Полиморфизм гена эндотелиальной NO-синтазы (eNOS) у детей с отягощенным семейным анамнезом по сердечно-сосудистой патологии
Дипломная работа - Медицина, физкультура, здравоохранение
Другие дипломы по предмету Медицина, физкультура, здравоохранение
Санкт-Петербургский государственный политехнический университет
Факультет Медицинской физики и биоинжинерии
Кафедра физико-химических основ медицины
ВЫПУСКНАЯ РАБОТА БАКАЛАВРА
Тема
ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНА ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ NO-СИНТЕТАЗЫ (eNOS) У ДЕТЕЙ С ОТЯГОЩЁННЫМ СЕМЕЙНЫМ АНАМНЕЗОМ ПО СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТОЙ ПАТОЛОГИИ
Направление: 140400 - техническая физика
Выполнил студент ( ) Скворцов Н.В.
Руководитель ( ) д.м.н., В.И.Ларионова
Куратор ( ) д.м.н., проф., В.В. Грызунов
Санкт-Петербург2008г.
ОГЛАВЛЕНИЕ
Список сокращений
Введение
Обзор литературысинтетаза и атерогенез
Общая характеристика гена eNOS
Материалы и методы
Обследуемые группы
Использованные материалы, реактивы и оборудование
Выделение ДНК из лейкоцитов периферической крови
Полимеразно - цепная реакция (ПЦР)
Проведение ПЦР для 4a4b полиморфизма гена эндотелиальной NO-синтазы (eNOS)
Электрофорез
Статистический анализ
Результаты и обсуждение
Выводы
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Список сокращений
Русскоязычные
ССП - сердечно-сосудистая патология
ИБС - ишемическая болезнь сердца
АГ - артериальная гипертензия
ИМ - инфаркт миокарда
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
п.н. - пар нуклеотидов
п.о. - пар оснований
ПЦР - полимеразная цепная реакция
СД2 - сахарный диабет тип 2
ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота
ЛПНП - липопротеиды низкой плотности
ЛПВП - липопротеиды высокой плотностиЗ - сердечно-сосудистые заболевания
ОР - относительный риск
ДИ - доверительный интервал
Англоязычные
- оксид азота - эндотелиальная NO-синтетаза
Введение
Эндотелиальные клетки первыми встречаются с реактивными свободными радикалами, с окисленными липопротеинами низкой плотности, с гиперхолестеринемией, с высоким гидростатическим давлением внутри выстилаемых ими сосудов (при артериальной гипертонии), с гипергликемией (при сахарном диабете). Все эти факторы приводят к повреждению эндотелия сосудов, к дисфункции эндотелия, как эндокринного органа и к ускоренному развитию ССЗ.
Из всех факторов, синтезируемых эндотелием, роль "модератора" основных функций эндотелия принадлежит эндотелиальному фактору релаксации или оксиду азота (N0). Именно это соединение регулирует активность и последовательность "запуска" всех остальных биологически-активных веществ, продуцируемых эндотелием. Оксид азота не только вызывает расширение сосудов, но и блокирует пролиферацию гладкомышечных клеток, препятствует адгезии клеток крови и обладает антиагрегантными свойствами. Таким образом, оксид азота является базовым фактором антиатерогенеза[1].
Ген эндотелиальной NO-синтетазы (eNOS), отвечает за синтез оксида азота (NO) эндотелием и является ключевым ферментом в регуляции тонуса кровеносных сосудов, в работе гладкомышечной мускулатуры сосудистой стенки и процессов тромбообразования. Полиморфизм в гене eNOS может стать прогностически важным в формировании группы риска сердечно-сосудистой патологии (ССП) среди детей с отягощённой наследственностью по ССЗ. Поэтому целью нашего исследования стало определение роли полиморфизма eNOS в формировании риска ССП у детей с отягощённым анамнезом по ССЗ.
Для осуществления нашей цели были поставлены следующие задачи:
Провести анализ наследственной отягощенности у детей в группе риска по ожирению, по сахарному диабету тип 2 (СД2) и по сердечно-сосудистой патологии.
Генотипировать банк ДНК всех детей по полиморфизму 4a/4b гена eNOS.
Сравнить частоты встречаемости аллелей и генотипов по данному гену между группами и в зависимости от пола и типа отягощенной наследственности, а так же в зависимости от количества у исследованных детей близких родственников с ССЗ, ожирением и наличием СД2.
Работа проводилась в лаборатории молекулярной диагностики с расширенной группой по экогенетике СПбГПМА под руководством д.м.н., проф., В.И. Ларионовой.
Обзор литературы
NO-синтетаза и атерогенез
Основным триггерным фактором при атеросклерозе iитается окисление липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) свободными радикалами. Окисленные липиды, входящие в состав ЛПНП, активируют макрофаги. Макрофаги начинают продуцировать цитокины и свободные радикалы. Свободные радикалы окисляют NO до нитратов, а цитокины индуцируют экспрессию и синтез индуцибельной NO-синтетазы в гладкомышечных эндотелиальных клетках. Индуцибельная NO-синтетаза создает относительный дефицит субстрата, или аргинина, поскольку она оттягивает его как бы на себя и уменьшает его доступность для эндотелиальной NO-синтетазы [2]. Известно, что у больных атеросклерозом уровень аргинина в плазме крови снижен приблизительно на 30 %.
В настоящее время известно, что эндотелий регулирует сосудистый тонуiерез освобождение сосудорасширяющих и сосудосуживающих факторов и модулирует сократительную активность гладкомышечных клеток. К эндотелиальным факторам дилатации относится и оксид азота. NO является основным вазодилататором, препятствующим тоническому сокращению сосудов нейронального, эндокринного или локального происхождения.
В физиологических условиях NO постоянно вовлечен в адаптацию сосудистой системы к повышенным метаболическим потреб