Микроорганизмы как индикаторы загрязнения окружающей среды
Курсовой проект - Экология
Другие курсовые по предмету Экология
%
- x
x=13,7%
РазведениеОбщее количество микроорганизмов КОЕ, в 1гОбщее количество актиномицетов КОЕ, в 1гОбщее количество бактерий КОЕ, в 1гДоминирующие формы, численность в 1г10-615 000 0002 000 00013 000 00010 000 000
Общее количество микроорганизмов КОЕ, в 1г сырой почвы 15*106= 15 000000
Общее количество актиномицетов КОЕ, в 1г сырой почвы 2*106=2000000
Общее количество бактерий КОЕ, в 1г сухой почвы 13 000 000
Количество пигментированных бактерий КОЕ, в 1г сырой почвы 7*106=7 000 000
Учет микроорганизмов КОЕ в 1г абсолютно сухой почвы 15*106/0,99=15151515
4. Учет количества микроорганизмов методом обрастания комочков почвы
Используется для определения относительной оценки плотности заселения аэробными целлюлозоразрушающими микроорганизмами и нитрифицирующими бактериями учитываемых групп в почве.
. Среда Эшби
Среда Эшби.
Для определения качественного состава почвы и относительной оценки населенности почвы аэробными целюлозоразрушающими микроорганизмами используют гелевые пластины или пластины из голодного агара. На пластину помещают кружок стерильной фильтровальной бумаги, увлажненной стерильной средой Виноградского или средой Гетченсона. Затем по фильтровальной бумаге раскладывают 25 комочков почвы диаметром 1-2мм. Появление налета вокруг комочков свидетельствует о наличии свободноживущих азотфиксирующих бактерий.
Общее число комочковКоличество обросших комочков% обросших комочков от общего числа.2525100
2. Среда Гетчинсона
Имеет следующий состав: NaNO 3 - 2,5; FeCl 3 - 0,01; К 2 НРО 4 - 1,0; MgSO 4 7H 2 O - 0,3; NaCl - 0,1; CaCl 2 - 0,1; рН среды доводят до 7,2 добавлением 20% - го раствора Na 2 СO 3 .
Данным раствором смачивают фильтровальную бумагу в чашках Петри.
Учет микроорганизмов ведут на восьмые сутки инкубации.
РазведениеОбщее количество микроорганизмов КОЕ, в 1гОбщее количество актиномицетов КОЕ, в 1гОбщее количество пигментированных колоний КОЕ, в 1гКоличество грибов10-233400334008001 большой
Общее количество микроорганизмов КОЕ, в 1г сырой почвы 334*102=33400
Общее количество актиномицетов КОЕ, в 1г сырой почвы 334*102=33400
Количество пигментированных бактерий КОЕ, в 1г сырой почвы 8*102=800
Учет микроорганизмов КОЕ в 1г абсолютно сухой почвы 334*102/0,99=33737.
В результате микроскопирования был выделен Actinomyces violaceus - слизистые колонии белого цвета;
5.Учет количества микроорганизмов на жидких средах
1.Среда Виноградского.
Определение группы анаэробных азотфиксирующих бактерий производится на среде Виноградского для бактерий первой фазы нитрификации.
Состав среды, %: (NH 4 ) 2 SO 4 - 0,2; К 2 НРО 4 - 1,0; MgSO 4 7H 2 O 0,5; NaCl - 0,5; СаСО 3 - 20,0; глюкоза - 20.
Характеристика цвета среды по окончанию инкубации:
О наличии роста свидетельствует изменение окраски среды.
Разведение10-110-210-310-410-510-6Число параллельно засеянных пробирок222222Число пробирок, в которых обнаружен рост222210
Числовая характеристика 221
Численность КОЕ в 1г воздушно-сухой почвы 70*1000/0,99=70707
2.Среда Гильтая
Используется для определения денитрифицирующих бактерий.
Состав среды:
Готовится из двух растворов. 1. KNO 3 - 2,1г; дистиллированная вода - 250мл ; аспарагин - 10г. 2. цитрат натрия - 5,0г; КН 2 РО 4 - 2,0; MgSO 4 7H 2 O - 2,0; CaCl 2 - 2,0г; FeCl 3 - следы; дистиллированная вода - 500мл. Оба растворы смешиваются и стерилизуются.
О наличии роста свидетельствует наличие пузырьков газа в поплавке и помутнение среды. Подсчет проводят на 5-6-е сутки.
Таким образом, основная часть нитратов восстанавливается до молекулярного азота, о чем свидетельствует обильное образование газов (СО 2 и N 2 ).
Наличие нитритов объясняется наличием нитрификаторов первой стадии. Для определения численности микроорганизмов на жидких средах используется таблица Мак-Креди. Число клеток в 1г воздушно-сухой почвы
N вс :
Где М вс - масса воздушно-сухой почвы, N - вероятное число клеток (по Мак-Креди).
Числовая характеристика 200
Численность КОЕ в 1г воздушно-сухой почвы 2,5*1000/0,99=2525
Paracoccus denitrificans - сферические клетки собранные в группы или одиночные.
В анаэробных условиях восстанавливает нитрат до оксида азота NO и молекулярного азота.
Заключение
Распределение микроорганизмов в пахотном слое почвы, тыс. на 1г:
Слой почвы, смАэробные и факультативно-аэробные бактерииАнаэробные бактерииНитрификаторыАктиномицетыгрибы0 - 5570027010006405310- 15440023010004204115 - 20270018010025020
На основании данных полученных при анализе образца почвы, можно сделать следующие выводы:
Наличие большего количества бактерий и актиномицетов в почве по отношению к грибам говорит о нейтральной или слабощелочной реакции среды. Наличие относительно большого количества актиномицетов свидетельствует о присутствии в почве тяжёлых металлов.
Присутствие видов рода Bacillus свидетельствует о том, что содержание тяжёлых металлов в почве не слишком высоко. Умеренный рост анаэробных азотфиксирующих бактерий свидетельствует о среднем содержании минеральных удобрений в почве. Дерново-подзолистые почвы бедны подвижными формами азота и фосфора, азот содержится преимущественно в органической форме, поэтому на МПА развилось большое количество Bacillus sp., использующих в качестве источника азота его органические соединения. Мало плодородные дерново-подзолистые почвы бедны биофильными элементами, в особенности - азотом, поэтому выявлено малое количество Actinomyces sp., получающих азот из его мин?/p>