Авторефераты по всем темам >>
Авторефераты по медицине
На правах рукописи
ГАНИЧ Тамара Владимировна
Патофизиологический анализ влияния рокситромицина на параметры воспалительного процесса пародонта (экспериментальное исследование)
14.03.03 - Патологическая физиология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
Москва, 2012
Работа выполнена в ФГБОУВПО Российский университет дружбы народов
Научный консультант: доктор медицинских наук профессор Дроздова Галина Александровна
Официальные оппоненты:
доктор медицинских наук профессор Радыш Иван Васильевич;
доктор медицинских наук профессор Пирожков Сергей Викторович
Ведущая организация:
ГБОУ ВПО Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н. И. Пирогова
Защита диссертации состоится л11 апреля 2012 года в л13 часов на заседании специализированного диссертационного совета Д.212.203.06 в Российском Университете дружбы народов по адресу: 117198, г. Москва, ул. МиклухоЦ Маклая, д. 8, медицинский факультет.
С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке Российского Университета дружбы народов по адресу: 117198, г. Москва, ул. МиклухоЦ Маклая, д. 8.
Автореферат разослан л___ марта 2012 года.
Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук профессор Г. А. Дроздова
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность работы. Проблема болезней пародонта до настоящего времени остается в центре внимания многочисленных исследований и является актуальной в стоматологической практике. Это объясняется прежде всего распространенностью и интенсивностью поражения тканей пародонта (Урбанович В.И., Вылегжанина Т.А., 2006; Гемонов В.В., 2007, 2008; Горбунова И.Л., 2007; Кетлинский С.А., 2009; Pussinen P.J. et al., 2004, 2005; Carayol N. et al., 2006; Wong D.M. et al., 2009; Janatov T. et al., 2009; Zarogoulidis P et al., 2011).
В настоящее время патология пародонта представляет собой сложную патофизиологическую проблему, которая приобретает не только медицинскую, но и социальную значимость. У людей в возрасте 30Ц40 лет и старше преобладают выраженные воспалительно-деструктивные изменения пародонтального комплекса, приводящие к потере зубов, нарушению целостности и функциональных характеристик зубочелюстной системы, снижению качества жизни. Важным является тот факт, что возрастает количество агрессивных форм заболевания, протекающих с частыми обострениями, устойчивых к традиционным методам лечения (Чухловин А.Б. и др., 2007; Гусев Е.Ю. и др., 2008; Славичек Р., 2008; Кетлинский С.А., 2009; Янушевич О.О., 2009; Duarte P.M, Tezolin K.R., 2009).
Согласно современным представлениям, бактериальная агрессия (парадонтопатогены), являясь одним из инициирующих факторов в развитии заболеваний пародонта, вызывает различные формы поражения пародонтального комплекса в зависимости от характера и интенсивности спровоцированной ею ответной реакции организма. Широко применяемая терапия не дает полной гарантии прекращения деструктивного процесса, так как он может поддерживаться аутокаталитическими механизмами воспалительных, микроциркуляторных, дегенеративных цепных реакций в зонах поражения.
В патогенезе заболеваний пародонта большую роль отводят иммунологическим аспектам воспаления. Длительный контакт между липополисахаридами зубной бляшки и тканями пародонта ведет к возникновению различных вариантов иммуновоспалительных процессов, которые могут обусловливать цепную реакцию, сопровождающуюся постоянно прогрессирующими изменениями тканей пародонта (Перова М.Д. и др., 2007; Семёнов А.В. и др., 2007; Фазылова Ю.В. и др., 2007; Brown S.A., Whiteley M., 2009; Duarte P.M., Tezolin K.R., 2009). Патологический процесс в тканях пародонта развивается в результате типовых механизмов взаимодействия различных элементов иммунного реагирования на пародонтопатогены, причем эффективность защитной реакции организма в значительной степени определяется реакцией макрофагальной фагоцитарной системы, полиморфонуклеаров и лимфоцитов на изменения параметров антигенного гомеостаза. Исследования последних лет подтверждают значимость проведения патофизиологического анализа изменений иммунной реактивности, являющейся основой как патогенеза воспалительной реакции в пародонтальных тканях, так и главного механизма выздоровления в процессе лечения антибиотиками с противовоспалительными терапевтическими эффектами (Pradeep A.R., Sagar S.V., 2008; Tabuchi S. et al., 2009).
При лечении воспалительных заболеваний парадонта все большее распространение приобретают те патогенетически обоснованные воздействия, которые обладают антибактериальным эффектом на микроорганизмы зубной бляшки и одновременно способствуют реализации иммунной функции или не нарушают ее параметры. Но только в последние годы, по мере накопления фактических данных о причинах и механизмах развития периодонтита, появилась возможность исследовать иммуномодуляторные свойства антибактериальных средств (Burrell R.C., Walters J.D., 2008; Haas A.N. et al., 2008; Milnkovits M., 2008; Pradeep A.R., Sagar S.V., 2008; Tabuchi S. et al., 2009), среди которых одно из ведущих мест занимают макролидные антибиотики.
Однако данных об особенностях иммунного реагирования и неспецифического ответа организма при пародонтите на воздействие макролидов явно недостаточно. Не выяснены закономерности влияния макролидов (на примере рокситромицина) на показатели, характеризующие течение воспалительного процесса. В клинике весьма затруднительным представляется отделить иммуномодулирующие эффекты от микробоцидных, что и явилось основанием для проведения настоящего исследования.
Цель исследования. Оценить эффекты макролидного антибиотика (на примере рокситромицина) на функциональное состояние фагоцитов (макрофагов и нейтрофилов), выраженность апоптоза полиморфонуклеаров, цитокиновый профиль в динамике воспалительного процесса в тканях пародонта.
Задачи исследования:
Ц изучить фагоцитарную активность макрофагов (захват тестового бактериального антигена) и интенсивность хемотаксиса в динамике воспаления и лечения макролидом рокситромицином;
Ц исследовать влияние рокситромицина на продукцию активных форм кислорода (лреспираторный взрыв) перитонеальными макрофагами и нейтрофилами;
Ц изучить параметры функциональной активности Т-хелперов-1 и Тхелперов-2 (определение -интерферона и интерлейкина-4) в динамике развития воспаления пародонта ЛПС-зависимого генеза и определить влияние рокситромицина на параметры ответа цитокинового профиля иммунной реактивности (содержание -интерферона и интерлейкина-4 в плазме крови);
Ц исследовать влияние рокситромицина на интенсивность апоптоза полиморфонуклеаров;
Ц выявить особенности терапевтических эффектов рокситромицина в зависимости от стадии воспалительного процесса.
Научная новизна исследования. В динамике развития экспериментального воспалительного процесса в тканях пародонта впервые проведено комплексное исследование функциональных особенностей нейтрофилов и макрофагов, а также выявлены некоторые патоиммунные механизмы острого и хронического воспаления пародонта.
В динамике воспалительного процесса продемонстрирован индуцируемый эффект рокситромицина на показатели фагоцитоза и хемотаксической активности.
Выявлены эффекты макролида в индукции апоптоза полиморфонуклеа ров и нормализующее действие на продукцию активных форм кислорода в острой и хронической стадях воспалительного процесса в тканях пародонта.
Проведен комплексный анализ исследуемых параметров неспецифической и специфической иммунной реактивности в генезе воспалительного процесса, модулируемого лечением макролидом рокситромицином, что позволило выявить параметрические особенности иммуномодулирующих эффектов рокситромицина.
Впервые в динамике воспалительного процесса в тканях пародонта исследован цитокиновый спектр в аспекте иммунного ответа, зависимого от типа Т-хелперного ответа (-интерферон и интерлейкин-4), и выявлен сдвиг в сторону синтеза интерлейкина-4.
Теоретическая и практическая значимость. Теоретическое значение полученных результатов состоит в определении закономерностей и механизмов реализации иммуномодулирующих свойств макролида рокситромицина при инициации и дальнейшей хронизации воспалительного процесса в тканях пародонта. Эффективность препарата проявлялась в активизации фагоцитоза макрофагами, усилении хемотаксиса, продукции активных форм кислорода макрофагами и нейтрофилами, в динамике показателей апоптоза нейтрофилов, что являлось основными параметрами, характеризующими чувствительность к действиям макролида.
Выявленные эффекты рокситромицина позволяют установить характер и механизмы модуляции макролидом воспалительной реакции пародонта, что является патогенетической основой для разработки лечебных мероприятий с учетом выявленных нарушений иммунной защиты и эффектов макролидного антибиотика.
Положения, выносимые на защиту.
1. Параметры фагоцитарной функции макрофагов (захват бактериального антигена) усиливаются при терапевтическом применении антибиотика рокситромицина в периоды острого и хронического воспалительного процесса в тканях пародонта.
2. Эффекты действия рокситромицина на кислородзависимые механизмы фагоцитарных клеток дифференцируются в зависимости от их типа: усиление продукции активных форм кислорода макрофагами в острый период пародонтального воспаления и снижение активности образования кислородных радикалов у нейтрофилов в период хронизации воспалительного процесса в тканях пародонта.
3. Терапевтическое использование макролида рокситромицина в развитии экспериментального воспалительного процесса в тканях пародонта позволяет восстановить нарушенные параметры апоптоза лейкоцитов как в остром, так и в хроническом периоде заболевания.
4. Рокситромицин оказывает влияние на параметры цитокинов, регулирующих гуморальный иммунитет. В динамике воспалительного процесса тканей пародонта достоверно повышается уровень интерлейкина-4 в плазме крови.
Апробация работы. Основные результаты работы доложены и обсуждены на XIV Международном симпозиуме Эколого-физиологические проблемы адаптации (Москва, 2009), X Международном конгрессе Здоровье и образование в XXI веке; концепция болезней цивилизации (Москва, 2009), на заседа нии кафедры общей патологии и патологической физиологии Российского университета дружбы народов (Москва, 2011).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 работ, из них 1 в изданиях, рекомендованных ВАК.
Объем и структура диссертации. Работа изложена на 149 страницах компьютерного текста. Состоит из введения, обзора литературы (I глава), материалов и методов исследования (II глава), результатов собственных исследований (IIIЦV главы), заключения, выводов, практических рекомендаций и библиографического списка, который включает 52 отечественных и 259 иностранных источников. Работа содержит 6 таблиц и 16 рисунков.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы исследования. В основу работы положены материалы экспериментальных исследований на животных, выполненные на самцах кроликов породы шиншилла массой 2,5Ц3 кг, которые были разделены на следующие группы.
Первая группа (I) - контрольная (n = 10). Оценивали морфофункциональное состояние тканей пародонта, исследовали влияние рокситромицина на показатели иммунного статуса у интактных животных.
Вторая группа (II) - опытная (n = 20). Моделировали воспаление мягких тканей пародонта и в острый период заболевания (2 недели) исследовали влияние макролида рокситромицина на показатели морфофункционального состояния тканей пародонта, фагоцитоза, эффективность апоптоза, хемотаксиса, интенсивность продукции активных форм кислорода, содержание интерлейкина-и -интерферона.
Третья группа (III) - опытная (n = 20). Исследовали влияние рокситромицина на фоне моделирования воспаления мягких тканей пародонта в стадии хронизации процесса (4 недели).
Воспаление мягких тканей пародонта моделировали путем введения бактериального липополисахарида (ЛПС) в ткани десны и зубодесневого соединения (по 50 мкрл ЛПС Escherichia coli; 1 мг/мл) каждые 48 часов в течение двух недель. В контрольной группе животным вводили 50 мкрл физиологического раствора вместо ЛПС.
Рокситромицин в дозе 30 мг на 1 кг массы назначали per os в течение дней в острой стадии воспалительной реакции в конце острого периода (2 недели) моделирования патологического процесса или в течение последних 5 дней в стадию хронизации воспаления (4 недели). Для исследования действия макролидов на параметры иммунного статуса в условиях интактного организма животным в течение двух дней давали рокситромицин в той же дозе. Все исследования проводили до введения макролида и после него.
Фагоцитарную активность макрофагов оценивали по их способности к захвату и выведению меченной 14С-брюшнотифозной вакцины. Исследования проводили в суспензии культуры жизнеспособных перитонеальных макрофагов, полученных путем промывания брюшной полости. Уровень радиоактивно сти измеряли на спектрометре (Beckman, США). Результаты выражали в импульсах в минуту на миллиграмм белка.
Активность хемотаксиса исследовали в суспензии макрофагов в изотоническом растворе хлорида натрия с измерением оптической плотности на фотоэлектрокалориметре ( = 670 нм). Рассчитывали количество клеток в брюшной полости (по белку) на каждый момент исследования. Содержание белка выражали в миллиграммах в 1 мл клеточной суспензии.
Интенсивность активных форм кислорода в макрофагах определяли методом, основанным на способности нитросинего тетразолия восстанавливаться кислородными радикалами до диформазана. Окислительную активность макрофагов выражали в единицах оптической плотности на 1 мг белка.
Респираторный взрыв нейтрофилов исследовали методом хемилюминесценци (Luminometer, 1250, LKB, Швеция) после предварительной активизации взрыва с применением формилметионил-лейцил-фенилаланина.
Для исследования апоптоза выделяли лейкоциты с последующим их культивированием в среде RPMI-1640. Далее определяли концентрацию клеток и их жизнеспособность. Методом проточной цитометрии устанавливали долю клеток, проницаемых для суправитального красителя пропидиума иодида (процент погибших клеток). После экстракции ДНК и специфичного к ней флуоресцентного окрашивания идентифицировали апоптозные клетки как имеющие деградированный хроматин, расположенные в субдиплоидном пике ДНКгистограммы.
Содержание интерлейкина-4 и -интерферона в сыворотке крови определяли с использованием коммерческого набора реактивов для иммуноферментного анализа (ЦИТОКИН, Санкт-Петербург).
Полученные цифровые экспериментальные данные обрабатывали методом вариационной статистики с использованием критерия t Стьюдента, корреляционную зависимость - с помощью критерия r. Вычисления и построение диаграмм, отражающих динамику изученных показателей, совершали с поддержкой программы Microsoft Excel 2003. Применен текстовый редактор Microsoft Word 2003.
ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Исследования показали, что выбранная модель воспалительного процесса пародонта оказалась адекватной. После второго введения ЛПС у животных в тканях пародонта отмечалось развитие воспалительного процесса: наблюдались отечность, гиперемия, воспаление тканей десны, кровоточивость при осмотре пародонтальным зондом.
Дальнейшее исследование было направлено на оценку иммунологических параметров. В настоящее время вопросы, связанные с влиянием нейтрофильных гранулоцитов на ткани пародонта, в аспекте их пародонтопатогенного действия, представляют значительный практический интерес. В организме фагоциты могут находиться в двух хорошо различимых функциональных состояниях:
исходном и активированном, характерном для многих воспалительных заболеваний. Переход фагоцитов из одного состояния в другое протекает через промежуточную стадию, получившую название прайминга. In vitro его формирование может быть вызвано действием большого набора провоспалительных факторов (Field E.H. et al., 2001; Singh B. et al., 2001; Fokkema S.J. et al., 2002;
Smeltz R.B. et al., 2002; Pussinen P.J. et al., 2004; Zhou Q. et al., 2005; D'Aiuto F.
et al., 2006; Ebisu S., Noiri Y., 2007).
Значительный интерес в этом плане представляет изучение процессов свободнорадикального окисления в динамике пародонтита. В мембране нейтрофила происходит сборка НАДФН-оксидазы - фермента, состоящего из мембранных и цитоплазматических компонентов. НАДФН-оксидаза катализирует восстановление молекулярного кислорода до супероксидного радикала, который затем превращается в перекись водорода и другие токсичные формы кислорода (например, гидропероксидный и гидроксидный радикалы). Перекись водорода, хлор и миелопероксидаза нейтрофила образуют систему, вырабатывающую чрезвычайно токсичные вещества: гипохлорит и молекулярный хлор.
Эти вещества окисляют и галогенируют различные компоненты бактерий и опухолевых клеток, а в очень больших количествах могут повреждать ткани пародонта (Asai Y., Ohyama Y., Gen K., Ogawa T., 2001; Brewington R. et al., 2001; Asakawa R. et al., 2003; Belibasakis G.N. et al., 2005).
До настоящего времени в литературе недостаточно освещена сравнительная характеристика кислородзависимого метаболизма нейтрофилов при пародонтитах и на разных стадиях патологического процесса в процессе терапии макролидными антибиотиками. Открытыми остаются вопросы, касающиеся состояния апоптоза полиморфонуклеаров.
Одной из задач исследования явилось изучение особенностей функционирования нейтрофильных гранулоцитов при моделировании ЛПС-зависимого воспаления в тканях пародонта. Показано, что в развитии воспалительного процесса резко снижается эффективность апоптоза в острый период на 40,1 % и в хронический - на 25,5 % (p < 0,05) по отношению к контрольным данным.
Наблюдается усиление процессов кислородозависимого метаболизма нейтрофилов: относительно контроля возрастает продукция активных форм кислорода на 218,8 % и 269,3 % (p<0,05) соответственно в острый и хронический периоды заболевания, что свидетельствует о гиперактивации прооксидантной системы, приводит к быстрому повреждению мембран клеток пародонтальных тканей и развитию структурных изменений, формирующих аномальный провоспалительный патогенез (табл. 1).
Представленные данные показывают, что в течение всего периода наблюдения за кроликами с моделированием воспалительного процесса в пародонте, отмечалось достоверное снижение интенсивности генетически детерминированной гибели полиморфонуклеаров.
Уменьшение апоптозной готовности могло бы свидетельствовать о высоких мобилизационных возможностях нейтрофилов.
Системный лейкоцитиндуцированный окислительный стресс, возникающий при пролонгированном воздействии липополисахаридов парадонтопатоге нов, приводит к модификации окислительного метаболизма нейтрофилов и эритроцитов, к развитию воспалительно-деструктивных и аутоиммунных процессов в тканях пародонта.
Известно, что клеточная гибель нейтрофилов после воздействия воспалительных медиаторов опосредуется через АФК (активные формы кислорода) митохондриального происхождения. Воздействуя на нейтрофилы, цитокины способны индуцировать два пути клеточной гибели: классический каспазозависимый апоптоз и неклассическую каспазонезависимую клеточную гибель. Апоптоз позволяет удалять потенциально опасные нейтрофилы из очагов воспаления и способствует их ограничению, поскольку фагоцитоз апоптозных клеток резидентными макрофагами оказывает иммуносупрессивный эффект. Апоптозное действие цитокинов (TNF-) связано с активацией каскада апоптозных протеаз, называемых каспазами. Сигнал гибели передается с рецептора TNF- внутрь клетки через ряд адапторных белков, которые организуют комплекс с одной из инициаторных каспаз - каспазой-8, что ведет к активации последней. Активная каспаза-8 способствует включению эффекторных каспаз, завершающих апоптозную программу (Zhou Q.
et al., 2005; D'Aiuto F. et al., 2006; Ebisu S,. Noiri Y., 2007).
Воспаление является высокоэффективным компонентом интегральной противоинфекционной защитной системы макроорганизма. Воспаление также рассматривают как центральное звено альтерации нормальных тканевых структур и патогенеза широкого круга неинфекционных заболеваний. Потенциальные противовоспалительные или, что более правильно, модулирующие воспаление эффекты макролидов при заболеваниях с воспалительным компонентом многообразны: воздействие на секрецию цитокинов/хемокинов; влияние на нейтрофилы - оксидативный взрыв, фагоцитоз, хемотаксис, усиление апоптоза, стимуляция дегрануляции; уменьшение трансэндотелиальной миграции нейтрофилов, эозинофилов, моноцитов и др.
Таблица Влияние рокситромицина на функциональную активность нейтрофилов при воспалении пародонта Группы животных Воспаление пародонта Контрольная I - опытная II - опытная Показатель группа группа группа (n = 10) 2 недели 4 недели (n = 20) (n = 20) До лечеИнтенсивность 53,8 1,70 32,2 1,2 40,1 0,ния апоптоза После леПМН, % 56,2 0.66 50,2 0,80 53,10 0,чения До лече202 10,10 644 18,0 746 14,Продукция активных форм ния кислорода, отн.ед. После ле216 10,70 564 9, 19,1 416 чения Примечание: жирным шрифтом выделены результаты, достоверно отличающиеся от данных контрольной группы; подчеркнуты результаты, достоверно отличающиеся при сравнении данных, полученных до и после лечения (p < 0,05).
Следующий этап исследования был посвящен выявлению эффектов рокситромицина на функциональную активность нейтрофилов. Предполагается существование двух механизмов взаимодействия макролидов с нейтрофилами, которые благоприятно отражаются на конечном эффекте. Во-первых, отмечается прямой синергизм между бактерицидным действием нейтрофилов и антибактериальной активностью макролидов. Во-вторых, наблюдается непрямой синергизм, то есть снижение вирулентности бактерий при низких концентрациях макролидов, что ведет к повышению активности нейтрофилов.
Данные представленные в табл. 1, показывают, что по отношению к контрольному значению в острый и хронический периоды заболевания эффективность апоптоза снижается. Однако применение рокситромицина способствует регуляции апоптозной активности нейтрофилов, повышая ее на 55,9 % в острый и на 32,4 % (p<0,05) в хронический период воспалительного процесса в пародонте в сопоставлении с группой животных без лечения.
Таким образом, экспериментально было доказано, что применение рокситромицина в лечении как острого, так и хронического воспаления пародонта у животных способствовало нормализации апоптоза и вносило определенный вклад в иммунные механизмы защиты поврежденных тканей.
Механизмы регуляции апоптоза (равно как и ее нарушение) чрезвычайно сложны и многокомпонентны, включают субклеточный (ферментные системы, в том числе лизосомные, простагландины, циклические нуклеотиды), гуморальный (различные гормоны и медиаторы), нервно-регуляторный) уровни.
Вполне правомерным является предположение о том, что в таком многокомпонентном процессе, каковым является фагоцитоз, в котором принимают участие многие регуляторные факторы, а фагоциты находятся в состоянии напряжения, апоптоз сам может стать весьма важным регуляторным фактором.
При исследовании образования активных форм кислорода в нейтрофилах (хемилюминисценция) при развитии ЛПС-индуцированного воспаления в пародонте обнаружено, что этот показатель резко возрастал.
Применение макролида в лечении воспалительного процесса пародонта способствовало снижению продукции активных форм кислорода нейтрофилами, однако эти показатели оставались достоверно высокими по отношению к контролю на 179,2 и 105,9 % (p < 0,05) в острой и хронической фазах воспалительного процесса соответственно. Однако, по сравнению с группой животных без лечения, продукция активных форм кислорода нейтрофилами достоверно снижается на 12,5 и 44,2 % (p < 0,05) соответственно в острой и хронической фазах заболевания и регулируется макролидным антибиотиком рокситромицином.
При ЛПС-индуцированном воспалении пародонта и при терапии рокситромицином (антиоксидантная активность) качественно изменяется динамика образования активных форм кислорода, что наряду с изменениями интенсивности апоптоза, обеспечивает механизмы эффективности функции нейтрофилов и ограничение активности воспалительной реакции. Таким образом, у рокситромицина выявлена антиоксидантная и иммунорегулирующая эффективность, на основе этого уменьшались стихание воспалительные процессы в пародонте.
Противовоспалительное действие макролидов в первую очередь связывают с их антиоксидантными свойствами. Как отмечено выше, способность ингибировать окислительный взрыв обнаружена у эритромицина, диритромицина, эритромициламина. Кроме того, эритромицин, спирамицин, рокситромицин и кларитромицин влияют на выработку цитокинов (Hamada K. et al., 2000; Lopez-Boado Y. S.
et al., 2000; Tateda K. et al., 2000; Culi O. et al., 2001; Hashimoto N. et al., 2001;
Kawashima M. et al., 2002; Kobayashi T. et al., 2002; Lonks J. R. et al., 2002).
Важное значение для антибактериальной активности макролидов имеет их взаимодействие с нейтрофилами. Благодаря способности проникать внутрь нейтрофилов и создавать в них высокие концентрации, многие макролиды позитивным образом модифицируют функции данных клеток, влияя, в частности, на хемотаксис, активность фагоцитоза и киллинга.
Таким образом, в динамике течения воспалительной реакции в пародонте и при лечении рокситромицином происходит переключение провоспалительной активности полиморфонуклеаров, вызывая благоприятные изменения в программируемой клеточной гибели нейтрофилов и других параметрах активности воспалительных клеток, ограничивая альтерирующий потенциал клеток, составляющих начальную волну инфильтрации пула воспалительных реакций.
В настоящее время масштабные исследования, проводимые при различных нозологических формах пародонтопатологии, позволяют утверждать, что все органы и ткани организма находятся под постоянным контролем иммунной системы, активность которой регулируется ее врожденным компонентом. Основными клетками врожденного иммунитета являются макрофаги, развивающиеся из моноцитов периферической крови и имеющиеся во всех органах и тканях. В здоровом организме макрофаги отвечают за поддержание гомеостаза ткани, а также за своевременный ответ на вторжение патогена, повреждение или появление трансформированных клеток (Bartova J. et al., 2000; Asai Y., Ohyama Y., Gen K., Ogawa T., 2001; Brewington R. et al., 2001; Asakawa R. et al., 2003; Belibasakis G.N. et al., 2005; Lalla E. et al., 2007).
В клеточной стенке грамотрицательных микробов, появляющихся в поддесневом зубном налете, находится эндотоксин - липополисахарид, который относится к тимуснезависимым антигенам. Освобождение молекул ЛПС с поверхности, например, Porphyromonas gingivalis (P.g.) или из ее бесклеточных структур, проникновение их в пародонтальные ткани для участия в деструктивном процессе признается важной предпосылкой сигнального действия ЛПС на макрофагальную систему при заболеваниях пародонта (Choi Y. et al., 2000, 2001; Chatenoud L., Salomon B., Bluestone J.A., 2001; Akilesh S., Shaffer D.J., Roopenian D.C., 2003;
Cao S.L. et al., 2004; Rollins SM et al., 2005).
ипополисахариды бактерий являются сильными иммуностимуляторами, действующими преимущественно на фагоцитарное звено иммунитета. При воздействии ЛПС на перитонеальные макрофаги или макрофаги, полученные из периферической крови, модулировалась их способность поглощать бактерии и возрастала - убивать поглощенные бактерии. Параллельно с этим под влиянием ЛПС у макрофагов изменялась экспрессия рецепторов, осуществляющих поглощение бактерий, и рецепторов, распознающих бактериальные молекулярные паттерны, а также увеличение экспрессии антигенпрезентирующих и костимуляторных моле кул, участвующих в образовании иммунологического синапсиса и представлении антигена Т- и В-лимфоцитам.
Нарушение функций макрофагов приводит к развитию хронических пародонтитов, воспалений, аутоиммунных заболеваний, а также к инициации и прогрессии опухолей. Последнее десятилетие было отмечено учащающимися попытками разработать новые терапевтические подходы для лечения с учетом функциональных характеристик макрофагов.
Фагоциты, взаимодействуя с ЛПС пародонтопатогенов, комплексами антиген - антитело, бактериями, активируются, их мембрана изменяется, в цитоплазме накапливаются гранулы, наполненные мощными протеазами. Возрастают поглощение кислорода и генерация активных форм кислорода (кислородный взрыв), включая перекись водорода и гипохлорит, а также окись азота. В дополнение к перечисленным признакам активации, макрофаги начинают выделять в среду мощные медиаторы воспаления (макрофаги составляют 18 % состава всех мононуклеарных клеток, а в нормальной ткани десен, по данным гистохимического и функционального определения - около 2 % всех выделенных клеток (Duarte P.M., Tezolin K.R., 2009; Van Assche N. et al., 2009;
Wong D.M. et al., 2009; Janatov T et al., 2009).
Данные об иммунной реактивности при развитии пародонтитов крайне ограниченны и большей частью посвящены оценке отдельных показателей клеточного и гуморального иммунитета, в то время как сведений о состоянии функциональной активности системы макрофагов при данных заболеваниях крайне недостаточно. Между тем известно, что воспалительные процессы челюстно-лицевой области практически всегда сопровождаются дисбалансом в системе макрофагальной защиты (Asakawa R. et al., 2003; Belibasakis G.N. et al., 2005).
Учитывая патоиммунные механизмы формирования воспалительного процесса в пародонте, необходимо дополнительно исследовать функциональные характеристики макрофагов и возможности их модификации макролидами.
Экспериментально показано, что в течение всего периода наблюдения за кроликами с моделированием воспалительного процесса пародонта отмечалось увеличение по отношению к контролю интенсивности фагоцитоза тестируемого антигена макрофагами на 22,3 и 19,03 % (p < 0,05), в острый и хронический периоды возрастали интенсивность хемотаксиса макрофагов на 38,8 и 42,2 % (p < 0,05) и показатели кислородного взрыва на 20,5 и 39,0 % (p < 0,05).
Таким образом, интенсивность фагоцитарного ответа при развитии ЛПСиндуцируемого воспалительного процесса пародонта увеличивалась как в период острого воспаления, так и во время хронизации, т. е. способность фагоцитоза бактериального антигена, презентация антигена макрофагами и их возможность участия в адаптивном иммунитете увеличиваются.
Одним из важных показателей течения воспалительного процесса является интенсивность двигательной активности фагоцитов (хемотаксис). Именно подвижность макрофагов выступает одним из механизмов, обуславливающих количество клеток - фагоцитов в очаге воспаления и определяющих в итоге эффективность фагоцитарного процесса. После адгезии к эндотелиальным клеткам и успешного преодоления эндотелиального барьера путем трансэндо телиальной миграции моноцит двигается в направлении какого-либо повреждения тканей или очага инфекции под влиянием градиента концентрации соответствующего хемоаттрактанта. Функцию хемоаттрактанта могут выполнять компоненты и продукты микроорганизмов, продукты деструкции тканей, активированная фракция комплемента или молекулы хемокинов. Движение клеток в отсутствие такого градиента носит беспорядочный характер и называется спонтанной миграцией. Направленное движение клеток (хемотаксис) начинается со связывания молекул хемоаттрактанта соответствующим рецептором на мембране моноцита/макрофага, затем следует трансдукция сигнала активации, которая приводит к изменениям актина цитоскелета клетки. Резко меняется ее форма, приближаясь к биполярной с вытянутыми псевдоподиями, в составе которых присутствуют микрофиламенты актина и другие белки, обеспечивающие движение клетки.
Моноциты/макрофаги, выполняющие в организме функции мусорщиков, участвуют в удалении не только микроорганизмов, но и обломков собственных клеток, апоптотических клеток, отработавших эритроцитов и тромбоцитов, циркулирующих иммунных комплексов и некоторых других молекул.
В аспекте анализа хемотаксиса как компонента функциональной активности фагоцитарных клеток важно отметить, что в иммунологических реакциях участвует большое количество компонентов, как клеточных, так и гуморальных (растворимых). В эти процессы вовлечены лейкоциты (Т- и В-лимфоциты, нейтрофилы, моноциты, базофилы, эозинофилы), тромбоциты, а также клетки органов и тканей. При этом процессы взаимодействия различных клеточных факторов контролируются внеклеточными медиаторами, включающими интерлейкины, ростовые и колониестимулирующие факторы, интерфероны, эйкозаноиды, компоненты системы комплемента и пептиды. Какие именно клетки и медиаторы включаются в иммунологические реакции, зависит от большого числа факторов, как внешних, так внутренних.
При исследовании гуморальных иммунологических механизмов определяют большой спектр цитокинов, отвечающих за активацию, пролиферацию и хемотаксис различных клеток. При этом среди цитокинов выделяют группу небольших по размеру (8Ц10 кД) белков, обладающих способностью вызывать направленный хемотаксис близлежащих клеток и получивших название хемокины (от хемотаксические цитокины). Эти соединения реализуют биологические эффекты, взаимодействуя со специфическими клеточными трансмембранными хемокиновыми рецепторами, связанными с G-белком внутри клетки (Smeltz R.B. et al., 2002; Pussinen P.J. et al., 2004; Zhou Q. et al., 2005; D'Aiuto F.
et al., 2006; Ebisu S., Noiri Y., 2007). Основной функцией хемокинов является обеспечение направленной миграции различных клеток, в первую очередь моноцитов, нейтрофилов и других эффекторных клеток.
Для выявления эффектов рокситромицина на функциональную активность макрофагов данный препарат включали в процесс лечения воспаления пародонта.
На фоне лечения макролидом интенсивность фагоцитоза макрофагов возрастала по отношению к контролю на 35,6 и 76,8 % (p < 0,05) в острый и хрониче ский периоды соответственно, что было достоверно выше на 10,8 и 48,5 % (p<0,05) аналогичных показателей в серии опытов без лечения. Экспериментально показано, что рокситромицин не оказывал воздействия на фагоцитоз макрофагов в контрольной группе опытов. Полученные нами результаты показывают, что данный препарат достоверно увеличивает фагоцитарную активность макрофагов.
При исследовании хемотаксиса на различных этапах воспалительного процесса в пародонте констатирован факт его динамического изменения под действием макролида рокситромицина. Так, в острый период воспалительного процесса в пародонте хемотаксисная активность макрофагов оставалась сниженной по отношению к контролю лишь на 14,3 % (p < 0,05), а в хронический была в два раза выше контрольного значения. Однако по сравнению с сериями опытов без лечения, в острый период этот показатель приближался к норме, а в хронический оставался выше нее на 40 % (p < 0,05) (табл. 2).
Таблица Показатели функциональной активности макрофагов в динамике воспалительного процесса в пародонте на фоне лечения рокситромицином Группы животных Воспаление пародонта Контрольная Показатель I - опытная II - опытная группа группа, группа, (n = 10) 2 недели 4 недели (n = 20) (n = 20) До лечеИнтенсивность фагоцитоза 9 434 227 11 540 210 11 230 4ния макрофагов, После леимп./мин/мг белка 9 620 240 12 795 228 16 680 3чения Интенсивность До лече0,049 0,001 0,068 0,001 0,070 0,0хемотаксиса ния макрофагов, После ле0,045 0,003 0,042 0,002 0,098 0,0 мг белка/мл чения До лечеКислородный взрыв 1,41 0,02 1,70 0,01 1,96 0,ния макрофагов, После ле отн. ед. 1,49 0,04 1,94 0,05 1,51 0,чения Примечание: жирным шрифтом выделены результаты, достоверно отличающиеся от данных контрольной группы; подчеркнуты результаты, достоверно отличающиеся при сравнении данных, полученных до и после лечения (p < 0,05).
Полученные нами результаты свидетельствуют о том, что хемотаксис макрофагов изменяется в динамике пародонтального воспаления, а макролид (рокситромицин) нормализует этот показатель в острый период воспаления и увеличивает хемотаксическую активность в хронический период (4-х недельное воспаление пародонта).
В плане комплексного влияния на эффекторные звенья функции фагоцитарных клеток важно различать апоптогенные и антиапоптозные стимулы, что определило наш интерес к кислородным радикалам, инициаторам апоптозного процесса. Принципиально важно, что фагоцитоз апоптозных нейтрофилов (как и других клеток) не только не возбуждает секрецию цитокинов, но даже подавляет ее, отчасти благодаря аутокринной ингибиции. Не случайно своевременному удалению апоптозных нейтрофилов тканевыми макрофагами придается большое значение в предупреждении и купировании воспалительных реакций.
Анализ данных показывает, что через две недели после начала воспалительного процесса в тканях пародонта прооксидантная активность макрофагов достоверно увеличивается и является чувствительной к терапевтическим и регуляторным влияниям рокситромицина. Показатель кислородного взрыва макрофагов экспериментальных животных с острым воспалением пародонта и терапией макролидным антибиотиком был достоверно выше контрольного на 37,5 % (p < 0,05), а с хроническим - лишь на 7,1 % (p < 0,05). Сравнивая данные полученные до и после лечения, отметим, что кислородный взрыв макрофагов в хронический период воспалительной реакции под действием макролида приближался к контрольным значениям, что указывает на антиоксидантные свойства рокситромицина Результаты изысканий последнего десятилетия обусловили необходимость дополнительных исследований патогенеза пародонтитов. В соответствии с современными концепциями, ведущую роль в патогенезе заболевания играет иммуновоспалительная активизация, опосредованная провоспалительными цитокинами (Akilesh S., Shaffer D.J., Roopenian D.C., 2003; Cao S.L. et al., 2004; Rollins S.M. et al., 2005; Duarte P.M., Tezolin K.R., 2009; Van Assche N. et al., 2009).
Ведущая роль в развитии и регуляции иммунного ответа принадлежит Тлимфоцитам, популяция которых включает Т-хелперы, Т-супрессоры, цитотоксические Т-лимфоциты. Т-хелперы продуцируют цитокины с различными функциональными свойствами. Т-хелпер 1 типа синтезируют -интерферон, интерлейкин-4 и другие продукты, индуцирующие соответственно клеточный и гуморальный иммунный ответ.
В изучении цитокинопосредованных механизмов возникновения и прогрессирования пародонтитов особое значение имеют -интерферон и интерлейкин-4. Эти плейотропные медиаторы способны подвергаться модулированию в динамике воспалительного процесса и в ходе лечения. Противовоспалительные цитокины, в частности интерлейкин-4, принимают участие в ограничении воспалительного ответа, подавляя секрецию провоспалительных цитокинов, регулируя таким образом тяжесть повреждения тканей.
В связи с этим важно охарактеризовать комплексные изменения иммунного статуса организма. Ранее уже рассматривались такие иммунные аспекты, как функциональная активность полинуклеарных клеток, фагоцитоз и его параметры, которые являются только частью общего иммунного ответа организма.
Для комплексной оценки иммунной перестройки организма при развитии воспаления пародонта мы избрали активность -интерферона, отражающего функциональное состояние ТЦхелперов-1 и Т-киллеров, и интерлейкина-4, отражающего активность ТЦхелперов-2 и в итоге выработку иммуноглобулинов и его иммунорегуляторные возможности. Таким образом, один из этих показателей характеризовал клеточный, а другой - гуморальный иммунитет, а также возможности иммуномодуляции и противовоспалительные свойства.
Экспериментально показано, что в течение всего периода наблюдения за кроликами с моделированием воспалительного процесса в пародонте отмечалось увеличение по отношению к контролю синтеза -интерферона на 340,9 % в острый период заболевания и 317,7 % (p<0,05) - в хронический; содержание интерлейкина-4 возрастало на 8,6 и на 25,2 % (p < 0,05) соответственно. Таким образом, течение патологического процесса обеспечивают механизмы развития (усиления) воспалительной реакции, зависимой от Т-лимфоцитов (хелперов).
Применение рокситромицина способствовало снижению синтеза интерферона, однако эти показатели оставались выше контрольных значений на 256,7 и 110,6 % (p < 0,05) в острый и хронический периоды заболевания соответственно, а содержание интерлейкина-4 в группе животных с применением препарата было выше контроля на 43,2 % в острый и на 85,6 % (p < 0,05) в хронический период (табл. 3).
Таблица Влияние рокситромицина на показатели -интерферона и интерлейкина-4 у кроликов при экспериментальном воспалительном процессе в пародонте Группы животных Воспаление пародонта Контрольная I - опытная II - опытная Показатель группа группа, группа, (n = 10) 2 недели 4 недели (n = 20) (n = 20) -интерферон, До лечения 4,87 0,1 21,47 1,5 20,34 1,пг/мл После лечения 4,61 0,1 17,37 1,8 10,26 1,интерлейкин-4, До лечения 1,39 0,02 1,51 0,03 1,74 0,пг/мл После лечения 1,74 0,02 1,99 0,03 2,58 0,Примечание: жирным шрифтом выделены результаты, достоверно отличающиеся от данных контрольной группы; подчеркнуты результаты, достоверно отличающиеся при сравнении данных, полученных до и после лечения (p<0,05).
Полученные нами результаты свидетельствуют о том, что показатели активности иммунитета по параметрам синтеза -интерферона и интерлейкина-изменяются в динамике пародонтального воспаления, а макролидный антибиотик способствует их модуляции.
Выявленная нами специфичность паттерна индукции определяемых иммунорегуляторных цитокинов определяет типовые характеристики развития воспалительного процесса во времени. Важным является также факт, что спектр интерлейкинов зависит от типа иммуновоспалительной реакции, моделируемой в настоящем исследовании. Макролид рокситромицин нормализовал синтез провоспалительных цитокинов (-интерферон) как в острый период, так и на этапе хронизации воспалительного процесса.
К противовоспалительным цитокинам относится интерлейкин-4, который продуцируется преимущественно Т-лимфоцитами, относящимися к субпопуляции Т-хелперовЦ2. Кроме того, ограниченная способность к выработке интерлейкина4 была обнаружена у тучных клеток, базофилов, В-лимфоцитов и стромальных клеток костного мозга. Основная функция интерлейкина-4 - контроль пролиферации, дифференцироки и функций В-лимфоцитов, т. е. антительного ответа. Ин терлейкин-4 может активировать и Т-лимфоциты (Burrell R.C., Walters J.D., 2008;
Pradeep A.R., Sagar S.V., Daisy H.J., 2008; Tabuchi S. et al., 2009).
Уровень интерлейкина-4 при лечении рокситромицином увеличивался в острый период воспалительного процесса пародонта, характеризуя усиленную гуморальную и иммунорегулирующую активность иммунитета, а в период хронизации воспаления, как представляется, его рост будет ингибировать избыточность альтерирующего потенциала иммуновоспалительных клеток.
Исключительно важным вопросом является не только стимуляция иммунной защиты, но и прекращение активизации иммунитета по мере стихания воспалительного процесса. С этой точки зрения уникальны возможности макролида рокситромицина, полученные в нашем исследовании (рис. 1).
Рокситромицин Противовоспалительный Иммунорегулирующий Антиоксидантный эффект эффект эффект Восстановление Восстановление функциональной функциональРегуляция синтеактивности ней- ной активности за -интерферона трофилов макрофагов интерлейкина-Восстановление Восстановление Восстановление интенсивности интенсивности интенсивности фагоцитоза хемотаксиса апоптоза Снижение воспалительного процесса в тканях пародонта Рис. 1. Эффекты рокситромицина в лечении воспалительного процесса в тканях пародонта Таким образом, проведено комплексное исследование особенностей фагоцитоза, активности хемотаксиса и продукции активных форм кислорода (респираторный взрыв) макрофагами и нейтрофилами при терапевтическом использовании макролида рокситромицина в развитии экспериментального воспалительного процесса в пародонте (воспроизведение пародонтита - ЛПСЦ индуцируемая модель). В динамике воспалительного процесса продемонстрирован усиливающий эффект рокситромицина на показатели фагоцитоза и хемотаксической активности в период хронизации воспаления.
Выявлены эффекты действия макролида на индукцию апоптоза полиморфонуклеаров и нормализующее влияния на продукцию активных форм кислорода в обе стадии воспалительного процесса.
Существенная модификация рокситромицином параметров захвата бактери ального антигена макрофагами и хемотаксиса, продукции активных форм кислорода макрофагами и нейтрофилами, а также статистически достоверное влияние макролида на апоптоз нейтрофилов позволяют установить характер и механизмы модуляции макролидом воспалительной реакциии пародонта, что может стать патогенетической основой для разработки лечебных мероприятий с учетом выявленных нарушений иммунной защиты и эффектов макролидного антибиотика.
Начавшись как инфекционно-воспалительный процесс, пародонтит в дальнейшем приобретает упорное течение ввиду формирующихся иммунологических нарушений с развитием в конечном итоге хронического воспаления.
В исследовании показано, что противовоспалительная активность рокситромицина (полусинтетического 14-членного макролида) связана с его выраженной антиоксидантной активностью и способностью подавлять процессы окислительного метаболизма (окислительного взрыва) в фагоцитах, снижая образование супероксидного иона кислорода. На модели воспаления пародонта у кроликов выявлен проапоптический эффект рокситромицина, опосредованный снижением активности полиморфонуклеаров. Полученные нами данные свидетельствуют о том, что интенсивность апоптоза нейтрофилов снижена как в острой стадии воспалительной реакции, так и в хронической. Введение рокситроромицина оказывает нормализующее влияние на апоптоз нейтрофилов, интенсивность которого повышается в оба исследуемых периода воспалительной реакции. Активированные при развитии воспаления нейтрофилы с замедленным апоптозом дольше циркулируют в кровотоке и, следовательно, длительно переживают в тканях, повреждая нормальные тканевые структуры, поддерживая хронизацию воспалительного процесса.
В динамике воспалительного процесса был исследован цитокиновый спектр в аспекте иммунного ответа, зависимого от типа Т-хелперного ответа (интерферон и интерлейкин-4) и выявлен сдвиг в сторону синтеза интерлейкина4 при терапии рокситромицином. Данная адаптационная реакция цитокиновой системы направлена на нормализацию иммунной реактивности организма и стимуляцию апоптоза полиморфонуклеаров.
Инверсия соотношения -интерферона и интерлейкина-4 у экспериментальных животных (смещение баланса Thl/Th2 в сторону Th2) свидетельствует о явном противоспалительном эффекте рокситромицина.
Таким образом, в работе проведен комплексный анализ исследуемых параметров неспецифической и специфической иммунной реактивности в генезе воспалительного процесса в тканях пародонта, модулируемого лечением макролидом рокситромицином, что позволило выявить параметрические особенности его терапевтических иммуномодулирующих эффектов в динамике развития экспериментального воспаления тканей пародонта.
ВЫВОДЫ 1. При длительном и повторном локальном введении липополисахарида в ткани пародонта (моделирование ЛПС-зависимого пародонтального воспаления) развивается воспалительный процесс, характеризующийся стадийностью, активизацией кислородного метаболизма нейтрофилов и макрофагов, усилени ем хемотаксической функции и фагоцитарной активности макрофагов, достоверным снижением апоптоза полиморфонуклеаров.
2. Рокситромицин, применяемый на различных стадиях развития ЛПСиндуцируемого воспаления тканей пародонта, оказывает модулирующий эффект на индуцируемые изменения фагоцитарной функции макрофагов. Усиление фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов наблюдается как в острый период, так и при хронизации пародонтального воспалительного процесса.
3. Терапевтическое использование рокситромицина, применяемого в острый и хронический периоды экспериментального воспалительного процесса, позволяет нормализовать параметры апоптоза нейтрофилов, что способствует уменьшению альтерации тканевых структур пародонта.
4. Под влиянием рокситромицина происходит ингибирование образования кислородных радикалов и респираторного взрыва полиморфонуклеарными лейкоцитами как в острый, так и в хронический период развития воспалительного процесса в тканях пародонта.
5. Рокситромицин способствует нормализации процессов хемотаксиса макрофагов в острый период воспалительного процесса в тканях пародонта и повышению в хронический, что улучшает эффективность фагоцитарного процесса.
6. В динамике развития экспериментального воспалительного процесса в тканях пародонта отмечается достоверное увеличение образования -интерферона и интерлейкина-4, что свидетельствует о стимуляции процессов клеточного и гуморального иммунитета во все исследуемые периоды. Инверсия соотношения интерферона и интерлейкина-4 у экспериментальных животных в обе стадии заболевания свидетельствует о противовоспалительных эффектах рокситромицина.
7. Патофизиологический анализ выявленной модификации рокситромицином параметров захвата бактериального антигена макрофагами и хемотаксиса, продукции активных форм кислорода макрофагами и нейтрофилами, а также эффектов влияния макролида на апоптоз нейтрофилов позволяет установить характер и механизмы модуляции воспалительной реакции, что является основой для уточнения патогенетических подходов при лечении пародонтальной патологии.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ С целью модуляции патоиммунных процессов и для коррекции функционального статуса нейтрофилов и макрофагов при воспалительном процессе в тканях пародонта рекомендуется включение в терапию макролида рокситромицина.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ 1. Нейроэндокринная модуляция функциональных характеристик лейкоцитов / В. А. Фролов, Г. А. Дроздова, Т. В. Ганич [и др.] // Вестник РУДН. - 2007. - №2. - С. 89Ц90.
2. Патогенетический анализ эффектов модуляторов воспаления при моделировании патологических процессов / В. А. Фролов, Г. А. Дроздова, Т. В. Га нич [и др.] // Научные труды 8 Международного конгресса Здоровье и образование в 21 веке; концепции болезней цивилизации. - М., 2007. - С.480Ц481.
3. Функциональные параметры лейкоцитов в условиях измененного углеводного метаболизма / В. Ф. Мустяца, А. В. Пасечник, Т. В. Ганич [и др.] // Научные труды 8 Международного конгресса Здоровье и образование в 21 веке;
концепции болезней цивилизации. - М., 2007. - С. 444.
4. Влияние метаболически активных препаратов на иммунные параметры при моделировании воспаления / А. В. Пасечник, А. А. Белова, Т. В. Ганич [и др.] // Научные труды X Международного конгресса Здоровье и образование в 21 веке; концепции болезней цивилизации. Инновационные технологии в биологии и медицине. - М., 2009. - С. 637.
5. Апоптоз нейтрофилов и продукция активных форм кислорода при воспалении и влияние селективного ингибитора ЦОГ / А. В. Пасечник, В. Ф. Мустяца, Т. М. Ганич // Сборник трудов и тезисов V Международного конгресса Здоровье и образование и в 21 веке. - М., 2011. - С. 561-562.
6. Молекулярные основы применения антиоксидантов при хроническом пародонтите / Г. А. Дроздова, Т. В. Тарасова, Т. В. Ганич [и др.] // Сборник трудов и тезисов V Международного конгресса Здоровье и образование и в веке. - М., 2011. - С. 564-565.
7. Анализ параметров функциональной активности макрофагов и нейтрофилов в динамике развития экспериментального пародонтита и сахарного диабета / Т. В. Ганич, В. Ф. Мустяца, Г. А. Дроздова [и др.] // Сборник трудов и тезисов V Международного конгресса Здоровье и образование и в 21 веке. - М., 2011. - С. 566-567.
8. Характеристика параметров воспалительных цитокинов в процессе развития экспериментального пародонтита и диабета / Д. Л. Льянова, Т. В. Ганич, Г. А. Дроздова [и др.] // Сборник трудов и тезисов V Международного конгресса Здоровье и образование и в 21 веке. - М., 2011. - С. 563-564.
9. Апоптоз нейтрофилов и его возможная роль в патогенезе воспаления пародонта / А. В. Пасечник, Т. В. Ганич, В. Ф. Мустяца [и др.] // Сборник трудов и тезисов V Международного конгресса Здоровье и образование и в 21 веке. - М., 2011. - С. 565-566.
РЕЗЮМЕ Ганич Т. В.
ПАТОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ВЛИЯНИЯ РОКСИТРОМИЦИНА НА ПАРАМЕТРЫ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА ПАРОДОНТА (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ) Рокситромицин, новый 14-членный макролидный антибиотик, эффективен при моделировании пародонтального воспаления. Рокситромицин, как показывают результаты исследования, регулируют несколько механизмов воспалительного процесса, включая хемотаксис макрофагов, локислительный взрыв нейтрофилов и макрофагов, апоптоз полиморфонуклеаров и продукцию провоспалительных и антивоспалительных цитокинов. Эти результаты показывают также, что рокситромицин регулирует апоптоз нейтрофилов и синтез кислородных радикалов и, таким образом, создаются благоприятные противовоспалительные условия в очаге пародонтального воспаления.
Уменьшенние воспалительного процесса при моделировании пародонтита и терапии рокситромицином зависит от способности макролидов регулировать провоспалительные и антивоспалительные цитокины.
Таким образом, макролидные антибиотики (рокситромицин) могут проявить терапевтические эффекты, независимые от их антибактериальной деятельности.
SUMMARY THE PATHOPHYSIOLOGICAL ANALYSIS OF INFLUENCES ROXITHROMYCINUM ON PARAMETERS OF INFLAMMATORY PROCESS PERIODONTITIS (The experimental study).
Ganich T.V.
Roxithromycin (RXM), a new 14-member macrolide antibiotic, is effective for inflammation. Macrolides have been shown to affect several pathways of the inflammatory process, including the migration of macrophages, the oxidative burst and apoptosis in phagocytes, and the production of proinflammatory and antiinflammatory cytokines. These results strongly suggest that RXM regulating neutrophil apoptosis into inflammatory sites and results in favorable modification of the clinical status of inflammatory diseases.
The decreased inflammation in roxithromycin-treated rabbits likely depends on the ability of the macrolide to down-regulate the production of proinflammatory cytokines and/or mediators.
Thus, macrolide antibiotics can exert therapeutic effects independent of their antibacterial activity.