Geum.ru
Авторефераты по всем темам  >>  Авторефераты по биологии  

На правах рукописи

Ефремова Аграфена Владимировна

СОСТОЯНИЕ Редокс-баланса и гуморального иммунитета У коренных жителей Якутии С хроническим гастритом

03.01.04 - биохимия

14.03.03 - патологическая физиология

А в т о р е ф е р а т

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Новосибирск Ц 2012

Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении Якутский научный центр комплексных медицинских проблем Сибирского отделения Российской академии медицинских наук

Научный руководитель:

доктор биологических наук        Миронова Галина Егоровна

Официальные оппоненты:

Меньщикова Елена Брониславовна доктор медицинских наук,

ФГБУ "НЦКЭМ" СО РАМН, руководитель группы

Сафронов Игорь Дмитриевич доктор медицинских наук,

ГБОУ ВПО "НГМУ" Минздравсоцразвития России, профессор

Ведущая организация: Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт терапии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук

Защита состоится "___" декабря 2012 г. в _____ часов на заседании диссертационного совета Д 001.034.01 при Федеральном государственном бюджетном учреждении "Научно-исследовательский институт биохимии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук по адресу: 630117, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБУ "НИИ биохимии" СО РАМН

Автореферат разослан "___" ноября  2012 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета        Русских Галина Сергеевна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Хронические гастриты (ХГ) занимают значительное место в структуре гастроэнтерологической заболеваемости среди коренного населения Якутии (Кривошапкин В.Г., 1974; Андросов В.Т.,а1984; Сосина С.С., 1992, Тихонов Д.Г.,1993; Жирков А.П., 2000; Лоскутова К.С., Аргунов В.А., 2007). По данным Госкомстата за 2010 год, из 998,0 тыс. населения Якутии почти каждый десятый имеет те или иные заболевания пищеварительной системы. При этом распространенность хронического гастрита среди представителей коренного населения составила 126 больных на 1000, а среди некоренного населения лишь 78,5 случаев на 1000. Частота атрофических антральных форм гастрита среди коренного населения Якутии (у 38,5Ц57,1% лиц), характеризующегося латентным течением и протекающего в виде постоянного рецидивирования без выраженных симптомов манифестации, намного выше, чем у некоренного населения (28,5%) (Емельянова Э.А., Сафонова С.Л., 2000).

Долгое время основными причинами развития хронического гастрита в условиях Севера считались факторы питания (Кривошапкин В.Г., 1974, 1978; Сафонова С.Л., 1983, 1989; Tichonov D.G., 1990). Открытие H. pylori совершило переворот в понимании патогенеза хронического гастрита.  Важную роль в повреждении слизистой оболочки желудка больных хроническим гастритом, ассоциированных с H. pylori, в свете современных представлений, играет гиперпродукция активных форм кислорода (АФК) (Davies G.R. et al., 1994; Suzuki H. et al., 1996; Zhang Q. et al., 1997; Suzuki H. et al., 2010; Handa O. et al., 2012). В единичных работах, проведенных якутскими исследователями, имеются данные о высокой частоте инфицированности H. pylori среди коренного населения Якутии, которая коррелирует с высокой частотой заболеваемости раком желудка (20,7 на 100а000 населения) (Сосина С.С., Иванов П.М., 2005; Александрова С.Л., 2007; Лоскутова К.С., 2007; Леханова С.Н., 2008, 2009). Избыточное образование АФК в эпителиальных клетках может быть причиной повреждения ДНК, способствующего развитию гастроканцерогенеза (Obst B., et al., 2000).

Существование организма в условиях холодного климата связано с повышением основного обмена, что требует дополнительных энергетических затрат. Вследствие этого повышается роль жиров и формируется так называемый полярный метаболический тип, в основе которого лежит активация процессов свободнорадикального окисления. В немногочисленных исследованиях показано достоверное повышение уровня продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в организме практически здоровых жителей Крайнего Севера (Миронова Г.Е., 2003; Николаев В.М., 2007; Олесова Л.Д., 2011). Климато-географические условия Крайнего Севера, не будучи этиологическими факторами заболевания, тем не менее могут играть определенную роль в патогенезе хронического гастрита.

Цель исследования - характеристика редокс-баланса и состояния гуморального иммунитета с учетом фактического питания у коренных жителей Якутии, страдающих ассоциированным и не ассоциированным с H.аpylori хроническим гастритом.

Задачи исследования:

  1. Оценить состояние редокс-баланса по показателям, характеризующим перекисное окисление липидов и антиоксидантную защиту у больных хроническим гастритом в зависимости от степени обсемененности Helicobacter pylori.
  2. Определить содержание про- и противовоспалительных цитокинов и иммуноглобулинов у больных хроническим гастритом в зависимости от степени обсемененности Helicobacter pylori.
  3. Оценить фактическое питание у больных хроническим гастритом, ассоциированным и неассоциированным с Helicobacter pylori.

Научная новизна исследования

Получены результаты, свидетельствующие о роли про- и антиоксидантного равновесия в патогенезе H.аpylori-ассоциированного гастрита у коренных жителей Якутии. Впервые показано, что интенсивность перекисного окисления у больных с хроническим гастритом зависит от степени обсемененности H.аpylori. Выявлена информативная ценность, показателя состояния редокс-баланса (КАОЗ/ПОЛ), который зависит от степени обсемененности H.аpylori у больных с хроническим гастритом, ассоциированным с H.аpylori. Установлено, что при выраженной степени обсемененности H.аpylori в слизистой оболочке желудка у коренных жителей Якутии, больных хроническим гастритом, снижается обеспеченность витаминами-антиоксидантами. Выявлено, что концентрация провоспалительных цитокинов и иммуноглобулинов в сыворотке крови больных хроническим гастритом возрастает прямо пропорционально степени обсемененности H.аpylori. Показана взаимосвязь между показателями редокс-баланса (КАОЗ/ПОЛ) и содержанием про- и противовоспалительных цитокинов, характеризующих воспалительный процесс.

Теоретическая и практическая значимость исследования

Теоретическая значимость работы заключается в углублении представлений о молекулярных механизмах развития хронического гастрита в экстремальных климатогеографических условиях Якутии. Полученные в ходе исследования данные помогут понять роль про- и антиоксидантных процессов в патогенезе хронического гастрита, ассоциированного с H.аpylori у коренных жителей Якутии. Установлена возможность использования показателей, отражающих интенсивность свободнорадикальных процессов, в определении дифференцированного подхода к проведению рациональной этиопатогенетической терапии, прогнозировании течения и оценке эффективности лечения хронического гастрита.

Внедрение результатов

Материалы диссертации используются в учебном процессе кафедры биохимии и биотехнологий биолого-географического факультета и в курсе дисциплины Пропедевтика внутренних заболеваний Медицинского института ФГАОУ ВПО Северо-восточный федеральный университет имени М.К. Аммосова. Методы оценки редокс-баланса внедрены в гастроэнтерологическом отделении Республиканской больницы № 1 Национального центра медицины (РБа№а1аНЦМ) г. Якутска при диагностике и лечении хронических гастритов.

Апробация работы

Результаты проведенных исследований доложены и обсуждены на 14 интернациональном конгрессе Циркумполярного здоровья (Канада, 2009); Аспирантских чтениях ЯГУ (Якутск, 2009, 2010), XIII Лаврентьевских чтениях молодых ученых и специалистов (Якутск, 2009, 2010), Республиканской научно-практической конференции Медицина в современном мире: взгляд научной молодежи (Якутск, 2010), Научно-практической конференции молодых ученых Актуальные вопросы охраны здоровья населения регионов Сибири (Красноярск, 2010), Всероссийской научно-практической конференции "Живые системы и конструкционные материалы в условиях криолитозоны" (Якутск, 2011).

Исследования выполнены в рамках проекта ФЦП Научные и научно-педагогические кадры инновационной России на 2009-2013 гг. по теме: Изучение состояния прооксидантного и антиоксидантного равновесия при НР-ассоциированных гастритах у коренного населения Якутии с учетом особенностей питания (государственный контракт №а2085П от 03.11.2009), а также поддержаны грантом Академии наук Республики Саха (Якутия) (2010).

Публикации

По теме диссертационной работы опубликовано 13 работ, в том числе 4 статьи в журналах, рекомендованных ВАК для публикации материалов диссертаций на соискание ученой степени кандидата наук.

Положения, выносимые на защиту:

  1. Выраженность изменений редокс-баланса коренных жителей Якутии, страдающих хроническими гастритами, зависит от степени обсемененности H.аpylori.
  2. Характер изменения содержания про- и противовоспалительных цитокинов и иммуноглобулинов при хроническом гастрите у коренных жителей Якутии зависит от степени обсемененности H.аpylori.

Структура и объём диссертации

Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов исследования, обсуждения результатов, выводов и списка цитированной литературы, включающего 160 отечественных и 145 зарубежных источников. Диссертация изложена на 149 страницах машинописного текста, иллюстрирована 12 таблицами и 11 рисунками.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Обследовано 161 лиц коренной национальности обоего пола в возрасте от 30 до 50 лет. Клинико-инструментальное обследование проводилось на базе РБа№а1аНЦМ. Пациенты отбирались для исследования при подтверждении диагноза хронический гастрит морфологическим методом. Морфологическое исследование проводилось в патологоанатомическом отделе Республиканской больницы № 1 Национального центра медицины под руководством д.м.н. Аргунова В.А. Исследование одобрено решением локального Этического комитета при Учреждении РАМН ЯН - КМП СО РАМН и выполнено с информированного согласия включенных в него пациентов (Приказа№а01-08/190 от 7 июня 2010аг.)

Материалом для исследований служили гепаринизированная кровь и сыворотка. Забор крови производился утром натощак из локтевой вены.

На основании морфологического и иммуноферментного анализа больные были разделены на две группы. Первую составили 115 больных ХГ, ассоциированным с H.аpylori, вторую - 46 больных ХГ, неассоциированным с H.аpylori. 87 больных с ХГ, ассоциированным с H.аpylori, были разделены на три группы. Первую группу составили 26 человек, в морфологических биоптатах которых было обнаружено до 20 микробных тел H.аpylori в поле зрения (Аруин Л.И., 1995), вторую - 18 больных с умеренной степенью выраженности инфицированности H.аpylori (от 20 до 50 микробных тел в поле зрения), третью - 43 больных с выраженной степенью инфицированности H.аpylori (более 50 микробных тел в поле зрения). Контрольную группу составили лица без патологии желудочно-кишечного тракта, неинфицированные H.аpylori (71 человек). Критерием отсутствия H.аpylori явилось совпадение отрицательных результатов серологического и морфологического методов исследования.

Интенсивность свободнорадикального окисления липидов оценивали спектрофотометрическим методом по накоплению в сыворотке крови продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБК-РП) (Павлихина Л. В., 1977). Показатели антиоксидантной защиты (АОЗ) организма определяли по суммарному содержанию низкомолекулярных антиоксидантов (НМАО) в сыворотке крови (Рогожин В.В., 1999) и активности супероксиддисмутазы (СОД) в эритроцитах (Constantine N.G., Stanley K.R., 1977).

Для характеристики редокс-баланса вычисляли коэффициент КАОЗ/ПОЛ, рассчитанный по формуле: КАОЗ/ПОЛа=а(СОДа+аНМАО)/ТБК-РП, где "СОД", "НМАО" и "ТБК-РП" - соответственно активность СОД, концентрация НМАО и концентрация ТБК-РП. Вклад ферментативного и неферментативного звеньев АОЗ характеризовали с помощью коэффициентов СОД/ТБК-РП и НМАО/ТБК-РП соответственно.

Обеспеченность витаминами-антиокcидантами -токоферолом (витамин Е) и ретинолом (витамин А) проводилось флуориметрическим методом на анализаторе биожидкостей Флюорат-02-АБЛФ (Люмекс, Санкт-Петербург), аскорбиновой кислотой (витамин С) - титрометрическим методом (Ларина Т.И., 1987).

Содержание интерлейкина-4 (IL-4), интерлейкина-6 (IL-6), фактора некроза опухоли α (-ФНО), IgA, IgG, секреторного IgA, С-реактивного белка в сыворотке крови определяли иммуноферментным методом (ЗАО Вектор-Бест), также определяли титр антител к антигену CagA H.аpylori тест-системой ХеликоБест-антитела.

Определение активности аспартат- (АсАТ) и аланинаминотрансферазы (ААТ), щелочной фосфатазы, гамма-глутамилтрансферазы, содержания общего белка, глюкозы, мочевины, альбумина, креатинина, мочевой кислоты, лактатдегидрогеназы, общего холестерина, холестерина липопротеидов низкой и высокой плотности (ХС ЛПВП), триглицеридов проводили энзиматическим методом на автоматическом биохимическом анализаторе Cobas Mira Plus (лLa Roche, Швейцария), с использованием реактивов Biocon (Германия).

Было проведено исследование фактического питания 320 больных ХГ, проживающих в сельской местности Республики Саха (Якутия) с помощью метода суточного воспроизведения питания (Методические рекомендацииЕ, 1996). На основании полученных данных с использованием таблиц Химический состав российских пищевых продуктов определяли химический состав суточного рациона (Скурихин И.М., 2002). Сбалансированность рациона оценивали по величинам потребления основных питательных веществ, энергии и сопоставляли с приведенными в методических указаниях Рациональное питание. Нормы физиологических потребностей в пищевых веществах и энергии для различных групп населения РФ (МУ 2.3.1. 2432-08).

При выполнении статистического анализа проверку на нормальность распределения изучаемых количественных показателей проводили по тесту КолмогоровааЦаСмирнова. Достоверность различий между средними величинами оценивали с помощью критерия t Стьюдента для независимых выборок, вероятность справедливости нулевой гипотезы принимали при pа<а0,05. Корреляционный анализ проводили по методу Пирсона. Данные в таблицах представлены в виде Mааm, где M - среднее арифметическое, m - ошибка среднего.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ и их обсуждение

Интенсивность перекисного окисления липидов у коренных жителей Якутии, больных ассоциированным и неаассоциированным с H. pylori хроническим гастритом

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что инфицирование H. pylori сопровождается усилением активности процессов перекисного окисления липидов. Так, среднее содержание ТБК-РП в крови больных ХГ, неассоциированным с H. pylori, превышало показатель контрольной группы в 1,6 раза (3,15аа0,03 мкмоль/л) (р < 0,05), а при НР-ассоциированном гастрите - в 2,1 раза (4,27 0,09 мкмоль/л) (р < 0,05).

Рис. 1. Содержание ТБК-РП (мкмоль/л) в сыворотке больных ХГ в зависимости от степени обсемененности H. pylori

При этом интенсивность процессов перекисного окисления липидов зависела от степени обсемененности H.аpylori. Данные, представленные на рисунке 1, свидетельствуют о прямой зависимости концентрации продуктов перекисного окисления липидов от количества микробов в слизистой оболочке желудка (СОЖ) больных. В литературе крайне мало сведений о зависимости интенсивности перекисного окисления липидов от обсемененности H. pylori в слизистой оболочке желудка больных хроническим гастритом. Q.B. Zhang и J.B. Dawodu (1997) методом хемилюминесценции получили аналогичные данные при исследовании биоптатов желудка больных с H. pylori - ассоциированным гастритом.

Показатели антиоксидантной защиты у коренных жителей Якутии, больных ассоциированным и неаассоциированным с H.аpylori хроническим гастритом

Активность СОД - ключевого фермента антиоксидантной защиты организма - у больных ХГ, ассоциированным с H. pylori была в 1,3 раза, а в крови неинфицированных больных - в 1,6 раза выше, чем у лиц контрольной группы. Менее выраженное повышение активности СОД в мембранах эритроцитов крови инфицированных H. pylori больных может быть свидетельством ослабления ферментативного звена антиоксидантной системы. Зависимость от степени обсемененности выражалась в том, что в группе больных со слабой степенью обсемененности H. pylori активность этого фермента была в 1,5 раза выше, чем в контрольной группе, в группе с умеренной степенью обсемененности - в 1,2 раза (р < 0,05), а среди больных с выраженной степенью обсемененности H. pylori - в 1,3 раза (р < 0,05).

В результате оценки состояния неферментативного звена антиоксидантной системы обследованных выявлено изменение суммарного содержания НМАО в крови больных ХГ, выраженность которого зависела от наличия инфекции H. pylori. Так, среди больных, инфицированных H. pylori, уровень НМАО в крови был выше в 2,0 раза, а среди больных ХГ, неассоциированным с H. pylori - в 1,6 раза по сравнению с величиной показателем контрольной группы. Активацию неферментативного звена антиоксидантной системы, сопровождающуюся повышением уровня НМАО в крови больных ХГ, можно назвать адаптивной реакцией в ответ на инициацию свободнорадикальных процессов, вызванную инфицированием H. pylori. Следует подчеркнуть, что суммарное содержание НМАО зависело от степени обсемененности H. pylori. Так, в первой группе больных выявлено повышение концентрации НМАО в 1,6 раза (p < 0,05), во второй - в 1,9 раза, в третьей - в 1,8 раза (p < 0,05) по сравнению с величиной показателя контрольной группы. Статистически достоверное увеличение уровня НМАО в крови больных с умеренной и выраженной степенью обсемененности H. pylori, вероятно, обусловлено активацией синтеза эндогенных антиоксидантов.

Известно, что на состояние редокс-баланса в организме влияют не только эндогенные, но и экзогенные антиоксиданты, к которым относятся как водорастворимые, так и жирорастворимые витамины. Согласно полученным нами данным, содержание витамина С в крови больных ХГ, ассоциированным с H. pylori, был в 1,3 раза, а в крови неинфицированных больных - в 1,2 раза ниже величины показателя контрольной группы. Полученные нами данные показали, что чем выше степень обсемененности СОЖ H. pylori, тем более выражен дефицит витамина С в сыворотке крови у больных ХГ. Так, у пациентов со слабой степенью обсемененности H. pylori концентрация витамина С в сыворотке крови была понижена на 22% (р < 0,05), с умеренной степенью обсемененности H. pylori - на 17%, с выраженной степенью обсемененности H. pylori - на 30% по сравнению с контролем (р < 0,05). Уменьшение концентрации аскорбиновой кислоты в крови больных ХГ, ассоциированным с H. pylori, свидетельствует о наличии у них гиповитаминоза С, возможно, вызванного инфицированием H. pylori. Полученные нами результаты согласуются с литературными данными (Лазебник Л.Б., 2001; Драудин-Крыленко В.А., 2000; Зеленая И.И., 2006).

Анализ обеспеченности организма обследованных витаминами А и Е показал, что их содержание в крови больных первой и второй группы практически не отличается от величин показателей контрольной группы, в то время как у лиц третьей группы достоверное снижено (в 1,6 и 1,4 раза соответственно) по сравнению с контролем. Полученные результаты не противоречат сведениям литературы (Phull P.S. et al., 1996; Sun Y.Q. et al., 2005). Выявленный нами наибольший дефицит витаминов-антиоксидантов в группе больных с выраженной степенью обсемененности H. pylori, возможно, связан с длительной персистенцией H. pylori в СОЖ больных. Вероятно, этот факт обусловлен повышенной утилизацией экзогенных низкомолекулярных антиоксидантов, поскольку увеличение степени обсемененности H.аpylori в СОЖ сопряжено с активацией процессов перекисного окисления липидов (рис. 1). Другой возможной причиной уменьшения содержания в крови больных с выраженной степенью обсемененности H.аpylori витаминов А, Е и С является пониженная кислотность в СОЖ: длительно протекающая H.аpylori-инфекция, приводящая к атрофии желудочных желез и процессам кишечной метаплазии, сопровождается повышением внутрижелудочного рН. В таких условиях эндогенные антиоксиданты не в состоянии осуществлять свои защитные эффекты, что ведет к нарастанию в ней содержания АФК. Дефицит витаминов-антиоксидантов увеличивает риск развития воспаления и иммунодефицита, в основе молекулярных механизмов которого лежит усиление синтеза активных форм кислорода.

Состояние про- и антиоксидантного равновесия у коренных жителей Якутии, больных ассоциированным и неаассоциированным с H.аpylori хроническим гастритом

С целью оценки состояния редокс-баланса был определен коэффициент КАОЗ/ПОЛ. Более высокое, чем у пациентов с хроническим гастритом, значение КАОЗ/ПОЛ в группе практически здоровых лиц свидетельствует о том, что их антиоксидантная система обладает более высоким потенциалом. Снижение величины КАОЗ/ПОЛ у лиц второй и третьей групп (в 1,6 и 1,8 раза соответственно) обусловлено увеличением уровня ТБК-РП и отражает влияние H. pylori, а именно то, что у больных ХГ с выраженной степенью обсемененности H. pylori прооксидантные процессы преобладают над антиоксидантными.

Рис. 2. Величины коэффициентов, отражающих состояние редокс-баланса (СОД/ТБК-РП и НМАО/ТБК-РП), у больных ХГ коренных жителей Якутии в зависимости от степени обсемененности H.аpylori

Изменение коэффициентов СОД/ТБК-РП и НМАО/ТБК-РП, на наш взгляд, свидетельствует о разном вкладе ферментативного и неферментативного звеньев АОЗ больных в про- и антиоксидантное равновесие (редокс-баланс) (рис. 2).

Несмотря на то, что изменение коэффициентов имело однонаправленный характер, коэффициент СОД/ТБК-РП резко снижается в группах с умеренной и выраженной степенью обсемененности H.pylori, а уменьшение коэффициента НМАО/ТБК-РП происходит постепенно.

Характер изменения изученных показателей свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты в зависимости от степени инфицированности H.аpylori свидетельствует о том, что ответная реакция организма на воздействие фактора, вызывающего окислительный стресс, зависит от исходного состояния про- и антиоксидантного равновесия. При слабой степени обсемененности организм больного способен регулировать продукцию активных форм кислорода и перекисное окисление липидов, увеличивая синтез ключевых ферментов антиоксидантной системы. При выраженной степени обсемененности H.аpylori на редокс-баланс организма больных более эффективное влияние оказывают низкомолекулярные антиоксиданты.

Показатели белкового, липидного и углеводного обмена у коренных жителей Якутии, больных ассоциированным и неаассоциированным с H. pylori хроническим гастритом

Проведенный нами анализ результатов клинико-биохимического обследования показал, что активность ферментов белкового обмена обследованных нами больных ХГ варьировала в пределах нормы, принятой для европейской части России. Вместе с тем у 44% больных с умеренной степенью обсемененности H.аpylori была обнаружена гиперферментемия по гамма-глутамилтрансферазе, а у больных с выраженной степенью обсемененности H.аpylori - в 33% случаев, при этом у 44% пациентов этой группы наблюдалась гипераспартатаминотрансфераземия. З.Н. Кривошапкина (2009) отмечает гиперферментемию даже у практически здоровых лиц. По мнению Е.Р. Бойко (2005), увеличение активности трансаминаз свидетельствует о снижении детоксикационных резервов организма северян. Повышение активности ферментов белкового обмена, вероятно, связано с обеспечением энергетических потребностей организма в экстремальных условиях существования, а также с исторически сложившимся преимущественно белковым типом питания.

Анализ показателей липидного обмена больных ХГ не выявил достоверных различий в зависимости от степени обсемененности H.аpylori среди больных ХГ. Обнаружена лишь тенденция к повышению содержания триглицеридов, а также к снижению концентрации ХС ЛПВП с одновременным увеличением уровня ХС липопротеидов низкой плотности, что, возможно, и является причиной высокого коэффициента атерогенности у больных с хроническим гастритом, ассоциированным с H.аpylori. Выявленные признаки дислипидемии у больных с выраженной степенью обсемененности H.аpylori не противоречат литературным данным (Stranberg T.E. et al.,1997; Patel P., Menall M.A., 1995; Никитин Ю.П., 2000).

Повышение активности ЛДГ, фермента анаэробного окисления глюкозы, у больных второй и третьей групп (на 12 и 15% соответственно по сравнению с группой контроля), может быть признаком метаболического ацидоза. Известно, чем острее протекает воспалительный процесс, тем сильнее выражен ацидоз, который сопровождается образованием большого количества кислых продуктов - накоплением молочной и пировиноградной кислот. Нами выявлены достоверные корреляционные связи между активностью ААТ и ЛДГ (r=0,385, p=0,000), АсАТ и ЛДГ (r=0,481, p=0,000) в сыворотке крови больных ХГ, ассоциированным с H.аpylori, что является признаком влияния бактерии на биохимический спектр сыворотки крови в части энергетического и белкового обмена.

Иммунологические показатели у коренных жителей Якутии, больных ассоциированным и не ассоциированным с H.аpylori хроническим гастритом

Исход воспалительной реакции во многом зависит от состояния иммунной системы больного. Результаты исследования содержания -ФНО, эндогенного медиатора воспаления, в крови больных ХГ показали, что оно было статистически значимо повышено (в 2,9 раза) у инфицированных H.аpylori пациентов по сравнению с величиной показателя у лиц контрольной группы, а у неинфицированных больных - недостоверно (в 1,4 раза). Нарастание уровня -ФНО в крови больных зависело от степени обсемененности СОЖ H.аpylori. Так, концентрация -ФНО в крови больных со слабой степенью обсемененности H.pylori была увеличена в 1,4 раза (р < 0,05), в крови больных с умеренной степенью обсемененности - в 1,5 раза (р < 0,05), а среди больных с выраженной степенью обсемененности H.аpylori - в 1,3 раза (p < 0,001) относительно величин контрольной группы. Полученные данные подтверждают, что инфекция H. pylori способствует развитию воспалительной реакции организма больного. Повышение уровня -ФНО можно также характеризовать как предиктор возможных деструктивных изменений в слизистой оболочке желудка, особенно у больных с выраженной степенью обсемененности H.аpylori. Полученные данные находятся в соответствии с литературными: так, в исследовании F.S. Lehmann и соавторов (2002) показано, что выраженность гастрита, ассоциированного с H. pylori, коррелирует с экспрессией в слизистой оболочке -ФНО и интерферона .

Повышение концентрации С-реактивного белка (СРБ) в крови больных не имело отчетливо выраженной зависимости от степени обсемененности H. pylori в слизистой желудка больных. Вместе с тем нами выявлено значимое увеличение содержания СРБ у больных с выраженной степенью обсемененности H. pylori по сравнению с контрольной группой (в 1,9 раза). Статистически значимое возрастание содержания СРБ в крови лиц третьей группы свидетельствует об активации неспецифического звена иммунитета у этих больных. Известно, что СРБ осуществляет антимикробное действие, связываясь с микроорганизмами и активируя систему комплемента по классическому пути, и участвует в регуляции функционирования иммунокомпетентных клеток, приводя к увеличению трансэндотелиальной миграции лейкоцитов (Bruins P. et al., 1997).

Продукция раннего медиатора воспалительной реакции цитокина IL-6 в крови обследованных пациентов имела тенденцию к повышению в зависимости от степени обсемененности H.аpylori. Статистически значимое увеличение содержания провоспалительного IL-6 (по сравнению с контрольной группой) у больных со слабой степенью обсемененности H.аpylori отражает активацию воспалительного процесса, протекающего в СОЖ, на начальной стадии хеликобактерного гастрита. Полученные данные не противоречат литературным (Basso D. et al., 1996; Long-Ngam D. et al., 2006).

Концентрация противовоспалительного IL-4 в крови больных ХГ, неинфицированных H. pylori, практически не отличалась от показателя контрольной группы, а в крови больных, инфицированных H. pylori, уровень IL-4 был ниже значения контрольной группы в 1,3 раза. Выявлена тенденция к снижению концентрации IL-4 в крови больных ХГ с увеличением степени обсемененности H. pylori, что свидетельствует о длительности хронического воспаления.

Полученные данные о соотношении про- и противовоспалительных цитокинов свидетельствует о том, что у обследованных больных активация иммунного ответа происходит по Тh1-типу. Преобладание иммунного ответа Th1 связано с прогрессированием атрофического гастрита и рака желудка (Houghton J. et al., 2002).

В результате проведенного исследования установлено, что величины показателей специфического гуморального ответа зависят от степени обсемененности H. pylori (табл.а1).

Таблица 1

Показатели гуморального иммунитета у больных ХГ в зависимости от степени обсемененности H.аpylori

Содержание Ig, мг/л

Контрольная группа (nа=а20)

Первая группа (nа=а26)

Вторая группа (nа=а18)

Третья группа (nа=а43)

IgA

1,80 0,76

2,66 0,06*

3,19 0,03*

3,24 0,25

IgG

14,58 1,59

14,70 0,03*

21,97 0,03*

17,46 0,04*

sIgA

3,58 1,89

1,22 0,04*

0,97 0,04*

1,46 0,03*

Примечание: * - p < 0,05 по сравнению с контрольной  группой

Анализируя полученные результаты, можно отметить, что во всех группах больных, инфицированных H. pylori, уровень IgA отчетливо увеличивается с ростом обсемененности H. pylori в СОЖ больных. Повышение концентрации IgA можно объяснить усиленной продукцией в слизистой оболочке желудка преимущественно IgA-антител, обладающих способностью предотвращать адгезию микроорганизмов, поскольку IgA принадлежит защита организма от инфекции, в частности, от H. pylori. Мы согласны с мнением Л.Б. Лазебник (2006), что повышение циркуляции IgA в сыворотке крови больных хроническим гастритом косвенно доказывает степень выраженности атрофических процессов в слизистой оболочке желудка (Лазебник Л.Б. и др., 2006).

Увеличение содержания в сыворотке крови антител IgG отражает не только наличие колонизации H. pylori и интенсивность инфильтрации слизистой оболочки желудка лейкоцитами, но и системную реакцию иммунной системы на локальное повреждение в гастродуоденальной системе. По повышенному уровню IgG в сыворотке крови больных ХГ можно судить об интенсивности воспаления в слизистой оболочке желудка, вызванной патогенным влиянием H. pylori. Достоверное возрастание содержания IgG у больных с умеренной степенью обсемененности H. pylori свидетельствует об активации иммунной системы, когда как у больных третьей группы с выраженной степенью обсемененности резервы иммунной системы снижены.

Уровень sIgA в крови больных ХГ, неассоциированным с H. pylori, был в 1,7 раза, а в крови инфицированных больных - в 2,2 раза ниже величины соответствующего показателя контрольной группы. При этомуменьшение концентрации sIgA в крови больных имело зависимость от степени обсемененности H. pylori в СОЖ больных. Содержание sIgA среди больных со слабой степенью обсемененности было в 2,9 раза (р < 0,05) ниже, чем у лиц контрольной группы, у пациентов с умеренной степенью обсемененности - в 3,7 раза (р < 0,05), с выраженной степенью - в 2,5 раза (р < 0,05) (табл. 1). В работе А.В. Кононова (1999) доказана возможность возникновения локального дефицита sIgA в слизистой оболочке желудка в результате способности H. pylori разрушать дисульфидные связи. Недостаточность этого компонента влечет за собой колонизацию слизистых оболочек микробами (Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., 1997), повышение потока аллергенов через эпителиальный барьер и, как следствие, повышение нагрузки на вторую линию защиты (Денисов Н.Л., 1990; Ивашкин В.Т., 1998; Yun I. et al., 2005).

Как уже было сказано выше, о воспалительном процессе в организме больных хроническими гастритами свидетельствует повышение интенсивности свободнорадикальных реакций. Нами выявлены достоверные корреляционные связи между содержанием в сыворотке крови низкомолекулярных антиоксидантов и -ФНО (rа=а0,405, ра=а0,012), низкомолекулярных антиоксидантов и IgA (rа=а0,399, ра=а0,013), продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой, и IL-4 (rа=а0,410, ра=а0,012). Это свидетельствует о том, что система поддержания редокс-баланса участвует в развитии иммунных реакций.

Показатели фактического питания коренных жителей Якутии, больных хроническим гастритом

При анализе суточного рациона обследованных нами лиц не выявлено статистически значимых различий как между здоровыми (контрольная группа) и больными ХГ, так и между пациентами с ХГ, ассоциированным и неассоциированным с H. pylori. Анализ фактического питания показал преобладание доли жиров и углеводов в суточном рационе у обследованных нами лиц. Избыточное потребление жиров и углеводов в сочетании с низкой физической активностью в условиях Севера приводит к ожирению. Согласно полученным данным, из 320 обследованных больных с ХГ избыточная масса тела и ожирение выявлена у 57%. Избыточная масса тела и ожирение свидетельствуют о нерациональном  соотношении по жировому, белковому и углеводному компонентам. Корреляционный анализ выявил достоверную связь между энергетической ценностью рациона и потреблением белков (r = 0,671, p = 0,000), жиров (r = 0,780, p = 0,000) и углеводов (r = 0,879, p = 0,000) у мужчин. Между количеством калорий и углеводов, потребляемых женщинами, также выявлена тесная положительная корреляция (r = 0,931, p = 0,000). Наиболее тесная корреляционная связь обнаружена между потреблением углеводов и калорийностью рациона (как у женщин, так и у мужчин), что подтверждает больший вклад углеводного компонента в энергетическую ценность рациона обследованных больных.

В таблице 2 приведены данные о среднесуточном потреблении витаминов. Отмечен острый дефицит потребления витамина С как мужчинами, так и женщинами: поступление с пищей витамина С среди мужчин было на 60,0%, а у женщин - на 69% ниже рекомендуемой нормы. Следует отметить, что низкое содержание витаминов в суточном рационе обследованного сельского населения связано с крайне низким потреблением свежих овощей, фруктов и ягод. Известно, что у пациентов с заболеваниями желудочно-кишечного тракта низкая обеспеченность витаминами может быть обусловлена нарушением всасывания и обмена витаминов, ухудшением аппетита, назначением редуцированных щадящих диет. Анализ витаминного состава суточного рациона показал, что между группами больных ХГ, ассоциированным и неассоциированным с H.аpylori, значимых различий не существует. Выявленный нами глубокий дефицит витаминов С и А в сыворотке крови больных ХГ с выраженной степенью обсемененности H.аpylori является следствием не только недостаточного их содержания в рационе питания, но и усиления свободнорадикальных процессов в организме пациентов, инфицированных H.аpylori.

Таблица 2

Среднесуточное потребление витаминов в рационе больных ХГ

Потребление витамина, мг/сут

Мужчины (nа=а57)

Женщины (nа=а211)

Рекомендуемые величины#

Витамин А

1,83 0,14*

0,58 0,17

0,90

Каротиноиды

1,95 0,02*

1,92 0,02

5,00

Витамин В1

1,22 0,06*

0,93 0,03

1,50

Витамин В2

2,74 0,22*

1,89 0,05

1,80

Витамин РР

23,22 1,46*

15,20 0,46

20,00

Витамин С

36,01 3,44*

28,26 1,35

90,00

Примечание: * - p < 0,05 по сравнению с контрольной  группой; # - нормы физиологических потребностей в энергии и пищевых веществах для различных групп населения РФ (МУ 2.3.1.2432-08).

Фактическое питание коренного населения Якутии, страдающего хроническим гастритом, не зависит от степени обсемененности H.аpylori и характеризуется несбалансированностью рациона по макро- и микронутриентам. Современное питание коренного сельского населения Якутии не соответствует традиционному типу, наиболее адаптированному к условиям Севера.

ВЫВОДЫ

  1. Повышение степени обсемененности слизистой оболочки желудка H. pylori у больных хроническим гастритом приводит к увеличению интенсивности свободнорадикального окисления: содержание продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой, в сыворотке крови больных со слабой степенью обсемененности в 1,6 раза (ра<а0,05), а у пациентов с выраженной степенью обсемененности - в 2,4 раза (ра<а0,05) выше, чем у коренных жителей Якутии без патологии желудочно-кишечного тракта, неинфицированных H. pylori (лиц контрольной группы).
  2. Инфицирование H. pylori влияет на редокс-баланс коренных жителей Якутии, больных хроническим гастритом. Достоверное снижение величины КАОЗ/ПОЛ в 1,7 раза у лиц с умеренной и в 1,8 раза у пациентов с выраженной степенью обсемененности H. pylori является свидетельством ослабления антиоксидантной защиты. Установлено, что при слабой степени обсемененности H. pylori редокс-баланс поддерживается ферментативным, а при выраженной степени обсемененности - неферментативным звеном антиоксидантной защиты.
  3. Развитие хронического гастрита, ассоциированного с H. pylori, у коренных жителей Якутии приводит к достоверному повышению продукции иммуноглобулинов IgА и IgG и к снижению концентрации секреторного иммуноглобулина sIgA. Выявлено статистически значимое увеличение концентрации провоспалительных цитокинов (IL-6, -ФНО) и С-реактивного белка, выраженность которого зависит от степени обсемененности H. pylori.
  4. Система поддержания редокс-баланса участвует в развитии иммунных реакций у больных хроническим гастритом, ассоциированным с H. pylori, о чем свидетельствует достоверные корреляционные связи между содержанием в сыворотке крови низкомолекулярных антиоксидантов и -ФНО (rа=а0,405, ра=а0,012), низкомолекулярных антиоксидантов и IgA (rа=а0,399, ра=а0,013), продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой, и IL-4 (rа=а0,410, ра=а0,012).
  5. Повышение степени обсемененности слизистой оболочки желудка H. pylori у больных хроническим гастритом приводит к развитию полигиповитаминоза: у пациентов со слабой и тяжелой степенью обсемененности H. pylori содержание антиоксидантного витамина С в сыворотке крови снижено на 22 и 30% соответственно; если концентрация жирорастворимых витаминов-антиоксидантов А и Е у больных со слабой степенью обсемененности H. pylori не отличается от величин соответствующих показателей практически здоровых лиц, то у пациентов с выраженной степенью обсемененности H. pylori статистически значимо уменьшается на 40 и 58% соответственно.
  6. Фактическое питание коренного населения Якутии не зависит от степени обсемененности H. pylori и характеризуется несбалансированностью рациона по макро- и микронутриентам. Увеличение доли жиров и углеводов (на 10 и 12% соответственно) в суточном рационе свидетельствует об углеводно-липидной направленности современного фактического питания коренного сельского населения Якутии.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

  1. Ефремова А.В., Миронова Г.Е., Гармаева Д.К. Состояние антиоксидантной системы организма рабочих алмазогранильных заводов г. Якутска // Молекулярно-клеточные аспекты патологии человека на Севере: межрегион. науч.-практ.конф. - Якутск, 2007. - С.40 - 41.
  2. Миронова Г.Е. Биохимические аспекты патологии человека на Севере / Г.Е. Миронова, А.В. Ефремова и [др.] // Молекулярно-клеточные аспекты патологии человека на Севере: межрегион. науч.-практ. конф. - Якутск, 2007. - С. 5Ц7.
  3. Ефремова А.В., Миронова Г.Е. Перекисное окисление липидов у больных хроническими гастритами по степени инфицированности Нelicobacter pylori // XIII Лаврентьевские чтения: сборник статей. - Якутск, 2009. - С.24 - 28.
  4. Николаев В.М. Влияние курения на обеспеченность витаминами-антиоксидантами Е и С у больных с ишемической болезнью сердца / В.М. Николаев, А.Н. Романова, Л.И. Константинова, Г.Е. Миронова, А.С. Гольдерова, А.В. Ефремова и [др.] // Якутский медицинский журнал. Ц  Якутск. - 2009. - №1 (25). - С.26 - 29. (Из списка ВАК)
  5. Ефремова А.В., Миронова Г.Е.Оценка инфицированности Нelicobacter pylori у больных с патологией желудочно-кишечного тракта // Сборник 14 интернационального конгресса Циркумполярного здоровья. - Канада, 2009. - С. 115-116.
  6. Олесова Л.Д. Состояние биохимического статуса у горнорабочих ГОКа Удачный/ Л.Д. Олесова, А.В. Ефремова и [др.]// Профессия и здоровья: сб. мат.VIII Всероссийского конгресса. - М., 2009. - С.365 - 367.
  7. Ефремова А.В., Миронова Г.Е. Перекисное окисление липидов у больных с хроническим гастритом по степени инфицированности Нelicobacter pylori // Медицина в современном мире: взгляд научной молодежи: мат. республиканской науч.-практ. конф. - Якутск, 2010. - С. 39 - 41
  8. Ефремова А.В. Перекисное окисление липидов у больных хроническими гастритами в зависимости от степени инфицированности Helicobacter pylori / А. В. Ефремова, и [др.]// Якутский медицинский журнал. - Якутск. - 2010. - №2 (30). - С.39 - 41. (Из списка ВАК)
  9. Ефремова А.В., Миронова Г.Е. Свободно-радикальное окисление липидов у больных хроническим гастритами по степени инфицированности Нelicobacter pylori //Материалы научно-практической конференции молодых ученых Актуальные вопросы охраны здоровья населения регионов Сибири. - Красноярск, 2010. - С.15 - 16.
  10. Ефремова А.В. Перекисное окисление липидов у больных хроническими гастритами, ассоциированными и неассоциированными с Helicobacter pylori // Результаты исследований получателей грантов Президента РС (Я) и государственных стипендий РС(Я) за 2010 год. - Якутск, 2011. - С. 137 - 140.
  11. Ефремова А.В. Иммунологические показатели больных хроническим гастритом в условиях Якутии/ А.В.Ефремова, А.С. Гольдерова, Г.Е. Миронова и [др.] //Якутский медицинский журнал. - Якутск. - 2011. - №3 (35) - С.21 - 24. (Из списка ВАК)
  12. Ефремова А.В. Роль гуморальных факторов иммунной системы в развитии хронического гастрита в условиях Севера/ А.В. Ефремова, А.С. Гольдерова,  Г.Е. Миронова и [др.] // Бюллетень ВСНТ - СО РАМН. - Иркутск. - 2011. - № 3 (79). - С. 34 - 37. (Из списка ВАК).
  13. Ефремова А.В. Иммунологические показатели больных хроническим гастритом в условиях Якутии/ А.В. Ефремова, А.С. Гольдерова, Г.Е. Миронова и [др.] // Живые системы и конструкционные материалы в условиях криолитозоны: сборник трудов всероссийской научной конференции. - Якутск, 2011. - С. 40 - 48.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АОЗ - антиоксидантная защита

АФК - активные формы кислорода

ААТ - аланинаминотрансфераза

АсАТ - аспартатаминотрансфераза

ДГ - лактатдегидрогиназа

ПВП - липопротеиды высокой плотности

НМАО - низкомолекулярные антиоксиданты

СОД - супероксиддисмутаза

СОЖ - слизистая оболочка желудка

СРБ - С-реактивный белок

ТБК-РП - продукты реакции с тиобарбитуровой кислотой

-ФНО - фактор некроза опухоли α

ХГ - хронический гастрит

IgA - иммуноглобулин А

IgG - иммуноглобулин G

IL-4 - интерлейкин-4

IL-6 - интерлейкин-6

sIgA - секреторный иммуноглобулин А

Th1 - Т-хелперы 1 типа

Н. pylori - Helicobacter pylori

  Авторефераты по всем темам  >>  Авторефераты по биологии