Исследование влияния фракции низкомолекулярных пептидов, полученных из кордовой крови, на развитие экспериментальной язвенной болезни у 3-х месячных крыс
Дипломная работа - Медицина, физкультура, здравоохранение
Другие дипломы по предмету Медицина, физкультура, здравоохранение
ых соединений [8] (см. таб.1). Кордовой крови присущ высокий уровень витаминов, микроэлементов.
Особенностями кордовой крови, в частности ее сыворотки является наличие более 60 специфических плацентарных белков, выполняющих роль ферментов, гормонов, гемопоэтинов, адаптогенов, рецепторов, факторов роста, иммунорегуляторных агентов; содержание целого ряда пептидов - структурных аналогов нейропептидов головного мозга, опиоидных пептидов (эндорфинов и энкефалинов) [11].
Одним из наиболее функционально важных белков КК считается эритропоэтин, который относится к группе цитокинов. В кордовой крови в норме концентрация этого белка в 2-3 раза превышает его концентрацию в донорской крови [7, 11, 16]. В связи с этим, кордовая кровь может рассматриваться как ценный источник стимуляции эритропоэза.
В КК также обнаружен лептин, концентрация которого в КК значительно выше, чем в норме в крови взрослого человека. гормон который у взрослого человека сигнализирует о количестве энергетических запасов в мозг и играет важную роль в регуляции гипоталамо-гопофизарных связей. Получены данные об участии лептина в регуляции таких процесов, как роста плода, его массы, энергетического обмена на различных сроках гистации, в регуляции гипоталамо-гопофизарных связей [20].
Известно, что КК в значительной степени, по сравнению с донорской, обогащена различными нейропептидами. В кордовой крови их содержание в 3-5 раз выше, чем в крови взрослых [8]. В кордовой крови обнаружены эндорфины и энкефалины [11]. Высокое содержание эндогенных опиоидных пептидов в кордовой крови позволяет ожидать при введении изготовленных из нее препаратов, достижения стойкого анальгезирующего эффекта, что очень важно при наличии различных хронических болевых синдромов [5].
Известно, что в КК по сравнению с донорской существует повышенный уровень веществ, играющих роль в антиоксидантной системе: каротиноидов, аскорбиновой кислоты, токоферролов и др. Такой повышенный уровень антиоксидантов в кордовой плазме может вносить вклад в увеличение резистентности плазмы КК к Cu2+ индуцированному перекисному окислению липидов [24]. Для КК характерно более высокое содержание ряда микроэлементов, участвующих в различных процессах клеточного метаболизма: калия, кальция, магния, фосфора, железа. Содержание никеля, хлора, цинка в КК и в материнской крови почти одинаково. Среди низкомолекулярных веществ выявлялись глюкоза, лактат, креатин, цитрат, аминокислоты и кетоновые тела. Плацентарная плазма имела сходный состав, за исключением того, что выше был уровень бетаина, а также отсутствовали цитрат, ацетон, ацетоацетат и некоторые липопротеины [13].
Таким образом, несмотря на повышенное содержание многих био- и иммуностимуляторов в КК, эти вещества находятся в сбалансированных концентрациях и представляют собой биологически активный комплекс, необходимый для развивающегося организма и нормализующий обмен веществ при попадании во взрослый организм [8].
Вследствие указанных выше особенностей клеточного состава, КК и полученные из нее препараты, находят в последнее время все большее применение в клинической практике [5, 28]. Причем в лечебных целях используется как цельная КК, так и отдельные ее компоненты.
2 Материалы и методы
ФНПКК получали с помощью метода ультрафильтрации с использованием ультрафильтрационного оборудования фирмы Sartorius (Германия). Для этого цельную КК дефибринировали, затем производили криодеструкцию путем помещения сырья в морозильную камеру с температурой -800С. Для получения низкомолекулярных фракций, полученные образцы размораживали при комнатной температуре, центрифугировали при 10000g, с целью удаления крупных частиц. После этого криогемолизированную кровь подвергали предфильтрации, для чего использовали фильтр многоразового использования, который задерживает частицы с молекулярной массой более 100 кДа. Полученный фильтрат пропускали через ультрафильтрационный модуль, с показателем номинальной молекулярной массы, которая отделяется , 5 кДа.
Выбранный метод ультрафильтрации в тангенциальном потоке, в сравнении с другими видами низкомолекулярного разделения молекул объединяет в себе достаточно высокую эффективность фильтрации, возможность фильтрации больших объемов и многоразовое использование мембраны [13].
Полученные низкомолекулярные пептиды подвергали лиофилизации.
Объектом исследования служили 3-х месячные самцы крыс линии Вистар.
ЯБ желудка моделировали по общепринятой методике Оболонцева Г. В. с помощью ацетилсалициловой кислоты, которую вводили экспериментальным животным в дозе 150 мг/кг массы тела 5 раз на протяжении 3-х суток. Экспериментальная ЯБ желудка у 10% животных представляет собой гастрит, а у 90% - проявляется в виде фокального некроза, который способствует потере защитно-барьерных свойств слизистой, слущиванию эпителия и возникновению массивных участков геморрагических эрозий и язв [10].
Экспериментальную язву, которая вызвана ацетилсалициловой кислотой, рассматривают как модель хронической язвы. Она имеет клинический аналог у людей, которые употребляют аспирин [10].
Экспериментальные животные были разделены на следующие группы, по животных в каждой: 1 группа - интактные животные; 2 - нелеченные животные после моделирования ЯБ; 3, 4 и 5 группы - животные Дозы, которые вводились, рассчитывались в соответствии с терапевтической дозой актовегина используемого в клинике для лечения язвы у человека, 800 мг/70 кг веса