Фармакогностическое изучение крапивы коноплевой, крапивы двудомной и крапивы жгучей, в качестве нового вида лекарственного растительного сырья
Курсовой проект - Медицина, физкультура, здравоохранение
Другие курсовые по предмету Медицина, физкультура, здравоохранение
p>
Ионы Na+ и К+ находятся совместно в одном калибровочном растворе, так как они оказывают взаимное влияние на оптические характеристики друг друга. Так как в любой биологической жидкости, в том числе и в моче, в достаточном количестве присутствуют оба этих электролита, то не соблюдение данного требование могло привести к искажению результатов эксперимента. В опытах использовались концентрации стандартных растворов Na+/ К+ ???мг/л. Для оптимизации работы сначала изготавливали маточные растворы в большом объеме ( концентрация Na+/ К+ 1000/1000 мг/л), а затем перед экспериментами разводили их до требуемой концентрации. Та часть раствора, которая использовалась для калибровки, отбрасывается и не в коем случае не сливается обратно в общую склянку во избежание изменения концентрации стандартных растворов.
В контрольных испытаниях мочу крыс разводили в ??? раз. Разведение мочи при анализе экскреции калия в 50 раз.
Уровень экскреции электролитов с мочой рассчитывается по формуле:
Е = Д * Р * А / Mr;
где Е - экскреция определяемого иона в ммоль;
Д - величина диуреза;
Р - разведение;
А - показание прибора;
Mr - молярная масса определяемого иона.
Помимо исследования почечной экскреции электролитов, в скрининговом анализе проводили изучение влияния экстракта крапивы на клубочковую фильтрацию. Маркером данного процесса является экскреция креатинина. Креатинин - это вещество образующееся в крови в ходе метаболизма азотистых соединений. При этом он в основном фильтруется и мало реабсорбируется в почках, поэтому уровень его экскреции с мочой прямо пропорционально уровню клубочковой фильтрации. Кроме того, давно установлено, что концентрация креатинина в плазме крови крыс не подвергается существенным колебаниям и, как правило, является стабильным показателем, величиной которой можно пренебречь.
Методика определения креатинина основана на реакции образования основания Шиффа, количество которого затем детектируется фотометрическим способом. В колбу на 50 мл отмеривали 0,5 мл мочи, добавляли 3 мл 1,5% раствора пикриновой кислоты и прибавляли 0,3 мл 2,5 Н раствора NaОН. В ходе описанной реакции креатинин в моче взаимодействует с пикриновой кислотой, образуя основание Шиффа, давая специфическую красно-желтую окраску. После смешивания раствор инкубировали 15 минут при комнатной температуре, затем разбавляли водой до метки в колбе и измеряли оптическую плотность раствора на фотоэлектроколориметре при длине волны ?=490 нм. Для расчетов использовали метод сравнения со стандартным раствором, который готовят аналогичным способом, отмеривая в колбу 0,5 мл раствора с заранее известной концентрацией. В опытах использовали готовый раствор креатинина фирмы Fluka с концентрацией 17,7 ммоль/л ( 2 мг/мл ). Расчет экскреции креатинина осуществлялась по формуле:
Ех = Д*Ах *50/ Mr* Аст. *0,5;
где Ех - экскреция креатинина в моль;
Д - величина диуреза;
Ах - оптическая плотность исследуемого образца;
Mr - молярная масса креатинина;
Аст. - оптическая плотность стандартного образца;
- объем колбы;
,5 - аликвота мочи;
Мочегонное действие экстракта крапивы двудомной
n=10
ДиурезКреатенин, %Na, %К, %Контроль 4,50,426,00,4018,74,44251,557,443 день7,21,398,51,197,51,96363,3100,515 день6,91,498,41,235,60,99282,258,837 день6,31,187,50,887,21,51320,949,29 день5,90,966,80,684,80,74241,127,5511 день7,00,758,40,723,30,41370,929,4414 день 5,80,966,70,672,70,40335,152,43
Мочегонное действие экстракта крапивы жгучей
n=10
ДиурезКреатенин, %Na, %К, %Контроль 4,00,315,50,3511,11,57175,014,953 день6,40,978,20,797,51,96384,347,55 день8,31,079,50,746,00,92384,347,57 день6,61,057,20,626,10,72320,736,119 день7,91,257,90,605,50,93241,127,5511 день7,21,277,80,893,70,42372,844,6114 день 8,61,038,00,694,20,56430,839,58
Статистика мочегонное действие экстракта крапивы коноплевой травы сухой (водный) n=10
№ п/пДиурезNa+K+КреатенинКонтроль 8,60,9510,71,36301,825,8310,30,873 15,52,19* Р0,05586,356,77* P<0,0515,01,37* P<0,05717,52,62* Р<0,054,90,62* Р<0,05649,070,90* P<0,0514,61,39* P<0,05915,01,40* Р<0,055,10,99* Р<0,05628,361,51* P<0,0513,61,15* P<0,051017,81,59* Р<0,055,10,92* Р<0,05721,042,94* P<0,0515,11,26* P<0,05
Вид опыта: острое воспаление, статистика, n=10
60 мин.120 мин240 минИнтактная группа1,880,152,590,173,120,19Группа получающая экстракт травы крапивы коноплевой2,060,14 Р=0,013* -8,73%2,690,18 Р=0,218 -3,86%2,790,12 P<0,05* 10,6%Группа получающая экстракт травы крапивы двудомной1,600,06 Р=0,93 14,89%2,100,09 Р<0,05* 18,91%2,660,10 P<0,05* 14,8% Группы получающая экстракт травы крапивы жгучей1,710,05
Р=0,003*
,04%1,990,06<0,05*
23,2%2,230,09=0,022*
28,5%
Библиографический список
1.
.
.
.
.
.
7.
.
.
.
11. Брюханов, В.М. Методические подходы к изучению функции почек в эксперименте на животных / В.М. Брюханов, Я.Ф. Зверев, В.В. Лампатов, А.Ю. Жариков // Нефрология. - 2009. - Том 13, №3. - С.52 - 62.
. Яковлев, Г.П. Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия / Г.П. Яковлев, К.Ф. Блинова и др. С. - Петербург: Изд - во СпецЛит , 2003. - С. 671 - 673.