Авторефераты по всем темам >>
Авторефераты по химии
На правах рукописи
АГАФОНОВА МАРИЯ НИКОЛАЕВНА
СИНТЕЗ ФУНКЦИОНАЛИЗИРОВАННЫХ ПО НИЖНЕМУ ОБОДУ п-трет-БУТИЛ(ТИА)КАЛИКС[4]АРЕНОВ И ИЗУЧЕНИЕ ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ С РЯДОМ ДИКАРБОНОВЫХ, -ГИДРОКСИ- И -АМИНОКИСЛОТ
02.00.03 - Органическая химия
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук
Казань - 2012
Работа выполнена на кафедре органической химии Химического института им.
А.М.Бутлерова федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего профессионального образования Казанский (Приволжский) федеральный университет Министерства образования и науки Российской Федерации.
Научный консультант: доктор химических наук, профессор Стойков Иван Иванович
Официальные оппоненты: Галкина Ирина Васильевна, доктор химических наук, профессор кафедры высокомолекулярных и элементоорганических соединений ФГАОУВПО Казанский (Приволжский) федеральный университет, г. Казань Зиганшина Альбина Юлдузовна, кандидат химических наук, старший научный сотрудник лаборатории химии каликсаренов ФГБУН Институт органической и физической химии им. А.Е. Арбузова РАН, г. Казань
Ведущая организация: ФГБУН Институт химии растворов им. Г.А.Крестова РАН, г. Иваново
Защита диссертации состоится л31 мая 2012 года в 16 часов 00 минут на заседании диссертационного совета Д 212.081.03 по химическим наукам при ФГАОУВПО Казанский (Приволжский) федеральный университет по адресу: 420008, г. Казань, ул. Кремлёвская, 18, Химический институт им. А.М. Бутлерова, Бутлеровская аудитория.
С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке им. Н.И. Лобачевского Казанского (Приволжского) федерального университета. Отзывы на автореферат просим направлять по адресу: 420008, г. Казань, ул. Кремлёвская, 18, ФГАОУВПО Казанский (Приволжский) федеральный университет, научная часть.
Автореферат разослан л___ апреля 2012 г.
Ученый секретарь диссертационного совета Казымова Марина Александровна
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность. Молекулярное распознавание синтетическими рецепторами природных соединений (карбоновых кислот и биогенных аминов, аминокислот, пептидов, белков), участвующих в разнообразных биологических процессах, является предметом исследований в ряде областей знания - биохимии, супрамолекулярной, органической и аналитической химии, медицине, фармакологии. Это обуславливает бурное развитие подходов к дизайну рецепторов с заданными свойствами и определенными функциями, обеспечивающими их сродство и селективность к биологически значимым соединениям.
Создание новых рецепторов (молекул-лхозяев) для решения задач обнаружения, разделения, трансмембранного переноса субстратов, содержащих карбоксильную или карбоксилатную группу, открывает новые перспективы для создания сенсорных и диагностических устройств, систем разделения и концентрирования органических соединений на основе реализации принципов биомиметики, а также для более глубокого понимания принципов транспорта веществ через биологические мембраны.
Как известно, формирование и функционирование природных супрамолекулярных систем обусловлено нековалентными взаимодействиями. Однако при дизайне рецепторов на дикарбоновые, -гидрокси- и -аминокислоты помимо указанных взаимодействий необходимо учитывать ряд дополнительных факторов (самоассоциация органических кислот, сильная гидратация заряженной цвиттер-ионной формы аминокислот, необходимость распознавания гидрофобной боковой цепи, обычно не содержащей заряженных или полярных групп), усложняющих достижение требуемых характеристик распознавания. В связи с этим направленное конструирование указанных рецепторов является комплексной задачей, более сложной, чем распознавание катионов и анионов.
Комбинирование различных по природе центров взаимодействия в рамках макроциклической системы открывает новые возможности дизайна хозяев для дикарбоновых, -гидрокси- и -аминокислот.
Каликсарены с уникальной трехмерной и конформационно подвижной структурой являются одной из популярных строительных синтетических платформ для синтеза молекуллхозяев. Благодаря синтетической доступности исходных соединений, сравнительно легкой функционализации верхнего и/или нижнего ободов макроцикла, способности образовывать несколько конформационных изомеров каликсарены становятся в один ряд с такими хорошо известными классами хозяев, как краун-эфиры, криптанды и циклодекстрины.
Целью работы является молекулярное моделирование и направленный синтез рецепторов на -гидрокси- и дикарбоновые кислоты, ароматические и алифатические аминокислоты на основе п-трет-бутил(тиа)каликс[4]аренов, функционализированных сложноэфирными, пентафторфенильными и аминофосфонатными фрагментами, установление структуры полученных макроциклов комплексом физических методов и характеристика их способности к молекулярному распознаванию методами мембранной экстракции, УФ-спектроскопии и ВЭЖХ.
Научная новизна работы состоит в следующем:
Ц синтезирован ряд новых 1,3-дизамещенных по нижнему ободу п-третбутилкаликс[4]аренов в конфигурации конус, функционализированных ароматическими, алкильными, сложноэфирными, пентафторфенильными, -аминофосфонатными фрагментами;
Ц впервые показано, что при замене двух трет-бутильных заместителей в 1,3дизамещенных по нижнему ободу каликс[4]аренах, содержащих пентафторфенильные и сложноэфирные фрагменты, на электроноакцепторные нитро-группы происходит избирательное связывание глутаминовой кислоты;
Ц впервые разработаны подходы к синтезу моно- и тетразамещенных по нижнему ободу п-трет-бутилтиакаликс[4]аренов в конформациях конус и 1,3-альтернат, содержащих -аминофосфонатные фрагменты;
Ц установлено, что предорганизация аминофосфонатных заместителей на макроциклической платформе (тиа)каликс[4]арена увеличивает избирательность связывания -гидрокси- и дикарбоновых кислот;
Ц впервые на примере соединений, содержащих -аминофосфонатные фрагменты, продемонстрировано, что переход к тиакаликс[4]арену от его классического аналога усиливает способность синтетического рецептора взаимодействовать с дикарбоновыми и аминокислотами.
Практическая значимость работы. Предложены и реализованы подходы к получению новых рецепторных соединений для эффективного связывания -гидрокси-, дикарбоновых и -аминокислот. Синтезированы и охарактеризованы 1,3-дизамещенные по нижнему ободу п-трет-бутилкаликс[4]арены в конформации конус, среди которых найдены эффективные и селективные переносчики глутаминовой и винной кислот. Оптимизированы методики синтеза аминофосфонатных производных на основе п-третбутил(тиа)каликс[4]арена в конфигурациях конус и 1,3-альтернат, среди которых выявлены рецепторы для связывания аспарагиновой, гликолевой, щавелевой, винной и глутаминовой кислот. Реализовано разделение смесей дикарбоновых и -аминокислот в ряду близких по структуре субстратов, что открывает новые возможности для создания систем анализа и очистки сложных биологических смесей.
На защиту выносятся:
Синтез ряда новых 1,3-дизамещенных по нижнему ободу п-третбутилкаликс[4]аренов в конформации конус, содержащих фрагменты для связывания дикарбоновых и -аминокислот.
Синтез новых производных п-трет-бутилтиакаликс[4]арена, содержащих один, четыре или восемь аминофосфонатных фрагментов в конфигурациях конус и 1,3-альтернат.
Закономерности, связывающие структурные факторы функционализированных птрет-бутил(тиа)каликс[4]аренов с их комплексообразующей способностью по отношению к дикарбоновым, -гидрокси- и -аминокислотам.
Апробация работы. Результаты исследований докладывались на Научнообразовательных конференциях студентов Биолого-почвенного факультета (2006-2007 гг.);
XV Всероссийской конференции УСтруктура и динамика молекулярных системФ (Яльчик, Республика Марий-Эл, 2008); Всероссийской школе-конференции Супрамолекулярные системы на поверхности раздела, посвященной 175-летию со дня рождения Д.И.
Менделеева (Москва, 2009 г); Итоговой научной конференции Казанского университета (Казань, 2011); международных научных конференциях: I Международном симпозиуме УSupramolecular and nanochemistry: toward applicationsФ (Харьков, SNCTA-2008); Чугаевской конференции в области супрамолекулярной химии координационных соединений и наноструктур на основе координационных соединений (Санкт-Петербург, 2009); V Международном симпозиуме УSupramolecular Systems in Chemistry and BiologyФ (Киев, 2009);
Международном симпозиуме УAdvanced Science in Organic ChemistryФ (ASOCЦCrimea, Крым, 2010); III Международной летней школе-конференции Supramolecular System in Chemistry and Biology (Львов, Украина, 2010).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 3 статьи, 1 монография (глава в книге) и 10 тезисов докладов.
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 1страницах машинописного текста, включает 55 рисунков и 16 таблиц. Состоит из введения, трех глав, выводов и списка использованных библиографических источников, включающего 234 ссылки.
В первой главе представлен обзор литературных данных, отражающий современное состояние исследований по молекулярному распознаванию карбоновых и аминокислот функционализированными каликсаренами. Также затронуты вопросы по созданию на основе метациклофанов терапевтических агентов, систем доставки, разделения и концентрирования.
Основные результаты экспериментальных исследований и их обсуждение приведены во второй главе. Обсуждены квантово-механическое моделирование рецепторных структур на основе (тиа)каликс[4]аренов, синтез моно-, тетра- и 1,3-дизамещенных п-третбутил(тиа)каликс[4]аренов, содержащих различные заместители для связывания органических кислот. Исследованы комплексообразующие свойства полученных соединений по отношению к -гидрокси-, дикарбоновым и -аминокислотам, а также показана способность избирательного транспорта ряда изученных субстратов через жидкие липофильные мембраны из смеси, содержащей несколько близких по структуре кислот.
Экспериментальная часть работы, включающая описание проведенных синтетических, экстракционных и спектральных экспериментов, а также ВЭЖХ, приведена в третьей главе диссертации.
ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
1 Молекулярный дизайн производных п-трет-бутил(тиа)каликс[4]аренов, содержащих фрагменты для связывания дикарбоновых, -гидрокси- и -аминокислот Комбинирование в рамках макроциклической системы различных по природе центров взаимодействия открывает новые возможности для дизайна хозяев. С целью создания рецепторов на основе п-трет-бутил(тиа)каликс[4]аренов на дикарбоновые, -гидрокси- и аминокислоты были предложены следующие участки связывания соответствующих гостей: фенольные группы (тиа)каликс[4]арена для связывания карбоксильной функции дикарбоновых (А) и -гидрокси- -аминокислот (рис.1А);
O O O O R H R H электроноакцепторные заместители по NO2 NOверхнему ободу макроцикла, увеличивающие кислотность (Б) свободных гидроксильных групп O O O O X X X X O O O R H R H O (рис.1Б); сочетание нескольких H H H H связывающих участков различной (В) X= CH2, S природы, а именно, протонодонорного S S S S и протоноакцепторного (рис.1В).
O O O O R R R R В рамках первого и второго конус R R подходов были рассмотрены 1,3O O дизамещенные по нижнему и верхнему S S S S O O ободу п-трет-бутилкаликс[4]арены в R R конфигурации конус 1-4 и 7-10. Третий 1,3-альтернат подход - сочетание нескольких Рис.1. Подходы к синтезу целевых участков связывания - был реализован функционализированных (тиа)каликс[4]аренов.
на примере макроциклов 5, 6, 11, 12, функционализированных по нижнему ободу -аминофосфонатными фрагментами.
O2N NOR R O O S S S S S O S S S O R O O O O O O O O O O O O R R H H H R H H H R R H R 7: R= -CH2-C6H5 1: R= -CH2-C6H2: R= -CH2-(CH2)6-CH3 8: R= -CH2-(CH2)6-CH3 11: R=-(CH2)2-NH-C(CH3)2-P(O)(OC2H5)9: R= -CH2-C6F3: R= -CH2-C6F12: R=-(CH2)3-NH-C(CH3)2-P(O)(OC2H5)10: R= -CH2-COOEt 4: R= -CH2-COOEt 5: R= -(CH2)4-NH-C(CH3)2-P(O)(OC2H5)6: R= -(CH2)2-NH-CH(Ph)-P(O)(OC2H5) В качестве субстратов нами были выбраны: -гидроксикислоты (гликолевая, d,lминдальная), дикарбоновые кислоты (d,l-винная, щавелевая, малоновая и янтарная), аминокислоты (d,l-глутаминовая, d,l-аспарагиновая). С целью теоретического обоснования выдвинутых гипотез нами были предварительно проведены расчеты предполагаемой модели связывания органических кислот функционализированными по верхнему и нижнему ободу п-трет-бутил(тиа)каликс[4]аренами для выявления стерических и/или электронных препятствий образованию комплекса. Молекулярное моделирование структур было проведено на полуэмпирическом уровне с использованием квантово-механического метода РМ3.
Сопоставление полученных для рецепторных структур 1-12 оптимизированных значений термодинамических характеристик показывает, что наиболее термодинамически выгодное комплексообразование реализуется в случае рецептора 9 и глутаминовой кислоты (Е~ -16 ккал/моль), тиакаликс[4]арена 11 и щавелевой/малоновой кислот (Е~ -12/-ккал/моль), а также соединения 12 и аспарагиновой кислоты (Е~ -48 ккал/моль).
Проведенное теоретическое исследование подтвердило отсутствие значительных стерических препятствий комплексообразованию и комплементарность потенциальных центров связывания в исследуемых субстратах и рецепторах. Моделирование новых синтетических рецепторов на основе функционализированных п-третбутил(тиа)каликс[4]аренов для распознавания ряда дикарбоновых, -гидрокси- и аминокислот с помощью квантово-химических методов (MM+, PM3) позволило предложить новых хозяев: макроцикл 5 для связывания винной кислоты, 12 - для аспарагиновой, 11 - для малоновой и щавелевой, 9 и 10 - для глутаминовой, 6 - для янтарной кислоты. В связи с этим для подтверждения теоретических предпосылок и экспериментального установления влияния ряда структурных факторов: природы заместителей, кислотно-основных свойств свободных фенольных групп, размера макроциклической полости (тиа)каликс[4]арена, пространственного расположения связывающих центров на способность связывать органические кислоты нами в дальнейшем были изучены подходы к синтезу рецепторов на основе (тиа)каликс[4]аренов.
2 Синтез функционализированных п-трет-бутил(тиа)каликс[4]аренов, содержащих алкильные, пентафторфенильные, сложноэфирные и аминофосфонатные фрагменты по нижнему ободу Селективным алкилированием п-трет-бутилкаликс[4]арена 13 соответствующими алкилгалогенидами в ацетонитриле в присутствии карбоната калия был синтезирован ряд 1,3-дизамещенных по нижнему ободу производных каликс[4]арена 1-4 с выходами 60-80%.
Затем две трет-бутильные группы на верхнем ободе макроциклов 1-4 были замещены нитро-группами. Макроциклические соединения 7-10 были получены нитрованием 1,3 дизамещенных по нижнему ободу каликс[4]аренов 1-4 азотной кислотой в хлористом метилене в присутствии уксусной кислоты при ~20С.
NOO2N HNORBr, K2COCH3COOH CH3CN O O OR R H O O OH OR R H OH O O O OH H H H 60-80% 44-55% 1: R1= -CH2-C6H5 7: R1= -CH2-C6H2: R1= -CH2-(CH2)6-CH3 8: R1= -CH2-(CH2)6-CH3: R1= -CH2-C6F5 9: R1= -CH2-C6F4: R1= -CH2-COOEt 10: R1= -CH2-COOEt Синтез п-трет-бутилтиакаликс[4]аренов 5 и 6 с двумя -аминофосфонатными фрагментами по нижнему ободу был осуществлен по реакции Кабачника-Филдса из макроциклов 16 и 17, диэтилфосфита и соответствующих карбонильных соединений.
Целевые -аминофосфонаты 5 и 6, закрепленные на каликс[4]ареновой платформе, были получены с выходами 67% и 31% соответственно.
Cl(CH2)3CN, (C2H5O)2P(O)H B2H6 67% O H K2CO3, HO O O O O O O CH3C(O)CH3, CH3CN, THF HO OH O O H H NaI 4-CH3C6H4SO3H HN CHNH NH2 H2N H3C CHOO CN NC P H3C P OC2H49% 54% H5C2OOC H5OC2HO O OH H H OH 31% ClCH2CN, B2H6 (C2H5O)2P(O)H O O O O K2CO3, C6H5CHO THF O H O HO OH O H CH3CN, HO OH O NaI NH HN CN NC Ph Ph O O 62% NH2 H2N P P H5C2O OC2H56% H5C2O C2H5O Таким образом, нами получен и охарактеризован ряд новых 1,3-дизамещенных по нижнему ободу каликс[4]аренов в конфигурации конус. Структура и состав впервые полученных соединений 1-10 были охарактеризованы с помощью ряда физико-химических 1 13 методов: ЯМР H, С, Р, ИК-спектроскопии и элементного анализа. Конформация макроциклического кольца полученных соединений была установлена с помощью одномерной ЯМР 1Н и двумерной ЯМР 1H-1H NOESY спектроскопии.
Для сравнения рецепторной способности фосфорилированных производных C18H37NHC P(O)(OC2H5)каликс[4]арена и ациклических аминофосфонатов, также по реакции H3C CHКабачника-Филдса были получены соединения 18 и 19. Строение и P(O)(OC2H5)1 31 C18H37NHCH состав продуктов были подтверждены методами ИК, ЯМР Н и Р Ph спектроскопии, а также данными элементного анализа.
Успешная функционализация аминофосфонатными фрагментами каликс[4]аренов позволила предположить, что создание аналогичных фосфорилированных структур возможно также и на основе тиакаликс[4]аренового макроцикла. С целью получения монозамещенного -аминофосфоната на основе п-трет-бутилтиакаликс[4]арена по литературным методикам было O синтезировано соединение 22.
Br N Далее нами была изучена реакция O S S S S аминированного тиакаликс[4]арена Cs2CO3, CH3C(O)CH3 O O O O S S S S O H O O H H O H H H 22 с диэтилфосфитом и ацетоном в H O 20 N O присутствии различных оснований, H2NNH2*H2O и катализаторов. Получение 68% EtOH монозамещенного п-третбутилтиакаликс[4]арена 11, (C2H5O)2P(O)H, содержащего -аминофосфонатный CH3C(O)CH3 S S S S S S S S O (C2H5)3N фрагмент, явилось довольно O O O O O O O H H H H H H сложной задачей. Первоначально 80% NH 22 NHпри использовании в качестве H3C O H3C P оснований карбонатов щелочных OC2HH5C2O 45% металлов (калия, цезия), а также этилата натрия были получены трудноразделимые смеси, содержащие несколько побочных продуктов. Введение в реакцию в качестве катализатора птолуолсульфокислоты также не привело к получению целевого продукта. Нами было выдвинуто предположение, что появление побочных продуктов может быть обусловлено наличием воды в реакционной смеси. Однако проведение синтеза с использованием насадки Дина-Старка и молекулярных сит (3А) также никак не повлияло на количество образующихся продуктов реакции. Наконец, путем подбора условий реакции удалось установить, что при использовании в качестве основания триэтиламина в спектре ЯМР Р реакционной смеси наблюдается преимущественно один продукт (р=31.44 м.д.), который и был выделен при разработке.
Интересно отметить, что изменение условий разработки S S вышеописанного синтеза позволяет S H S O O O O H H выделить наряду с продуктом 11 также N NH комплекс, состоящий из O P монозамещенного тиакаликс[4]арена и O O триэтиламина в соотношении 1:(рис.2) (согласно данным Рис.2. Структура комплекса соединения 11 с триэтиламином в кристаллическом состоянии.
спектроскопии ЯМР Н). Структура полученного комплекса подтверждена с помощью данных рентгеноструктурного анализа (рис.2). Рентгенографический анализ показал, что происходит перенос протона от фенольного гидроксила в 3-положении тиакаликсарена 11 к азоту третичного амина с образованием феноксильной и аммонийной групп со стабилизацией образующегося аниона водородными связями с соседними OH-группами.
С целью исследования влияния пространственных факторов на рецепторные свойства -аминофосфонатов также интересным представлялось получение и исследование других конфигураций фосфорилированных макроциклов. В связи с этим при использовании в качестве прекурсора тетразамещенных аминированных макроциклов 23 и 24 в конфигурации 1,3-альтернат были получены соединения 12 и 25 соответственно. Выходы продуктов составили 68% для соединения 12 и 38% для соединения 25.
OC2H5 C2H5O C2H5O OC2HC2H5OOC2H5 O P CH3H3C P C2H5OOC2HP H3C O H3C O NH2 CH3 NH O P CHHN NH2 H2N NH2 H3C NH NH CHC2H5O OC2HO O OC2HC2H5O P N CH3 PCH3 N N N H3C H3C NHH2N NH HN O O O O (H5C2O)2P(O)H S S 38% S S S O S S O S O CH3C(O)CH3, O O 68% O S S S O (H5C2O)2P(O)H O S O 4-CH3C6H4SO3H O S S S S CH3C(O)CH3, O O 4-CH3C6H4SO3H N N N N NHH2N NH CHHN NH NH2 HN H2N H3C CH3 CHNH2 H3C HN CH3 NH O CHH2N H3C H3C H3C P 89% O O P O OC2HC2H5O P P O OC2H5 O C2H5O OC2H5 P CH3H3C P C2H5O C H5O OC2H5 OC2HC2H5O OC2H52 OC2HСтруктура и состав синтезированных тетразамещенных по нижнему ободу п-третбутилтиакаликс[4]аренов 12 и 25 были охарактеризованы комплексом физических методов.
Конформация макроциклического кольца полученных соединений была установлена с 1 помощью одномерной ЯМР Н и двумерной ЯМР H-1H NOESY спектроскопии.
Наблюдаемые в спектре ЯМР H-1H NOESY макроциклов 12 и 25 кросс-пики, обусловленные диполь-дипольным взаимодействием между протонами OCH2, CH2NН групп с трет-бутильными и арильными фрагментами макроцикла, а также этоксильных протонов при атоме фосфора с протонами трет-бутильных фрагментов однозначно свидетельствуют о нахождении п-трет-бутилтиакаликс[4]аренов 12 и 25 в конфигурации 1,3-альтернат.
Таким образом, впервые были синтезированы моно- и тетразамещенные по нижнему ободу п-трет-бутилтиакаликс[4]арены, содержащие -аминофосфонатные фрагменты.
Получен кристаллический комплекс монофункционализированного по нижнему ободу производного п-трет-бутилтиакаликс[4]арена с третичным амином, и установлена структура координационного узла в твердом состоянии. Впервые разработан подход к введению -аминофосфонатного фрагмента в структуру монозамещенного по нижнему ободу п-трет-бутилтиакаликс[4]арена в конформации конус, включающий применение в качестве темплата третичного амина.
3. Комплексообразующие свойства функционализированных производных птрет-бутил(тиа)каликс[4]аренов по отношению к -амино-, -гидрокси- и дикарбоновым кислотам Для изучения закономерностей образования комплексов п-третбутил(тиа)каликс[4]аренов с дикарбоновыми, -гидрокси- и -аминокислотами использовались методы мембранной экстракции, УФ-спектроскопии и высокоэффективной жидкостной хроматографии.
3.1 Индуцированный функционализированными (тиа)каликс[4]аренами мембранный транспорт дикарбоновых, -гидрокси- и -аминокислот Эксперимент по мембранной экстракции проводился в стеклянной термостатируемой ячейке с подвижным цилиндром. Жидкая мембрана представляла собой раствор переносчика в о-нитрофенилоктиловом эфире, импрегнированный в поры тефлоновой матрицы. В изученных системах процесс транспорта кислот протекал по схеме диализа, т.е. под действием градиента химического потенциала. По механизму массопереноса транспорт классифицируется как индуцированный, т.е. с участием молекулы-переносчика.
Оказалось, что переносчики на основе 1,3-дизамещенных по нижнему ободу каликс[4]аренов 1-4, 7-10 с алкильными, ароматическими, пентафторфенильными и сложноэфирными фрагментами демонстрируют невысокую транспортную способность по сравнению с холостым экспериментом (рис.3). Полученные результаты подтверждают, что взаимодействия субстратов только с гидроксильными группами на нижнем ободе 1,3дизамещенного каликс[4]арена 1 недостаточно для связывания и 1экстракции гидрофильных 11карбоновых кислот в липофильную мембранную фазу.
При замене двух третбутильных заместителей на нитрогруппы в соединениях 7-10 в большинстве случаев наблюдается рост величины массопереноса исследуемых субстратов через Рис.3. Коэффициенты усиления потока (= ji/jо) мембрану. В случае соединения ряда органических субстратов через жидкую наблюдается ускорение транспорта ипрегнированную мембрану, содержащую глутаминовой кислоты через переносчики 1-4, 7-10.
а т а о а л от т а с л о т и а с л о а т к и с л т о и к с я о л та к а и а я с л о т а с к я и л ев о и а к с л л ов в к и ая е с о н я к в в я и н и а о а к г я и н н н а а ща н о м ь в р ая а л и л е а т н в а л п у р д ма о с а л н а к г т и н л ми я г липофильную жидкую мембрану в 23 раза. При замене двух трет-бутильных заместителей на электроноакцепторные нитро-группы был получен селективный и эффективный рецептор на глутаминовую кислоту 9. Очевидно, что в этом случае (макроциклы 9 и 10) эффективность взаимодействия обусловлена увеличением кислотности свободных гидроксильных групп при введении акцепторных заместителей по верхнему ободу. В результате переносчик демонстрирует усиление потока глутаминовой кислоты в 146 раз.
Далее интересные результаты были получены для рецепторных соединений, содержащих -аминофосфонатные фрагменты. Оказалось, что синтезированные соединения 5 и 6 продемонстрировали отличия в транспортной способности по отношению к субстратам по сравнению с ациклическими переносчиками 18 и 19. Сравнение величин массопереноса с данными холостого эксперимента показало, что введение в мембрану модельных переносчиков 18 и 19 приводит к увеличению скорости транспорта субстратов в 10-1000 раз (рис.4). Наибольшее значение коэффициента усиления потока наблюдается для щавелевой кислоты. Для ациклических -аминофосфонатов явно прослеживается корреляция между силой кислот и интенсивностью трансмембранного переноса. Соответственно, максимальные значения коэффициента усиления потока показаны для дикарбоновых кислот: щавелевая кислота>малоновая кислота>янтарная кислота.
В целом, модельные соединения 18 и 19 продемонстрировали довольно высокую эффективность и селективность транспорта щавелевой кислоты. Для макроциклических рецепторов 5 и 6 наблюдается уменьшение величины коэффициента усиления потока для щавелевой кислоты. Также следует отметить, что происходит переключение селективности на винную кислоту для соединения 5, и на янтарную и аспарагиновую кислоты для соединения 6. Очевидно, что данный факт обусловлен, в первую очередь, повышением степени предорганизованности функциональных заместителей переносчиков, что приводит к выходу на передний план не силы кислот, а характеристик структурного и геометрического соответствия участков связывания субстрату.
1 14112110864219 Рис.4. Коэффициенты усиления потока (= ji/jо) ряда органических субстратов через жидкую импрегнированную мембрану, содержащую переносчики 5, 6, 18, 19.
а т а а т о т а т т о а о л т а о о а л т а с л о т а л л т с т о с а и а о л т с с а о о и л т т а с к л о т и и л с л о а к о т с ки и о л с я с к т к и о л л и я с к л я а о и и с к с л я я с а к и в а л к к и с я и а а в я е с и к в я к и а к в в о а л о к и я я а к в е я о е в н я н а я а к в о а я л н о а в и я а и н о е н а н я н н и а г в м нн н н в и а ь н о ь в а е м а ща о и г а и е н л л р л р т л а в а л в а а а л р а а о у т щ а р т а д д п л м у к а т м н с ко н г н л и п н а я и и и г л с я л м г м а г В связи с вышесказанным логично было предположить, что при переходе к тиакаликс[4]ареновой платформе, которая имеет ряд отличий от классической, также будет наблюдаться уменьшение эффективности и увеличение селективности макроциклов по отношению к кислотам, что и было продемонстрировано на примере тиакаликс[4]аренов 11 и 12.
Наличие одного -аминофосфонатного фрагмента в структуре тикаликс[4]арена 11 не предполагает высокой селективности 2макроцикла, соединение демонстрирует 1довольно высокую транспортную 1способность по отношению к изучаемым субстратам, в целом превосходящую 1,3дизамещенный -аминофосфонат 5 на основе каликс[4]ареновой платформы (рис.5). Что касается тетразамещенного макроцикла 12, то при введении данного соединения в мембранную фазу Рис.5. Коэффициенты усиления потока (= наблюдается значительное уменьшение ji/jо) ряда органических кислот через жидкую импрегнированную мембрану, содержащую массопереноса всего спектра кислот кроме переносчики 11 и 12.
аспарагиновой и гликолевой.
Наблюдаемое усиление скорости массопереноса аспарагиновой и гликолевой кислот в 174 и 70 раз соответственно позволяет говорить об эффективном молекулярном распознавании данных субстратов.
Таким образом, полученные в ходе мембранной экстракции результаты хорошо согласуются с данными молекулярного моделирования квантово-механическим методом PM3. Так, наблюдаемые значения коэффициентов массопереноса для (тиа)каликс[4]аренов 5, 6, 11, 12, содержащих -аминофосфонатные фрагменты, являются максимальными в ряду исследованных соединений, что свидетельствует об эффективном взаимодействии переносчик-кислота. Как и ожидалось, макроцикл 5 наиболее эффективно экстрагирует винную кислоту, 12 - аспарагиновую, 11 - малоновую, 9 и 10 - глутаминовую, а 6 - янтарную.
3.2 Исследование комплексообразующей способности -аминофосфонатов на основе п-трет-бутил(тиа)каликс[4]арена методом УФ-спектроскопии Для более глубокого понимания механизма связывания, были проведены спектрофотометрические исследования и расширен круг исследуемых аминокислот. Кроме аспарагиновой и глутаминовой были изучены следующие аминокислоты: d,l-аланин, d,lвалин, d,l- гистидин, d,l-лейцин, d,l-лизин.
а т о л с а и т к о я л с а в и а е к т л о я е л а в с в а а и о т к щ н о л и я с г а а а и в т р о к о а н я л п и а а с с т м и в а о а о к л т н с у о я и л а л а к г а т н о я н м л а и с н в а и ь т к л о а я л д а с н в и и е к л м я о а к н и р л а г т н я Было установлено, что при взаимодействии каликс[4]арена 5 с винной кислотой в УФспектрах хозяина наблюдается гипохромный эффект. В то же время широкая полоса поглощения 290-310 нм претерпевает сильный гипсохромный сдвиг относительно исходного спектра макроцикла. По отношению к остальным исследованным субстратам значимых изменений не зафиксировано. Для монозамещенного аминофосфоната 11 наблюдается преимущественное взаимодействие с глутаминовой, малоновой и щавелевой кислотами. В данном случае происходит небольшое смещение полосы поглощения в спектре комплексов в коротковолновую область, а также наблюдается гипохромный эффект.
В случае же тетразамещенного аминофосфоната 12 изменения происходят только при взаимодействии с гликолевой и аспарагиновой кислотами (рис.6). Наблюдается гипохромный эффект и смещение полосы поглощения с максимумом при 270 нм в область более коротких волн относительно исходного спектра макроцикла. Кроме того, в спектре комплекса тетразамещенного аминофосфоната 12 и гликолевой кислоты наблюдается гиперхромный эффект в диапазоне 225-240 нм, тогда как для других субстратов значимых изменений не зафиксировано. Что касается соединения 25, то при взаимодействии каликс[4]арена с винной кислотой в УФ-спектрах хозяина наблюдается гиперхромный эффект. По отношению к остальным исследованным субстратам значимых изменений не зафиксировано.
O O O O EtO P OEt EtO P OEt P P а EtO OEt EtO OEt NH NH б HN HN O O OEt EtO P P O O O O EtO OEt NH S S S S HN S S S S O O O O NH NH NH NH EtO OEt EtO OEt P P O 12 P OEt EtO EtO P OEt O O O O O S 2 S S S O А O N NH EtO H OEt H2N P P OEt EtO O O O H O O H O нм Рис.6. (а) УФ-спектры растворов п-трет-бутилкаликс[4]арена 12 (110-5 М) (1) в дихлорметане после добавления различных кислот: гликолевая (2), аспарагиновая (3). (б) Результаты моделирования методом РМ3 комплекса п-трет-бутилтиакаликс[4]арена 12 с аспарагиновой кислотой.
Изучение с помощью УФ-спектроскопии способности к молекулярному распознаванию ряда дикарбоновых, -гидрокси- и -аминокислот (тиа)каликс[4]аренами 5, 6, 11, 12, 25 в дихлорметане выявило в некоторых случаях значительные изменения в электронных спектрах поглощения макроциклов при взаимодействии с данными субстратами.
Для количественной характеристики молекулярного распознавания кислотных субстратов функционализированными производными п-трет-бутил(тиа)каликс[4]арена методом разбавления были установлены константы устойчивости образующихся комплексов (табл.1). Также с помощью метода построения кривых изомолярных серий была установлена стехиометрия комплексов субстрат-п-трет-бутилтиакаликс[4]арен, образующихся в дихлорметане.
Таблица 1. Значения логарифмов констант устойчивости комплексов (1:1) (тиа)каликс[4]аренов 5, 6, 11, 12, 25 с рядом органических кислот в дихлорметане при 20С.
-lgК, M а соединение 5 6 11 12 щавелевая 3.00.1 2.30.1 4.30.1 2.30.1 2.80.малеиновая 2.30.1 2.10.1 2.20.1 2.50.2 2.70.аспарагиновая 2.40.1 4.40.1 2.50.1 5.70.1 2.40.глутаминовая 2.10.1 2.30.1 3.90.1 2.10.1 2.10.лизин 2.30.1 2.30.1 2.90.1 3.10.1 4.10.фенилаланин 2.10.2 2.00.2 2.70.2 2.80.2 2.90.валин 2.10.2 2.30.2 2.80.2 2.90.2 4.30.1* лейцин 2.20.0 2.10.0 2.40.0 3.40.0 3.10.аланин 2.40.1 2.30.1 2.70.1 3.20.1 4.70.2* триптофан 2.10.2 2.00.2 2.60.2 2.60.2 3.10.малоновая 2.40.1 2.30.1 4.10.1 2.20.2 2.30.фумаровая 2.60.1 2.10.1 2.60.1 2.90.1 2.20.винная 5.30.2 2.50.2 2.70.2 3.20.2 5.50.2* гликолевая 3.60.1 3.20.1 2.90.1 6.1 0.1* 2.4 0.янтарная 3.10.1 5.00.1 3.40.1 3.40.1 2.10.(*Стехиометрия 1:2).
Значения логарифмов констант устойчивости комплексов изученных аминофосфонатов с рядом дикарбоновых, -гидрокси- и -аминокислот изменяются от 2.1 до 6.1, что свидетельствует об эффективном и в ряде случаев селективном связывании изученных гостей. Как было показано в процессе квантово-механических расчетов энергии комплексов, подобное эффективное взаимодействие возможно благодаря тому, что карбоксильная, гидроксильная и аминогруппы субстратов могут образовывать водородные связи с атомами азота и кислорода аминофосфонатного фрагмента.
Таким образом, в ходе проведенных исследований с помощью методов мембранной экстракции и УФ-спектроскопии изучена комплексообразующая способность синтезированных производных (тиа)каликс[4]аренов по отношению к некоторым -амино- (аспарагиновая, глутаминовая, аланин, валин, лизин, лейцин, триптофан, фенилаланин), гидрокси- (винная, гликолевая) и дикарбоновым кислотам (малоновая, малеиновая, фумаровая, щавелевая, янтарная). Установлена способность изученных рецепторов к эффективному и избирательному взаимодействию с гликолевой, малоновой, глутаминовой, щавелевой, аспарагиновой кислотами. Эффективность связывания определяется природой субстратов, а также количеством потенциальных центров координации рецептора.
Поскольку фосфорилированные соединения 5, 6, 11, 12, 25 продемонстрировали довольно высокие значения логарифмов констант устойчивости по отношению к узкому кругу субстратов, для дополнительной оценки селективности синтезированных рецепторов нами были проведены эксперименты ВЭЖХ, в ходе которых была исследована их способность к селективному взаимодействию с определенным видом субстратов, близких по структуре.
3.3 Исследование комплексообразующей способности фосфорилированных п-третбутил(тиа)каликс[4]аренов методом ВЭЖХ Для дополнительной оценки селективности синтезированных соединений 5 и 12 при проведении эксперимента по индуцированному рецепторами-переносчиками мембранному транспорту методом ВЭЖХ нами контролировалось содержание кислот в принимающей фазе. Параметры эксперимента аналогичны условиям, описанным в разделе 3.1.
Поглощение (A) Поглощение (A) винная винная Единственным отличием являлось наличие в подающей фазе смеси различных кислот янтарная янтарная 20.20.малоновая малоновая (тогда как ранее нами исследовалась способность рецепторов к массопереносу определенной кислоты) (рис.7). Отбор 0 5 10 15 20 0 5 10 15 20 образцов принимающей фазы Время удерживания(мин) Время удерживания(мин) осуществлялся каждый час в течение всего Рис.7. Хроматографический анализ подающей фазы в мембранной экстракции эксперимента (7 часов). В случае смеси винной, малоновой и янтарной макроцикла 5 в принимающей фазе в кислот соединением 5.
первые три часа детектировался только пик винной кислоты (рис.8).
Поглощение (A) Поглощение (A) Поглощение (A) Поглощение (A) а б 500.500.457,457,200,200,0.0.0 2 4 6 8 10 12 0 2 4 6 8 10 12 0 5 10 15 20 0 5 10 15 20 Время удерживания(мин) Время удерживания(мин) Время удерживания(мин) Время удерживания(мин) Рис.8. Хроматографический анализ принимающей фазы для соединения 5 и смеси винной, малоновой и янтарной кислот после трех (а) и пяти (б) часов эксперимента по мембранной экстракции.
В дальнейшем, по прошествии пяти часов, наблюдалось появление на хроматограмме пика, соответствующего янтарной кислоте. Что касается малоновой кислоты, то ее появления не наблюдалось в течение всего эксперимента.
Полученные результаты хорошо согласуются с данными мембранной экстракции. Так, при снижении коэффициента усиления потока в 6 раз (для янтарной кислоты по сравнению с винной) рецептор 5 способен селективно переносить через мембрану исключительно винную кислоту.
В случае соединения 12 происходит переключение селективности экстракции гостя с винной кислоты на аспарагиновую. Из приведенной хроматограммы (рис.9) видно, что даже после семи часов эксперимента детектируется только пик аспарагиновой кислоты. Что касается остальных кислот, содержащихся в подающей фазе (малоновой, винной, янтарной), то их появления не наблюдается в течение всего эксперимента. Полученные результаты хорошо согласуются с данными, полученными с помощью УФ-спектроскопии, так как константы ассоциации комплексов для этих кислот различаются на несколько порядков.
аспарагиновая аспарагиновая 1111винная винная а 11111111малоновая малоновая H5C2O OC2HO O OC2HH5C2O P P H3C янтарная янтарная CHH3C CHNH HN O O 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 S S S S O O Время удерживания (мин) Время удерживания (мин) Время удерживания (мин) 443333HN 3325 NH 33CH3 CHH3C 22HC3 P O P 2250 H5C2O O OC2Hб 2225 OC2H5 H5C2O 22111111111 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 Время удерживания (мин) Время удерживания (мин) Рис.9. Хроматографический анализ: (а) подающей фазы, состоящей из смеси аспарагиновой, винной, малоновой и янтарной кислот и (б) принимающей фазы после часов эксперимента по мембранной экстракции для соединения 12.
Поглощение (А) Поглощение (А) Поглощение (А) Поглощение (А) Поглощение (А) В заключение следует отметить, что в ходе проведенных исследований удалось определить кинетические зависимости процессов мембранного транспорта и величины потока субстратов через жидкие импрегнированные мембраны. Показано, что введение аминофосфонатных групп в (тиа)каликс[4]арен приводит к существенному изменению комплексообразующих свойств аминофосфонатных фрагментов по сравнению с ациклическими аналогами. Сравнение селективности классических каликс[4]аренов и их тиа-аналогов показало преимущество последних.
ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ 1. На основе моделирования квантово-химическими методами предложены новые синтетические рецепторы на основе функционализированных п-третбутил(тиа)каликс[4]аренов для распознавания винной, аспарагиновой, малоновой, глутаминовой и янтарной кислот.
2. Синтезирован ряд новых п-трет-бутил(тиа)каликс[4]аренов, содержащих алкильные, арильные, сложноэфирные, пентафторфенильные и -аминофосфонатные фрагменты. Показана возможность применения полученных соединений в качестве переносчиков дикарбоновых, -гидрокси- и -аминокислот через жидкие липофильные мембраны.
3. Впервые получен кристаллический комплекс монофункционализированного по нижнему ободу производного п-трет-бутилтиакаликс[4]арена с третичным амином, и установлена структура координационного узла в твердом состоянии. Показано, что происходят перенос протона от фенольного гидроксила к амину с образованием феноксильной и аммонийной групп и стабилизация образующегося аниона водородными связями с соседними OH-группами.
4. Разработан подход к введению -аминофосфонатного фрагмента в структуру монозамещенного по нижнему ободу п-трет-бутилтиакаликс[4]арена в конформации конус, включающий применение в качестве темплата третичного амина.
5. Методами мембранной экстракции и электронной спектроскопии (методы разбавления и изомолярных серий) изучены комплексообразующие свойства синтезированных соединений по отношению к ряду органических кислот. Установлены закономерности влияния структуры макроциклических рецепторов на основе замещенных по верхнему и нижнему ободам п-трет-бутил(тиа)каликс[4]аренов на их комплексообразующую способность по отношению дикарбоновым, -гидрокси- и аминокислотам:
- для 1,3-дизамещенных по нижнему ободу п-трет-бутилкаликс[4]аренов, содержащих сложноэфирные и пентафторфенильные фрагменты, успешное связывание глутаминовой кислоты осуществляется как заместителями по нижнему ободу макроцикла, так и свободными гидроксильными группами, выступающими в качестве протонодоноров;
- при переходе от ациклических аминоалкил(арил)фосфонатов к их макроциклическим аналогам на основе каликс[4]арена происходит увеличение селективности синтетических рецепторных структур, в частности, наблюдается избирательное взаимодействие с винной, янтарной и аспарагиновой кислотами;
- при увеличении количества -аминофосфонатных фрагментов, вводимых в структуру п-трет-бутилтиакаликс[4]арена, от одного до восьми наблюдается усиление селективности рецепторных соединений по отношению к исследуемым субстратам.
6. Методом ВЭЖХ установлено, что синтезированные п-третбутил(тиа)каликс[4]арены с -аминофосфонатными фрагментами в составе жидких импрегнированных мембран способны осуществлять селективное извлечение винной и аспарагиновой кислот из смесей дикарбоновых, -гидрокси- и -аминокислот.
Основное содержание работы
отражено в следующих публикациях 1. Stoikov, I.I. New membrane carrier for glutamic acid based on p-tert-butylcalix[4]arene 1,3-disubstituted at the lower rim. / I.I. Stoikov, M.N. Agafonova, P.L. Padnya, E.N. Zaikov, I.S.
Antipin // Mendeleev Communications. - 2009. - V. 19, N. 3. - P. 163Ц164.
2. Stoikov, I.I. Molecular Recognition: Biotechnology, Chemical Engineering and Materials Applications. Molecular Recognition of Carboxylic Acids and Carboxylate Anions by Synthetic Receptor [Text] / I.I. Stoikov, M.N. Agafonova, L.S. Yakimova, I.S. Antipin, A.I. Konovalov // NY: Novapublisher. - 2011. - p. 337 (ISBN: 978-1-61122-734).
3. Agafonova, M.N. Selective transmembrane carriers for hydroxycarboxylic acids:
influence of a macrocyclic calix[4]arene platform / M.N. Agafonova, O.A. Mostovaya, I.S. Antipin, A.I. Konovalov, I.I. Stoikov // Mendeleev Communications. - 2012. - V. 22. - P. 80-82.
4. Агафонова, М.Н. Молекулярное распознавание дикарбоновых, -гидрокси- и аминокислот искусственными рецепторами на основе функционализированных по нижнему ободу тиакаликс[4]аренов, содержащих аминофосфонатные фрагменты / М.Н. Агафонова, О.А. Мостовая, К.С. Шибаева, И.И. Стойков, И.С. Антипин, А.И. Коновалов // Ученые записки Казанского государственного университета. Серия Естественные науки. - 2012. - Книга 1. - С. 7Ц17.
5. Stoikov, I.I. Design of novel sensing materials for glutamic acid on the basis of calix[4]arene derivatives / I.I. Stoikov, M.A. Agafonova, E.N. Zaikov, L.I. Shamova, I.S. Antipin, A.I. Konovalov // Book of abstracts of International Symposium on Olfaction and Electronic Noses.
Ц St. Petersburg, 2006. - Р. 109Ц110.
6. Мостовая, О.А. Индуцированный -аминофосфонатами транспорт дикарбоновых и гидроксикислот через липофильные мембраны / О.А. Мостовая, М.А. Агафонова, И.И.
Стойков, И.С. Антипин, А.И Коновалов // Тезисы докладов VI Всероссийского научного семинара с молодежной научной школой УХимия и медицинаФ. - Уфа, 2007. - С. 195.
7. Агафонова, М.Н. Молекулярное распознавание -гидрокси- и дикарбоновых кислот -аминофосфонатами и рецепторами на основе каликс[4]арена, дизамещенного по нижнему ободу пиридиновыми фрагментами / М.Н. Агафонова, И.И. Стойков // Тезисы докладов Итоговой научно - образовательной конференции Биолого-почвенного факультета. - Казань, 2007. - C. 3.
8. Zhukov, A.Yu. Synthesis and study of the complex agent capability of the new thiacalix[4arene derivatives to a range of organic acids / A.Yu. Zhukov, M.N. Agafonova, I.I.
Stoikov, I.S.Antipin, A.I.Konovalov // Book of abstracts of First International symposium УSupramolecular and nanochemistry: toward applicationsФ SNCTA. - Kharkov, 2008. - P. 1-6.
9. Агафонова, М.Н. Синтез и исследование комплексообразующей способности новых производных тиакаликс[4]арена по отношению к ряду органических кислот / М.Н.
Агафонова, А.Ю. Жуков, И.И. Стойков, И.С. Антипин // Тезисы докладов Всероссийской школы-конференции Супрамолекулярные системы на поверхности раздела, посвященной 175-летию со дня рождения Д.И. Менделеева. - Москва, 2009. - С. 60.
10. Agafonova, M.N. The 1,3-disubstituted at lower rim p-tert-butylcalix[4]arenes as efficient -amino, -hydroxy and dicarboxylic acid membrane carriers / M.N. Agafonova, I.I.
Stoikov, E.N. Zaykov, P.L. Padnya, I.S. Antipin // Book of abstracts of Vth International Symposium УSupramolecular Systems in Chemistry and BiologyФ. - Kyiv, 2009. - P. 192.
11. Agafonova, M.N. The complexation ability of the synthetic receptors based on calix[4]arenes toward a number of -hydroxy and dicarboxylic acid / М.N. Аgafonova, A.Yu.
Zhukov, I.I. Stoikov, V.I. Kalchenko, I.S. Antipin // Тезисы докладов XXIV Международной Чугаевской конференции по координационной химии и Молодежной конференции-школы Физико-химические методы в химии координационных соединений. - Санкт-Петербург, 2009. - С. 504.
12. Агафонова, М.Н. Молекулярное распознавание -амино-, -гидрокси- и дикарбоновых кислот синтетическими рецепторами на основе каликс[4]аренов / М.Н.
Агафонова // Тезисы докладов Всероссийской конференции с элементами научной школы. - Белгород, 2009. - С. 108.
13. Агафонова, М.Н. Синтетические рецепторы на основе функционализированных каликс[4]аренов, способных индуцировать транспорт дикарбоновых, амино- и гидроксикислот через липофильные мембраны / М.Н. Агафонова, И.И. Стойков, И.С.
Антипин, А.И. Коновалов // Тезисы докладов Международного симпозиума УAdvanced Science in Organic ChemistryФ (ASOCЦCrimea). - Крым, 2010. - С. 4.
14. Агафонова, М.Н. Молекулярное распознавание дикарбоновых, -гидрокси- и аминокислот искусственными рецепторами на основе функционализированных каликс[4]аренов / М.Н. Агафонова, П.Л. Падня, И.И. Стойков, И.С. Антипин, А.И. Коновалов // Тезисы докладов II Международной молодежной школы-конференции Супрамолекулярные системы на поверхности раздела. - Туапсе, 2010. - С. 62.
15. Agafonova, M.N. The design and synthesis of receptor structures based on thiacalix[4]arenes capable to recognition a number of -hydroxy- and dicarboxylic acids / М.N.
Аgafonova, A.Yu. Zhukov, A. V. Galukhin, I.I. Stoikov, I.S. Antipin, A.I. Konovalov // Book of abstracts of 3rd International Summer School "Supramolecular Systems in Chemistry and Biology".
Ц Lviv, 2010. - P. 46.