На правах рукописи
САТТОРОВ СУЛЕЙМАН ФАТТОХОВИЧ
Особенности диагностики туберкулеза
крупного рогатого скота
в общественном и частном секторе
06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология
Автореферат диссертации на соискание ученой степени
кандидата ветеринарных наук
Душанбе - 2012
Работа выполнена в лаборатории микобактериозов Ветеринарного института Таджикской академии сельскохозяйственных наук (ТАСХН)
Научный руководитель: доктор ветеринарных наук,
профессор, член корр.
ТАСХН Мирзоев
Давлатали Мирзоевич
Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук
Муминов Абдулло
Муминович
кандидат ветеринарных
наук Хасанов Нахтулло
Рахматович
Ведущаяаорганизация: Научно-производственное
предприятие Биологичеcкие
препараты ТАСХН
Защита диссертации состоится л15 мая 2012 г. в 10-00 часов на заседании диссертационного совета ДМ.050.001.01 при Ветеринарном институте Таджикской академии сельскохозяйственных наук по адресу: 734005, Республика Таджикистан, г. Душанбе, ул. А. Каххорова, 43, тел. (992-372) 27-39-95.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ветеринарного Института ТАСХН
Автореферат разослан л14 апреля 2012 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета,
доктор ветеринарных наук Н.Ярбаев
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. На современном этапе борьбы с туберкулёзом животных, основой профилактических и оздоровительных мероприятий была и остаётся проблема ранней диагностики этой болезни. При диагностике туберкулёза крупного рогатого скота основным, массовым и общепринятым методом является внутрикожная проба с применением ППД - туберкулина для млекопитающих. Одной из важных проблем при диагностике туберкулёза внутрикожной туберкулиновой пробой остаётся проблема неспецифических реакций на туберкулин.
Актуальность этой проблемы увеличивается из года в год. Массовые выявления неспецифических реакций на туберкулин приводят к убою большого количества здоровых животных, что причиняет экономический ущерб и вызывает сомнения в правильности диагностики туберкулёза существующими методами. Поэтому, наряду с методами диагностики туберкулеза необходимо исследование современным методом, таким как Полимеразная Цепная Реакция (ПЦР), для уточнения диагноза в спорных вопросах.
В последние годы в нашей республике увеличилась заболеваемость людей туберкулезом, резко сократилось поголовье крупного рогатого скота в общественном и увеличилось в частном секторе. Поэтому, всё острее возрастает проблема диагностики туберкулёза крупного рогатого скота в частном секторе.
Особенностью, затрудняющей диагностику туберкулеза в частном секторе, является совместное содержание и тесный контакт разных видов животных и птиц, способствующих заражению различными видами микобактерий (Жумаш А.С.аи соавт, 2005; Помыканов Н.П.а, 2005).
В Хатлонской области за последние годы эпизоотическая ситуация по туберкулезу среди животных общественного сектора значительно улучшилась. Из зоны с максимальным риском инфекции область практически подошла к ликвидации этой болезни, но в частном секторе в связи со сложной эпидемиологической ситуацией имеется тенденции к увеличению количества заболевших животных и появлению новых неблагополучных пунктов. Возникла необходимость существенной корректировки системы противотуберкулезных мероприятий в области с учетом изменений временных, территориальных и популяционных границ эпизоотического процесса этой болезни, что определило выбор темы и направления наших исследований.
Цель данной работы - разработать особенности комплексной сравнительной оценки эпизоотологической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота и методы диагностики в общественном и частном секторах Хатлонской области Республики Таджикистан.
Для достижения поставленной цели решены следующие задачи:
1. провести изучение эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота в Хатлонской области за 2000 - 2011 годы;
2. провести сравнительную оценку результатов аллергических исследований крупного рогатого скота в частном и общественном секторах со сложной эпидемиологической ситуацией Хатлонской области;
3. изучить результаты аллергических исследований крупного рогатого скота в частном и общественном секторах Хатлонской области;
4. изучить результаты бактериологического исследования биоматериала от крупного рогатого скота, реагирующего на ППД-туберкулин для млекопитающих, в общественном и частном секторах;
5. изучить влияние объектов внешней среды на инфицированность животных возбудителем туберкулеза;
6. изучить современные методы диагностики туберкулеза в условиях Республики Таджикистан (ПЦР);
7. разработать систему мероприятий по профилактике и борьбе с туберкулезом крупного рогатого скота.
Научная новизна работы заключается в следующем:
- изучена эпизоотическая ситуация по туберкулезу крупного рогатого скота в Хатлонской области с различной формой собственности;
- установлена возможность применения различных методов диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в Хатлонской области;
- установлена целесообразность применения ПЦР при дифференциальной диагностике туберкулеза крупного рогатого скота;
- разработана система комплексных мероприятий по профилактике и оздоровлению животноводческих хозяйств от туберкулеза крупного рогатого скота в условиях Республики Таджикистан.
Практическая значимость работы заключается в том, что результаты исследований включены в Мероприятия по профилактике и оздоровлению животноводческих хозяйств от туберкулеза крупного рогатого скота в условиях Республики Таджикистан, рассмотренные и одобренные ветеринарным научно-техническим советом Службы государственного ветеринарного надзора, Министерства сельского хозяйства Республики Таджикистан от 29 ноября 2010.
Результаты изучения эпизоотической ситуации хозяйств с различной формой собственности включены в Методические рекомендации по уточнению диагноза на туберкулез у крупного рогатого скота в благополучных хозяйствах и определение видовой принадлежности культур микобактерий утвержденные ветеринарным научно-техническим советом Службы государственного ветеринарного надзора МСХ РТ от 10.12.2010г
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены: на Международной научно-практической конференции с участием ученых Республики Македония (2008 - 2009гг.); с участием ученых Центральной Азии, Казахстана, Турции, Иордании, Новой Зеландии (2009г.), посвященной проблемам туберкулеза и бруцеллеза; на научной конференции молодых ученых ТАСХН (2010г.); на заседаниях ученого совета Ветеринарного института ТАСХН Республики Таджикистан (2007-2011гг.); а также на курсе тренингов по обучению современным методам диагностики (PCR и ELIZA) в Республике Македония (2007г.) и в Ветеринарном институте Республики Таджикистан (2008г.), по результатам которого имеется сертификат IAEA TAD/07039 от 22. 04. 2008.
Материалы диссертации представлены в отчётах о научно-исследовательской работе Ветеринарного института по теме: Эпизоотологический мониторинг и разработка комплексной системы мероприятий по обеспечению благополучия хозяйств Хатлонской области от туберкулёза (2006Ц2011 гг.).
Результаты исследования объединены в Методические рекомендации по профилактике и оздоровлению туберкулёза крупного рогатого скота современными методами.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 научных работ, в том числе 3 статьи в рецензируемых научных журналах, рекомендованных ВАК Минобразования и науки РФ (Доклады Таджикской академии сельскохозяйственных наук).
Объем и структура диссертации. Работа изложена на 127 страницах и включает разделы: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения, список литературы. Работа иллюстрирована 17 таблицами, 8 рисунками. Список литературы включает 160 источников, в т.ч. 29 зарубежных авторов.
Основные положения, выносимые на защиту:
- характеристика эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота в хозяйствах с различной формой собственности в Хатлонской области;
- результаты различных методов диагностики туберкулеза крупного рогатого скота на ППД-туберкулин для млекопитающих;
- результаты изучения современных методов диагностики туберкулеза и возможности их применения при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота;
- основные направления системы комплексных мероприятий по профилактике и оздоровлению животноводческих хозяйств от туберкулеза крупного рогатого скота в условиях Хатлонской области Республики Таджикистан.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Материалы и методы
Работа выполнена в лаборатории микобактериозов, Ветеринарного института ТАСХНа Республики Таджикистан в 2007-2012 гг. в соответствии c планом НИР 08.01.06.
Эпизоотологический мониторинг и разработка системы комплексных мероприятий по оздоровлению животных и птиц от туберкулеза в разных регионах Республики Таджикистан (2006 - 2010), в благополучных и неблагополучных хозяйствах Хатлонской области Республики Таджикистан.
Изучение эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота проводили по данным ветеринарной отчетности Службы государственного ветеринарного надзора Республики Таджикистан (2006-2011агг.) с учетом результатов собственных, аллергических и бактериологических исследований поголовья крупного рогатого скота, результатов бактериологических исследований районных ветеринарных лабораторий и СГВН районов Хатлонской области. За период работы нами проведены аллергические исследования на туберкулез крупного рогатого скота в частном и общественном секторах в количестве 16030 голов, 215 проб почвы, воды, фекалий, молока, мокроты, слизи, гноя с неблагополучных участков, и у владельцев животных, которые стоят на учете туберкулезных диспансеров для уточнения и подтверждения диагноза.
Комплексная диагностика туберкулеза животных проводилась лично автором с работниками гос.вет.сети районов в хозяйствах Восейского, Пархарского, Кулябского и Ховалингского районов, входящих в разные природно-климатические зоны.
В работе использовали ППД-туберкулин для млекопитающих, производства ФГУП Курской биофабрики - фирма БИОК, физиологический раствор, инсулиновые шприцы, кутиметр, цифровой ветеринарный кутиметр НПФ КОСТА, безиголные инъекторы БИ-7. Для выращивания микобактерий туберкулеза использовали глицериновые МПА и МПБ, картофель, плотные, яичные, питательные среды Левенштейна-Йенсена, Петраньяни, Финн - 2, оборудование для постановки ПЦР, тест-системы для индикации и дифференциации M. bovis и M. Tuberculosis методом ПЦР (производитель - ЗАО НПО НАРВАК, г. Москва).
При диагностическом убое животных, у которых при патологоанатомическом осмотре не обнаружили характерных для туберкулеза изменений, брали кусочки внутренних органов и лимфоузлы, а у остального положительно реагирующего на туберкулин крупного рогатого скота, также брали пробы крови, фекалий, слизь и мокроту для лабораторного (бактериологического и биологического) исследования на туберкулез и исследование методом ПЦР.
Для аллергической диагностики проводили в основном внутрикожную туберкулинизацию, а по мере необходимости и глазную пробу. Все поступившие пробы исследовали бактериологическим методом, а при необходимости для уточнения и дифференциации диагноза методом ПЦР.
Дифференциацию атипичных микобактерий проводили согласно схеме классификации групп микобактерий предложенной Ранъону.
Постановку ПЦР осуществляли согласно общепринятой методике, используя набор тест-системы для индикации и дифференциации M. bovis и M. Tuberculosis методом ПЦР (пр-во - ЗАО НПО НАРВАК, г.Москва).
2.2. Результаты исследований
2.2.1. Изучение эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота в Хатлонской области
за 1994 Ц 2011 г.
Туберкулез крупного рогатого скота согласно архивным данным, в Республике Таджикистан регистрируется с 1931 года (КаюмовР.К., 1972).
Хатлонская область является неблагополучной по туберкулезу с 1970 года, однако массовое выделение больных животных отмечается в 1987 году, когда после проведения комиссионных исследований процент зараженности достиг 3,12%. В целом, по области в результате проведенных исследований процент зараженности выделенных больных животных в 1994 году достиг 2,5%.
С 2006 по 2011 годы в результате исследований крупного рогатого скота на туберкулёз выявлено: в общественном секторе - 371, положительно реагирующих животных, что составило 0,06%, а в частном секторе выявлено - 13, положительно реагирующих животных, что составило 0,002%. Количество положительно реагирующих на туберкулин животных в частном секторе в 30 раз меньше, чем в общественном секторе.
В результате проведённых противотуберкулёзных мероприятий количество реагирующих животных ежегодно снижалась и процент заражённости крупного рогатого скота туберкулёзом уменьшался от 0,06 до 0,01%. Эпизоотическая ситуация по туберкулезу крупного рогатого скота постепенно улучшилась.
В период работы в хозяйствах, где проводились диагностические исследования крупного рогатого скота на туберкулез, сложилась сложная эпидемиологическая обстановка. По данным санитарно-эпидемиологической службы области в некоторых районах (Восейском, Дангаринском, Фархорском) отмечена высокая заболеваемость людей туберкулёзом в 2006-2011 гг.
Приведённые данные свидетельствуют о том, что эпизоотологическая и эпидемиологическая ситуация по туберкулёзу в разных хозяйствах и населенных пунктах Хатлонской области остаётся весьма сложной и требует совершенствования методов диагностики и мер борьбы с данной болезнью, применительно к местным условиям в общественном и частном секторах.
Анализируя эпизоотическую обстановку в Хатлонской области выяснили, что в течение 1981 - 1990 гг., туберкулез крупного рогатого скота регистрировали в 57 неблагополучных пунктах. Проведенные в 1986 - 1987 гг. комиссионные исследования позволили выявить 49 неблагополучных хозяйств в районах области и определить процент зараженности туберкулезом крупного рогатого скота. Процент зараженности в области в среднем составил от 8% до 36%, а в двух хозяйствах Кулябского района Хатлонской области в 1986 г. было выявлено от 28,3% до 80% реагирующих на туберкулин животных. Такое же положение и в некоторых хозяйствах Муминабадского, Фархорского и Восейского районов.
Распространению туберкулеза в то время способствовала передержка больного туберкулезом крупного рогатого скота в хозяйствах области без надлежавшей изоляции, не проводился весь комплекс противотуберкулезных мероприятий, направленных на обнаружение и уточнение источников возбудителя инфекции, допускались погрешности в проведение диагностических исследований. В результате этого произошло массовое перезаражение туберкулезом поголовья крупного рогатого скота, а в некоторых хозяйствах не обеспечили в полной мере эффективную профилактику этого заболевания. Причиной распространения туберкулеза в области также являлось скученное содержание животных, сырость в животноводческих помещениях, неполноценное кормление, молодняк не исследовали на туберкулез, завозных племенных телят из других зон республики размещали в основном стаде без предварительного карантинирования. Оздоровление неблагополучных пунктов проводили путем полной замены неблагополучного поголовья, ежеквартальным систематическим исследованием и пополнением стада после убоя реагирующих животных на туберкулин за счет завозного скота из республики Беларусь.
Анализ эпизоотической ситуации в Хатлонской области показал, что за период с 2001 по 2011 годы в целом наблюдалось улучшение эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота. Количество неблагополучных пунктов, имеющихся на 01.01.2001 г., были ликвидированы по состоянию на 01.01.2012 г.
2.2.2. Сравнительная оценка результатов аллергических
исследований крупного рогатого скота в частном
и общественном секторах со сложной эпидемиологической ситуацией Хатлонской области
Нами собраны данные по трем районам Хатлонской области: Восейскому, Кулябскому и Фархарскому, для анализа проявления туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота в общественном и частном секторах.
В Восейском районе, при анализе полученных аллергических исследований установлено, что в частном секторе животные реагируют в 2,1 раза меньше, чем в общественном секторе. В 2007 году количество реагирующих на ППД-туберкулин животных в частном секторе было значительно меньше (в 3,3 раза), чем в общественном секторе. При сравнении процента реагирующих животных в частном и общественном секторах в целом за период с 2007 по 2011агг. данный показатель в среднем был меньше в 1,95 раза. Реагирующий на туберкулин крупный рогатый скот дополнительно исследовали методом ПЦР для идентификации и дифференциации М. bovis и М. tuberculosis. В результате исследований универсальными праймерами обнаружены M.bovis и M. Tuberculosis.
В 2010 году в населенных пунктах со сложной эпидемиологической ситуацией проведена туберкулинизация крупного рогатого скота в количестве 297 голов и выявлена 1 (0,34%) голова крупного рогатого скота положительно реагирующая, на туберкулин. При исследовании методом ПЦР выявлена M.аtuberculosis.
При сравнении процента реагирующих животных в частных и в общественных хозяйствах Кулябского района за период с 2007 по 2011 гг. данный показатель был выше в 3,16 раз.
Сравнение процента реагирующего крупного рогатого скота в вышеперечисленных частных секторах и у животных, находящихся в общественном секторе показало, что животные реагируют меньше в частном секторе, чем в крупных общественных хозяйствах - в 1,95 раз, а в хозяйствах и населенных пунктах со сложной эпидемиологической ситуации в 3,16 раз выше.
В Фархорском районе при сравнении результатов положительно реагирующего на туберкулин поголовья крупного рогатого скота в частном секторе населенных пунктов сельсовета Ватан, проведено исследование на туберкулез крупного рогатого скота в количестве 1286 голов, положительно реагировало 24 (1,9%); а в сельсовете Комсомол, исследовано 1645 голов, положительно реагировало 32 (1,9%), процентное соотношение равное.
2.2.3. Изучение результатов аллергических
исследований крупного рогатого скота в частных
и общественных секторах Хатлонской области
Результаты аллергических исследований крупного рогатого скота за 6 лет в хозяйствах Фархорского района показали, что в частном секторе из 3430 голов (при первичном исследовании 2050 голов, и повторном 1380 голов) положительно реагировало на туберкулин 66 голов крупного рогатого скота, процент зараженности составил 1,9%.
Выяснили, что за 6 лет, по данным результатов аллергических исследований - 20 голов крупного рогатого скота из 4534 в общественном секторе ПК Бахт-82 и 10 голов крупного рогатого скота из 3182 частного сектора Мехнатабадского сельсовета, положительно реагировало на туберкулин животных. Процент зараженности всего составил 0,38%.
Проведённые исследования поголовья крупного рогатого скота в общественном секторе животноводческого комплекса им. Амиршоева Кулябского района и в частном секторе населенных пунктов Пахтакорского сельсовета из 4958 голов при первичном и повторном исследовании выявлено 27 голов крупного рогатого скота реагирующих на туберкулин, из них 16 голов в частном секторе сельсовета Пахтакор и 11голов в хозяйстве им. Амиршоева. Процент зараженности всего составил 0,38%.
За период 2006-2011гг. проведённые аллергические исследования в частном секторе Фархорского района и производственного кооператива Бахт - 82 Мехнатабадского сельсовета Восейского района, а также в хозяйстве им. Амиршоева Кулябского района и частного сектора Пахтакорского сельсовета из 12992 голов, выявлено положительно реагирующих 123 головы, что составляет 0,9%. Процент заражённости по трём хозяйствам в среднем составил 0,89%.
При исследовании 57 проб биологического материала бактериологическим методом, в культурах микобактерий не обнаружено. Для уточнения диагноза дополнительно эти пробы были исследованы методом ПЦР, из них в 12 случаях выявили положительно реагирующих на туберкулез животных, что составляет 21,05% от количества положительно реагирующего на туберкулез поголовья крупного рогатого скота.
Необходимо отметить, что данные бактериологических исследований во всех случаях были подтверждены результатами ПЦР. Следует отметить, что количество голов крупного рогатого скота, реагирующих на ППД-туберкулин для млекопитающих в частном секторе значительно ниже, чем в общественном секторе, расположенных в одной местности.
Применение ППД-туберкулина для млекопитающих, дополнительное исследование бактериологическим методом и применение метода ПЦР, дополняя друг друга, могут выявить больных туберкулезом животных в стадии анергии и в ранней стадии зараженности.
2.2.4. Результаты бактериологического исследования
материала от крупного рогатого скота, реагирующего на ППД-туберкулин для млекопитающих в общественном
и частном секторе
Всего за период с 2007 по 2010 год в частном секторе Ватанского сельсовета Фархорского района Хатлонской области исследовано 24апробы биологического материала от крупного рогатого скота, реагирующего на ППД-туберкулин для млекопитающих. Из них выделено 21 культура микобактерий: M.аavium - 6 (28,6%), атипичные микобактерии II группы по Ранъону - 3 (14,3%) и 12 (57,1%) - атипичных микобактерий IV группы по Ранъону.
За этот период исследовано 32 пробы биоматериала от крупного рогатого скота, реагирующего на туберкулин в частном секторе Комсомольского сельсовета Фархорского района Хатлонской области. Биологический материал обрабатывался методом А.П. Аликаевой и модифицированным методом седиментации (Донченко А.С. с соавт., 1994). В результате исследований было изолировано 28 культур атипичных микобактерий.
Необходимо отметить, что данные бактериологических исследований во всех указанных случаях были подтверждены результатами ПЦР.
Сравнивая результаты бактериологических исследований 32 проб биологического материала, следует отметить, что наименьшее количество выделенных культур микобактерий получено при обработке проб методом А.П.аАликаевой - 2 (6,2%). Модифицированным методом с использованием принципа седиментации было выделено 8 (25,0%) культур, а при дополнительном заражении белых мышей 18 (56,2%) культур.
В процессе анализа культур микобактерий, изолированных от крупного рогатого скота, реагирующего на туберкулин, следует отметить, что в частном секторе Ватанского и Комсомольского сельсоветов выделено из биологического материала от крупного рогатого скота 8 (28,6%) культур M.аtuberculosis, что связано с тесным контактом с больными туберкулезом владельцами животных. Количество культур M.аavium, изолированных из биологического материала от животных, реагирующих на туберкулин в личных подсобных хозяйствах Комсомольского сельсовета, составило 7 (25,0%). Количество культур, отнесенных к атипичным микобактериям, составило 13а(46,4а%).
Изучение результатов выделения атипичных микобактерий при бактериологических исследованиях биологического материала от крупного рогатого скота, реагирующего на ППД-туберкулин для млекопитающих проводили по схеме, предложенной Ранъоном, основанной на признаках пигментообразования и скорости роста культур микобактерий (Runyon, 1959).
2.2.5. Совершенствование методов диагностики туберкулеза крупного рогатого скота
Для совершенствования методов диагностики туберкулёза крупного рогатого скота применяли метод ПЦР.
Для постановки ПЦР, использовали тест-системы для индикации и дифференциации M. bovis и M. Tuberculosis (производитель - ЗАО НПО НАРВАК, г. Москва).
В лаборатории микобактериозов Ветеринарного института за период 2007 - 2011 гг., с поступившим патологическим материалом проводили многократные исследования на туберкулез методом ПЦР и получили положительные результаты.
Так, например, из патологического материала с частного сектора сельсоветов Комсомол и Ватан Фархорского района при исследовании 66 проб биоматериала, от положительно реагирующих на туберкулин голов крупного рогатого скота, только за 2007 и 2008 гг. было получено 2 положительных результата и выявили М. bovis.
В сельсовете Мехнатобод в частном секторе и в ПК Бахт - 82 Восейского района в период за 2007 - 2010 гг. было выявлено 30 голов крупного рогатого скота, положительно реагирующих на туберкулин, в 6 пробах методом ПЦР выявлена М. bovis, а в 3 случаях, из частного сектора, универсальными праймерами выявлены M. bovis и M. Tuberculosis.
В частном секторе сельсовета Пахтакор Восейского района и хозяйства им. Амиршоева Кулябского района за 2007-2009 гг. из 27 проб выявлено 4 положительных результата, из них в 3 пробах из частного сектора сельсовета Пахтакор выявлены M. bovis и M. Tuberculosis, в основном у лиц, находящих на учете тубдиспансеров, а в 1 случае - M. Bovis в хозяйстве им. Амиршоева Куябского района.
К примеру, 16 февраля 2009 г. исследовали материал, поступивший с рынка Шохмансур - внутренние органы (легкие, печень, селезенка, почки и лимфоузлы) от КРС. При патологическом осмотре мы обнаружили туберкулез легких. Были дополнительно взяты пробы из легких, печени, средостеночных лимфоузлов и бронхиальную слизь для подтверждения диагноза методом ПЦР. По отдельности подготовили материал для исследования на ПЦР, путем измельчения и растирания в ступке в физиологическом растворе. Получили положительные результаты - во всех 4 пробах выявили М. bovis.
При поступлении в лабораторию 6 проб кусочков паренхиматозных органов от КРС с Мясного бульвара, в результате исследования обнаружили одну положительную пробу.
В хозяйствах Сино Восейского района после дегельминтизации КРС проводили аллергическое исследование на туберкулез КРС в количестве 197 голов, в основном у лиц, находившихся на учете в туберкулезных диспансерах. В результате читки реакции была обнаружена одна голова, положительно реагирующая на туберкулин, у которой была взята проба крови, фекалий и мочи для дальнейшего исследования на ПЦР. Получен положительный результат.
При исследовании 2 проб патологического материала взятого от коз, 3 проб пат. материала от КРС, доставленных с рынка Шохмансур и одной пробы крови от собаки, которая находилась на территории тубдиспансера района Рудаки. По результатам исследования методом ПЦР во всех пробах была получена отрицательная реакция, кроме собаки, у которой обнаружили М. tuberculosis.
В хозяйстве Урунхаджаева Гафуровского района проводились аллергические исследования на туберкулез КРС: 8 июня 2010 г. одна положительно реагирующая корова инв. №190 была контрольно забита, а патологический материал был доставлен в Ветеринарный институт для дальнейшего исследования методом ПЦР и диагноз был подтвержден.
Исходя из вышеизложенного, можно сделать вывод о том, что наряду с существующими методами диагностики туберкулеза, метод ПЦР является заключительным и достоверным в спорных вопросах и, дополняя другие методы, выявляет животных в стадии ранней заражённости и в стадии анергии.
3. Значение объектов внешней среды в инфицировании животных возбудителем туберкулеза.
За период проведенных научно-исследовательских работ с 2006 по 2011 гг. из 74 проб объектов внешней среды, выделено: культуры М. bovis - 3 (4,05%), М. tuberculosis - 15 (20,3%), М. avium - 17 (23,0%) и атипичные микобактерии - 39 (52,7%). При дифференциации 39 культур нетуберкулезных микобактерий установлено, что 9 из них (23,01%) по классификации Ранъона, отнесены к фотохромогенным (1 группа); 10 (25,6%) - к скотохромогенным (2 группа); 5 (12,8%) - к нефотохромогенным (3 группа); и 15 (38,5%) - к быстрорастущим микобактериям (4 группа).
Таким образом, результаты исследований показывают, что в объектах внешней среды в отдельных случаях выявляли животных, инфицированных возбудителем туберкулеза бычьего вида, в некоторых случаях - микобактериями М. tuberculosis, М. avium а также атипичными микобактериями. По-видимому, целесообразно ввести понятие сельский дворовый смешанный очаг туберкулеза при наличии больного человека и больных туберкулезом или микобактериозом животных.
4. Выводы
1. Эпизоотическая обстановка по туберкулезу крупного рогатого скота в Хатлонской области за 1994 - 2011 гг. оставалась напряженной. Инфицированность крупного рогатого скота достигла от 0,01% до 2,5%. Проведенные оздоровительные мероприятия позволили оздоровить 22 неблагополучных пункта. Напряженность эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота за 1994 -2011 гг. составила от 1 до 14 неблагополучных пунктов.
2. Эпизоотический процесс туберкулезной инфекции в разрезе районов характеризовался неравномерностью эпизоотической напряженности, сравнение процента поголовья крупного рогатого скота, реагирующего в общественном и частном секторах показала, что животные реагируют меньше в частном секторе, чем в общественном - в 1,95 раз, а в секторах со сложной эпидемиологической ситуацией - в 3,16 раз выше.
3. Установлено, что бактериологические исследования во всех случаях подтверждаются результатами ПЦР. Применение ППД-туберкулина для млекопитающих, дополнительное исследование бактериологическим методом и применение метода ПЦР, дополняя друг друга, могут выявить больных животных в стадии анергии и в ранней стадии зараженности.
4. Результатами бактериологического исследования в общественном и частном секторах за 2007 - 2011 гг. выделено 11 культур микобактерий М. avium в 6 (28,6%), атипичных микобактерий 2 группы в 3 (14,3%) случаях и в 12 (57,1%) случаях атипичных микобактерий 4 группы по Ранъону.
5. Оздоровление поголовья крупного рогатого скота от туберкулеза в Хатлонской области шло интенсивнее, что подтверждается ликвидацией неблагополучных пунктов от 96 до 2 за исследуемый период.
6. Установлено снижение процента зараженности крупного рогатого скота микобактериями туберкулеза от 2,5 до 0,002%.
7. Результатами исследований доказано, что из объектов внешней среды выявляется возбудитель туберкулеза бычьего вида в некоторых случаях М. avium, а также атипичные микобактерии. Поэтому понятие смешанный очаг туберкулеза при наличии больного человека и больных туберкулезом или микобактериозом животных уместно. Таким образом актуальным является проведение эпидемиолого-эпизоотического обследования очагов туберкулеза, которое осуществляется при выявлении каждого случая инфекции.
8. Установлено, что наряду с существующими методами диагностики туберкулеза метод ПЦР является заключительным и достоверным в спорных вопросах, и, дополняя другие методы, выявляет животных в стадии ранней зараженности и стадии анергией.
9. К основным направлениям разработки систем мероприятий по профилактике и борьбе с туберкулезом крупного рогатого скота в условиях Хатлонской области относится: организация специальных ферм для выращивания здоровых животных, своевременное проведение диагностических исследований, оздоровление стад преимущественно методом полной замены неблагополучного поголовья в общественном секторе и компенсация убытков убитых животных у населения государством и проведение ветеринарно-санитарных мероприятий.
5. Практические предложения
Научные разработки, положения и выводы диссертационной работы вошли в нижеследующие нормативные документы.
1. Методические рекомендации по профилактике и оздоровлению хозяйств от туберкулеза крупного рогатого скота в условиях республики Таджикистан. Утвержденные Службой Государственного ветеринарного надзора МСХ РТ 29.11.2010 г.
2. Рекомендация по уточнению диагноза на туберкулез крупного рогатого скота благополучных хозяйств и определение видовой принадлежности культур микобактерий. Утвержденная Службой Государственного ветеринарного надзора МСХ РТ 10.12.2010 г.
Внедрение в производство статистического анализа, совершенства диагностики, планирования и контроля противоэпизоотических мероприятий, большого объема диагностических исследовании новейшими достижениями науки, создание систем мониторинга ветеринарного благополучия, обеспечения разработки оперативных прогнозов эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота - все способствует оздоровлению Хатлонской области от этой инфекции.
Практические предложения тщательно приведены в рекомендациях По профилактике и оздоровлению хозяйств от туберкулеза крупного рогатого скота в условиях республики Таджикистан.
6. Список работ опубликованных по теме диссертации.
1. Мирзоев Д.М., Сатторов С.Ф. Эпизоотология и эпидемиология туберкулеза животных Доклады ТАСХН. Душанбе - 2009. №4, с. 41-44.
2. Мирзоев Д.М., Сатторов С.Ф Туберкулез сельскохозяйственных животных. Доклады ТАСХН. Душанбе - 2010. №3, с. 39-43.
3. Мирзоев Д.М, Сатторов С.Ф., Одинаев К.А. Эпизоотология, диагностика и профилактика туберкулеза птиц. Доклады ТАСХН. Душанбе - 2010. №4, с. 61-65.
4. Сатторов С.Ф. Профилактика и особенности диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в частном секторе. Краевые аспекты инфектологии научно-практической конференции, посвященная 80-летию Таджикского научно- исследовательского института профилактической медицины Душанбе-2011, с. 176-179.
5. Мирзоев Д.М, Сатторов С.Ф., Мирзоева В.М. Способ приготовления агарозного геля для диагностики болезней животных методом полимеразой цепной реакции. Патент Республики Таджикистан TJ 279 МПК (2006) А 61 К 31/729, 4 с.
6. Мирзоев Д.М, Ярбаев Н., Сатторов С.Ф., Мирзоева В.М., Одинаев К.А. Методические рекомендации по профилактике и оздоровлению животноводческих хозяйств от туберкулеза крупного рогатого скота в условиях Республики Таджикистан. - 2010, 22 с.
Авторефераты по всем темам >> Авторефераты по сельскому хозяйству