На правах рукописи

ЦЫРЕМПИЛОВА

Нина Алексеевна

ВЛИЯНИЕ ГЕМОПРЕПАРАТА НА МИКРОБИОЦЕНОЗ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ И ЕГО ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ В КОРРЕКЦИИ ДИСБИОЗОВ

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертацииана соискание

ученой степени кандидата ветеринарных наук

Барнаул 2012

Работа выполнена на кафедре микробиологии, вирусологии и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГБОУ ВПО Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р. Филиппова.

Научный руководитель:а  заслуженный работник высшей школы РФ,

доктор ветеринарных наук, профессор

Цыдыпов Виктор Цыбанович

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, старший научный сотрудник  Разумовская Валентина Владимировна

кандидат ветеринарных наук, доцент  Густокашин Константин Анатольевич

Ведущая организация: ГНУ НИИ Ветеринарии  Восточной

Сибири СО Россельхозакадемии (г.Чита)

Защита состоится 29 марта 2012 г. в 10.00 часов на заседанииадиссертационного совета Д 220.002.02 при ФГБОУ ВПО Алтайский государственный аграрный университет на факультете ветеринарной медицины по адресу: 656922, Алтайский край, г. Барнаул, ул. Попова, 276, тел./факс 8(3852) 31-39-70.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке факультета ветеринарной медицины ФГБОУ ВПО Алтайский государственный аграрный университет.

Автореферат разослан л__ февраля 2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета П.И. Барышников

Общая характеристика работы

1.1.

Актуальность темы. Наметившаяся тенденция производства экологически чистых продуктов питания требует новых типов добавок, повышающих продуктивность животных. Одной из реальных альтернатив на сегодняшний день являются пробиотики препараты, содержащие живые культуры микроорганизмов - симбионтов желудочно-кишечного тракта. Их применяют в качестве биологически активных веществ, обладающих ростостимулирующим и лечебно-профилактическим эффектом. Преимущество их в том, что они безвредны и не имеют недостатков, присущих антибиотикам и химиотерапевтическим средствам.

Применение пробиотиков в животноводстве затрагивает ряд важных проблем, связанных с регулированием кишечного микробиоценоза, иммунной, гормональной и ферментативной систем организма молодняка. [Аграненко Д.М. 1972, Алиев С.А. 1981 и др.].

Для профилактики здоровья молодняка необходимо поддерживать популяцию полезных бактерий в пищеварительном тракте. Поэтому важно при его выращивании создавать необходимые условия для формирования собственного микробиоценоза, включая применение средств, в том числе пробиотиков, способствующих формированию микрофлоры в нужном для организма направлении [Баймуратова М.А. 2004 и др.].

Существует большое количество пробиотиков, созданных на основе лактобактерий, бифидумбактерий, молочнокислых, целлюлозолитических и других бактерий. Широко применяются в животноводстве и птицеводстве такие новые пробиотики, как реалак, лаком, стрептобифид, ветом-1.1, субалин, целлобактерин, лактоами-ловарин и другие [Карликанова С.Н.1983 и др.].

В начале 90-х годов в ВИЖе на основе каротинсинтезирующей культуры Rhodococcus получен пробиотик - каротинобактерин, эффективный в рационах цыплят-бройлеров, молодняка крупного рогатого скота и свиней [Житенко П.В. 1986 и др.].

Кровь убойных животных представляет собой ценное сырье для производства лечебных препаратов, поскольку имеет высокую биологическую ценность, обусловленную значительным содержанием хорошо усвояемых и полноценных белков, минеральных солей, ферментов, витаминов, сахаров, лецитина и других веществ [Бубеев А.Т., Данилова Т.Е. Цыренов В.Ж. 2003, 2005, 2006 и др.]. Поэтому кровь животных вызывает особый интерес для разработки новых биологически активных препаратов в профилактике дисбиозов и иммунодефицитов у молодняка сельскохозяйственных животных. [Балтрошевич А.К. 1978; Бубеев А.Т., Данилова Т.Е. Цыренов В.Ж. 2003, 2005, 2006 и др.].

1.2. Цель и задачи исследований.аЦелью настоящей работы явилось установление биологической ценности гемопрепарата на лабораторных и сельскохозяйственных животных, его лечебную и профилактическую эффективность при дисбактериозах, исследование фонового показателя микробиоценоза кишечника у экспериментальных животных.

Для реализации данной цели были поставлены следующиеазадачи исследований:

1. Освоить технологию получения гемопрепарата в условиях убойных пунктов животных.

2. Определить изменение количественного и видового состава микроорганизмов в кишечнике телят под влиянием антгельминтного препарата аверсект-2, как фонового показателя до применения гемопрепарата.

3. Изучить влияние гемопрепарата на состав микробиоценоза пищеварительного тракта кроликов и телят.

5. Изучить биологические свойства, выделенных микроорганизмов (культуральльные, морфологические, тинкториальные и биохимические показатели) желудочно-кишечного тракта кроликов и телят до и после применения гемопрепарата.

6. Установить оптимальные дозы и изучить экономическую эффективность применения гемопрепарата при выращивании кроликов и телят.

1.3. Научная новизна. Впервые изучены показатели биологической ценности гемопрепарата, позволяющие рассматривать его в качестве эффективного белкового компонента и источника азотного питания у телят;

Выявлено положительное влияние на микробиоценоз кишечника экспериментальных животных;

Изучена возможность использования гемопрепарата, в качестве компонента функционального питания при профилактике дисбактериозов;

Отработана технология получения крови животных в условиях пункта убоя животных.

Практическая значимость работы.

В результате проведения комплексных исследований разработаны практические рекомендации по применению гемопрепарата, как объекта биотехнологии. Он может использоваться для коррекции дисбиозных состояний у сельскохозяйственных животных для сохранности общего поголовья молодняка, а также как методический материал в учебном процессе.

На основе проведенных исследований разработана технологическая схема проведения диагностических и ветеринарно-профилактических мероприятий по выявлению дисбактериозов в хозяйствах Республики Бурятия. Разработаны и утверждены методические рекомендации: Влияние гемопрепарата на микробиоценоз желудочно-кишечного тракта сельскохозяйственных животных и его практическая значимость в коррекции дисбиозов (Решения Ученого Совета факультета ветеринарной медицины ФГБОУ ВПО Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р. Филиппова протокол №6 от 22.02.07 г. и Научно-технического совета Управления ветеринарии Республики Бурятия, протокол №5 от 20.05.2009г.).

1.5. Реализация и внедрение результатов работы.аРезультаты работыаиспользуются в хозяйствах и ветеринарных учреждениях Республики Бурятия при проведении различных лечебно-профилактических мероприятий, влекущих за собой изменение микробиоценоза и дисбиозных состояний. Материалы диссертационной работы применяются для усовершенствования схемы ветеринарно-санитарных мероприятий в хозяйствах региона при составлении ветеринарно-технологических карт противоинвазионных обработок и вакцинаций, вызывающих состояние дисбиоза у молодняка сельскохозяйственных животных.

1.6. Апробация работы.аОсновные материалы диссертации обсуждены и одобрены на Международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию профессора Ивана Андреевича Спирюхова Актуальные вопросы экологической, сравнительной, возрастной и экспериментальной морфологии (Улан-Удэ, 2007); на Международной научно- практической конференции, посвященной 85-летию кафедры паразитологии (Улан-Удэ, 2008); на Международной научноЦпрактической конференции, посвященной дню науки (Улан-Удэ, 2009); в сборнике научных трудов: Биотехнология. Технология пищевых продуктов, посвященная 70-летию со дня рождения Александра Александровича Васильева (Улан-Удэ, 2009); на Всероссийской научной конференции Эколого-географические аспекты инфектологии (Улан-Удэ, 2011).

1.7. Публикации.аОсновные научные положения по теме диссертации отражены в 6 научных работах,ав том числе в 2 статьях в журнале Вестник Бурятской государственной сельскохозяйственной академии имени В.Р. Филиппова рекомендованном ВАК РФ, методической рекомендации:алВлияние гемопрепарата на микробиоценоз желудочно-кишечного тракта сельскохозяйственных животных и его практическая значимость в коррекции дисбиозов (Улан-Удэ 2011г.).

1.8. Объем и структура диссертации.аДиссертационная работа изложена на 119 страницах компьютерного текста на русском языке и включает: введение, обзор литературы, собственные исследования, анализ результатов исследований, выводы, предложения, список использованной литературы. Работа иллюстрирована 35 таблицами и 48 рисунками. Список использованной литературы содержит 136 источников отечественных и иностранных публикаций.

1.9. Основные положения, выносимые на защиту.аНа защиту выносятся следующие положения:

1. Технология получения гемопрепарата в условиях лаборатории убойного пункта скота.

2. Влияние гемопрепарата на количественный и видовой состав микроорганизмов в кишечнике телят под влиянием антгельминтного препарата аверсект-2, как фонового показателя до его применения.

3. Влияние гемопрепарата на состав и резистентность микрофлоры пищеварительного тракта кроликов и телят и биохимические показатели крови.

4. Характер изменчивости биологических свойств, представителей микробиоценоза (культуральные, морфологические, тинкториальные и биохимические показатели микроорганизмов) желудочно-кишечного тракта кроликов и телят до и после применения гемопрепарата.

5. Экономическая эффективность применения гемопрепарата при выращивании кроликов и телят.

Номер государственной регистрации темы: 0121156755 Мониторинг ветеринарного благополучия и получение животноводческой продукции высокого санитарного качества.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы исследования.аРабота выполненаана кафедре микробиологии, вирусологии и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГБОУ ВПО Бурятская государственная сельскохозяйственная академия имени В.Р. Филиппова, в течение с 2006 по 2011 гг.

При выполнении научных исследований использованы методы клинического, лабораторного, экономического и статистического направления.

Экспериментальный препарат, далее Гемопрепарат, разработан на кафедре Биотехнология ФГБОУ ВПО Восточно-Сибирский государственный технологический университет, Патент РФ №2265361 Способ предварительной обработки крови убойных животных опубликованный 10.12.2005, бюл. №34. Авторы Данилова Т. Е., Бубеев А.Т., Тарнуева Н.М., Цыренов В.Ж.

В настоящее время приготовление гемопрепарата с лечебной и профилактической целью осуществляется на убойных пунктах. В соответствии с п. 3.2.12.1 Санитарных правил 3.1.085-96 при наличии разрешения Управления ветеринарии и Управления Роспотребнадзора Республики Бурятия.

Материалом исследований в экспериментах служили пробы кала молодняка кроликов и крупного рогатого скота. Отбор и обработка исследуемых проб осуществлялась в соответствии с методами бактериологического анализа ГОСТ 21237 - 75, ГОСТ 10444, ГОСТ- Р 500474, ГОСТ - 7702.2.5.

На первом этапе проведены лабораторные исследования с использованием кроликов (n=36) породы Великан со средней живой массой тела 2,5 кг, возраст 6 месяцев. Для достоверности полученных результатов исследования проведены в трех сериях. В каждой серии опытов использовали по 12 животных (опыт n=6 и контроль n=6), подобранных по принципу аналогов. Кроликам опытной группы один раз в сутки выпаивали до кормления 20 мл гемопрепарата в течение 7 суток. Производственный эксперимент с гемопрепаратом проводили на телятах в возрасте 6 месяцев (n=12), симментальской породы учебного хозяйства Байкал. Животным по условиям эксперимента выпаивали по 150 мл гемопрепарата внутрь один раз в сутки в течение недели, средний вес телят составлял 130 кг, из допустимой нормы применения препаратов 1-2 мл на 1кг живой массы.

В экспериментальных целях в условиях учебного хозяйства Байкал, провели работу по определению количественного и видового состава микрофлоры кишечника телят до и после введения антгельминтика аверсект-2 2%-й в дозе 2 мл подкожно в среднюю треть шеи. Для эксперимента было отобрано 9 телят по принципу аналогов, в возрасте до одного года живой массой 130 кг. Содержание и кормление телят соответствовало зоотехническим нормам и правилам.аВапробах кала проводили качественный учет сальмонелл, энтеробактерий, стафилококков, дрожжеподобных грибов, бифидо-, и лактобактерий. Для дифференциации бактериальные посевы высевали на среды Гисса, Эндо, Левина, Плоскирева, мясопептонный, кровяной, висмут-сульфит, М497 агары, мясопептонный и печеночный бульоны. Для выявления дрожжеподобных грибов использовали среду Сабуро.аПосевы инкубировали при t 37С, 24-48 часов. Подсчет колоний каждого вида микроорганизмов выросших на плотных питательных средах проводили с учетом степени разведения проб и количества посевной дозы по методу Баймуратовой и др. (2004) по формуле:

Mа=аN10n+1,

где M - число микробов в одном грамме кала;

Nа- число выросших колоний на чашке;

nа - степень разведения исследуемого материала.

Микробиологическое исследование было направлено на выделение определенных видов микроорганизмов из смешанной естественной популяции, культивирование и поддержание чистой культуры на искусственных питательных средах, обеспечивающих сохранение основных биологических свойств микроба с целью определения видовой принадлежности.

Посевы культур осуществляли по общепринятой методике бактериологической петлей. Все среды инкубировали при 370С 24-48 часов, в термостате ТС-80М, При идентификации бактерий пользовались определителями микроорганизмов Берджи Д.(1969), Циона Р.А. (1948), Штибена В.Д.(1955).

Культурально-морфологические, тинкториальные, биохимические свойства выделенных микроорганизмов изучали, используя методы общей микробиологии Биргера М.О. и Герхарда Т.Ф.(1983).

Для световой микроскопии использовали биологические микроскопы с фотокамерой Миктрон 200М и Миктрон 400М. Культуральные свойства изучали при посеве на следующие питательные среды: МПА, МПБ, Эндо, Сабуро, висмут-сульфит агаре, стафилококкагаре, лактобакагаре, бифидумагаре.

С целью идентификации и дифференциации микробных культур изучали их биохимические свойства, используя набор для биохимической идентификации микроорганизмов: СИБ (Система индикаторных бумажек для идентификации микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae), который состоит из дисков или полосок хроматографической бумаги, содержащих определенное количество субстрата в сочетании с соответствующим индикатором. Результаты проведенных тестов обрабатывали с помощью компьютерной программы Биохимия микроорганизмов 2.0 ГНУ СибФТИ. Это экспертная система, предназначенная для оперативной идентификации возбудителей инфекционных болезней молодняка сельскохозяйственных животных.

Чувствительность микроорганизмов к различным антибиотикам определяли методом диффузии в агар с применением стандартных дисков, содержащих антибиотики.

Биохимические показатели крови лабораторных животных изучали с помощью аппарата Рефлотрон +2. Фотографирование проводили с помощью цифрового фотоаппарата марки Samsung. Статистическую обработку полученных экспериментальных данных проводили при помощи компьютерной программы Microsoft Office Exel 2007.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Технология приготовления гемопрепарата в лаборатории убойного пункта скота в поселке Селендума Селенгинского района Республики Бурятия

Исходное сырье для получения гемопрепарата: 1) кровь крупного рогатого скота; 2) обезжиренное молоко; 3) культура молочнокислых бактерий Lactobacillus acidophilus 200Т. Молочную сыворотку получали путем фракционирования, сквашенного при 370С чистыми культурами Lactobacillus acidophilus, обезжиренного молока до достижения титруемой кислотности 2600Т- 2700Т. Выход сыворотки составлял 70%. С сывороткой, полученной при фракционировании сквашенного Lactobacillus Acidophilus обезжиренного молока, в кровь вносится порядка 7 x 105а- 8 x 105кл/мл культуры пробиотика. В процессе хранения количество клеток Lactobacillus Acidophilus снижается до 2 x 105а- 3 x 105. Снижение количества клеток пробиотика в биоконсервированной крови, равно как и посторонней микрофлоры, связано с неблагоприятными условиями для их развития: рН среды, высокой каталазной активностью, образованием гема при разделении основного белка крови на гем и глобин.

С сывороткой, полученной при фракционировании сквашенного Lactobacillus acidophilus обезжиренного молока, в кровь вносится 7 x 105а- 8 x 105акл/мл культуры пробиотика. В процессе хранения в течение одного месяца количество клеток Lactobacillus Acidophilus снижается до 2 x 105а- 3 x 105а. Снижение количества клеток пробиотика в биоконсервированной крови, связано с рН среды, высокой каталазной активностью, образованием гема при разделении основного белка крови на гем и глобин.

По химическому составу (таблица 1) гемопрепарат до и после обработки ферментом желудочно-кишечного тракта пепсином для прогнозирования количества поступающих в кишечник дополнительных к рациону питательныхакомпонентов получили следующие результаты, отражающие состав гемопрепарата с точки зрения требований, предъявляемых к составу общеупотребительных питательных сред для микроорганизмов. Пепсиновый гидролиз осуществляли в течение 3 часов при физиологических значениях его протекания в желудке.

Таблица 1. Химические свойства гемопрепарата.

Из данных таблицы 1 видно, что по содержанию основного параметра питательных сред - аминному азоту, гемопрепарат уступает пепсину, однако уже после пепсинового гидролиза данный показатель увеличивался в 9 раз, а азот полипептидов в 6,6 раза. Содержание ядовитых веществ, например, хлорид-ионов, находились в пределах нормы. Гемопрепарат, как и кровь отличается высоким содержанием микроэлемента железа - 11,0+2,7 мг%.

Таким образом, приготовление гемопрепарата позволяет получать пробиотик высокой биологической ценности, одним из свойств которого является свойство оказывать влияние на микробиоценоз кишечника опытных животных, подавляющий рост условно-патогенной микрофлоры (сальмонелл).

3.2. Влияние гемопрепарата на формирование фекального микробиоценоза желудочно-кишечного тракта кроликов

Исследования по применению гемопрепарата на лабораторных животных (кроликах) проводили в трех сериях опытов.

В первой серии опытов, исследования проводили в условиях вивария клиники кроликах (n=12) породы Великан со средней живой массой тела 2,5 кг, в возрасте шести месяцев. Содержание и уход за ними осуществлялся с соблюдением зоотехнических норм и правил. Животные по условию эксперимента были разделены на опытную (n=6) и контрольную (n=6) группы. Кроликам опытной группы один раз в сутки применяли до кормления по 20 мл гемопрепарата. Материалом для микробиологических исследований служили пробы кала не более 3 часовой давности. Состав микроорганизмов фекалий определяли по стандартному методу.

Микробиологические исследования (таблица 2) фекальной микрофлоры кроликов, получавших гемопрепарат, позволили выявить, что до применения гемопрепарата количество Bifidobacterium spp. составляло (183,6+0,45)х106аКОЕ/г, а через 7 суток применения (192,6+0,44) х106аКОЕ/г. После выпаивания гемопрепарата в течение 14 суток количество Bifidobacterium spp. составило (196,0+0,36)х106КОЕ/г, количество Enterobacterium spp. (7,97+0,59)х106аКОЕ/г, через 7 суток (8,16+0,65)х106аКОЕ/г и через 14 суток увеличилось до (8,63+0,54)х106КОЕ/г. Количество Streptococcus spp. до применения гемопрепарата составляло (7,88+0,44)х106КОЕ/г, а через 14 суток применения возбудителя не регистрировали.

Таблица 2. - Влияние гемопрепарата на микробиоценоз желудочно-кишечного тракта кроликов.

К1 - сравнение с кроликами контрольной группы , *-p<0.05.

Обобщив все полученные данные, пришли к выводу, что удельное содержание Bifidobacterium spp. и Enterobacterium spp. в фекалиях животных возрастало, соответственно, на 15% (p<0.05) и 8% (p<0.01) после курса приема гемопрепарата в течение 7 суток, на 11% (p<0.001) и 2% (p<0.1) в течение 14 суток. Частота встречаемости индигенных микробов в фекалиях кроликов составляла 100% и сохранялась в течение эксперимента.

Транзиторные микроорганизмы, такие как Staphylococcus spp. и Candida spp. в фекалиях контрольных животных обнаруживались, в 59% и 100% случаев соответственно с удельным содержанием 7,7 и 5,2 КОЕ/г. У опытных животных после приема препарата количество дрожжеподобных микроорганизмов увеличивалось на 30% по сравнению с контрольной группой. В фекалиях как опытной, так и контрольной групп животных, культура Staphylococcus spp. обнаруживалась во всех с удельным содержанием 7,1-7,2 КОЕ/г.

Представители Salmonella spp. и культура Str. haemolitycus выявлены в фекалиях как опытных, так и контрольных животных, соответственно в 60 и 100% случаев. После курса приема гемопрепарата в течение семи суток у животных отмечается тенденция снижения количества на 33% (p<0.001) и полное исчезновение Str. Haemolitycus spp (p<0.001). Облигатные штаммы анаэробных микроорганизмов (Clostridium spp.) выделялись стабильно в течение всего курса приема гемопрепарата с удельным содержанием 7,71-7,52 КОЕ/г (p<0.01). Во второй и третьей сериях опытов получили аналогичные результаты с первой серией.

При анализе результатов исследований по влиянию гемопрепарата на формирование фекальной микрофлоры, констатировали, что наиболее устойчивыми к действию гемопрепарата оказались представители индигенных микроорганизмов Bifidobacterium spp., Enterobacterium spp. и транзиторные культуры Staphylococcus spp.: они регистрировались в течение всего курса приема препарата. Более того, количество клеток Bifidobacterium spp. достоверно увеличивалось. Наиболее чувствительными к действию препарата определялись представители рода Salmonella spp.. Их содержание достоверно снижалось. Представители рода Salmonella spp. выявлены в фекалиях как опытных, так и контрольных. После курса приема гемопрепарата у животных отмечается тенденция снижения количества данных микроорганизмов. Удельное содержание Bifidobacterium spp. и Enterobacterium spp. достоверно увеличивалось. Транзиторные микроорганизмы Staphylococcus spp. в фекалиях контрольных животных оставались на одном уровне, а опытных животных достоверно снижались.

3.3. Биологическая характеристика выделенных микробных изолятов из кала кроликов

3.3.1. Культурально-морфологическая характеристика выделенных микробных культур

При изучении морфологических свойств выделенных микроорганизмов из экскрементов кроликов обнаружили, что из 51 выделенной микробной культур 17(20%) микробных культур являются грамположительными кокковидной формы, 31 (37%) микробная культура грамположительная и 36 (43%) культур- грамотрицательные палочковидной формы. У выявленных и исследованных микробных культур спорообразования и капсулообразования не выявлено.

По культуральным свойствам выделенные микробные культуры от кроликов выглядели следующим образом. В S-форме выявлялись 84%, а в R-форме- 16%.

3.3.2. Влияние гемопрепарата на морфологические и биохимические показатели крови кроликов

Данный этап экспериментальных исследований характеризовал влияние гемопрепарата на морфологический и биохимический состав крови. Динамика морфологии и биохимии крови экспериментальных животных опытной группы (n=6) и контрольной (n=6) проводилась до применения препарата, гемоглобин (73,4+7,5)г/%-опыт; (90,5+10,39)г/%-контроль; эритроциты составили соответственно (2,4+0,25)млн/мл и (2,6+0,27)млн/мл; лейкоциты (3,8+0,63) тыс/мл и (3,7+0,45)тыс/мл; глюкоза (5,5+0,60)ммоль/л и (6,2+0,63)ммоль/л; мочевина (8,3+0,57)ммоль/л и (8,7+0,73)ммоль/л; общий белок (66,4+5,58)г/л и (74,1+6,67)г/л; общий билирубин составил (6,4+0,62)мкмоль/л и (6,7+0,57) мкмоль/л. Достоверных отличий между опытной и контрольной группами не регистрировали.

Через семь суток применения гемопрепарата регистрировали увеличение количества гемоглобина до (77,6+7,58)г/%, а в контрольной группе снижалось до (82,2+7,78)г/%. Отмечали незначительное снижение уровня лейкоцитов до (2,3+0,31)тыс/мл в опытной группе и до (2,0+0,37)тыс/мл в контрольной группе. Глюкоза составила (5,4+0,54) ммоль/л в опытной группе и (6,1+0,57) ммоль/л в контрольной группе. Мочевина в опытной группе увеличилась до (13,0+2,14 ммоль/л), а в контрольной группе осталась на прежнем уровне (8,8+0,88) ммоль/л. Общий белок незначительно вырос до (68,5+6,49) г/л в опытной группе и до (78,4+6,98) г/л в контрольной группе. А в опытной группе общий билирубин снизился до (6,1+0,53) мкмоль/л.

Проанализировав полученные данные через 14 суток, пришли к выводу, что даже незначительные изменения в функционировании органов и систем организма неизбежно приводят к тем или иным изменениям в составе периферической крови. Так уровень гемоглобина составил (98,6+15,70)г/% в опытной группе и (85,9+1,15)г/% в контрольной группе. Эритроциты составили (2,4+0,23) млн/мл и (2,5+0,26) млн/мл соответственно. Лейкоциты (6,2+0,4) тыс/мл и (3,4+0,54)тыс/мл. Глюкоза (5,1+0,45) ммоль/л и (6,42+0,53) ммоль/л. Мочевина (5,9+0,91) ммоль/л и (8,0+1,52) ммоль/л. Общий белок (88,3+12,13) г/л и (71,8+6,40) г/л. Общий билирубин (7,3+0,18) и (6,7+0,65) соответственно.

В ходе опыта сравнили полученные нами данные с аналогичными показателями в норме. Количество гемоглобина до применения гемопрепарата составляло (73,4+7,5) г/%, через семь суток применения наблюдали незначительное повышение (77,6+7,58) г/%, а через 14 суток достоверно увеличилось до (98,6+15,70)г/% по сравнению с полученным результатом до применения. Эритроциты до и после применения были на одном уровне (2,4+0,25)млн/мл, лейкоциты (3,8+0,63)тыс/мл, через семь суток применения наблюдали незначительное понижение до (2,3+0,31)тыс/мл и повышались до (6,2+0,40)тыс/мл через 14 суток. Глюкоза (5,5+0,60)ммоль/л,ачерез 7 суток применения наблюдали незначительное понижение до (5,4+0,54), ммоль/л и через 14 суток снизилось до (5,1+0,45)ммоль/л. Мочевина до применения (8,3+0,57)ммоль/л, через 7 суток применения наблюдали повышение до (13,0+2,14)ммоль/л,и через 14 суток снизилось доа(5,9+0,91)ммоль/л. Уровень общего белка до применения гемопрепарата был (66,4+5,58)г/л, через семь суток применения гемопрепарата достоверно возрастал до (68,5+6,49)г/л, через 14 суток увеличился до (88,25+12,13)г/л. Уровень общего белка в норме при этом составляет 78,6 г/л.

3.3.3. Биохимическая характеристика выделенных микробных культур

По результатам постановки биохимических тестов проведен анализ ферментативных свойств выделенных культур до применения гемопрепарата, отрицательные тесты давали: с оксидазой - 16,3%; с В-галактозидазой - 15,25; образование индола - 4,4%; сероводорода - 69,4%; определение уреазы - 59,7%; орнитина - 16,6%; лизина - 37,5%; фенилаланина - 100%; с глюкозой - 32%; в реакции Фогес-Проскауэра - 91,6%; взаимодействовали с малонатом натрия - 1,3% микробных культур.аВыделенные культуры положительно реагировали, вызывая ферментацию углеводов с образованием кислоты: с глюкозой - 67%; с оксидазой - 1,3%; с В- галактозидазой - 82%; образование индола - 1,3 %, сероводорода - 2,7%; определение уреазы - 40,2%, орнитина - 80,5%, лизина - 59,7%, взаимодействовали с малонатом натрия - 98,6% и цитратом натрия- 100% выделенных микробных культур.аСомнительные реакции дали расщепление оксидазы - 75%; с В - галактозидазой - 2,7; орнитином - 2,7 %; с глюкозой - 1,3%; образование индола - 4,1; сероводорода - 27,7%; на реакцию Фогес-Проскауэра - 8,35.Через семь суток применения гемопрепарата данные по изучению биохимических свойств выделенных культур. Из них видно, что отрицательные тесты дали: с В-галактозидазой - 19,4%, уреазой - 1,3%, орнитином - 30,5%, лизином - 86,1%; образование индола - 100%; на фенилаланин - 100%; взаимодействовали с цитратом натрия - 5,5%; в реакции Фогес-Проскауэра - 100%. Выделенные культуры положительно реагировали, вызывая ферментацию углеводов с образованием кислоты: с глюкозой - 100%; с В-галактозидазой - 80,5%; уреазой - 98,6, орнитином - 6,8%, лизином - 9,7%, образование сероводорода - 66,6%; взаимодействовали с цитратом натрия - 94,45 и малонатом натрия - 100%. Сомнительные реакции дали с оксидазой - 100%; орнитином - 5,5%; лизином - 4,1%; 4 образование сероводорода - 33,3%.Через 14 суток после применения гемопрепарата выделенные культуры дали отрицательные тесты: с В-галактозидазой - 61,1%, уреазой - 100%, орнитином - 61,1%, лизином - 90,2%; образование индола - 98,6%, сероводорода - 100%; на фенилаланин - 100%; взаимодействовали с цитратом натрия - 15,2%, с малонатом натрия - 1,3%; в реакции Фогес-Проскауэра - 100%. Положительные тесты дали с В-галактозидазой - 8,8%, орнитином - 34,7%, лизином - 9,7%, с глюкозой - 100%; образование индола - 1,3%; взаимодействовали с цитратом натрия - 84,7%, с малонатом натрия - 98,6%; Сомнительные реакции дали с оксидазой - 100%, с орнитином - 2,7%.

3.3.4. Чувствительность выделенных микробных культур к антибиотикам

Все исследованные культуры, выделенные из желудочно-кишечного тракта кроликов, проявляли различную степень чувствительности и устойчивости к антибиотикам. Чувствительность выделенных микробных культур была следующей: к тобрамицину, канамицину и стрептомицину были чувствительны 14% выделенных микробных изолятов; к левомицетину- 13%, к эритромицину и бензилпенициллину -по 12%, к ампицилину- 11%, к тетрациклину- 10%.

Чувствительность выделенных микробных изолятов к антибиотикам через семь суток применения гемопрепарата незначительно изменяется. При этом чувствительность к тобрамицину поднялась до 15%, канамицина уменьшилась до 11%; к стрептомицину также были чувствительны 14%, выделенных микробных изолятов; к левомицетину и эритромицину стали чувствительны 14%, к бензилпенициллину 9%, к ампицилину 11%, к тетрациклину- 12%.

Чувствительность выделенных микробных изолятов к антибиотикам через 14 суток применения гемопрепарата незначительно изменяется. При этом чувствительность разных антибиотиков была следующей: к тобрамицину осталась равной 15%, канамицину уменьшилась с 14% до 11%; к стрептомицину чувствительность поднялась с 13% до 14%, выделенных микробных изолятов; к левомицетину и эритромицину чувствительность снизилась с 14% до 12%, к бензилпенициллину поднялась с 9% до 12%, к ампицилину увеличилась с 11% до 15% , к тетрациклину снизилась чувствительность с 12% до 9%.

Таким образом, сравнив между собой полученные данные, можно констатировать, что устойчивость к антибиотикам полезных микробных культур, выделенных из организма кроликов, постепенно повышается при применении гемопрепарата, а уровень резистентности условно-патогенной микрофлоры заметно снижается. Гемопрепарат оказывал благоприятное воздействие на микрофлору кишечника и на биохимию крови организма кроликов. Полученные результаты позволяют контролировать состояние микрофлоры у сельскохозяйственных животных, что даст возможность своевременно корректировать нежелательные изменения микрофлоры желудочно-кишечного тракта и дисбиотические нарушения за счет искусственного введения полезных бактериальных представителей и не допустить развития дисбактериоза в тяжелой форме.

3.4.аФоновые показатели количественного и видового состава микроорганизмов в кишечнике телят под влиянием препарата аверсект-2 в условиях учебного хозяйства Байкал перед применением гемопрепарата

Прежде чем приступить к изучению влияния гемопрепарата на видовой и количественный состав микроорганизмов в кишечнике телят, изучили влияние на микрофлору препарата аверсект-2, который по данным нескольких авторов вызывает дисбиотическое состояние, которое затем следует скорректировать. Для этого в экспериментальных целях в условиях учебного хозяйства Бурятской ГСХА Байкал провели работу по определению количественного и видового состава микрофлоры кишечника телят до и после введения антгельминтика аверсект-2 2%-й в дозе 2 мл подкожно в среднюю треть шеи. Для эксперимента было отобрано 9 телят по принципу аналогов, в возрасте шести месяцев живой массой 130 кг. Содержание и кормление телят соответствовало зоотехническим нормам и правилам.

До введения антгельминтного препарата аверсект-2 количество полезной микрофлоры составляло: Bifidobacterium spp.-(0,9+0,09)х106КОЕ/г, Lactobacterium spp.-(0,51+0,102) х106КОЕ/г. Общее микробное число составило (1,22+0,125) х106аКОЕ/г. Условно-патогенная микрофлора была представлена: Salmonella spp.Ц(0,34+0,131)х106КОЕ/г; Staphylococcus spp. (2,93+0,151)х106КОЕ/г; Enterobacterium spp. (1,35+0,255)х106. Количество дрожжеподобных грибов Candida spp. составляло (1,75+0,279)х106КОЕ/г. После применения антгельминтного препарата через семь суток количество полезной микрофлоры снижалось. Так количество Bifidobacterium spp. составило (0,34+0,136)х106КОЕ/г, Lactobacterium spp. (0,36+0,137)х106КОЕ/г. Общее микробное число снизилось до (0,6+0,37)х106КОЕ/г. Количество условно-патогенной микрофлоры в среднем составило: Salmonella spp. (1,27+0,132)х106КОЕ/г, Staphylococcus spp.- (0,72+0,126)х106аКОЕ/г, Enterobacterium spp. (1,0+0,32)х106КОЕ/г, дрожжеподобных грибов Candida spp. (1,01+0,146)х106КОЕ/г. Через 14 суток после введения препарата полезная микрофлора была представлена: Bifidobacterium spp. (0,25+0,067)х106КОЕ/г, Lactobacterium spp. - (0,47+0,291)х106аКОЕ/г. Общее микробное число составило- (0,45+0,1280)х106КОЕ/г. Условно-патогенную микрофлору формировали: Salmonella spp.- (1,78+0,407)х106КОЕ/г; Staphylococcus spp.- (1,44+0,199)х106КОЕ/г; Enterobacterium spp. (0,98+0,362)х106КОЕ/г и дрожжеподобные грибы Candida spp.- (0,38+0,206)х106КОЕ/г.

Установлено, что антгельминтный препарат, подавляет нормальную микрофлору. Так негативное влияние антгельминтика аверсект-2 на микробиоценоз кишечника телят проявлялось в подавлении роста полезных микроорганизмов (бифидумбактерии, лактобактерии и др.) на фоне усиления роста и размножения условно-патогенных микроорганизмов.

3.5.аКоличественный и видовой состав микрофлоры выделенной из проб кала телят под влиянием гемопрепарата, после применения аверсекта-2

Исследования по влиянию гемопрепарата на количественный и видовой состав микрофлоры выделенной из проб кала телят обработанных аверсектом-2 исследовали до применения гемопрепарата, через 7 суток и через 10 суток применения гемопрепарата.

Установлено, что до применения гемопрепарата у телят опытной группы до применения гемопрепарата общее микробное число составляет (1,22+0,12) х106аКОЕ/г микробных клеток в 1 грамме кала. При этом количество полезной микрофлоры желудочно-кишечного тракта телят составляло: Lactobacterium spp. (0,5+0,29)х106КОЕ/г; Bifidobacterium spp. (1,2+0,40)х106КОЕ/г; Условно-патогенная микрофлора представлена Salmonella spp.- (0,7+0,12)х106КОЕ/г; Staphylococcus spp.- (0,3+0,19)х106аКОЕ/г и Enterobacterium spp. (0,2+0,36)х106аКОЕ/г. через 7 суток применения гемопрепарата представлены общим микробным числом- (1,66+0,13) х106амикробных клеток в 1 грамме фекалий. Отмечено увеличение количества полезной микрофлоры: Lactobacterium spp. до (0,6+0,14)х106КОЕ/г и Bifidobacterium spp. до (2,9+0,15)х106КОЕ/г. Количество условно-патогенной микрофлоры значительно снизилось: Salmonella spp.- до (0,7+0,09)х106КОЕ/г, количество Staphylococcus spp.- снизилось до (0,2+0,13)х106КОЕ/г, количество Enterobacterium spp. снизилось до (0,1+0,25)х106КОЕ/г.

Для установления изменений в составе микрофлоры телят после применения гемопрепарата были проведены бактериологические исследования через 10 суток применения препарата.

Полученные данные свидетельствуют о том, что через 14 суток применения гемопрепарата, общее микробное число составляет (0,25+0,067)x 106аКОЕ/г, при этом количество Lactobacterium spp. равнялось (0,5+0,10)x106аКОЕ/г, Bifidobacterium spp.-(2,9+0,16)x106КОЕ/г, Salmonella spp.-(0,2+0,01)x106аКОЕ/г, Staphylococcus spp.-(0,9+0,09)x106КОЕ/г, Enterobacterium spp.-(0,3+0,05)x106КОЕ/г.

Наблюдается увеличение количества полезной микрофлоры Bifidobacterium spp. и Lactobacterium spp. А также восстановление количественного показателя условно-патогенной микрофлоры Salmonella spp. Staphylococcus spp. и Enterobacterium spp. до исходной.

В представленных сводных данных по влиянию гемопрепарата на количественный и видовой состав микроорганизмов желудочно-кишечного тракта телят до применения, через 7 суток и через 14 суток применения.

Обобщая результаты исследований по влиянию гемопрепарата на формирование фекальной микрофлоры телят, можно констатировать, что гемопрепарат оказал влияние на представителей индигенных микроорганизмов Bifidobacterium spp., Enterobacterium spp. и транзиторные культуры Staphylococcus spp.: частота их регистрации практически не менялась в течение эксперимента связанного с применением гемопрепарата. Более того, количество клеток Bifidobacterium spp. достоверно увеличилось, отмечалось повышение чувствительности к действию препарата культур рода Salmonella spp. Их содержание достоверно снижалось. После курса приема гемопрепарата у животных отмечается тенденция снижения количества данных микроорганизмов. Удельное содержание Bifidobacterium spp. и Enterobacterium spp. в фекалиях телят достоверно возрастало. Данные индигенные микробы в фекалиях экспериментальных телят регистрировали у всех опытных животных и сохранялась в течение эксперимента. Установлено, что гемопрепарат усиливает рост численности полезных с одновременным угнетением роста условно-патогенных микроорганизмов. Таким образом, данный препарат может быть использован в качестве корригирующего средства при дисбактериозах.

3.5.1. Биохимическая характеристика выделенных микробных культур

По результатам постановки биохимических тестов проведен анализ ферментативных свойств выделенных культур до применения гемопрепарата, отрицательные тесты давали: с оксидазой - 26,3% (17 культур); с В-галактозидазой - 15,25 (11культур); образование индола - 94,4 % (68 культур), сероводорода - 69,4% (50 культур); определение уреазы - 59,7% (43 культуры), орнитина - 16,6% (12 культур), лизина - 37,5% (27 культур), фенилаланина- 100% (72 культуры); с глюкозой - 32% (23 культуры); в реакции Фогес-Проскауэра - 91,6% (66 культур); взаимодействовали с малонатом натрия - 1,2% (1 культура). Выделенные культуры положительно реагировали, вызывая ферментацию углеводов с образованием кислоты: с глюкозой - 66,6% (48 культур); с оксидазой - 1,2% ( 1 культур); с В-галактозидазой - 82% (59 культур); образование индола - 1,2 % (1 культура), сероводорода - 2,7% (2 культуры); определение уреазы - 40,2% (29 культуры), орнитина - 80,5% (58 культур), лизина - 59,7% (43 культуры), взаимодействовали с малонатом натрия - 98,6% (71 культура) и цитратом натрия 100% (72 культуры). Сомнительные реакции дали расщепление оксидазы - 75% (54 культуры); с В - галактозидазой - 2,7 (2 культуры), орнитином - 2,7 % (2 культуры), с глюкозой - 1,2% (1 культура); образование индола - 4,1 (3 культуры), сероводорода - 27,7% (20 культур); на реакцию Фогес-Проскауэра - 8,35 (6 культур).

Через семь суток применения гемопрепарата данные по изучению биохимических свойств выделенных культур отрицательные тесты дали: с В-галактозидазой - 19,4% (14 культур), уреазой - 1,2% (1культура), орнитином - 30,5% (22 культуры), лизином - 86,1 (62 культуры); образование индола - 100% (72 культуры); на фенилаланин - 100% (72 культуры); взаимодействовали с цитратом натрия - 5,5% (4 культуры); в реакции Фогес-Проскауэра - 100% (72 культуры).

Выделенные культуры положительно реагировали, вызывая ферментацию углеводов с образованием кислоты: с глюкозой - 100% (72 культуры); с В- галактозидазой - 80,5% (58 культур), уреазой - 98,6 (71 культура), орнитином - 6,8% (46 культур), лизином - 9,7% (7 культур), с образованием сероводорода - 66,6% (48 культур); взаимодействовали с цитратом натрия - 94,45 (68 культур) и малонатом натрия - 100% (72 культуры). Сомнительные реакции дали с оксидазой - 100% (72 культуры), орнитином - 5,5% (4культуры), лизином - 4,1% ( 3 культуры), с образованием сероводорода - 33,3% ( 24 культуры). Через 10 суток применения гемопрепарата отрицательные тесты: с В-галактозидазой - 61,1% (44 культуры), уреазой - 100% (72 культуры), орнитином - 61,1% (44 культуры), лизином - 90,2% (65 культур); с образованием индола - 98,6% (71 культура), сероводорода - 100% (72 культуры); на фенилаланин - 100% (72культуры); взаимодействовали с цитратом натрия - 15,2% (11культур), с малонатом натрия - 1,3% (1 культура); в реакции Фогес - Проскауэра - 100% (72 культуры).

Положительные тесты дали с В-галактозидазой - 8,8% (28 культур), орнитином - 34,7% (25 культур), лизином - 9,7% (7 культур), с глюкозой - 100% (72 культуры); образование индола - 1,2% (1 культура); взаимодействовали с цитратом натрия - 84,7% (6 культур), с малонатом натрия - 98,6% (71 культура); Сомнительные реакции дали с оксидазой - 100% (72 культуры), с орнитином - 2,7% (2 культуры).

3.5.2. Видовая принадлежность выделенных условно-патогенных микроорганизмов

Все выделенные культуры микроорганизмов были идентифицированы на основании изученных свойств и представленые к рассмотрению колонии выделенных микроорганизмов состояли из: Staphylococcus aureus - 14 культур; Staphylococcus epidermidis - 8; Staph. saprophyticus - 6; по 5 культур - Enterobacter agglomerans, Staphylococcus hominis, Streptococcus faecalis; по 4 культуры ЦBacillus lentimorbus, Proteus vulgaris, Escherichia coli, Citrobacter freundii и по 3 культуры - Bacillus larve, Staphylococcus simulans; по 2 культуры - Bacillus alcalophilus, Enterobacter aerogenes, Bacillus popilliae, Citrobacter amalonaticus, Salmonella gallinarum; и по одной культуре Ц, Enterobacter sakazakii и cloacae, Bacillus lentus, Bac. polymyxa, Bacillus megaterium, Bac. alvei, Bac. subtilis. По две культуры - Bacillus subtilis, Enterobacter aerogenes, Streptococcus faecalis, Staphylococcus aureus; и по одной культуре - Bacillus cereus, Bacillus megaterium, Enterobacter agglomerans, Escherichia coli, Citrobacter freundii, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus.

3.5.3. Чувствительность выделенных микробных культур из кала

телят к антибиотикам

Все исследованные культуры, выделенные из кала телят, проявляли различную степень чувствительности и устойчивости к антибиотикам

Чувствительность выделенных микробных культур была следующей: к тобрамицину, канамицину и стрептомицину были чувствительны 14% выделенных микробных изолятов; к левомицетину- 13%, к эритромицину и бензилпенициллину- по 12%, к ампицилину- 11%, к тетрациклину- 10%.

Чувствительность выделенных микробных изолятов к антибиотикам через 7 суток применения гемопрепарата незначительно изменяется. При этом чувствительность к тобрамицину поднялась до 15%, канамицину уменьшилась до 11%; к стрептомицину были чувствительны 14% выделенных микробных изолятов; к левомицетину и эритромицину стали чувствительны 14% бензилпенициллину - 9%, ампицилину- 11%, тетрациклину- 12%.

Чувствительность выделенных микробных изолятов к антибиотикам, через 14 суток применения гемопрепарата незначительно изменяется. При этом чувствительность разных антибиотиков была следующей: к тобрамицину осталась равной 15%, канамицину уменьшилась с 11% до 8%; к стрептомицину чувствительность снизилась с 14% до 12% выделенных микробных изолятов; к левомицетину и эритромицину чувствительность снизилась с 14% до 12%, к бензилпенициллину поднялась с 9% до 12%, к ампицилину увеличилась с 11% до 15% , к тетрациклину поднялась чувствительность с 12% до 14%.

Таким образом, сравнив между собой полученные данные, видно, что устойчивость микробных культур, выделенных из организма телят, постепенно повышается при применении гемопрепарата, а уровень резистентности условно-патогенной заметно снижается. Значит, гемопрепарат может повышать эффективность антибиотикотерапии.

3.6. Экономическое обоснование применения гемопрепарата

В данном эксперименте была применена биологически активная добавка Гемопрепарат, разработанный на кафедре Биотехнология Восточно-Сибирского государственного университета сотрудниками Патент РФ №2265361 Способ предварительной обработки крови убойных животных опубликованный 10.12.2005. Бюл. №34. Авторы Данилова Т.Е., Бубеев А.Т., Тарнуева Н.М., Цыренов В.Ж.

Исходным сырьем для получения препарата служили:

Вторичное сырье мясоперерабатывающих предприятий - кровь крупного рогатого скота стоимостью 5 рублей за литр.

Вторичное сырье молокоперерабатывающих предприятий - обезжиренное молоко (обрат) стоимостью 12,5 рублей за литр.

Культура молочнокислых бактерий Lactobacillus acidophilus - препарат Лактобактерин стоимостью 75 рублей за упаковку.

Себестоимость препарата на 1 животное составила 9,8 рублей на одно животное.

Из расчета: на одно животное применено по 350 мл. Для изготовления 1 литра препарата необходимо 4% молочной сыворотки, 60% крови и одна доза Лактобактерина.

Кровь: 1 л- 5 руб.

0,6 л - х

х=(5 х 0,6) / 1=3 руб.

Обрат: 1 л- 12,5 руб.

0,4 Цх

х=(12,5х 0,4)/1 =5 руб.

Обрат + кровь =8 руб. за литр

На одно животное применено 350 мл гемопрепарата

8 руб. - 1000 мл

х - 350мл

х= (350 х 8)/ 1000= 2,8 руб./350 мл.

актобактерин:

75 руб.- 75 доз

х - 7 доз

х= (75 х 7)/ 75= 7 рублей

2,8 руб. (кровь + обрат) + 7 руб. (лактобактерин) =9,8 руб. /350 мл. гемопрепарата.

Таким образом, вычислили, что себестоимость гемопрепарата на одного теленка составляет 9,8 рублей.

ВЫВОДЫ

1. Гемопрепарат, созданный в Восточно-Сибирском государственном университете кафедрой Биотехнология Патент РФ №2265361 Способ предварительной обработки крови убойных животных может быть использован в ветеринарии при лечении и профилактике дисбиозов молодняка сельскохозяйственных животных, а также как биологически активный препарат.

2. Показатели биологической ценности гемопрепарата, изученные in vivo, имеют значения, позволяющие рассматривать его в качестве эффективного белкового компонента и источника азотного питания. При выпаивании в течение семи суток кроликам гемопрепарата в дозе 1-2 мл на кг живой массы, при трехкратном повторении опытов выявили увеличение количества полезной микрофлоры.

3. На фоне приема гемопрепарата наблюдаются положительные изменения микробиоценоза кишечника экспериментальных животных.

4. Гемопрепарат может быть использован в качестве компонента функционального питания при профилактике дисбактериоза. Данное утверждение основывается на наличие бифидогенного эффекта - стимулятора роста и развития бифидобактерий.

5. При применении гемопрепарата повышалась эффективность воздействия антибиотиков на условно-патогенную микрофлору (тобрамицин, канамицин, стрептомицин, левомицетин, эритромицин.

6. Полученные данные указывают на возможность элиминации условно-патогенных штаммов микроорганизмов из желудочно-кишечного тракта при условии подбора доз и продолжительности применения гемопрепарата. Данный препарат может быть приготовлен в условиях лицензированных убойных пунктов скота, для широкого производственного применения.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. На основе полученных результатов составлены методические рекомендации "ВЛИЯНИЕ ГЕМОПРЕПАРАТА НА МИКРОБИОЦЕНОЗ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ И ЕГО ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ В КОРРЕКЦИИ ДИСБИОЗОВ".

2. Материалы могут служить источником информации при проведении республиканских совещаний ветеринарных работников Республики Бурятия, касающихся вопросов разработки мер профилактики по предупреждению возникновения заболеваний животных и использоваться в учебном процессе при подготовке специалистов ветеринарного профиля.

3. Результаты исследований используются в учебном процессе при подготовке специалистов ветеринарного профиля.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Микробиологические и биохимические показатели организма кроликов после применения гемопрепарата / Н.А. Цыремпилова, Т.Е. Данилова, В.Ц. Цыдыпов // Актуальные вопросы экологической, сравнительной, возрастной и экспериментальной морфологии: материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию профессора Ивана Андреевича Спирюхова. - Улан-Удэ, 2007. - С.126-129.

2. Количественный и видовой состав микроорганизмов в кишечнике телят под влиянием препарата Аверсект-2 / Н.А. Цыремпилова, В.Ц. Цыдыпова//аВестник Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Р. Филиппова. Ц Улан-Удэ, 2009. Ц С.105-110.

3. Оценка биологической эффективности гемопрепарата / Н.А. Цыремпилова, Т.Е. Данилова, В.Ц. Цыдыпов // Сборник научных трудов Восточно-Сибирского государственного технологического университета: изд-во Восточно-Сибирского технологического университета. - Улан-Удэ, 2009. - С.86-97.

4. Влияние гемпрепарата на микробиоценоз кишечника телят. / Н.А Цыремпилова, О.С. Дансарунова, Е.А. Дансарунов // Эколого-географические аспекты инфектологии: материалы Всероссийской научной конференции, посвященной 350-летию добровольного вхождения Бурятии в состав Российской империи, 80-летию ФГОУ ВПО Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р. Филиппова и 75-летию Новосибирского государственного аграрного университета. - Улан-Удэ, 2011. - С. 60-67.

5.аЭпизоотическая характеристика инфекционных болезней животных в Иркутской области /аН.А. Цыремпилова,аН.И. Дзюбин, В.Ц.аЦыдыпов // Эколого-географические аспекты инфектологии: материалы Всероссийской научной конференции, посвященной 350-летию добровольного вхождения Бурятии в состав Российской империи, 80-летию ФГБОУ ВПО Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р. Филиппова и 75-летию Новосибирского государственного аграрного университета. - Улан-Удэ, 2011. - С. 67-72.

6. Влияние гемопрепарата на микробиоценоз желудочно-кишечного тракта сельскохозяйственных животных и его практическая значимость в коррекции дисбиозов / Н.А. Цыремпилова, А.Д. Цыбикжапов // Вестник Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Р. Филиппова. Ц Улан-Удэ, 2011 Ц №4(18). Ц С. 12-25.

________________________________________________________________

Подписано в печать 00.00.2012 г. Формат 60х90 1/16

Ризография. Усл.п.л. 1,0. Тираж 100 экз.

Издательство ФГБОУ ВПО Бурятская государственная

сельскохозяйственная академия им. В.Р. Филиппова

670034, г. Улан Удэ, ул.Пушкина ,8

e-mail:аrio-bgsha@mail.ru