Культивирование бактерий
Курсовой проект - Биология
Другие курсовые по предмету Биология
ГОУВПО “Марийский государственный университет”
Кафедра биохимии и молекулярной биологии
Культивирование бактерий.
курсовая работа
Выполнил:
студент III курса Марийского государственного университета
биолого-химического факультета, очного отделения Биоэкология
Гайдай Роман Андреевич.
Руководитель:
Гажеева Тамара Петровна.
Йошкар-Ола, 2007г.
Содержание.
1.Основы жизнедеятельности микробных клеток--------------- 3 стр.
1.1Внутриклеточный рН.--------------------------------------------- 3 стр.
1.2Диапазон рН.-------------------------------------------------------- 3 стр.
1.3Природные среды. ------------------------------------------------- 3 стр.
1.4Регуляция рН среды. ---------------------------------------------- 3 стр.
1.5Влияние рН на микробные клетки. ---------------------------- 4 стр.
2.Микробный рост. ---------------------------------------------------- 4 стр.
2.1.Температурный диапазон.------------------------------------- 4 стр.
2.2.Микробный рост существенно зависит
от присутствия кислорода и других газов------------------------ 5 стр.
2.3Растворимость газов.---------------------------------------------- 5 стр.
2.4.Аэрация. ------------------------------------------------------------ 5 стр.
2.5.Контроль за концентрацией О2 ------------------------------- 5 стр.
2.6.СО2.----------------------------------------------------------------- 6 стр.
2.7.Активность воды и осмотическое давление зависят от концентрации растворенных осмотически активных частиц.-- 7 стр.
2.8. Давление и удаление кислорода, влияние на бактериальную клетку.----------------------------------------------------------------------- 8 стр.
3.0.Свет может служить источником энергии
для микроорганизмов. -------------------------------------------------- 9 стр.
3.1.Среды для выращивания бактерий.------------------------------ 9 стр.
3.2.Источники энергии.------------------------------------------------- 10 стр.
3.3.Основными питательными элементами служат углерод, азот, сера и фосфор.------------------------------------------------------------------- 10 стр.
3.4.Для выращивания чистых культур микроорганизмов необходима стерилизация сред и инструментов. ---------------------------------- 14 стр.
3.5.Рост можно измерять различными методами.------------------ 16 стр.
3.6.Подсчет колоний. ---------------------------------------------------- 18 стр.
3.7.Метод определения наиболее вероятного числа бактерий.- 19 стр.
4.0. Методы хранения культур обеспечивают
длительное поддержание их жизнеспособности.------------------- 20 стр.
4.1.Работа микробиологов основана на методах
элективного культивирования и получения чистых культур.---- 21стр.
4.2. Полунепрерывное культивирование.---------------------------- 23 стр.
4.3.Методы консервирования основаны на подавлении микробного роста.-------------------------------------------------------------------------- 24 стр.
1.Основы жизнедеятельности микробных клеток.
1.1Внутриклеточный рН.
Большинство видов бактерий, способно расти в широком диапазоне рН (~ 4 ед.), но их быстрый рост наблюдается в более узком диапазоне примерно 2 ед. рН. При этом значение рН поддерживается, на постоянном, оптимальном уровне, который часто сильно отличается от рН среды. Регуляция внутриклеточного рН опосредована неизвестной пока сенсорной системой, и протонодвижущей силой.
Если рН среды, более щелочной, чем рН цитоплазмы, клетки бактерий, должны поглощать Н+ с использованием энергии мембранного потенциала.
1.2Диапазон рН.
Бактерии, для которых оптимальны значения рН, близкие к 7,0, например Е. соli, составляют группу нейтрофилов. Экстремофильные виды, приспособленные к очень низким значениям рН, называют ацидофилами. К ним относится, например, бактерия Thiobacillus ferroxidons, растущая при рН 2,0-8,0. Виды - алкалифилы растут в щелочных средах; например, для Bacillus alcaliphilus оптимальное значение рН составляет примерно 10,5. Внутри-клеточный рН у этих трех приведенных в качестве примеров бактерий равен примерно 7,6; 6,5 и 9 соответственно. Некоторые бактерии, такие как Acetobacter и Lactobacillus, способны сохранять жизнеспособность при экстремальных значениях рН в течение определенного времени. Большинство грибов предпочитает слабокислую среду.
1.3Природные среды.
Спектр значений рН в природных местообитаниях представлен на рис. 6.2. Алкалифилы способны выживать при рН > 10, но рост их возможен, как правило, при рН < 10. Многие бактерии при росте потребляют и/или образуют кислоты либо основания. Например, при использовании NH4CL в качестве источника азота клетки ассимилируют NНз, выделяя в среду НСL.
1.4Регуляция рН среды.
Для контроля за изменением рН среды при росте бактерий (например, как диагностическим признаком) в состав многих питательных сред вводят индикаторы рН (слабые органические кислоты или основания, яркоокрашенные в зависимости от протонирования / депротонирования). В качестве таких индикаторов используют бромфеноловый синий (рКа 4,0), метиловый красный (рКа 5,2) и тимоловый синий (рКа 8,9), в кислой форме приобретающие желтую окраску. Поддерживать значение рН среды в узком диапазоне позволяют автоматические системы контроля рН, состоящие из рН-электрода, рН-метра, системы регуляции/установки допустимых пределов изменения рН и насоса для добавления кислоты или основания.
1.5Влияние рН на микробные клетки.
Неблагоприятная концентрация Н+ и ОН~ в среде влияет на различные структурные и биохимические параметры микробных клеток, Цитоплазма хорошо забуферена; при ее буферной емкости для изменения рН на 1 ед. необходимо > 0,1 моль ки?/p>