ПОВЫШЕНИЕ БИОРЕСУРСНОГО ПОТЕНЦИАЛА ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ НА ОСНОВЕ УСОВЕРШЕНСТВОВАННОЙ ПРЕСТАРТОВОЙ И СТАРТОВОЙ СИСТЕМЫ ВЫРАЩИВАНИЯ 03.02.14 - биологические ресурсы АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой

Авторефераты по всем темам >> Авторефераты по биологии

На правах рукописи

ЕБЕДЕВА Ирина Анатольевна

ПОВЫШЕНИЕ БИОРЕСУРСНОГО ПОТЕНЦИАЛА ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ НА ОСНОВЕ УСОВЕРШЕНСТВОВАННОЙ ПРЕСТАРТОВОЙ И СТАРТОВОЙ СИСТЕМЫ ВЫРАЩИВАНИЯ

03.02.14 - биологические ресурсы

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

доктора биологических наук

г. Екатеринбург, 2011

Работа выполнена на факультете технологий животноводства в ФГОУ ВПО Уральская государственная сельскохозяйственная академия и в отделе мониторинга и прогнозирования болезней животных ГНУ Уральского научно-исследовательского ветеринарного института Российской академии сельскохозяйственных наук.


Научный консультант:	академик Россельхозакадемии, доктор биологических наук, профессор
	Донник Ирина Михайловна
Официальные оппоненты:	доктор биологических наук, профессор
	Мымрин Владимир Сергеевич
	доктор биологических наук,
	профессор Топурия Гоча Мирианович

	Заслуженный врач РФ
	доктор медицинских наук, профессор Бейкин Яков Борисович

Ведущая организация:	ФГОУ ВПО Тюменская государственная сельскохозяйственная академия, г. Тюмень

Защита состоится л___ декабря 2011 года в л___ часов на заседании диссертационного совета Д 006.099.01 при Уральском научно-исследовательском ветеринарном институте РАСХН (корпус №2, ул.аГлавная,а21)

Адрес: Уральский НИВИ

620142 г.аЕкатеринбург, ул. Белинского, 112а

тел/факс (343) 257-64-82, 257-82-63

Адрес сайта института: www.urnivi.ru E-mail: info@urnivi.ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ Уральского научно-исследовательского ветеринарного института Россельхозакадемии

Автореферат разослан л __ ________ 2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

кандидат ветеринарных наук Печура Е.В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Среди множества кормовых добавок, используемых в птицеводстве, эффективны те добавки, которые оказывают наибольшее влияние на развитие организма и становление гомеостаза в ранний постэмбриональный период, на состояние здоровья и раскрытие биоресурсного потенциала и генотипа цыплят-бройлеров в конце откорма в условиях технологического цикла. У цыплят на 3-5 день жизни отмечается первый критический период, поэтому важно именно в это время оптимально скорректировать питание (Фисинин В.И., 2009-2010; Егоров И.А., 2010). Хороший старт при откорме птицы приводит к лучшим результатам, таким как низкая смертность и улучшение однородности поголовья по массе. Анализ кормовых средств, используемых в птицеводстве, в первые дни жизни, показал, что пробиотики оказывают наиболее сильное влияние на организм (Тараканов Б.В., 2006). Замена антибиотиков пробиотиками связана также с решением ключевой задачи зоотехнии и здравоохранения - получение биологически полноценной и более качественной продукции животноводства и птицеводства (Бессарабов Б.Ф. 2006; Бойко Н.В., 2007; Смирнов Н.П., 2008;, Топурия Г.М., 2008; Федоров Ю.Н., 2008; Смирнов А.М., 2008, 2010; Егоров И.А., 2010; Калашников В.В., 2010; Панин А.Н., 2011; Малик Н.И., 2011). Пробиотические препараты Биоспорин и Моноспорин, в состав которых входят бактерии рода Bacillus по совокупности физиологинческих свойств и факторов биологической активности обладают несомненными преимуществами по сравнению с другими аналогами (Литусов Н.В., 2004; Петенко А.И., 2007- 2010; Кощаев А.Г., 2007- 2010 и др.).

В практике кормления животных и птицы также применяют ряд биологических стимуляторов для активизации роста и повышения жизнеспособности. Особого внимания заслуживает никотиновая кислота как протеин сберегающий фактор и влияющая на уровень гормонов, в частности, на прогестерон.

В настоящее время разработка методов повышения продуктивных качеств птицы на ранних этапах жизни, раскрытие ее биоресурсного потенциала, по-прежнему, остается в зоне внимания и имеет большое практическое значение. Требуется изучение вопросов, касающихся изменений происходящих в органах иммунитета и пищеварительной системы, в особенности печени и в мышечных волокнах при использовании различных активизирующих кормовых средств в первые дни жизни. Выполненные исследования посвящены изучению влияния никотиновой кислоты и пробиотических препаратов с B.subtilis на организм и усовершенствованию системы престартового и стартового выращивания цыплят-бройлеров.

Цель исследования. Изучить биологический потенциал цыплят-бройлеров, качество мяса у них при использовании кормовых добавок в престартовый и стартовый периоды технологического цикла и усовершенствовать систему выращивания с применением никотиновой кислоты и пробиотических препаратов Биоспорин и Моноспорин (B.subtilis).

В соответствии с целью были поставлены задачи:

Дать характеристику кормовым добавкам и пробиотикам в общепринятых схемах кормления цыплят-бройлеров в ранний постэмбриональный период.
Оценить биологический потенциал цыплят-бройлеров, выращиваемых на разных схемах и с использованием пробиотиков (по комплексу зоотехнических, биохимических и морфологических показателей).
Изучить влияние кормовых добавок и пробиотиков на качественный состав микрофлоры кишечника, качество мяса и субпродуктов бройлеров.
Оценить влияние пробиотического препарата Моноспорин в престартовых и стартовых фазах на состояние организма цыплят-бройлеров на финишной фазе продуктивности по комплексу морфологических, гистологических, биохимических показателей.
Определить эффект воздействия метаболитов B.subtilis на синтез ДНК, РНК и белка на эмбриональной культуре клеток 2-х дневных эмбрионов бройлеров
Экспериментально обосновать схему введения повышенной дозы никотиновой кислоты в престартовые рационы.
Разработать усовершенствованную систему выращивания цыплят-бройлеров в престартовом и стартовом периоде с использованием пробиотиков на основе B.subtilis и никотиновой кислоты.

Научная новизна исследований. Впервые научно-обоснована и внедрена система повышения биопотенциала цыплят-бройлеров в ранний постэмбриональный период с использованием комплекса пробиотических препаратов (на основе B.subtilis) и никотиновой кислоты. Установлено, что пробиотический препарат Биоспорин имеет приоритетное воздействие на организм птицы в формировании обмена веществ по сравнению со всеми другими стимулирующими кормовыми добавками, широко используемыми в ранний постэмбриональный период, и не имеет побочного действия (Получен патент на изобретение). Впервые установлено, что введение повышенной дозы никотиновой кислоты и пробиотика Биоспорин в ранний постинкубационный период цыплятам-бройлерам вызывало изменения уровня гормонов, электролитов крови, соотношение видового состава микрофлоры кишечника. Повышенная доза никотиновой кислоты, используемая в ранний постэмбриональный период, влияла на сохранение структуры мышечного волокна цыплят-бройлеров (Получен патент на изобретение). Морфо - гистологическими исследованиями органов иммунной и пищеварительной систем, печени и мышц цыплят-бройлеров подтверждено позитивное действие пробиотического препарата Моноспорин на организм птицы. Впервые на молекулярном уровне с использованием культуры эмбриональных клеток установлено позитивное влияние метаболитов B.subtilis (пробиотического препарата Моноспорин) на синтез дезоксирибонуклеиновой (ДНК) и рибонуклеиновой кислоты (РНК) и на синтез белка.

По результатам исследования получено 3 патента на изобретение РФ: №2292156 Способ выращивания бройлеров от 27.01.2007, № 2332853 Способ выращивания цыплят-гипотрофиков от 10.09.2008 и № 2423870 Способ промышленного выращивания цыплят яичных и мясных кроссов от 08.02.2010.

Практическая значимость работы. Полученные результаты использования пробиотических препаратов Биоспорин и Моноспорин для более сильной защиты организма в ранний период жизни и как корректор синтеза белка после действия антибиотиков внедрены на птицефабриках Уральского региона и Российской Федерации. Предложенные дозы никотиновой кислоты, как протеинсберегающего фактора, способствовали более раннему формированию мышечного волокна у цыплят-бройлеров. Выявленный комплекс морфологических, гематологических и биохимических изменений в организме бройлеров расширяет познания в области метаболизма, витаминологии, физиологии и морфологии птицы при нагрузке антибиотиками, что позволяет оптимизировать применение антибиотиков и пробиотиков в ранний постинкубационный период. Полученные данные динамики содержания гормонов и электролитов крови, морфогистологические показатели состояния органов иммунной и пищеварительной системы бройлеров могут быть использованы в качестве физиологической нормы в лабораторной диагностике при оценке клинического состояния птицы.

На основании результатов исследования разработаны научно- практические рекомендации для птицеводческих хозяйств Особенности нормирования аскорбиновой и никотиновой кислот в престартовых рационах цыплят-бройлеров, утвержденные Министерством сельского хозяйства и продовольствия Свердловской области (Екатеринбург, 2007).

Полученные данные также внедрены в учебном процессе (Уральской, Тюменской, Курганской государственных сельскохозяйственных академиях, Кубанском государственном аграрном университете).

Исследования выполнены при поддержке Министерства сельского хозяйства и продовольствия Свердловской области (госконтракт Разработка повышения питательности престартовых комбикормов и обоснование применения их в птицеводстве, 2003, 2005 и 2006гг.), Российского фонда фундаментальных исследований (проект № 07-04-96123 Урал Характеристика гомеостаза в ранний постэмбриональный период по морфофизиологическим параметрам на модели птиц 2007-2008гг.).

Основные положения, выносимые на защиту:

Пробиотический препарат Биоспорин, среди анализируемых кормовых средств, используемых в престартовый период, оказывает позитивное влияние на обмен веществ и сохранности цыплят-бройлеров.
Результаты морфологических, гистологических и биохимических исследований при использовании различных кормовых добавок в стандартных системах престартового и стартового выращивания свидетельствуют о снижении биоресурсного потенциала цыплят-бройлеров.
Микрофлора кормов, кормовых добавок, содержимого толстого кишечника представлена рядом бифидо- и лактобактерий, кишечной палочкой. Пробиотический препарат Биоспорин способствует становлению микробной флоры кишечника в начале продуктивности и в процессе роста цыплят.
У цыплят-бройлеров качество мяса и субпродуктов улучшаются при использовании пробиотического препарата Моноспорин.
Двойная доза никотиновой кислоты стимулирует раннее формирование мышечного волокна и изменяет уровень гормонов щитовидной железы и прогестерона цыплят.
Метаболиты B.subtilis стимулируют процессы синтеза ДНК, РНК и белка в эмбриональных клетках и корректируют блокирующие действие антибиотика на биосинтез.
Научно-обоснованная престартовая и стартовая система в технологическом цикле выращивания бройлеров обеспечивает повышение биоресурсов и качества мяса и мясопродуктов.

Апробация работы. Материалы диссертации были доложены и обсуждены: на межрегиональных и международных научно-практических конференциях: Екатеринбург 1999, 2004, 2005, 2006, 2008; Курган, 2004, 2006; Волгоград, 2005; Мурманск, 2006; Москва, 2007, 2009; Троицк, 2007, 2008; Тюмень, 2007; Новосибирск, 2008; Украина: Судак, Алушта, 2008, 2009; на Первом Российском Научном Форуме Демидовские чтения на Урале - Екатеринбург, 2006; на 9-й Российской агропромышленной выставке Золотая осень Москва, 2007, 2008; на IV Международном симпозиуме Современные проблемы ветеринарной диетологии и нутрициологии, Санкт-Петербург, 2008; на Межведомственном координационном совещании по птицеводству, Сергиев Посад, 2008;; на Всероссийском съезде физиологов, Екатеринбург, 2009 и Калуга, 2010; на ученых советах УрГСХА и Уральского НИВИ, Екатеринбург, 2006-2011.

Публикации. Основные положения работы опубликованы в 61 научной статье, в том числе 18 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ (Журналы: Птицеводство -5, Ветеринария - 1, Ветеринария Кубани -2, Аграрный вестник Урала - 9 , Вестник Уральской медицинской академической науки -1 ).

ичное участие автора. Автору принадлежит идея и концепция исследований, определение путей научного поиска, организация опытов, анализ полученных результатов, научное обоснование выводов и предложение производству. Часть исследований проведена с сотрудниками Уральской ГСХА: по изучению действия никотиновой, аскорбиновой кислоте и селену с Маслюк А.Н. и Шацких Е.В. Гистологические исследования выполнены под руководством д.в.н., профессора ДроздовойаЛ.И.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 309 страницах компьютерного набора и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения, список литературы и приложения; кроме этого иллюстрирована 53 рисунками и 47 таблицами. Библиографический список включает 312 источников, в том числе 81 работа иностранных авторов.

Благодарности. Выражаем благодарность за всестороннюю научно-методическую помощь в выполнении работы: руководителям и специалистам птицефабрик: к.с.-х.н. Топоркову Н.В., к.э.н Эйриян С.К., Валишину Р.Р., Боровиковой О.Г., к.б.н. Зеленской О.В., ГаляутдиновааЕ.Н., Гусевой Л.Г.; сотрудникам Министерства сельского хозяйства и продовольствия Свердловской области; безвременно ушедшим Кляйнрок Ю.И. и Кузнецову В.Н.., а также ныне здравствующим к.с.-х.н. Колчину Г.А., к.э.н. Чемезову С.М.; сотрудникам Уральской государственной сельскохозяйственной академии: д.в.н., профессору Дроздовой Л.И., доценту, к.в.н. Жениховой Н.И.; сотрудникам Уральского научно-исследовательского ветеринарного института: д.в.н., профессору Шкуратовой И.А., с.н.с., к.в.н. Ряпосовой М.В.: профессору Кубанского государственного аграрного университета д.с.-х.н. Петенко А.И.

Особая благодарность ген. директору БиоТехАгро (г.Краснодар), к.с.-х.н. Калашникову А.И.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Эксперименты проведены на базе птицефабрик Среднеуральская, Рефтинская, Первоуральская Свердловской области в период 2003 - 2010 год, в соответствии с планом научно-исследовательской работы по теме: Характеристика гомеостаза по морфо-физиологическим показателям в ранний постэмбриональный период в условиях технологического цикла на модели птиц (госрегистрация № 01200810248) и Разработка применительных схем пробиотических препаратов Бацелл, Моноспорин, Пролам на модели птиц (госрегистрация № 01200810249). Объектом исследования являлись цыплята- бройлеры разных кроссов Смена-4 и Смена-7.

Всего было исследовано проб крови - 70, гистологических срезов - 144, образцов для микробиологических исследовании - 170, образцов для биохимических исследований - 22, исследуемое поголовье - 191а850 голов. Было проведено три серии экспериментов.

Первая серия экспериментов. Для определения наибольшей эффективности влияния изучаемых добавок в комбикорм вводили пробиотические препараты: БИО плюс 2Б, Биоспорин, НОРИНЭ; а также кормовые добавки: сухое молоко, органический селен , эмульгатор, повышенные дозы аскорбиновой и никотиновой кислоты. Препараты включали в рацион бройлеров в ранний постэмбриональный период (престартовый период) с суточного до 5-дневного возраста; в последующие периоды птица получала одинаковые рационы (табл.1).

Группы формировали по 160 голов в каждой (80 петушков и 80 курочек). С 6-го по 42-й день жизни цыплята всех групп получали общий рацион, предусмотренный схемой кормления птицефабрики. Цыплята контрольной группы в предстартовый период получали основной рацион - комбикорм, изготовленного по ГОСТ ПК 5-1-89. Цыплята опытных групп получали к комбикорму испытуемые добавки.

Забор крови проводили методом декапитации у 5 цыплят из каждой группы. У цыплят определяли уровень гормонов и электролитов крови в 6- и 38-дневном возрасте. Концентрацию тироксина (СТ4), трийодтиронина (СТ3), прогестерона устанавливали с использованием хемилюминесцентного метода на автоматическом анализаторе Advia Kentavr фирмы Bauer (Германия) с использованием диагностических наборов фирмы Bauer. Концентрацию калия, натрия, хлора определяли на автоматическом биохимическом анализаторе Architect CI 8200 фирмы Abbott (США) с помощью диагностических наборов фирмы Abbott (США).Исследования проводились в МУ Управления здравоохранения г. Екатеринбурга Клинико-диагностический центр.

Биологический материал от 10 цыплят- бройлеров (ножные и грудные мышцы, кожа, селезенка, кровь) был исследован на наличие возбудителей рода В.subtilis на бульоне и на агаре по общепринятой методике в Бактериологической лаборатории МУ ДГБ№5 (руководитель Кондрашенко Н.В.)

Таблица 1 - Схема первой серии опытов на цыплятах-бройлерах.

Возраст, дней
1-5			6-42
Рацион	Испытуемое кормовое средство	Доза	Рацион
Контрольная группа
Комбикорм ГОСТ ПК 5-1-89	-	-	Основной рацион
Опытные группы
Комбикорм ГОСТ ПК 5-1-89	Эмульгатор Лисофорт	1%	Основной рацион
Комбикорм ГОСТ ПК 5-1-89	Сухое молоко	5%	Основной рацион
Комбикорм ГОСТ ПК 5-1-89	БИО плюс 2Б	40 мг /100 г корма	Основной рацион
Комбикорм ГОСТ ПК 5-1-89	Биоспорин	3 мг/100г корма	Основной рацион
Комбикорм ГОСТ ПК 5-1-89	Неорганический (селен селенит натрия)	0.2 г (в пересчете на селен)	Основной рацион
Комбикорм ГОСТ ПК 5-1-89	Органический селен (Селплекс)	0.2 г в пересчете на селен)	Основной рацион
Комбикорм ГОСТ ПК 5-1-89	Никотиновая кислота	30 мг/100г корма	Основной рацион
Комбикорм ГОСТ ПК 5-1-89	Никотиновая кислота	60 мг/100г корма	Основной рацион
Комбикорм ГОСТ ПК 5-1-89	Аскорбиновая кислота	50 мг/100г корма	Основной рацион
Комбикорм ГОСТ ПК 5-1-89	Аскорбиновая кислота	250 мг/100г корма	Основной рацион
Комбикорм ГОСТ ПК 5-1-89	НОРИНЭ	3 мг/100 г корма	Основной рацион

Микробиологические исследования содержимого толстого кишечника цыплят разного возраста, комбикорма, который получала птица с 1-х по 5-е сутки на наличие гриба Aspеrgillus проведены в Уральской ГСХА на кафедре микробиологии (руководитель к.б.н., доцент Носырева Л.А.).

Для гистологических исследований у цыплят-бройлеров были отобраны образцы тканей и органов (фабрициевой бурсы, тимуса, селезенки, печени и грудной мышцы). Материал фиксировали в 10-%-ом растворе нейтрального формалина. Изучение общих структурных изменений в органах проводили на парафиновых срезах, окрашенных гематоксилином и эозином. Все гистологические исследования документировались фотографированием на микроскопе Micros (Австрия). Исследования проводили в Уральской ГСХА на кафедре анатомии и гистологии (руководитель д.в.н , профессор Дроздова Л.И.).

Анализ корма и помета проводили согласно методикам в соответствии с ГОСТ, определяли общий азот по методу Кьельдаля, массовую долю сырого жира и сырой клетчатки, сырую золу, кальций, фосфор. Химический анализ мяса (от 3 тушек каждой группы) осуществляли по общепринятым методикам. Биологическую полноценность мяса бройлеров определяли по качественно - белковому показателю (КБП), или коэффициенту биологической ценности белка мяса, представляющему собой отношение аминокислот триптофана к оксипролину, аминокислоты в мышцах определяли фотометрическим способом в аналитической лаборатории Уральском НИИ сельского хозяйства (руководитель Мотерн М.П).

На фоне научно-хозяйственных опытов с целью определения переваримости и использования основных питательных веществ рациона, были проведены физиологические (балансовые) опыты, при этом руководствовались Методикой проведения научных и производственных исследований по кормлению сельскохозяйственной птицы (ВНИТИП,2004). В ходе изучения влияния пробиотического препарата Биоспорин балансовый опыт был проведён с 38-дневного возраста в течение 3 дней. Рационы для птицы составляли согласно Рекомендациям по кормлению сельскохозяйственной птицы (ВНИТИП,2003). В ходе опытов условия содержания для всех групп цыплят были одинаковые, с соблюдением оптимальных зоогигиенических параметров микроклимата.

Во второй серии экспериментов изучали влияние двойной дозы никотиновой кислоты в ранний постэмбриональный период на рост цыплят-бройлеров гипо-, нормо- и гипертрофиков и на последующие периоды их жизни для установления максимального эффекта в промышленных условиях. Для проведения эксперимента по принципу пар-аналогов были сформированы контрольная и шесть опытных групп. Эксперимент проводили по схеме: не сортированные по массе цыплята получали основной рацион с никотиновой кислотой 30 мг/кг, цыплята 1, 2, 3 опытной группы получали основной рацион с никотиновой кислотой 30 мг/кг); цыплята 4, 5, 6 опытной группы (гипотрофики, нормотрофики и гипертрофики) с основным рационом получали никотиновой кислоты 60 мг/кг с суточного до 5 дневного возраста. С шестых суток условия кормления в контрольной и опытной группе были одинаковые.

Была использована порошковая форма никотиновой кислоты, которая механически смешивалась с готовым комбикормом. Определяли химический состав мяса и биологическую полноценность белка мяса птицы после убоя в конце откорма.

В третьей серии экспериментов проведены исследования по влиянию пробиотического препарата Моноспорин и антибиотика Энроколи. Цыплята контрольной и опытной групп в предстартовый период с 1 по 5 день жизни получали основной рацион с антибиотиком Энроколи. Бройлеры опытной группы с 6-х суток жизни получали дополнительно основной рацион с пробиотическим препаратом Моноспорин из расчета 0.03 мл/гол. В конце откорма определяли химический состав мяса и биологическую полноценность белка мяса птицы. Анатомическую разделку тушек проводили согласно Методике проведения научных и производственных исследований по кормлению сельскохозяйственной птицы (ВНИТИП, 2004). Учитывали динамику роста цыплят и их сохранность в течение всего технологического цикла выращивания.

В крови определяли количество эритроцитов, лейкоцитов, содержание гемоглобина, скорость оседания эритроцитов (СОЭ) по общепринятым методам. Концентрацию общего белка, альбуминов, глобулинов, кальция, фосфора, калия, натрия, хлора определяли на автоматическом биохимическом анализаторе Architect CI 8200 фирмы Abbott (США) с помощью диагностических наборов фирмы Abbott (США).

Для изучения влияния продуктов жизнедеятельности В.subtilis (пробиотического препарата Моноспорин) на фоне антибиотика Энроколи проведены исследования на эмбриональной культуре клеток двухдневных эмбрионов цыплят-бройлеров по общепринятым методикам для стволовых клеток в лаборатории Молекулярных технологий РАМН в Уральской государственной медицинской академии (Руководитель д.м.н. Макеев О.Г.). Для изучения эффектов жизнедеятельности B. Subtilis было проведено культивирование B. Subtilis и эмбриональных клеток. Для оценки влияния продуктов, синтезируемых B. Subtilis во время роста, эмбриональную культуру клеток инкубировали в стандартной среде с добавлением стерилизованного супернатанта культуры роста B. Subtilis в соотношении 1/99, 10/90, 20/80, 30/70 (первая цифра - объем супернатанта культуры роста B. Subtilis, вторая - объем культуры эмбриональных клеток). Антибиотик Энроколи добавляли в среду инкубации эмбриональных клеток в количестве 0,1, 0,25, 2,5 и 25 мкг/мл среды. Совместное влияние изучаемых препаратов исследовали посредством внесения их в культуральную среду эмбриональных клеток обоих препаратов и проводили сравнение с показателями контрольной культуры (без добавления данных веществ).

В ходе опытов еженедельно определяли живую массу птицы путем индивидуального взвешивания, сохранность птицы по отдельным периодам выращивания, анализировали причины падежа.

Экономическую эффективность выращивания цыплят-бройлеров устанавливали с учётом стоимости препаратов и дополнительно полученной продукции.

Полученные в экспериментах цифровые данные обработаны стандартными статистическими методами с применением компьютерной программы Microsoft Excel 2003 Statistica 6,0. Достоверными считали различия при р< 0,05.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Характеристика кормовых добавок, пробиотиков в общепринятых схемах кормления цыплят-бройлеров в ранний

постэмбриональный период

Мониторинговые исследования по использованию различных кормовых добавок и кормовых средств, применяемых в период 1-е - 5-е сутки жизни цыплят-бройлеров проведены на базе птицефабрик Свердловской области. Установлено, что наиболее часто добавляются к основному рациону кормовые добавки: пробиотические препараты: БИО плюс 2Б, Биоспорин, НОРИНЭ; эмульгаторы; повышенные дозы аскорбиновой и никотиновой кислоты; органические формы селена (Селплекс). На птицефабриках в этот период жизни также применяют антибиотик Энроколи или антибиотики энрофлаксацинового ряда. Традиционно используется для цыплят 1-4 суток жизни комбикорм ГОСТ ПК 5-1-89. ВНИТИП рекомендует с 1-х по 5-е сутки жизни цыплят добавлять к нему сухое молоко (3-5%) (Рекомендации ВНИТИП, 2003) , т.к. данный комбикорм низкой питательности, всего 22% сырого протеина, что не соответствует физиологической потребности цыплят-бройлеров современных кроссов. Сухое молоко на птицефабриках редко используется, так как не технологично, трудоёмко, дорого стоит. В настоящее время единый стандарт на кормление в престартовый период цыплят-бройлеров отсутствует, а птицефабрики периодически используют в рационе престартовые импортные комбикорма или разрабатывают свои рецепты, используя комплекс перечисленных кормовых добавок к основному рецепту, что зачастую экономически не целесообразно. При этом не учитывают уровень обменных процессов, патологические изменения в организме цыплят и снижение биологической полноценности мяса бройлеров.

В связи с этим научное и логическое обоснование использования кормовых добавок является актуальной задачей.

В наших исследованиях мы использовали пробиотические препараты Биоспорин (B.subtilis-3:1х109-8х109 B.licheninformis-31:1х108-2х109) (живые бактерии, лиофильно высушенные в сахарозно-желатиновой среде, производитеь ООО УраБиоФарм, Россия) ; БИО плюс 2Б (Bacillus subtilis, штамм DSM 5750, и Bacillus licheniformis, штамм DSM 5749, в соотношении 1:1 в концентрации 3,2 х 109 спор/г производитель Биохем ГмбХ), Германия, Наринэ (лиофилизированная культура ацидофильных молочных бактерий с питательной средой, сухая закваска, производитель Narex, Армения).

Из кормовых добавок в эксперименте использовали - Селенит натрия ТУ 6-09-17-209-88 квалификации Ч и Сел-Плекс фирмы Биотехнологический центр Оллтек Ирландия, НД № 13-5-2/1062. Действующим веществом препарата является селенометионин (основная форма), селеноцистеин и другие селеноаминокислоты. Содержание селена в Сел-Плексе - 1000 мг в 1 кг препарата; молоко сухое обезжиренное ГОСТ 10970-87. производитель ООО Молоко, С.Петербург, эмульгатор Ц Лисофорт, производитель KEMIN-EUROPA, Бельгия, продукт производства компании Alltech, Ltd/Оллтек, Лтд, Ирландия.

Была использована порошковая форма аскорбиновой и никотиновой кислоты, которые механически смешивали с комбикормом.

3.2. Биологический потенциал цыплят-бройлеров при выращивании на разных схемах кормления

3.2.1. Результаты зоотехнических исследований

В результате исследования кормовых добавок живая масса цыплят-бройлеров в ранний постэмбриональный период в конце выращивания была в пределах нормативных показателей. Включение в рацион пробиотических и других кормовых добавок Норинэ, Био плюс 2Б, никотиновой и аскорбиновой кислоты, Селплекса и эмульгатора Лисофорт в период с первых по пятые сутки жизни оказало неоднозначное влияние на зоотехнические показатели выращивание цыплят-бройлеров. Сохранность цыплят-бройлеров в конце откорма в группах, получающих пробиотик Биоспорин и двойную дозу никотиновой кислоты, была лучше, падежа по причине заболеваний органов пищеварения не выявлено. Тогда как в других группах при использовании престартовых комбикормов с добавлением сухого молока, эмульгаторов, аскорбиновой кислоты, селена органической и неорганической формы, комбикорма по ГОСТу, других пробиотических препаратов падеж птицы был от 30 до 50% (от общего числа павшей птицы) обусловлен энтеритами, клаоцитами, гепатитами.

3.2.2. Результаты морфологических, гистологических и параметров при использовании различных кормовых добавок

В возрасте 40 дней проводили морфогистологические исследования печени цыплят бройлеров при различном кормлении в первые пять дней жизни.

Материал для исследования был отобран у цыплят-бройлеров, получающих различные кормовые добавки и у цыплят контрольной группы. Различные патологические изменения печени были отмечены: при использовании стандартного комбикорма по ГОСТу и при использовании вместе с комбикормом эмульгатора, сухого молока, неорганического селена (селенит натрия по норме), органического селена - Селплекс, аскорбиновой и никотиновой кислоты. При использовании двойной дозы никотиновой кислоты и пробиотического препарата Биоспорин структурных изменений в печени не обнаруживали.

3.2.3. Результаты микробиологических исследований кормов и кормовых добавок и микрофлоры кишечника

Санитарно-бактериологическое состояние комбикормов с добавками с учетом органолептических исследований оказывалось удовлетворительным. Численное содержание микробов в пробах колебалось в значительных пределах 2.2-21.2 тыс. м.к.\г. Наиболее высокая цифра в пробах с пробиотическими препаратами и кормовой добавки Селплекс. Из всех групп выделяли Вac.mesenteries. Условно-патогенных и патогенных видов не выделено. Плесневые грибы в корме отсутствуют за исключением комбикорма с сухим молоком, где выделен гриб Aspergillius. У всех цыплят в возрасте 6 суток исследовали выделяемое толстой кишки на наличие грибов.. У цыплят, получающих комбикорм с Норинэ, комбикорм с сухим молоком в выделяемом толстой кишки обнаружены грибы из pода Aspergillus , в пробах контрольной группы выделялись условно-патогенные бактерии (p. Citrobacter). В опытной группе, где цыплята получали Биоспорин, ни в одной из трёх проб не выделились грибы. Это характеризует организм опытных цыплят как более устойчивый. Наличие грибов можно рассматривать как следствие дисбаланса микрофлоры. В возрасте 35 дней проводили повторные исследования содержимого кишечника. Патогенные микроорганизмы и грибы в исследуемых образцах не обнаружены.

Для повторных исследований были отобраны группы: контрольная и с испытуемыми добавками Биоспорин, Селплекс, аскорбиновая (250 мкг) и никотиновая кислота (60 мкг). В возрасте 1, 6 и 22 суток у цыплят-бройлеров производили отбор выделяемого толстой кишки для определения количества кишечной палочки, лакто- и бифидобактерий. При бактериологическом исследованиях проб содержимого, взятого из толстой кишки цыплят в первые сутки жизни преимущественно выделяли бактерии группы кишечной палочки, культуры E.coli. Бифидобактерии и лактобациллы не выделены.

Результаты исследования проб содержимого толстой кишки цыплят в возрасте 6 суток свидетельствуют о том, что идет дальнейшее становление нормофлоры кишечника. Из всех проб с Биоспорином выделяются два вида спорообразующих бацилл. Условно-патогенных бактерий и плесневых грибов не выделено. Наиболее высокий уровень микроорганизмов наблюдался у цыплят в группе с пробиотическим препаратом Биоспорин в возрасте 6 суток: кишечной палочки 105 ; лактобактерий - 104 ; бифидобактерий - 1010 . Относительно этой группы, уровень кишечной палочки, лактобактерий и бифидобактерий был ниже у цыплят, которые получали аскорбиновую и никотиновую кислоту, а также у цыплят контрольной группы и составлял; 104, 103, 109 соответственно. Заключительные исследования проводили в возрасте 22-х суток. Видовой и количественный состав основных представителей нормофлоры сохранился. Не выделено условно-патогенных и патогенных бактерий. Выявлен рост бифидобактерий в пределах 109, лактобактерий - 103 , кишечной палочки 106 . Следует отметить, что использование кормовой добавки Селплекс способствовало росту кишечной палочки, как и при использовании пробиотического препарата в этот же период жизни до 10 7 и уровень бифидо- и лактобактерий был ниже - 1010 и 103 соответственно. В группе с пробиотическим препаратом Биоспорин уровень бифидо- и лактобактерий, кишечной палочки сохранился самый высокий 1010 , 103 и 107 соответственно.

3.3.Качество мяса и субпродуктов

На наличие B.subtilis и B. licheninformis были проверены органы и ткани цыплят бройлеров в 40- дневном возрасте: ножная и грудная мышцы, кожа, селезенка, кровь. B.subtilis и B.licheninformis не обнаружены.

Химический анализ мяса цыплят-бройлеров при использовании пробиотических препаратов и других кормовых добавок был в пределах нормативных. В группах, где цыплята-бройлеры получали комбикорм с пробиотическим препаратом Биоспорин и никотиновой кислотой (60 мкг) отмечена тенденция более высокого уровня протеина (на 1,3-2,1%), низкого уровня жира в мясе (на 0,5-1,2 %).

В балансовых опытах по испытаниям пробиотического препарата Биоспорин наблюдалась аналогичная тенденция лучшего усвоения протеина и зольных элементов.

При определении биологической полноценности уровень триптофана в пробах опытных группах был несколько выше контрольных показателей.

3.4. Влияние никотиновой и аскорбиновой кислот, пробиотического препарата Биоспорин на биохимические показатели крови

цыплят-бройлеров

3.4.1. Результаты исследования уровня гормонов крови

В результате исследований стандартных схем лучшие результаты были получены в группах с использованием кормовых добавок: пробиотического препарата Биоспорин, аскорбиновой и никотиновой кислоты.

У цыплят этих групп в возрасте 6 и 38 дней были отобраны пробы крови для определения уровня гормонов (табл. 2)

Таблица 2 - Уровень гормонов в крови цыплят бройлеров при использовании никотиновой кислоты в престартовый период

Показатели

Контрольная группа

(30 мкг)

Опытная группа

(60 мкг)

Трийодтиронин, пмоль/л

6 дней

38 дней

11,37 1,90

8,45 2,17

12,11 2,74

8,13 0,91

Тироксин, пмоль/л

6 дней

38 дней

5,27 0,12

6,59 2,18

5,84 0,44*

5,81 1,01

Прогестерон, нмоль/л

6 дней

38 дней

1,88 0,17

0,72 0,39

2,15 0,32*

0.91 0,41*

Примечание * р0.05

Использование повышенной дозы никотиновой кислоты оказывало достоверное изменение на уровень прогестерона и тироксина. Известно, что никотиновая кислота единственный витамин, который оказывает влияние на прогестерон, который в свою очередь связан с гормонами щитовидной железы (Ковалев П.И., 2002).

Результаты влияния гипердозы аскорбиновой кислоты, которую применяли в течение 5-ти дней из расчета 250 мкг в престартовый период в опытной группе против 50 мкг в контроле представлены в таблице 3.

Таблица 3 - Уровень гормонов в крови цыплят бройлеров при использовании аскорбиновой кислоты в престартовый период.

Показатели

Контрольная группа (5 мкг)

Опытная группа

(250 мкг)

Трийодтиронин, пмоль/л

6 дней

38 дней

11,37 1,9

8,45 2,17

8.03 0.27*

6.47 0,82*

Тироксин, пмоль/л

6 дней

38 дней

5,27 0,12

6,59 2,18

5.59 0.27

9.22 1,86

Прогестерон, нмоль/л

6 дней

38 дней

1,88 0,17

0,72 0,39

1.63 0,24*

0.45 0,12*

Примечание * р<0,05

Использование гипердозы аскорбиновой кислоты вызывало некоторое снижение уровня изучаемых гормонов, разница между группами достоверна (р<0,05). При этом данный уровень гипердозы аскорбиновой кислоты в опытной группе не повлиял биохимические и морфологические показатели крови (Маслюк А.Н., Лебедева И.А., 2006, 2007).

Изменение показателей гормонов крови при использовании пробиотического препарата Биоспорин в престартовый период представлено в таблице 4.

Таблица 4 - Уровень гормонов в крови цыплят бройлеров при использовании Биооспорина в престартовый период.

Показатели

Контрольная группа

Опытная группа

Трийодтиронин, пмоль/л

6 дней

38 дней

12,00 1,46

9,64 1,84

10,64 1,05*

9,81 1,64

Тироксин, пмоль/л

6 дней

38 дней

5,73 0,32

7,62 1,06

5,23 0,16*

10,59 1,89

Прогестерон, нмоль/л

6 дней

38 дней

1,61 0,19

0,31 0,13

2,75 0,42*

0.64 0,23

Примечание * р<0,05

Анализ показателей изменения уровня гормонов выявил снижение количества трийодтиронина и тироксина в опытной группе .

Можно отметить, что пробиотический препарат Биоспорин и повышенные дозы никотиновой и аскорбиновой кислоты оказывали влияние на уровень гормонов крови.

3.4.2. Результаты исследования содержания электролитов крови

В крови определяли содержание ионов калия, натрия и хлора. По этим элементам характеризуют кислотно-основное равновесие (табл. 5-7).

Таблица 5 - Уровень электролитов крови при использовании аскорбиновой кислоты в престартовый период (р<0,05)

Показатели

Контрольная группа

Опытная группа

Калий, ммоль/л

В возрасте 6 дней

38 дней

6,9 0,64

9,46 0,6

6.56 0.44

9.57 0.49

Натрий, ммоль/л

В возрасте 6 дней

38 дней

150,2 0,65

145,2 3,6

148.4 1.68

148.25 4.3

Хлор, ммоль/л

В возрасте 6 дней

38 дней

113,4 1, 35

108,6 3,27

113.2 0.82

110.25 4.3

Из данных таблицы следует, что при повышении уровня аскорбиновой кислоты (опытная группа) не установлено каких либо закономерных изменений в составе электролитов крови.

Таблица 6 - Уровень электролитов крови цыплят-бройлеров при использовании никотиновой кислоты в престартовый период

Показатели

Контрольная группа

Опытная группа

Калий, ммоль/л

В возрасте 6 дней

38 дней

6,9 0,64

9,46 0,6

7,08 0,59

9,3 0,78

Натрий, ммоль/л

В возрасте 6 дней

38 дней

150,2 0,65

145,2 3,6

147,6 0,9

147,0 4,7

Хлор, ммоль/л

В возрасте 6 дней

38 дней

113,4 1, 35

108,6 3,27

110,4 1,35

107,0 3,26

Примечание * р<0,05

Уровень микроэлементов, характеризующих солевой обмен в организме, в пределах нормативных показателей, как в опытной, так и в контрольной группе (при использовании двойной дозы никотиновой кислоты в престартовый период).

Таблица 7 - Уровень электролитов крови цыплят бройлеров при использовании Биоспорина в престартовый период.

Показатели

Контрольная группа

Опытная группа

Калий, ммоль/л

В возрасте 6 дней

38 дней

6,54 0,31

10,00 0,0

7,08 0,52*

10.00 0,0

Натрий, ммоль/л

В возрасте 6 дней

38 дней

151,0 1,41

142,6 3,17

146,2 3.26

143.4 1,75

Хлор, ммоль/л

В возрасте 6 дней

38 дней

113,4 1, 15

106,8 2,01

109,0 2,62

107,2 1,47

Примечание * р<0,05

Применение пробиотического препарата Биоспорин в ранний постэмбриональный период также не оказало достоверного влияния на показатели калия, натрия и хлора, характеризующие кислотно - основное равновесие, как сразу после применения препарата, так и перед убоем птицы.

3.5. Обоснование экспериментальной схемы введения повышенной дозы никотиновой кислоты в престартовые рационы.

Как приём раскрытия биопотенциала бройлеров использовали применение повышенной дозы никотиновой кислоты в ранний постэмбриональный (престартовый) период.

Все цыплята бройлеры в суточном возрасте были сформированы в группы гипотрофиков, нормотрофиков и гипертрофиков (самцов и самок по 80 голов в каждой группе). Половина цыплят в каждой группе получала рацион с никотиновой кислотой в дозе 30 мкг/100 г корма, а вторая половина рацион с двойной дозой никотиновой кислоты 60 мкг/100 г корма. Контролем служила группа несортированных цыплят, выращиваемых с нормативной дозой никотиновой кислоты 30 мкг/100 г корма, Опыт длился с 1 по 5 сутки жизни. С 6-40 сутки все цыплята начинали получать одинаковые рационы. В 40 суток цыплята были взвешены. За период опыта была рассчитана сохранность. В 40 дней произведен контрольный убой по 3 курочки и 3 петушка для проведения гистологических исследований мышечного волокна.

Установлено, что никотиновая кислота действует как протеинсберегающий фактор (Ковалев П.И, 2002), это способствовало раннему формированию мышечного волокна у цыплят бройлеров к 6 -ти дневному возрасту (рис. 1 и 2).


Рисунок 1 - Контрольная группа. Между волокнами значительное количество жировой клетчатки. Волокна разъединены и деформированы.	Рисунок 2 - Опытная группа. Саркоплазма равномерно окрашена.

3.6. Оценка влияния пробиотического препарата Моноспорин в стартовых схемах на состояние организма цыплят-бройлеров

Один из применяемых в последнее время препаратов является пробиотик Моноспорин. В эксперименте использовали пробиотический препарат Моноспорин (В.subtilis 945(В-5225), регистрационный №ПВР -1-4.7/02/02099, производитель ООО Биотехагро Россия, г. Тимошевск Краснодарского края. Схема применения пробиотика Моноспорин усовершенствована с учетом производственных условий. Обычно на птицефабриках цыплятам с 1 по 5 день жизни выпаивают Энроколи, антибиотик широкого спектра действия для профилактики кишечных инфекционных заболеваний. В наших опытах после применения антибиотика выпаивали Моноспорин в течение 10 дней с 6 по 15 сутки жизни цыплят-бройлеров. С 1 по 15 сутки все условия испытания были одинаковые, кроме дачи Моноспорина. С 16 по 40 сутки опытные и контрольные группы цыплят-бройлеров имели одинаковые рационы и были в равных условиях.

В результате испытаний пробиотика Моноспорин был изучен гомеостаза цыплят бройлеров в финишную фазу продуктивности при использовании существующих и новых престартовых и стартовых схем в ранний постэмбриональный период, а также рассчитана динамика живой массы, сохранности, однородности стада, убойных показателей. При применении пробиотического препарата Моноспорина на фоне антибиотика Энроколи выявлена тенденция повышения живой массы и среднесуточного прироста (табл. 8).

Таблица 8 - Динамика живой массы и среднесуточный прирост цыплят-бройлеров при использовании препарата Моноспорин , г (xSx)

Возраст, дней	Контрольная группа			Опытная группа			Норма
Возраст, дней	курочки	петушки	среднее	курочки	петушки	Среднее	Норма
1 7 14 21 28 35	40,63,1 129,410,7 315,713,8 596,229,0 957,139,1 1412,349,8	40,94,2 128,217,5 318,621,6 596,138,8 968,932,9 1521,078,1	40,83,4 128,812,9 318,118,5 596,1449,2 963,044,5 1466,767,4	40,72,0 134,512,5 323,829,9 631,732,8 1012,443,7 1499,959,8	40,12,2 133,815,3 334,219,8 662,037,1 1082,368,4 1615,051,0	40,43,01 134,111,8 329,017,3 646,832,4 1047,359,0 1557,4 45,6	36,0 150,0 345,0 650,0 1050,0 1450,0
Убой в 40 дней	1730,0 105,3	1889,6 112,4	1809,8 98,8	1811,0 86,1	1995,3 73,2	1903,6 65,9	1800,0
Ср. сут прирост	43,3	47,2	45,25	45,3	49,9	47,6	45,0

Выявлена тенденция увеличения живой массы цыплят-бройлеров при использовании пробиотического препарата Моноспорина. Установлено также повышение сохранности на 1.3% (табл. 9) и однородности стада на 10% (табл. 10) при использовании пробиотического препарата Моноспорин (опытная группа) на фоне использования антибиотика, как в динамике, так и на заключительном этапе выращивания.

Таблица 9 - Динамика сохранности цыплят-бройлеров при использовании препарата Моноспорин.

Возраст, сутки

Контрольная группа

Опытная группа

Голов

Сохранность, %

Голов

Сохранность, %

47400

46647

46160

45565

45348

45175

44971

98,4

97,4

96,1

95,7

95,3

94,9

47700

47015

46690

46439

46259

46120

45883

98,6

97,9

97,4

97,0

96,7

96,2

Сохранность в группе при использовании пробиотического препарата Моноспорин (опытная группа) была выше на 0.5 - 1,5%.

Таблица 10 - Динамика однородности цыплят-бройлеров при использовании Моноспорина, %

Возраст, дней

Контрольная группа

Опытная группа

Норма

курочки

петушки

среднее

Курочки

петушки

Среднее

96,0

74,3

71,3

64,8

66,2

74,3

77,0

97,0

75,0

64,4

61,3

56,0

65,3

71,0

96,8

74,7

67,9

63,1

61,1

69,8

74,0

96,0

76,2

72,5

74,1

76,5

83,5

90,0

96,0

78,7

76,2

60,8

61,5

74,3

78,0

96,0

77,5

74,4

67,5

69,0

78,9

84,0

85,0

Однородность стада - важный технологический показатель, характеризуют уровень кормления птицы и соблюдение нормативных показателей по содержанию цыплят-бройлеров. Однородность в опытной группе на 7-12% выше, чем в контрольной группе.

По результатам убоя и анатомической разделки тушек бройлеров (табл. 11) установлена отёчность долей печени, повышенное отложение абдоминального жира, в том числе на мышечном желудке, утолщение стенок железистого желудка, некрозы на кутикуле, кровоизлияния на слизистой двенадцатиперстной кишки, деформация поджелудочной железы в контрольной группе. Использование Моноспорина с 6 по 15 сутки жизни в конце откорма характеризовалось повышением выхода мышечной массы на 1,4 %, снижением отложение подкожного жира на 3,1%, по сравнению с контрольной птицей.

Таблица 11 - Результаты анатомической разделки цыплят бройлеров, %

Показатели	Контрольная группа	Опытная группа
Мышцы грудные	25,2	25,9
Мышцы ножные	22,7	21,7
Мышцы другие	10,1	11,7
Общая мышечная масса	57,9	59,3
Кожа с подкожным жиром	15,9	12,8
Кости	26,2	27,9

Установлены патологические изменения органов пищеварительной системы у цыплят бройлеров контрольной группы. В печени цыплят-бройлеров была отмечена мелкокапельная жировая дистрофия гепатоцитов, расширение синусоидов, незначительная гиперемия микроциркулярного русла. Лимфациркулярная инфильтрация соединительной ткани и её разрастание. На тех же участках наблюдалось активное деление ядер. Белковая дистрофия, очаговые некрозы гепатоцитов, клетки без ядер, узкие синусоиды - это характерная картина печени цыплят контрольной группы. В печени цыплят-бройлеров опытной группы, получающих Моноспорин, гепатоциты были равномерно окрашены, только в некоторых из них обнаруживалась зернистая дистрофия. Балочное строение печени было хорошо выражено, обнаруживались обширные очаги кровоизлияний и плазмарагии. Синусоиды были заполнены эритроцитарной массой, а в системе триады видны полиморфно клеточные инфильтраты, состоявшие из лейкоцитов, лимфоцитов и плазматических клеток. Наблюдалась гиперемия кровеносных сосудов, первоскулярная инфильтрация, псевдоэозинофильная реакция. Печень в начальной стадии жировой дистрофии.

На гистологических срезах тонкого кишечника цыплят-бройлеров опытной группы, получающей пробиотический препарат Моноспорин, был отмечен хорошо сохраненный рисунок ворсинок. Секреция эпителия была хорошо выражена, бокаловидные клетки равномерно распределены в эпителии ворсинок. На отдельных участках наблюдалось утолщение ворсинок, гиперсекреция и лимфацитарная инфильтрация, дисквомация эпителия, а также гиперемия венозных кровеносных сосудов стенки кишечника и полиморфноклеточная инфильтрация стенки кишечника. В целом рисунок ворсинок был четко выражен, лимфатические скопления активизированы и среди зрелых лимфоцитов имели место клетки пластического ряда, что свидетельствовало об активизации защитной реакции кишечной стенки. Просматривались четко очерченные лимфатические фолликулы, что свидетельствовало хорошей защитной реакции кишечника. При изучении гистологических срезов тонкого кишечника цыплят контрольной группы был отмечен катаральный экссудат в просвете кишечника. Наблюдалась гиперплазия лимфоидных фолликулов. По картине ворсинок можно было отметить, что они у основания утолщены, на вершине утонченные, было зафиксировано слущивание эпителия. В тонком кишечнике цыплят контрольной группы были отмечены патологические процессы.

Установлено влияние пробиотического препарата Моноспорин на слизистую зоба, железистого и мышечного желудка (рис. 3 -8).


Рисунок 3 - Ороговение слизистой зоба цыплят контрольной группы в возрасте 40 дней	Рисунок 4 - Слизистая зоба в пределах гистологической нормы цыплят опытной группы в возрасте 40 дней

Рисунок 5 - Ворсинки железистого желудка цыплят-бройлеров контрольной группы в возрасте 40 дней. Нарушение структуры пищеварительных желез.		Рисунок 6 - Ворсинки железистого желудка цыплят-бройлеров опытной группы в возрасте 40 дней. Структуры пищеварительных желез в пределах гистологической нормы.

По гистологическим срезам установлено, что действие пробиотического препарата Моноспорин начинается с момента попадания на слизистую пищеварительного тракта с 6 по 15 сутки и продолжается длительный период (до 40 суток) до убоя цыплят. Вероятно, пробиотик способствует росту лактобактерий, которые колонизируются у птиц в зобе, и защищает слизистую зоба от механических повреждений частицами корма. Токсичное действие антибиотика установлено как на кутикуле, в виде некрозов, так и на подкутикулярном слое мышечного желудка (рис. 7).


Рисунок 7 - Подкутикулярный слой мышечного желудка цыплят-бройлеров контрольной группы в возрасте 40 дней. Отёк тканей и нарушение просветов желудочных ямок.	Рисунок 8 - .Подкутикулярный слой мышечного желудка цыплят-бройлеров опытной группы в возрасте 40 дней. Ткани и желудочные ямки в пределах гистологической нормы..

При исследованиях гистологических срезов бурсы Фабрициуса цыплят-бройлеров опытной группы, получающей Моноспорин, было установлено, что складчатость бурсы хорошо сохранена. Фолликулы бурсы распределены равномерно. Четко видна корково-мозговая зона. Соединительнотканные тяжи утолщены в области капсулы бурсы. Между тяжами и капсулой появляются жировые отложения, которые свидетельствуют о начале процессов инволюции бурсы Фабрициуса. Признаком инволюции являлись кистозные полости, которые выявлены как в эпителии, так и под ним. Эпителий бурсы равномерно покрывал все складки, в некоторых участках он был усилен за счет пролифирации липоэпителиальных клеток. На некоторых участках бурсы Фабрициуса наблюдалось утолщение капсулы и врастание эпителия. Проявляются эпителиальные признаки инволюции: ложные каналы и инкапсулированные кистозные полости с содержимым на месте фолликулов. В ложных каналах и в некоторых участках бурсы Фабрициуса просматривалась застойная гиперемия, был хорошо виден корковый и мозговой слой, не было кистозных полостей, эпителий был хорошо выражен. Складчатость стромы была в норме. В центре фолликулов начинала появляться соединительная и межуточная ткань. Бурса Фабрициуса цыплят-бройлеров, получающих Моноспорин, была в активном состоянии, были хорошо выражены иммунобиологические процессы. По гистологическим срезам бурсы Фабрициуса цыплят-бройлеров контрольной группы было установлено, что в органе разрасталась соединительная ткань. Не было четкой границы коркового и мозгового слоя, хотя фолликулы были выражены и хорошо развиты, был хорошо выражен эпителий. Фиксировалось разрастание соединительной ткани в межфолликулярном пространстве. Наблюдалась редукция лимфоидных фолликулов. В поле зрения часто попадала картина образования кистозных полостей в фолликулах бурсы. Макро- и микрокисты встречались довольно часто. В бурсе Фабрициуса цыплят контрольной группы активно протекала пролифирация эндотелия стенок сосудов, отмечался первоскулярный и подкапсулярный отек, были утолщены капсулы.

В тимусе цыплят-бройлеров опытной группы, получающих пробиотический препарат Моноспорин, наблюдалось активное разрастание тимической ткани между отдельными дольками тимуса. Некоторые дольки были редуцированы и на их месте была обширно разветвлена мозговая зона. Были отмечены участки жировой клетчатки непосредственно в мозговой зоне тимуса с наличием отложения жирового пигмента. Наряду с молодыми тельцами Госсаля, обнаруживались тельца с некрозами и отложениями солей извести. Микроциркулярное русло тимуса было в состоянии гиперемии, причем обнаруженные внутри сосуды, были гемолизированы. В межуточной соединительной ткани отмечали полиморфноклеточный инфильтрат и обнаруживали образования жировой ткани. Тимические тельца (тельца Госсаля) были в состоянии некроза и петолификации, сосуды в состоянии гиперемии. В тимусе цыплят контрольной группы также были отмечены инволютивные процессы: замещение ткани тимуса жировой тканью, разрастание соединительной ткани. Наблюдалась застойная гиперемия сосудов, кровоизлияния. В поле зрения встречалось мало телец Госсаля, хотя отмечалось скопление эпителиальных новых клеток, которые в последствие образовывали тельца Госсаля. Молодых телец Госсаля - мало или они отсутствовали. Местами просматривалась очаговая жировая инфильтрация тимуса, врастание межуточной соединительной ткани, гиперемия кровеносных сосудов и внутрисосудистый гемолиз. Все инволютивные процессы, происходящие в тимусе цыплят контрольной группы, были связаны с разрастанием жировой или соединительной ткани.

В селезенке цыплят-бройлеров опытной группы, получающей пробиотический препарат Моноспорин, были обнаружены перетрабекулярные кровоизлияния и гиперемия сосудов. Лимфатические сосуды были небольших размеров. Как в кишечнике, так и в селезенке фолликулы были хорошо выражены. В поле зрения попадалось достаточно много центров размножения фолликулов. В селезенке цыплят-бройлеров контрольной группы была отмечена застойная гиперемия. В светлых полях - центрах размножения самих фолликулов - лимфоидных клеток не было, и хотя цыплятам бройлерам 40 дней, фолликулы отсутствовали или попадали в поле зрения единичные фолликулы. В селезенке зафиксированы кровоизлияния около трабекулярных сосудов и распад эритроцитов.

В результате гистологического изучения мышечного волокна грудной и ножной мышцы цыплят было выявлено жировое перерождение мышечной ткани при использовании существующих схем кормления (рис. 9-10) мышечные волокна грудной мышцы цыплят-бройлеров опытной группы, получающей пробиотический препарат Моноспорин, были равномерно окрашены при равномерном распределении ядер мышечной ткани. Между тяжами мышечных волокон в месте расположения кровеносных сосудов были видны жировые прослойки, толщина которых не превышает объёма толщину 2-х мышечных волокон. В межуточной соединительной ткани жировые прослойки были более значительны и превышали объем четырех мышечных волокон. В поле зрения встречались единичные гипертрофированные волокна. На гистологических срезах грудной мышцы цыплят-бройлеров контрольной группы были видны четко выраженные, но не равномерно окрашенные волокна из-за их разной толщины. Отмечалось отложение жировой ткани между мышечными волокнами, были зафиксированы тромбы в сосудах. Некоторые волокна были рыхлые, также в мышечных волокнах наблюдались явления атрофии и некроза. В поле зрения попадались водянистые мышцы и прослойки межуточной ткани. В грудной мышце было отмечено отложение жира между отдельными мышечными пучками волокон и гипертрофированные мышечные волокна. На продольном разрезе грудной мышцы чаще, чем в опытной группе встречались гипертрофированные мышечные волокна, ядра клеток которых имели круглую форму. При изучении гистологических срезов ножных мышц цыплят-бройлеров опытной группы, получавших пробиотический препарат Моноспорин, было установлено, что в мышцах конечностей в отличие от грудных мышц был четко выражен рисунок мышечных тяжей, в поле зрения встречались единичные гипертрофированные мышечные волокна. В межуточной соединительной ткани жировые вакуоли были единичны, их количество было незначительно. На гистологических срезах мышечное волокно ножных мышц цыплят-бройлеров контрольной группы было четко выражено. Соединительнотканные прослойки были толще, чем мышечное волокно. Встречалась полиморфно клеточная инфильтрация между мышечными волокнами - так называемый воспалительный очажок. В поле зрения часто попадались пучки волокон соединительной ткани, большое количество гипертрофированных волокон. Были зафиксированы гипертрофированные мышечные волокна среди жировых клеток. И хотя мышечные пучки были четко выражены, в мышечной ткани отмечалось первоскулярное отложение жировых вакуолей и отложение жира между мышечными пучками и волокнами. Наблюдалось формирование тромбов в сосудах.


Рисунок 9 - Ножные мышцы цыплят-бройлеров контрольной группы в возрасте 40 дней. Перерождение мышечного волокна в жировую ткань.	Рисунок 10 - Ножные мышцы цыплят-бройлеров опытной группы в возрасте 40 дней. Мышечное волокно и жировая ткань в пределах нормы.

Морфологическим исследованиям крови цыплят в конце выращивания установлено достоверное снижение уровня лейкоцитов при использовании препарата Моноспорин, что подтверждается данными по отсутствию патологии органов пищеварительной и иммунной системы (табл. 12).

Таблица 12 - Гематологические показатели крови цыплят-бройлеров (xSx)

Показатели	Контрольная группа	Опытная группа
ейкоциты,10е9/л	3,300,40	2,06 0,16**
Гемоглобин, г/л	84,673,18	91,0017,62
Гематокрит, %	21,830,07	20,171,62
Эритроциты, 10е12\л	2,240,05	2,020,12
Средний объем эритроцита, ф/л	97,832,40	99,272,13
Ср. содерж. гемоглобина в одном эритроците, Пг	37,771,08	44,335,90
Распределение эритроцитов по объему, %	21,931,20	21,570,12
Тромбоциты, 10е9/л	27,6712,72	18,337,43
Ср. объем тромбоцитов, ф/л	33,803,24	26,272,77
СОЭ, Мм/час	4,001,16	3,001,00

Примечание ** р< 0,01

Биохимические исследования крови показали, что достоверные изменения отмечены по электролитам крови цыплят опытной группы по сравнению с контрольной группой (табл. 13).

Таблица 13 - Биохимический анализ крови цыплят-бройлеров (xSx)

Показатели	Контрольная группа	Опытная группа
Общий белок, г/л	27,674,17	25,670,34
Альбумины, г/л	4,670,66	5,670,34
Глобулины, г/л	23,003,51	20,000,58
Кальций, ммоль/л	2,450,20	2,650,04
Фосфор, ммоль/л	2,990,66	2,640,19
Калий, ммоль/л	10,000,00	7,570,43***
Натрий, ммоль/л	117,009,82	152,002,08**
Хлор, ммоль/л	93,677,69	115,332,40*

Примечание ***р<0.001, **р<0.01, *р<0.05

Таким образом, в крови цыплят-бройлеров при использовании пробиотического препарата Моноспорин отмечен достоверно более низкий уровень лейкоцитов. Учитывая состояние внутренних органов цыплят опытной группы можно отметить, что при использовании пробиотика Моноспорин происходит нормализация кислотно-основного равновесия.

3.7. Эффект воздействия метаболитов B. Subtilis на синтез ДНК, РНК и белка на эмбриональной культуре клеток (ЭКК).

Для изучения эффектов жизнедеятельности B. Subtilis было проведено культивирование B. Subtilis и эмбриональных клеток из яиц кур родительского стада бройлеров. Для оценки влияния продуктов, синтезируемых B. Subtilis во время роста, ЭКК инкубировали в стандартной среде с добавлением стерилизованного супернатанта культуры роста B. Subtilis в соотношении 1/99, 10/90, 20/80, 30/70 (первая цифра - объем супернатанта культуры роста B. Subtilis, вторая - объем культуры ЭКК) .

Антибиотик Энроколи добавляли в среду инкубации ЭКК в количестве 0,1, 0,25, 2,5 и 25 мкг/мл среды.

Совместное влияние изучаемых препаратов исследовали посредством внесения в культуральную среду ЭКК обоих препаратов и проводили сравнение с показателями контрольной культуры (без добавления данных веществ).

Внесение в культуру ЭКК среды, содержащей продукты жизнедеятельности B. Subtilis, сопровождалось статистически достоверным изменением активности клеток в отношении синтеза ДНК (табл.14), причем в интервале соотношения объемов культур 1/99 - 20/80 наблюдается стимуляция синтеза ДНК (до 38,89%). Дальнейшее увеличение концентрации продуктов жизнедеятельности бактерий вызывает достоверное угнетение синтеза ДНК (на 11%) .

Таблица 14 - Влияние продуктов жизнедеятельности B. Subtilis и антибиотика Энроколи на включение 214С-тимидина в ДНК эмбриональных клеток в условиях культуры. (xSx)

Включение 214С-тимидина в ДНК (Бк/106 кл)		Концентрация антибиотика мкг/мл
Соотношение объемов сред инкубации (v/v)		0	0,1	0,25	2,5	25
	0	5,40,09	4.360.07*	4.730.08*	1.250.04*	0.330.02*
	1/99	6.70.11*	4.810.04*#	4.290.12*	1.480.11*	0.470.03*#
	10/90	7.90.11*	5.620.13#	4.640.07*	1.640.05*#	0.320.06*
	20/80	7.50.12*	4.310.07*	4.120.05*#	1.160.05*	0.330.07*
	30/70	4.80.04*	4.270.27*	4.530.08*	1.130.10*	0.280.04*

Примечание * - достоверное отличие от контроля (без добавления среды роста B. Subtilis и антибиотика. # - достоверное отличие включения 214С-тимидина в ДНК в культуре с добавлением среды роста B. Subtilis и антибиотика от культуры только с добавлением антибиотика в соответствующей концентрации.

Здесь и далее достоверным считали отличие при р< 0,05

Установлено, что это связано с образованием B. Subtilis веществ, обладающих способностью угнетать пролиферацию не только микроорганизмов, но и ЭКК. Однако данный эффект проявляется лишь при замещении среды инкубации ЭКК средой кондиционированной B. Subtilis на треть по объему.

Выявлено, что внесение в культуру ЭКК антибиотика Энроколи в диапазоне концентраций 0,1-25 мкг/мл вызывает стойкое угнетение включения селективной метки в ДНК (на 20% уже при концентрации 0,1 мкг/мл и на 93,89% - в максимальной концентрации). Последнее можно объяснить присутствием в составе Энроколи энфрофлоксицина - препарата фторхинолинового ряда, механизм действия которого заключается в ингибировании синтеза ДНК. Привнесение в среду продуктов роста бактерий, обладающих стимулирующим эффектом в отношении синтеза ДНК, несколько улучшает ситуацию. Так, при концентрации антибиотика 0,1 мкг/мл применение кондиционированной среды B. Subtilis в соотношении 10/90 угнетения синтеза ДНК не наблюдалось (данные не отличались от контроля). Однако при остальных концентрациях угнетающий эффект антибиотика сохранялся, хотя и был выражен в меньшей степени. Определено, что синтезируемые бактериями вещества способны реактивировать топоизомеразы, блокируемые фторхинолинами, а также синтезировать вещества, способные расплетать двойную цепочку ДНК, оказывая топоизомеразоподобный эффект. Это многостадийный процесс, проявляющийся в снижение поступления антибиотика внутрь клетки и его ускоре нную внутриклеточную деградацию.

Установлено, что включение радиоактивно меченого предшественника синтеза РНК 14С-уридина продемонстрировал в целом сходную картину с той лишь разницей, что выявленные на примере синтеза клетками ДНК эффекты были более выраженными. Так, продукты жизнедеятельности бактерий вызывали увеличение синтеза РНК на 50-80%, а в максимальной концентрации не оказывали ингибирующего эффекта (табл. 15).

Механизм действия исследуемого антибиотика заключается в блокировании топоизомераз, наряду с нарушением репликации ДНК так же будет наблюдаться и нарушение транскрипции. Полученные данные в полной мере соответствуют этому предположению. Так, добавление антибиотика в культуральную среду сопровождалось дозозависимым подавлением синтеза РНК на 47-87%% .

Таблица 15 - Влияние продуктов жизнедеятельности B. Subtilis и антибиотика Энроколи на включение 14С-уридина в РНК эмбриональных клеток курицы в условиях культуры (xSx)

Включение 14С-уридина в РНК (Бк/106кл)		Концентрация антибиотика мкг/мл
Соотношение объемов сред инкубации (v/v)		0	0,1	0,25	2,5	25
	0	21,441,05	11.310.13*	5.230.20*	4.110.19*	4.330.17*
	1/99	32.651.08*	22.890,97#	18,550,69#	13,720,80#	9,110,57#
	10/90	39.610.99*	21,510,73#	23.401,11#	18,741,12#	10,230,63#
	20/80	35.641.20*	23,520,24#	21,790,74#	22.460,88#	13,470,08#
	30/70	28.640.91	20,490,15#	21,110,42#	20,641,30#	16.70,73*#

Примечание * - достоверное отличие от контроля (без добавления среды роста B. Subtilis и антибиотика), # - достоверное отличие включения 14С-уридина в РНК в культуре с добавлением среды роста B. Subtilis и антибиотика от культуры только с добавлением антибиотика в соответствующей концентрации

Как и в исследовании синтеза ДНК, привнесение продуктов жизнедеятельности бактерий в культуру ЭКК с добавлением антибиотика лишь в некоторой степени улучшало картину. Анализ данных, полученных при изучении эффектов продуктов B. Subtilis и антибиотика Энроколи на синтез эмбриональными клетками курицы белка позволил установить, что тенденция, выявленная в отношении синтеза нуклеиновых кислот, в целом сохраняется.

Продукты жизнедеятельности B. Subtilis в зависимости от концентрации, оказывают стимулирующий эффект на синтез белка ЭКК (табл. 16).

Таблица 16 - Влияние продуктов жизнедеятельности B. Subtilis и антибиотика Энроколи на включение 3Н-лейцина в белок эмбриональных клеток курицы в условиях культуры

Включение 3Н-лейцина в белок (Бк/106 кл)		Концентрация антибиотика
Соотношение объемов сред инкубации (v/v)		0	0,1	0,25	2,5	25
	0	66,56 2,33	41.341.75*	30.121.35*	24.110.97*	14.330.53*
	1/99	89.232.46*	68.962.03#	42.422.31*#	37.091.25*#	21.640.12*#
	10/90	102.223.61*	70.582.34#	63.662.07#	35.941.24*#	22.880.09*#
	20/80	89.872.89*	67.221.33#	58.973.31*#	32.831.97*#	19.640.07*#
	30/70	77.882.01	53.111.00*#	28.530.83*#	33.961.45*#	15.460.99*

Примечание * - достоверное отличие от контроля (без добавления среды роста B. Subtilis и антибиотика). # - достоверное отличие включения 3Н-лейцина в белок в культуре с добавлением среды роста B. Subtilis и антибиотика от культуры только с добавлением антибиотика в соответствующей концентрации.

Вместе с тем, выявленная зависимость не является линейной. Так, в диапазоне соотношения объемов, кондиционная B. Subtilis культура/культура ЭКК 1/99, 10/99 наблюдается рост стимулирующего эффекта продуктов жизнедеятельности B. Subtilis в отношении включения меченого лейцина в белок (на 34 и 54 %% по сравнению с контрольными величинами соответственно). В диапазоне соотношения объемов 20/80 и 30/70 наблюдается снижение стимулирующего эффекта (до 17%) .

Следует отметить, что зарегистрированная стимуляция синтеза белка не может быть объяснена образованием бактериями аминокислот, так как среда, в которой культивировали ЭКК, содержит их в избыточном количестве.

При добавлении в культуру инкубации антибиотика Энроколи выявлено дозозависимое снижение синтеза белка клетками (от 38% при минимальной концентрации до 78% при максимальной концентрации антибиотика).

Применение продуктов жизнедеятельности B. Subtilis в ряде случаев позволяет предотвратить угнетение синтеза белка под влиянием антибиотика, но лишь при его минимальных (0,1 и 1 мкг/мл) концентрациях в среде.

Таким образом, установлено, что пробиотический препарат Моноспорин, продукты жизнедеятельности B. Subtilis, способствуют стимуляции синтеза белка, о чем свидетельствует живая масса цыплят-бройлеров.

3.8. Престартовая и стартовая система в технологическом цикле выращивания бройлеров

В результате исследований разработана и научно-обоснована система обязательного применения пробиотических препаратов на основе B. Subtilis в технологических схемах выращивания цыплят-бройлеров в престартовый и стартовый период в дозах Биоспорин 3 мкг/100 г корма, Моноспорин 0,01 мл/гол. Никотиновую кислоту вводить цыплятам-бройлерам (гипотрофикам) в дозах 60 мкг/100 г корма.

Таблица 17 - Схема выращивания цыплят-бройлеров

Схема	Возраст, дней
	1-5	6-15	16-28	29-40
	Престаровый	Стартовый	Ростовой	Финишный
Стандартная	Основной рацион + антибиотик	Основной рацион	Основной рацион	Основной рацион
Новая - 1	Основной рацион + пробиотик (B. Subtilis)	Основной рацион	Основной рацион	Основной рацион
Новая - 2	Основной рацион + никотиновая кислота	Основной рацион	Основной рацион	Основной рацион
Новая Ц3	Основной рацион + антибиотик	Основной рацион + пробиотик (B. Subtilis)	Основной рацион	Основной рацион

Экономическая эффективность от применения пробиотических препаратов по новым схемам составляет 9 рублей прибыли на 1 рубль затрат.

4. ВЫВОДЫ

В стандартных технологических схемах кормления цыплят-бройлеров в престартовый и стартовый периоды в основном применяют с 1-х по 5-е сутки их жизни кормовые добавки с антибиотиками энрофлаксацинового ряда. Пробиотические препараты либо применяют параллельно с ними, что снижает их действие, либо вообще не используют.
Включение в рацион цыпят в период с 1-го по 5-й день жизни различных добавок, в т.ч. пробиотических (Биоспорин, Норинэ, Био плюс 2Б), а также никотиновой и аскорбиновой кислоты оказывало неоднозначное влияния на их зоотехнические показатели. Введение добавки Селплекс и сухого молока приводило к достоверному увеличению живой массы цыплят, но при этом существенно снижалась сохранность (на 10% и 4 % соответственно). Применение пробиотического препарата Биоспорина наоборот приводило к отсутствию падежа по причине заболеваний органов пищеварения и стабильной живой массе цыплят-бройлеров. При использовании других пробиотиков и кормовых добавок падеж по причине заболеваний желудочно-кишечного тракта составил 30-50% от количества павшей птицы.
Применение разных схем кормления, в том числе с использованием пробиотиков вызывало у цыплят изменение морфологической структуры печени. У цыплят, в рационе которых применяли пробиотический препарат Биоспорин на фоне повышенной дозы никотиновой кислоты, морфологическая структура печени была сохранена. У цыплят-бройлеров контрольной группы и других опытных групп, в которых пробиотики не применяли, регистрировали нарушение структуры тканей печени и разного рода гепатодистрофии.
Включение в рацион пробиотической добавки Биоспорин оказало положительное влияние на рост и развитие нормофлоры кишечника как после использования препарата, так и в последующие периоды. Уровень лактобактерий, в содержимом толстой кишки составил 103, бифидобактерий - 1010 , непатогенной кишечной палочки 10 7 м.е., что было выше (в 100-1000 раз), чем в контроле и других опытных группах.
Применение пробиотического препарата Биоспорин влияло на качество мяса цыплят-бройлеров: химический состав характеризовался в грудной мышце снижением содержания жира и повышением уровня протеина, минеральных веществ (на 0,5%, 1,3% и 0,9% соответственно).
Применение пробиотического препарата Моноспорин в стартовый период способствовало нормализации количества лейкоцитов крови до 2,06 0,16 против контроля 3,300,40 109 г/л (на 38% ) при р<0,01 и уровня электролитов крови: калия 7,570,43 ммоль/л против контроля 10,000,00 ммоль/л (на 24%) при р<0,001, натрия 152,002,08 ммоль/л против контроля 117,009,82 ммоль/л (или на 26%), хлора 115,332,40 ммоль/л против контроля 93,677,69 ммоль/л (или на 18%) при р<0,05.
Использование пробиотического препарата Моноспорин на фоне антибиотика Энроколи увеличивало синтез белка и корректировало токсичное действие антибиотика, о чем свидетельствовали гистологические исследования. В опытной группе с использованием пробиотического препарата Моноспорин, патологические изменения были менее выражены или не отмечены. В контрольной группе установлены патологические изменения: ороговение слизистой зоба, воспаление стенок железистого и мышечного желудка, некрозы на кутикуле, рексис и пикноз клеток двенадцатиперстной кишки, жировая дистрофия печени, стирание слизистой ворсинок тонкого кишечника.
Установлено, что применение пробиотического препарата Моноспорин в стартовый период на фоне антибиотика способствовало формированию у цыплят структурированного мышечного волокна, в контрольной группе наоборот отмечено перерождение мышечного волокна в жировую ткань. В мышечном волокне грудной и ножной мышцы цыплят-бройлеров при использовании существующих схем кормления было также выявлено жировое перерождение мышечной ткани.
В экспериментах на эмбриональной культуре клеток установлено достоверное (р<0,05) негативное дозазависимое влияние антибиотика Энроколи на синтез ДНК, РНК и белка. Чем выше применяли дозу антибиотика ( 0,1, 0,25, 2,5 и 25 мкг/мл среды), тем больше блокировался синтез клеточного белка, РНК и ДНК.
Внесение в культуру эмбриональных клеток среды, содержащей продукты жизнедеятельности B. Subtilis, и антибиотика сопровождалось статистически достоверным увеличением синтеза ДНК и белка при соотношении объемов культур 1/99 - 20/80 (до 38,89%). Дальнейшее увеличение концентрации продуктов жизнедеятельности бактерий вызывало достоверное угнетение их синтеза. Максимальная концентрация объёмов не оказывала ингибирующего эффекта на синтеза РНК (р<0,05).
Применение продуктов жизнедеятельности B. Subtilis при определенном соотношении объёмов культур (B. Subtilis и эмбриональной культуры клеток) не вызывало угнетения синтеза белка в минимальных дозах антибиотика - 0,1 и 1 мкг/мл.
Увеличение дозы ввода никотиновой кислоты до 60 мкг/кг (против 30 мкг) и использование никотиновой кислоты в престартовых рационах способствовало повышению продуктивности цыплят-бройлеров и раннему формированию у них мышечного волокна. У цыплят в возрасте 6 суток грудные мышцы имели структуру как у цыплят-бройлеров в конце откорма в возрасте 35-40 суток. У контрольных цыплят в возрасте 6 суток мышечное волокно было недоразвито и имело жировые включения в мышечную ткань. Использование повышенной дозы никотиновой кислоты (60 мкг против 30 мкг) в ранний постэмбриональный период выявило достоверное увеличение прогестерона в крови цыплят- бройлеров соответственно 2,15 0,32 против 1,88 0,17 нмоль/л (или на 14.8%).
На основе проведенных исследований усовершенствована система выращивания цыплят-бройлеров в престартовый и стартовый период, внедрение которой в птицеводство позволило получить экономический эффект до 9 руб. на 1 руб. затрат.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Рекомендуем усовершенствованную систему повышения биопотенциала при использовании пробиотического препарата Биоспорин (3 мкг/100 г корма) для цыплят-бройлеров и никотиновой кислоты (60 мкг/ 100 г корма) для цыплят-бройлеров-гипотрофиков с 1 го по 5-й день жизни, пробиотического препарата Моноспорин (0.03 мл/гол) для цыплят бройлеров с 6 по 15 день жизни после использования антибиотика (Энроколи).
При оценке состояния цыплят-бройлеров следует руководствоваться в лабораторной диагностике количественными и морфометрическими показателями, установленными для престартового и стартового периода цыплят-бройлеров.

6. СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

(* - фамилия изменена на Лебедеву И.А. в связи с вступлением в брак)

Кутафина И.А.* Производство яиц и мяса птицы/ К.Я.Мотовилов, В.И. Речкалов, И.А .Кутафина / Технологические основы производства переработки и хранения продукции животноводства/ Под ред. Булатова А.П. / Учебное пособие. Рекомендовано уч.-метод. объединением вузов РФ по образованию в области зоотехнии и ветеринарии. - Курган: 1999, гл. 6, С.- 229 - 279.
ебедева И.А. Анализ витаминно-минерального питания животных и птицы в Курганской области и регионе: Материалы межрегиональной научно-практической конференции. - Екатеринбург: УрГСХА, 1999.- С. 23.
ебедева И.А. Престартер - фундамент для оптимального роста и здоровья птицы // БИО журнал для специалистов птицеводческих и животноводческих хозяйств, 2002.- № 1.- С. 25.
ебедева И.А. Хороший старт - успех бройлерного птицеводства // БИО журнал для специалистов птицеводческих и животноводческих хозяйств,, 2002.- № 7.- С. 33 - 34.
ебедева И.А. Престартовое кормление цыплят-бройлеров./ Материалы международн.научно-практической концеренции. Курган, 2004.- т.2.- С.123-125.
ебедева, И.А. Использование пробиотиков в начальном периоде онтогенеза цыплят в условиях технологического цикла / И.А.Лебедева // Диагностика, лечение и профилактика опасных инфекционных заболеваний. Эпидемиология и эпизоотология. Биотехнология. Экология. Мат. юбилейной, научно-практической конференции, посв. 55-летию образования Центра ВТП БЗ НИИ микробиологии МО РФ.- Екатеринбург, 2004.- С. 191-192.
ебедева, И.А. Влияние витамина В 5 на живую массу цыплят-бройлеров /И.А. Лебедева, Н. Светлова /Материалы международной научно-практической конференции . Екатеринбург, 2005 .-т.1.- С.178-181.
ебедева, И.А. Влияние спорообразующих пробиотических препаратов на микробиологические и морфологические показатели цыплят-бройлеров/ И.А. Лебедева, Т.В. Просвирина, / Достижения зоотехнической науки и практики - основа развития производства продукции животноводства // Сб. материалов международной научно-практической конференции . - Волгоград, 2005.- С. 309-312.
ебедева, И.А. Формирование микрофлоры цыплят-бройлеров и микробиологические исследования кормов на птицефабрике Среднеуральская / Т.В. Просвирина, И.А. Лебедева , Л.А. Носырева // БИО журнал для специалистов птицеводческих и животноводческих хозяйств,, 2005.- №9.- С.11-12.
ебедева, И.А., Восполнение йоддефицита / И.А. Лебедева, Н.В. Евхутич // Птицеводство.-2005.- №3. - С. 14-15.
ебедева, И.А. Престартовые комбикорма - гистологическая картина ответной реакции организма цыплят / И.А. Лебедева, Л.И. Дроздова // Международная научно-практическая конференция Наука и образование Ц2006 Мурманский государственный технический университет, Мурманск, 2006.- С.757-759.
ебедева, И.А. Характеристика гомеостаза в ранний постэмбриональный период по морфо-биохимическим показателям на модели птицы /И.А. Лебедева, Е.В. Шацких, А.Н. Маслюк , С.В. Левицкая, Т.В. Просвирина // Сб.материалов Первого Российского Научного Форума Демидовские чтения на Урале-Екатеринбург: УрГУ, 2006. -С'259-260.
ебедева, И.А. Гипердозы витамина С в престартовых рационах /И.А. Лебедева, Н.А. Верещак, А.Н. Маслюк //Птицеводство. -2006. -№7. -С.31-32.
ебедева, И.А. Влияние аскорбиновой кислоты и ниацина на биохимические показатели крови птицы /И.А. Лебедева, А.Н. Маслюк //Мат. Межд. науч.-практ. конференции. Достижения птицеводов в реализацию национального проекта развития АПК - Курган: КГСХА, 2006. -С.74-79.
ебедева, И.А. Оценка биологической полноценности мяса цыплят-бройлеров при использовании в престартовом рационе различных форм селена / Е.В. Шацких, И.А. Лебедева / Материалы международной практической конференции Продовольственная безопасность в системе народонаселения 7-8 декабря 2006 года Екатеринбург, Егатеринбург, 2006.- С.274-276.
ебедева, И.А. Селенит натрия Ц активный антиоксидант / Е.В. Шацких, И.А. Лебедева // Птицеводство, 2006.-№3.- С.21.
ебедева, И., Препарат селплекс в рационах родительского стада бройлеров / Е. Шацких Е, И. Лебедева, Е. Галяутдинова, О. Зеленская // Птицеводство, 2006.-№9.-С.23.
ебедева, И.А. Корма и технология производства комбикормов /В.Д. Голомолзин, В.Ф. Гридин, И.А Лебедева// Учебное пособие (Рекомендовано Мин. высш. обр.РФ) Екатеринбург, 2006.- 137 с.
ебедева И.А.Особенности нормирования аскорбиновой и никотиновой кислоты в рационах петушков бройлеров/ А,Н. Маслюк, Л.И. Дроздова, И.А.Лебедева / Практические рекомендации. Екатеринбург, 2006.- 18 с.
ебедева, И.А. Оценка биологической полноценности мяса цыплят-бройлеров при использовании в престартовом рационе различных форм селена (Электронный ресурс) /Е.В. Шацких, И.А. Лебедева // Продовольственная безопасность в системе народосбережения: материалы Международной научно-практической конференции 7-8 декабря 2006. Секция 2. АПК, пищевая и перерабатывающая промышленность. -Екатеринбург.: Изд-во Урал.гос.экон.ун-та,2006.-Электрон.дан. и прогр.- Формат:Аdobeо Acrobat Readerо - C.274-276.
ебедева, И.А. Особенности кормления цыплят-бройлеров в ранний постнатальный период / Е.В. Шацких, И.А. Лебедева, О.В. Зеленская / Роль молодых ученых в реализации национального проекта Развитие АПК: сб. материалов Международной научно-практической конференции. Часть 2.- М.: ФГОУ ВПО МГАУ, 2007.- С.328-331.
ебедева, И.А. Никотиновая кислота в престартовых рационах цыплят-бройлеров /А.Н. Маслюк, И.А. Лебедева //Мат. Межд. науч.-практ. конф. Актуальные вопросы ветеринарной медицины и биологии. ЦТроицк: УГАВМ, 2007.-С.108-111.
ебедева, И.А. Йодказеин в престартовом рационе цыплят-бройлеров/ Шацких Е.В.. Лебедева И.А., Цыганова О.С / Роль молодых ученых в реализации национального проекта Развитие АПК // Сб. материалов международной научно-практической конференции. Часть 2.- М.: ФГОУ ВПО МГАУ, 2007.-С.331-333.
ебедева, И.А.. Характеристика гомеостаза в ранний постнатальный период по морфо-биохимическим показателям на модели птиц / И.А.Лебедева, Е.В. Шацких, А.Н. Маслюк // Вестник Тюменской государственной сельскохозяйственной академии. Тюмень. - 2007.- №1(2).-С.55-57.
ебедева, И.А. Влияние добавок на дисбактериоз бройлеров в предстартовый период / Лебедева И.А., Шацких Е.В., Зеленская О.В. // Птицеводство, 2007.- №10.- С.37-38.
ебедева, И.А. Биоспорин в предстартовый период/ И.А.Лебедева // Птицеводство, 2007.- №11.- С.46-47.
ебедева, И.А. Сохранность цыплят бройлеров при использовании ферментно-пробиотического препарата Бацелл в престартовый период И.А.Лебедева // Ефективне птахiвництво, 2007.-№8(32).- С.43-45.
ебедева, И.А. Эффективность использования пробиотического препарата Биоспорин в престартовый период / И.А.Лебедева // Аграрный вестник Урала, 2007.-№6 (42).- С.74-75.
ебедева, И.А. Генотоксические эффекты под воздействием различных форм селена на модели птиц/ Е.В. Шацких, И.А. Лебедева, О.Г. Макеев, В.А. Буханцев// Аграрный вестник Урала, 2007.-№6 (42).- С.79-80.
Пат. 2292156 , Российская Федерация, МПК51 К 35/66, А23К 1/00. Способ выращивания цыплят-бройлеров / Л.И. Дроздова, Н.В.Литусов, И.А.Лебедева и др.; заявитель и патентообладатель ФГОУ ВПО Уральская гос. с.-х. академия. - № 2005121359/13, заявл. 07.07.2005; опубл. 27.01.07, бюл. № 3 - 9 с.
Лебедева, И.А. Влияние гипердоз аскорбиновой кислоты на морфологию органов цыплят /Л. И. Дроздова, А.Н. Маслюк, И.А. Лебедева //Ветеринария.-2008.-№2.-С.52-55.
Пат. 2334405 Российская Федерация, МПК51, А23К 1/00. Способ повышения сохранности и продуктивности бройлеров / Е.В. Шацких, И.А. Лебедева, Л.И. Дроздова и др.; заявитель и патентообладатель ФГОУ ВПО Уральская гос. с.-х. академия. - № 2007108439/13; заявл. 06.03.2007; опуб. 27.09.2008 Бюл., № 27. - 10 с.
Лебедева, И.А. Использование пробиотиков для улучшения качества и безопасности мяса бройлеров / И.А.Лебедева, М.В.Новикова // Пища. Экология. Качество // Сб. трудов V Международной научно-практической конференции (Краснообск, 30 июня - 2 июля 2008 г.). - Новосибирск, 2008.- С.311-312
ебедева, И.А. Влияние никотиновой кислоты на морфофункциональное состояние печени петушков-бройлеров /А.Н. Маслюк, Л.И. Дроздова, И.А. Лебедева // Материалы международной научно-практическая конференция Инновационные подходы в ветеринарии, биологии, экологии к здоровье сбережению в сельском хозяйстве.-Троицк: УГАВМ, 2008. ЦС.95-99.
Лебедева, И.А. Применение пробиотических препаратов нового поколения в птицеводстве / И.А. Лебедева, М.В. Новикова // Материалы международной научно-практической конференции Здоровье сберегающие технологии агропромышленному Комплексу Российской Федерации, Троицк, ФГОУ ВПО УГАВМ, 26-27 марта 2008 г. - С.
ебедева, И.А. Использование пробиотика Моноспорин в птицеводстве / И.А. Лебедева, М.В. Новикова// Кормление сельскохозяйственных животных и кормопроизводство, 2008.- №4.- С.72-73.
ебедева, И.А. Влияние различных форм селена на синтетические процессы в клетках цыплят-бройлеров / Е.В. Шацких, И.А. Лебедева, О.Г. Макеев, В.А. Буханцев // Кормление сельскохозяйственных животных и кормопроизводство. - 2008.- № 4.- С.74-76.
ебедева, И.А. Использование пробиотиков в кормлении цыплят-бройлеров / И.А.Лебедева, Н.И.Женихова, М.В.Лебедева // Современные проблемы ветеринарной диетологии и нутрициологии: материалы Четвертого международного симпозиума (6-8мая 2008 года). - С.-Петербург, 2008.- С.81-83.
Лебедева, И.А. Влияние пробиотического препарата Моноспорин на формирование иммунных органов ремонтных курочек /Л.И. Дроздова, М.В. Новикова, И.А. Лебедева, В.Г. Бурун, Р.Р. Осипенко// Аграрный Вестник УРАЛА, 2008.-№11 (53).- С.59-61.
ебедева, И.А. Влияние пробиотических препаратов на печень сельскохозяйственной птицы / И.А. Лебедева, М.В. Новикова / Всероссийская научно-практическая конференция Вклад молодых ученых в отраслевую науку с учетом современных тенденций развития АПК, Москва Гос. Университет по землеустройству, 22-24 декабря 2008 г.; Москва, 2008.-С.78-79.
ебедева, И.А. Влияние пробиотического препарата Моноспорин на формирование фабрициевой бурсы и тимуса ремонтных курочек / М.В. Новикова, И.А. Лебедева / Актуальные проблемы ветеринарно-зоотехнической науки и практики: сборник статей Международной научно-практической конференции 21-22 ноября 2008 года. - Екатеринбург.: Изд-во УрГСХА, 2008.- С.97-101.
Пат. 2332853 , Российская Федерация, МПК 51 А23К 1/00. Способ выращивания цыплят-гипотрофиков / Л.И. Дроздова, И.А.Лебедева, Н.В.Садовников и др. заявитель и патентообладатель ФГОУ ВПО Уральская гос. с.-х. академия. - № 2008144549/13, заявл. 13.12.2006; опубл. 10.08.2008, бюл. №.25 - 8 с .
ебедева., И.А. Параметры синтеза ДНК цыплят-бройлеров под влиянием различных форм селена / Е.В. Шацких, И.А. Лебедева, О.Г. Макеев, В.А. Буханцев // Аграрный вестник Урала.- 2008. - № 6(48). -С.48-49.
ебедева, И.А Использование пробиотических препаратов Бацелл и Моноспорин в кормлении цыплят-бройлеров / И.А.Лебедева// Материалы 1Х Украинской конференции по птицеводству с международным участием Актуальные проблемы современного птицеводстваАлушта сентябрь 15-18, Алушта, 2008.- С.98-104.
ебедева, И.А Использование пробиотического препарата Моноспорин при откорме цыплят-бройлеров / И.А.Лебедева, Н.А.Осовских, К.А.Гнатюк// Материалы 1Х Украинской конференции по птицеводству с международным участием Актуальные проблемы современного птицеводстваАлушта сентябрь 15-18, Алушта, 2008.- С.104-110..
ебедева, И.А Влияние Моноспорина на фабрициеву бурсу / И. Лебедева, В. Бурун, М. Новикова, Л. Дроздова// Птицеводство, 2009.-№2.- С.38.
ебедева, И.А. Эффективность использования пробиотика Моноспорин в кормлении цыплят-бройлеров и ремонтных курочек / И.А. Лебедева, М.В. Новикова// БИО журнал для специалистов птицеводческих и животноводческих хозяйств,, 2009.- №3.- С.17-18.
ебедева, И.А. Использование пробиотического препарата Моноспорин в мясном и яичном птицеводстве / И.А. Лебедева, М.В. Новикова// Сельский округ, 2009.-№78.- С.10.
Пат. 2343713 Российская Федерация, МПК51, А23К 1/00. Способ кормления бройлеров в условиях йоддефицита / Е.В. Шацких, И.А. Лебедева, Л.И. Дроздова и др.; заявитель и патентообладатель ФГОУ ВПО Уральская гос. с.-х. академия. - № 2007116082/13, заявл. 27.04.2007; опуб. 20.01.2009, Бюл., № 2. - 9с.
Пат. 2351151 Российская Федерация, МПК51, А23К 1/00. Способ повышения резистентности организма бройлеров / Е.В. Шацких, И.А. Лебедева, Л.И. Дроздова и др.; заявитель и патентообладатель ФГОУ ВПО Уральская гос. с.-х. академия. - № 2007125280/13, заявл. 04.07.2007; опуб. 10.04.2009, Бюл., № 10. - 11с.
Пат. 2363237 Российская Федерация, МПК51, А23К 1/00. Способ выращивания бройлеров мясного кросса / Е.В. Шацких, И.А. Лебедева, Л.И. Дроздова и др.; заявитель и патентообладатель ФГОУ ВПО Уральская гос. с.-х. академия. - № 2008106998/13, заявл. 22.02.2008; опуб. 10.08.2009, Бюл., № 22. - 10 с.
ебедева И.А. Морфологические изменения в иммунных органов цыплят-бройлеров при использовании пробиотического препарата Моноспорин / И.А.Лебедева // Вестник Уральской Медицинской Академической науки, Екатеринбург, 2009.-№2 (25).- С.233-234.
ебедева, И.А. Пробиотики как неотъемлемый компонент при выращивании цыплят-бройлеров и ремонтных курочек / И.А.Лебедева, М.В.Новикова / Сборник научных трудов ведущих ученых России и Зарубежья Современные проблемы диагностики, лечения и профилактики болезней животных и птиц, Выпуск 3. УрНИВИ, Екатеринбург, 2010 г. С. 213-215..
ебедева, И.А. Состояние желудка и кишечника цыплят-бройлеров при использовании пробиотического препарата Моноспорин / И.М. Донник И.М., И.А.Лебедева // Ветеринария Кубани, 2011.-№3.- С. 15-16.
ебедева, И.А. Повышение качества мышечной ткани цыплят с использованием органических кислот в рационе/ И.М.Донник, И.А.Лебедева // Ветеринария Кубани, 2011.-№4.- С. 25-27.
ебедева И. А. Мышечный желудок и двенадцатиперстная кишка при использовании пробиотика и антибиотика // Аграрный Вестник Урала, 2011.-№7 (86).- С.59-61.
Пат. 2423870, Российская Федерация, МПК 51 А23К 1/00. Способ промышленного выращивания цыплят яичных и мясных кроссов / Т.И.Пахомова, В.В.Слепухин, А.И.Калашников, И.А.Лебедева и др.; заявитель и патентообладатель общество с ограниченной ответственностью Биотехагро.- 2010104517/13, заявл.09.02.2010; опубл. 20.07.11, бюл. №.20 - 8 с.
ебедева, И.А. Сохранность и однородность стада цыплят при использовании Моноспорина / И.М. Донник И. М., И.А. Лебедева // Аграрный Вестник Урала, 2011.-№7 (86).- С.25-27.
ебедева, И.А. Мышцы цыплят-бройлеров при использовании повышенной дозы никотиновой кислоты в престартовом рационе / И.А.Лебедева// Аграрный Вестник Урала, 2008.-№8 (87).- С.54-55.
Лебедева, И.А., Морфо-гистологическая картина железистого желудка цыплят при использовании антибиотика и пробиотика (Моноспорин) / И.А.Лебедева // Аграрный Вестник Урала 2011.-№8 (87).- С.56-57.
Лебедева, И.А. Селезенка, тимус, фабрициева бурса цыплят-бройлеров при воздействии антибиотика и пробиотика / И.А.Лебедева // Аграрный Вестник Урала, 2011.-№8(87).- С.58-59.

На правах рукописи

ЕБЕДЕВА ИРИНА АНАТОЛЬЕВНА

03.02.14 - биологические ресурсы

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора биологических наук

Авторефераты по всем темам >> Авторефераты по биологии

Blog