Geum.ru
   Книги по разным темам Pages:     | 1 | 2 | УДК 615.212.7:340.67]:616.15:57.08 (045) Оригинальная статья ОСНОВНЫЕ МЕТОДЫ ИДЕНТИФИКАЦИИ НАРКОТИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ В ТРУПНОЙ МОЧЕ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ В КРОВИ ПРИ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЯХ НА НАРКОТИКИ Е.аН.аБычков Ч ГБОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В. И. Разумовского Минздравсоцразвития России, доцент кафедры психиатрии и наркологии, кандидат медицинских наук; С.аА.аСеркова Ч ГУЗ Бюро судебно-медицинской экспертизы министерства здравоохранения Саратовской области, врач-эксперт; Л.аА.аАрсентьева Ч ГУЗ Бюро судебно-медицинской экспертизы министерства здравоохранения Саратовской области, главный специалист; Т.аС.аФранцузова Ч ГУЗ Бюро судебно-медицинской экспертизы министерства здравоохранения Саратовской области, врач химического отделения; Г.аА.аБлувштейн Ч ГБОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В. И. Разумовского Минздравсоцразвития России, заведующий кафедрой факультетской хирургии, профессор, доктор медицинских наук; В.аБ.аБородулин Ч ГБОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В. И. Разумовского Минздравсоцразвития России, заведующий кафедрой биохимии, профессор, доктор медицинских наук.

GENERAL METHODS OF IDENTIFICATION OF NARCOTIC SUBSTANCES IN CADAVERIC URINE AND BIOCHEMICAL INDICES IN BLOOD AT POSITIVE IDENTIFICATION OF DRUG SUBSTANCES E.аN.аBychkov Ч Saratov State Medical University n.a. V. I. Razumovsky, Department of Psychiatry and Narcology, Assistant Professor, Candidate of Medical Science; S.аA.аSerkova Ч Saratov Bureau of Forensic Medical Examination, Expert; L.аA.аArsentieva Ч Saratov Bureau of Forensic Medical Examination, Main Expert; T.аS.аFrantsuzova Ч Saratov Bureau of Forensic Medical Examination, Chemical Department; G.аA.аBluvshtein Ч Saratov State Medical University n.a. V. I. Razumovsky, Head of Department of Faculty Surgery, Professor, Doctor of Medical Science; V.аB.аBorodulin Ч Saratov State Medical University n.a. V. I. Razumovsky, Head of Department of Biochemistry, Professor, Doctor of Medical Science.

Дата поступления Ч 19.01.2011 г. Дата принятия в печать Ч 07.09.2011 г.

Бычков Е.аН., Серкова С.аА.,аАрсентьева Л.аА., Французова Т.аС.,аБлувштейнаГ.аА.,аБородулинаВ.аБ. Основные методы идентификации наркотических веществ в трупной моче и определение биохимических показателей в крови при положительных исследованиях на наркотики // Саратовский научно-медицинский журнал. 2011. Т. 7, № 3. С. 642Ц646.

Представлены методы идентификации наркотических веществ, описаны хроматографические и спектральные характеристики наркотических веществ. Изучены взаимосвязи между биохимическими показателями при положительных исследованиях на наркотические вещества. Обнаружено увеличение концентрации мочевины в трупной крови наркоманов по сравнению с контрольными образцами.

Ключевые слова: наркотические вещества, хроматография, спектроскопия, моча, креатинин.

Bychkov E.аN.,аSerkovaаS.аA., ArsentievaаL.аA.,аFrantsuzovaаT.аS.,аBluvshteinаG.аA., BorodulinаV.аB.аGeneral methods of identification of narcotic substances in cadaveric urine and biochemical indices in blood at positive identification of drug substances // Saratov Journal of Medical Scientific Research. 2011. Vol. 7, № 3. P. 642Ц646.

The goal of the present paper was to find effective biocheical arkers of chronic narcotization. Materials and methods. The results of biocheical research of biological liquids in huan organis and chroatographic ethods of drug substances identification in cadaveric urine were analyzed. Research of 197 saples of different biologic liquids of 10 persons was carried out. Control was fulfilled on the basis of 135 saples of biological liquids took of 12 persons.

Methods of identification of drug substances are presented, chroatographic and spectral characteristics of drug substances are described. Interrelations of biocheical indices at positive study of drug substances identification were conducted. The increased urea etabolic concentration in cadaveric blood of drug addicts was revealed in coparison with control speciens. Results. (Nueral results are given in Table 3). Correct correlation of biocheical arkers was not established. Conclusion. The present results suppose continued study of inforative reliable biocheical arkers of chronic drug intoxication.

Key words: narcotic substances, chroatography, spectroscopy, urea, creatinine.

Введение. Злоупотребление наркотиками и хроматографические методы анализа, такие, как другими веществами, вызывающими зависимость, тонкослойная хроматография, спектрофотометрия, весьма распространено, несмотря на меры, прини- газовая хроматография и другие. Для определения маемые мировым сообществом. В последнее время наркотических веществ чаще всего используется отмечается распространение полинаркомании, свя- моча, как наиболее информативный биообъект исзанной с употреблением лекарственных коктейлей следования.

для усиления наркотического действия. Основным Методы. Среди методов обнаружения наркотикритерием диагностики отравлений наркотическими ческих веществ использовали тонкослойную хромавеществами является положительный результат су- тографию и спектрофотометрию [1, 2]. Хроматоградебно-химического исследования тканей и биологи- фия как физико-химический процесс основана на ческих сред трупа. Судебно-медицинская экспертиза различных скоростях движения и размывания контрупов с исследованием биологического материала центрационных зон компонентов, которые движутся на наличие наркотических средств включает в себя в потоке подвижной фазы вдоль слоя неподвижной фазы. При этом следует иметь в виду, что исслеОтветственный автор Ч Бычков Евгений Николаевич.

дуемые вещества находятся в обеих фазах. После Адрес: 410012, г. Саратов, ул. Б. Казачья, 112.

разделения анализируемой смеси на отдельные Тел.: 89172007474.

E-ail: bychkov-2005@yandex.ru Саратовский научно-медицинский журнал. 2011. Т. 7, № 3.

NARCOLOGY компоненты хроматографирование прекращают и в хроматографических зонах проводят качественное и количественное определение (детектирование).

Для обнаружения бесцветных соединений чаще всего используют облучение УФ-светом, опрыскивание химическими реагентами, смачивание проявляющим раствором, капельное нанесение реагента, экстрагирование зоны вещества с сорбента для последующего исследования полученных соединений физическими и химическими методами. Идентификация компонентов проводится по свидетелям (метчикам) Ч известным эталонным веществам сравнения, хроматографируемым одновременно, на одной и той же пластинке, с анализируемой пробой.

а б Основными системами для двухмерной хроматоРис. 1. Система: этилацетат - этанол - 25%-ный аммиак графии наркотических веществ являются: 1) для опи(9:1:0,5). Реагент - реактив Марки. Объект - моча (а) атов: хлороформ Ч диоксан Ч ацетон Ч 25 %-ный Система: хлороформ - ацетон - этанол - 25%-ный аммиак раствор аммиака (45:47.5:5:2.5), этилацетат Ч эта- (20:20:3:1). Реагент - реактив Марки. Объект - моча (б) нол Ч аммиак (9:1:0.5); 2) для амфетаминов: хлороформ Ч ацетон Ч этанол Ч 25 %-ный раствор аммиака (20:20:3:1), толуол Ч этанол Ч триэтиламин В скрининге наркотических веществ используют(9:1:1) [3]. Основной качественной характеристикой ся следующие реагенты для обнаружения: 1) растонкослойной хроматографии является величина Rf, твор нингидрина, 2) реактив Драгендорфа, 3) реаккоторая представляет собой отношение расстояний, тив Манделина, 4) реактив Марки, 5) реактив Фреде;

которые пройдены исследуемым веществом и под- 6) 1 %-ный раствор Черного прочного К (FBK). ПомиFBK). Поми). Помивижной фазой [4]. Для определения Rf очень важно мо производных амфетамина FBK дает различные точно установить положение фронта растворителя.

окрашивания (красного, синего, оранжевого, фиоПри полном совпадении полученного значения с Rf летового цвета) с некоторыми другими веществами известного соединения можно говорить только о воз- (табл. 1, рис. 1Ц3).

можной идентичности вещества, которую дополни- На рисунках 1Ц3 представлены пластинки Сорбтельно подтверждали спектрофотометрией [5].

фил с нанесенными на них объектами и метчиками Таблица Сравнительные значения Rf наркотических веществ на пластинках Сорбфил Вид систем Вещества (нарк.) основная основная основная основная Rf Rf Rf Rf система система система система Морфин Этилацетат 0.2 Хлороформ 0.17 - - - - этанол - - диоксан - 25% аммиак ацетон - (9:1:0.5) 25% аммиака (45:47.5:5:2.5) Кодеин Этилацетат 0.34 Хлороформ - 0.41 - - - - этанол - диоксан - 25% аммиак ацетон - (9:1:0.5) 25% аммиака (45:47.5:5:2.5) Промедол Этилацетат 0.69 Хлороформ - 0.72 - - - - этанол - диоксан - 25% аммиак ацетон - (9:1:0.5) 25% аммиака (45:47.5:5:2.5) Героин Этилацетат 0.60 Хлороформ - 0.48 - - - - этанол - диоксан - 25% аммиак ацетон - (9:1:0.5) 25% аммиака (45:47.5:5:2.5) МДА Хлороформ 0.66 Толуол - 0.46 Метанол - 0.41 Этилацетат - 0.МДМА - ацетон - 0.23 этанол - 0.46 конц. аммиак 0.31 метанол - 0.МДЕА этанол - 0.46 триэтиламин 0.64 (100:1.5) конц. аммиак ДОМ/STP 25% водный 0.46 (9:1:1) 0.43 0.35 (85:10:5) 0.ПМА раствор 0.64 0.36 0.41 0.ДМА аммиака 0.54 0.42 0.37 0.ТМА (20: 20:3:1) 0.43 0.ДОБ 0.41 0.40 0.37 0.ДОХ 0.60 0.МБДБ 0.41 0.БДБ 0.74 0.ДОЭТ 0.52 0.40 0.36 0.Мескалин 0.5 0.12 0.44 0.Метамфетамин 0.38 0.46 0.33 0. Saratov Journal of Medical Scientific Research. 2011. Vol. 7, № 3.

644 НАРКОЛОГИЯ после прогонки в основных камерах и опрыскивания реагентами В основе количественных определений спектральными методами лежит закон Бугера Ч Ламберта Ч Бера, устанавливающий зависимость между оптической плотностью и концентрацией анализируемого раствора (табл. 2).

В работе использовались биохимические методики.

Определение ацетилхолинэстеразы (АХЭ) по методу Хестрина.

В пробирку помещали 1,5 мл фосфатного буфера с pH 7,6 по УИБ, 0,5 мл дистиллированной воды, 1 мл исследуемой крови в разведении 1:8 и 1 мл а б 0,4 %-ного раствора ацетилхолинохлорида. Смесь термостатировали при периодическом встряхиваРис. 2. Система: хлороформ - диоксан - ацетон - 25%-ный нии в течение 30 мин. Затем в пробирку добавляли аммиак (45:47,5: 5:2,5).

Реагент - реактив Драгендорф. Объект - моча (а) 1 мл 25 %-ного раствора трихлоруксусной кислоты, Система: метанол - конц. аммиак (100:1,5) через 10 мин. содержимое пробирки отфильтровыРеагент - 1%-ный раствор Черного прочного, 1М раствор вали. К 1 мл безбелкового фильтрата добавляли едкого натра.Объект - моча (б) мл смеси растворов из 3,5н едкого натра и 2н солянокислого гидроксиламина в соотношении 1:1, мл соляной кислоты в разведении 1:2, 1 мл 0,37м раствора хлорного железа в 0,1н растворе соляной кислоты. Раствор колориметрировали на КФК-3 при длине волны 510 нм, в кювете толщиной слоя 5,мм. В качестве раствора сравнения использовали контроль на реактивы. Концентрация неразрушенного ацетилхолинохлорида в растворе имеет линейную обратно пропорциональную зависимость от активности ацетилхолинэстеразы. Кроме того, проводили определение концентрации гемоглобина. В пробирку отмеряли 2 мл трансформирующего раствора из набора Диахим-Гемциан, добавляли 0,2 мл разведенной крови 1:8, инкубировали при температуре 20С 15 мин. Центрифугировали Рис. 3. Система: этилацетат - метанол - конц. аммиак 10 мин. при 15 тыс. об / мин. Затем снимали оптиче(85:10:5). Реагент - 1%-ный раствор Черного прочного, скую плотность на КФК-3 при длине волны 540 нм в 1М раствор едкого натра. Объект - моча кювете толщиной слоя 5,05 мм. В качестве раствора сравнения использовали контроль на реактивы.

Таблица Спектральные характеристики наркотических веществ Вещество Растворитель макс, нм н НСl Морфин 0.1 н NaOH 205,Этанол н НСl 211,Кодеин 0.1 н NaOH Вода Кодеина фосфат 0.1 н НСl Тебаин 0.1 н NaOH 0.1 н НСl 0.1 н Н2SO4 Героин Этанол 0.1 н NaOH Амфетамины: МДА МДМА МДЕА ДОЭТ Водный раствор МБДБ ПМА ДОБ Мескалина сульфат Саратовский научно-медицинский журнал. 2011. Т. 7, № 3.

NARCOLOGY Активность холинэстеразы прямо пропорциональна стоящий из смеси креатинина 445,2 мкмоль / л и концентрации гемоглобина. альбумина 20 г / л. Раствор сравнения Ч водный Расчет проводили по формулам: раствор пикриновой кислоты. Реакционная смесь дает с креатинином желто-оранжевое окрашивание. Концентрация креатинина прямо пропорциональна его оптической плотности и рассчиты(1), вается по формуле: C=FE, F=0,177 / E. Раствор on c колориметрировался на КФК-3, кювета 5,05 мм, при длине волны 500 нм, измеряли оптическую где 8 Ч постоянная;

плотность и концентрацию креатинина.

8 Ч разведение крови;

Результаты. Проведенный анализ десяти исследований трупной крови при положительных реакциЦ% разрушенного ацетилхолинохлорида;

ях на наркотические вещества выявил следующее:

1) показатели ацетилхолинэстеразы в пяти случаях были в пределах нормы (292Ц334 ExhHb), в трех случаях были понижены на 2, 5 и 28 % и в двух слуE Ч оптическая плотность опытного образца;

оп чаях повышены на 5 и 17 %; 2) показатели мочевиE Ч оптическая плотность стандартного раствора;

ст ны в трех случаях укладывались в границы нормы EHb Ч оптическая плотность гемоглобина.

(3,0Ц5,0 ммоль / л), в двух случаях были ниже нормы, После математических преобразований формула а в пяти случаях повышены; 3) показатели креатини(1) принимает вид линейной зависимости:

на в двух случаях были в пределах нормы (0,12Ц0,Qon = 64 Ч E F, on ммоль / л), в трех случаях понижены, а в пяти случаях где F = 64 / EHb. повышены (табл. 3).

Определяем оптические плотности E и E.

оп ст Таблица СHb=F2EHb, (2), Соотношения биохимических показателей где F2=64.74, в трупной крови при положительных исследованиях на наркотические вещества и в контроле Определяем оптическую плотность ЕНb, (3), Контроль Исследуемая группа Биохимический показатель (М) (М) Р % отклонения = (4).

АХЭ 31222 33824 Р>0,Креатинин 0,190,07 0,220,08 Р>0,Определение мочевины в крови основано на измерении скорости образования окрашенного комМочевина 40,87 7,50.8 Р<0,плекса мочевины с диацетилмонооксимом в сильнокислой среде в присутствии тиосемикарбазида и ионов трехвалентного железа.

Pages:     | 1 | 2 |    Книги по разным темам