Микробная утилизация полиароматических углеводородов

Информация - Разное

Другие материалы по предмету Разное

? инормация:

 

 

1.Штамм актиномицетов Streptomyces rochei, осуществляющий полное разложение 2,4,6-трихлорфенола или 2,4-дихлорфенола или 2,6- дихлорфенола, или 2-хлорфенола: А.с. 1652335 СССР, МКИ5 С12 N 1/20, С12 S 13/00/ Головлева Л.А., Заборина О.Е., Перцова Р.Н., Евтушенко Л.И.; Ин-т биохимии и физиол. микроорганизмов АН СССР.- № 4696431; Заявл. 08.06.89; Опубл. 30.05.91, Бюл. № 20.

 

2.Методы и установка для [проведения] аэробного ферментативного, в частности, для компостирования органических материалов. Verfahren und Vorrichtung zur aeroben, fermentativen Hydrolyese, insbesondere zur Kompostierung vor organischen Stoffen: Заявка 3925905 ФРГ, МКИ5 С12М 1/02, СО5F 9/04/ Hofmann Hermann, Schnorr Karl Ersnt.-№ 3925905.6; Заявл. 04.08.89; Опубл. 28.02.91.

 

3.Фотолитически усиленное микробное разрушение [веществ] загрязняющих окружающую среду. Photochemically enhanced microbial degradation of enviromental pollutants: Пат. 5342779 США МКИ5 ВО9В 3/00, D06Н 16/00/ Matsumura Fumio, Katayama Arata; The Regents of the University of California.- №687368; Заявл.18.04.91; Опубл. 30.08.94; НКИ 453/262.5.

 

 

4.Улучшенная смесь питательных соединений для биологической очистки загрязненых почв и вод. Verbesserte Nahrstoffgemische fur die Bioremediation verschmutzter Boden und Cewasser: Заявка 4228168 ФРГ, МКИ5 С12N 1/26, С12S 9/00/ Kopp-Holtwiesche Bettinna, Weiss Albricht; Henkel KGaA.-№ 4228168.7; Заявл. 25.08.92; Опубл. 03.03.94.

 

5.Штамм бактерий - деструктор фенола, бензола и их галогензамещенных аналогов: Пат. 2041943 Россия, МКИ6 C12N 1/12, CO2F 3/34/ Зайцев Г.М., Ивойлов В.С; Суровцева Э.Г.; Науч.-произв. предприятие Биотехинвест. - №92014789/13; Заявл. 28.12.92; Опубл. 20.08.95, Бюл. № 23.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

7.Экспериментальная часть

7.1.Материалы и методы

7.1.1.Материалы

7.1.1.1.Штаммы микроорганизмов

 

В нашей работе были использованы штаммы мицеллиальных грибов любезно предоставленные Ю.С.Оследкиным (ВНИИСХМ, г.Пушкин).

В таблице №1 приводится список видов и номера штаммов, а также указывается доступная информация об источнике их происхождения (организации и/или географическом и/или экологическом происхождении).

 

таблица 1

 

№п/.п

название штамма

коллекционный/

музейный

номер штамма

источник1Trichoderma linorum 32ARRIAМ2Trichoderma linorum 37ARRIAM3Trichoderma linorum 48ARRIAM4Chaetomium elatum Kunze:Fris 1817 341СПбГУ5Chaetomium bainieri Munk 1957 344СПбГУ6Chaetomium funicolum Cooke 1873 347СПбГУ7Chaetomium coclioides Palliser 1910 491Укр.ИСХМ9Coriolus versicolor

(L.1753:Fr. 1821) Quelet 1888 330ВИЗР

10

Fusarium solani (Martius) Sacc 1881

464Ленинград- ский рег., почва

11

Fusarium solani (Martius) Sacc 1881

496РФ,

почва12Phanerochaete chrysosporium F-20696ATCC

7.1.1.2.Питательные среды

 

В работе были использованы следующие питательные среды:

 

1.Среда Ван-Итерсона /41/, г/л:

NH4NO3-0,5

KH2PO4-0,5

полоска фильтровальной бумаги -1x12 см

H2O-1 литр

 

2.Среда Ван-Итерсона модифицированная /42/:

минеральный состав среды тот же, что и в классическом варианте, полоска фильтровальной бумаги инпрегнированна веществом, для которого отбирается штамм-деструктор содержание вещества составляет 5% от массы полоски бумаги

 

3.Среда Чапека /41/, г:

KH2PO4-1,0

NaNO3-3,0

KCl-0,5

MgSO4.7H2O -0,5

FeSO4.7H2O -0,01

H2O-1 литр

 

4.Среда Чапека с сахарозой/41/:

Минеральный состав без изменений, добалено 30 г/литр сахарозы

 

 

 

5.Сусло пивное неохмеленное /41/:

Неохмеленное пивное сусло разводится в два раза водопроводной водой и стерилизуется

 

Для получения твердых питательных сред добавляли 2 г/литр агар-агара.

 

7.1.1.3.Субстраты

Для выделения, отбора, хранения и культивирования микромицетов использовали следующие субстраты (табл.2.):

таблица 2

п.п.наименование

субстратаисточник

полученияприменение1бумага

фильтровальнаяWhatman No 1

Великобританиявыделение

микромицетов2березовые

опилкиСтолярная

мастерская СПбГТИ(ТУ)культивирование

микромицетов3древесина

шпалПропиточный з-д.

г.Отрадноекультивирование

микромицетов

 

 

7.1.1.4.Пробы

 

В работе были использованы образцы древесины телеграфных столбов, подвергшихся воздействию микроорганизмов (Новгородский регион), любезно предоставленныe Марьяновской Юлией Валентиновной (кафедра МБТ СПбГТИ(ТУ)).

 

 

7.1.2.Методы

7.1.2.1.Выделение культур микромицетов

 

Выделение первичных культур велось на модифицированной среде Ван-Итерсона. Для устранения посторонних микроорганизмов образец короткое время обжигали в пламени спиртовки и помещали на питательную среду. Микроорганизмы, находящиеся на поверхности, гибли, а те микробы, которые находились внутри образца сохраняли жизнеспособность. Продолжительность инкубации составляла 60 суток. Остальные условия оговариваются особо.

Выделение чистых культур велось на агаре Чапека с использованием стандартных микробиологических методов /43/.

 

7.1.2.2.Изучение морфологических и физиолого-биохимических свойств культур микромицетов

 

Для изучения морфологических, культуральных и физиолого-биохимических свойств культур микромицетов использовали стандартные микробиологические среды и методы /41/.

Цитоморфологические наблюдения проводили с помощью общепринятых методов и растворов красителей /41/.

 

 

 

7.1.2.3.Отбор штаммов-деструкторов ПАУ

 

Отбор целлюлолитических штаммов мицеллиальных грибо