Авторефераты по всем темам >>
Авторефераты по разное
На правах рукописи
БУДУЛОВ
НУРДИН РАГИМХАНОВИЧ
РЕСПИРАТОРНЫЕ БОЛЕЗНИ КРУПНОГО
РОГАТОГО СКОТА В ДАГЕСТАНЕ
16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология,
микология с микотоксикологией и иммунология
16.00.01 - диагностика болезней и терапия животных
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
доктора ветеринарных наук
Краснодар - 2009
Работа выполнена в ГНУ Прикаспийский зональный НИВИ и ГНУ Краснодарский НИВИ Российской академии сельскохозяйственных наук
Научные консультанты: доктор биологических наук
Глотова Татьяна Ивановна
доктор ветеринарных наук
Басова Наталья Юрьевна
Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор
Болоцкий Иван Александрович
доктор ветеринарных наук, профессор
Малышева Людмила Александровна
доктор ветеринарных наук, профессор
Никулин Иван Алексеевич
Ведущая организация: Ставропольский государственный аграрный
университет
Защита состоится л01 июля 2009 г. в л10-00 часов на заседании диссертационного совета Д 220.038.07 в Кубанском государственном аграрном университете по адресу: 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Кубанского государственного аграрного университета.
Автореферат разослан л 2009 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета,
доктор ветеринарных наук И.А. Родин
- ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы. Перед сельским хозяйством страны Концепцией развития животноводства в ХХ век поставлена задача - решить проблему обеспечения населения продовольствием за счет собственных ресурсов. Ее решение зависит от надежного эпизоотического благополучия животных по инфекционным и незаразным болезням (В.М. Авилов, 1998).
Широкое распространение респираторных болезней крупного рогатого скота (КРС) в Российской Федерации, в том числе и Республике Дагестан (РД), препятствует решению поставленной задачи вследствие экономических потерь, складывающихся из падежа, вынужденного убоя, снижения прироста живой массы, затрат на лечебно-профилактические мероприятия, уменьшения потенциала продуктивности и племенных качеств животных (О.Г. Петрова с соавт., 1999; А.Г. Высокопоясный с соавт., 2000; Н.И. Закутский, 2000; В.А. Мищенко с соавт., 2001; Н.Ю. Басова, 2002; К.П. Юров с соавт., 2003; A.L.E. Lindberg, 2003).
Большинство болезней, развивающихся на фоне неблагоприятного воздействия на животных различных предрасполагающих факторов, снижающих общую неспецифическую резистентность организма, имеют инфекционную природу (Г.В. Корнева, 1990; В.А. Белопольский с соавт., 1993;
А.В. Жаров, 1995; В.П. Иноземцев с соавт., 1996; А.С. Кашин, 1996; А.Н. Гизатулин, 1996; С.М. Лавренов с соавт., 1997; А.Г. Шахов, 1997; В.Н. Выдрин с соавт., 1998; Б.Л. Белкин, 1998; Ю.Н. Федоров, 2005; Н.А. Кавенькин с соавт., 2005; М.А. Сидоров с соавт., 2006; В.А Мищенко с соавт., 2006;
C.S. Ribble et al., 1995; D.A.-V.K. Virtala et al., 1996; F. Marschang, 1998).
По мнению ряда исследователей (Н.Н. Крюков с соавт., 1984;
В.А. Мищенко с соавт., 2000; К.П. Юров с соавт., 2003; А.Г. Глотов с соавт., 2006; L.A. Babiuk et al., 1996; K.W. Jericho et al., 2004 и др.), первопричиной возникновения пневмоний у 90% телят являются вирусы, которые, вызывая инфекционный процесс в макроорганизме, создают оптимальные условия для жизнедеятельности в нем бактерий, что приводит к осложнению вирусного заболевания.
Взаимодействие микроорганизмов различных классов приводит к значительному усилению тяжести течения респираторных болезней молодняка КРС. Ассоциативное течение болезней осложняет их диагностику, профилактику и терапию (С.И. Жидков с соавт., 1996; П.А. Красочко, 1991; Н.Ю. Басова, 2002; О.Г. Петрова, 2002; К.П. Юров с соавт., 2003; Т.И. Глотова, 2006; М.И. Гулюкин с соавт., 2007; H. Houe, 1999 и др.).
Несмотря на большой объем информации по проблеме острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ), многие вопросы эпизоотологии респираторных болезней молодняка КРС, связанные с учетом природно-климатических особенностей и специализации хозяйств, остаются до сих пор нерешенными.
Республика Дагестан занимает одно из ведущих мест по производству животноводческой продукции в Российской Федерации.
С внедрением в республиках Северного Кавказа, в том числе в Дагестане, промышленной технологии ведения животноводства изменилась система содержания КРС. Новые технологические приемы (круглогодовое стойловое содержание, высокая концентрация животных на ограниченных площадях, отсутствие выгулов и инсоляции) при разнообразных климатических условиях республики повысили функциональную нагрузку на организм животных, что привело к увеличению болезней органов дыхания.
Учитывая сложность развития патологического процесса респираторных болезней, их полиэтиологичность и многофакторность, стратегия профилактики и лечения животных должна быть направлена на комплексное воздействие как на этиологические факторы болезни, так и на организм в целом.
Все вышеупомянутое определяет актуальность проведения комплексных исследований по изучению этиологической структуры болезней органов дыхания у телят и поиску специфических препаратов, методов и схем их применения для повышения эффективности ветеринарных мероприятий.
Цель исследований. Изучить особенности эпизоотической ситуации, этиологическую структуру респираторных болезней молодняка крупного рогатого скота, усовершенствовать методы их диагностики, разработать систему профилактических и лечебных мероприятий, с учетом зональных особенностей Дагестана.
Задачи исследований:
1. Изучить распространение респираторных болезней молодняка КРС в хозяйствах Дагестана и определить наносимый ими экономический ущерб; выяснить причины и факторы, способствующие их возникновению и распространению на территории республики;
2. Изучить этиологическую структуру вирусных респираторных инфекций КРС и особенности эпизоотической ситуации по наиболее распространенным болезням (парагрипп-3, инфекционный ринотрахеит, аденовирусная и респираторно-синцитиальная инфекции, вирусная диарея-болезнь слизистых оболочек КРС), факторы, влияющие на развитие острых респираторных болезней и определить спектр бактериальных агентов, осложняющих их течение;
3. Усовершенствовать методы диагностики вирусных инфекций КРС с использованием культур клеток, а также систему специфической профилактики и терапии респираторных болезней телят в условиях Дагестана;
4. Усовершенствовать методы, средства профилактики и терапии крупного рогатого скота и разработать систему лечебных мероприятий респираторных болезней;
5. Разработать и внедрить в хозяйствах республики усовершенствованную комплексную научно обоснованную систему мероприятий по профилактике и терапии респираторных болезней молодняка КРС, основанную на рациональном сочетании точной диагностики, специфической профилактики и эффективной терапии смешанных респираторных болезней молодняка КРС, отягощенных наличием лейкоза.
Научная новизна. Изучено распространение респираторных болезней молодняка крупного рогатого скота в Республике Дагестан и наносимый ими экономический ущерб. Определена этиологическая структура респираторных вирусных заболеваний телят в промышленных комплексах и на фермах сельхозпредприятий.
Разработаны методы получения первичных культур клеток и субкультур с преобладанием клеток эпителиоподобного типа из легочной ткани плода буйволицы и доказана возможность использования их для диагностики вирусных респираторных болезней КРС. Изучены некоторые культурально-морфологические свойства полученных культур клеток, выявлены некоторые особенности цитопатогенного действия респираторных вирусов на культуру клеток.
Впервые установлена возможность использования сыворотки крови буйволят и плодов буйволиц для культивирования клеточных культур.
Разработана и внедрена в ветеринарную практику республики научно обоснованная система специфической профилактики и терапии респираторных болезней телят с применением гипериммунной сыворотки крови и сухой культуральной ассоциированной вакцины против парагриппа-3 (ПГ-3) и инфекционного ринотрахеита (ИРТ) крупного рогатого скота (ВИЭВ).
Установлена противовирусная активность изатизона в отношении вируса ИРТ КРС. Показана профилактическая эффективность двух форм изатизона у телят, экспериментально инфицированных смешанными вирусными инфекциями. На основании полученных данных предложен способ профилактики вирусных респираторных заболеваний молодняка КРС препаратом сероизатизон, на который получен патент РФ на изобретение.
Новизна исследований подтверждена двумя авторскими свидетельствами. На Способ профилактики вирусных респираторных заболеваний крупного рогатого скота получен патент.
Теоретическая и практическая значимость работы. Материалы диссертации использованы при составлении:
Ц Методических рекомендаций по культивированию первичных культур клеток и субкультур из ткани легкого плодов крупного рогатого скота, утвержденных секцией Биология, общая и сравнительная патология животных Отделения ветеринарии ВАСХНИЛ (протокол № 2 от 03.06.1985 г.);
Ц Методических рекомендаций по профилактике и лечению вирусных респираторных заболеваний крупного рогатого скота в хозяйствах Дагестана, утвержденных секцией ветеринарии НТС МСХиП ДАССР (протокол № 15 от 23.12. 1991 г.);
Ц Методических рекомендаций по культивированию первичных культур клеток, субкультур и эксплантатов из ткани легкого плодов буйволиц, утвержденных секцией Ветеринарная биотехнология Отделения ветеринарной медицины РАСХН (протокол № 3 от 09.06.1999 г.);
Ц Методических рекомендаций по получению сыворотки крови плодов буйволиц для клеточной биотехнологии и культивирования вирусов, утвержденных секцией Ветеринарная биотехнология Отделения ветеринарной медицины РАСХН (протокол № 1 от 30.02.2004 г.);
Ц Методических рекомендаций по профилактике и борьбе с лейкозом крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах Прикаспийского региона РФ, утвержденных НТС Комитета Правительства РД по ветеринарии (протокол № 15 от 29.06.2005 г.);
Ц рекомендаций Стратегия и принципы применения противовирусных препаратов при вирусных болезнях продуктивных и мелких домашних животных, утвержденных подсекцией секции Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока Отделения ветеринарной медицины РАСХН (протокол № 3 от 30.10.2007 г.);
Ц Комплексной системы оздоровления и профилактики лейкоза крупного рогатого скота в Республике Дагестан на 2008Ц2015 гг., утвержденной НТС Департамента по ветеринарии при МСХ РД (протокол № 1 от 12.03.2008 г.).
Результаты исследований представляющие теоретическую и практическую ценность, создают почву для использования противовирусных препаратов в общей схеме противоэпизоотических мероприятий при смешанных вирусно-бактериальных инфекциях молодняка КРС с целью его терапии и могут быть использованы в практике при разработке оздоровительно-профилак-тических мероприятий с учетом лейкоза КРС.
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на: заседаниях ученого совета Прикаспийского зонального НИВИ в 1987Ц2008 гг.; республиканских, краевых, областных научно-практических и научно-производственных конференциях (Махачкала, 1996, 1997, 2000, 2001, 2002, Краснодар, 2001, Ставрополь, 2005, Вологда, 2007); Международной конференции Современное состояние и перспективы интеграции ветеринарной науки и практики в условиях реформирования с.-х. производства Прикаспийского региона (Махачкала, 1997); Международной научной конференции Разработка и производство диагностических сухих питательных сред и микросистем (Махачкала, 1998); Международной научной конференции Достижения и современные проблемы развития науки в Дагестане (Махачкала, 1999); Международной юбилейной научно-практической конференции Проблемы ветеринарной медицины в условиях реформирования с.-х. производства (Махачкала, 2003); Всероссийской конференции Лекарственные средства для животных и корма. Современное состояние и перспективы (М., 2005); Всероссийской научно-практической конференции Сельскохозяйственная наука Республики Мордовия: достижения, направления развития (Саранск, 2005); Международной научно-практической конференции Основные проблемы, тенденции и перспективы устойчивого развития с.-х. производства (Махачкала, 2006); Международной научно-практической конференции Актуальные проблемы ветеринарии в современных условиях (Краснодар, 2006); Всероссийской научно-практической конференции Естественные науки в решении проблем производства, экологии и медицины (Назрань, 2006); Всероссийской научно-практической конференции Антибиотикорезистентность и антимикробная химиотерапия (Махачкала, 2006); 16-й Всероссийской научно-методической конференции Современные проблемы патологической анатомии, патогенеза и диагностики болезней животных (Ставрополь, 2007); Всероссийской научно-практической конференции Образование, наука, инновационный бизнес - сельскому хозяйству регионов (Махачкала, 2007); Х Международной конференции Биологическое разнообразие Кавказа (Махачкала, 2007); Международной научной конференции Биологическое разнообразие Кавказа (Грозный, 2008); Международной научно-практической конференции Достижения ветеринарной науки и практики - с.-х. производству (Махачкала, 2008).
Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 57 научных работ, в том числе 9 статей в ведущих научных журналах, рекомендованных ВАК Минобразования РФ (Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук, Сибирский вестник сельскохозяйственной науки, Ветеринарная патология, Аграрный вестник Урала, изданы 7 методических рекомендаций, получено 2 авторских свидетельства и патент на изобретение.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 335 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, практических предложений, приложения. Работа иллюстрирована 23 рисунками и 68 таблицами. Список литературы включает 590 источников, в том числе 275 зарубежных.
Внедрение результатов исследований. Результаты научных исследований использованы при разработке методических рекомендаций, утвержденных на федеральном и региональном уровнях, по культивированию первичных культур клеток и субкультур из легочной ткани плодов коров и буйволиц; по получению сыворотки плодов буйволиц для клеточной биотехнологии и культивирования вирусов; по профилактике и лечению вирусных респираторных заболеваний КРС в хозяйствах Дагестана; по стратегии и принципам применения противовирусных препаратов при вирусных болезнях продуктивных и мелких домашних животных; по профилактике и лечению инфекционных пневмоэнтеритов телят; по комплексной системе профилактики болезней КРС в Республике Дагестан.
Основные положения, выносимые на защиту:
Ц результаты изучения распространения и особенностей проявления вирусных респираторных инфекций КРС в Дагестане и наносимого ими экономического ущерба промышленному животноводству;
Ц результаты комплексных вирусологических, бактериологических, иммунологических и серологических исследований, использованных при изучении этиологической структуры респираторных болезней молодняка крупного рогатого скота;
Ц схема получения и применения лечебных сывороток для профилактики и терапии респираторных болезней в комплексе с противовирусными препаратами;
Ц разработка и эффективность усовершенствованной комплексной научно обоснованной системы мероприятий по профилактике и терапии респираторных болезней молодняка, основанной на рациональном сочетании точной диагностики, специфической профилактики и эффективной терапии смешанных респираторных болезней молодняка КРС, отягощенных наличием лейкоза.
Теоретический анализ, обобщение результатов, экспериментальные исследования выполнены автором самостоятельно.
Автор выражает глубокую благодарность за участие в выполнении некоторых фрагментов диссертации профессору кафедры микробиологии и вирусологии ДГСХА П.Д. Устарханову, заведующему лабораторией биотехнологии-диагностический центр ГНУ ИЭВСиДВ СО РАСХН А.Г. Глотову, а также сотрудникам лаборатории вирусологии Прикаспийского зонального НИВИ.
2. Собственные исследования
2.1. Материалы и методы исследований
Работа выполнялась в период с 1987 по 2008 г. в лаборатории вирусологии ГНУ Прикаспийский зональный НИВИ РАСХН, ОПХ Уйташское НИВИ и в 212 животноводческих хозяйствах 29 районов Республики Дагестан в соответствии с утвержденными планами НИР гостематик (№№ Госрегистрации: 01.9.10.027806; 01.2.00.104429; 15070.77210178217821).
Анализ распространения у телят болезней органов дыхания, наносимого ими экономического ущерба и показатели производственной деятельности животноводческих хозяйств проводили, используя данные ветеринарной отчетности РФ, Департамента ветеринарии при МСХ РД.
При изучении и анализе бактериального пейзажа больных бронхо-пневмонией телят учитывали данные Республиканской ветеринарной лаборатории и результаты собственных исследований.
Экономический ущерб, наносимый промышленному скотоводству болезнями органов дыхания, рассчитывали согласно Справочные работы, таблицы животновода, ветврача, зоотехника (Н. Новгород, 1998).
Распространение вирусных респираторных заболеваний КРС определяли, рассчитывая средний процент проб сыворотки крови, содержащих вируснейтрализующие антитела к вирусам, от числа поступивших из благополучных и неблагополучных по респираторным болезням хозяйств.
Эпизоотические, клинические, патологоанатомические, бактериологические исследования проводили по общепринятым методикам.
Вирусологические исследования проводили согласно стандарту МЭБ (OIE Manual, Manual of Standarts//Chapter 2.3.5., 2000; Chapter 2.10.6., 2004). При массовых обследованиях от больных животных в период выраженных клинических признаков респираторных болезней отбирали и исследовали пробы носовых выделений, от вынужденно убитых - кусочки тканей паренхиматозных органов.
Подготовку проб биоматериала для вирусологических исследований проводили согласно методикам А.Ф. Карышева, В.Н. Сюрина (1980); В.Н. Сюрина, Н.Ф. Фоминой (1979).
Выделение вирусных агентов из патологического материала проводили в первично-трипсинизированных культурах клеток: почка эмбриона коровы (ПЭК), легкие эмбриона коровы (ЛЭК), легкие плода буйволицы (ЛПБ) и их субкультурах.
Для ретроспективной диагностики болезней пробы сыворотки от животных отбирали однократно, а от больных телят - двукратно с интервалом 20Ц23 дня для установления сероконверсии. Пробы хранили при Ц20оС и исследовали одновременно.
Для культивирования культур клеток использовали следующие питательные среды: ИГЛА, 199, 0,5%-ный гидролизат лактальбумина (ГЛА), с добавлением сыворотки крови КРС и без нее.
Жизнеспособность и концентрацию клеток определяли путем окрашивания клеточной суспензии 0,5%-ным водным раствором трипанового синего по методике, описанной Л.П. Дьяконовым и др. (1986, 1988). Субкультуры из монослоя первично-трипсинизированных культур клеток (ПЭК, ЛЭК, ЛПБ) готовили бесцентрифужным методом, описанным В.А. Сергеевым (1963).
Бактериологические исследования проводили по общепринятым методикам с использованием коммерческих дифференциальных питательных сред и тест-систем (СИБ, ПБДЭ, ММТЕ 1 и 2). Изучение культуральных и патогенных свойств выделенных микроорганизмов проводили по общепринятым методикам, а видовую идентификацию - с помощью определителя бактерий Берги (1980).
Серологическую идентификацию вирусов проводили в реакции нейтрализации (РН), реакции гемагглютинации (РГА), реакции торможения гемагглютинации (РТГА), реакции непрямой гемагглютинации (РНГА), реакции иммунодиффузии (РИД) с использованием иммунных к референтным штаммам возбудителей сывороток: ПГ-3 (МВА-1/77), ИРТ (МВА-1/80), аденовируса (Bovine-10) и ВД-БС КРС (ВК-1В1).
Антитела к вирусу ПГ-3 в сыворотке крови животных определяли в РТГА и РНГА, к вирусу ИРТ в РН и РНГА, к аденовирусам в РНГА, к вирусу ВД-БС в РСК и ИФА, к вирусу респираторно-синцитиальной инфекции (РС) в РИД с использованием коммерческих диагностических наборов согласно Методическим указаниям по лабораторной диагностике вирусных респираторных инфекций КРС (1978).
Специфические антитела к вирусу лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) выявляли в РИД и иммуноферментного анализа (ИФА), согласно Методическим указаниям по диагностике лейкоза крупного рогатого скота (утв. 23.08. 2000 г. МСХ РФ).
Для диагностики ПГ-3 в РТГА готовили твин-эфирный антиген по общепринятой методике из полевого штамма ПГ-3 (Аксай).
Устойчивость выделенных изолятов к температуре изучали с применением метода заражения культур клеток прогретым при различных температурах вирусом. Устойчивость к эфиру определяли по методике A. Mayer and M. Bogel (1961), гемадсорбирующие и гемагглютинирующие свойства выделенных ЦПД-агентов - по общепринятым методам. Тип нуклеиновой кислоты определяли с помощью 5-йоддезоксиуридина (JUPR).
Титр вируса рассчитывали по цитопатическому действию с использованием пробирочных культур клеток на 5Ц7-е сутки их инкубирования при 37оС.
Параметры микроклимата определяли общепринятыми методами: содержание аммиака - при помощи газоанализатора УГ-2, скорость движения воздуха - анемометром АСО-3, влажность воздуха - аспирационным психрометром ШБ-4М, бактериальную обсемененность - методом осаждения.
Гематологические исследования проводили по общепринятым методикам (А.А. Кудрявцев с соавт., 1969; Г.А. Симонян с соавт., 1995).
Общий белок в сыворотке крови определяли биуретовым методом по О.Д. Кушмановой и Т.М. Ивченко (1983), лизоцимную активность крови - по В.Г. Дорофейчику (1968), бактерицидную активность сыворотки крови - по О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966), фагоцитарную активность лейкоцитов крови нпо А.И. Иванову и Б.А. Чуклову (1987).
Для получения культуры клеток ЛПБ использовали плоды буйволиц на 4Ц8-м месяцах развития, 0,02%-ный раствор версена, 0,25%-ный раствор трипсина, питательные среды 199, ИГЛА, 0,5%-ный раствор гидролизат лактальбумина (ГЛА), солевой раствор Хенкса, с добавлением 200 Ед/мл пенициллина и 200 мкг/мл стрептомицина.
Цитологические исследования проводили путем выращивания культуры клеток на покровных стеклах с последующей их фиксацией через 24, 48, 72, и 96 ч в жидкости Буэна и окрашиванием гематоксилин-эозином по общепринятой методике.
Чувствительность полученной культуры клеток ЛПБ к вирусам ИРТ (штамм МВА-1/80) и ПГ-3 (штамм ПТК-45) изучали путем их заражения в дозе 2-3 ТЦД на клетку.
Оптимизацию схемы получения гипериммунных сывороток в условиях хозяйств изучали на 60 15Ц18-месячных бычках красно степной породы живой массой 350Ц400 кг, серонегативных к бруцеллезу, лейкозу, лептоспирозу, отрицательно реагирующих на введение туберкулина.
В работе использовали вирусы: ПГ-3 (аттенуированный вакцинный штамм МВА-1/77) с инфекционной активностью 105,0 ТЦД50/мл, ИРТ (аттенуированный вакцинный штамм МВА-1/80) с титром 105,5 ТЦД50/мл, аденовирус (штамм Bovine-10) с титром 104,0 ТЦД50/мл и вирус диареи-болезни слизистых оболочек (аттенуированный вакцинный штамм ВК-1В1) с титром 105,0 ТЦД50/мл. Титры антител к вирусу ПГ-3 контролировали в РТГА.
Противовирусное действие изатизона и сероизатизона в опытах in vitro изучали в перевиваемых линиях культур клеток MDBK и КСТ с использованием референтных штаммов вирусов ИРТ КРС (штамм ТК-А) и ВД-БС КРС (штамм ВК-1), цитотоксичность - микрометодом в культуральных 96-луночных планшетах.
Жизнеспособность клеток оценивали после окрашивания 1%-ным раствором трипанового синего, приготовленного на фосфатном буфере рН 7,2Ц7,3.
Научно-производственные опыты по определению эффективности предложенных препаратов и схем их применения проводили в хозяйствах РД, неблагополучных по респираторным болезням крупного рогатого скота.
Статистическую обработку проводили общепринятыми методами, оценивая доверительный интервал для 95%-ной вероятности.
Достоверность результатов подтверждали путем статистической обработки и определения различий средних значений с помощью критерия Стьюдента. Результаты считали достоверными при Р < 0,05, использовали программу Microsoft Excel.
Экономический эффект проводимых лечебно-профилактических мероприятий рассчитывали согласно методическим рекомендациям по определению экономической эффективности ветеринарных мероприятий, утвержденным ГУВ МСХ и П РФ 21.02.1997 г.
Объем проведенных исследований: серологических - 33087, вирусологических - 1104, бактериологических - 1100, биохимических - 1640, иммунологических - 1670, гематологических - 6900, цитологических - 160, патологоанатомических - 2200, клинических - 10900 проб.
В производственных опытах по изучению профилактической и лечебной эффективности предложенных препаратов и схем использовано 12500 голов КРС.
2.2. Результаты исследований
- Распространение респираторных болезней телят
в Дагестане и наносимый ими экономический ущерб
Анализ ветеринарной отчетности Департамента по ветеринарии при МСХ РД за последние 10 лет свидетельствует о значительном уровне заболеваемости КРС. Так, за период 2000Ц2007 гг. ежегодно заболевало 18645Ц32093 гол., или 23,2Ц32,8% к обороту стада. Заболеваемость молодняка составляла 37,2Ц52,1 % к полученному приплоду, в том числе болезнями органов дыхания - 45,8Ц50,4%, а в стационарно неблагополучных хозяйствах этот показатель достигал 60Ц90%.
Основной процент гибели животных приходится на молодняк - 42,9Ц77,2% от павших, в том числе по причине респираторных болезней ежегодно гибло 41,1Ц50,9% от количества павших и вынужденно убито 45,4Ц57,0% от общего количества вынужденно убитых телят.
В среднем за период 1996Ц2007 гг. заболеваемость молодняка КРС респираторными болезнями колебалась в пределах 45,4Ц50,4%, занимая второе место после болезней органов пищеварения, а в 2006 г. повысилась по сравнению с 1996-м на 4,7%. Падеж телят по причине этой патологии за тот же период ежегодно составлял 41,1Ц50,9% от числа павших, а вынужденный убой - 45,4Ц57,0% от общего числа вынужденно убитых, причем в 2007 г. этот показатель вырос по сравнению с 1996 г. на 11,6%.
Удельный вес к общей заболеваемости и падежу телят от респираторных болезней за 2000Ц2007 гг. составляет, соответственно, 45,8Ц50,4% (рис.1).
Рисунок 1. Заболеваемость и падеж телят от респираторных болезней.
Обозначения: 1 - заболеваемость, 2 - отход
Ущерб от болезней органов дыхания складывался в основном за счет гибели животных и вынужденного убоя. Прямой экономический ущерб от респираторных болезней телят в Республике Дагестан ежегодно составляет 5Ц7 млн руб. Однако, учитывая затраты на проведение ветеринарных мероприятий и недополучение продукции от переболевших животных, размер ущерба можно увеличить в 1,5Ц2 раза.
Результаты исследований показали, что заболеваемость молодняка КРС болезнями органов дыхания выше в горной зоне республики - в среднем за 10 лет наблюдений она ежегодно составляла 55,4%, в равнинной зоне этот показатель на 23,5% ниже - 31,9%, а наименьшее количество больных данной патологией регистрировали в предгорной зоне - 12,7%. Отход телят из-за респираторных болезней в горной зоне был также наиболее высоким - 70,4% от числа павших и вынужденно убито 36,8% от общего количества вынужденно убитых телят.
- Вирусные и смешанные вирусно-бактериальные
инфекции молодняка КРС в Дагестане
Для установления этиологической структуры массовых респираторных заболеваний молодняка КРС в РД провели ретроспективный серологический мониторинг на респираторные вирусные инфекции.
При серологических исследованиях животных, принадлежащих 37 хозяйствам, неблагополучным по респираторным болезням КРС, в 36 выявляли антитела к вирусу ПГ-3 (97,3%), в 33 - ИРТ (89,2%), аденовирусной инфекции (АДВ) - 73,0%, вирусу диареи-болезни слизистых оболочек (ВД-БС) - 59,5% и РСИ - 51,4%.
Во всех хозяйствах установили ассоциированное течение вирусных респираторных инфекций. Наиболее часто (37,8%) выявляли ассоциации трех возбудителей, несколько реже (29,7%) - четырех, еще меньше (21,6%) - пяти, а наименьшая частота встречаемости (10,9%) - у двух антигенов.
На протяжении последних 20 лет (1987Ц2008 гг.) у КРС в неблагополучных по ОРВИ хозяйствах наиболее широко циркулируют возбудители ПГ-3 - количество серопозитивных животных составляет 66,9% от числа обследованных животных, ИРТ - 37,8%, АДВ - 14,1%, ВД-БС - 11,7% и РС - 7,8% (рис. 2).
Рисунок 2 - Результаты ретроспективных серологических исследований
телят на ПГ-3 (1), ИРТ (2), АДВ (3), ВД-БС (4) и РС (5)
При изучении роли вирусов в развитии респираторных болезней КРС установили, что на крупных животноводческих комплексах количество телят с данной патологией в 1,5Ц5 раз превышает количество телят с патологией желудочно-кишечного тракта. Начало вспышек и их интенсивность не связаны с сезонами года, а зависят от сроков завоза животных и времени комплектования групп. Вспышки респираторных заболеваний среди завезенных телят, как правило, регистрировали на 7Ц10-е сутки после формирования секции из вновь поступивших животных, в течение 10Ц15 дней они охватывали 80Ц90% поголовья с последующим падежом 12Ц16% пораженных животных. Ежегодные потери (вынужденный убой и падеж) поголовья по причине респираторных болезней на крупных комплексах составлял 28,2 - 33,4%.
В хозяйствах репродукторного типа респираторные болезни чаще регистрировали в весенний и осенне-зимний периоды с вовлечением соответственно 40,2Ц51,5% и 26,5 - 34,8% от общего количества телят. Падеж составлял 2,6Ц19,3% и 5,1Ц11,0%. Телята болели, начиная с 15Ц20-дневного возраста, массовые респираторные болезни регистрировались у телят 1,5Ц2-месячного возраста. В период вспышки, как правило, на фоне перегруппировки или температурного стресса, заболеваемость достигала 68Ц75%, а падеж - 9,4Ц21%.
Установлено, что хозяйства-поставщики являются источниками возбудителей вирусных респираторных инфекций, возникающих на комплексах, где в одном боксе размещают телят, собранных из нескольких хозяйств с различной эпизоотической ситуацией. В течение 7Ц8 дней телята инфицируются возбудителями вирусных инфекций, вследствие чего возникают вспышки респираторных болезней. В свою очередь, комплексы по выращиванию нетелей способствуют заносу в репродукторные хозяйства вирусов, не регистрировашихся в них ранее.
При проведении вирусологических исследований 65 проб биоматериала от вынужденно убитых телят и 291 пробы носовых выделений, отобранных от больных телят с клиническими признаками ОРВИ, изолировали в 20,5% случаев вирус ПГ-3; в 8,4 - ИРТ; 4,8 - аденовирус; в 3,9% исследованных проб выделенные цитопатогенные агенты идентифицировать не удалось.
В результате исследований в РИФ в 10% проб выявили вирус ИРТ, а в 60% - вирус ПГ-3.
При интраназальном и интратрахеальном заражении телят в возрасте пяти месяцев, серонегативных к вирусам ПГ-3 и ИРТ КРС, изолятом вируса ИРТ КРС в дозе 2 х 6 lg ТЦД50/мл установили его патогенность. Этот изолят был выделен при вспышке ОРВИ на МТК совхоза Хамаматюртовский. Клиническая картина заболевания была аналогичной наблюдаемой в полевых условиях: на третьи сутки после заражения у подопытных телят повысилась температура тела до 40,50С, появились серозно-слизистые истечения из носовых ходов, сухой, лающий кашель, серозный конъюнктивит, слезотечение, положительные трахеальная проба и проба апноэ. При патологоанатомическом вскрытии в верхних дыхательных путях установили изменения, характерные для серозно-катарального воспаления, в легких - мелкодольчатые ателектазы. Телята контрольной группы на протяжении опыта оставались здоровыми.
В хозяйствах, неблагополучных по ИРТ в 25Ц30% случаев кроме респираторной выявляли генитальную форму течения болезни. В таких хозяйствах отмечали увеличение количества абортов и число мертворожденных телят, у коров удлинялся сервис-период, увеличивалось количество перегулов.
Так, при серологическом исследовании животных ОПХ ДагНИИСХ на ИРТ КРС положительно реагировало 71,4% коров, 52,3% нетелей и 21,7% телок разного возраста. Клиническая картина заболевания выявлена у 41,1% коров, 20,5% нетелей; количество абортированных и мертворожденных плодов составило соответственно 10,7 и 6,8%.
Широкому распространению ИРТ в генитальной форме способствовали быки-производители, зараженные вирусом ИРТ. При обследовании племпредприятий РД, вирусоносительство выявлено у 32,4%, а через шесть месяцев - у 75,7% быков, клиническое проявление заболевания регистрировали у 18,9% животных, из эякулята 31,6% быков выделен цитопатогенный агент, в 21,1% идентифицированный как возбудитель ИРТ. В реакции ИФА выявление вируса ИРТ было выше - 47,4% проб.
Одним из факторов, осложняющих ОРВИ у 25Ц45% телят, является бактериальная микрофлора, вызывающая бронхопневмонию при неблагоприятных условиях содержания и несвоевременно проводимой терапии.
При бактериологическом исследовании патологического материала, полученного от вынужденно убитых и павших телят в острой стадии заболевания выделяли, бактерии семейств Pasteurellaceae - 31,4%, Enterobacteriac-ea - 4,9%, родов Streptococcus - 26,7%, Staphylococcus - 22,8%, Mycoplasma - 14,2%. Очевидно, что в этиологии респираторных болезней телят в республике кроме вирусов участвуют ассоциации бактерий разных таксономических групп, которые осложняют протекающий в легкой форме вирусный процесс.
Из носовых секретов больных острыми респираторными инфекциями телят наиболее часто выделяли в 34,7% - Streptococcus, 24% - Mycoplasma, 8,6% - Enterobacteriacea, 9,2% - Staphylococcus, 23,5% культур идентифицировать не удалось. В большинстве случаев выделяли бактериальные ассоциации: 35,6% - два патогена, 26,7% - три, 12,9% - четыре, и только в 24,8% были выделены монокультуры. Выделенные культуры были патогенны для белых мышей: 100% пастерелл, 48% стрептококков, 65% стафилококков в дозе 500Ц750 млн м. т./мышь и 77% энтеробактерий в дозах 360 млн - 1,5 млрд м. т./мышь.
При изучении чувствительности выделенных культур микроорганизмов к 19 антимикробным препаратам, наиболее часто применяемым в хозяйствах республики, не обнаружено ни одного препарата 100% активного по отношению ко всем изолятам. Наиболее активны были: сульфаниламиды (норфлоксацин) - 98,7% исследованных культур, антибиотик пятого поколения абактан - 90,0%, четвертого поколения - гентамицин - 89,3% и неомицин - 87,1%.
2.2.3. Влияние факторов внешней среды на заболеваемость
телят респираторными болезнями
Развитие респираторных болезней зависит не только от наличия возбудителя, но и от факторов внешней среды, снижающих резистентность организма животных.
Исследования по определению влияния условий содержания телят на рост, развитие, показатели общей резистентности, а также на устойчивость к респираторным заболеваниям проводили в комплексе по выращиванию телок колхоза им. Батырмурзаева в реконструированном профилактории № 1 (опытная группа из 210 телок) и профилактории № 2 - 180 телочек (контроль). Животные поступили на выращивание в возрасте 1Ц1,5 месяцев со средней живой массой 65 кг.
Для контроля физиологического состояния по принципу аналогов было отобрано по 20 телят в каждой группе. Учитывали продуктивность, заболеваемость и отход животных.
Изменения параметров микроклимата в обоих профилакториях в различные сезоны года были примерно одинаковыми, но в контрольной группе отмечали повышенное содержание: аммиака - в 3Ц4 раза, микробных тел - в 22Ц33 раза, повышенную температуру воздуха в летний, пониженную - в зимний периоды по сравнению с опытной.
Таблица 1 Ц Влияние микроклимата на прирост живой массы,
заболеваемость и сохранность телят
| Показатели | Профилактория № 1 (опыт) n = 210 | Профилактория № 2 (контроль) n = 180 |
Живая масса в начале опыта, кг | 61,30,3 | 64,00,5 |
Живая масса через 30 дней, кг | 84,10,6 | 80,80,9 |
Живая масса через 60 дней, кг | 104,60,9 | 97,30,8 |
Среднесуточный прирост живой массы, г. | 680,32,0 | 560,48,0 |
Заболеваемость животных / % | 32/15,2 | 66/36,7 |
Отход животных / % | 17/8,1 | 33/18,3 |
У телят опытной группы клинико-физиологические показатели были сравнительно лучше, чем у контроля: температура тела ниже на 0,2Ц0,50С, частота пульса на - 6,3Ц14,6%, частота дыхания - на 10,3Ц20,0%, количество общего белка выше на 4,8Ц9,4%, каротина - на 10,0-38,5%, глюкозы - на 16,7Ц36,7%, резервная щелочность - на 6,9Ц21,3%, бактерицидная активность сыворотки - на 16,8Ц29,3%, количество лейкоцитов ниже на 6,8Ц21,3%.
Заболеваемость телят в опытной группе была ниже на 21,5%, отход - на 10,2%, а среднесуточный прирост массы тела выше на 119,9 г, или 17,6% (табл. 1).
2.2.4. Роль факторов естественной резистентности
при респираторных болезнях телят
Изучение взаимосвязи проявления респираторных болезней телят с общей резистентностью организма животных в условиях Дагестана проводили в комплексе по выращиванию и откорму молодняка КРС Правда Хасавюртовского района, неблагополучном по респираторным заболеваниям. Отход телят в этом комплексе ежегодно составлял от 9,5 до 21,8 %.
Показатели естественной резистентности изучали по сезонам года на 45-телятах 25Ц40-дневного возраста до поступления в комплекс и на 5-, 20- и 35-е сутки после поступления. Определяли в крови количество лейкоцитов и их фагоцитарную активность, общий белок, бактерицидную и лизоцимную активность сыворотки крови.
Проведенными исследованиями установлено, что у телят в зимний период года содержание общего белка было выше на 0,2 г/%, лизоцимная активность на 12%, фагоцитарная - на 11,0% в сравнении с теми же показателями в летние месяцы. В зимний период заболеваемость телят была ниже на 10Ц15%, а отход - на 5,1Ц10,3% по сравнению с летним.
После поступления на комплекс у телят основные показатели естественной резистентности снижались к 5-му дню, а затем, к 20Ц25 дням, нормализовались и к 35Ц40 превышали показатели 1-го дня. Заболевание телят ОРВИ регистрировали на 7-йЦ10-й день после их поступления на комплекс.
Одним из факторов снижения естественной резистентности у КРС в Дагестане является лейкоз КРС. Инфицированные вирусом лейкоза животные выявлены как в племенных, так и в товарных хозяйствах, в общественных и индивидуальных стадах. В общественном секторе доля инфицированных животных составляет 30,3% с колебаниями от 0,3% до 85%, а в индивидуальном - 6,4 с колебаниями от 0,8% до 55,8%. Из 64 обследованных общественных хозяйств 58 неблагополучны по лейкозу КРС. В 46,9% хозяйств инфицированность скота превышает 30%, в 28,1% - варьирует от 10 до 30%, в 15,6% - ниже 10% и 9,4% хозяйств не выявили инфицированных вирусом лейкоза животных.
У инфицированных ВЛКРС животных в крови понижено содержание общего белка, гамма-глобулиновой фракции, микроэлементов (магния, цинка, железа), каротина, глюкозы, снижена фагоцитарная активность лейкоцитов, при увеличении количества Т- и В-лимфоцитов снижена функциональная активность продуцентов иммуноглобулина класса М (табл. 2).
Таблица 2 - Иммунологические показатели телок
в СПК им. У. Буйнакского Кизилюртовского района (М±m; п=30)
Показатели | Результаты исследований | |
Интактные | Инфицированные | |
ФА, % | 27,4±3,22 | 24,6±2,38 |
ФЧ, ед. | 1,95±0,11 | 1,62±0,09* |
ФИ, ед. | 0,53±0,06 | 0,45±0,06 |
ФЕ, 109/л | 0,608±0,21 | 0,515±0,76 |
Зав. фагоцитоза, ед. | 1,33±0,24 | 1,1±0,16 |
Т-лимфоциты, % | 48±7,29 | 62,2±3,09* |
Т-лимфоциты, 109/л | 2,88±0,82 | 3,62±0,85 |
В-лимфоциты, % | 30,6±1,94 | 32,2±0,58 |
В-лимфоциты, 109/л | 1,64±0,35 | 1,74±0,41 |
НБТ сп, % | 44,4±0,56 | 33,4±3,25 |
НБТ сп, СЦИ | 0,686±0,081 | 0,464±0,037* |
НБТ ст, % | 39,6±5,24 | 40,8±3,86 |
НБТ ст, СЦИ | 0,598±0,09 | 0,59±0,047 |
КМ | 0,79±0,131 | 1,504±0,26* |
АСК, % | 13,18±3,35 | 19,62±2,42 |
БАСК, % | 35,06±11,5 | 57,36±12,8 |
Ig G, г/л | 26,3±1,72 | 25,7±3,2 |
Ig M, г/л | 2,4±0,33 | 1,97±0,08 |
*Р > 0,05
Влияние иммуностимуляторов левамизола и иммунофана на иммунобиологические показатели, заболеваемость, сохранность телят и прирост массы тела изучали в двух сериях опытов на телятах красной степной породы на базе СПК им. У.Буйнакского Кизилюртовского района на трех группах коров (2 опытных и контрольная) в возрасте 2Ц4 отела, со сроком стельности 7Ц7,5 мес, сформированных по принципу пар-аналогов.
Все животные получали общий для данной физиологической группы рацион с добавлением минерально-витаминного кормового премикса, нормализующего обменные процессы.
Коровам 1-й опытной группы дважды, с интервалом 14 дней внутри- мышечно вводили 10%-ный раствор левомизола из расчета 1 мг/кг массы тела и вакцину против ПГ-3 и ИРТ КРС инактивированную сорбированную (ВНИИЗЖ, г. Владимир) в дозе 5,0 см3, дважды, с интервалом 14 дней. Телятам, полученным от коров 1-й опытной группы (с 14-дневного возраста) дважды с интервалом 14 дней вводили левамизол, в той же дозе. Коровам и телятам 2-й опытной группы по аналогичной схеме вводили иммунофан (НПП Бионокс, серия 1410204) в объеме 5,0 см3 и 1,0 см3 соответственно. Животным контрольных групп вместо иммуностимуляторов вводили стерильный физиологический раствор.
Телят, полученных от коров опытных и контрольной групп в 14-20-дневном возрасте дважды, с интервалом 14 дней вакцинировали против ПГ-3 и ИРТ. Кровь для проведения гематологических, биохимических, иммунологических серологических исследований брали до применения иммуностимуляторов и через 14 дней после повторного введения препарата. Критериями оценки эффективности применения иммунофана были показатели живого веса телят при рождении, а также заболеваемости, сохранности, прироста живой массы, титры специфических антител к виру ПГ-3.
Установили, что у телят опытных групп нормализовались морфологические и биохимические показатели крови, повысились иммунологические параметры: бактерицидная активность сыворотки крови возросла в среднем на 44,5% по отношению к фоновым показателям и была на 40,1Ц97% выше чем у телят контрольных групп в тот же период. Активность фагоцитоза у подопытных и контрольных животных увеличилась по сравнению с фоновыми показателями, однако у телят опытных групп это увеличение было более значительным
Титры поствакцинальных антител к ПГЦ3 КРС у телят первой опытной группы (левамизол) находились в пределах 8,6 lg2 и колебались от 1:64 до 1:512, у телят второй опытной группы (иммунофан) - 8,8 lg2 с колебаниями в пределах 1:64 - 1:1024. У телят контрольной группы этот показатель составлял соответственно 7,8 lg2, с колебанием титров специфических антител от 1:32 до 1:256.
Заболеваемость телят 1-й опытной группы была ниже, чем контрольной, на 13,3% и составляла в среднем по группам 33,3%, тогда как в контрольной группе этот показатель был равен 46,6%. Во второй опытной группе заболеваемость телят составила 20%, что ниже показателей контроля на 26,6%. Сохранность телят в первой опытной группе также была выше, чем в контрольной, на 6,7%, что составило 86,7% против 80% в контрольной группе. Во второй опытной группе этот показатель был на 20% выше по сравнению с контролем и равнялся 100% - не пал ни один теленок.
2.2.5. Влияние обменных процессов на развитие
болезней органов дыхания
Анализ результатов биохимических исследований сыворотки крови коров из хозяйств-поставщиков в различные сезоны года, свидетельствует, что наиболее серьезные нарушения в организме животных регистрируются в зимний и ранневесенний периоды, тогда же отмечаются вспышки респираторных болезней у молодняка. В эти периоды у коров снижено содержание общего белка по сравнению с летним показателем на 24,6% и 18,0% соответственно, нарушен его фракционный состав за счет снижения гамма-глобулиновой фракции, понижено содержание цинка и каротина, что свидетельствует о наличии дефицита иммунитета (таб. 3).
Таблица 3 Ц Биохимические показатели крови коров
в репродукторных хозяйствах-поставщиках
№ п/п | Показатели | Ед. измерения | Сезоны года | ||
весенний | етний | зимний | |||
1. | Белок | г/л | 62,81,74 | 85,21,37 | 69,73,3 |
2. | Альбумины | % | 43,811,96 | 36,463,61 | 42,53,9 |
3. | Альфа-глобулины | % | 9,590,73 | 12,61,16 | 13,91,1 |
4. | Бета-глобулины | % | 18,061,09 | 15,40,9 | 10,20,9 |
5. | Гамма-глобулины | % | 21,142,15 | 35,62,28 | 34,13,3 |
6. | Глюкоза | ммоль/л | 1,530,11 | 1,550,15 | 1,351,1 |
7. | АST | Ед/мл | 46,22,38 | 47,140,76 | 46,31,8 |
8. | ALT | Ед/мл | 24,234,31 | 26,92,93 | 30,42,8 |
9. | Кальций | ммоль/л | 2,510,03 | 2,670,03 | 2,570,1 |
10. | Фосфор | ммоль/л | 1,890,12 | 2,310,08 | 1,440,06 |
11. | Са/Р | Ед. | 1,490,12 | 1,170,04 | 1,890,14 |
12. | Магний | ммоль/л | 0,930,09 | 1,050,03 | 0,970,07 |
13. | Цинк | мкг/% | 53,84,9 | 94,15,8 | 83,14,2 |
14. | Железо | Мкмоль/л | 16,621,59 | 29,07,4 | 26,62,1 |
15. | Медь | мкг/% | 82,637,62 | 96,78,9 | 104,17,6 |
16. | Каротин | мг/% | 0,150,02 | 2,40,04 | 0,240,03 |
При изучении биохимических показателей телят, поступающих на комплексы в весенний период, у них также установили низкое содержание общего белка - 62,81,74 г/л, гамма-глобулинов - 21,142,15%, цинка - 53,84,9 мкг/% и каротина - 0,150,02. Приведенные нарушения негативно влияют на резистентность организма и могут привести к развитию болезней органов дыхания.
2.2.6. Клинико-эпизоотологические и патологоанатомические
особенности вирусных респираторных заболеваний молодняка КРС
Клинические признаки респираторных заболеваний молодняка КРС с положительной сероконверсией в большинстве обследованных хозяйств были отнотипными: угнетение, повышение температуры тела до 40Ц410С, учащение пульса и дыхания, серозно-катаральный ринит, конъюнктивит, сухой кашель, расстройство желудочно-кишечного тракта. У 15Ц20% телят процесс осложнялся бактериальной микрофлорой и развивалась серозно-катаральная, а затем катарально-гнойная бронхопневмония. При патологоанатомическом вскрытии вынужденно убитых и павших телят отмечали истощение, взъерошенность шерстного покрова, гиперемию слизистых оболочек верхних дыхательных путей, конъюнктивит, гиперплазию региональных лимфоузлов, катарально-гнойную бронхопневмонию с преимущественным поражением верхушечных, сердечных и краниальных участков диафрагмальных долей легких, катаральный энтерит, острый серозный лимфаденит подчелюстных, средостенных и бронхиальных лимфоузлов.
- Применение клеточных культур в диагностике вирусных
респираторных заболеваний крупного рогатого скота
Поскольку используемые для вирусологических исследований перевиваемые и диплоидные клеточные культуры часто контаминированы микоплазмами, а первично-трипсинизированные культуры клеток из тканей плода КРС содержат ингибиторы и возбудителей вирусных болезней, нами были разработаны методы получения первичных культур и субкультур клеток из тканей легкого плода буйволицы, изучены чувствительность полученных культур к вирусам ИРТ и ПГ-3 и особенности ЦПД респираторных вирусов на культуру.
Культуру клеток из ткани легкого готовили методом трипсинизации и эксплантирования тканевых фрагментов.
Оптимальные результаты получили при 10-минутной трипсинизации, рН в пределах 7,2Ц7,4, температуре +30Е+330С и воздействии смеси 0,25% растворов трипсина и Хенкса в соотношении 1:1 и 2:1. Общий выход составил, соответственно, 197,3 и 247,2 тыс. клеток/мл, а их жизнеспособность - в пределах 66,1 и 78,3%.
В качестве ростовой среды использовали равные объемы ГЛА и среды 199 с 10% сыворотки крови КРС.
Для выявления чувствительности культур клеток ЛПБ к респираторным вирусам провели 5 последовательных пассажей. ЦПД возбудителя ИРТ в этой культуре наступало через 44 ч после заражения и характеризовалось округлением клеток, разрыхлением и разрушением монослоя с последующим отторжением клеток от стекла. Цитопатогенное действие вируса ПГ-3 проявлялось через 48 ч (рис. 3)
Титры вируса в субкультуре клеток ЛПБ достигали для ИРТ 5,5 и ПГ-3 Ц 6,6 lg ТЦД 50/мл.
Таким образом, разработаны методы выделения и длительного субкультивирования клеток эпителиоподобного типа из тканей ЛПБ, чувствительности к респираторным вирусам КРС, использованные в дальнейшем для первичного выделения вирусов из патологического материала, идентификации возбудителей и накопления антигенов.
Нами впервые установлена пригодность сыворотки крови плодов буйволиц и буйволят в составе питательных сред для выращивания первичных культур, субкультур и перевиваемых линий клеток.
Рис. 2. Цитопатогенное действие вируса ПГ-3 в культуре клеток ЛПБ
через 45 часов после заражения. Множественные внутрицитоплаз-матические включения (ув. ок. 10, об. 40.
2.2.8. Профилактика болезней органов дыхания
Для профилактики и терапии ОРВИ в условиях хозяйств Дагестана были отработаны схемы получения сыворотки крови реконвалесцентов и гипериммунных лечебных сывороток. Для повышения титров специфических антител использовали левамизол, нуклеинат натрия и пирогенал. Левамизол вводили животным перед гипериммунизацией внутримышечно в дозе 3 мг/кг массы тела трехкратно с интервалом двое суток. Нуклеинат натрия и пирогенал вводили внутримышечно одновременно с вакциной в дозах 60, 100, 200 мг и 200, 400, 600 МЕ на животное.
При использовании стимуляторов антителообразования титры полученной сыворотки повышались на 2Ц4 lg.
Профилактическая эффективность сыворотки крови реконвалесцентов обеспечила сохранность телят опытных групп 90,2%, 89,7%, 92,1%, 89,5% и 96,4%, в сравнении с контролем - 76,5%, 80,9%, 81,8%, 81,7% и 75,0%.
При профилактической аэрозольной обработке 363 телят в карантинном отделении откормочного комплекса Правда Хасавюртовского района отход снизился в 8 раз по сравнению с контролем.
Профилактическая эффективность гипериммунной сыворотки против ПГ-3 при аэрозольной обработке 114 телят из расчета 5 мл на 1 м3 помещения при экспозиции 60 мин была на 13,1% выше, чем в контроле, где применяли аналогичный коммерческий препарат.
Сравнительную профилактическую эффективность гипериммунной поливалентной сыворотки против ИРТ, ПГ-3, ВД-БС при подкожном введении в дозе 1,0 мл/кг массы тела в сравнении с аналогичной коммерческой сывороткой проводили на двух группах клинически здоровых телят 1,5Ц2-месячного возраста с массой тела 45Ц50 кг по 180 гол. в каждой.
Анализируя полученные результаты, установили, что профилактическая эффективность полученной сыворотки на 11,1% выше по сравнению с испытанным коммерческим препаратом.
При изучении в молочном комплексе совхоза Сафаралиевский Хивского района профилактического действия поливалентной лечебной сыворотки на 378 клинически здоровых телятах в возрасте 1,5Ц2 мес массой тела 45Ц55 кг, установили, что в группе телят, обработанных полиспецифической сывороткой, отход составил 8,3%, что в 3,4 раза меньше по сравнению с группой животных, не подвергнутой профилактической обработке (табл. 4).
Таблица 4 - Профилактическая эффективность применения поливалентной сыворотки в молочном комплексе совхоза Сафаралиевский
| Группы животных | Кол-во живот. в группе, гол | В течение 4-х месяцев | ||||||||
Заболело | Пало | В/убито | Сохранность | Среднесут. прирост жив. массы, г | ||||||
гол. | % | гол. | % | гол. | % | гол. | % | |||
1-я опыт- ная | 228 | 66 | 28,9 | 6 | 2,6 | 13 | 5,7 | 209 | 91,7 | 688 |
2-я кон-трольная | 150 | 83 | 55,3 | 13 | 8,7 | 29 | 19,3 | 108 | 72,0 | 568 |
Р < 0,05 | ||||||||||
При проведении широкого производственного опыта по определению профилактической эффективности лечебной сыворотки на 1088 телятах сохранность составила 97,5%, что на 11,2% выше, чем в контроле.
Профилактическая эффективность полученной поливалентной гипериммунной сыворотки в широком производственном опыте была на 23,8% выше коммерческой (Щелковской биофабрики).
Окупаемость затрат при использования полученной гипериммунной поливалентной сыворотки с профилактической целью составила 5,2 руб. на 1 руб. затрат.
Профилактическую активность двух форм изатизона в отношении основных вирусов, участвующих в этиологии смешанных респираторных болезней телят, изучали в условиях in vitro и in vivo.
Проведенными in vitro исследованиями установили, что изатизон в дозе 50 мкг/мл не токсичен для культур клеток. Препарат в указанной дозе, внесенный за 16 и 24 ч в культуру клеток до заражения вирусом ИРТ КРС, приводил к статистически достоверному снижению инфекционной активности вируса (до 2 lg ТЦД50/мл), что свидетельствует о выраженном профилактическом действии изатизона. Однако активность его была значительно выше при внесении через 1,5 и 3 ч после заражения культуры клеток.
Изучение вирулицидного действия изатизона показало, что после совместной инкубации с тест-вирусом при 37оС в течение 30, 60 и 90 мин в соотношении 1:1 препарат снижал инфекционную активность вируса на 0,25 lg ТЦД50/мл (Р > 0,05), что статистически недостоверно. Таким образом, установлено, что изатизон в опытах in vitro не обладает вирулицидным действием в отношении вируса ИРТ КРС.
Для определения профилактической эффективности изатизона in vivo в опыте использовали 100 телят 4Ц6-месячного возраста живой массой более 100 кг, 307 животных аналогичного возраста служили контролем. Телят опытной группы обрабатывали аэрозольно изатизоном во время комплектования групп двукратно с интервалом 24 ч в дозе 2 мл/м3 с экспозицией 40Ц60 мин.
В контрольной группе из 307 животных заболело 100 (32,5%), а в опытной - 11 телят (11,0%).
Профилактическую эффективность нового комплексного препарата сероизатизон (иммунная сыворотка с содержанием 15% изатизона) изучали путем экспериментального заражения телят 2Ц3-месячного возраста. Телят опытной группы, в количестве 9 гол., по истечении 24 ч после парентеральной обработки препаратом в дозе 2,0 мл/гол., интраназально заражали вирулентными штаммами вирусов ПГ-3 и ИРТ в дозе 2 х 5,5 lg ТЦД50/мл, и АДВ КРС в той же дозе 4,5 lg ТЦД50/мл. Телят контрольной группы обрабатывали по аналогичной схеме гипериммунной сывороткой.
Установили, что введение препарата сероизатизон предотвращало развитие клинических признаков заболеваний у всех животных. У телят контрольной группы на 2-е сутки после заражения регистрировали повышение температуры тела до 39,9Ц40,50С и угнетение, на 3Ц4-е сутки - отказ от корма, конъюнктивиты и риниты. На 7-е сутки - хрипы в легких. Продолжительность заболевания у животных составила 10Ц12 сут.
Профилактическую эффективность комплексного препарата, в сравнении с изатизоном и иммунной сывороткой проверяли на 160 телятах 1,5Ц2-месячного возраста, разделенных по принципу аналогов на четынре группы по 40 гол. Жинвотных однократно обрабатывали аэрозольным способом в день завоза и повторно - на 14-, 28 и 42-й день.
Телят первой группы обрабатывали препаратом изатизон совместно с этонией в дозе 2,5 мл/м3, телят второй группы - сывороткой реконвалесцентов в дозе 5 мл/м3, телят третьей группы - гипериммунной сывороткой против ПГ-3, ИРТ, ВД-БС и АДВ в дозе 5 мл/м3, а телят четвертой группы - комплексным препаратом сероизатизон в дозе 5 мл/м3.
Как видно из данных таблицы 5, наибольший профилактический эффект получен в четвертой группе, где использован комплексный препарат сероизатизон - 97,5%, а при использовании препарата изатизон совместно с этонием, сыворотки реконвалесцентов и гипериммунной сыворотки профилактический эффект составил соответственно, 82,5; 82,5 и 85,0%.
Таблица 5 - Сравнительная профилактическая эффективность
иммунной сыворотки, изатизона и сероизатизона при ОРЗ телят
| Груп-па | Применяемые препараты | Доза | Кратность введения | Кол-во обрабо-танных, гол. | Кол-во больных, гол. | Эффек-тивность обработ-ки, % |
| 1-я | Изатизон с этонием | 2,5 мл/м3 | Однократно в день завоза и повторно на 14-, 28- и 42-й день завоза | 40 | 7 | 82,5 |
2-я | Сыворотка реконва-лесцентов | 5 мл/м3 | То же | 40 | 7 | 82,5 |
3-я | Гипериммунная сы-воротка против ПГ-3, ИРТ, ВД-БС и АДВ | 5 мл/м3 | То же | 40 | 6 | 85,0 |
4-я | Комплексный препа-рат сероизатизон | 5 мл/м3 | То же | 40 | 1 | 97,5 |
Включение гипериммунной сыворотки в состав комплексного препарата сероизатизон увеличивает его профилактическую эффективность при респираторных заболеваниях у телят на 15,0% в сравнении с изатизоном.
В связи с острым неблагополучием республики по ПГ-3 и ИРТ молодняка КРС и ранними сроками заболевания телят (младше 20-дневного возраста) нами проведено производственное испытание сухой культуральной ассоциированной вакцины (ВИЭВ) против ПГ-3 и ИРТ КРС в комплексе с гипериммунной сывороткой или препаратом сероизатизон.
При анализе результатов иммунопрофилактики ОРВИ КРС в период с 2005 по 2008 г. полученных по 5890 животным из 12 хозяйств республики, установили, что заболеваемость невакцинированных телят до 6-мес составила 56,8%. В хозяйствах, где в течение четырех лет проводилась целенаправленная специфическая профилактика вирусных респираторных инфекций этот показатель составил 9,8% (табл. 6).
Таблица 6 - Эффективность вакцинации против вирусных респиратор-
ных инфекций в хозяйствах Дагестана (данные по 12 хозяйствам)
Кол-во неблагополучных по ИРТ КРС пунктов | Кол-во живот-ных, гол | Привито (гол) | Кол-во пунктов, где регистрировались случаи респираторных болезней, % от общего числа | Кол-во заболевших животных, гол./заболевае-мость, % |
8 | 4520 | 4520 | 1/16,7 | 445/9,8 |
4 | 1370 | 0 | 4/100 | 778/56,8 |
Экономическая эффективность вакцинации составляет 19,8 руб. на, 1 руб. затрат.
2.2.9. Терапия респираторных болезней телят
ечебную эффективность гипериммунной поливалентной сыворотки
изучали в условиях откормочного комплекса совхоза Тамазатюбинский Бабаюртовского района, где в результате комплексных исследований был установлен ПГ-3 КРС.
Были сформированы 2 группы телят 1Ц1,5-месячного возраста. Животным опытной группы (180 гол.) подкожно вводили гипериммунную сыворотку против ПГ-3, ИРТ, АДВИ и ВД-БС по 2 мл/кг массы животного дважды с интервалом 48 ч. Животным контрольной группы (178 гол.) внутримышечно вводили хлортетрациклин в дозе 15 тыс. ЕД/кг 2 раза в сутки пять дней подряд.
Установили, что лечебная эффективность гипериммунной сыворотки составил 75,0%, что на 12,1% выше, чем в контроле. Среднесуточный прирост живой массы у телят опытной группы на 26 г выше, чем в контроле.
В сравнении с коммерческой поливалентной сывороткой терапевтический эффект от применения препарата, изготовленного в условиях хозяйств, выше на 13,6% (табл. 7).
Таблица 7 - Терапевтическая эффективность поливалентной
сыворотки при пневмоэнтеритах телят
Группы телят | Количество, гол./ % | Пало, гол./ % | Вынужденно убито, гол./ % | Отход, гол./ % |
1-я опытная | 230 | 4/1,7 | 14/6,1 | 18/7,8 |
2-я контрольная | 140 | 10/7,1 | 20/14,3 | 30/21,4 |
Окупаемость затрат от использования полученной гипериммунной поливалентной сыворотки с лечебной целью составила 3,3 руб. на 1 руб. затрат.
Определение лечебной эффективности сероизатизона проводили на 65 телятах с клиническими признаками ОРЗ, обрабатывали аэрозольно двукратно в дозе 5 мл/м3, три дня подряд. Для лечения 78 больных телят контрольной группы использовали по той же схеме коммерческую сыворотку против ПГ-3 и ИРТ.
Установили, что терапевтическая эффективность сероизатизона в сравнении с гипериммунной сывороткой выше на 8,4% (11,5% телят вынужденно убито в контрольной и 2 теленка - 3,1% - в опытной).
На основании полученных результатов в Республике Дагестан была разработана и внедрена комплексная система мероприятий по профилактике и лечению ОРВИ молодняка КРС, включающая проведение общехозяйственных мероприятий, снижение неблагоприятных воздействий техногенных стрессов, обеспечение пассивной гуморальной защиты телят, повышение неспецифической и специфической резистентноси, проведение этиопатогенетической терапии больных.
Предложенная система обеспечивает благополучие хозяйств по респираторным вирусным болезням КРС и повышает сохранность телят до 96Ц97%. Экономический эффект составляет 5,8 руб. на 1 руб. затрат.
2.2.10. Комплексная система мероприятий по профилактике
и терапии вирусных респираторных болезней молодняка КРС
Респираторные болезни молодняка КРС широко распространены в хозяйствах Дагестана и наносят значительный экономический ущерб.
Сложная этиологическая структура и разнообразие факторов, способствующих возникновению и развитию болезней органов дыхания осложняют диагностику, профилактику и терапию животных. Поэтому в настоящее время системы и методы оздоровления хозяйств от этих заболеваний, используемые без учета региональных особенностей и проведения комплексной диагностики не всегда эффективны.
Учитывая широкое распространение на территории Дагестана ИРТ КРС, и то, что одним из факторов передачи возбудителя является инфицированная сперма племенных быков, следует оздоравливать племпредприятия согласно разработанной нами схеме.
Мероприятия включали:
Ц выявление и выбраковку быков с клиническими признаками заболевания;
Ц вирусологические исследования спермы, полученной от латентно инфицированных быков и выбраковку серий спермы, содержащих вирус;
Ц комплектование племпредприятий только серонегативными животными после получения двукратных отрицательных результатов в период карантинирования в течение 60 дней;
Ц профилактическую иммунизацию животных инактивированной вакциной против ИРТ КРС, согласно наставлению по применению, перед переводом их в общее стадо;
Ц пассивную иммунизацию бычков 15Ц30-дневного возраста, предназначенных для ввода на племпредприятия, сывороткой крови животныхЦреконвалесцентов, гипериммунной сывороткой или сероизатизоном по схеме: первый раз в хозяйстве-поставщике в дозе 2 мл/кг массы, а затем в период карантинирования в возрасте 30, 45 и 60 дней;
Ц иммунизацию ремонтного молодняка (после завершения схемы пассивной иммунизации) в возрасте 2Ц2,5 мес инактивированной вакциной против ИРТ КРС;
Ц исследование сыворотки крови быков на наличие антител к вирусу ИРТ КРС. Повторную иммунизацию серонегативных животных инактивированной вакциной;
Ц исследование спермы быков-производителей два раза в год на контаминацию вирусом ИРТ КРС.
При ассоциированных эпизоотических процессах в практических условиях решающее значение имеют рациональные схемы использования вакцин в сочетании с зоотехническими, зоогигиеническими, ветеринарно-санитарными мероприятиями, обеспечивающими создание и поддержание определенного уровня напряженности иммунитета.
Для этого следует:
1. Организовать проведение комплексных эпизоотологических и лабораторных исследований для постановки точного диагноза и установления этиологической структуры с применением серологических тестов (РТГА, РНГА, ИФА, РДП, РН), вирусологических (выделение на культурах клеток ЛЭК, ЛПБ, ПТ, МДБК и др.), бактериологических с определением чувствительности выделенной микрофлоры к антимикробным препаратам.
2. Обеспечить получение здорового приплода с высоким уровнем иммунитета за счет полноценного кормления матерей, специфической иммунизации стельных коров с учетом этиологической структуры возбудителей, создания оптимальных условий содержания и обеспечения моциона глубокостельных коров.
3. Обеспечить пассивную гуморальную защиту путем создания напряженного колострального иммунитета с дополнительным применением гипериммунных сывороток, полученных в условиях хозяйств, сыворотки крови реконвалесцентов или сероизатизона.
4. Снизить неблагоприятное действие техногенных стрессов за счет:
- обеспечения оптимальных параметров микроклимата;
- улучшения санитарного состояния животноводческих помещений;
- комплектации промышленных комплексов здоровыми телятами с однородным иммунным статусом.
5. Повысить неспецифическую резистентность организма телят, для чего:
- нормализовать обменные процессы за счет применения витаминно-минеральных премиксов;
Ц повысить активность клеточного звена иммунитета за счет применения иммуностимулирующих препаратов левамизол и иммунофан.
6. Повысить специфическую резистентность КРС за счет:
Ц применения гипериммунной сыворотки против ПГ-3, ИРТ и АДВ, сыворотки реконвалесцентов и сероизатизона при переводе телят на комплексы и формировании возрастных групп;
Ц парентеральной иммунизации телят в 25Ц30-дневном возрасте;
Ц создания единого иммунного фона в репродукторных хозяйствахЦпоставщиках путем реиммунизации против ПГ-3, ИРТ и АДВ КРС телят в возрасте 6 мес и телок перед случкой;
- проведение серологического контроля напряженности поствакцинального иммунитета.
7. Проводить этиопатогенетическую терапию при заболевании телят острыми респираторными инфекциями:
- аэрозольное и парентеральное применение гипериммунной сыворотки с лечебной целью;
- аэрозольное и парентеральное применение противовирусного препарата изатизон;
- аэрозольное и парентеральное применение комплексного препарата сероизатизон.
Противоэпизоотическая эффективность разработанной нами комплексной системы мероприятий по профилактике и терапии респираторных болезней молодняка КРС, основанной на рациональном сочетании точной диагностики, специфической профилактики и эффективной терапии смешанных патологий органов дыхания, отягощенных лейкозом, при ее многолетнем применении обеспечивает эпизоотическое благополучие поголовья КРС по респираторным инфекциям молодняка и повышает сохранность до 97,5Ц98% от количества полученных телят. Экономический эффект от ее внедрения составил 9,8 руб. на 1 руб. затрат.
3. ВЫВОДЫ.
1. Респираторные болезни крупного рогатого скота широко распространены в Республике Дагестан. Ежегодно болезнями органов дыхания заболевает 45,8Ц50,4% телят, а гибнет (падеж и вынужденный убой) 9,8Ц13,1% от числа заболевших. В стационарно неблагополучных хозяйствах респираторные болезни регистрируются у 60Ц90% телят, а отход достигает 45Ц60%. Максимальную заболеваемость (55,4%) и летальность (66,5%) регистрировали в горной зоне республики.
2. Экономический ущерб от болезней органов дыхания складывается в основном за счет гибели животных, их вынужденного убоя, резкого снижения продуктивности больного и переболевшего скота и затрат на проведение ветеринарных мероприятий. Убытки от переболевания в 2007 г. 4063 телят превысили 6,3 млн руб., а потери при гибели 1066 гол. молодняка КРС - около 4 млн рублей. Таким образом, прямой экономический ущерб от респираторных болезней КРС в РД превысил 10 млн руб.
3. Парагрипп-3 КРС поражает телят с 20Ц25-дневного возраста. Болезнь охватывает 60Ц80% поголовья, проявляется ринитами, кератоконъюнктивитами, гипертермией в пределах 40Ц41оС. ИРТ протекает в двух формах: респираторной, при которой болезнь охватывает 60Ц70% телят до 2Ц3-месячного возраста и генитальной, при которой наблюдаются массовые задержания последа, эндометриты, аборты в третьем триместре стельности, пустулезные вульвагиниты, у быков - баланопоститы. Инфицированность быков производителей возбудителем ИРТ составляет - 32,4Ц75,7%, коров и нетелей - 52,3Ц71,4%. Аденовирусной инфекцией заболевают, как правило, телята 30Ц45-дневного возраста. Болезнь протекает с клиническими признаками поражения верхних дыхательных путей, кератоконъюнктивита, у 10Ц15% телят развивается диарея. Охват поголовья в период вспышек - 40Ц75%, отход - 3Ц5%.
4. Основным источником респираторных инфекций молодняка КРС на комплексах являются инфицированные животные из хозяйств-поставщиков. В репродукторных хозяйствах - носители возбудителей в латентной форме. Распространению ИРТ КРС способствует использование спермы быков-вирусоносителей. Основные этиологические агенты, вызывающие острые респираторные вирусные инфекции в РД - вирусы ПГ-3 - в 97,3%, ИРТ - 89,2%, АДВ - 73%, ВД-БС - 59,5%, РС - 51,4%. Ассоциированное течение ОРВИ регистрировали в 100% случаев: двух возбудителей - 10,8%, трех - 37,8%, четырех - 21,6% и пяти - 29,7%.
5. Течение ОРВИ у телят в крупных специализированных комплексах и на товарных фермах различно: на комплексах заболевание начинается на 7-еЦ10-е сутки после формирования секций с охватом 80Ц90% поголовья. В репродукторных хозяйствах клиническое проявление болезни регистрируется с 20Ц25-дневного возраста, поражает 18Ц40% приплода.
6. В этиологической структуре бактериальных агентов, осложняющих течение вирусных болезней и вызывающих бронхопневмонию, ведущее место занимают Pasteurella - 31,4%, Streptococcus - 26,7%, Staphylococcus - 22,8%, Mycoplasma - 14,2%, Enterobacteriaceae - 4,9%. В 75,2% случаев изолировали бактериальные ассоциации. Выделенные культуры микроорганизмов были патогенны для белых мышей в дозе 360 млн - 1,5 млрд микробных тел/мышь, резистентны к большинству применяемых в хозяйствах Дагестана антибиотиков. Наибольшей активностью обладали норфлоксацин - 98,7%, абактан - 90,0%, гентамицин - 89,3% и неомицин - 87,1%.
7. На возникновение и развитие респираторных болезней молодняка КРС существенное влияние оказывают факторы внешней среды, снижающие резистентность организма животных: условия содержания, микроклимат помещений, нарушение обменных процессов в результате неадекватного кормления, техногенные стрессы. В условиях республики выраженным индуктором иммуносупрессии является вирус лейкоза крупного рогатого скота.
При профилактике респираторных болезней телят для повышения иммунной реактивности целесообразно применение иммуностимуляторов, активизирующих клеточное звено иммунитета - левамизол и иммунофан. Наиболее эффективной при профилактике и терапии респираторных болезней является схема совместного использования иммуномодуляторов, специфических биологических средств и препаратов, обладающих противовирусной активностью.
8. При респираторных заболеваниях телят профилактическая эффективность лечебных сывороток, полученных в условиях хозяйств, на 23,8 - 26,4% выше, чем у аналогичного коммерческого препарата, а терапевтическая эффективность выше на 3,3Ц13,6%.
Для повышения активности гипериммунной сыворотки в качестве стимулятора антителообразования наиболее эффективным и экономически приемлемым является левамизол.
9. Препараты изатизон и сероизатизон обладают выраженной противовирусной активностью при профилактическом применении. Аэрозольное применение изатизона в концентрации 2 мл/м3 снижает заболеваемость телят ОРВИ на 21,5%. При аэрозольном применении комплексного препарата сероизатизон заболеваемость телят снизилась на 28%, отход - в 4,8 раза. При
включении гипериммунной сыворотки в состав комплексного препарата сероизатизон его профилактическая эффективность возрастает на 2,5Ц15%.
10. Профилактическое применение сухой культуральной ассоциированной вакцины (ВИЭВ) против ПГ-3 и ИРТ в комплексе с парентеральным введением гипериммунной сыворотки и (или) сероизатизона (в дозе 1Ц1,5 мл/кг массы тела, трижды, с первого дня жизни с интервалом 7 сут), повышает эффективность профилактических мероприятий, снижая заболеваемость телят респираторными болезнями на 47%, повышая сохранность на 76,9% и среднесуточный прирост массы тела - на 16,1%. Экономическая эффективность предложенной схемы вакцинопрофилактики составляет 9,8 руб. на 1 руб. затрат.
11. Система оздоровления хозяйств от респираторных болезней, включающая в себя кроме методов и средств специфической и неспецифической этиотропной профилактики и терапии мероприятия, способствующие повышению резистентности организма животных, обеспечивает благополучие хозяйств и повышает сохранность телят до 97,5Ц98%.
4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
По материалам научных исследований издано 7 методических рекомендаций, которые используются в научных, учебных и производственных целях:
Ц Методические рекомендации по культивированию первичных культур клеток и субкультур из ткани легкого плодов крупного рогатого скота (М., 1985; рассмотрены и рекомендованы для издания на заседании секции Биология, общая и сравнительная патология животных Отделения ветеринарии ВАСХНИЛ, протокол № 2 от 03.06.1985 г.).
Ц Методические рекомендации по профилактике и лечению вирусных респираторных заболеваний крупного рогатого скота в хозяйствах Дагестана (Махачкала, 1991; рассмотрены и утверждены секцией ветеринарии НТС МСХиП ДАССР, протокол № 15 от 23 декабря 1991 г.).
Ц Методические рекомендации по культивированию первичных культур клеток, субкультур и эксплантатов из ткани легкого плодов буйволиц (М., 1999; рассмотрены и рекомендованы для издания на секции Ветеринарная биотехнология Отделения ветеринарной медицины РАСХН, протокол № 3 от 09.06.1999 г.).
Ц Методические рекомендации по получению сыворотки крови плодов буйволиц для клеточной биотехнологии и культивирования вирусов (М., 2004; рассмотрены и утверждены на секции Ветеринарная биотехнология Отделения ветеринарной медицины РАСХН, протокол № 1 от 30 марта 2004 г.).
Ц Методические рекомендации по профилактике и борьбе с лейкозом крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах Прикаспийского региона РФ (Махачкала, 2005; рассмотрены и одобрены ученым советом Прикаспийского зонального НИВИ 24.06.2005 г. и утверждены НТС Комитета Правительства РД по ветеринарии, протокол № 15 от 29.06.2005 г.).
Ц Стратегия и принципы применения противовирусных препаратов при вирусных болезнях продуктивных и мелких домашних животных (Новосибирск, 2007; рассмотрены и утверждены ученым советом ГНУ ИЭВСиДВ СО РАСХН, протокол № 3 от 30.10.2007 г. и подсекцией Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока Отделения ветеринарной медицины РАСХН, протокол № 3 от 30.10.2007 г.).
Ц Комплексная система оздоровления и профилактики лейкоза крупного рогатого скота в Республике Дагестан на 2008-2015 гг. (Махачкала, 2008; рассмотрены и одобрены ученым советом Прикаспийского зонального НИВИ 27.02.2008 г. и утверждены НТС Департамента по ветеринарии при МСХ РД, протокол № 1 от 12.03.2008 г.).
5. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ
ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Методические рекомендации по культивированию первичных культур клеток и субкультур из ткани легкого плодов крупного рогатого скота/Соавт.: Л.П. Дьяконов, Д.В. Лобунцова, Б.П. Аспанидзе и др. - М., 1985. Ц8 с.
2. А. с. № 1306121 А 1 4 С 12 N 5/00. Штамм культивируемых клеток легкого плода коровы для культивирования вирусов / Соавт.: Л.П. Дьяконов, Д.В. Лобунцова, Б.П. Аспанидзе и др.// ВИЭВ. Заявка № 3963118/28-13. Приоритет изобретения от 22.08.1985 г.
3. А. с. № 1369285 А 1 4 С 12 N 7/00, А 61 К 39/00. Способ получения протективного антигена для профилактики герпесвирусных инфекций животных / Соавт.: К.П. Юров // ВИЭВ. Заявка № 3953627/30-13. Приоритет изобретения от 09.09.1985 г.
4. Методические рекомендации по профилактике и лечению вирусных респираторных заболеваний крупного рогатого скота в хозяйствах Дагестана / Соав.: П.Д. Устарханов. - Махачкала, 1991. Ц18 с.
5. Клинико-эпизоотологические и патоморфологические особенности острых респираторных заболеваний телят в промышленных комплексах Республики Дагестан / Соавт.: П.Д. Устарханов, Х.М. Гайдарбекова // Состояние и перспективы развития животноводства в Дагестане: Материалы респуб. науч.-практ. конф. - Махачкала, 1996. ЦС. 79Ц80.
6. Разработка и применение экологически чистых препаратов при острых респираторных заболеваниях телят / Соавт.: П.Д. Устарханов, Б.М. Гаджиев, Х.М. Гайдарбекова // Проблемы сельскохозяйственной экологии: Материалы респуб. науч.-практ. конф. - Махачкала, 1997. ЦС. 149Ц151.
7. Применение химиотерапевтических средств на основе сыворотки реконвалесцентов для профилактики и лечения вирусных инфекций в хозяйствах Республики Дагестан / Соавт.: Б.М. Гаджиев, П.Д. Устарханов // Проблемы сельскохозяйственной экологии: Материалы респуб. науч.-практ. конф. - Махачкала, 1997. ЦС. 54-55.
8. Ассоциированные респираторные заболевания животных в Дагестане, их лечение и профилактика / Соавт.: П.Д. Устарханов, Б.М. Гаджиев, Х.М. Гайдарбекова // Проблемы сельскохозяйственной экологии: Материалы респуб. науч.-практ. конф. - Махачкала, 1997. ЦС. 108-109.
9. Изучение ростстимулирующей активности сыворотки крови плодов буйволиц/Соавт.: Х.М. Гайдарбекова // Проблемы сельскохозяйственной экологии: Материалы респуб. науч.-практ. конф. - Махачкала, 1997. ЦС. 114-115.
10. Питательная среда для культур клеток, содержащая сыворотку крови буйволят / Соавт.: Х.М. Гайдарбекова, А.И. Алиев // Разработка и производство диагностических сухих питательных сред и микротестсистем: Материалы Междунар. науч. конф. - Махачкала, 1998. ЦС. 58Ц60.
11. Профилактика и лечение пневмоэнтеритов телят / Соавт.: П.Д. Устарханов, А.И. Алиев, Х.М. Гайдарбекова//Достижения и современные проблемы развития науки в Дагестане: Тез. докл. Междунар. конф. - Махачкала, 1999. ЦС. 278Ц279.
12. Методические рекомендации по культивированию первичных культур клеток, субкультур и эксплантатов из ткани легкого плодов буйволиц / Соавт.: Т.В. Гальнбек, Х.М. Гайдарбекова, А.И. Алиев. - М., 1999. - 9 с.
13. Моноспецифическая сыворотка против парагриппа-3 крупного рогатого скота / Соавт.: А.И. Алиев, Х.М. Гайдарбекова // Проблемы ветеринарии в Дагестане в современных условиях: Тез. докл. респуб. науч.-практ. конф. - Махачкала, 2000. ЦС. 11Ц12.
14. Результаты серологической диагностики респираторных заболеваний телят в хозяйствах Дагестана / Соавт.: П.Д. Устарханов, А.И. Алиев, Х.М. Гайдарбекова // Проблемы ветеринарии в Дагестане в современных условиях: Тез. докл. респуб. науч.-практ. конф. - Махачкала, 2000. ЦС. 12-14.
15. Респираторные заболевания телят в Прикаспийском регионе, лечение и профилактика их / Соавт.: П.Д. Устарханов, Ю.Х. Гамидов // Новые фармакологические средства для животноводства и ветеринарии: Материалы науч.-практ. конф. - Краснодар, 2001. ЦТом 2. ЦС. 221Ц223.
16. Получение поливалентной гипериммунной сыворотки против пневмоэнтеритов телят / Соавт.: А.И. Алиев, Ю.С. Салихов, Х.М. Гайдарбекова // Проблемы сохранения, рационального использования и воспроизводство природно-ресурсного потенциала Республики Дагестан: Материалы респуб. науч.-практ. конф. - Махачкала, 2001. ЦС. 109Ц110.
17. Чувствительность культур клеток из тканей легкого плода буйволицы к некоторым респираторным вирусам / Соавт.: Х.М. Гайдарбекова, А.И. Алиев // Тез. докл. XV науч.-практ. конф. по охране природы Дагестана. - Махачкала, 2001. ЦС. 197Ц198.
18. Некоторые ветеринарно-медицинские аспекты вируса лейкоза крупного рогатого скота / Соавт.: А.И. Алиев, Ю.С. Салихов // Сб. науч. тр. Дагестан. противочумной станции. - Махачкала, 2002. ЦС. 193Ц196.
19. О лейкозе крупного рогатого скота в Дагестан/ Соавт.: Ю.С. Салихов // Актуальные проблемы ветеринарной медицины: Тез. докл. респуб. науч.-прак. конф. - Махачкала, 2002. ЦС. 62Ц63.
20. О состоянии эпизоотической обстановки по лейкозу крупного рогатого скота в Республике Дагестан / Соавт.: Ю.С. Салихов, А.Р. Мустафаев // Проблемы ветеринарной медицины в условиях реформирования с.-х. производства: Материалы Междунар. юбил. науч.-практ. конф. - Махачкала, 2003. ЦС. 30Ц32.
21. Лейкоз крупного рогатого скота в равнинной зоне Республики Дагестан / Соавт.: Ю.С. Салихов // Проблемы ветеринарной медицины в условиях реформирования с.-х. производства: Материалы Междунар. юбил. науч.-практ. конф. - Махачкала, 2003. ЦС. 52Ц54.
22. Патоморфология лейкозов крупного и мелкого рогатого скота в Дагестане / Соавт.: П.Д. Устарханов // Проблемы ветеринарной медицины в условиях реформирования с.-х. производства: Материалы Междунар. юбил. науч.-практ. конф. - Махачкала, 2003. ЦС. 92Ц93.
23. Методические рекомендации по получению сыворотки крови плодов буйволиц для клеточной биотехнологии и культивирования вирусов / Соавт.: Т.В. Гальнбек, Х.М. Гайдарбекова и др. - М., 2004. Ц11 с.
24. Эпизоотическая обстановка по лейкозу крупного рогатого скота в сельхозпредприятиях Дагестана / Соавт.: П.Д Устарханов, Ю.С. Салихов, А.Р. Мустафаев // Вестник ветеринарии. Ц2004. Ц№ 3. ЦС. 7Ц12.
25. Патент 2240115 Российской Федерации, МПК7 С2 А 61 К 31/175, А 61 Р 1/00, 31/00, 31/12. Способ профилактики респираторных заболеваний крупного рогатого скота / Соавт.: П.Д. Устарханов, А.Д. Алиев, Б.М. Гаджиев; заявитель и патентообладатель ГНУ Прикаспийский зональный НИВИ РАСХН Ц№ 2002103666; заявл. 08.02.2002; опубл. 10.09.03. Бюл. Ц№ 25.
26. Распространение респираторных и желудочно-кишечных болезней молодняка крупного рогатого скота в хозяйствах Республики Дагестан / Вестник ветеринарии. Ц2005. Ц№ 4. ЦС. 32Ц37.
27. Методические рекомендации по профилактике и борьбе с лейкозом крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах Прикаспийского региона РФ /Соавт.: Ю.С. Салихов, М.Н. Мусаева и др.Ц Махачкала, 2005.Ц23 с.
28. Проблемы лейкозов крупного рогатого скота в Дагестане / Соавт.: П.Д. Устарханов // Сб. науч. тр. - Ставрополь: Агрус. Ц2005. ЦС. 158Ц160.
29. Анализ ветеринарной отчетности по желудочно-кишечным и респираторным болезням крупного рогатого скота в хозяйствах Республики Дагестан / Сельскохозяйственная наука Республики Мордовия: достижения, направления развития: Материалы Всерос. науч.-практ. конф. - Саранск, 2005.ЦТом 2. ЦС. 351Ц352.
30. Профилактика вирусных респираторных заболеваний крупного рогатого скота /Соавт.: М.Н. Мусаева, Т.Т. Рагимова //Лекарственные средства для животных и корма. Современное состояние и перспективы: Тезисы док. Всерос. конф. - М., 2005. ЦС. 61Ц63.
31. Эпизоотическая ситуация по лейкозу крупного рогатого скота в личных подсобных хозяйствах Дагестана / Соавт.: Ю.С. Салихов, М.Н. Мусаева, Т.Т. Рагимова // Естественные науки в решении проблем производства, экологии и медицины: Материалы Всерос. науч.-практ. конф. - Назрань, 2006. ЦС. 307.
32. К вопросу изучения лейкоза крупного рогатого скота в Дагестане / Соавт.: Ю.С. Салихов, Т.Т. Рагимова // Актуальные проблемы ветеринарии в современных условиях: Материалы междунар. науч.-практ. конф. - Краснодар, 2006. ЦС. 117Ц118.
33. Определение антибиотикочувствительности штаммов E. coli / Соавт.: М.Н. Мусаева //Антибиотикорезистентность и антимикробная химиотерапия: Материалы Всерос. науч.Цпракт. конф. - Махачкала, 2006. ЦС. 91Ц92.
34. Оригинальный метод получения протективного антигена для профилактики герпесвирусных инфекций животных // Основные проблемы, тенденции и перспективы устойчивого развития с. -х. производства: Сб. статьей Междунар. науч.-практ. конф. - Махачкала, 2006. ЦТом. 2. ЦС. 58Ц59.
35. Культура клеток из ткани легкого плода буйволицы / Соавт.: Х.М. Гайдарбекова, Т.Т. Рагимова // Вестник РАСХН. Ц2007. Ц№ 2. ЦС. 86-87.
36. Эпизоотологический мониторинг лейкоза крупного рогатого скота в хозяйствах Дагестана / Соавт.: А.Р. Мустафаев, Ю.С. Салихов // Научное обеспечение ветеринарного обслуживания животноводства в условиях реформирования с. -х. производства: Материалы науч.-производст. конф. - Вологда, 2007. ЦС. 28Ц33.
37. Эпизоотологический мониторинг лейкоза и туберкулеза крупного рогатого скота в хозяйствах Республики Дагестан / Соавт.: Р.А. Нуратинов // Ветеринарная патология. Ц2007. Ц№ 2 (21). ЦС. 123Ц127.
38. Распространение онковируса крупного рогатого скота в РД / Соавт.: Р.А. Нуратинов // Биологическое разнообразие Кавказа: Материалы 1Х Междунар. конф. - Махачкала, 2007. ЦС. 251Ц253.
39. Инфицированность людей и различных видов животных вирусом лейкоза крупного рогатого скота/ Соавт.: Р.А. Нуратинов//Биологическое разнообразие Кавказа: Материалы 1Х Междунар. конф. - Махачкала, 2007.ЦС. 253.
40. Роль человека и различных видов животных в формировании природных резервуаров ВЛКРС / Соавт.: П.Д. Устарханов, Ю.С. Салихов, А.Р. Мустафаев // Образование, наука, инновационный бизнес - сельскому хозяйству регионов: Материалы Всерос. науч.-практ. конф. - Махачкала. -2007. -С. 226.
41. Стратегия и принципы применения противовирусных препаратов при вирусных болезнях продуктивных и мелких домашних животных (Рекомендации)/ Соавт.: Т.И. Глотова, А.Г. Глотов, Т.Б. Тугунова и др. - Новосибирск, 2007. - 44 с.
42. Лейкоз крупного рогатого скота в Дагестане / Соавт.: А.Р. Мустафаев, Ю.С. Салихов // Российский ветеринарный журнал. Ц2007. Ц№ 4. ЦС. 28Ц29.
43. О профилактике вирусных респираторных заболеваний телят/Соавт.: П.Д. Устарханов, Б.М. Гаджиев //Основные проблемы ветеринарной медицины и стратегия борьбы с заболеваниями с. -х. животных в современных условиях: Сб. науч. тр. Прикаспийского ЗНИВИ. - Махачкала, 2007. ЦС. 74Ц79.
44. Ретроспективная диагностика инфицированности крупного рогатого скота и овец аденовирусом и вирусом парагриппа-3 // Основные проблемы ветеринарной медицины и стратегия борьбы с заболеваниями с. -х. животных в современных условиях: Сб. науч. тр. Прикаспийского ЗНИВИ. - Махачкала, 2007. ЦС. 79Ц81.
45. Инфицированность вирусом лейкоза животных различных возрастов / Соавт.: М.Н. Мусаева, А.Р. Мустафаев // Основные проблемы ветеринарной медицины и стратегия борьбы с заболеваниями с. -х. животных в современных условиях: Сб. науч. тр. Прикаспийского ЗНИВИ. - Махачкала, 2007. ЦС. 81Ц83.
46. Инфицированность разных пород крупного рогатого скота вирусом лейкоза / Соавт.: Ю.С. Салихов, А.Р. Мустафаев // Основные проблемы ветеринарной медицины и стратегия борьбы с заболеваниями с. -х. животных в современных условиях: Сб. науч. тр. Прикаспийского ЗНИВИ. - Махачкала, 2007. ЦС. 83Ц87.
47. Эпизоотическая ситуация среди новорожденных телят с желудочно-кишечной патологией в хозяйствах Дагестана / Соавт.: М.Н. Мусаева // Основные проблемы ветеринарной медицины и стратегия борьбы с заболеваниями с. -х. животных в современных условиях: Сб. науч. тр. Прикаспийского ЗНИВИ. - Махачкала, 2007. ЦС. 87Ц90.
48. Комплексная система оздоровительных мероприятий при острых респираторных заболеваниях крупного рогатого скота / Соавт.: О.Г. Петрова, И.А. Рубинский, Н.И Кушнир и др.// Основные проблемы ветеринарной медицины и стратегия борьбы с заболеваниями с. -х. животных в современных условиях: Сб. науч. тр. Прикаспийского ЗНИВИ. - Махачкала, 2007. ЦС.120Ц123.
49. Комплексная система оздоровления и профилактики лейкоза крупного рогатого скота в Республике Дагестан на 2008-2015 гг. (теоретические и практические аспекты). Рекомендации / Соавт.: З.М. Джамбулатов, Н.Т. Карсаков. - Махачкала, 2008. Ц19 с.
50. Эффективность инактивированной вакцины Комбовак при факторных респираторных болезнях телят в сельскохозяйственных организациях / Соавт.: О.Г. Петрова, А.Т. Татарчук, И.А. Рубинский и др. // Аграрный вестник Урала. Ц2008. Ц№ 5. ЦС. 61Ц62.
51. Этиологическая структура массовых респираторных болезней молодняка крупного рогатого скота в хозяйствах, занимающихся производством молока / Соавт.: А.Г. Глотов, Т.И. Глотова, А.В. Нефедченко и др.// Сибирский вестник с. -х. науки. Ц2008. Ц№ 3. ЦС. 72Ц78.
52. Инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота в Республике Дагестан: особенности распространения, клинические проявления и организация ветеринарно-профилактических мероприятий/ Сибирский вестник с. -х. науки. Ц2008. Ц№ 3. ЦС. 78Ц83.
53. Клинико-гематологические и патоморфологические показатели при лейкозе крупного рогатого скота/Соавт.: П.Д. Устарханов // Вестник РАСХН. Ц2008. Ц№ 3. ЦС. 76-78.
54. Ассоциированные респираторно-кишечные заболевания телят в Дагестане / Соавт.: П.Д. Устарханов, Б.М. Гаджиев // Материалы Междунар. науч.-практ. конф. - Махачкала, 2008. ЦС. 109Ц112.
55. Применение изатизона и сероизатизона для профилактики вирусных респираторных болезней телят / Соавт.: Т.И. Глотова, Ю.Г. Юшков, А.Г. Глотов // Ветеринарная патология. Ц2008. Ц№ 2 (25). ЦС. 59Ц62.
56. Эпизоотическая ситуация по лейкозу крупного рогатого скота в племенных хозяйствах Дагестана / Соавт.: С.Ш. Кабардиев, Х.М. Гайдарбекова, Т.Т. Рагимова // Ветеринарная патология. Ц2008. Ц№ 2 (25). ЦС. 67-68.
57. Выявление ВЛКРС в зависимости от породы, возраста животных и категорий хозяйств / Соавт.: Р.А. Нуратинов // Материалы Междунар. науч. конф.: Биологическое разнообразие Кавказа. - Грозный, 2008. ЦС. 306Ц309.
Подписано к печати: 28.05.2009 г. Формат 60х84/16.
Усл. печ. л. 1,33. Уч. изд. л. 1,33. Тираж 100 экз.
Заказ № 58
ООО Световод Краснодар,
ул. Калинина, 126/1 корп. 57
Авторефераты по всем темам >>
Авторефераты по разное