Выделение, изучение свойств микроорганизмов и их использование для выполнения подготовительных процессов переработки овчинно-мехового сырья
Дипломная работа - Биология
Другие дипломы по предмету Биология
Вµнением соотношения агар-агара импортного и отечественного производства lg КОЕ снижается. Так, например, для культуры 3 данный показатель уменьшается с 7,62 до 6,48. На среде МПА максимальный lg КОЕ наблюдается у культуры 3 (27,82), а минимальный у I (18,04).
Далее определяли такие морфолого-физиологические признаки микроорганизмов, как спорообразование, подвижность, разжижение желатина, наличие сероводорода, аммиака, каталазы, а также редуцирующую способность. Данные определений представлены в табл. 4.
Далее провели исследования колоний на тинкториальную способность (окраска по Граму и подвижность). Окраска по Граму является дифференциально-диагностической и зависит от содержания в клеточной стенке гликолипида муреина, представляющего собой гетерополимер, который в свою очередь состоит из чередующихся остатков N-ацетилглюкозоамина и N ацетилмурамовой кислоты и пептидов. Грамположительная окраска указывает на наличие небольшого количества полисахаридов, липидов и белков и характерна для всех выделенных культур. Исследование подвижности показало, что для микроорганизмов типа 3,7, I характерен лофотрихиальный тип движения, культуре F перетрихиальный, G монотрихиальный. А для культуры I характерен как монотрихиальный, так и лофотрихиальный тип движения.
Протеолитические свойства микроорганизмов изучали посевом в мясопептонный желатин (МПЖ) согласно п.2.2.5. Выделенные культуры, кроме F, обладают протеолитическими свойствами, т.к. разжижают МПЖ. Для обнаружения сероводорода делали посев уколом пристеночно в агар-агар с уксуснокислым свинцом (п.2.2.5.1.). Если культура при разложении белка выделяет сероводород, то появляется темно-бурое окрашивание (почернение) по месту укола в плотной среде. Культуры 3, F, I выделяют сероводород, а остальные нет. Ни одна культура не выделяет аммиак, определение которого проводили в соответствии с п.2.2.5.2. при наличии фермента каталазы при действии перекиси водорода обнаруживают обильное выделение пузырьков отщепленного кислорода, т.е. образуется пенистая шапка. Каталаза присутствует во всех выделенных культурах. Редуцирующей способностью (обеiвечивание молока с метиленовым синим) обладают все культуры, за исключением I.
На основе исследования свойств микроорганизмов определили их видовую принадлежность /53/. Бактерии рода Listeria представляют собой короткие палочки правильной формы с закругленными краями. Грамположительные, неспорообразующие, каталазоположительные. Следовательно, культуры 3, 7, G, I можно отнести к данному роду, т.к. они имели форму коротких палочек, окрасились в фиолетовый цвет (грамположительные) и не образовывали при определении каталазы пенистую шапку. Данные микроорганизмы широко распространены в окружающей среде, некоторые виды патогенны для человека и животных.
Культуру F можно отнести к роду Brochotrix. Данные микроорганизмы имеют палочки правильной формы в цепочках, грамположительные и каталазоположительные. Эти признаки наблюдались при изучении свойств культуры F. Данные организмы широко распространены в природе.
Бактерии рода Bacillus имеют форму прямых палочек с закругленными концами, грамположительные, подвижные и образующие овальные эндоспоры, каталазоположительные. Как видно из данных табл. 4, все эти признаки относятся к культуре I. Данные микроорганизмы обнаруживаются в разнообразных местообитаниях, некоторые виды патогенны для позвоночных и беспозвоночных.
Липолитические свойства микроорганизмов определяли посевом в бульон Штерна, где в качестве единственного источника углерода использовали оливковое масло с концентрацией 1см3/100см3 бульона. Бактерии, обладающие липолитическими свойствами, при ферментации оливкового масла извлекают из него альдегиды, подкисляя среду, при этом окраска бульона переходит из золотисто-желтой в розовую. Стерильный бульон Штерна разливали в пробирки по 10см3 в каждую и вносили исследуемые культуры. Пробирки с микроорганизмами термостатировали при температуре (380,5)0С. В течение 120ч проводили визуальные наблюдения за изменением физических свойств бульона Штерна, которые выражались в образовании хлопьев, а также в изменении цвета и прозрачности. В качестве контрольного варианта использовали состав, включающий в себя бульон Штерна без введения микроорганизмов. Результаты наблюдений представлены в табл. 5.
Таблица 5. "ияние типов бактерий на свойства бульона Штерна
Тип колонийПоказатели качественного состояния бульонаХарактеристика изменения качественного состояния бульона через(род)Штерна0ч24ч48ч72ч96ч120чКонтрольный вариантЦвет бульоназолот-желтзолот-желтзолот-желтзолот-желтзолот-желтзолот-желтНаличие хлопков------Ширина жирового кольца, мм
2,0
1,5
1,5
1,5
1,5
1,5Наличие помутнения------рН6,56,56,56,56,56,5ListeriaЦвет бульоназолот-желтзолот-желтзолот-желтзолот-желтс роз.
оттенкомрозовыйsp IНаличие хлопков------Ширина жирового кольца, мм
2,0
2,0
2,0
2,02,0
част разрушение
кольца2,0
част разруш-ие
кольцаНаличие помутнения-+/-+/-+/-+/-+/-рН6,56,56,05,55,55,5ListeriaЦвет бульоназолот-желтзолот-желтзолот-желтзолот-желтзолот-желтзолот-желтsp 3Наличие хлопков------Ширина жирового кольца, мм
2,0
2,0
2,0
2,0
2,0
2,0Наличие помутнения-+++++рН6,56,57,07,07,57,5
Как видно из данных, представленных в табл. 5, практически для всех типов микроорганизмов в процессе культивирования не наблюдалось образование хлопьевидного осадка, за исключением культур 7, G. Для них характерно появление хлопков вследствие продуц?/p>