Проведение исследований в вирусологической лаборатории
Отчет по практике - Сельское хозяйство
Другие отчеты по практике по предмету Сельское хозяйство
изол 1-5%, хлорамин 1-5%, формалин 2,5-5%.
Помимо обычной бактериологической посуды, в вирусологической лаборатории должны быть: гомогенизатор для измельчения тканей, магнитные мешалки, микроскопы (световые для исследования в обычном и ультрафиолетовом свете, а также электронные), центрифуги различной мощности (на 3-5 тыс. об. /мин, а также с охлаждением на 12-15 тыс. и 60 тыс. об. /мин), имеющие набор роторов. Необходимы термостаты, одновременно работающие при различной температуре (от 25 до 40?С), в том числе с подачей углекислого газа, или термостатные комнаты. Вирусологическая лаборатория оборудуется рефрижераторами или холодильными камерами с температурой +4, - 20 и - 40?С. Для хранения культур клеток необходимы сосуды Дьюара с жидким азотом или холодильники с температурой ниже - 90?С.
Лаборатории, изучающие биохимию вирусов оборудуют по типу химических. Работа с радиоактивными изотопами производится в специально оборудованном помещении.
В отделениях по приготовлению сред, помимо обычной химической посуды необходимо иметь установки для обработки воды, которая дважды дистиллируется в стеклянных аппаратах или деионизируется на колонках с ионообменными смолами. Для стерилизации растворов, которые нельзя автоклавировать, используют асбестобумажные стерилизующие пластины Зейтца, вмонтированные в фильтры типа Сальникова (Ф-140, ФС-3, ФС-7 и т.п.); фильтрация осуществляется при давлении 0,5 атм.
Рабочий стол вирусолога, по возможности располагают на расстоянии 1 м от окна и покрывают линолеумом или стеклом. На столе помещают газовую горелку. Обязательным оборудованием рабочего места является банка для пипеток с дезинфицирующим раствором (3% раствор карболовой кислоты), закрывающийся фарфоровый или стеклянный сосуд для ваты, набор штативов для пробирок, эмалированные кюветы, пинцеты, ножницы и скальпель, чистые предметные стекла с лунками и без них, а также покровные стекла. Микроскопы хранят в футляре или под стеклянным колпаком. В вирусологической лаборатории также должна быть умывальная раковина, над которой на полке помещают бутыль с раствором для дезинфекции рук.
Виварий должен быть отделен от помещения собственно вирусологической лаборатории. В нем необходимо иметь комнаты для карантина поступающих животных, для их заражения и отдельно для вскрытия. Работа с мелкими лабораторными животными производится за защитным стеклом. Обеззараживание клеток для содержания животных лучше производить паром. Необходимо также иметь крематорий для сжигания трупов животных и мусора.
Устройство областной вирусологической лаборатории, в которую хозяйство направляет материал для исследований, отвечает основным правилам и нормам.
Правила взятия и пересылки материала для вирусологического исследования
Для вирусологических исследований желательно направлять пробы от животных в трех стадиях болезни:
от свежих трупов (кровь, кость, лимфоузел и пораженные органы);
от убитых в агонии животных (кровь, кость, лимфоузлы и пораженные органы);
от выздоравливающих животных (кровь).
Пробы необходимо брать асептически, не допуская их загрязнения, в стерильные флаконы (обычно из-под антибиотиков). Каждую пробу необходимо брать в отдельный флакон. Масса каждой пробы должна быть достаточной для исследования - не менее 5-10 мл, или грамм. Все флаконы должны герметически закрываться пробками (обычно резиновыми), продезинфицированы снаружи, высушены и маркированы. Надписи необходимо делать простым карандашом с указанием вида и номера животного, названия органа и даты взятия материала. Дополнительные данные, относящиеся к анамнезу, заболеваемости, размеру очага или вспышки, симптоматике, применявшимся вакцинам, препаратам и т.п., отражают в специальной карте или сопроводительном письме. Лучшие условия для сохранения проб материалов - замораживание.
Для пересылки образцы должны быть помещены в термосы со льдом или изотермические ящики, приспособленные для пересылки. Если образцы можно доставить в лабораторию в течение суток после отбора, то их не замораживают и не консервируют. Образцы, которые не могут быть доставлена в лабораторию в течение суток или в замороженном виде, необходимо консервировать глицерином. Он должен полностью покрывать кусочки взятых органов. Даже консервированные образцы желательно хранить в холодильнике.
Успешная и точная диагностика зависит от быстроты доставки материалов в лабораторию.
При вспышках заболеваний со значительной массовостью или смертностью из близко расположенных к лаборатории районов кроме образцов материала желательно присылать больных животных или свежие трупы. Их также необходимо доставлять с предосторожностями (упаковывать в ящики или коробки) во избежание разноса инфекции. Образцы материалов от трупов должны быть отобраны в возможно короткие сроки после смерти животного, чтобы сохранить возможности для выделения возбудителя, вызывающего заболевание. В тропическом и субтропическом климате при повышенных температуре и относительной влажности воздуха время от гибели до отбора проб не должно быть более 12 ч.
Взятие проб крови от переболевших животных.
Пробы крови берут из яремной вены у крупного и мелкого рогатого скота, лошадей, из хвостовой артерии у свиней и из подкрыльцовой вены у птиц. Кровь можно брать из ушной вены.
Перед взятием крови необходимо очистить и продезинфицировать кожу в месте укола или разреза. Каждую иглу или лезвие мо