Сэндвич-метод иммуноферментного определения hbsAg с помощью рн чувствительных сорбируемых моноклональных антител 14. 03. 09 клиническая иммунология, аллергология
СодержаниеНаучные руководители
Официальные оппоненты
Ведущая организация
Общая характеристика работы
Цель исследования
Задачи исследования
Научная новизна исследования
Практическая значимость
Положения, выносимые на защиту
Внедрение результатов работы в практику
Апробация работы
Содержание работы
Методы Получение гибридом.
Определение антигенсвязывающей активности антител.
Очистка антител.
Определение концентрации антител.
Подбор пар МКА, образующих сэндвич с HBsAg
Определение HBsAg в сыворотке крови.
Определение минимальной достоверно определяемой концентрации HBsAg в сыворотке крови.
Результаты исследований
Рис. 1. Связывание МКА 18С8 с различными препаратами HBsAg, иммобилизованными на поверхность иммунных планшетов.
Таблица 1. Подбор пар моноклональных антител, образующих сэндвич с HBs-антигеном в твердофазном иммуноферментном методе
Иммобилизованные антитела
Подбор пар моноклональных антител, образующих сэндвич с HBsAg
Рис. 2. Калибровочные кривые в сэндвич-методе тестирования HВs-антигена с различными парами иммобилизованных и детектирующих ант
Влияние рН адсорбции антител на параметры сэндвич-метода
Иммобилизованные антитела
Рис. 3. Влияние рН сорбции иммобилизуемых антител на коэффициент калибровочной кривой с различными парами иммобилизованных и дет
Рис. 4. Калибровочные кривые в сэндвич-методе тестирования HBsAg при различных рН сорбции иммобилизуемых антител.
Рис. 5. Свойства антител клона 18С8 иммобилизованных на поверхность иммунных планшетов при нейтральных и кислых рН.
Оптимизация концентрации иммобилизованных антител и времени инкубации
Доказательства иммунологической тождественности рекомбинантных HBsAg и иммунореактивного HBsAg из сыворотки крови больных, инфиц
Рис. 7. Калибровочные кривые в сэндвич-методе тестирования HBsAg c различными препаратами HВsAg
Минимальная достоверно определяемая концентрация HBsAg
Определение концентрации HBsAg в образцах сывороток больных, инфицированных вирусом гепатита В
Таблица 2. Определение HBsAg в сертифицированных образцах сывороток
Концентрация, декларируемая производителем, нг/мл
Список работ, опубликованных по теме диссертации
