Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на нейтрофилы и факторы мукозального иммунитета
Информация - Медицина, физкультура, здравоохранение
Другие материалы по предмету Медицина, физкультура, здравоохранение
янский А.Н., 2006).
Для изучения правильности нашего предположения проведено измерение активности фермента НАДФН-оксидазы, которой принадлежит ключевая роль в развитии респираторного взрыва, поскольку данный фермент осуществляет транспорт электронов от НАДФ цитозоля к молекулярному кислороду, а НИЛИ может являться физическим стимулятором выработки данного фермента (таблица 3).
Результаты исследований подтверждают наше предположение о том, что НИЛИ стимулирует выработку локализованных в гранулах цитоплазмы нейтрофилов фермента - НАДФН оксидазы, поскольку нами зарегистрировано достоверное усиление выработки данного фермента более выраженное при облучении взвеси НГ с лазером с переменной генерацией импульса при дозе излучения 0,56 Дж/см2
Таблица 3
Влияние лазерного излучения с постоянной и переменной генерацией импульса на выработку НАДФН-оксидазы нейтрофилами, выделенными из крови доноров (Мm)
Доза лазерного
излучения
Дж\см2Скорость НАДФН-оксидазной реакции пмоль/мин х106клетокНеактивированные
нейтрофилыНейтрофилы, активированные ЛО с постоянной
генерацией
импульсаНейтрофилы, активированные ЛО с переменной генерацией
импульса0,0181.030.161.930.18
*,***2.130.12
*,**0,0361.800.112.810.11
*,***3.080.21
*,**0,0722.720.253.750.25
*,***4.070.15
*,**0,143.010.313.790.31
*,***4.170.30
*,**0,284.110.155.310.15
*,***5.990.10
*,**0,564.510.135.290.23
*,***6.210.19
*,**1,14.610.335.910.13
*,***6.950.10
*,**
Примечание: *-достоверность различий показателей по отношению к неактивированным нейтрофилам, **-достоверность различий показателей по отношению к НГ, облучёнными с постоянной генерацией импульса, ***- достоверность различий показателей по отношению к НГ, облучёнными с переменной генерацией импульса С учетом поправки Бонферрони критический уровень р составил 0,003. U-критерий Мана- Уитни.
Для изучения секреторной функции нейтрофилов был проанализирован цитокиновый состав (таблица 4), содержание высокомолекулярных пептидов-дефенсинов и бактерицидного протеина BPI (таблица 5), биохимический состав супернатантов нейтрофилов (таблица 6). В результате проведённых исследований нами было выявлено, что нейтрофилы, полученные из периферической крови доноров и инкубированные в термостате в течение 30 мин. при температуре 37С в растворе Хенкса выделяют глюкозу, метаболиты азота, ионы кальция, магния, ИЛ-1?, ИЛ-1?, РАИЛ1, ИЛ-8, ФНО-?. Появление этих продуктов в супернатантах неактивированных нейтрофилов обусловлено, возможно, секреторной дегрануляцией клеток, происходящей при инкубации нейтрофилов не в физиологических условиях in vitro. Поэтому термин неактивированные нейтрофилы мы можем принимать лишь условно, как выделенные без индуктора секреции клеток, т.е. без лазерного излучения. Уровни изучаемых цитокинов в супернатантах неактивированных нейтрофилов доноров достоверно отличались от содержания в секреторных продуктах, выделенных после активации нейтрофилов лазерным излучением с постоянной и переменной генерацией импульса. Эти изменения имели однонаправленный характер, степень выраженности которых была различной.
Таблица 4
Содержание цитокинов в супернатантах нейтрофилов неактивированных и активированных лазерным излучением с постоянной и переменной генерацией импульса (Мm)
ЦитокиныСупернатанты
неактивированных
нейтрофилов
Параметры излученияСупернатанты
нейтрофилов
активированные
ЛО с постоянной
генерацией
импульсаСупернатанты
нейтрофилов
активированных
ЛО с переменной
генерацией
импульсаИЛ-1?, пг/мл51.420.2959.830.54
*, ***62.434.41
*,**ИЛ-1?, пг/мл14.280.1220.360.87
* ,***24.4712.21
*, **РАИЛ-1,пг/мл99.362.4299.671.92100.982.10
*ИЛ-8, пг/мл44.481.3969.81.88
*, ***136.821.71
*, **ФНО -?, пг/мл2.210.454.240.75
*, ***6.310.33
*, **
Примечание: *-достоверность различий показателей по отношению к неактивированным нейтрофилам, **-достоверность различий показателей по отношению к НГ, облучённых лазером с постоянной генерацией импульса, ***- достоверность различий показателей по отношению к НГ, облучённых лазером с переменной генерацией импульса С учетом поправки Бонферрони критический уровень р составил 0,003. U-критерий Мана- Уитни.
Анализ цитокинового состава показал достоверно более высокое содержание провоспалительных цитокинов ИЛ-1?, ИЛ-1?, РАИЛ1, ИЛ-8, ФНО-? в супернатантах нейтрофилов крови доноров, облучённых лазером с переменной генерацией импульса (таблица 4). Возможно, данный вид излучений является стимулирующим фактором, приводящим к достоверно, по сравнению с неактивированными и активированными НИЛИ с постоянной генерацией импульса НГ доноров более выраженной секреции преформированных цитокинов. Помимо этого, в секреторных продуктах нейтрофилов были обнаружены высокомолекулярные пептиды, обладающие иммунотропной активностью-дефенсины и бактерицидный/индуцированный протеин BPI (таблица 5).
Таблица 5
Содержание дефенсинов и белка BPI в супернатантах нейтрофилов неактивированных и активированных лазерным излучением с постоянной и переменной генерацией импульса (Мm)
Пептидные продукты нейтрофиловСупернатанты
неактивированных
нейтрофилов
Параметры излученияСупернатанты
нейтрофилов
активированные
ЛО с постоянной
генерацией
импульсаСупернатанты
нейтрофилов
активированных
ЛО с пере?/p>