На правах рукописи
Сисягина
Елена Павловна
Разработка средств и способов терапии и
профилактики респираторных болезней телят
06.02.02 - ветеринарная микробиология,
вирусология, эпизоотология, микология
с микотоксикологией и иммунология.
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
доктора ветеринарных наук
Н. Новгород - 2010
Работа выполнена на кафедре эпизоотологии и инфекционных болезней ФГОУ ВПО Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия, в лаборатории физиологии и патологии размножения и болезней молодняка крупного рогатого скота НИВИ НЗ РФ, в хозяйствах Нижегородской области
Научный консультант:
член-корреспондент РАСХН,
заслуженный деятель науки РФ,
доктор ветеринарных наук, профессор В.В. Сочнев
Официальные оппоненты:
Доктор ветеринарных наук, профессор А.И. Молев
(ФГОУ ВПО НГСХА)
Доктор ветеринарных наук, профессор В.А. Мищенко
(ВНИИЗЖ, г. Владимир)
Доктор ветеринарных наук, профессор Р.Х. Равилов
(ФГОУ ВПО КазГАВМ
им. Н.Э. Баумана)
Ведущая организация - ФГОУ ВПО Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины
Защита состоится л ____ ____________ 2010 г. в 900 на заседании диссертационного совета Д 220.047.02 при ФГОУ ВПО Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия (603107, г. Н. Новгород, пр. Гагарина, д. 97).
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО НГСХА (603107, Н. Новгород, пр. Гагарина, д. 97).
Автореферат опубликован на официальном сайте ВАК РФ л17 марта 2010 г.
Автореферат разослан л____ _____________ 2010 г.
Ученый секретарь диссертационного совета
д. вет. наук, доцент А.В. Пашкин
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы. Респираторные болезни молодняка крупного рогатого скота (КРС) распространены во всех странах мира и наносят огромный экономический ущерб животноводству, обусловленный потерей живой массы животных, снижением продуктивности, нарушением воспроизводства и высокой гибелью молодняка.
Ведущее место в этиологии респираторных болезней у телят принадлежит возбудителям вирусной, бактериальной и хламидийно-микоплазмен-ной природы (Н.Н. Крюков и соавт., 1984; И.А. Бакулов, 1998; В.А. Мищенко и соавт., 2000; К.П. Юров и соавт., 2003; В.Н. Сюрин, А.Я. Самуйленко, 2006; Г.Р. Реджепова и соавт., 2006; Т.И. Глотова, 2006; Ю.Н. Зайцев, 2007; Deregt et al.,1995; A.L.E. Linberg, 2003). Среди вирусных агентов особая роль в возникновении острых респираторных болезней телят отводится вирусам парагриппа-3 (ПГ-3), инфекционного ринотрахеита (ИРТ) и вирусной диареи - болезни слизистых (ВД-БС), так как инфицированные ими животные становятся восприимчивыми к развитию бактериальной микрофлоры наряду с грибами и простейшими (Н.Н. Крюков и соавт., 1984; Е.В. Андреев, 1984; С.А. Жидков, 1996; И.А. Масимов, 2003; А.Г. Шахов и соавт., 2006; П.А. Красочко, 2009; Ю.Н. Масьянов и соавт., 2009; L.A. Babiuk et al., 1991; R.W. Fulton et al., 2004).
В системе мер борьбы с респираторными болезнями широкое применение получили вакцинопрофилактика и различные химиотерапевтические средства (О.Г. Новиков, 2002; Н.П. Тулева, Ю.В. Тулев, 2004; А.Г. Глотов и соавт., 2005; О.Г. Петрова и соавт., 2005; Е.В. Батищева, 2008).
Однако вакцинация коров-матерей и телят, проводимая на фоне пониженного иммунологического статуса животных, не всегда дает желаемый результат. Кроме того, эффективности формирования активного поствакцинального иммунитета у телят в ранний постнатальный период препятствуют колостральные антитела.
Применение антибактериальных средств сдерживается зачастую появлением к ним резистентных штаммов микроорганизмов (В.Ф. Ковалев и соавт., 1988; Г.К. Коромыслов, Ю.Н. Федоров, 1988; В.В. Субботин, М.А. Сидоров, 1966; С.М. Сулейманов и др., 1997; Д.М. Никулин, 2000; В.А. Мищенко с соавт., 2001; П.Н. Сисягин и соавт., 2005; А.Г. Шахов и соавт., 2006; Е.В. Батищева, 2008). Поэтому в настоящее время наиболее эффективным и оправданным способом повышения эффективности химиотерапевтических средств является изыскание комплексных антибактериальных препаратов, обладающих по сравнению с монопрепаратами широким спектром антимикробного действия и замедляющих развитие к ним резистентности у микроорганизмов (В.Д. Соколов, 1990; И.М. Карпуть с соавт., 1994; В.А. Антипов, 1995; Г.Р. Реджепова с соавт., 2003; С.В. Втюрин, 2006).
Актуальной остается и проблема поиска новых, высокоэффективных средств и способов повышения антигенной активности вакцинных препаратов, позволяющих увеличить продолжительность и напряженность поствакцинального иммунитета у телят. С этой целью применяются различные иммуностимуляторы, однако они имеют ограниченное применение из-за недостаточной изученности механизма действия некоторых из них и отсутствия научно обоснованных рекомендаций по их применению.
Всё вышеизложенное и послужило основанием для проведения исследований по разработке средств и способов повышения лечебно-профилактической защиты телят при респираторных болезнях телят с применением иммуномодулирующих, антибактериальных и биологических препаратов.
Цель исследований: разработать новые средства и способы лечебно-профилактической защиты телят при острых респираторных болезнях с применением иммуномодулирующих, антибактериальных и биологических средств.
Основные задачи исследований:
- определить этиологию респираторных болезней телят;
- определить состояние иммунологического статуса у клинически здоровых и больных телят;
- разработать способы коррекции вторичных иммунодефицитов с применением различных биологических препаратов и фармакологических средств и дать им сравнительную оценку;
- разработать новые средства и способы повышения эффективности специфической профилактики вирусных респираторных болезней телят с применением различных вакцинных препаратов и средств, обладающих иммуномодулирующей активностью, и дать им сравнительную оценку;
- разработать новые средства и способы лечебно-профилактической защиты телят при вирусных респираторных болезнях с применением различных иммуномодулирующих, антибактериальных и биологических средств и дать им сравнительную оценку;
- разработать новые, экологически безопасные лекарственные средства на основе сырья растительного происхождения, обладающие иммуностимулирующей и лечебно-профилактической активностью и доступные для широкого применения в ветеринарной практике;
- разработать новые способы профилактики респираторных болезней телят с применением аэрозолей лекарственных средств, полученных из сырья растительного происхождения;
- разработать и утвердить соответствующую научную и нормативно-техническую документацию на средства и способы лечебно-профилактической защиты телят при вирусных респираторных болезнях.
Научная новизна. Разработаны новые способы коррекции иммунодефицитных состояний у телят с применением зоолана, гликопина, кватерина и его производных - квациклина и изокватерина. Разработаны новые фитопрепараты - фитасол, фитастим, фитадез, обладающие иммуномодулирующей и лечебно-профилактической активностью при респираторных болезнях телят. Разработаны способы повышения напряженности поствакцинального противовирусного иммунитета у телят и повышения их сохранности с применением средств, обладающих иммуномодулирующей активностью. Разработаны новые, эффективные средства и способы лечения и профилактики респираторных болезней телят, включающие применение иммуномодулирующих (зоолана, гликопина, кватерина), антибактериальных (сульфатетрина-М, биозина-М), биологических средств (вакцин, гипериммунной сыворотки, фитастима, фитасола, фитадеза). Разработаны новые, эффективные и экологически безопасные способы аэрозольпрофилактики респираторных болезней телят с применением средств, полученных из сырья растительного происхождения.
Новизна научных исследований подтверждена получением 13 патентов Российской Федерации на изобретения: Способ профилактики острых респираторных болезней телят № 2150279 от 10.06.2000 г.; Способ лечения респираторных болезней телят № 2150281 от 10.06.2000 г.; Способ повышения резистентности у новорожденных телят № 2150289 от 10.06.2000 г.; Лечебно-профилактическое средство для молодняка крупного рогатого скота № 2169558 от 27.06.2001 г.; Лечебно-профилактическое средство для молодняка сельскохозяйственных животных и способ профилактики и лечения респираторных болезней телят с его применением № 2303992 от 10.08.2007 г.; Биологически активный стимулятор и способ повышения общей неспецифической резистентности с его применением № 2305551 от 10.09.2007 г.; Лечебно-профилактическое средство для молодняка сельскохозяйственных животных и способ профилактики и лечения респираторных болезней телят с его применением № 2311190 от 27.11.2007 г.; Биологически активный стимулятор и способ коррекции вторичных иммунодефицитов у телят с его применением № 2311189 от 27.11.2007 г.; Способ профилактики респираторных болезней телят № 2309762 от 10.11.2007 г.; Биологически активный стимулятор и способ повышения неспецифической резистентности с его применением № 2317091 от 20.02.2008 г.; Биологически активный стимулятор и способ коррекции вторичных иммунодефицитов с его применением № 2318530 от 10.03.2008 г.; Лекарственное средство для профилактики респираторных болезней телят и способ аэрозольпрофилактики с его применением № 2328299 от 10.07.2008 г.; Способ лечения респираторных болезней телят № 2364407 от 20.08.2009 г.
Практическая значимость. Определены этиология респираторных болезней и состояние иммунологического статуса у клинически здоровых и больных телят. Отработаны доза, кратность и продолжительность применения иммуномодулирующих средств зоолана, гликопина, кватерина и его производных для повышения резистентности и иммунологической реактивности у телят при вторичном иммунодефиците и дана им сравнительная оценка. Отработаны доза и кратность применения иммуномодулирующих средств для повышения эффективности специфической профилактики вирусных респираторных болезней. В производственных условиях показана их выраженная иммуномодулирующая активность и относительно высокая лечебно-профилактическая эффективность в комплексе с антибактериальными и биологическими средствами при респираторных болезнях телят. Определена иммуномодулирующая и лечебно-профилактическая эффективность новых фитопрепаратов - фитасола, фитастима и фитадеза и отработаны режимы их применения при респираторных болезнях телят. Разработаны и в установленном порядке утверждены научная и нормативно-техническая документация по изготовлению, контролю качества и применению сульфатетрина-М, биозина-М в ветеринарной практике, зоолана, фитасола, фитастима, фитадеза в порядке широкого производственного испытания. Материалы исследований вошли: в Научно обоснованную систему эпизоотологического надзора профилактических и лечебно-реабилитационных мероприятий при болезнях телят в раннем постнатальном периоде, одобренную Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации 27.01.2000 г.; в Методические рекомендации по коррекции системных иммунодефицитов для профилактики и терапии массовых желудочно-кишечных и респираторных болезней телят, одобренные секцией ветеринарной медицины Северо-Восточного научно-методического центра Россельхозакадемии в 2005 г.; в рекомендации Технология лечебно-профилактической защиты от массовых желудочно-кишечных и респираторных болезней телят, одобренные НТС МСХ и производственных ресурсов Нижегородской области в 2009 г. и другую научно-техническую документацию.
Федеральным агентством по науке и инновациям Российской Федерации в 2008Ц2009 гг. проведена процедура учета и государственной регистрации разработанных средств и способов, на основании которой выдано 11 регистрационных свидетельств на объекты учета научно-технической деятельности с правом Российской Федерации на безвозмездное их использование для федеральных государственных нужд.
На защиту выносятся следующие основные положения:
- респираторные болезни телят имеют сложную этиологическую структуру и протекают на фоне иммунодефицитного состояния, усугубляющегося в процессе развития болезни;
- разработанные средства и способы коррекции вторичных иммунодефицитов с применением зоолана и гликопина, кватерина и его производных, фитопрепаратов оказывают выраженное нормализующее воздействие на исходно сниженные показатели клеточного и гуморального иммунитета у телят;
- разработанные способы повышения эффективности специфической профилактики с применением иммуномодулирующих средств способствуют усилению формирования противовирусного поствакцинального иммунитета у телят и повышают их сохранность;
- разработанные средства и способы лечебно-профилактической защиты телят при респираторных болезнях с применением иммуномодулирующих, антибактериальных и биологических средств являются доступными и эффективными;
- разработанные новые средства растительного происхождения - фитасол, фитастим и фитадез обладают экологической чистотой, безвредностью, иммуномодулирующей и лечебно-профилактической эффективностью при респираторных болезнях телят.
Пути реализации. Результаты исследований могут быть использованы при разработке научно обоснованных систем по диагностике и мерам борьбы с респираторными болезнями телят в различных регионах России, а также в организации учебно-педагогического процесса при подготовке ветеринарных специалистов.
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на ученых советах НИВИ НЗ РФ (2000Ц2010 гг.), научно-производственных конференциях НИВИ НЗ РФ (2001, 2002, 2004, 2006, 2008 гг.), заседаниях методической комиссии и межкафедральном совещании профессорско-преподавательского состава ФГОУ ВПО НГСХА (2001Ц2002; 2008Ц2010 гг.), заседаниях экспертной комиссии и секции ветеринарной медицины Северо-Восточного научно-методического центра Россельхозакадемии (2001, 2006, 2008 гг.), Международной научно-практической конференции в г. Дубровицы, 2003 г., научно-практической конференции в г. Костроме, 2005 г., Международной научно-производственной конференции, посвященной 80-летию Самарской НИВС, 2009 г., Всероссийской научно-практической конференции в г. Новочеркасске, 2009 г.
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 49 работ, в том числе 13 в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ: Ветеринарная патология - 4, Ветеринарная практика - 3, Ветеринарный врач - 2, Ветеринарный консультант - 1, Российский ветеринарный журнал - 1, Вестник РАСХН - 1, Ветеринария и кормление - 1, и 13 изобретений, защищенных патентами Российской Федерации, опубликованных в специальных бюллетенях.
Внедрение. Результаты научных исследований под авторским надзором и с положительным эффектом внедрены в 2005Ц2009 гг. в хозяйствах Нижегородской области, в учебном процессе ФГОУ ВПО НГСХА при подготовке ветеринарных специалистов.
Федеральным агентством по науке и инновациям зарегистрированы права Российской Федерации на использование в народном хозяйстве следующих объектов научно-технической деятельности, которые составляют основу материалов докторской диссертации:
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/007. Способ профилактики респираторных болезней телят.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/008. Препарат для профилактики респираторных болезней телят.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/009. Лечебно-профилактическое средство для молодняка сельскохозяйственных животных и способ профилактики и лечения респираторных болезней телят с его применением.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/010. Лечебно-профилактическое средство для молодняка сельскохозяйственных животных и способ профилактики и лечения желудочно-кишечных болезней телят с его применением.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/013. Лечебно-профилактическое средство для молодняка сельскохозяйственных животных и способ профилактики и лечения вирусных респираторных болезней телят с его применением.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/014. екарственное средство для профилактики респираторных болезней телят и способ аэрозольпрофилактики с его применением.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/015. Биологически активный стимулятор и способ коррекции вторичных иммунодефицитов у телят с его применением.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/016. Биологически активный стимулятор и способ повышения неспецифической резистентности с его применением.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/017. Биологически активный стимулятор и способ коррекции вторичных иммунодефицитов у телят с его применением.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/018. Лечебно-профилактическое средство для молодняка сельскохозяйственных животных и способ профилактики и лечения вирусных желудочно-кишечных болезней телят с его применением.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/020. Способ профилактики респираторных болезней телят с применением аэрозоля фитастима.
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 317 стр. компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Материалы диссертации иллюстрированы 35 таблицами и 31 рисунком. Список литературы включает 462 источника, в том числе 161 иностранных авторов. В приложении диссертации представлены документы, подтверждающие результаты отдельных этапов работы, их научную и практическую ценность.
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материалы и методы
Настоящая работа выполнена в 1999Ц2010 гг. в рамках федеральной программы фундаментальных и приоритетных прикладных исследований по научному обеспечению развития АПК Российской Федерации (№ госре-гистрации 01.200.1 13882 и 01.2.006.07186) на базе лаборатории физиологии и патологии размножения и болезней молодняка крупного рогатого скота Государственного научного учреждения - Научно-исследовательского ветеринарного института Нечерноземной зоны РФ Российской академии сельскохозяйственных наук, кафедры эпизоотологии и инфекционных болезней ФГОУ ВПО Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия, ОАО Каменское, СПК Нижегородец, колхоза Искра и племсовхоза Богородский, племхозяйства Пушкинское, СЗАО Березниковское и СФГУП Румянцевское Нижегородской области.
Исследования по разработке способов повышения естественной резистентности и иммунологической реактивности у телят, новых способов профилактики и лечения респираторных болезней телят с применением зоолана и гликопина проводили в содружестве с ООО Исследовательский центр Комкон (г. Санкт-Петербург), Всероссийским научно-исследовательским институтом экспериментальной ветеринарии (г. Москва). Участие соисполнителей от данных и других учреждений отражено в списке опубликованных научных работ.
В проведении ряда исследований принимали также участие сотрудники института: Г.Р. Реджепова, П.Н. Сисягин, И.В. Убитина, Г.В. Зоткин, З.Я. Косорлукова, Ю.Б. Юлдашов, В.В. Сочнев, В.С. Втюрин, которым автор выражает искреннюю признательность и благодарность за оказанную помощь в работе.
В работе использован комплексный эпизоотологический подход, включающий методы эпизоотологического обследования, эпизоотологической статистики, бактериологический, вирусологический, серологический, иммунологический и экспериментальные исследования.
Под клиническим наблюдением и в исследованиях использованы клинически здоровые и больные телята в возрасте от 1 до 180 дней, количество которых отражено в соответствующих разделах.
В опытах использовали следующие препараты:
- зоолан (биолан ветеринарный) - аминокислотно-пептидный комплекс, включающий пептид дельта-сна (триптофанил-аланил-глицил-аспартил-аланил-серил-глицил-глютаминовая кислота), и глицин (аминоуксусная кислота), разработанный в ООО Исследовательский центр Комкон (г. Санкт-Петербург);
- гликопин - синтетический препарат природного происхождения, действующим началом которого является N-ацетилглюкозаминил- N-ацетилмуромилаланил-Д-изоглутамин (ГМДП);
- кватерин-3 (2,2,2 триметилгидразиний) пропионат и его производные: квациклин (1,1 - диметил3-оксопиразолидин - 1-ий-4-ил-ацетат), изокватерин (2 - триметиламмоний этилкарбамат). Препараты синтезированы в институте органического синтеза Латвийской АН;
- живая лиофилизированная вакцина против парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота - Бивак и поливалентная сухая ассоциированная вакцина против вирусов инфекционного ри-нотрахеита, вирусной диареи - болезни слизистых и парагриппа-3 крупного рогатого скота - Тривак;
- эмульсионная инактивированная вакцина против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота;
- комплексные антибактериальные препараты сульфатетрин-М, биозин-М и препараты растительного происхождения - фитастим, фитасол и фитадез, сконструированные в НИВИ НЗ РФ в ходе выполнения настоящей работы. Составы и способы их применения изложены в соответствующих разделах.
При изучении этиологии респираторных болезней за животными вели клинические наблюдения, проводили патологоанатомические вскрытия павших и вынужденно убитых телят. Бактериологические исследования патологического материала проводили в НИВИ НЗ РФ и Нижегородской областной ветеринарной лаборатории в соответствии с Методическими указаниями по бактериологической диагностике колибактериоза животных (1991). Выявление антител в сыворотке крови телят 1Ц3-месячного возраста осуществляли в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) с использованием соответствующих диагностических наборов.
Исследование параметров микроклимата проводили в помещениях, где содержались телята в возрасте 20Ц120 дней и 120Ц180 дней. Измерение температуры воздуха осуществляли с помощью спиртового термометра, относительной влажности воздуха - психрометром, скорость движения воздуха - шаровым кататермометром, количество аммиака - универсальным газоанализатором УГ-2, общую бактериальную обсемененность воздуха - методом осаждения на чашки Петри с мясопептонным агаром. Анализ питательной ценности рационов, используемых для кормления молодняка крупного рогатого скота, проводили по данным зоотехнической отчетности.
Оценку иммунологического статуса животных проводили по показателям абсолютного количества лейкоцитов, относительного содержания лимфоцитов и их основных популяций (Т- и В-лимфоциты), функциональной активности нейтрофилов, общего белка, иммуноглобулинов G- и М-классов, бактерицидной, лизоцимной и бетализинной активности сыворотки крови.
Выделение лимфоцитов из крови животных для определения количества Т- и В-лимфоцитов проводили по методу Н.И. Блинова (1985). Определение общего белка в сыворотке крови осуществляли рефрактометрическим методом. Количественное определение уровня иммуноглобулинов отдельных изотипов проводили методом радиальной иммунодиффузии по G. Manchini et al. (1965) с использованием моноспецифических антисывороток и моноклональных антител к отдельным изотипам иммуноглобулинов крупного рогатого скота, полученных в лаборатории иммунологии и биотехнологии ВИЭВ, а также экспресс-методом с использованием сульфитно-натриевого теста. Динамику уровня гемоглобина в крови изучали по Сали; форменных элементов крови - пробирочным методом в камере Горяева, лейкоцитарной формулы - путем подсчета 200 лейкоцитов разных видов, окрашенных по Романовскому-Гимза с вычислением процентного содержания каждого вида.
Определение функциональной активности нейтрофилов крови проводили в реакции восстановления нитросинего тетразолия (А.Н. Маянский и др., 1979). Бактерицидную активность сыворотки крови определяли по методу О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966), лизоцимную активность сыворотки крови - по методу В.Г. Дорофейчук (1968), бетализинную активность сыворотки крови - по методу О.В. Бухарина и др. (1970). Об эффективности разработанных способов лечения и профилактики судили по количеству заболевших и павших животных, продолжительности течения и наличию рецидивов болезни, по показателям иммунобиологического статуса опытной и контрольной групп телят.
Статистическую обработку результатов исследований проводили по Н.А. Плохинскому (1979) и Хитоси-Кумэ (1990).
С целью удобства восприятия полученных результатов отдельные материалы и методы исследований изложены в соответствующих разделах результатов собственных исследований.
Результаты исследований
Этиология респираторных болезней телят
Уровень кормления и условия содержания коров-матерей и телят
Исследования по изучению этиологии респираторных болезней телят выполнены в СЗАО Березниковское, СФГУП Румянцевское, ПХ Пушкинское, СПК Нижегородец, колхозе Искра и племсовхозе Богородский Нижегородской области.
С этой целью провели комплекс эпизоотологических обследований с применением статистических, клинических, патологоанатомических, бактериологических, вирусологических, биохимических и иммунологических методов. В круг изучаемых вопросов входили экономические и производственные показатели хозяйств, общее санитарное и эпизоотическое состояние, поголовье скота, продуктивность, показатели воспроизводства стада, организация кормления и содержания, подготовка коров и нетелей к отелам, организации и проведению родов, выращиванию телят в секционных профилакториях, своевременной выпойке молозива.
Избранные для проведения исследований хозяйства являются типичными для лесостепной зоны Российской Федерации, они характеризуются высокой заболеваемостью новорожденных телят, сопровождающейся высокой летальностью. Это и послужило основанием для выбора их в качестве базовых хозяйств с целью изучения этиологии респираторных болезней телят и разработки новых способов лечения и профилактики.
Исследованиями, проведенными в базовых хозяйствах, установлено, что более высокий выход телят был в СФГУП Румянцевское, колхозе Искра, племсовхозе Богородский, который составлял 89,0Ц96,0%. Заболеваемость телят во всех хозяйствах респираторными болезнями была относительно высокой и составила 68,6Ц86,6%.
Анализ факторов, способствующих возникновению заболеваний, показал, что мощность родильных отделений и телятников-профилакториев не соответствует действующим нормативам. Выявлены серьезные нарушения в организации проведения отелов коров и выращивания телят в профилакто-риях в первые дни жизни: на фермах и в комплексах не оборудовано достаточного количества родовых секций (боксов), отсутствуют послеродовые секции, не соблюдаются санитарные разрывы во время работы родильного отделения и сроки заполнения секций телятника-профилактория, не соблюдаются также сроки содержания телят в профилакториях и время выпойки им первой порции молозива. Все это свидетельствует о перегрузке по площади и времени в работе родильных отделений и профилакториев и, как следствие, их низком санитарном состоянии.
Анализ уровня кормления сухостойных коров (по данным лабораторных исследований) показал, что большинство кормов являются недоброкачественными. Так, в силосе наличие масляной кислоты превышало в 1,2Ц2,6 раза допустимую норму. Сено было тоже низкого качества, буровато-зеленого цвета, иногда с затхлым запахом и содержанием пыли, по ботаническому составу неоднородно: злаковое, бобовое, из разнотравья естественных сенокосов. Рационы сухостойных коров по питательности не отвечают существующим требованиям, так как они не сбалансированы по переваримому протеину, углеводам, каротину, фосфору и кальцию, поэтому у большинства исследованных коров во всех базовых хозяйствах, по данным лабораторных исследований крови, отмечены нарушения белкового, углеводного, минерального и, в большей степени, витаминного (по каротину) обменов.
Выявлены нарушения технологии содержания сухостойных коров. В зимний период они не пользуются активным моционом, а в выгульные дворы выпускают нерегулярно. У 30Ц35% коров отмечен укороченный сухостойный период, составляющий 30Ц45 дней.
При изучении параметров микроклимата установили, что в помещениях для содержания животных параметры микроклимата имели существенные отклонения от зоогигиенических норм: отмечалось превышение относительной влажности воздуха, содержание окиси углерода, микробной загрязненности помещений, которая была обусловлена не только высокой концентрацией животных в помещениях, но и несовершенством приточно-вытяжной вентиляции.
Микробная загрязненность воздуха в родильном отделении превышала предельнодопустимую норму в 2,0Ц2,3 раза, телятниках-профилакториях - в 3,2Ц3,6 раза. По данным ветеринарной отчетности, хозяйства длительное время являются неблагополучными по острым респираторным болезням телят.
На основании полученных результатов исследований можно заключить, что возникновению респираторных болезней телят в базовых хозяйствах способствовали такие факторы, как несбалансированность рационов коров-матерей по основным питательным веществам, отсутствие прогулок и инсоляций животных, нарушение санитарно-гигиенического режима при подготовке, проведении родов и выращивании молодняка, нарушение сроков выпойки молозива новорожденным телятам и режима их кормления в последующие дни, резкие колебания температуры воздуха в родильных отделе-ниях, телятниках-профилакториях и помещениях для молодняка крупного рогатого скота, пониженный воздухообмен, сквозняки, повышенная влажность, загазованность и высокая микробная загрязненность воздуха в помещениях. Неполноценное кормление сухостойных коров и нарушение условий их содержания сопровождалось нарушением обмена веществ и снижением резистентности организма как у беременных животных, так и у их приплода.
Роль микроорганизмов в возникновении
респираторных болезней телят
С целью изучения роли бактериальной микрофлоры в этиологии респираторных болезней телят в трех хозяйствах Нижегородской области провели исследования 84 проб носовой слизи и 126 проб патологического материала (кусочки носовых раковин, трахеи, легких, средостенных лимфатических узлов и селезенки) от 68 больных, павших и вынужденно убитых животных.
При проведении бактериологических исследований из носовой слизи больных и органов павших и вынужденно убитых телят выделены 181 культура микроорганизмов. По морфологическим и тинкториальным свойствам 54 (29,8%) из них идентифицированы как St. aureus, 41 (22,7%) - Str. pneumoniae, 32 (17,7%) - E. Coli, 42 (23,2%) - Proteus vulgaris и 12 (6,6%) - P. haemolytica.
Все выделенные культуры микроорганизмов были патогенны для белых мышей. Наиболее высокая патогенность была отмечена у смешанных культур микроорганизмов. Большинство подопытных мышей погибали через 6Ц12 часов после заражения. Это указывает на усиление патогенных свойств микроорганизмов в ассоциации.
При серологическом обследовании 2368 животных в возрасте 20Ц30 дней из данных хозяйств выявили антитела к вирусам ИРТ, ПГ-3 и ВД-БС крупного рогатого скота в 35,8% случаев, к вирусу ПГ-3 и ИРТ одновременно в 50,7% случаев. В ряде случаев вирусные респираторные болезни протекали как моноинфекции.
Наибольшая выявляемость антител к вирусам отмечалась в обследованных хозяйствах ОАО Каменское, СЗАО Березниковское, СФГУП Румянцевское, колхозе Искра. Среди животных племхозяйств Пушкинское и Богородский серопозитивность была наименьшей и составляла к вирусу ИРТ соответственно 12,5Ц20,6%; ВД-БС - 16,7Ц19,4%; ПГ-3 - 8,4Ц16,6%.
Исследования парных сывороток крови показали, что титр вируснейтрализующих антител у 20 переболевших телят увеличивался к вирусу ПГ-3 в 4,6 раза, ИРТ - в 5,4 и ВД-БС - в 4,1 раза, что свидетельствует о ведущей роли данных вирусов в возникновении болезни.
Иммунологический статус у клинически здоровых и больных телят
С целью изучения данного вопроса были сформированы 2 группы телят: 1-я группа опытная - клинически здоровые телята (10 голов), 2-я группа опытная - телята с выраженными признаками острых респираторных заболеваний (10 голов).
Установлено, что у больных респираторной патологией телят наблюдается угнетение иммунного статуса, сопровождающееся снижением абсолютного содержания лимфоцитов на 17%, относительного и абсолютного содержания Т-лимфоцитов на 43 и 50%, В-лимфоцитов на 37 и 33% соответственно, угнетением функциональной активности нейтрофилов крови в спонтанном и индуцированном тестах соответственно на 19 и 52% в сравнении с клинически здоровыми телятами. Полученные результаты исследований свидетельствуют, что как у клинически здоровых, так и в большей степени у больных респираторными болезнями телят имеется выраженное иммунодефицитное состояние, которое оказывает определяющее влияние на возникновение и развитие болезни. В связи с этим в совершенствовании мер борьбы с указанными болезнями важное значение приобретает разработка высокоэффективных и доступных для применения в ветеринарной практике средств и способов иммунокоррекции.
Разработка новых средств и способов коррекции вторичных
иммунодефицитов с применением различных биологических препаратов и фармакологических средств
и их сравнительная оценка
Иммуномодулирующая активность зоолана и гликопина
С целью определения иммуномодулирующей активности зоолана по результатам исследований крови по принципу аналогов сформированы две группы клинически здоровых новорожденных (суточных) телят с выраженным приобретенным иммунодефицитом: опытная - 14 и контрольная - 16 животных.
Влияние зоолана на иммунобиологические показатели животных изучали после введения его телятам опытной группы внутримышечно в виде 0,3%-ного раствора в дозе 1,6 мл трехкратно с интервалом 5 дней. Контрольной группе животных зоолан не применяли. Исследование крови животных (по 5 голов из каждой группы) проводили в динамике: до введения зоолана, перед каждым последующим введением и через 5 дней после последнего применения препарата.
Результаты исследований показали, что применение зоолана способствовало достоверному увеличению относительного содержания лимфоцитов, Т- и В-лимфоцитов, IgG и IgM, повышению функциональной активности нейтрофилов, бактерицидной, лизоцимной и бетализинной активности. Особенно выраженное влияние препарат оказал на показатели В-лимфоцитов. Так, содержание их в крови опытной группы телят к концу опыта составило 9,2 0,8% по сравнению с 4,1 0,4% в контроле, что соответствовало их физиологическому уровню для данного возрастного периода животных. Таким образом, содержание В-лимфоцитов у опытной группы телят увеличилось на 196,7% по сравнению с исходными показателями, или на 168,6% больше по сравнению с телятами контрольной группы.
Содержание Т-лимфоцитов у телят опытной группы в течение опыта существенно не отличалось от контрольной, и лишь к 6 дню жизни оно было наиболее высоким, и данные изменения были статистически достоверными. Содержание Т-лимфоцитов превосходило исходные показатели телят опытной группы на 19,0% и на 16,4% телят контрольной группы. Дальнейшие изменения данного показателя как у телят опытной, так и контрольной групп животных были незначительны, существенно не отличались и находились в пределах 22,2 1,6 22,4 0,6%. Аналогичные изменения были отмечены и в содержании общего белка.
Наибольшее его увеличение в сыворотке крови телят опытной группы наблюдалось к 6 и 11 дням жизни животных, в то время как к 16 дню жизни животных его содержание значительно снизилось, выявленные различия по сравнению с исходными показателями телят обеих групп были статистически недостоверными. Динамика IgG и IgM в сыворотке крови опытной группы была наиболее характерной и изменения были статистически достоверными (Р<0,05). Наиболее выраженные изменения данных показателей в сторону их существенного увеличения были отмечены уже к 6 и к 11 дням жизни, в то время как у телят контрольной группы данные изменения были незначительны и недостоверны (Р>0,05). Увеличение содержания IgG и IgM к 6 дню составило 24,6 и 28,6%, к 11 дню - 19,2 и 28,6%. К 16 дню жизни концентрация иммуноглобулинов G и M незначительно снизилась, однако по сравнению с исходными показателями она была выше на 15,6 и 14,3% соответственно. Снижение уровня иммуноглобулинов в сыворотке крови телят опытной и контрольной групп к 16 дню жизни, по-видимому, следует объяснить тем, что к данному возрастному периоду происходит снижение уровня колострального иммунитета.
Показатели бактерицидной, лизоцимной и бетализинной активности сыворотки крови у опытных телят в течение всего периода исследований имели выраженную динамику к их стабильному увеличению. Особенно выраженное влияние зоолан оказал на лизоцимную и бетализинную активность, которые к концу опыта увеличились по сравнению с исходными показателями соответственно на 166,6 и 86,9%, в то время как бактерицидная активность возросла на 43,1%. У телят контрольной группы изменения этих показателей были менее значительны и их увеличение по сравнению с исходными соответственно составило 57,8; 20,9 и 6,3%. Выявленные различия в динамике бактерицидной и бетализинной активности у телят контрольной группы были статистически недостоверными (Р>0,05).
У телят опытной группы установлено повышение функциональной активности нейтрофилов (по реакции восстановления нитросинего тетразолия). Число активированных нейтрофилов (индуцированный тест) к концу опыта увеличилось до 14,9 1,1%, что на 136,5% выше по сравнению с исходными показателями и на 100,1% по сравнению с животными контрольной группы. Изменения спонтанного теста у телят опытной группы также были статистически достоверны и его увеличение к 16-му дню жизни составило 79,5% по сравнению с 36,4% в контроле (Р>0,05).
Влияние гликопина на иммунологические показатели изучали на 20 телятах в возрасте 1Ц16 дней: 1 группа опытная - 9 животных и 1 контрольная - 11 животных. Опытной группе животных применяли 0,2% раствор гликопина трехкратно с интервалом 5 дней в дозе 2,0 мл подкожно. Контрольной группе животных гликопин не применяли.
Исследования показали, что у животных опытной группы относительное содержание лимфоцитов увеличилось по сравнению с исходными показателями на 49,4%, В-лимфоцитов - на 130,0%, IgG - на 14,9%, в то время как увеличение иммуноглобулинов у животных контрольной группы было недостоверным (Р>0,05).
Увеличение функциональной активности нейтрофилов у животных опытной группы по сравнению с контролем по спонтанному тесту составило 42,9%, индуцированному - 81,6%, бактерицидной активности - 28,2%, лизоцимной активности - 99,4%, бетализинной активности сыворотки крови - 44,3%. Повышение спонтанного НСТ-теста при применении зоолана и гликопина свидетельствует о том, что в организме активизируются энергетические процессы, обеспечивающие внутриклеточное переваривание, т.е. возрастает способность клетки к завершенному фагоцитозу. Повышение индуцированного НСТ-теста подтверждает резервную функцию фагоцитоза и позволяет судить о повышении функциональной активности нейтрофилов.
Таким образом, результаты исследований дают основание заключить, что зоолан и гликопин обладают выраженными иммуномодулирующими свойствами при вторичных иммунодефицитных состояниях у телят. Применение их нормализует соотношение Т- и В-лимфоцитов, повышает функциональную активность нейтрофилов и общую неспецифическую резистентность организма (бактерицидную, лизоцимную, бетализинную активность сыворотки крови), что дает основание рекомендовать их для применения в качестве средств, повышающих эффективность традиционных способов профилактики и лечения респираторных болезней телят.
Сравнительный анализ полученных результатов исследований показал, что в условиях данных опытов из испытанных средств более выраженной иммуномодулирующей активностью обладал зоолан.
Иммуномодулирующая активность кватерина и его
производных Ц квациклина и изокватерина
Исследования проводили на пяти группах клинически здоровых новорожденных телят с выраженным приобретенным иммунодефицитом: 4 опытные группы по 10 голов в каждой и контрольная - 14 животных.
В качестве иммуномодулирующих средств были испытаны широко известные в ветеринарии и медицине препараты: кватерин, квациклин и изокватерин.
Кватерин-3 (2,2,2 триметилгидразиний) пропионат синтезирован в институте органического синтеза Латвийской АН и является структурным аналогом Цбутиробетаина. Препараты 1,1 - диметил3-оксопиразолидин - 1-ий-4-ил-ацетат (квациклин) и 2-триметиламмоний этилкарбамат (изокватерин) являются производными кватерина. Изучение иммуномодулирующей активности данных препаратов проведено в сравнении с зооланом, который по результатам предыдущих исследований обладал наиболее выраженной иммуномодулирующей активностью.
Влияние кватерина как иммуномодулирующего средства на иммунологические показатели изучали путем введения его телятам опытной группы внутримышечно в виде 40% раствора в дозе 4 мл два раза в сутки в течение 5 дней. Квациклин и изокватерин в виде 2% раствора вводили в дозе 4 мл внутримышечно трехкратно с интервалом 5 дней. Зоолан в виде 0,3% раствора вводили внутримышечно в дозе 1,6 мл трехкратно с интервалом 5 дней. Контрольной группе животных иммуномодулирующие средства не применяли.
Животным первой опытной группы применяли кватерин, второй - квациклин, третьей - изокватерин и четвертой - зоолан.
Исследования крови подопытных животных (по 5 проб из каждой группы) проводили в динамике: при применении кватерина - до введения препарата и через 5 дней после последнего его приема. При применении всех остальных - до введения препаратов, через 10 дней после первого введения препарата и через 5 дней после последнего их применения.
Установили, что применение кватерина и квациклина оказывало нормализующее воздействие на исходно сниженные показатели клеточного и гуморального иммунитета животных. Особенно выраженное стимулирующее действие препараты оказывали на показатели В-лимфоцитов. Так, уже к 11 дню жизни после применения кватерина количество В-лимфоцитов возросло на 152,7%, а квациклина - на 112,9% по сравнению с контролем и достигло уровня физиологических величин для данного возраста животных. В то же время не было установлено существенных различий в относительном количестве Т-лимфоцитов у телят опытных и контрольных групп.
При применении препаратов в сыворотке крови у телят обеих опытных групп наблюдалось достоверное увеличение общего белка к 11 и 16 дням жизни по сравнению с контрольной группой животных. Концентрация JgG и JgM в сыворотке крови телят в опытных и контрольной группах к 11 дню жизни существенно не изменилась, однако к 16 дню жизни у телят второй опытной и контрольной групп она заметно снизилась, но в то же время у опытной группы эти показатели были достоверно значительно выше по сравнению с контролем.
Выраженные различия наблюдались и в числе активированных нейтрофилов (индуцированный тест), этот показатель у телят опытных групп к 11 дню жизни соответственно составил 14,9 2,0% и 11,4 0,4%, в то время как у телят контрольной группы он составил 8,4 2,1%.
Установлено, что изокватерин и зоолан обладают выраженными иммуномодулирующими свойствами при приобретенном иммунодефиците у телят. Наиболее выраженное действие отмечено у зоолана, применение которого способствовало достоверному увеличению относительного содержания лимфоцитов, Т- и В-лимфоцитов, иммуноглобулинов G и М, повышению функциональной активности нейтрофилов, бактерицидной, лизоцимной и бетализинной активности. Особенно выраженное влияние зоолан оказал на показатели В-лимфоцитов.
Так, содержание их в крови опытной группы телят к концу опыта составило 9,6 0,8% по сравнению с 4,1 0,2% в контроле, что соответствовало их физиологическому уровню для данного возрастного периода животных.
Содержание Т-лимфоцитов у телят опытных групп в течение опыта существенно не отличалось от контрольной, и лишь к 11 дню они были наиболее высокими и статистически достоверными. Дальнейшие изменения данного показателя как у телят опытных, так и контрольной групп животных были незначительны, существенно не отличались и находились в пределах 24,6 0,4% - 25,0 1,2%. Аналогичные изменения были отмечены и в содержании общего белка. Наибольшее его увеличение в сыворотке крови телят опытных и контрольной групп телят наблюдалось к 11 дню жизни, в то время как к 16 дню жизни животных его содержание заметно снизилось. Динамика иммуноглобулинов G в сыворотке крови при применении зоолана была наиболее характерна и статистически достоверной, в то время как при применении изокватерина, а также у телят контрольной группы данные изменения были незначительными. Увеличение содержания иммуноглобулинов G и М у телят опытных групп к 11 дню составило 18,5 и 28,5%. К 16 дню жизни концентрация их незначительно снизилась, однако по сравнению с исходными показателями она была выше на 15,5 и 14,2% соответственно. Снижение уровня иммуноглобулинов в сыворотке крови телят опытных и контрольной групп к 16 дню жизни, по-видимому, следует объяснить тем, что к данному возрастному периоду происходит снижение уровня колострального иммунитета.
Показатели бактерицидной, лизоцимной и бетализинной активности сыворотки крови у опытных групп телят в течение всего периода имели выраженную динамику к их стабильному увеличению, в то же время выявленные различия в динамике бактерицидной и бетализинной активности у телят контрольной группы были статистически недостоверными. Число активированных нейтрофилов (индуцированный тест) у телят 3-й опытной группы (при применении изокватерина) увеличилось в 2,4 раза, 4-й опытной группы (при применении зоолана) - в 3,4 раза.
Результаты исследований позволяют сделать вывод, что все испытанные препараты: кватерин, квациклин, изокватерин и зоолан - обладают выраженными иммуномодулирующими свойствами при вторичных иммунодефицитных состояниях у телят. Применение указанных средств нормализует соотношение Т- и В-лимфоцитов, повышает функциональную активность нейтрофилов и общую неспецифическую резистентность организма (бактерицидную, лизоцимную и бетализинную активность сыворотки крови). Наиболее выраженные иммуномодулирующие свойства выявлены при применении зоолана и кватерина. Полученные результаты исследований дают основание рекомендовать данные препараты в качестве средств, повышающих эффективность традиционных способов профилактики желудочно-кишечных и респираторных болезней телят.
Разработка новых способов повышения эффективности
специфической профилактики вирусных респираторных
болезней телят с применением вакцинных препаратов и средств, обладающих иммуномодулирующей активностью,
и их сравнительная оценка
Влияние зоолана и гликопина на иммунный ответ при вакцинации
телят против инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3
С целью изучения влияния зоолана и гликопина на повышение напряженности противовирусного поствакцинального иммунитета сформированы две опытные группы (50 и 48 голов) и одна контрольная (45 голов) телят. Животных всех групп иммунизировали живой лиофилизированной вакциной Бивак в соответствии с наставлением по ее применению.
Животным первой опытной группы для усиления потенцирующего действия вакцины дополнительно применяли зоолан внутримышечно в виде 0,3% раствора в дозе 2 мл на голову трехкратно: первый раз за 12Ц18 часов до применения вакцины, а далее с интервалом 24 часа. Через 21 день после первой вакцинации проводили ревакцинацию животных с применением зоолана в тех же режимах. Животным второй опытной группы в качестве иммуномодулирующего средства применяли гликопин в том же режиме, что и зоолан, в виде 0,2% раствора в дозе 2 мл. Взятие крови у животных для исследований проводили перед вакцинацией, через 20 дней (перед ревакцинацией) и спустя 20 дней после ревакцинации по 12 проб от каждой группы.
Результаты исследований показали, что применение зоолана одновременно с вакциной Бивак через 20 дней после ревакцинации способствовало увеличению титров антител к вирусам ПГ-3 и инфекционного ринотрахеита на 133 и 77% соответственно в сравнении с контролем, показателей Т- и В-лимфоцитов - на 67 и 15% соответственно, функциональной активности нейтрофилов крови в спонтанном НСТ-тесте - на 73 и индуцированном - на 31%, JgG - на 44, JgM - на 68%, лизоцимной активности сыворотки крови - на 39 и бактерицидной активности - на 20%.
Аналогичное влияние на иммунологические показатели и факторы естественной резистентности телят отмечено и при совместном применении вакцины Бивак с иммуномодулятором гликопином.
Так, через 20 дней после ревакцинации телят титр антител к вирусам ПГ-3 и инфекционного ринотрахеита увеличился на 158 и 112% соответственно в сравнении с контролем, количество Т- и В-лимфоцитов - на 60 и 31%, функциональная активность нейтрофилов в спонтанном НСТ-тесте возросла на 70 и индуцированном - на 29%. Уровень иммуноглобулинов G и M соответственно увеличился на 37 и 36%, лизоцимная активность сыворотки крови - на 46, бактерицидная активность сыворотки крови - на 25%.
Профилактическая эффективность совместного применения вакцины Бивак с зооланом составила 96%, с гликопином - 97,9% по сравнению с 86,7% в контроле. Сохранность телят в опытных группах была на 8,8% выше в сравнении с контролем.
Полученные результаты исследований позволяют заключить, что применение зоолана и гликопина способствует повышению противовирусного поствакцинального иммунитета у телят и профилактической эффективности на 9,3Ц11,2%, что дает основание рекомендовать их в качестве средств, повышающих эффективность специфической профилактики при инфекционном ринотрахеите и парагриппе-3 и увеличение их сохранности.
Влияние кватерина и его производных Ц квациклина и
изокватерина на иммунный ответ при вакцинации телят против
инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 и их
сравнительная оценка
Эффективность вакцинопрофилактики в комплексе с иммуно-модулирующими средствами определяли на 1972 клинически здоровых телятах 30-дневного возраста. Исследования проводили на пяти группах животных (четыре опытные и одна контрольная). Телятам всех опытных групп вводили в носовую полость вакцину Бивак в объеме 2 мл, по 1 мл в каждую ноздрю, на глубину 5Ц7 см. Дополнительно животным первой опытной группы внутримышечно вводили кватерин в виде 40% раствора в дозе 5 мл, второй - квациклин в виде 2% раствора внутримышечно в дозе 5 мл, третьей - изокватерин в виде 2% раствора внутримышечно в дозе 4 мл, четвертой - зоолан в виде 0,3% раствора внутримышечно в дозе 1,6 мл. Животным контрольной группы иммуномодулирующие средства не применяли. Через 21 день после первой вакцинации проводили ревакцинацию животных по той же схеме, что и первоначально.
Взятие крови у животных для серологического и иммунологического исследований проводили выборочно (по 12 голов из каждой группы) перед вакцинацией, через 21 день (перед ревакцинацией) и спустя 14 дней после ревакцинации.
Установлено, что применение иммуномодулирующих средств способствовало усилению формирования противовирусного поствакцинального иммунитета у телят на фоне применения вакцины Бивак.
Все испытанные препараты оказали стимулирующее влияние на продукцию антител. Иммунный статус телят характеризовался более высоким уровнем антител к вирусу парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита по сравнению с животными контрольной группы. Наиболее выраженное действие выявлено при одновременном применении вакцины Бивак и зоолана. Применение иммуномодулирующих средств способствовало значительному повышению показателей естественной резистентности организма. Так, лизоцимная активность сыворотки крови у телят опытных групп через 21 день после вакцинации находились в пределах 4,4 0,4 - 6,4 0,1%, или на 22,2Ц154,2% больше по сравнению с контролем. Показатели бетализинной активности у опытных групп животных были на 14,7Ц55,7% выше по сравнению с животными контрольной группы.
Аналогичная динамика отмечена и по функциональной активности нейтрофилов. Увеличение спонтанного НСТ-теста у телят опытных групп по сравнению с контролем составило 66,5Ц138,2%, индуцированного - 60,6Ц121,1%. Наиболее существенное увеличение данных показателей отмечено при применении зоолана.
Усиление противовирусного иммунитета у телят способствовало снижению уровня их заболеваемости на 7,1Ц10,7% респираторными болезнями и повышению их сохранности.
Таким образом, исследования показали, что применение живой лиофилизированной вакцины Бивак против парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота одновременно с иммуномодулирующими средствами способствовало повышению профилактической эффективности вирусных респираторных болезней телят в 93,7Ц97,3% случаев по сравнению с 86,6% в контроле. Сохранность телят в опытных группах животных была относительно высокой и составила 99,0Ц99,6%. Полученные результаты исследований позволяют заключить, что эффективность специфической профилактики вирусных респираторных болезней телят может быть значительно повышена за счет вакцины в комплексе с иммуномодулирующими средствами. Из испытанных препаратов наиболее предпочтительным и доступным для широкого практического применения является зоолан.
Влияние зоолана и гликопина на иммунный ответ при вакцинации
телят против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи Ц болезни слизистых крупного рогатого скота
Влияние зоолана и гликопина на эффективность иммунизации животных вакциной Тривак определяли в условиях хозяйства, неблагополучного по вирусным респираторным болезням телят, с подтвержденной циркуляцией вирусов инфекционного ринотрахеита (68,4%), вирусной диареи - болезни слизистых (84,7%) и парагриппа-3 (72,4%). В экспериментах использовано 146 клинически здоровых телят 30-45-дневного возраста. С этой целью были сформированы три группы телят: две опытные (46 и 50 голов) и одна контрольная (50 голов).
В качестве средств специфической профилактики животным опытных и контрольной групп применяли живую лиофилизированную вакцину Тривак в соответствии с наставлением. Животным первой опытной группы дополнительно применяли зоолан внутримышечно в форме 0,3% раствора в дозе 2 мл на голову трехкратно: первый раз - за 12Ц18 часов до применения вакцины, а затем с интервалом 24 часа. Через 21 день после первой вакцинации проводили ревакцинацию животных с применением зоолана в тех же режимах. Животным второй опытной группы в качестве иммуномодулирующего средства применяли гликопин в том же режиме, что и зоолан, в форме 0,2% раствора в дозе 2 мл.
Взятие крови у животных для исследований проводили выборочно перед вакцинацией, через 20 дней (перед ревакцинацией) и спустя 20 дней после ревакцинации по 20 проб от каждой группы.
Установлено, что сочетанное применение зоолана или гликопина с вакциной Тривак способствовало более интенсивному повышению показателей иммунологической реактивности телят опытных групп по сравнению с контролем - при применении одной вакцины.
При этом повышение показателей Т-лимфоцитов телят первой и второй опытных групп по сравнению с контрольной составило соответственно 68 и 75 %, В-лимфоцитов - 125 и 75%, функциональной активности нейтрофилов в спонтанном НСТ-тесте - 55 и 52%, в индуцированном тесте - 32 и 19%, JgG - 48 и 43%, JgM - 60 и 53%, лизоцимной активности - 90 и 103%, бактерицидной активности сыворотки крови - 30 и 28%, среднего геометрического титра антител к вирусу ИРТ - 69 и 50%, ВД-БС - 100 и 89% и ПГ-3 - 79 и 274%.
Сочетанное применение иммуномодулирующих средств в комплексе с вакциной Тривак способствовало повышению профилактической эффективности при вирусных респираторных болезнях телят. Профилактическая эффективность сочетанного применения вакцины Тривак с зооланом составила 97,8%, с гликопином - 100,0% по сравнению с 84% в контроле. Сохранность телят в опытных группах была на 8,0% выше в сравнении с контролем.
Полученные результаты исследований позволяют заключить, что применение зоолана или гликопина способствует повышению противовирусного поствакцинального иммунитета у телят и профилактической эффективности на 13,8Ц16,0%, что дает основание рекомендовать их в качестве средств, повышающих эффективность специфической профилактики при вирусных респираторных болезнях телят и их сохранность.
Влияние гликопина на эффективность антителообразования при вакцинации коров-матерей против инфекционного ринотрахеита,
парагриппа-3 и вирусной диареи Ц болезни слизистых крупного
рогатого скота, иммунобиологические показатели и
напряженность колострального иммунитета у телят
С целью изучения эффективности сочетанного применения эмульсионной инактивированной вакцины против вируса парагриппа-3 (ПГ-3), инфекционного ринотрахеита (ИРТ) и вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота с иммуномодулятором гликопином в стационарно неблагополучном по респираторным болезням хозяйстве были сформированы две группы коров: опытная (280 голов) и контрольная (226 голов), которых иммунизировали эмульсионной инактивированной вакциной против вирусов ПГ-3, ИРТ и ВД-БС внутримышечно в дозе 2 мл двукратно с интервалом 21Ц30 дней за 1Ц1,5 месяца до осеменения с последующей ревакцинацией через 6 месяцев. Дополнительно животным опытной группы за 18Ц24 часа до первой вакцинации, а впоследствии двукратно после иммунизации с интервалом 24 часа внутримышечно применяли иммуномодулятор гликопин в виде 0,2% раствора в дозе 4 мл. При второй вакцинации и ревакцинации животных введение гликопина осуществляли в тех же режимах.
Взятие крови у животных обеих групп (по 10 голов из каждой группы) для исследований проводили до вакцинации (фоновое исследование) и через 30 дней после второй вакцинации. Молозиво для исследований и повторное взятие крови у животных осуществляли сразу после отела. У полученного потомства исследование крови проводили в динамике до приема молозива и в возрасте 2 и 5 дней.
С целью изучения влияния вакцинации коров-матерей на иммунобиологические показатели и сохранность потомства были сформированы две группы телят, полученных от вакцинированных коров: опытная (180 гол.) - телята, полученные от вакцинированных коров с применением гликопина, и контрольная (165 гол.) - телята, полученные от вакцинированных коров без применения гликопина.
Установлено, что сочетанное применение вакцины с гликопином способствует более выраженному иммунному ответу у коров. Так, при исследовании через 30 дней после второй вакцинации выявлено, что у животных опытной группы титры антител в сыворотке крови к вирусам ПГ-3, ИРТ и ВД-БС повысились на 215, 288, 185% соответственно против 123, 195, 152% в контроле. При исследовании сыворотки сразу после отела было установлено, что у опытных коров титры антител к данным вирусам превышали таковые контрольных: титры антител к вирусам ПГ-3, ИРТ и ВД-БС повысились на 53, 165 и 112% соответственно против 34, 123 и 100% в контроле. Следует отметить, что в молозиве опытной группы коров уровень титров антител к ПГ-3, ИРТ и ВД-БС был выше аналога на 24, 46, и 28% соответственно.
Результаты исследования колострального иммунитета у телят, полученных от иммунизированных коров-матерей, показали, что у телят обеих групп до выпойки молозива антитела к вирусам ПГ-3, ИРТ и ВД-БС отсутствовали. Через 2 дня после приема молозива титры антител к данным вирусам в сыворотке крови телят опытной группы были на 23, 40 и 28%, а через 5 дней - на 24, 36 и 32% соответственно выше в сравнении с контролем. При исследовании иммунного статуса телят, полученных от иммунизированных коров-матерей, установлено, что у телят опытной группы иммунологические показатели были значительно выше в сравнении с контрольной группой.
Так, у телят опытной группы в 20Ц30-дневном возрасте относительное и абсолютное содержание Т- и В-лимфоцитов было выше на 25, 29% и 50, 58% соответственно в сравнении с этими показателями в контрольной группе. Показатели функциональной активности нейтрофилов крови у телят опытной группы в индуцированном тесте были выше на 28%, в спонтанном тесте не отмечено достоверной разницы данного показателя. Уровень иммуноглобулинов G и М у телят опытной группы был выше на 43 и 33% соответственно в сравнении с контролем. Лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови у телят опытной группы была выше на 75 и 8% соответственно, чем у животных контрольной группы. Следует отметить, что к 20Ц30-дневному возрасту наблюдалось характерное снижение уровня вируснейтрализующих антител у животных обеих групп. Однако в опытной группе телят титры антител к вирусам ИРТ и ВД-БС были выше на 34 и 53% в сравнении с контролем, достоверной разницы к вирусу ПГ-3 между опытной и контрольной группами не установлено.
Исследования показали, что заболеваемость телят опытной группы была на 15,8% ниже по сравнению с контролем. Применение данного способа позволило увеличить прирост живой массы и сохранность опытной группы телят.
Таким образом, сочетанное применение вакцины с гликопином способствует повышению иммуногенной активности вакцины, созданию более напряженного колострального иммунитета у новорожденных телят, полученных от коров-матерей опытной группы, повышению иммунобиологических показателей, что обеспечивает высокую профилактическую эффективность и сохранность животных при массовых респираторных болезнях.
Разработка новых средств и способов
ечебно-профилактической защиты телят при респираторных болезнях с применением различных антибактериальных, иммуномодулирующих и биологических средств
и их сравнительная оценка
Профилактическая и терапевтическая эффективность сочетанного применения антибактериального препарата сульфатетрина-М, иммуномодулирующего средства зоолана и гипериммунной сыворотки крови
Эффективность способов лечения определяли в условиях хозяйств Нижегородской области, являющихся стационарно неблагополучными по парагриппу-3 (ПГ-3), инфекционному ринотрахеиту (ИРТ) и вирусной диареи - болезни слизистых (ВД-БС), где не проводилась специфическая профилактика данных болезней. Результаты серологических исследований, проведенные перед опытами, свидетельствовали о циркуляции вирусов ПГ-3, ИРТ и ВД-БС. Количество серопозитивных животных по отношению к вирусу парагриппа-3 составило 38,4%, ИРТ - 66,4% и ВД-БС - 60,8%. Из проб биоматериала от больных телят были выделены вирусы: ИРТ (28,6%), парагрипп-3 (18,9%) и ВД-БС (24,4%), а также бактерии Streptococcus pneumoniae (10,6%), Salmonella spp. (18,9%), Salmonella dublin (34,4%), Pasteurelle multocida (8,2%). Заболеваемость животных составляла 68Ц85%, летальность достигала 18Ц25%.
Учитывая роль бактериальной микрофлоры в этиологической структуре респираторных болезней телят, нами был сконструирован новый комплексный препарат - сульфатетрин-М, содержащий в качестве активнодействующих веществ окситетрациклина гидрохлорид, сульфадимезин, рибофлавин, аскорбиновую кислоту, тиамина бромид и в качестве наполнителя белотин. Препарат применяли в соответствии с наставлением по его применению, утвержденным МСХ и продовольствия РФ от 14 января 2000 г. Он оказывает бактериостатическое действие на стафилококки, стрептококки, клостридии, эшерихии, сальмонеллы, пастереллы, рикетсии.
Испытание способов лечения проводили на трех группах телят в возрасте 45Ц60 дней в количестве 105 голов. Группы формировали по принципу аналогов: две группы - опытные, одна - контрольная, по 35 голов в каждой.
Больных телят первой опытной группы лечили с применением гипериммунной сыворотки крови (ГИС), содержащей антигемагглютинины к инфекционному ринотрахеиту не ниже 1:256, вирусной диарее - болезни слизистых - 1:500 и к вирусу парагриппа-3 в титре 1:1280 в дозе 2 мл/кг массы животного с интервалом 48 часов до выздоровления и дополнительно зоолан в виде 0,3% водного раствора внутримышечно в дозе 2,0 мл 2 раза в сутки до полного клинического выздоровления. Телятам второй опытной группы дополнительно применяли сульфатетрин-М в дозе 0,7 г/кг массы животного 2 раза в сутки до полного клинического выздоровления. Телятам контрольной группы животных применяли гипериммунную сыворотку.
С целью изучения профилактической эффективности гипериммунной сыворотки и сульфатетрина-М в комплексе с зооланом в условиях неблагополучного по вирусным респираторным болезням хозяйства были сформированы три группы телят в возрасте 20Ц30 дней: две группы - опытные (14 и 22 гол.), одна - контрольная (18 гол.). Всем группам животных применяли подкожно гипериммунную сыворотку, что и при лечении больных телят в дозе 1мл/кг массы животного трехкратно с интервалом 10 дней. Животным первой опытной группы дополнительно применяли зоолан в виде 0,3% водного раствора внутримышечно в дозе 2 мл; животным второй опытной группы также применяли зоолан по той же схеме, что и животным первой опытной группы, и дополнительно внутрь сульфатетрин-М в дозе 0,5 г/кг массы животного 2 раза в день в течение 7 дней.
Анализ результатов исследований показал, что наиболее выраженное действие на показатели клеточного, гуморального иммунитета и резистентности организма оказывало комплексное применение зоолана, гипериммунной сыворотки и сульфатетрина-М.
Особенно выраженное влияние применяемые способы лечения оказали на показатели В-лимфоцитов, функциональной активности нейтрофилов (индуцированный тест) и лизоцимную активность сыворотки крови. Так, содержание В-лимфоцитов у телят опытных групп увеличилось на 106,2Ц163,3% по сравнению с исходными показателями, или на 34,2Ц91,3% больше по сравнению с контролем; функциональная активность нейтрофилов соответственно по индуцированному тесту - на 122,4Ц172,3%, или на 46,4Ц96,3% больше по сравнению с контролем; лизоцимная активность - на 119,1Ц136,3%, или на 71,6Ц88,9% больше по сравнению с животными контрольной группы.
Увеличение относительного содержания Т-лимфоцитов у телят опытных групп было незначительным и по сравнению с животными контрольной группы оно составило 10,6Ц19,7%. Аналогичные изменения отмечены и в содержании общего белка, иммуноглобулинов G и лизоцимной активности сыворотки крови. Данные показатели у телят опытных групп по сравнению с контролем увеличились соответственно на 11,5Ц12,9%; 5,1Ц15,8%; 71,6Ц89,0%.
Анализ результатов терапевтической эффективности разработанных способов лечения показал, что наиболее высокий терапевтический эффект (97,1%) отмечен при комплексном применении гипериммунной сыворотки, сульфатетрина-М и зоолана. Сохранность животных у опытных групп была на 8,6Ц11,4% выше по сравнению с животными контрольной группы.
Применение разработанных способов лечения способствовало сокращению сроков лечения и рецидивов. Среднесуточный прирост массы у животных первой опытной группы был на 47,0 г, второй - на 89,0 г больше по сравнению с животными контрольной группы.
Исследования по изучению профилактической эффективности показали, что наиболее выраженной профилактической эффективностью являлся способ, включающий одновременное применение гипериммунной сыворотки, сульфатетрина-М и зоолана, который в 95,5% случаев предотвращал возникновение респираторных болезней телят. Относительно высокой эффективностью обладал и способ профилактики с применением гипериммунной сыворотки и зоолана (85,8%), что позволяет рекомендовать их для широкого применения в ветеринарной практике.
Полученные результаты исследований позволяют заключить, что применение разработанного способа лечения и профилактики респираторных болезней телят вирусно-бактериальной этиологии, включающего использование иммуномодулирующих (зоолан), антибактериальных (сульфатетрин-М) и биологических (гипериммунная сыворотка крови) средств, в условиях эксперимента показало его относительно высокую лечебно-профилактическую эффективность (97,1 и 95,5% соответственно). Эффективность комплексного применения указанных средств была обусловлена не только этиотропным действием, но и стимулирующим влиянием на механизмы иммунологической защиты животных.
Терапевтическая эффективность комплексного антибактериального препарата биозина-М, иммуномодулирующего средства кватерина и
гипериммунной сыворотки крови
В опытах использовали кватерин-3 (2,2,2 триметилгидразиний) - пропионат, синтезированный в Институте органического синтеза Латвийской Академии наук; комплексный антибактериальный препарат - биозин-М, сконструированный нами в ходе выполнения работы, содержащий в качестве активнодействующих веществ норсульфазол, аскорбиновую кислоту и биовит-80, а также гипериммунную сыворотку, которую получали от специально иммунизированных взрослых животных живой массой не менее 300 кг, свободных от заразных и кровепаразитарных заболеваний, и готовили по методу Н.И. Горбань (1981).
Донорами и реципиентами служили животные одного и того же неблагополучного хозяйства, где в дальнейшем и применяли сыворотку.
Испытание способов лечения проводили на трех группах телят в возрасте 45Ц60 дней в количестве 36 голов. Группы формировали по принципу аналогов: две группы - опытные, одна - контрольная, по 12 голов в каждой.
Больных телят первой опытной группы лечили с применением гипериммунной сыворотки крови (ГИС), содержащей антигемагглютинины к инфекционному ринотрахеиту не ниже 1:256, вирусной диарее - болезни слизистых - 1:500 и к вирусу парагриппа-3 в титре 1:1280, в дозе 2 мл/кг массы животного с интервалом 48 часов до выздоровления и дополнительно вводили кватерин в виде 40% водного раствора внутримышечно в дозе 4,0 мл 2 раза в сутки до полного клинического выздоровления. Телятам второй опытной группы дополнительно применяли внутрь антибактериальный препарат биозин-М в дозе 0,2 г/кг массы животного 2 раза в сутки до полного клинического выздоровления. Телятам контрольной группы животных применяли только гипериммунную сыворотку (ГИС).
Установлено, что у всех групп больных животных до начала опыта отмечено пониженное содержание В-лимфоцитов, общего белка и иммуноглобулинов G и М классов. Ниже физиологического уровня для данной возрастной группы животных были и показатели естественной резистентности организма, о чем свидетельствовали данные бактерицидной, лизоцимной и бетализинной активности сыворотки крови. Отмечено угнетение функциональной активности нейтрофилов.
Наиболее выраженное действие на показатели клеточного, гуморального иммунитета и резистентности организма оказывало комплексное применение кватерина, гипериммунной сыворотки и биозина-М.
Так, содержание В-лимфоцитов у телят опытных групп увеличилось на 113,3Ц166,6% по сравнению с исходными показателями, или на 41,1Ц94,4% больше по сравнению с контролем; функциональная активность нейтрофилов соответственно по индуцированному тесту - на 127,6Ц170,2%, или на 51,5Ц94,1% больше по сравнению с контролем; лизоцимная активность - на 125,0Ц147,6%, или на 77,6Ц100,2% больше по сравнению с животными контрольной группы. Увеличение относительного содержания Т-лимфоцитов у телят опытных групп было незначительным и по сравнению с животными контрольной группы оно составило 19,5Ц31,4%. Аналогичные изменения отмечены и в содержании общего белка и иммуноглобулинов G. Данные показатели у телят опытных групп по сравнению с контролем увеличились соответственно на 12,3Ц17,6 и 5,2Ц16,7%.
Анализ результатов терапевтической эффективности разработанных способов лечения показал, что наиболее высокий терапевтический эффект (91,7%) отмечен при комплексном применении гипериммунной сыворотки, биозина-М и кватерина.
Сохранность животных у опытных групп была на 8,3% выше по сравнению с животными контрольной группы. Применение разработанных способов лечения способствовало сокращению сроков лечения и рецидивов. Среднесуточный прирост массы у животных первой опытной группы был на 61,5 г, второй - на 66,0 г больше по сравнению с животными контрольной группы.
Применение разработанного способа лечения респираторных болезней телят вирусно-бактериальной этиологии, включающего использование иммуномодулирующих (кватерин), антибактериальных (биозин-М) и биологических (гипериммунная сыворотка крови) средств, в условиях эксперимента показало его относительно высокую терапевтическую эффективность (91,7%). Эффективность комплексного применения указанных средств была обусловлена не только этиотропным действием, но и стимулирующим влиянием на механизмы иммунологической защиты животных.
Разработка новых, экологически чистых средств растительного
происхождения, обладающих иммуномодулирующей и
ечебно-профилактической активностью при
респираторных болезнях телят
Подбор лекарственных растений и способ получения
растительных препаратов
Для изготовления новых растительных препаратов были подобраны различные лекарственные травы, которые, по данным литературы, известны в народной медицине как средства, обладающие антибактериальным, противовирусным, иммуностимулирующим и лечебно-профилактическим действием при болезнях, связанных с нарушениями функции иммунной системы, желудочно-кишечных заболеваниях, болезнях органов дыхания.
Для решения поставленной задачи были отобраны следующие лекарственные растения: эхинацея пурпурная, чабрец, листья мать-и-мачехи, корни солодки, цветы липы мелколистной, почки сосны, корневища и корни девясила.
Эхинацея пурпурная (Ehinacea purpurea L.) - многолетник, произрастает в прериях Среднего Запада Северной Америки. Культивируется на Украине и Кавказе. Химический состав: полисахариды, флавоноиды, соединение эхинакозид, смолы и жирные кислоты. Эхинацея является стимулятором иммунной системы и обладает бактерицидными и антивирусными свойствами.
Мать-и-мачеха (Tussilago farfara) встречается повсеместно. Собирают листья в первую половину лета. Химический состав: слизь, при гидролизе которой образуются глюкоза, галактоза, урановые кислоты, горькие гликозиды, эфирное масло, сапонины, фитостерин, каротиноиды, яблочная и винная кислоты и др. В народной и научной медицине мать-и-мачеху применяют как отхаркивающее, мягчительное, противовоспалительное, дезинфицирующее и потогонное средство.
Чабрец (тимьян ползучий - Thymus serpyllum L.) естественно растет в лесной зоне. Собирают надземные части растений в период цветения. Химический состав: эфирное масло, дубильные вещества, горечи, флавоноиды, урсоловая и олеаноловая кислоты. В народной и научной медицине чабрец применяют как отхаркивающее, антисептическое, противосудорожное и болеутоляющее средство.
Солодка голая (Glycyrrhiza glabra L.) - многолетнее травянистое растение, произрастает на Северном Кавказе, в Средней Азии, на юго-востоке европейской части РФ. Лекарственное сырье - корни. Его заготавливают осенью или ранней весной как в неочищенном виде, так и очищенном от наружной оболочки. Химический состав: сапонин, глицирризин, флавоноиды, глюкоза, сахароза, крахмал, слизи, камеди, органические кислоты, витамин С, дубильные вещества, липиды. Применяется как отхаркивающее, обволакивающее средство при воспалительных явлениях в желудочно-кишечном тракте, заболеваниях органов дыхания, а также как бактерицидное средство.
Цветки липы мелколистной (Flores Tiliae) встречаются повсеместно. Лекарственное сырье - цветки, собранные в середине цветения вместе с пленчатыми прилистниками. Химический состав: эфирное масло, гликозиды, сапонины, каротин, аскорбиновая кислота, фитонциды, слизь, дубильные вещества. Применяется в качестве потогонного, антимикробного, диуретического, противокашлевого (отхаркивающего), общестимулирующего средства.
Почки сосны (Gemmue Pini) собирают ранней весной в период набухания, до расхождения чешуек на верхушках почек. Химический состав: живица, эфирное масло, каротин, витамины, горькие, дубильные, минеральные вещества, антоциановые соединения. В народной и научной медицине почки сосны применяют как отхаркивающее, потогонное, мочегонное и дезинфицирующее средство.
Девясил высокий (Inula heleium L.) - многолетнее дикорастущее травянистое растение, произрастает по берегам рек, на влажных лугах, среди кустарников на Кавказе, Алтае, в Средней Азии, на юго-востоке европейской части РФ. Лекарственное сырье - корневища и корни (Rhizomata et radices inulae). Химический состав: эфирные масла, инулин, сапонины и другие полисахариды. Применяют как отхаркивающее, противовоспалительное и дезинфицирующее средство при заболеваниях верхних дыхательных путей.
Из измельченных лекарственных трав в соответствии с требованиями
Государственной Фармакопеи готовили настойку на 70% спирте в соотношении сырья и извлекателя 1:5. Измельченное растительное сырье помещали в стеклянный сосуд, заливали спиртом, закрывали и выдерживали в темном месте при комнатной температуре (15Ц20С) в течение 7 дней, затем настойку сливали, отжимали лекарственное сырье, фильтровали и выливали в темную бутылку. Перед применением препараты разводили кипяченой водой, охлажденной до 37С до получения 7% раствора.
Из указанных трав были приготовлены следующие препараты: фитасол, фитастим и фитадез. Фитасол - из смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, листьев мать-и-мачехи, цветков липы мелколистной и корней солодки; фитастим - из смеси равных количеств трав и соцветий эхинацеи пурпурной, чабреца, листьев мать-и-мачехи и корней солодки; фитадез - из смеси почек сосны, травы и соцветий эхинацеи пурпурной, корневища и корней девясила.
Данные препараты были испытаны в качестве средств для коррекции вторичных иммунодефицитов у телят, профилактики болезней телят, а также с целью повышения традиционных способов лечения респираторных болезней телят. Были отработаны дозы, кратность и продолжительность их применения по вышеуказанному назначению. В диссертации приводятся режимы их применения, позволяющие получить наибольшую эффективность.
Иммуномодулирующая активность и профилактическая
эффективность фитастима, фитасола, фитадеза
Исследования по иммуномодулирующей активности и профилактической эффективности препаратов проведены в условиях неблагополучных по респираторной патологии телят хозяйствах Нижегородской области на 560 клинически здоровых животных 20Ц30-дневного возраста. Влияние препаратов на иммунологические показатели организма определяли на четырех группах телят: три - опытные, одна - контрольная. Животным первой опытной группы (112 голов) внутрь за 20Ц30 минут до кормления применяли 7% раствор фитастима в дозе 2,0 мл/кг живой массы один раз в сутки в течение 15 дней, животным второй (120 голов) и третьей (118 голов) групп аналогично фитастиму применяли соответственно фитасол и фитадез. Телятам контрольной группы (110 голов) аналогично фитастиму применяли 7% раствор настойки мать-и-мачехи в дозе 3 мл/кг живой массы. Взятие крови у животных для исследования проводили до применения препаратов (фоновое исследование) и спустя 5Ц7 дней после завершения опытов по 10 проб от каждой группы.
Установлено, что применение фитастима, фитасола и фитадеза способствует нормализации исходно сниженных показателей иммунного статуса телят.
Так, относительное содержание Т-лимфоцитов крови у животных опытных групп увеличилось соответственно на 23, 22 и 19% против недостоверной разницы в контроле, абсолютное содержание Т-лимфоцитов увеличилось на 68, 60 и 54% против 24% в контроле, относительное содержание В-лимфоцитов увеличилось соответственно на 49, 43 и 33%, абсолютное содержание В-лимфоцитов увеличилось на 100, 74 и 65% по сравнению с контролем, где отмечалось недостоверное изменение данного показателя.
Установлено выраженное стимулирующее влияние фитопрепаратов на показатели функциональной активности нейтрофилов крови. Так, активность нейтрофилов в спонтанном тесте у телят опытных групп увеличилась соответственно на 94, 67 и 72% против недостоверной разницы в контроле, в индуцированном тесте - на 107, 107 и 94% против 22% в контроле. Уровень иммуноглобулинов G в сыворотке крови телят опытных групп увеличился на 31, 24 и 15% по сравнению с недостоверной разницей этого показателя в контроле, иммуноглобулинов М - на 62, 37 и 33% соответственно против 26% в контроле.
Применение фитопрепаратов оказывает положительное влияние на показатели естественной резистентности организма телят. Так, лизоцимная активность сыворотки крови у телят опытных групп увеличилась на 143, 109 и 90% соответственно против 21% в контроле, бактерицидная активность сыворотки крови - на 31, 29 и 16% против недостоверного изменения данного показателя в контрольной группе.
Профилактическая эффективность испытуемых фитопрепаратов была соответственно на 6,1; 6,9; 7,6% выше в сравнении с контролем-аналогом. Сохранность животных в опытных группах составляла 99,1Ц100%, что на 4,6Ц5,5% выше в сравнении с контролем. Среднесуточный прирост живой массы у животных опытных групп был соответственно на 42, 36 и 37% выше, чем у телят контрольной группы. Применяемые препараты обеспечивали более легкую форму переболевания.
Таким образом, исследования показали, что применение фитастима, фитасола и фитадеза в дозе 2,0 мл/кг живой массы в течение 15 дней способствует повышению уровня исходно сниженных показателей иммунного статуса телят, что обеспечивает значительное снижение риска заболеваемости респираторной патологией, 100% сохранность и более высокий прирост живой массы животных по сравнению с контролем. Результаты исследований дают основание рекомендовать новые фитопрепараты для использования в качестве средств, повышающих эффективность традиционных лечебно-профилактических мероприятий при болезнях телят.
Профилактическая эффективность фитастима, фитасола и
фитадеза в форме аэрозолей
Исследования выполнены на 553 клинически здоровых телятах 20Ц30-дневного возраста, подобранных по принципу аналогов и сформированны в три опытные и одну контрольную группы.
Аэрозольной обработке подвергали животных четырех телятников, где содержались животные 20Ц30-дневного возраста. С профилактической целью клинически здоровых животных (145 голов) первого телятника обрабатывали аэрозолью 7% раствора фитастима из расчета 2 мл/м3 помещения. Животных (145 голов) второго телятника аналогично фитастиму обрабатывали аэрозолью фитасола, животных третьего телятника (136 голов) обрабатывали фитадезом аналогично фитастиму. Контролем служили 127 голов клинически здоровых животных аналогичного возраста четвертого телятника, которых обрабатывали аэрозолью спиртовой настойки мать-и-мачехи из расчета 3 мл/м3 помещения. Аэрозольную обработку проводили с помощью сверхзвуковой аэрозольной форсунки САФ при давлении 6Ц7 атм. в три цикла по 3 дня подряд с 2-х дневным интервалом между каждым циклом, при экспозиции препаратов 45Ц60 минут. Аэрозольную обработку осуществляли при температуре воздуха 140С и относительной влажности не ниже 70%. Стабильность аэрозолей достигали добавлением 10Ц20% стерильного глицерина или 10% глюкозы в порошке к общему объему рабочего раствора. Взятие крови у подопытных животных для иммунологических исследований проводили до применения препаратов (фоновое исследование) и спустя 7 дней после завершения трех циклов обработок. Общую бактериальную обсемененность воздуха животноводческих помещений определяли методом осаждения на чашки Петри с мясопептонным агаром.
Исследованиями установлено, что применение фитастима, фитасола и фитадеза в форме аэрозолей способствует повышению иммунологической резистентности организма телят. Так, увеличение Т-лимфоцитов у животных опытных групп по сравнению с исходными показателями составило соответственно 37,2Ц48,4%, что на 20,6Ц31,9% больше по сравнению с контролем, показатели В-лимфоцитов увеличились соответственно на 36,1Ц29,0%, или на 21,5Ц14,5% больше по сравнению с животными контрольной группы. Применение фитопрепаратов оказывало стимулирующее влияние на показатели общей резистентности организма, и особенно на функциональную активность нейтрофилов и лизоцимную активность сыворотки крови. У животных опытных групп функциональная активность нейтрофилов по спонтанному тесту по сравнению с животными контрольной группы увеличилась соответственно на 32,1Ц33,1%, индуцированному - 31,2Ц40,9%, или на 43,5Ц53,2% по сравнению с исходными показателями. Лизоцимная активность соответственно увеличилась на 88,9Ц68,4%, или на 57,3Ц36,8% больше по сравнению с животными контрольной группы.
Результаты исследований свидетельствовали также о высокой антимикробной эффективности аэрозолей фитастима, фитасола и фитадеза.
Общая микробная обсемененность воздуха в животноводческих помещениях после обработки фитастимом снизилась в 4,3 раза, фитасолом и фитадезом - в 3,9 раза и настойкой мать-и-мачехи - в 1,26 раза. Профилактическая эффективность препаратов составила 97,8Ц98,6%, что на 27,7Ц28,5% выше по сравнению с контролем.
Таким образом, проведенные исследования позволяют заключить, что применение в форме аэрозолей разработанных нами препаратов фитастима, фитасола и фитадеза способствует снижению микробной обсемененности воздуха в животноводческих помещениях, повышению исходно сниженных иммунобиологических показателей у клинически здоровых телят, обеспечивает профилактическую эффективность в 97,8Ц98,6% случаев при массовых респираторных болезнях, 100% их сохранность и увеличение среднесуточных привесов. Достоверных различий в эффективности разработанных средств не установлено.
Терапевтическая эффективность сочетанного применения фитадеза с гипериммунной сывороткой крови
Исследования проводили на двух группах больных телят: первая - опытная, вторая - контрольная, подобранные по принципу аналогов. Телятам опытной группы (125 голов) внутрь за 20Ц30 минут до кормления применяли фитадез в виде 7% водного раствора с интервалом 12 часов в дозе 4,0 мл/кг массы животного. Телятам контрольной группы (110 голов) аналогично фитадезу внутрь применяли спиртовую настойку мать-и-мачехи. Дополнительно телятам обеих групп подкожно вводили иммунную сыворотку животных-доноров в дозе 2 мл/кг живой массы с интервалом в 24Ц48 часов.
Для лечения респираторных болезней телят использовали экологически безопасный препарат фитадез, представляющий собой спиртовую настойку сбора лекарственных растений, включающего почки сосны, траву и соцветия эхинацеи пурпурной, корневища и корни девясила высокого. Препарат обладает бактерицидным, антивирусным, противовоспалительным, отхаркивающим и иммуностимулирующим действием. Относится к нетоксичным препаратам, не обладает кумулятивными, эмбриотоксическими и аллергенными свойствами, совместим с химиотерапевтическими и биологическими средствами.
С лечебной целью использовали гипериммунную сыворотку животных-доноров, содержащую антигемагглютинины к вирусам парагриппа-3 (ПГ-3) 1:1280, инфекционного ринотрахеита (ИРТ) 1:256 и вирусной диареи - болезни слизистых (ВД-БС) 1:1024.
В результате проведенных исследований установлено, что сочетанное применение фитадеза с иммунной сывороткой животных-доноров способствует повышению показателей иммунного статуса больных телят.
Применение фитадеза способствовало достоверному увеличению относительного и абсолютного содержания T- и B- лимфоцитов крови, функциональной активности нейтрофилов крови (НСТ-тест) и гуморальных факторов естественной резистентности организма. Так, относительное и абсолютное содержание T-лимфоцитов у телят опытной группы увеличилось на 56 и 57% соответственно против 19,3% в контроле, относительное и абсолютное содержание B-лимфоцитов увеличилось на 36 и 29% соответственно против 22 и 14% в контроле. Установлено значительное повышение функциональной активности нейтрофилов крови (НСТ-тест): в спонтанном - на 113% против 80% в контроле, в индуцированном - на 220% против 148% в контрольной группе; повышение уровня иммуноглобулинов G и M на 20 и 64% соответственно против недостоверной разницы в контроле.
Показатели лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови у опытной группы телят увеличились на 171 и 52% соответственно против 105 и 18% в контроле.
Терапевтическая эффективность сочетанного применения фитадеза с иммунной сывороткой животных-доноров составила 100%, или на 10% выше в сравнении с контролем-аналогом. Среднесуточный прирост живой массы у животных опытной группы был на 24% выше, чем у животных контрольной группы.
Таким образом, исследованиями установлено, что сочетанное применение фитадеза с иммунной сывороткой животных-доноров способствует повышению иммунного статуса телят, что обеспечивает высокую терапевтическую эффективность и сохранность животных при массовых респираторных болезнях.
ВЫВОДЫ
1. Эпизоотологическими, вирусологическими, бактериологическими, серологическими и иммунологическими исследованиями установлено, что респираторные болезни телят имеют сложную этиологическую структуру, ведущее место в которой принадлежит вирусам инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусу диареи - болезни слизистых.
В качестве бактериальных агентов, осложняющих развитие болезни, являются стафилококки, стрептококки, сальмонеллы и пастереллы.
2. Иммунологический мониторинг, основанный на системно-функциональном подходе к оценке иммунного статуса, позволил выявить у клинически здоровых и больных телят иммунодефицитного состояния, характеризующегося низкой функциональной активностью иммуно-компетентных клеток, пониженным содержанием общего белка и иммуноглобулинов.
2.1. Формирование иммунодефицитного состояния обусловлено нарушением условий содержания коров-матерей и телят и воздействием на организм животных ассоциаций микроорганизмов.
3. Разработаны новые способы коррекции вторичных иммунодефицитов у телят с применением зоолана, гликопина, кватерина и его производных - квациклина и изокватерина.
3.1. Установлено, что все испытанные препараты обладали выраженной иммуномодулирующей активностью при вторичных иммунодефицитах телят.
Сравнительное изучение их эффективности показало, что наиболее выраженное иммуномодулирующее действие отмечено у зоолана, гликопина и кватерина.
3.2. Применение зоолана в виде 0,3% раствора в дозе 1,6 мл или гликопина в виде 0,2% раствора в дозе 2 мл трехкратно с интервалом 5 дней нормализует соотношение Т- и В-лимфоцитов, повышает содержание иммуноглобулинов, функциональную активность нейтрофилов и неспецифическую резистентность организма (бактерицидную, лизоцимную, бетализинную активность сыворотки крови).
3.3. Выраженный иммуномодулирующий эффект выявлен при применении кватерина в виде 40% раствора в дозе 4 мл два раза в сутки в течение 5 дней, квациклина и изокватерина - в виде 2% раствора в дозе 4 мл внутримышечно трехкратно с интервалом 5 дней.
4. Разработаны новые способы повышения эффективности специфической профилактики вирусных респираторных болезней телят с применением вакцин и средств, обладающих иммуномодулирующей активностью.
4.1. Применение зоолана, гликопина, кватерина и его производных - квациклина и изокватерина при вакцинации телят против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 обеспечивает повышение напряженности поствакцинального противовирусного иммунитета у телят и их сохранности.
4.2. Сравнительное изучение эффективности препаратов показало, что наиболее высокий уровень антителообразования отмечен при применении вакцин в сочетании с зооланом или гликопином.
4.3. Двукратная иммунизация телят вакциной Тривак в 30Ц60-дневном возрасте в сочетании с зооланом или гликопином обеспечивала формирование не только выраженного специфического гуморального иммунитета, но и оказывала стимулирующее влияние на клеточные и гуморальные факторы неспецифической резистентности телят.
Уровень Т-лимфоцитов у телят опытных групп по сравнению с контролем увеличивался соответственно на 68,0 и 75,0 %, В-лимфоцитов - 125,0 и 75,0%, JgG - 48,0 и 43,0%, JgM - 60,0 и 53,0; средний геометрический титр вируснейтрализующих антител к вирусам ПГ-3 увеличивался соответственно на 79,0 и 274,0%, ИРТ - 69,0 и 50,0%; ВД-БС - 100,0 и 89,0%.
4.4. Профилактическая эффективность сочетанного применения вакцины Тривак с зооланом составила 97,8%, с гликопином - 100,0% по сравнению с 84,0% в контроле; сохранность телят в опытных группах животных была выше на 8,0% по сравнению с контролем.
4.5. Двукратное введение гликопина стельным коровам повышает антигенную активность вакцинных препаратов против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота и обеспечивает формирование у телят напряженного колострального иммунитета. Иммунный статус телят, полученных от этих коров, характеризуется более высоким уровнем антител к вирусу инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи - болезни слизистых (8,1 log2; 8,6 log2 и 11,8 log2) соответственно против (5,8 log2; 7,0 log2 и 9,2 log2) в контроле; JgG 11,3 0,5 мг/мл против 7,9 0,4 мг/мл в контроле; JgM 1,2 0,03 мг/мл против 0,9 0,03 мг/мл в контроле при относительно высокой функциональной активности иммунокомпетентных клеток.
4.6. Профилактическая эффективность вакцинации коров против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи - болезни слизистых с применением гликопина составила 97,2% по сравнению с 81,4% в контроле. Сохранность телят в опытной группе составила 100% по сравнению с 94,0% в контроле.
5. Разработаны новые способы лечения и профилактики респираторных болезней телят вирусно-бактериальной этиологии, включающие применение иммуномодулирующих (зоолан, кватерин, фитасол, фитастим), антибактериальных (сульфатетрин-М, биозин-М) и биологических (гипериммунная сыворотка) средств.
5.1. Сравнительное изучение их эффективности показало, что наиболее высокая (97,1%) терапевтическая эффективность была установлена при комплексном применении сульфатетрина-М, зоолана и гипериммунной сыворотки крови, которая была обусловлена не только этиотропным действием препаратов, но и стимулирующим влиянием на механизмы иммунологической защиты.
5.2. Уровень В-лимфоцитов у телят данной опытной группы по сравнению с животными контрольной группы увеличился на 91,1 %, Т-лимфоцитов - на 19,8%, JgG - на 15,8%, общего белка - на 12,9%, функциональная активность нейтрофилов по индуцированному НСТ-тесту Ц на 96,2%, лизоцимная активность - на 89,0%, бактерицидная активность - на 11,7%, бетализинная активность - на 51,7%.
5.3. Применение данного способа лечения способствовало повышению противоэпизоотической эффективности мероприятий за счет увеличения сохранности животных и прироста живой массы. Сохранность телят опытной группы была на 11,4%, а прирост живой массы на 89,0 г больше по сравнению с контролем. Профилактическая эффективность данного способа составила 95,5% по сравнению с 77,8% в контроле.
6. Разработаны новые, экологически безопасные и доступные для применения в ветеринарной практике средства растительного происхождения - фитасол, фитастим и фитадез, обладающие иммуномодулирующей и лечебно-профилактической эффективностью при респираторных болезнях телят. Способы применения препаратов просты и экономичны, в установленных режимах применения они не оказывают токсического и побочного действия на организм животных.
6.1. Применение фитасола, фитастима и фитадеза внутрь в дозе 2,0 мл/кг живой массы за 20Ц30 минут до кормления один раз в сутки в течение 15 дней способствует нормализации исходно сниженных иммунобиологических показателей у телят. Относительное содержание Т-лимфоцитов у телят опытных групп увеличивалось на 19,0Ц23,0%, В-лимфоцитов Ц 33,0Ц49,0%, в то время как у телят контрольной группы изменение данных показателей было недостоверным.
Установлено выраженное стимулирующее влияние фитопрепаратов на показатели функциональной активности нейтрофилов крови, JgG и JgM, лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови, что обеспечивало профилактическую эффективность у животных опытных групп в 93,4Ц94,9% случаев по сравнению с 87,3% в контроле при 99,2Ц100,0% сохранности. Прирост живой массы у животных опытных групп был на 32,8Ц39,0% выше по сравнению с контролем.
6.2. Применение фитадеза внутрь в сочетании с иммунной сывороткой животных-доноров способствовало повышению терапевтической эффективности традиционного способа лечения на 10% и увеличению среднесуточного прироста живой массы на 24,0%. Способ оказывал нормализующее влияние на показатели клеточного и гуморального иммунитета у телят, общей неспецифической резистентности организма.
7. Разработан новый способ профилактики респираторных болезней телят с применением аэрозолей лекарственных средств, полученных из сырья растительного происхождения.
7.1. Применение фитасола, фитастима и фитадеза в форме аэрозолей из расчета 2 мл/м3 помещения в три цикла по 3 дня подряд с двухдневным интервалом между каждым циклом в течение 45Ц60 минут способствовало повышению исходно сниженных показателей клеточного и гуморального иммунитета, неспецифической резистентности организма у клинически здоровых телят, снижению микробной обсемененности животноводческих помещений в 3,8Ц4,3 раза, снижению заболеваемости телят на 27,7Ц28,5% и повышению прироста живой массы и их сохранности по сравнению с контролем.
8. Апробация разработанных средств и способов коррекции иммунодефицитных состояний у телят, лечения и профилактики респираторных болезней телят в производственных условиях показала их технологичность, относительно высокую воспроизводимость и противоэпизоотическую эффективность.
9. Внедрение новых средств, изготовленных по утвержденной научной и нормативно-технической документации, для борьбы с респираторными болезнями телят в условиях хозяйств Нижегородской области подтвердило их эффективность и востребованность.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
Для применения в ветеринарии предложены следующие нормативно-технические документы и приоритетные научные разработки:
* Сульфатетрин-М. Технические условия 9344-003-00670433-2000;
* Наставление по применению сульфатетрина-М в ветеринарии № 13-5-2/1851, утв. Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации, 2000 г.;
* Инструкция по изготовлению сульфатетрина-М в производственных условиях, утв. в установленном порядке 17.02.2003 г.;
* Биозин-М. Технические условия ТУ 9344-005-00670433-2000;
* Наставление по применению биозина-М в ветеринарии № 13-5-2/1853, утв. Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации, 2000 г.;
* Инструкция по изготовлению биозина-М в производственных условиях, утв. в установленном порядке 17.02.2003 г.;
* Временное наставление по применению зоолана в ветеринарии № 13-5-2/1552, утв. Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации, 2000 г.;
* Временное наставление по применению фитасола в ветеринарии в порядке широких производственных испытаний в 2006Ц2007 гг., одобренное Ученым советом НИВИ НЗ РФ и утв. Комитетом государственного ветеринарного надзора Нижегородской области 22 декабря 2005 г.;
* Временное наставление по применению фитастима в ветеринарии в порядке широких производственных испытаний в 2006Ц2007 гг., одобренное Ученым советом НИВИ НЗ РФ и утв. Комитетом государственного ветеринарного надзора Нижегородской области 22 декабря 2005 г.;
* Временное наставление по применению фитадеза в ветеринарии в порядке широких производственных испытаний в 2006Ц2007 гг., одобренное Ученым советом НИВИ НЗ РФ и утв. Комитетом государственного ветеринарного надзора Нижегородской области 21 декабря 2005 г.;
* Научно обоснованная система эпизоотологического надзора профилактических и лечебно-реабилитационных мероприятий при болезнях телят в раннем постнатальном периоде, одобренная Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации, 2000 г.;
* Методические рекомендации по коррекции системных иммунодефицитов для профилактики и терапии массовых желудочно-кишечных и респираторных болезней телят, одобренные Ученым советом НИВИ НЗ РФ и секцией ветеринарной медицины Северо-Восточного научно-методического центра Российской Академии сельскохозяйственных наук, 2005 г.;
* Рекомендации по способам профилактики респираторных болезней телят, одобренные Ученым советом НИВИ НЗ РФ и секцией ветеринарной медицины Северо-Восточного научно-методического центра Российской Академии сельскохозяйственных наук, 2007 г.;
* Рекомендации по способам лечения респираторных болезней телят, одобренные Ученым советом НИВИ НЗ РФ и секцией ветеринарной медицины Северо-Восточного научно-методического центра Российской Академии сельскохозяйственных наук, 2008 г.;
* Технология лечебно-профилактической защиты от массовых желудочно-кишечных и респираторных болезней телят, одобренная Ученым советом НИВИ НЗ РФ и НТС Министерства сельского хозяйства и продовольственных ресурсов Нижегородской обл., 2009 г.;
* ечебно-профилактические средства и способы их применения для лечения и профилактики респираторных болезней телят, приоритетность которых подтверждена патентами Российской Федерации № 2150281, 2150279, 2169558, 2303992, 2309762, 2311190, 2328299, 2364407;
* Биологически активные средства и способы их применения для коррекции вторичных иммунодефицитов у телят, приоритетность которых подтверждена патентами Российской Федерации № 2150289, 2305531, 2311189, 2317091, 2318530.
Данные научные разработки в установленном порядке в 2008Ц2009 гг. прошли государственную процедуру учета и регистрации и Федеральным агентством по науке и инновациям Российской Федерации выдано 11 регистрационных свидетельств на следующие объекты учета научно-технической деятельности с присвоением номеров государственной регистрации:
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/007. Способ профилактики респираторных болезней телят.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/008. Препарат для профилактики респираторных болезней телят.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/009. Лечебно-профилактическое средство для молодняка сельскохозяйственных животных и способ профилактики и лечения респираторных болезней телят с его применением.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/010. Лечебно-профилактическое средство для молодняка сельскохозяйственных животных и способ профилактики и лечения желудочно-кишечных болезней телят с его применением.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/013. Лечебно-профилактическое средство для молодняка сельскохозяйственных животных и способ профилактики и лечения вирусных респираторных болезней телят с его примене-нием.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/014. екарственное средство для профилактики респираторных болезней телят и способ аэрозольпрофилактики с его применением.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/015. Биологически активный стимулятор и способ коррекции вторичных иммунодефицитов у телят с его применением.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/016. Биологически активный стимулятор и способ повышения неспецифической резистентности с его применением.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/017. Биологически активный стимулятор и способ коррекции вторичных иммунодефицитов у телят с его применением.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/018. Лечебно-профилактическое средство для молодняка сельскохозяйственных животных и способ профилактики и лечения вирусных желудочно-кишечных болезней телят с его применением.
№ 15070.3666026906.06.8.001.2/020. Способ профилактики респираторных болезней телят с применением аэрозоля фитастима.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ
ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ
1. Сисягина, Е.П. Иммуномодулирующая активность зоолана при вторичном иммунодефиците у телят / Е.П. Сисягина // Научные основы технологии производства ветеринарных препаратов: сб. докл. Междунар. конф. молодых ученых, 5Ц6 декабря 2002. - Щелково, 2002. - С. 128Ц130.
2. Сисягина, Е.П. Эффективность комплексного применения зоолана и фурациклина при болезнях телят / Е.П. Сисягина // Журн. Ветеринарная патология. - М., 2003. - № 1. - С. 177Ц179.
3. Сисягина, Е.П. Эффективность антибактериальных и иммуномодулирующих средств при болезнях телят со сложной этиологической структурой / Е.П. Сисягина // Стратегия развития сельского хозяйства и сфера услуг в Российской Федерации и в мире: мат. Междунар. Симпозиума. - М., 2004. - С. 72Ц75.
4. Сисягина, Е.П. Новые способы повышения противовирусного иммунитета у телят / Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова, П.Н. Сисягин // Сб. научн. трудов НГСХА, Нижний Новгород, 2005. - С. 61Ц64.
5. Сисягина, Е.П. Влияние гликопина на эффективность вакцинации телят / Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова и др. // Сб. научн. трудов НГСХА, Нижний Новгород, 2005. - С. 73Ц77.
6. Сисягина, Е.П. Способы коррекции иммунологического статуса у новорожденных телят / Е.П. Сисягина, Р.Е. Ким, Г.Р. Реджепова, З.Я. Косорлукова и др. // Сб. научн. тр. НГСХА, Нижний Новгород, 2005. - С. 33.
7. Сисягин, П.Н. Влияние гликопина на эффективность вакцинации телят при вирусных респираторных болезнях / П.Н. Сисягин, Г.Р. Реджепова, Е.П. Сисягина, С.В. Втюрин, Ю.Б. Юлдашов, Ю.Н. Федоров // Журн. Ветеринарная патология. - М., 2005. - № 4. - С. 116Ц118.
8. Ким, Р.Е. Иммунологический статус у новорожденных телят и способ его коррекции / Р.Е. Ким, Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова, И.В. Убитина и др. // Журн. Ветеринарная патология. - М., 2005. - № 4. - С. 119Ц122.
9. Сисягин, П.Н. Новые способы профилактики вирусных респираторных болезней телят / П.Н. Сисягин, Г.Р. Реджепова, Е.П. Сисягина, И.В. Убитина // Новые технологии в диагностике, профилактике и лечении болезней сельскохозяйственных животных: Сб. научн. тр. НИВИ НЗ РФ. - Н. Новгород, 2006. - С. 125Ц130.
10. Сисягин, П.Н. Коррекция вторичных иммунодефицитов у телят / П.Н. Сисягин, Г.Р. Реджепова, Е.П. Сисягина // Новые технологии в диагностике, профилактике и лечении болезней сельскохозяйственных животных: Сб. научн. тр. НИВИ НЗ РФ. - Н. Новгород, 2006. - С. 131Ц137.
11. Профилактика респираторных болезней / П.Н. Сисягин, Г.Р. Реджепова, Е.П. Сисягина, С.В. Втюрин, З.Я. Косорлукова, Ю.Н. Федоров // Новые технологии в диагностике, профилактике и лечении болезней сельскохозяйственных животных: Сб. научн. тр. НИВИ НЗ РФ. - Н. Новгород, 2006. - С. 138Ц143.
12. Новые способы повышения противовирусного поствакцинального иммунитета у телят / П.Н. Сисягин, Г.Р. Реджепова, Е.П. Сисягина // Проблемы совершенствования селекции технологий содержания и кормления животных, методов борьбы с болезнями различных этиологий в условиях Евро-Северо-Востока: Мат. научн. сессии 25 января 2006 г. - Киров, 2006. - С. 76Ц81.
13. Реджепова, Г.Р. Профилактика респираторных болезней телят аэрозолями дезинфицирующих средств / Г.Р. Реджепова, Е.П. Сисягина, Ю.Б. Юлдашов, Е.В. Карпачева // Новые технологии в повышении сохранности с.-х. животных: Мат. науч.-практич. конф. - Н. Новгород, 2007. - С. 135Ц138.
14. Сисягин, П.Н. Профилактическая эффективность препарата фитадез при массовых респираторных болезнях телят / П.Н. Сисягин, Г.Р. Реджепова, Е.П. Сисягина, И.В. Убитина, Ю.Б. Юлдашов // Новые технологии в повышении сохранности с.-х. животных: Мат. науч.-практич. конф. - Н. Новгород, 2007. - С. 139Ц144.
15. Сисягин, П.Н. Сравнительная эффективность различных иммуномодулирующих средств при вторичных иммунодефицитных состояниях у телят / П.Н. Сисягин, Г.Р. Реджепова, Е.П. Сисягина, С.В. Втюрин, Ю.Н. Федоров // Журн. Ветеринарная патология. - М. - 2007. - № 2. - С. 116-120.
16. Сисягина, Е.П. Способы профилактики массовых респираторных болезней телят / Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова, П.Н. Сисягин // Журн. Ветеринарный консультант. - М., 2007. - № 19. - С. 16Ц17.
17. Сисягин, П.Н. Способы профилактики респираторных болезней телят вирусно-бактериальной этиологии / П.Н. Сисягин, Г.Р. Реджепова, Е.П. Сисягина, И.В. Убитина, Ю.Б. Юлдашов // Научное обеспечение животноводства. - Мат. науч.-практич. конф. 4Ц6 июня 2008 г., г. Саранск, 2008. - С. 180Ц182.
18. Сисягина, Е.П. Применение фитопрепаратов для профилактики респираторных болезней телят / Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова, П.Н. Сисягин, И.В. Убитина, Ю.Б. Юлдашов // Актуальные проблемы диагностики, профилактики и лечения болезней с.-х. животных: Сб. научн. тр. НИВИ НЗ РФ, Нижний Новгород, 2008. - С. 165Ц169.
19. Сисягина, Е.П. Терапевтическая эффективность фитосредств при респираторных болезнях телят / Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова, И.В. Убитина // Актуальные проблемы диагностики, профилактики и лечения болезней с.-х. животных: Сб. научн. тр. НИВИ НЗ РФ, Нижний Новгород, 2008. - С. 170Ц174.
20. Сисягина, Е.П. Влияние зоолана и гликопина на эффективность специфической профилактики вирусных респираторных болезней телят / Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова // Актуальные проблемы диагностики, профилактики и лечения болезней с.-х. животных: Сб. научн. тр. НИВИ НЗ РФ, Нижний Новгород, 2008. - С. 151-156.
21. Сисягина, Е.П. Лечебно-профилактическая эффективность антибактериальных, иммуномодулирующих и биологических средств при респираторных болезнях телят вирусно-бактериальной этиологии // Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова // Актуальные проблемы диагностики, профилактики и лечения болезней с.-х. животных: Сб. научн. тр. НИВИ НЗ РФ, Нижний Новгород, 2008. - С. 157Ц164.
22. Реджепова, Г.Р. Применение аэрозолей фитастима и фитасола для профилактики респираторных болезней телят / Г.Р.Реджепова, Е.П. Сисягина, Ю.Б. Юлдашов, И.В. Убитина // Актуальные проблемы диагностики, профилактики и лечения болезней с.-х. животных: Сб. научн. тр. НИВИ НЗ РФ, Нижний Новгород, 2008. - С. 175Ц179.
23. Сисягина, Е.П. Эффективность применения зоолана и гликопина при вакцинации телят против вирусных респираторных болезней / Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова, П.Н. Сисягин // Российский ветеринарный журнал. - М., 2008. - С. 40Ц42.
24. Сисягина, Е.П. Применение фитопрепаратов для профилактики респираторных болезней телят / Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова, И.В. Убитина // Журн. Ветеринарная практика. - Санкт-Петербург, 2008. - № 3 (42). - С. 94Ц97.
25. Сисягина, Е.П. ечебно-профилактическая эффективность антибактериальных, иммуномодулирующих и биологических средств при респираторных болезнях телят вирусно-бактериальной этиологии / Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова // Журн. Ветеринарная практика. - Санкт-Петербург, 2008. - № 3 (42). - С. 111Ц115.
26. Сисягина, Е.П. Терапевтическая эффективность фитадеза при респираторных болезнях телят / Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова, И.В. Убитина // Журн. Ветеринарная практика. - Санкт-Петербург, 2008. - № 3 (42). - С. 103Ц105.
27. Сисягина, Е.П. Эффективность комплексного применения иммуномодулирующих и биологических средств при респираторных болезнях телят / Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова // Современные проблемы диагностики, лечения и профилактика инфекционных болезней животных и птиц: Сб. научн. тр. ведущих ученых России, СНГ и др. стран. Вып.2. - Уральское издательство, Екатеринбург, 2008. - С. 431Ц435.
28. Сисягина, Е.П. Влияние зоолана и гликопина на эффективность вакцины Тривак / Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова, П.Н. Сисягин // Журн. Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. - М., 2009. - № 2. - С. 73Ц75.
29. Реджепова, Г.Р. Способы профилактики массовых респираторных болезней телят / Г.Р. Реджепова, Е.П. Сисягина, П.Н. Сисягин // Журн. Ветеринария с.-х. животных. - М., 2009. - № 2. - С. 31Ц32.
30. Реджепова, Г.Р. Применение фитопрепаратов для повышения резистентности и сохранности телят / Г.Р. Реджепова, Е.П. Сисягина, Ю.Б. Юлдашов, И.В. Убитина // Журн. Ветеринария и кормление. - М., 2009. - № 3. - С. 16Ц17.
31. Сисягина, Е.П. Влияние фитопрепаратов на иммунологический статус телят и повышение их сохранности / Е.П. Сисягина, И.В. Убитина, Ю.Б. Юлдашов // Повышение продуктивности сельскохозяйственных животных и птицы на основе инновационных достижений: мат. Всероссийской науч.-практ. конф., Новочеркасск, 2009. - С. 139Ц142.
32. Сисягина, Е.П. Эффективность биозина-М в комплексе с биологическими средствами при респираторных болезнях телят / Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова // Повышение продуктивности сельскохозяйственных животных и птицы на основе инновационных достижений: мат. Всероссийской науч.-практ. конф., Новочеркасск, 2009. - С. 131Ц135.
33. Сисягина, Е.П. Новые способы коррекции иммунодефицитов / Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова // Журн. Ветеринарный врач. - 2009. - № 6. - С. 39Ц42.
34. Сисягина, Е.П. Профилактика респираторных болезней телят с применением аэрозолей фитопрепаратов / Е.П. Сисягина, Ю.Б. Юлдашов, И.В. Убитина // Журн. Ветеринарный врач. - 2009. - № 6. - С. 34Ц36.
35. Реджепова, Г.Р. Иммунодефициты у телят раннего постнатального периода и способы их коррекции / Г.Р. Реджепова, Е.П. Сисягина // мат. Междунар. конф., посвящ. 80-летию Самарской НИВС, Самара, 2009. - С. 349Ц353.
36. Сисягина, Е.П. Иммунодефициты при респираторных болезнях телят / Е.П. Сисягина, Г.Р. Реджепова, П.Н. Сисягин // мат. Междунар. конф., посвящ. 80-летию Самарской НИВС, Самара, 2009. - С. 417Ц421.
37. Патент 2150281 Российской Федерации, МКИ 7 А61К 35/16, 35/70, 38/00, А61Р 11/00. Способ лечения респираторных болезней телят / Урбан В.П., Сисягин П.Н., Реджепова Г.РЕ.Сисягина Е.П. / заявлено 29.03.1999; опубликовано 10.06.2000. Бюл. № 16.
38. Патент 2150279 С1 Российской Федерации, МКИ 7 А61К 35/16, 38/00, А61Р 11/00. Способ профилактики острых респираторных болезней телят / Урбан В.П., Сисягин П.Н., Реджепова Г.РЕ.Сисягина Е.П. и др. / заявлено 29.03.1999; опубликовано 10.06.2000. Бюл. № 16.
39. Патент 2150289 С1 Российской Федерации, МКИ 7 А61К 38/00, А61Р 37/04. Способ повышения резистентности у новорожденных телят / Урбан В.П., Сочнев В.В.Е.Сисягина Е.П. и др. / заявлено 29.03.1999; опубликовано 10.06.2000. Бюл. № 16.
40. .Патент 2169558 С1 Российской Федерации, МКИ 7 А61К 31/00. Лечебно-профилактическое средство для молодняка крупного рогатого скота / Сисягин П.Н., Ким Р.Е., Косорлукова З.Я., Сисягина Е.П. и др. / заявлено 16.11.1999; опубликовано 27.06.2001. Бюл. № 18.
41. Патент 2303992 С1 Российской Федерации, МПК А61К 36/185, 36/28, 36/48, 39/42, 31/00. Лечебно-профилактическое средство для молодняка сельскохозяйственных животных и способ профилактики и лечения респираторных болезней телят с его применением / Сисягин П.Н., Реджепова Г.Р., Сисягина Е.П. и др. / заявлено 28.03.2006; опубликовано 10.08.2007. Бюл. № 22.
42. Патент 2305551 С1 Российской Федерации, МПК А61К 36/28, 36/53, 36/484, 37/00 Биологически активный стимулятор и способ повышения общей неспецифической резистентности с его применением / Сисягин П.Н., Реджепова Г.Р., Федоров Ю.Н., Сисягина Е.П. и др. / заявлено 28.03.2006; опубликовано 10.09.2007. Бюл. № 25.
43. Патент 2309762 С1 Российской Федерации, МПК А61К 36/00, 36/28, 36/484. Способ профилактики респираторных болезней телят / Сисягин П.Н., Реджепова Г.Р., Сисягина Е.П. и др. / заявлено 28.03.2006; опубликовано 10.11.2007. Бюл. № 31.
44. Патент 2311189 С1 Российской Федерации, МПК А61К 36/28, 36/484, 36/53, 37/04. Биологически активный стимулятор и способ коррекции вторичных иммунодефицитов у телят с его применением / Сисягин П.Н., Реджепова Г.Р., Косорлукова З.Я., Сисягина Е.П. и др. / заявлено 28.03.2006; опубликовано 27.11.2007. Бюл. № 33.
45. Патент 2311190 С1 Российской Федерации, МПК А61К 36/28, 36/53, 36/484, 37/04. Лечебно-профилактическое средство для молодняка сельскохозяйственных животных и способ профилактики и лечения вирусных респираторных болезней телят с его применением / Сисягин П.Н., Реджепова Г.Р., Федоров Ю.Н., Сисягина Е.П. и др. / заявлено 28.03.2006; опубликовано 27.11.2007. Бюл. № 33.
46. Патент 2317091 С2 Российской Федерации, МПК А61К 36/00, 36/28, 36/484, 37/04. Биологически активный стимулятор и способ повышения неспецифической резистентности с его применением / Сисягин П.Н., Реджепова Г.Р., Сисягина Е.П. и др. / заявлено 28.03.2006; опубликовано 20.02.2008. Бюл. № 5.
47. Патент 2318530 С2 Российской Федерации, МПК А61К 36/484, 36/28, 36/185, 37/00. Биологически активный стимулятор и способ коррекции вторичных иммунодефицитов с его применением / Сисягин П.Н., Реджепова
Г.Р., Косорлукова З.Я., Сисягина Е.П. и др. / заявлено 28.03.2006; опубликовано 10.03.2008. Бюл. № 7.
48. Патент 2328299 С1 Российской Федерации, МПК А61К 36/00, 31/04. Лекарственное средство для профилактики респираторных болезней телят и способ аэрозольпрофилактики с его применением / Сисягин П.Н., Реджепова Г.Р., Сисягина Е.П. и др. / заявлено 28.02.2007; опубликовано 10.07.2008. Бюл. № 19.
49. Патент 2364407 С1 Российской Федерации, МПК А61К 36/00, 39/155, 39/265. Способ лечения респираторных болезней телят / Сисягина Е.П., Реджепова Г.Р. и др. / заявлено 04.05.2008; опубликовано 20.08.2009. Бюл. № 23.
Сисягина
Елена Павловна
Разработка средств и способов терапии и профилактики
респираторных болезней телят
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
доктора ветеринарных наук
Корректор Г.Н. Орехова
Компьютерный набор и верстка Э.Н. Шакерова
Подписано в печать 15.02.2010 г.
Формат 60/84 1/16. Печать трафаретная. Бумага офсетная.
Объем: печ. л. 2,0. Тираж 100 экз. Заказ _______
Отпечатано в типографией НГСХА,
603073, Нижний Новгород, пр. Гагарина, д.97
Авторефераты по всем темам >> Авторефераты по сельскому хозяйству