировайных штаммов друг от друга имеет S- Признак, виру-лентшх - Тд^ и S - признаки. v~'-'V vb'>:

' 'Х - . Тешера^рная чувствителыюсть репггоркции." Характеристику температурной чувствительности репродукции /ТЧР/ штаммов и *;'.. ' вакцинных изолятов ВГС проводили по rct40 и ^40/37 - при-

-'Г 'УУ: У-.:;"\

Критерии оценки-признаков, оболочкой

: Д: v .Х Таблица 4 связанных с бековой'-

Тёрмостабильиость

; Устойчивость к - трипсину л

;рН S,Q - стабиль-.

_^ность

величина ;: .ч /lq пВД50/м/

характер:величина. ; харая- :величина ристика : дТг ' . " терис- " " ~ штамма :/Ц ТОД^^ тика

штамма:

. . :харак-

1 штемма

' но-2,5

, стабильный У: ^Ьо;4 ;

умеренно 'стабильный

Т50 -'У

>1,5 . но

стабилышй Тг+

.стабильный рН 3.0*

умеренно'.41,0" ' умеренно стабильный: ко - стабильный Tfi 2,0'; . - рН 3,0  .

^2,6 У-,' лабильный . >2,6

У-УУ- \ Т50 ~ Х У УУ'\

"-лабильный тг -

Л 2,0: лабильный ' о FH 3,0 -

енакам. Ее результаты представлены в таблице б. . *, .*'

Г;-'У ."У ':-.:':--- - У ; - ХУУУ/У >:'.' ;v .' Таблица 5 '."'.' Р*Т 40 и ко

> Штамм, , .вакцинный изолят

:Шйеуока

Дб2 v-V." 1,09*0,25

U-42-' v - о

М-42 Окина

ОГККИ-5 Х

0,0740,02' 0,53*0,07

1,30*0,19 1,55*0,16 -

0,58*0, t4 '-.'- 1,17*0,13

.......-У"1, 1,26*0, IP J

0,10*0,18 / 0,36*0,10 '

0,ft3*0,12' V У - 0,34*0,02 '

ОИГО.З.,, " 0.24*0,02 ;

0,60*0,15 У У "'У У: 0,86*0,11 ;"

''-. 0,06*0,03 У 0,78*0,06

' Лучше всех при 40

ные' штамш Пурпью/линия П-115 / и штамм Дд^ -, низких' пассажей в У ' культуре клеток, слабее всего - вирус линии ПЧ штамма Пурдью и золят ив вакцины ВГНКИ-5/ГС^д составляет 0,07 и О.Сб, соответственно/. Для остальных штаммов и вакцинных иволятов ВШ2 вначе-ния tct^ находились в пределах от 0,17 до 0,96. У'

Определение величины a504(ygj, свидетельствует о тон, что у штаммов, пля которых.отмечено высокое значение ret П-1 }5 И / наблюдается И большая величина аначеняя ЭБО40/37 Al .О/ Высокое значение ' <0.^0/37. получено также пля : вирулентного огам- . . на Шизуока /1,17^0,13/, хотя величина rct^g у него составляла . 0,58*0,14. Для всех остодьных штаммов-характерно еначение,' ItO^Q/gj, в пределах от 0,24 до 0,85, ; причем в ряде; случаев мели идем существенные различия п характеристике ТЧР по tt^Q ЙЮ40/37- признакам /штамм Нурдью, линия ПЧ, иеолят йе вакцины ВГОКИ-5, штамм Ииауока/. Линия ПЧ существенно отлоталась

no 4P от линии П-ilS при оценке как по tcj 4q, так и ^ во . ЯЙ40/07 - припнокам. Вакцинные иэоляты - производные штамма

ТО /Рамс .и ВГНКИ-5/ существенно /р С 0,06 / отличались от штамма TOgjCa^pg по ТЧР при оценке по <040/37 - признаку, в то время;' как го ret эти различия не были, значимыми /р! ь0,05 / В то . же время, .при,сравнении, двух вакцинных иэолятов - Риме и ВШК11-5 т. по: ТЧР; имеет место1 обратная зависимость: Х rct^ пригник выявил между ким равличая,! a <040/37 - нет ro говорит о необходимости ивучения обоих признаков при характеристике ТЧР,штаммов рируса TTC. ...у:.../. V ".':';. V-'V

Для всех изученных ттьмм-n и вакииннях изолятов ВТГС отмечено уменьшение среднего диаметра 'ляшек при 40

Изучение спорстп клонированного рисуса> Клонирована Сани подвергнуты аттенуированные штамм* - прокзлоанме штамма ТО -Риме, TOgQCUjpgл ВП1К1-5, а также вирулентния штамм Д^ низких . Пассаже! в культуре клеток; Для характеристики использовали по " одному рачпоию отобринноиу кяоиу каждого дтамма. ,

: J Клеииропоние привело к вначительному повыле-

1 "кию однородности.популяции no S - Прианаку /табл.б / - у кло- ...

ков, ..подученных ио ntraunnomiux штамма ТО, бляшки основного класса /> 1-2 мц/ стали состппнть окйло 75 % гсей популяция, Срек-

: ния диаметр кленов исех rrJWMOB тданилеч /р г. 0,06/: у клона .

; Риме К21211 ~ уиеличчс.Ч, У клопов W К511 и ВГШ1 К131 уменьшися . Клоп Н7РЯ хаппктсриаопадся рооким появлением онород-

'-' . - Таблица б

/V/ '. признак клонированных.'штаммов'ТОпдВД]^, "" Дл^ V т'"-.' г, Х и вакцинных иволятоп Риме и ВТОМ-5' \V-. -..' ^'-,.

К л о и : Всего под-; считано-- -г бляшек; т.ч. 1 % бляшек диаметром, мм : : й.2-3 :>3-4 .'Средний -.^диаметр : бляшек,мм

ТО К511 400 9.75 7? ,50 12.75 0 1,53*0,05

Риме К212>4 233 2,аз . 73,3 22,66- 2,25 1,75*0,05

ВШКИ К131 овв 8,25 75,6 13,в0 2,25 1,60*0,05

Дб2 К792 47В 0,20 1,20. 97,40 1,20 2,60*0,04

ности бляшек по размеру - сшле их имели диаметр 2-3 мм. Среаний циаметр блявек данного клона сущестренно нв изменися. '

/р ^оро& /. -V

Генетические признаки. связанные с бековой оболо^ой. Ра-вультаты характеристики 5д0, Тт и рИ 3,0 - риэнпхов клонированного вируса представлены в "таблице. 7. " '/ . :

-у';-1'''; -"V"- .,''' "" \ " I ' Таблица 7 -ХУ'/Г-Х'

" Генетические признаки, свяванные с бековой оболочкой, клонов штаммов и. вакцинньгх изолятов вируса ТГС . . ' ч

' К л о н' ;' /1Ч "Щ-л/п/:

. ТО К511 3,33*0,05 1,07*0,05 1,60* О; 09 :

Риме К21211 3,08*0,00 -- 2,94*0,0? 1,49*0,09

- вгаад К1Э1; 2,03*0,10 V 2,50*0,07 2,50*0,02

ХДев'10,02 ' 0,11*0,10 .1,83*0,0? 0,63*0,02

Х Х . Изучение термостабилыюсти клонов пок^ало^ что. прогрева-: ние. привело к снижению шфевцаонности клона ТО НОИ на В,55 4 О,ОЗЦ,что более, чем в 10 раз превышало его у неклонированкого втемма ТОд^СД^. Клон вакцинного изолята Риме К21211 гаяже сни-зтог термосгабильнооть по сравнению с'неялонировавним вирусом ."'Х />4^0^.3,00 4 0,Ш 1д /, клон ВЩКИ К181 -бил несколько более. . табильнш ори прогревании,- чем невлопарованный вирус, чувствл- . тешость к прогреванию ,клона К?'Р2г-ттвмма ^2>в ЗО равменьше,

чем у исходного неклонированкого; вируса У д ^^=0^1*0,10. Ц /. Х Для клонов штаммов ТО^СЩ^, %2 и и?олята ив вакцины . Риме Х Х ' укаваннае различия существенны /.p Z. 0,06 /; для клона ВШКИ Kisi -, носят случайный характер / р ^ 0,05 /.'-.,; ;" " г: "'.;:

Снижение МлеКЦИОКНОСТЯ КЛОНОВ; при : обработке трипсином так- ; же и вменилось по сравнении с иек локированными штампами : клоны .. штаммов ТОз^СЦ^рз и ВШКЯ-5 являются'Солее устойчивыми к ! данному ферменту чем исходные кеклонировашше виру et; клоны K7P2 ..' штамма' Ддд., и К212И вакцинного м$олята Римз является, более чувствительными ,' чем неклонировачные штаммы, однако все-вдавленнив; ' различия не являютсяХаиачимл / р >.0,05 /. .Х '.';, 'Х-У,;

Обработка клонов рН 5,0, привела к большему снижению инфек-циониости клояое ТО KSI, Риме К21211 * ВГОКИ К1Э1 по сравнению с неклni(иропаншм штаммами, клон К7ЙЗ штамма Дд^ является более " стабильным при гН Э.О, чем исхокыя вирус, различия между клонированными и нехлониропаниыш вариантами штаммов TQgjQD^gg * ' ' ВШКИ-5 являются суii*eственными /р 0,01 и р Z 0,05 /, в то ' npcvw, JtaK для штамма Д^ и вакцинного иэолята Риме они незначимо /р> 0,05 /, '-/ '[У-^:- -

Таким обраеом, клонирование привело к получению линия вируса, отличеюшикся по генетическим признакам, связанным с бековой озолочкоя, от неклонярованны* штаммов; В ряде "случаев выяв '. ленные различия' били существенными /р С 0,05 /, в других они но.

сил случайный хаоактер / р ^ 0,С6 /. -у".'.

'' Температурная'чувствительность репродукции.По ret ади ЁБО^ - прививкам клоны, полученные на штамма J^g : и вакцин-Х ных изолятов Ptrne и'цГНКИ-5 существенно не отличались от всход- Х кого неклонирсванчого вируса / р Ъ.0,06 /. Клон ; ТО К511 облапал /ькзчитепъно повшениЬп ТС1 'tio сравнению <s исходным неклонировен-нам штаммом TOjgCH^ * снижение показателей ltt4Q И ФО40/37 , Солее, чем в -100 рва.Это порвол-ило предположительна отнести его к спонтанным: Is' - мутантим. Х :'; Х . ', '. .

ГУ ' : : Изучение *-. признака при 40

витальности к трипсину. , Х - /V ''

' Ряд иа полученл* клонов, представлявших интерес для ивуче-1 ния возможностей использовавл для совершенствования существующих и получения новых вакцинных штаммов, переданы для изучения их . : иммунобиологических свойств. "Х ; !.-,/ -"^i v v.'X-

= В Ы В О Д Ц Х У-'^.'^Л- '. '.':" >

' V- - : 1. Стандартизованы Х методы и отработаны режим! определения in Vjfm генетических признаков / Х Тг и pH .3,0 /, шк- Х ' ла й_критерий их.оценки.

: 2. 9 неклонированньпс штаммов вируса TTC различного проио. -.-Х хождения охарактеризованы пэ комплексу определяемых itl Vitro : генетических признаков. В ряде случаев: между штаммам выявлены {,'; ' существенные различия по ним. V/ i':; ' : 8. Выявлена выраженная в различной степени гетерогенность Х ро S - признаку и различия в среднем диаметре бляшек даже . у Х ' штаммов, имеющих родственное происхождение. . \

Х 4. Штаммы и иволяты применяемых в СССР хилых /ВГНКИ- р Х Х.. Рима / и инактгаированной /Ц-42/ вакцин впервые охарактериао-. ваны по комплексу определяемых in vt ГО генетических, при знаков, 5. Бев применения селективного давления получены клоны, от-л Х личаюавдеся от исхо дн огр некл они рованаого вируса по отиелышм изучавшимся признакам. " . : Х' .

. ' б. Показана необхоаимость изучения свойств как неклониро- : : ванной| так и клонированной популяций при характеристике штшг . .-Х.

7. Вирулентные if аттенуировакные штаммы могут обладать одинаковыми характерйстикш.ыпо S TgQ Tir Г,- pH 8,0 и ТЧР - V^ V 1 признакам, определяемым Ц vitro . ; что не поаволяет испольао- . ватЬ их в качестве лабораторных маркеров для дифференциации вит v рулентних и аггенуироеанпых штаммов ВТГС и подтверкиает . точку зрения об отсутствии корреляции махду ниш и патогенностьо, г ' У -. Практическое внёпрение результатов ' V'

Х 1. Составлены "Методические рекомендаций по оценке опреде ляемых in yitrt генетических признаков Н фиеико-химических ' свойств вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней и их ис>.,, -- пользование для характеристики штаммов при создании вакцин"^ * у-: вераденние директором;института. Они используются при оценочной

yi сел ё щио

-У 2. Полученное при выпонения работы результаты поввЬгсми -. предложить сгтм Шраыо-113 дгя диагностических работ и молеку- V ЛЯрНО-бИОЛОГИЧеСКИХ ИСССДОВаНИЙ*. Х .Х У У/У 'У.У:У.; У.У.'-У. У У Х с/ при получении, г'иперимм/шюй нтисиворотки и приготовлении антигена для лаагностикума в реакции лейтроляаатии и проив-: вопствс на их основе набора диагностику ков для реакций нейтра-. виеации; .у,г

б/ при разработке'иш?коферментлого метода диагностики ТГС; ^У-'''-

,vy в/ в коскулярно-биологических и.'биотехнологических работах по получению гибридом, пройуцирумах моноклональаые антите-

/в К ВТГС. '^У..УУ;:ЛУ':У'''УУ;У^

* Л'. 3. Клок 1МК /ГОК/, выделенной ив модифицированного ттамла ^ЗО^ег кок перспективный ля'г.шьн⳻ших работ по получений' Новой отечественной жипой виру с-вакцины против ТГС: 1

Х . Х в/ прэжел.межинстятутские испытания; /У - .-У ...

; ; б/ по рс87льтатам проверки рекомендован и йспояьвуется в у. работа*' по соэ^онию ноэой вир с-пакцкны против ТГС. Х . Х Х ХХ УУ -/Vj 4. Клоны.аакиинчогоиволята ВШИЯ-5 перепииы в ВТОКИ вег-. препаратов Гогаропрок;и СССР для 3роведекия кунобаологичес-' : лих работ с целью огрепеления воачо*носгей их исшльаования:У-У У- При: сов ершен сх эов они и.суик ству гтего вакцинного препарата. ".?.:>,

л .'.Список о rtv 0 лив о а ан напоре ЗУ льт от аы диссерт ациира Сот УУУ

1, Краснобаев Е.А., Кучерявенко A.A., Дерябина К.Г., Макаренко З.С^ Бпшкообраэумцая сгособпосгь вируса трансмиссивно- ; . Х У го гастроэнтерита стней. Акзг.вопр.вег.вирус ;//, Теа.докл. Х Bcec.RO'!.'.,вст. вирус. -'Казань; -' 1GQO. ' .; Х ; ' ' :: \ЧУ

Х 2. ДеряСиио Г.Г. Некототие фивиго-хиьмческие свойства корона- . :,:-У вируса трансмиссивного гаироэнтеритв свиней и антеровируса

' Шсерэтипа // Вестчта сел ьхоенау ки., - 1РВЗ.; - К5 1- Я Ь - .

V Х С. 81 /на укр.яадае/. , У-У'.';' . ' . . ' ;ХХ'.ХХ"ХХ"-

У. 3. Краснобаев Е.А., СоСко А.И., Д^рчОача К.Г.', Дсряб;ш'о.Н.,У -Мельникова Л.А., Осэдзе ДА., Касо? К.Й, Сриянитсльная ха-

;ХХ. рактеристика генетических прианаков вакцинных игиммов вирусе ' Трансмиссивного гастроэнтерита свинеЯ ВШКИ-5 и Римо .Вет. Х Х,. пробл. пром. свиновод. // Гее.докл.'Всес. коиф. - Киев. - . л 1903, - С. "Г.;.4 'Х;.Х"Х . . V:\:'' ^ . -:Y

' ^..Краснобаев Ц.К., Дерябина Е.Г., Деря они О.Н., Каро-Иуньес У., Квачев В-Г- Рришок А-А. СоСко А.ИГ Характеристика" генети- . чески jc признаков, фиоико-химических и иммунобиологических : свойств гатамма М-42 ВТГС. Вет.. пробл. пром. свиновод. // Tee. ^ : кл^ ; г':;:>

; Дерябина. Е.ГЕелодед Т.А.Г Чернявекая Т.И. ИэУчение бяяшко-,,'- обжалования вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней.-; /ШТС/ в культуре клеток СПШ. Вет. пробл. пром. свиновод, ; //Тев. доыь-Всес. Kent'. ~;Киев. - 1GG3. - С. 31.

Дерябин О.Н., Дерябина Е.ГКааачок Н.ВКраснаСаев Е.А. ;. Изучение генетических признаков штаммов вируса трансмиссив-. ного гастроэнтерита свиней'/ВТГС/1 связанных , с бековой обо- . дочкой кап си да'. Вет^ .пройп, пром. свиновод. // Tea. докл. ' .Х",. iBcec. "кон|>.. - Киев I';-''1983, - С. V.

.7.''Краснобаев E.Al, Дерябина Б.Г. , ДеряОстн ОЖХарактеристика " генетических признаков и фиаико-химических свойств штаммов вируса трансмиссииного гастроэнтерита свинея. УI сгьеад Украин, микробиол Л Общества,' Доне!,. 1Ю4 // Тез. докл. - Киев: Науко-Х; Х ва пумка. - 4.2. - С.204. Х Х"ХХ'.Х;Х -

; J3.Краснобаев Е.А.',."Дерябина Е.Г:, Дерябин О.Н., Попова р.А.

" Характеристика опрецеляекл in viWo генетических привна- ' * Х ков штаммов коронавируса-возбудителя.трансмиссивного гастроэнтерита свиней. Вет. нробп. пром_ свиновоц. // Tea.' докл. i V: респ. KbHl>i - Белая Церковь. 1СВ5. - 4.1. - С. 40. ;. /

' 9. Муравьев"В.К., Троценко Б.Л., Черваткк А.В., Бидоштш В.Б.,

Х Х Гордиенко О .И., Дерябина R, Г.Г Краснобаев Е.А. Показатели

Х , колострального иммунитета против ВТГС у вакцинированных сви-

, Х ней. Вет.' пробч.' пром.' свиновод. // Теэ. докл. рёбп.; конф.- : Белая Церковь./-'1663; -4.1. - С. 97. ; .

10. Краснобаев Б.А., Дерябина Е.Г., ДеряСМн О.Н. Сравнительная \ Х_".'' . характеристика по генетическим приананам двух линий штамма '; Пурдыо ВТГС. .Вет. пробл. пром. свиновод. // Tea. докл. респ. .Л коиф.-- Белая Церковь. - 1КЭ5. г 4.1. - С. 41 .':;:'

11. Краснобаев Е.А., Собяо А.И., Дербдна Е.Г., Дерябин О.Н., Краснобаев Б.А. Мацукв Г.Х. Характеристика определяем!л

;... ш vilro генетических признаков, физико-химических., и молекулярно-биол отческих свойств короаавируса трансмиссив-Х *'ого гастроэнтерита сриней /ВГЛУ Сиш., посвяи. 73-летию кн-та км. ВЛеффлера о.Римс, ГДР, 10-11 октября 1Ск5 г. // Х ХХ Тев. дам. - С. 12.

12. Раеработать и внедрить метод оценки пригодности Штаммов ви- руса трансмиссивного гастроэнтерита свиней в качестве вак-

шш по генетическим признакам и физико-химическим свойствам / Вахл. отчет по теме 13 УДК 610.576.658 Пост. ЛИТ СССР от 15,03.03 per. Я* 1.64 О 060-S74 Киев Ук

18. Краснобаев Е.А., Дерябина Е.Г., Дерябин О.Н., Попова Г.А.

'.;, . Изучение свойств штаммов вируса трансмиссивного гаетроэяте- риге свиней // Ветеринария. - 1507. - № 7. - С. 3*4.

14. ДряСИн О.П., Попова Г.А., Дерябина Е.Г., Крикун Л.И., Ре-венко Л.И., Пушко Н.П., Краснобаев R.A. Титрование вируса ; трансмиссивного гастроэнтерита свиней модифицированным ке-

'."..' тодом бляяек "Повьса.- е|фект, вет. обеспеч. пром. свиновод*'. // Тез. респ.конф. - Киев. - в-11 декабря СЙ7 г. - С. 55.

Mnvit<uniлp4 I BfWTi ¿,<цт, 3чû 7|,"TM>л J,

Похожие диссертации