Микроорганизмы как индикаторы загрязнения окружающей среды
Курсовой проект - Экология
Другие курсовые по предмету Экология
л стерильной водопроводной воды. Каждую колбу встряхивают в течение минуты.
Из полученных разведений проводят посев на плотные и жидкие среды. При глубинном посеве берут 1 мл почвенной суспензии из более высокого разведения, чем при поверхностном. Суспензию вносят в стерильную чашку Петри, заливают охлажденным до 45 0 расплавленным агаром и перемешивают с ним.
Для учета количества микроорганизмов почвы на жидких средах из каждого разведения, начиная с самого высокого, стерильной пипеткой необходимо взять по 1 мл суспензии и перенести в жидкие среды.
Если численность отдельных групп микроорганизмов в почве небольшая, их выделяют методом обрастания комочков почвы. На пластинах отмытых от следов хлора и прокипяченных, пропитанных 3-5 мл элективной среды по поверхности раскладывают по трафарету 30-40 комочков почвы диаметром 1-2 мм, чашки помещают в термостат.
Для проведения общего микробиологического анализа необходимо сделать посев микроорганизмов на плотные среды - мясо-пептонный агар (МПА) и крахмало-аммиачный агар (КАА), и жидкие среды - среду Виноградского, среду Гильтая. Для обнаружения азотобактера используется метод обрастания комочков почвы.
Все засеянные чашки Петри и пробирки ставят в термостат с температурой 28-30 0 на определенный срок инкубации, затем вынимают и учитывают результат.
Плотные питательные среды:
1.МПА (мясо-пептонный агар) - учитывается численность сапрофитных микроорганизмов, использующих в качестве источника питания органические формы азота.
2.КАА (крахмало-аммиачный агар) - выявляется численность микроорганизмов, усваивающих минеральные формы азота.
.Среда Гетчинсона - применяется для учета денитрофицирующих бактерий.
.Среда Эшби - выявление азотфиксирующих аэробных микроорганизмов путем раскладывания комочков почвы.
Жидкие питательные среды:
1.Среда Гильтая - применяется для определения денитрифицирующих бактерий.
2.Среда Виноградского - используют для определения анаэробных азотфиксирующих бактерий.
микроорганизм пестицид почва загрязнение экологический
3. Учет количества микроорганизмов на плотных средах
.1 Качественная и количественная оценка микроорганизмов на МПА
Качественную и количественную оценку состава микроорганизмов на МПА проводят визуально на 4-5 день после посева. После подсчета количества всех колоний на чашке их группируют по культуральным признакам: характеру роста на агаре, цвету, краю, форме, размеру (приблизительный) и консистенции колонии - для качественного анализа сапротрофной микрофлоры на МПА.
РазведениеОбщее количество микроорганизмов КОЕ, в 1гОбщее количество актиномицетов КОЕ, в 1гОбщее количество бактерий КОЕ, в 1гДоминирующие формы, численность в 1г10-5130 00 000-130 00 00030 00 000
Общее количество микроорганизмов КОЕ, в 1г сырой почвы: 130*105=130 00 000
Количество доминирующих форм: 30*105=30 00 000
Учет микроорганизмов КОЕ в 1г абсолютно сухой почвы: 130*1000/0,99=13131313.
Культуральные и морфологические признаки доминирующих микроорганизмов
Культуральные признакиМорфологические признакиПредполагаемый возможный род (или группа), к которому можно отнести описываемый микроорганизмФорма колоний - круглая; Размер - 7мм; Цвет - бледно-желтый; Поверхность - непрозрачная; Край - шаровидный; Структура - однородная; Блеск - матовый; Консистенция - маслянистая.Форма клетки - палочковидная; Характер расположения клеток - одиночные; Способность к спорообразованию - способны;Bacillus sp. 1600
Численность доминирующей формы КОЕ в 1г сырой почвы: 30*105=3000000
Численность доминирующей формы от общей численности
- 100%
- x
x=23%
РазведениеОбщее количество микроорганизмов КОЕ, в 1гОбщее количество актиномицетов КОЕ, в 1гОбщее количество бактерий КОЕ, в 1гДоминирующие формы, численность в 1г10-627 000 000-27 000 00012 000 000
Общее количество микроорганизмов КОЕ, в 1г сырой почвы: 27*106= 27 000 000
Учет микроорганизмов КОЕ в 1г абсолютно сухой почвы: 27*106/0,99=27272727
.2 Качественная и количественная оценка микроорганизмов на крахмало-аммиачном агаре (КАА)
Численность колоний на КАА подсчитывают на 7-10-й день инкубации.
Учет численности на КАА. Колонии на таком агаре подсчитывают на 7-10-ый день
РазведениеОбщее количество микроорганизмов КОЕ, в 1гОбщее количество актиномицетов КОЕ, в 1гОбщее количество бактерий КОЕ, в 1гДоминирующие формы, численность в 1г10-5146 00 0005 00 000141 00 00020 00 000
Общее количество микроорганизмов КОЕ, в 1г сырой почвы 146*105=146 00 000
Общее количество актиномицетов КОЕ, в 1г сырой почвы 5*105=500000
Общее количество бактерий КОЕ, в 1г сухой почвы 141 00 000
Количество пигментированных бактерий КОЕ, в 1г сырой почвы 50*105=50 00 000
Учет микроорганизмов КОЕ в 1г абсолютно сухой почвы 146*105/0,99=14747475
Культуральные и морфологические признаки доминирующих микроорганизмов.
Культуральные признакиМорфологические признакиПредполагаемый возможный род (или группа), к которому можно отнести описываемый микроорганизмФорма колоний - круглая; Размер - 7мм; Цвет - персиковый; Поверхность - непрозрачная; Край - шаровидный; Структура - однородная; Блеск - матовый; Консистенция - маслянистая.Форма клетки - палочковидная; Характер расположения клеток - одиночные; Способность к спорообразованию - способны; Bacillus sp. 1600
Численность доминирующей формы КОЕ в 1г сырой почвы 20*105= 2000000
Численность доминирующей формы от общей численности микроорганизмов, %
146 00 000 - 100