Выделение чистых культур целлюлозолитических микроорганизмов из короедов
Информация - Биология
Другие материалы по предмету Биология
?ием пузырьков кислорода.
.Изучение морфолого-физиологических свойств:
a)Изучение усвоения углеводов. Посев на среду Гисса.
b)Проба на аммиак: Процессы разложения азотсодержащих соединений с выделением аммиака называются аммонификацией. Аммонификация имеет важное значение для питания растения, круговорота азота в природе. Процесс этот осуществляется бактериями в аэробных и анаэробных условиях. Выделяющийся в атмосферу аммиак окрашивает подвешенную влажную красную лакмусовую бумагу в синий цвет.)Проба на сероводород: Полоску фильтров бумаги пропитывают раствором уксуснокислого свинца, высушивают и помещают в пробирку, укрепив ватной пробкой. В присутствии сероводорода полоска бумаги через несколько дней чернеет. Образование на поверхности почерневшей бумаги серебристого налета свидетельствуют о выделении и других соединений среды (меркаптанов). При введении в состав питательной среды лимоннокислого или виннокислого железа выделение сероводорода ведет к почернению всей среды.
7.Выявление антагонистической активности:.Проба на антибиотики: В чашку Петри разливаем среду Гетчинсона с МПА, предварительно приготовим разведение с антибиотиками. Бензилпенициллин разводим 1:10 физ. раствором. В приготовленном растворе пропитываем кружки фильтровальной бумаги антибиотиком. Чистую культуру целлюлозолитических микроорганизмов добавляем в чашку Петри и зигзагообразными движениями проводим на среде вертикально и горизонтально. Затем берем кружок фильтровальной бумаги и помещаем в чашку Петри. Ставим в термостат при 37 0С.
b.Проба с E. Colli: В чашку Петри с подсушенной средой Гетчинсона с МПА вносят точно измеренный объем (0,05 или 0,1 мл) соответствующего разведения целлюлозолитических микроорганизмов и распределяют его стеклянным шпателем по поверхности среды. Затем распределяем E. Colli вертикальными и горизонтальными линиями в форме сетки. Ставим в термостат при 370С.
.3 Результаты
По выявлению характерных признаков развития выделяемых микроорганизмов - помутнение среды, появление пигментации, разложение фильтровальной бумаги можем сделать вывод, что присутствуют целлюлозолитические микроорганизмы. Помимо визуального наблюдения микроскопируют и выявляют присутствие желаемых форм, или продуктов метаболизма, образование которых свойственно выделяемым микроорганизмам. Результаты микроскопирования целлюлозолитических бактерий на рис. 1.
Форма бактерий палочковидная, они располагаются одиночно, парами или короткими цепочками, клетки неподвижны, форма концов клетки заостренная относятся к миксобактериям (подпорядок Cystobacterinae). Определенное расположение клеток относительно друг друга обусловлено направлением деления и прочностью связи между разделившимися клетками. Окраска по Грамму показала, что бактерии грамположительные, так как приобрели сине-фиолетовое окрашивание. Размеры бактерий 2 мкм.
Выявление каталазы: каталаза присутствует, так как произошло разложение перекиси водорода с выделением пузырьков кислорода.
Изучение морфолого - физиологических свойств:
a)Результат посева на среде Гисса: Во всех колбах с разновидными дифференциальными средами, предназначенные для изучения сахаролитических свойств микроорганизмов изменились цвета (бежевый), что свидетельствует об усвояемости сахарозы, сорбита, лактозы, глюкозы, мальтазы, маннита целлюлолитическими микроорганизмами;
b)Результат пробы на аммиак: аммиак отсутствует, так как не окрасилась красная лакмусовая бумага в синий цвет;)Результат пробы на сероводород: сероводород отсутствует, потому что полоска бумаги не почернела.
Выявление антагонистической активности:
a)Проба на антибиотики. В результате микроскопирования можно сделать вывод, что целлюлозолитические бактерии не подавились антибиотиком (бензилпенициллином), т.е. они устойчивы по отношению к антибиотику. Так как целлюлозолитические микроорганизмы образовали капсулы.
b)Проба с E. Colli. В результате микроскопирования целлюлозолитических микроорганизмов с E. Colli наблюдали, что целлюлозолитические бактерии подавили E. Colli, т.е. выросли только целлюлозолитические микроорганизмы.
ВЫВОД
1)Выделили чистую культуру целлюлозолитических микроорганизмов из короедов.
2)При изучении морфолого - физиологических свойств выделены следующие выводы:
Изучение усвоения углеводов. Посев на среду Гисса. Усваиваются сорбит, сахароза, маннит, лактоза, мальтаза, глюкоза.
Проба на аммиак отсутствует.
Проба на сероводород отсутствует.
3)На выявление антагонистической активности выведен вывод, что зоны подавления роста антибиотика не наблюдается вследствие образования капсул.
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
1.Гусев М.В., Минеева Л.А. Микробиология. М.: Издательский центр "Академия", 2003.
2.Градова Н.Б., Бабусенко Е.С., Горнова И.Б., Гусарова Н.А. Лабораторный практикум по общей микробиологии. Москва, Дели принт, 2001.
.Егорова Н.С. Руководство к практическим занятиям по микробиологии/Учебное пособие. Москва, МГУ, 1995.
.Теппер Е.З., Шильникова В.К., Переверзева Г.И. Практикум по микробиологии. Москва, агропромиздат, 1987.
.Тимофеева В.А. "Товароведение продовольственных товаров", Ростов-на-Дону, Феникс, 2007 год.
.Шепелев А.Ф. "Товароведение и экспертиза молока и молочных продуктов", Ростов - на - Дону, 2003 год.