Авторефераты по всем темам >>
Авторефераты по биологии
На правах рукописи
Герасименко Вадим Владимирович
Обмен веществ и продуктивные качества гусей
при использовании пробиотиков
03.00.13 - физиология
03.00.04 - биохимия
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
доктора биологических наук
Боровск - 2008
Диссертационная работа выполнена в ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных и ФГОУ ВПО Оренбургский государственный аграрный университет
Научные консультанты - заслуженный деятель науки РФ,
доктор биологических наук,
профессор Тараканов Б.В.;
доктор сельскохозяйственных наук,
профессор Никулин В.Н.
Официальные оппоненты - доктор биологических наук, профессор
Галочкин В.А.;
доктор биологических наук, профессор Фомичев Ю.П.;
доктор биологических наук, профессор Шевелев Н.С.
Ведущее учреждение: Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства
Защита диссертации состоится л18 июня 2008 года в 10 часов на заседании диссертационного совета Д.006.030.01 при ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных.
Адрес института: 249013, Калужская область, г. Боровск, пос. Институт, ВНИИФБиП с.-х. животных, тел. (495)9963415, факс - (48438) 42088.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского государственного научно-исследовательского института физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных.
Автореферат разослан л___________ 2008 года
Ученый секретарь
диссертационного совета
кандидат биологических наук Лазаренко В.П.
1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность работы. Повышение продуктивных качеств сельскохозяйственных животных и птиц возможно только при глубоком изучении физиолого-биохимических процессов, протекающих в их организме (Егоров И.А., 2002; Фисинин В.И., 1999, 2005). Сравнительно недавно для нормализации метаболических процессов в организме сельскохозяйственных животных и птицы стали использовать пробиотические препараты, которые, по сути, являются живой микробной добавкой к корму и оказывают свое позитивное воздействие на организм за счет улучшения его кишечного микробного баланса (Тараканов Б.В., 2007; Данилевская Н.В., 2006; Панин А.Н., Малик Н.И., 2002; Fuller R., 1989).
Между тем, большая часть исследований посвящена определению эффективности воздействия пробиотиков на продуктивные качества сельскохозяйственных животных и птиц. При этом доля физиолого-биохимических экспериментов по данному направлению чрезвычайно мала, а сами эксперименты в основном ограничиваются определением минимального набора клинических показателей. Однако не стоит забывать о том, что новое столетие - это фундаментальные исследования физиологии и биохимии питания птицы (Фисинин В.И., 2002). Кроме этого, в данный момент пробиотики практически не рассматриваются как регуляторы антиоксидантного статуса макроорганизма, что, однако, не исключает их вероятную и эффективную роль в поддержании устойчивости организма к активным формам кислорода.
Уникальным объектом для проведения экспериментов по выявлению характера и степени воздействия пробиотических препаратов на физиолого-биохимический статус макроорганизма являются гуси (Тараканов Б.В., Никулин В.Н. с соавт., 2004). У гусей, как ни у каких других сельскохозяйственных птиц, пищеварительные процессы, а следовательно, и обмен веществ в целом зависят от микрофлоры желудочно-кишечного тракта. Из этого следует и тот факт, что применение пробиотических препаратов именно в промышленном выращивании гусей должно оказывать максимальное воздействие на метаболические процессы, а также на продуктивные качества и экономическую эффективность.
С учетом высокого качества продукции гусеводства и потребности в ней продовольственного и промышленного рынка, а также большого спроса населения на молодняк закономерным должно быть повышение производства мяса, пера и пуха гусей. Однако в последние десятилетия в России отмечены отрицательные моменты в развитии гусеводства. Так, количество поголовья гусей на 2004 год достигло отметки 600 тысяч, что составляет около 0,2 % от общего количества всех видов сельскохозяйственной птицы, при этом доля мяса гусей от общей массы производимого мяса птицы составляет 0,1 % (Материалы общего собрания Росптицесоюза, 2004; Ройтер Я.С., Лукьянов А.Ф. с соавт., 2004). Одной из причин данного снижения является недостаточная изученность физиолого-биохимических особенностей организма гусей.
Цель и задачи исследований. Целью настоящих исследований являлось выявление общих закономерностей воздействия пробиотических препаратов на физиолого-биохимический статус организма гусей и их продуктивные качества.
Для достижения поставленной цели предусматривалось решение следующих задач:
- Определить дозы пробиотических препаратов лактомикроцикола, лактоамиловорина и микроцикола, обеспечивающие биологическую и экономическую эффективность промышленного выращивания гусей.
- Установить особенности физиолого-биохимического статуса организма гусей, выращиваемых на мясо и перо-пуховое сырье, при использовании лактомикроцикола, лактоамиловорина и микроцикола.
- Изучить воздействие пробиотических препаратов на показатели антиоксидантного статуса организма гусей.
- Выявить характер и степень влияния пробиотиков на физиолого-биохимический статус организма гусынь-несушек и их репродуктивные качества.
- Определить влияние пробиотиков на выводимость гусиных яиц, последующую сохранность и продуктивность молодняка.
- Изучить эффективность выращивания гусей при их инокуляции кишечной микрофлорой взрослой птицы в раннем возрасте.
- Провести производственную апробацию новых пробиотиков при промышленном выращивании гусей.
Научная новизна. 1. Впервые получен фактический материал о возрастных изменениях гематологических, физиологических и биохимических показателей организма гусей, а также о характере и степени воздействия лактоамиловорина, микроцикола и лактомикроцикола на данные показатели. Выявлены особенности механизмов воздействия пробиотиков на белковый, углеводный, липидный и минеральный обмен в организме гусей. Предложен способ снижения уровня холестерола в крови и продукции гусей за счет кратковременного использования в их кормлении штамма Lactobacillus amylovorus БТ 24/88 (патент RU № 2270580).
2. Выявлено, что применение пробиотиков с целью стимуляции репродуктивных качеств гусынь-несушек неоднозначно, и на основании комплекса физиолого-биохимических и хозяйственных признаков доказано, что наиболее целесообразным является использование штамма Escherichia coli S 5/98, входящего в состав пробиотика микроцикола.
3. Впервые показано, что предварительная обработка инкубационных гусиных яиц пробиотиками повышает их инкубационные качества, а также выводимость, жизнеспособность и массу тела молодняка гусей, при этом максимальное положительное воздействие оказывает комплексный препарат лактомикроцикол, содержащий штаммы Lactobacillus amylovorus БТ 24/88 и Escherichia coli S 5/98.
4. Впервые установлено положительное воздействие кратковременного скармливания суточным гусятам комплекса микрофлоры взрослой птицы в виде кишечной массы гусаков на физиолого-биохимический статус организма молодняка птицы, а также на их продуктивные качества.
5. Доказано, что использование пробиотиков не влечет за собой глубоких изменений в анатомии гусей, а повышение массы тела происходит за счет увеличения абсолютной массы всех органов пропорционально. Установлено антистрессовое воздействие пробиотиков на организм гусей.
6. Обнаружено качественно новое свойство пробиотических препаратов воздействовать на антиоксидантный статус макроорганизма. На модели гусей получен новый фактический материал о воздействии лактоамиловорина, микроцикола и лактомикроцикола на активность супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы и каталазы крови, содержание малонового диальдегида и общую антиокислительную способность плазмы крови, что позволяет расширить и углубить знания по данному вопросу, а в некоторых случаях использовать пробиотики с целью коррекции антиоксидантных процессов в организме птицы и животных.
Практическая значимость. 1. Настоящая работа относится как к области фундаментальных, так и прикладных исследований. Результаты комплексных исследований белкового, углеводного, липидного и минерального обмена, уровня естественной резистентности и, как следствие, продуктивности и сохранности гусей при использовании лактоамиловорина, микроцикола и лактомикроцикола позволяют рекомендовать применение данных пробиотиков в установленных дозах при выращивании гусей на мясо и перопуховое сырье. При этом наиболее эффективным является использование лактоамиловорина, который повышает сохранность молодняка на 2,6 %, живую массу - на 12,5 % и выход перопухового сырья - на 7 %.
2. С целью стимуляции репродуктивных качеств гусынь-несушек рациональным является использование микроцикола, который повышает сохранность на 0,67 %, яйценоскость на среднюю несушку - на 2,61 %, выход инкубационного яйца - на 0,47 %, вывод и выводимость молодняка гусей - на 1,61 и 0,74 % соответственно, а также сохранность молодняка - на 0,45 %.
3. Для повышения эффективности инкубирования гусиных яиц, увеличения продуктивных качеств молодняка гусей целесообразной является предварительная обработка инкубационного яйца лактомикроциколом, что позволяет повысить вывод гусят - на 7 %, выводимость - на 8,9 % и живую массу гусят - в среднем на 7 %.
4. Применение микробно-ферментного инокулята от взрослых гусаков в кормлении молодняка гусей позволяет повысить сохранность и живую массу на 11 и 12,7 % соответственно, при этом валовой выход перопухового сырья возрастает на 21,2 %.
5. Вышеуказанные технологические приемы позволяют рекомендовать производству дополнительные резервы повышения экономической эффективности промышленного выращивания гусей за счет использования рациональных схем применения пробиотиков. Результаты диссертационной работы имеют важное народнохозяйственное значение, поскольку направлены на решение крупной научно-практической задачи - повышения эффективности промышленного выращивания гусей. Осуществлено внедрение новых пробиотиков в практику выращивания гусей в ОАО Спутник, СПК Птицефабрика Гайская и ЗАО Птицефабрика Оренбургская.
6. В результате исследований разработаны и изданы: 1. Рекомендации по кормлению и использованию пробиотических препаратов при выращивании гусей (Рассмотрены и одобрены администрацией Оренбургской области департаментом агропромышленного комплекса. Оренбург, 2004); 2. Методические рекомендации по использованию пробиотика лактоамиловорина в животноводстве и ветеринарии (Рекомендации одобрены и рекомендованы к изданию ученым советом ВНИИФБиП сельскохозяйственных животных и на заседании секции физиологии и биохимии Россельхозакадемии. Боровск, 2007), а также монография Научные и практические аспекты разведения гусей для специалистов, занимающихся разведением гусей (Москва, 2004), монография Методы физиолого-биохимических исследований крови для аспирантов и научных сотрудников (Оренбург, 2005) и монография Биологические основы применения пробиотических препаратов в сельском хозяйстве для специалистов сельского хозяйства (Оренбург, 2007).
7. Научные разработки использованы при подготовке учебного пособия Основы аналитической химии с грифом МСХ РФ № 13-03/1005 от 13.10.2004 и учебного пособия Биохимия мяса и молока с грифом МСХ РФ № 13-03-2/556 от 16.03.2005, а также обучающей компьютерной программы для студентов аграрных вузов. Результаты исследований используются в учебном процессе аграрных вузов Российской Федерации.
8. Работа отмечена 2 дипломами и серебряной медалью на VI и VII Московском международном салоне инноваций и инвестиций (Москва, 2006; 2007), дипломом на Ярмарке бизнес-ангелов и инноваторов (Саранск, 2006), дипломом на Российском экономическом форуме Россия Единая (Нижний Новгород, 2007), серебряной медалью на Российской агропромышленной выставке Золотая осень (Москва, 2007). За проведение и внедрение данной работы автор удостоен званий: лауреата премии администрации Оренбургской области для молодых ученых и специалистов (Оренбург, 2005; 2008), лауреата премии Губернатора Оренбургской области в сфере науки и техники (Оренбург, 2006), лауреата премии Правительства Оренбургской области (Оренбург, 2007), а также награжден нагрудным знаком Участник ВВЦ № 12, постановление от 21.11.2007 № 51 (Москва, 2007).
Связь исследований с научной программой. Диссертационная работа выполнялась в соответствии с тематическими планами научно - исследовательских работ Оренбургского ГАУ по теме № 01200105542 и ВНИИФБ и П с.-х. животных по разделу № 01.9.70.002735, согласно договорам о совместных научных исследованиях между ФГОУ ВПО ОГАУ и ГНУ ВНИИФБиП с.-.х. животных от 26.11.1996; от 6.12.2000; от 20.12.2005. По межведомственной координационной программе фундаментальных и приоритетных прикладных исследований РАСХН, МСХ РФ, РАН (Головное учреждение - ГНУ ВНИИФБиП с.-х. животных) по научному обеспечению развития агропромышленного комплекса РФ № V 1.03. По межведомственной координационной программе РАСХН (Головное учреждение - ГНУ ВНИТИП), Проблема - VII, Задание - 02. усовершенствовать систему нормированного кормления птицы. Данная научно-исследовательская работа выполнялась при финансовой поддержке грантов Губернатора Оренбургской области № 20/05 от 09.06.2005 и № 19/243-п от 19.07.2007, а также РФФИ и администрации Калужской области, грант № 01-04-96027.
Положения, выносимые на защиту. 1. Пробиотики лактомикроцикол, микроцикол и лактоамиловорин оказывают существенное воздействие на обмен белков, минеральных веществ, углеводов и липидов в организме гусей.
2. Изменение эффективности межуточного обмена в организме гусей за счет использования пробиотиков сопровождается интенсификацией гемо- и эритропоэза и повышает уровень неспецифической резистентности.
3. Пробиотические препараты оказывают модулирующее действие на антиоксидантный статус организма гусей.
4. Пробиотики стимулируют метаболизм основных питательных веществ в организме гусынь-несушек в репродуктивный период. Обработка инкубационных яиц пробиотиками повышает выводимость гусят и их последующую продуктивность.
5. Кратковременное введение с кормом микробно-ферментного инокулята взрослой птицы стимулирует обмен веществ, а также факторы неспецифической защиты молодняка гусей и повышение их продуктивности.
6. Использование лактоамиловорина, микроцикола и лактомикроцикола в промышленном гусеводстве повышает сохранность, живую массу, выход перопухового сырья и увеличивает диетическую ценность мяса.
Апробация работы. Основные материалы диссертационного исследования представлялись и одобрены на межрегиональных научно-практических конференциях Пути увеличения производства и повышения качества животноводческой продукции (Оренбург, 2001; 2002); расширенных заседаниях Ученого совета факультета технологии производства и переработки продукции животноводства Оренбургского ГАУ (Оренбург, 2001; 2002); заседаниях Ученого совета факультета ветеринарной медицины и биотехнологии ФГОУ ВПО ОГАУ (Оренбург, 2003; 2004; 2005; 2006; 2007); I Всероссийской научно-практической конференции Здоровьесберегающие технологии в образовании (Оренбург, 2003); I и II Международных научно-практических конференциях Биоэлементы (Оренбург, 2004; 2007); Международной научно-практической конференции Научное наследие П.Н. Кулешова и современное развитие зоотехнической науки и практики животноводства (Москва, 2004); III Международном симпозиуме "Современные проблемы ветеринарной диетологии и нутрициологии" (Санкт-Петербург, 2005); Российской научно-практической конференции, посвященной 50-летию освоения целинных земель (Оренбург, 2004); региональной конференции молодых ученых и специалистов Оренбуржья (Оренбург, 2005); региональной конференции Наука - Технологии - Производство - Рынок (Оренбург, 2007); Российской научно-практической конференции, посвященной 75-летию основания Оренбургского государственного аграрного университета (Оренбург, 2005); I и II Российских научно-практических конференциях Проблемы устойчивости биоресурсов: теория и практика (Оренбург, 2004; 2007); III Всероссийской научно-практической конференции Проблемы экологии Южного Урала (Оренбург, 2007); Международной научно-практической конференции Актуальные проблемы ветеринарной медицины и биотехнологии (Оренбург, 2006); заседании Ученого совета ГНУ ВНИИФБиП с.-х. животных (Боровск, 2007).
А также на: конкурсе на соискание премии научно-исследовательских работ молодых ученых и специалистов Оренбуржья (Оренбург, 2005); конкурсе на соискание звания Лауреат премии Губернатора Оренбургской области в сфере науки и техники (Оренбург, 2006); конкурсе на соискание премии Правительства Оренбургской области в сфере науки и техники (Оренбург, 2007); VI и VII Московском международном салоне инноваций и инвестиций (Москва 2006; 2007); Ярмарке бизнес-ангелов и инноваторов (Саранск, 2006); Российском экономическом форуме Россия Единая (Нижний Новгород, 2007); Российской выставке Золотая осень (Москва, 2007).
Публикация результатов работы. По материалам исследований опубликовано 56 работ.
Объем и структура работы. Материалы диссертации изложены на 363 страницах компьютерного текста и включают введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения, список использованной литературы (637 источников, в т.ч. 300 зарубежных авторов). Работа иллюстрирована 109 таблицами, 17 рисунками, имеет 4 приложения.
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ
Экспериментальная часть работы выполнялась в птицеводческих хозяйствах Оренбургской области, базовым являлось ОАО птицефабрика Спутник Соль-Илецкого района Оренбургской области. Лабораторные физиолого-биохимические исследования проводились в ФГОУ ВПО Оренбургский ГАУ, ГНУ ВНИИФБиП сельскохозяйственных животных и ГНУ ВНИИМС. Объектом исследований являлись гуси итальянской белой породы. Всего было проведено одиннадцать опытов на молодняке гусей, на гусынях-несушках первого года использования и на гусиных яйцах. Общая логическая схема диссертационного исследования представлена на рисунке 1.
Целью первого и второго опытов было определение оптимальных доз лактоамиловорина, микроцикола и лактомикроцикола при выращивании гусей в промышленных условиях, обеспечивающих максимальную биологическую и хозяйственную эффективность. В первом опыте изучался лактоамиловорин, а исследования по определению наиболее эффективных доз микроцикола и лактомикроцикола проводили параллельно, и контрольная группа в данном случае была одна (опыт 2).
Третий и четвертый опыты выполнялись с целью определения физиолого-биохимических особенностей организма гусей, получавших лактоамиловорин, лактомикроцикол и микроцикол в эффективных дозах, установленных в первом и втором опытах. В этот период были проведены эксперименты по определению переваримости и усвоения, основных питательных веществ корма в возрасте 30 и 60 дней (3 и 4 опыты). Кровь для изучения динамики обменных процессов брали в возрасте 1, 10, 20, 30, 40, 60, 120, 150 и 180 дней.
Цель пятого опыта заключалась в определении влияния лактоамиловорина, лактомикроцикола и микроцикола на состояние антиоксидантных параметров организма гусей (опыт 5).
С целью уточнения возможного механизма воздействия пробиотиков лактоамиловорина и лактомикроцикола через естественные иммуномодуляторы - пептидогликаны, вероятно находящиеся в клеточной стенке штамма Lactobacillus amylovorus БТ-24/88, входящего в вышеназванные препараты, был проведен шестой эксперимент (опыт 6). Инактивацию штамма осуществляли следующим образом: пробиотический препарат лактоамиловорин, содержащий 4,261010 жизнеспособных клеток в 1 г препарата, кипятили в стерильной колбе в течение 3-х часов на медленном огне, после чего прокипяченный препарат высушивали до постоянной массы в сушильном шкафу при t = 120о С. Инактивированный препарат смешивали с кормом и растворяли в питьевой воде непосредственно перед кормлением. Опытная птица в течение первого месяца жизни получала инактивированный штамм Lactobacillus amylovorus БТ-24/88 в дозе 7 г/100 кг комбикорма, кроме этого аналогично опытам с обычными пробиотиками инактивированный препарат дополнительно выпаивался с водой в течение первых трех дней жизни в дозе 0,7 г/л при неограниченном её потреблении.
В седьмом опыте изучалось влияние пробиотиков на репродуктивные качества гусынь. Первая группа являлась контрольной и получала основной рацион, соответствующий нормам ВНИТИП для гусей в данном продуктивном периоде. Вторая группа дополнительно получала лактоамиловорин в дозе 7 г/100 кг комбикорма в течение всего периода исследований. Третья группа в составе рациона получала пробиотик микроцикол в количестве 10 г/100 кг комбикорма. Четвертая группа птицы дополнительно получала лактомикроцикол в дозе 11 г/100 кг корма. Все пробиотики скармливали в течение всего периода исследований, который длился с 250-дневного возраста до 370 дней. Гусаки содержались совместно с гусынями в соотношении 1:3.
В восьмом эксперименте определялось воздействие обработки инкубационных гусиных яиц лактоамиловорином, микроциколом и лактомикроциколом на их инкубационные качества, выводимость и жизнеспособность молодняка. Для эксперимента, выполняемого методом групп-аналогов, было сформировано 4 группы гусиных яиц. Перед закладкой яйца подвергали всем плановым ветеринарным мероприятиям. Первая группа служила контролем, вторую группу яиц предварительно перед закладкой в инкубатор погружали на 1 минуту в водный раствор лактоамиловорина с концентрацией 7 г/л, а перед переносом яиц в выводной шкаф процедуру повторяли. Третью и четвертую группы яиц перед закладкой в инкубатор погружали на 1 минуту в водные растворы лактомикроцикола и микроцикола с концентрацией пробиотиков 11 г/л и 10 г/л соответственно. Для приготовления растворов использовали дистиллированную воду, а в момент погружения яиц в раствор с пробиотиками поддерживали его температуру в пределах 35Ц37о С. В данном эксперименте учитывались только зоотехнические показатели.
Рис. 1 - Общая схема исследований
С целью определения влияния микробно-ферментного инокулята взрослой птицы на физиолого-биохимические и хозяйственные показатели молодняка гусей был проведен девятый эксперимент. В этом опыте гусятам опытной группы в течение первых трех суток жизни дополнительно задавали измельченную кишечную массу взрослых клинически здоровых гусаков в дозе 500 г/10 кг комбикорма. Для получения кишечной массы забивали взрослых клинически здоровых гусаков, проводили анатомическую разделку и отрезали кишечник от мышечного желудка до клоаки. После чего измельчали весь кишечник с содержимым с помощью бытовой мясорубки и тут же смешивали кишечную массу с комбикормом в вышеуказанной пропорции. Скармливание приготовленной смеси гусятам производили немедленно. Кровь для исследований брали в возрасте 30 и 60 дней.
Производственные опыты проведены на большом поголовье гусей. Испытания с лактоамиловорином выполняли отдельно (опыт 10), а с микроциколом и лактомикроциколом осуществлены параллельно, и контрольная группа была одна (опыт 11). В данных опытах дозы и схемы использования препаратов были аналогичны установленным в первом и втором опытах.
В опытах № 1, 2, 3, 4, 5, 6, 9, 10 и 11 группы формировались методом групп-аналогов, при соотношении самцов и самок 1:1. Гусят выращивали с суточного до 30-дневного возраста в помещении, а затем перевели на пастбище. Во время проведения опыта соблюдались рекомендуемые специалистами птицефабрики зоотехнические параметры, такие, как плотность посадки на 1 м2 пола 8 голов; температура в первые три дня поддерживалась на уровне 290 С, и к концу первой декады её снижали до 240 С, а затем до 200 С; относительная влажность воздуха находилась в пределах 65Ц75 %; освещение птичника в первые пять дней круглосуточное, при интенсивности 20Ц25 люкс/м2 пола, затем его сократили до 16 часов в сутки. Птица имела постоянный свободный доступ к корму и воде. В процессе опыта проводились также плановые ветеринарные мероприятия.
Взвешивания проводили на электрических весах Kenwood, сохранность учитывали по количеству павшей птицы ежедневно. Анатомическую разделку тушек проводили по методике ВНИТИП (2001). Количественный выход перо-пухового сырья определялся как с одной головы, так и в целом по группе. Кровь брали до утреннего кормления из крыловой вены (до возраста 1 месяца тотально) от 5 особей из каждой группы (3 + 2), а в опыте № 7 (5), в качестве антикоагулянта использовали гепарин, или если того требовала методика - ЭДТА. Для определения усвоения питательных веществ корма у гусей при использовании пробиотиков (опыты № 3 и 4) были проведены физиологические (балансовые) опыты в возрасте 30 и 60 дней. Было отобрано по 6 гусаков от опытной и контрольной групп однородных по живой массе, отражающей среднюю по группе.
В опытах использовали препараты с титром колониеобразующих единиц (КОЕ) Lactobacillus amylovorus БТ 24/88 в пределах 0,243Ц4,261010 и Escherichia coli S 5/98 - 1,64109 в 1 г препаратов, которые готовили в лаборатории биотехнологии микроорганизмов ГНУ ВНИИФБиП сельскохозяйственных животных, согласно патентам RU № 2054478, № 2268297 и № 2268925.
Производственные испытания пробиотиков проведены в ОАО птицефабрика Спутник, ЗАО Птицефабрика Оренбургская и СПК Птицефабрика Гайская.
В крови определяли: эритроциты, лейкоциты и гематокрит (Болотников В.А., Соловьёв Ю.В., 1980); концентрацию гемоглобина в гемометре Сали (Предтеченский В.Е., 1964); общий кальций и холестерол (Колб В.Г., Камышников В.С., 1976); содержание железа, цинка и меди в сыворотке крови методом атомно-абсорбционной спектроскопии, активность церулоплазмина (Кузнецов С.Г., 1997); фосфор в сыворотке крови по Бригсу в модификации Лебедева П.Т. и Усовича А.Г. (1965); общий белок в сыворотке крови рефрактометрическим методом (Меньшиков В.В., 1973); разделение и количественное определение соотношения отдельных фракций белков сыворотки крови электрофорезом на бумаге, общие липиды в сыворотке крови по цветной реакции с сульфофосфованилиновым реактивом (Колб В.Г., Камышников В.С., 1982); кислотную ёмкость крови по методу Неводова А.П.; глюкозу в крови глюкозооксидазным методом (Материкин А.М. с соавт., 1997).
Показатели неспецифической резистентности: бактерицидную активность сыворотки крови по методу Смирновой О.В. и Кузьминой Т.А., титр лизоцима по методу Ермольевой З.В. и Буяновской И.С., активность бета-лизина ускоренным методом Бухарина О.В. (Маслянко Р.П., 1984).
Показатели антиоксидантного статуса: активность супероксиддисмутазы (Дубинина Е. Е. с соавт., 1983); активность глутатионпероксидазы (Моин В.М., 1986); активность каталазы (Королюк М.А. с соавт., 1988); малоновый диальдегид (Андреева Л.И. с соавт., 1988); антиокислительную активность плазмы крови (Клебанов Г.И. с соавт., 1988).
В кормах определяли: азот по Къельдалю, клетчатку по методу Геннеберга-Штомана, жир методом Рушковского, минеральные вещества путем сухого озоления, кальций и фосфор общепринятыми методами (Маслиева О.В., 1970), расчет БЭВ проведен по методу ВНИТИП (2001), крахмал методом Максакова (Материкин А.М. с соавт., 1997)
В помете определяли: те же вещества теми же методами, что и в кормах, протеин после отгонки мочевой кислоты и её солей по методу Дьякова М.И. (Маслиева О.И., 1970).
В мясе определяли: количество белковых веществ, жира, минеральных веществ и воды общепринятыми методами (Маслиева О.В., 1970), количество триптофана и оксипролина в мясе по методу Белькова Г.И. с соавт. (1984). Содержание общего холестерола в мясе по методу Зака, описанному Мартюшовым В.М. с соавт., (1997).
Инкубационные качества яиц определяли: общепринятыми методами, разработанными сотрудниками ВНИТИП для установления морфологического и химического состава яиц (Агеева Л.Н. с соавт., 1981; Дядичкина Л.Ф. с соавт. 1992, 2001; Отрыганьев Г.К. с соавт., 1982; Тишенков А.Н. с соавт., 1982; Сергеева A.M., 1978).
Полученные в экспериментах цифровые данные обработаны методом вариационной статистики (Гатаулин А.М., 1992). Данные в таблицах представлены в виде Mm, где M - среднее арифметическое, m - ошибка средней арифметической. В случае нормального распределения, то есть тождественности дисперсий в сравниваемых группах и разницы между средней арифметической (М) и медианой (Ме) менее 10 %, оценку статистической значимости различий между группами проводили с помощью t-критерия Стьюдента. Если же сравниваемые показатели имели распределение, отличающееся от нормального, то сравнение проводили с помощью U-теста Манна-Уитни, то есть непараметрического аналога t-критерия Стьюдента. Обработку проводили на персональном компьютере с использованием программы Microsoft Excel 2003 и Statistica 6.0. Достоверными считали различия при р0,05.
3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И
ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Результаты первого и второго опытов свидетельствуют о том, что использование лактомикроцикола, лактоамиловорина и микроцикола сопровождается повышением сохранности и живой массы молодняка гусей, а также оказывает воздействие на физиолого-биохимические показатели их организма. Оптимальные дозы пробиотиков составляют: лактомикроцикола - 11 г, лактоамиловорина - 7 г и микроцикола - 10 г/100 кг комбикорма. Все препараты задавались птице в установленных дозах с поправкой на титр КОЕ.
3.1 Воздействие пробиотиков на переваримость питательных веществ корма
Применение микроцикола, лактоамиловорина и лактомикроцикола в первую очередь оказывало влияние на процессы пищеварения, то есть на начальный этап обмена веществ, а уже затем на промежуточный и конечный этапы обмена. Применение пробиотиков приводило к повышению среднесуточного потребления корма как в 30-, так и в 60-дневном возрасте. При скармливании лактомикроцикола потребление корма увеличивается на 3,63 %, а усвоение протеина возрастает на 3,41Ц3,45 %, клетчатки - на 6,61 %, БЭВ на - 4,04 - 10,55 %, золы - на 5,4Ц5,48 %, кальция на - 5,14Ц6,47 %, крахмала - на 3,23Ц5,79 %, а использование липидов снижается на 21,14Ц21,21 % (р0,05). При применении лактоамиловорина возрастает потребление корма на 3,24 %, усвоение протеина повышается на 2,92 - 4,32 %, клетчатки - на 11,39 %, БЭВ - на 13,26 %, минеральных веществ - на 1,52Ц2,39 %, тогда как усвоение липидов снижается на 41,68Ц44,5 % (р0,05). Введение в комбикорм микроцикола оказывает меньшее воздействие на процессы пищеварения в ЖКТ гусей, но тем не менее усвоение протеина корма увеличивается на 2,52 %, клетчатки - на 1,01Ц10,51 %, БЭВ - на 3,9 %, минеральных веществ - на 7,31 %, кальция - на 2,34 % и фосфора - на 2,49Ц3,63 % (р0,05).
При применении лактоамиловорина и лактомикроцикола повышение потребления кормов наиболее выражено. Вероятно, это сопряжено со снижением усвоения липидов корма, которые, как известно, имеют максимальную энергетическую ценность по сравнению с белками и углеводами. Аналогичная зависимость при повышении калорийности рационов и обратный эффект при понижении калорийности отмечена многими исследователями (Никулин В.Н., Тараканов Б.В., Синюкова Т.В., 2007; Романов М.П., 1962; Baldini J.T. et al., 1955, 1957; Bolton W., 1963; Dobson D.S. et al., 1964; Donaldson W.E. et al., 1955; Mc Daniel A.H. et al., 1957; Sandr M.L., 1956; Schwartz H.G. et al., 1958; Spring S.L. et al., 1957), при этом объяснение данного явления состоит в том, что энергетические потребности являются наиболее существенным стимулятором потребления корма, и если эти потребности удовлетворены, то прием корма прекращается. Это приводит к ограничению приема других нутриентов, в том числе протеина и минералов. Причиной снижения усвоения липидов корма у гусей, получавших лактоамиловорин и лактомикроцикол, является свойство, установленное Gilliland S.E. (1990), различных видов лактобацилл, обитающих в пищеварительном тракте, деконъюгировать таурохолиевую и гликохолиевую желчные кислоты, а поскольку деконъюгированные желчные кислоты обеспечивают меньшее всасывание липидов из кишечного тракта, определенное количество липидов корма проходит через желудочно-кишечный тракт транзитом.
Причиной незначительного повышения среднесуточного потребления корма гусями под воздействием микроцикола может быть активный рост лактобактерий под воздействием штамма Escherichia coli S 5/98, однако это предположение не находит подтверждения в опытах по переваримости отдельных питательных веществ корма, поскольку в этой группе наблюдалось некоторое повышение степени усвоения липидов корма. Возможно, под влиянием микроцикола усиливалась перистальтика кишечника и компоненты корма быстрее эвакуировались из кишечника, заставляя птицу более активно потреблять новые порции. Впрочем, по данным Bengmark S. (2000), на жизнедеятельность микрофлоры кишечника макроорганизма в среднем расходуется до 10% поступившей энергии и 20% объема принятой пищи, а поскольку под воздействием пробиотиков количество микроорганизмов, колонизирующих кишечник гусей, возрастало, то закономерно увеличивалась и потребность их в питательных веществах, что и послужило причиной повышения среднесуточного потребления кормов.
3.2 Влияние пробиотиков на морфофизиологические показатели крови
По-разному пробиотики оказывали воздействие на гематологические показатели (табл. 1). Общим было то, что лактоамиловорин, микроцикол и лактомикроцикол повышали уровень гемоглобина, количество эритроцитов и величину гематокрита, но при этом под воздействием лактоамиловорина и лактомикроцикола количество лейкоцитов несколько снижалось, а под воздействием микроцикола повышалось. Применение лактомикроцикола сопровождалось
Таблица 1 - Воздействие пробиотиков на гематологические показатели гусей
Возраст, сут | Показатель | ||||||||
Эритроциты, 1012/л | ейкоциты, 109/л | Гемоглобин, г/л | |||||||
1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | |
1 | 2,300,02 | 2,310,03 | 2,300,02 | 23,680,03 | 23,720,12 | 23,680,03 | 101,80,51 | 102,50,32 | 101,80,51 |
10 | 2,340,03 | 2,340,02 | 2,320,03 | 23,330,03 | 23,330,17 | 23,360,03 | 99,40,58 | 99,10,62 | 98,50,54 |
20 | 2,500,04 | 2,530,14 | 2,460,03 | 23,770,04 | 23,620,39 | 23,890,04 | 96,70,49* 101,57 | 96,20,73* 101,8 | 95,40,48 |
30 | 2,790,03* 105,28 | 2,870,11 | 2,730,04 | 23,940,02* 97,75 | 23,330,02* 94,92 | 24,570,03* 100,33 | 98,11,05* 107,45 | 100,30,21* 113,85 | 96,20,67* 104,49 |
40 | 2,730,06 | 2,720,14 | 2,640,04 | 25,010,06* 97,62 | 25,020,24* 96,38 | 25,660,06 | 108,31,20* 107,54 | 109,20,65* 108,55 | 104,81,03* 104,07 |
60 | 2,780,09 | 2,770,12 | 2,710,10 | 24,580,09* 98,60 | 24,720,27 | 24,950,12 | 111,21,49* 104,02 | 112,40,35* 106,74 | 109,70,81* 102,62 |
120 | 2,750,09 | 2,740,09 | 2,740,09 | 23,820,21 | 23,420,17* 97,75 | 24,230,16 | 116,51,74* 106,10 | 118,20,38* 108,04 | 114,31,45* 104,09 |
150 | 2,920,12 | 2,940,09 | 2,810,10 | 25,120,22 | 24,330,12* 96,66 | 25,700,20 | 121,92,12* 108,45 | 124,30,36* 111,58 | 118,11,71* 105,07 |
180 | 3,010,12 | 3,050,09 | 2,950,11 | 24,490,13* 98,16 | 23,750,33* 95,11 | 25,170,07* 100,88 | 132,32,45* 112,88 | 137,31,76* 17,65 | 124,72,17* 106,39 |
Примечание: здесь и далее в таблицах 2 - 7 и 10 - 14 1-я опытная - группа, где использовали лактомикроцикол, 2-я опытная - лактоамиловорин, 3-я опытная - микроцикол; *- различия между опытной и контрольной группами достоверны при р0,05; здесь и в таблицах 2, 3, 4 и 5 в случае статистически значимых различий между опытной группой и контролем в числителе приведены абсолютные значения показателя, а в знаменателе - в процентах к контролю.
повышением количества гемоглобина на 1,57-12,88 %, величины гематокрита на 2,21-3,56 %, количества эритроцитов на 5,28 % и снижает количество лейкоцитов на 1,42-2,44 % (р0,05). Использование лактоамиловорина увеличивало уровень гемоглобина на 1,8 - 17,65%, величину гематокрита - на 2,21 - 7,41%, тогда как число лейкоцитов снижалось на 2,3 - 5,35% (р0,05), а скармливание микроцикола повышает количество гемоглобина на 2,62-6,39 %, лейкоцитов - на 0,33-0,88 % и величины гематокрита - на 1,72-1,82 % (р0,05).
Все вышеперечисленные изменения не оказывали видимого отрицательного воздействия на организм гусей и не выходили за пределы физиологических норм. Наиболее вероятной причиной положительных сдвигов в составе красной крови гусей под влиянием пробиотиков является интенсификация процессов окисления и восстановления в организме птицы. Так как гусята опытных групп лучше переваривали питательные вещества корма, то и количество веществ, поступающих в кровь из желудочно-кишечного тракта, увеличивалось, а поскольку эти нутриенты могут изменять рН крови в ту или иную сторону, необходимо увеличение её буферной ёмкости. Известно, что большая часть буферной ёмкости крови приходится на гемоглобин эритроцитов, в связи с чем количество эритроцитов и гемоглобина в крови гусей опытных групп было выше, чем в контроле. Похожие данные численности эритроцитов и количества гемоглобина в крови гусей получены в исследованиях Закраевской Г. (1970), Лукичевой В.А. (1989) и Крючковой М.А. (2007), а также возрастной динамики величины гематокрита Лукичевой В.А. (1989) и Woszczyk J. et al. (1981).
За весь исследуемый возрастной период количество лейкоцитов в крови гусей опытных групп, где использовали лактоамиловорин и лактомикроцикол было несколько ниже, чем в контроле, и поскольку никаких отрицательных моментов влияния лактоамиловорина и лактомикроцикола на организм гусей не выявлено, этот факт, вероятно, может быть расценен как результат положительного влияния пробиотиков на физиолого-биохимический статус организма гусей.
Аналогичные данные были получены в экспериментах Малик Н.И. (2002) на цыплятах под воздействием пробиотика стрептобифида-форте, а также в опытах Данилевской Н.В. (2007) на крупном рогатом скоте и цыплятах-бройлерах. Однако под воздействием микроцикола количество лейкоцитов возрастало, и этот факт, по-видимому, связан с действием штамма Escherichia coli S 5/98 на макроорганизм, поскольку такой же эффект отмечен в работах Тараканова Б.В. (2005), а также Соколовой Н.А. с соавт. (1991) под воздействием других пробиотиков на основе штаммов Escherichia coli. Вероятно штаммы Escherichia coli, входящие в состав нормобиозов макроорганизмов, каким-то образом оказывают воздействие на количество лейкоцитов, т.е. регулируют их содержание, а основной эффект от введения таких пробиотиков выражается в стимуляции лейкопоэза, что также стимулирует защитные силы макроорганизма. При этом не следует исключать и возможное ответное действие макроорганизма гусей на введение микробных агентов, воспринимающихся им как патогенные или условно-патогенные.
3.3 Воздействие пробиотиков на состояние естественной резистентности организма гусей
Воздействие пробиотиков на защитные реакции организма гусей реализовывались не только за счет регуляции численности лейкоцитов, но и за счет повышения уровня сывороточного лизоцима, активности бета-лизина и, как следствие, бактерицидной активности сыворотки крови (табл. 2). При использовании лактомикроцикола БАСК увеличивается на 5,15Ц10,15 %, количество лизоцима - на 12,25Ц16,58 % и активность бета-лизина - на 9,17Ц13,87 % (р0,05). Применение лактоамиловорина повышает бактерицидную активность сыворотки крови на 2,17Ц12,49 %, содержание лизоцима - на 13,48Ц35,18 % и активность бета-лизина - на 8,3Ц34,87 % (р0,05). Использование микроцикола увеличивает БАСК на 4,25Ц10,98 %, количество лизоцима - на 11,16Ц12,0 % и активность бета-лизина - на 7,47Ц25,63 % (р0,05).
По данным Маслянко Р.П. (1987); Иванова Ю.Б. (2005), бактерицидная активность сыворотки крови (БАСК) является интегральным фактором естественной резистентности гуморального типа, свидетельствующим о способности крови к самоочищению. Применение всех трех пробиотиков стимулировало бактерицидную активность сыворотки крови опытных гусей. Данные возрастной динамики бактерицидной активности сыворотки крови у гусей всех групп совпадают с данными, полученными Хаустовым В.Н. (2001) на утках и Липской В.В. (1967) на гусях. Последний автор сообщила, что уровень БАСК у гусей очень отзывчив на различные внешние факторы, например, добавление метионина в рацион значительно повышает бактерицидную активность сыворотки крови.
Лизоцим относится к одному из важнейших факторов естественной резистентности организма (Бухарин О.В. с соавт., 1977; Воронин Е.С. с соавт., 2002; Карпуть И.М., 1994; Pfulek S. et al., 1985). Применение микроцикола, лактоамиловорина и лактомикроцикола позволило увеличить содержание лизоцима в крови гусей опытных групп, тем самым оказало стимулирующее влияние на неспецифическую резистентность организма. Данные возрастной динамики содержания лизоцима в крови гусей совпадают с данными, полученными Хаустовым В.Н. (2001) на утках.
Маслянко Р.П. (1987) сообщил, что бета-лизин является одной из важных бактерицидных систем сыворотки крови животных, отличающейся термостабильностью и избирательностью в отношении грамположительных бактерий. По своей природе бета-лизин представляет катионный белок (Ivanov I.B. et al., 2005, 2006, 2007). По мнению авторов, бета-лизин имеет тромбоцитарное происхождение. Применение пробиотиков оказывало не столь выраженное стимулирующее влияние на активность бета-лизина, как, например, на бактерицидную активность сыворотки крови или содержание лизоцима. К сожалению, в доступной нам литературе не найдено данных возрастной динамики активности бета-лизина у птиц вообще и у гусей в частности. Поэтому мы можем только констатировать, что с возрастом активность бета-лизина у гусей значительно снижается, тогда как cодержание лизоцима и бактерицидная активность
Таблица 2 - Влияние пробиотиков на неспецифическую резистентность гусей
Возраст, сут | Показатель | ||||||||
БАСК, % | изоцим, мкг/мл | Активность бета-лизина, % | |||||||
1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | |
1 | 57,320,99 | 59,70,25 | 57,320,99 | 25,311,04 | 24,471,54 | 25,311,04 | 27,531,16 | 30,441,23 | 27,531,16 |
10 | 54,290,85* 105,15 | 55,870,23* 110,09 | 54,360,82* 105,29 | 24,531,02* 114,41 | 24,421,23* 118,77 | 23,890,63* 111,42 | 25,410,89 | 27,321,02 | 26,180,49* 107,47 |
20 | 62,831,24* 109,77 | 64,720,17* 110,77 | 61,450,96* 107,36 | 21,290,97* 116,53 | 21,570,56* 124,54 | 20,460,47* 112,0 | 22,160,76 | 24,020,96 | 23,450,85* 111,3 |
30 | 67,581,10* 105,96 | 69,930,35* 106,21 | 66,490,96* 104,25 | 17,860,84* 116,58 | 17,860,52* 126,94 | 17,030,76* 111,16 | 19,520,71 | 20,110,84 | 20,340,51* 111,2 |
40 | 74,261,48* 110,15 | 74,560,48* 112,49 | 74,821,52* 110,98 | 18,370,61* 113,3 | 15,640,68* 135,18 | 17,840,85 | 16,270,43 | 16,031,05 | 17,590,81* 114,07 |
60 | 75,341,63* 108,85 | 75,830,62* 110,33 | 76,031,44* 109,85 | 15,910,65* 113,5 | 12,560,65 | 15,170,81 | 12,380,12* 109,17 | 12,110,93* 120,14 | 13,270,56* 117,01 |
120 | 75,721,24* 105,81 | 75,240,77* 102,17 | 76,121,48* 106,37 | 14,080,95 | 14,780,71* 134,0 | 13,650,67 | 8,440,32 | 8,510,72* 134,87 | 9,120,43* 123,57 |
150 | 84,411,87* 107,67 | 85,760,89* 107,43 | 83,741,45* 106,82 | 49,221,79* 112,25 | 58,720,07* 113,27 | 44,011,83 | 9,830,46 | 10,750,81* 130,3 | 10,260,61 |
180 | 81,051,34* 105,75 | 83,300,14* 107,53 | 80,691,11* 105,28 | 43,852,25 | 56,070,06* 113,48 | 41,282,17 | 5,420,19* 113,87 | 2,600,07* 108,3 | 5,980,48* 125,63 |
сыворотки крови с возрастом у гусей повышается. По-видимому, эти процессы каким-то образом связаны между собой и требуют более детального изучения. Интересным представляется и тот факт, что на активность бета-лизина из всех трех препаратов наибольшее воздействие оказал микроцикол. Это, вероятно, связано с тем, что, по данным Гриценко В.А. с соавт. (2001), Johnson J.R. (1991), Krzeska I. et al. (1992), Yamamoto S. et al. (1996), бактерии рода Escherichia обладают способностью воздействовать на активность бета-лизина и некоторых других факторов неспецифической резистентности организма по различным, еще до конца не выясненным, механизмам.
3.4 Влияние пробиотических препаратов на концентрации белка и
соотношение его отдельных фракций в сыворотке крови гусей
Более высокая степень усвоения протеина корма у гусей опытных групп, по-видимому, обусловлена несколькими факторами, такими, как повышение общей протеолитической активности кишечника за счет выделяемых микроорганизмами желудочно-кишечного тракта протеаз; во-вторых, применение изучаемых пробиотических препаратов позволило создать благоприятные условия для обитания и активной жизнедеятельности бактерий, способных продуцировать ферменты, гидролизующие клетчатку. Этот факт важен не только тем, что продукты расщепления клетчатки, в частности моносахара, лучше, чем сама клетчатка, используются птицей в качестве питательных веществ, но и тем, что данные ферменты освобождают клетки растительных тканей от оболочек, состоящих из клетчатки, и делают содержимое клеток доступным воздействию пищеварительных ферментов, в том числе и протеаз.
Вышеперечисленные факты лежат в основе повышения содержания общего белка в сыворотке крови гусей опытных групп (табл. 3). Так, при использовании лактомикроцикола увеличивается количество общего белка в сыворотке крови на 5,82Ц17,16 %, отмечается увеличение относительной доли альбуминов на 1,22Ц4,25 % и -глобулинов на 0,86Ц4,1 %, за счет снижения доли -глобулинов на 1,65Ц8,98 % (р0,05). Применение лактоамиловорина повышает содержание общего белка в сыворотке крови гусей на 3,49Ц25,33 %, увеличивает долю альбуминов на 1,44Ц5,47 % и -глобулинов на 2,03 - 4,6 % за счет снижения таковой -глобулинов на 1,72 - 8,92 % (р0,05). Скармливание микроцикола приводит к повышению количества общего белка в сыворотке крови на 3,84Ц12,58 %. При этом увеличиваются доли альбуминов на 1,74Ц2,49 % и -глобулинов на 0,87Ц1,16 %, но снижаются - и -глобулинов на 1,54Ц1,6 и 2,8Ц5,05 % соответственно (р0,05).
Однако увеличение содержания белка в сыворотке может быть обусловлено не только этими факторами, но и тем, что применение лактоамиловорина, микроцикола и лактомикроцикола улучшает состояние микробиоценоза кишечника, и микроорганизмы, входящие в состав микробиоценоза, участвуют в синтезе аминокислот, используя в качестве источника азота аммиак, а в качестве источника углерода - углекислый газ, уксусную, пропионовую и другие органические кислоты. Известно также, что и сами бактерии в результате лизиса, под действием лизоцима и трипсина, могут быть источником белка для организма гусей (Боярский Л.Г., 1985; Мосякин В.М., 1993; Николичева Т.А., 1975; Шендеров Б.А. с соавт., 1989; Abdulrahim S.M., 1996; Gibson S.A. et al., 1989; Jan-Ho Son et al., 1995).
Таблица 3 - Содержание общего белка в сыворотке крови гусей, г/л
Возраст, сут | Группа | ||
1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | |
1 | 38,20,54 | 38,60,52 | 38,20,54 |
10 | 41,80,68* 105,82 | 42,40,72* 108,16 | 40,60,54 |
20 | 44,30,57* 106,30 | 65,90,94* 150,46 | 43,20,37* 103,84 |
30 | 58,70,77* 117,16 | 66,30,89* 125,33 | 56,40,65* 112,58 |
40 | 58,91,36* 112,84 | 57,60,84* 107,26 | 57,70,97* 110,54 |
60 | 63,81,64* 114,54 | 69,30,93* 121,79 | 59,31,01* 106,46 |
120 | 64,51,51* 110,50 | 63,80,95* 110,76 | 60,11,40 |
150 | 65,11,25* 112,24 | 62,20,99* 103,49 | 60,81,76 |
180 | 66,71,53* 112,48 | 64,60,63* 123,05 | 63,91,28* 107,75 |
Сходные результаты возрастной динамики содержания общего белка в сыворотке крови гусей были получены Охрименко Е.М. и Нестерович Р.С. (1968), Лукичевой В.А. (1989), Жумабаевым М.К. (2004) и Крючковой М.А. (2007).
3.5 Содержание минеральных веществ в сыворотке крови гусей при
применении пробиотиков
По мнению Шендерова Б.А. (2005), обобщившего большой фактический материал, механизмы, связанные с нормальной микрофлорой, обеспечивающие микроэлементный гомеостаз в живых организмах, состоят в превращении химических элементов в атомовиты, специфические для каждого вида живых организмов; осуществлении специфических ОВР с неорганическими и органическими соединениями, изменяющими растворимость, подвижность и усвоение химических элементов; продукции органических кислот и других веществ, изменяющих растворимость и биодоступность неорганических и органических химических соединений; образовании и выделении хелатирующих и комплексообразующих соединений, влияющих на подвижность, адсорбцию и всасывание поступающих в организм естественным путем макро- и микроэлементов; восстановлении химических элементов из соединений до элементного и/или газообразного состояния; изменении биоусвояемости и токсичности за счет повышения или снижения транслокации химических элементов через слизистую пищеварительного тракта за счет дискриминации по транспорту анионов и катионов; опосредованной регуляции количественного и качественного содержания химических элементов в просвете кишечника и в биологических жидкостях организма за счет изменения скорости продвижения пищевого комка по кишечному тракту, влияния на другие физиологические функции, биохимические реакции организма, связанные с метаболизмом химических элементов. На этом базируется современное понимание механизма действия пробиотических препаратов на метаболизм основных минералов (Мазо В.К. с соавт., 2004; Мирошников С.А. с соавт., 2006; Сусликов В.Л., 2002; Шендеров Б.А., 2005; Bjomhag G., 1989; Elli M. et al., 2000; Khassanova L. et al., 2002; Kot E. et al., 1999; Mead G.C., 1989; Mengheri E. et al., 1999; Roediger W.E., 1986; Rojhani A. et al., 1994; Santavirta J. et al., 1991; Smith J.C. et al., 1984; Van den Berghe D, 2002; Watzke H.J., 1998).
В наших исследованиях установлено, что гуси опытных групп лучше усваивали кальций и фосфор корма, что приводило к повышению их уровня в сыворотке крови (табл. 4).
Таблица 4 - Воздействие пробиотиков на содержание макроэлементов в
сыворотке крови гусей, ммоль/л
Возраст, сут | Показатель | |||||
Кальций | Фосфор | |||||
1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | |
1 | 2,240,01 | 2,280,02 | 2,240,01 | 1,050,03 | 1,030,09 | 1,050,03 |
10 | 2,110,01 | 2,120,03 | 2,080,01 | 1,880,03 | 1,990,05 | 1,910,02 |
20 | 2,540,02* 104,53 | 2,560,09 | 2,460,02 | 1,900,04 | 2,010,04 | 1,930,01* 102,66 |
30 | 3,520,03* 104,14 | 3,610,04* 105,25 | 3,440,03 | 1,950,02 | 2,070,05* 106,7 | 1,970,01* 102,60 |
40 | 3,030,03* 118,36 | 3,020,05* 123,77 | 2,890,03* 112,89 | 2,040,02* 4,08 | 2,350,08* 119,29 | 2,080,03* 106,12 |
60 | 3,310,04* 112,59 | 3,270,08* 127,73 | 3,150,03* 107,14 | 2,140,02* 4,39 | 2,430,09* 120,30 | 2,210,04* 107,80 |
120 | 3,480,05* 115,23 | 3,430,11* 120,77 | 3,400,04* 112,58 | 2,180,01* 2,83 | 2,410,07* 116,43 | 2,230,03* 105,19 |
150 | 2,160,02* 110,77 | 1,320,05 | 2,090,02* 107,18 | 1,630,03* 5,84 | 1,240,12 | 1,760,02* 114,29 |
180 | 2,410,05* 114,76 | 2,420,11* 151,25 | 2,200,03* 104,70 | 1,780,03* 5,33 | 1,820,14* 162,50 | 1,820,03* 107,69 |
У гусей, получавших пробиотики, усвоение всех минеральных веществ корма было также выше, и с этим связано повышение содержания цинка и меди в сыворотке крови гусей, получавших лактоамиловорин и лактомикроцикол, но у них отмечено снижение уровня железа (табл. 5). Воздействие микроцикола было несколько иным, а именно: содержание цинка было также выше, а вот уровень меди снижался, тогда как количество железа возрастало. Различия во влиянии пробиотиков на содержание меди в сыворотке крови гусей, вероятно, связаны с селективным действием входящих в их состав микроорганизмов на этот микроэлемент, а также с его антагонистической активностью относительно железа в макроорганизме. Данный факт подтверждает предположение о том, что более активным микроорганизмом в пробиотике лактомикроциколе является штамм Lactobacillus amylovorus БТ-24/88, поскольку лактоамиловорин оказывает такое же воздействие на содержание изучаемых макро- и микроэлементов в сыворотке крови гусей.
Ясно, что воздействие пробиотиков на усвоение кальция и фосфора корма, а стало быть, и на их уровень в крови, реализуется по механизмам, описанным выше, а повышение общего уровня этих макроэлементов в организме гусей влечет за собой общеизвестные положительные сдвиги в метаболизме, в конечном итоге выражающиеся в повышении продуктивных качеств.
Гораздо более интересным, с точки зрения глобальности воздействия пробиотиков, является изменение количественного состава микроэлементов сыворотки крови. Так, например, уровень цинка в сыворотке крови гусей всех групп повышался, но данный факт важен не столько с точки зрения собственного повышения количества данного атомовита, сколько с точки зрения последствий данного увеличения, потому что цинк является эссенциальным микроэлементом и входит в состав активного центра ряда ферментов, стимулирует регенерацию тканей, обладает бактериостатическим действием, а также регулирует функции иммунной системы - от модуляции проницаемости кожных покровов до влияния на дифференцировку иммунокомпетентных клеток (Гуревич К.Г., 2001; Панченко Л.Ф. с соавт., 2004; Beerli R.R. et al., 2000; China S.E. et al., 2000; Davis C.D. et al., 2000; Ekmekcioglu С., 2001; Rink L. et al., 2000; Wellinghausen N. et al., 1998, 2001; Yang Т.Н. et al., 2000).
На уровень меди пробиотики оказывали селективное действие. Так, лактоамиловорин и лактомикроцикол повышали, а микроцикол несколько снижал концентрацию данного микроэлемента в сыворотке крови гусей. Анализируя данные литературы, Панченко Л.Ф. с соавт. (2004) пришли к выводу, что медь - это эссенциальный элемент, входит в состав антиоксидантных ферментов и участвует в транспорте железа, а дефицит и избыток меди сопряжены с риском поражения некоторых внутренних органов.
Таблица 5 - Воздействие пробиотиков на содержание микроэлементов в сыворотке крови гусей, мг/л
Возраст, сут | Показатель | ||||||||
Железо | Цинк | Медь | |||||||
1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | |
1 | 4,270,09 | 4,290,12 | 4,270,09 | 2,210,09 | 2,180,14 | 2,210,09 | 0,550,007 | 0,530,002 | 0,550,007 |
10 | 4,250,05 | 4,260,07 | 4,260,05 | 4,270,5* 104,66 | 4,360,04* 105,83 | 4,250,05* 104,17 | 0,590,010 | 0,590,003 | 0,570,008 |
20 | 4,140,05 | 3,960,04* 95,65 | 4,190,04 | 4,110,02* 102,24 | 4,020,05* 107,49 | 4,090,05 | 0,560,005* 103,70 | 0,570,007* 107,55 | 0,530,006 |
30 | 4,760,02* 98,55 | 4,170,03* 84,58 | 4,890,01* 101,24 | 4,150,03* 102,46 | 4,170,02* 103,47 | 4,160,04* 102,71 | 0,540,009* 108,00 | 0,540,008* 110,2 | 0,490,007 |
40 | 4,680,03 | 4,320,12 | 4,770,01* 101,27 | 3,740,05* 105,35 | 3,560,14* 120,68 | 3,680,03* 103,66 | 0,580,017 | 0,590,008* 107,27 | 0,540,010 |
60 | 4,820,04* 96,98 | 4,560,12* 91,02 | 5,020,03 | 4,080,06 | 4,090,09 | 4,080,01* 101,74 | 0,550,012 | 0,570,014 | 0,530,007 |
120 | 4,800,05* 96,97 | 4,430,14* 89,32 | 4,980,05 | 4,200,06 | 4,230,08 | 4,170,05 | 0,570,008* 105,56 | 0,580,009* 107,41 | 0,520,004* 96,30 |
150 | 4,610,03* 96,44 | 4,450,08* 93,68 | 4,830,04 | 3,760,03* 103,30 | 3,730,05 | 3,700,04 | 0,600,016 | 0,610,008* 107,02 | 0,560,013 |
180 | 4,330,01 | 4,120,07 | 4,520,04* 103,43 | 2,840,08 | 2,840,03 | 2,830,02* 102,91 | 0,640,011* 104,91 | 0,620,018 | 0,590,005* 96,72 |
Количество железа в сыворотке крови под воздействием микроцикола повышалось, тогда как использование лактоамиловорина и лактомикроцикола оказывало обратное действие. По данным Кудрина А.В. с соавт. (2000), в определенной степени медь и железо являются антагонистами, и, вероятно, штамм Lactobacillus amylovorus БТ 24/88 способствует в большей степени усвоению меди и тем самым несколько ослабляет использование железа, тогда как штамм Escherichia coli S 5/98 оказывает обратный эффект. При этом необходимо отметить, что особых видимых последствий данного селективного воздействия мы не наблюдали, что дает основание полагать, что уровни данных микроэлементов не понижались ниже физиологического оптимума, а данная вариабельность имела не столь значительный размах, чтобы оказать негативное воздействие. Тем не менее, данный факт требует пристального внимания, поскольку установленное нами селективное воздействие пробиотиков на количество микроэлементов возможно в последующем использовать с целью коррекции минерального статуса организма птицы, например, в регионах с повышенным содержанием железа или меди в рационе или, наоборот, с пониженным. В качестве гипотезы можно предложить еще и следующий вариант объяснения данного феномена. Так, Yokoyama K. et al. (2000) в своих исследованиях отмечают, что концентрации некоторых микроэлементов в сыворотке крови имеют циркадные ритмы. Максимум концентрации меди и железа отмечается в 9 часов утра, а минимум в 6 часов вечера. В наших исследованиях кровь всегда брали в 6 часов утра, то есть до утреннего кормления, и возможно, что использование пробиотиков сдвигает вышеупомянутые циркадные циклы данных микроэлементов за счет изменения активности пищеварения, и в одно и то же время мы наблюдали одну и ту же картину содержания железа и меди, тогда как возможно в другое время зависимость могла быть иной. Сущность следующей гипотезы заключается в том, что к фракции -глобулинов относится трансферрин, который является основным белком, запасающим железо в плазме крови, а в опытной группе под воздействием лактоамиловорина и лактомикроцикола процентное содержание -глобулинов несколько ниже, чем в контроле.
Таким образом, использование лактомикроцикола влечет за собой увеличение количества кальция на 4,14Ц18,36 %, фосфора - на 2,83Ц5,84 %, цинка - на 2,24Ц5,35 % и меди - на 3,7Ц8,0 %, при этом количество железа снижается на 1,47Ц3,69 % (р0,05). Применение лактоамиловорина увеличивает в сыворотке крови содержание кальция на 5,25Ц51,25 %, фосфора - на 6,7Ц62,5 %, цинка - на 3,47Ц20,68 %, меди - на 7,02Ц10,2 %, однако содержание железа уменьшается на 4,55Ц18,23 % (р0,05). Воздействие микроцикола выражается в повышении количества кальция в сыворотке крови на 4,7Ц12,89 %, фосфора - на 2,6Ц14,29 %, железа - на 1,24Ц3,43 % и цинка - на 1,74Ц4,17 %, но сопровождается уменьшением концентрации меди на 3,39Ц3,85 % (р0,05).
Некоторые исследователи считают, что активность такого фермента, как церулоплазмин, может служить критерием обеспеченности организма минеральными веществами (Кузнецов С.Г., 1989, 1991, 1997; Кузнецова Т.С., 1999; Микулец Ю.И. с соавт., 2002; Freiden Е., 1974, 1981). При введении в комбикорм лактомикроцикола увеличивается активность церулоплазмина на 2,44Ц15,82 %, кислотная емкость - на 3,69Ц6,88 %, количество глюкозы - на 5,88Ц12,14 %, однако снижается количество общих липидов на 23,66Ц28,64 % и холестерола на 8,41Ц28,03 % (р0,05). Применение лактоамиловорина повышает активность церулоплазмина на 6,2 %, увеличивает содержание глюкозы в сыворотке крови на 12,75Ц13,14 % и кислотной ёмкости крови на 9,83 %, но уменьшает уровни общих липидов и холестерола на 22,69Ц36,57 % и 12,6Ц32,67 % соответственно (р0,05). Использование микроцикола повышает активность церулоплазмина на 7,63Ц33,07 %, кислотную емкость крови - на 4,03Ц5,06 %, количество глюкозы - на 6,94 % (р0,05) и не изменяет концентрации общих липидов и холестерола.
3.6 Антиоксидантный статус организма гусей при
применении пробиотиков
На начальных этапах проведения экспериментов с лактоамиловорином было установлено, что применение данного препарата способствует активации церулоплазмина. Анализ литературы показал, что данный фермент обладает четко выраженными антиоксидантными свойствами. Это позволило предположить, что пробиотики могут тем или иным образом оказывать регулирующее действие на антиоксидантный статус макроорганизма. Проведенные эксперименты подтвердили правильность данной гипотезы (табл. 6).
В любом макроорганизме важная роль принадлежит свободнорадикальному окислению и генерации активных форм кислорода, поскольку свободнорадикальное окисление является эволюционно сложившимся естественным механизмом деструкции с целью последующего обновления клеток и тканей, а также для их приспособления к изменяющимся условиям окружающей среды, кроме этого происходит защита организма от различных агентов вирусной и инфекционной природы и образуются активные формы кислорода. Антиоксидантная система макроорганизма в определенной мере служит ликвидатором последствий активации свободнорадикального окисления и таким образом поддерживает биорадикальный гомеостаз (Владимиров Ю.А. с соавт., 1992; Галочкин В.А., 2001; Немцова Е.Р. с соавт., 2006; Beauchamp С.O. and Fridovich I., 1973; Feter J. et al., 1987; Halliwell B. et al., 1990; Kono Y. and Fridovich I., 1982; Slater T.F., 1984; Stocks J., 1982).
В наших исследованиях было установлено, что использование пробиотиков влечет за собой повышение активности супероксиддисмутазы и, как следствие, увеличение ферментативной активности каталазы и глутатионпероксидазы. Вероятно, это связано в первую очередь с оптимизацией минерального статуса организма гусей, поскольку, исходя из канонов кинетики ферментативных реакций, становится ясным, что в относительно замкнутой системе, а мы определяли активность данных ферментов в системе in vitro, их активность может зависеть от ряда факторов, а именно: от температуры, рН, концентрации субстрата и наличия активаторов. Поскольку температура, рН и концентрация субстратов во всех пробах были одинаковыми, то их влияние мы вполне обоснованно можем исключить.
Таблица 6 - Воздействие пробиотиков на состояние ферментативного звена антиоксидантного статуса организма гусей
Возраст, сут | Показатель | ||||||||||||
Активность супероксиддисмутазы цельной крови, усл.ед./мл крови | Активность глутатионпероксидазы эритроцитов крови, мкмоль/мин/г Hb | Активность каталазы сыворотки крови, мкат/л | |||||||||||
контрольная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | контрольная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | контрольная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | ||
1 | 21,430,72 | 325,1619,58 | 9,150,24 | ||||||||||
10 | 17,31 0,43 | 20,11 0,86* | 19,76 0,71* | 19,28 0,51* | 243,28 10,21 | 271,85 14,82 | 269,37 12,75 | 286,42 11,02* | 12,72 0,31 | 14,63 0,37* | 15,43 0,34* | 13,58 0,42 | |
20 | 14,64 0,54 | 17,26 0,73* | 17,53 0,85* | 17,04 0,63* | 217,49 11,25 | 259,62 12,49 | 263,25 15,04 | 267,15 10,83* | 13,88 0,36 | 15,29 0,33* | 16,28 0,53* | 14,72 0,45 | |
30 | 9,52 0,38 | 11,37 0,52* | 10,65 0,63 | 10,29 0,50 | 238,62 11,28 | 283,71 10,36* | 289,63 12,23* | 275,33 13,59 | 9,03 0,28 | 13,71 0,54* | 14,11 0,47* | 13,26 0,53* | |
40 | 15,85 0,41 | 17,48 0,39* | 18,31 0,72* | 17,53 0,41* | 309,78 15,46 | 361,29 17,04 | 374,52 16,38* | 343,86 14,27 | 17,64 0,39 | 18,54 0,52 | 19,28 0,41* | 18,25 0,46 | |
60 | 6,03 0,35 | 7,42 0,46 | 7,58 0,41* | 7,16 0,38 | 258,14 9,27 | 299,93 11,58* | 288,16 17,62 | 264,74 9,85 | 10,49 0,34 | 12,09 0,44* | 12,89 0,49 | 10,83 0,37 | |
120 | 3,89 0,29 | 4,10 0,35 | 4,02 0,33 | 3,91 0,37 | 221,86 12,36 | 242,14 13,27 | 236,49 14,16 | 230,51 12,74 | 8,23 0,42 | 9,11 0,46 | 9,45 0,38 | 8,96 0,34 | |
150 | 9,48 0,78 | 11,65 0,89 | 12,83 0,85* | 10,36 0,74 | 341,07 15,89 | 389,56 16,15 | 401,52 13,46* | 358,67 14,61 | 16,52 0,53 | 17,23 0,48 | 18,76 0,57* | 17,08 0,35 | |
180 | 7,93 0,52 | 9,07 0,58 | 9,74 0,64 | 8,97 0,49 | 263,19 14,07 | 278,38 12,17 | 291,34 11,75 | 271,28 15,37 | 10,74 0,32 | 11,08 0,30 | 11,35 0,41 | 10,84 0,43 | |
В этом случае на кинетику изучаемых ферментов будет действовать только один фактор - наличие и количество активаторов. Активаторами супероксиддисмутазы, каталазы и глутатионпероксидазы являются различные микроэлементы, а поскольку их уровень в сыворотке крови опытных гусей возрастал, то и закономерно возрастала активность ферментов антиокислительной защиты. Следствием этого явилось снижение уровня малонового диальдегида, который является одним из основных продуктов перекисного окисления липидов различными свободными радикалами (табл. 7). Антиокислительная активность плазмы крови зависит от наличия в ней различных антиоксидантов, ферментных систем обезвреживания перекисей и свободных радикалов, SH-соединений, стероидных гормонов, -токоферола, церулоплазмина, трансферрина и др. (Клебанов Г.И., 1988; Al-Timini D.J. et al., 1977; Stocks J. et al., 1974). Гуси опытных групп имели солидное преимущество над контрольными по данному показателю.
Повышение антиокислительной активности плазмы крови является закономерным следствием активации ферментативного звена антиоксидантного статуса организма гусей, что, однако, не исключает и возможное влияние других вышеуказанных факторов неферментного происхождения.
Таблица 7 - Содержание малонового диальдегида и общая антиоксидантная активность плазмы крови гусей при использовании пробиотиков
Возраст, сут | Показатель | |||||||
Содержание малонового диальдегида в сыворотке крови, мкмоль/л | Антиоксидантная активность плазмы крови, % | |||||||
контрольная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | контрольная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | |
1 | 9,830,15 | 25,302,41 | ||||||
10 | 8,24 0,09 | 7,98 0,11 | 7,91 0,07* | 8,06 0,08 | 34,82 2,89 | 47,12 3,16* | 49,51 3,28* | 37,43 2,45 |
20 | 7,92 0,12 | 7,42 0,09* | 7,14 0,13* | 7,63 0,15 | 42,53 2,24 | 52,29 2,51* | 54,83 3,63* | 48,17 3,36 |
30 | 5,43 0,14 | 4,91 0,11* | 4,83 0,16* | 5,27 0,14 | 51,79 2,63 | 63,42 3,06* | 65,94 3,92* | 62,50 2,61* |
40 | 7,29 0,18 | 6,77 0,24 | 6,59 0,17* | 6,98 0,19 | 64,22 2,58 | 75,38 2,91* | 77,27 3,75* | 68,91 3,02 |
60 | 4,68 0,17 | 4,02 0,16* | 3,88 0,21* | 4,41 0,18 | 73,18 3,74 | 79,57 3,98 | 82,09 4,67 | 76,29 4,17 |
120 | 3,56 0,11 | 3,27 0,17 | 3,34 0,15 | 3,15 0,09* | 79,56 5,62 | 82,34 5,33 | 84,17 6,89 | 81,73 4,92 |
150 | 6,85 0,14 | 6,52 0,19 | 6,46 0,21 | 6,64 0,17 | 70,23 5,23 | 73,46 4,85 | 75,90 5,74 | 72,38 4,56 |
180 | 5,21 0,19 | 5,09 0,08 | 4,89 0,22 | 5,18 0,23 | 78,64 6,08 | 81,07 5,24 | 80,37 6,27 | 78,85 5,37 |
Также здесь стоит учитывать и данные, полученные в результате определения активности церулоплазмина, поскольку данный фермент также обладает антиоксидантной активностью (Ажипа Я.И., 1983; Ярополов А.И. с соавт., 1986; Berry E.B., 1992; Gutteridge J., 1983; Sergeev A.G., 1993; Yamashoji S. et al., 1993). Непосредственно в организме гусей активация могла происходить и за счет того, что свободные радикалы выполняют и защитную функцию, а повышенный уровень микрофлоры в кишечнике за счет применения пробиотиков на каком-то из этапов развития гусей мог служить причиной активации данных ферментов. Стоит также отметить, что возрастные особенности антиоксидантного статуса организма гусей также были подвержены изменениям, а пиковые ситуации наблюдались после перевода птицы из птичника на пастбище и после проведения прижизненной ощипки. Таким образом, нами впервые изучено влияние пробиотиков на антиоксидантный статус организма гусей, что позволяет расширить знания по данному вопросу, а в некоторых случаях использовать пробиотики с целью коррекции антиоксидантных процессов в организме птицы и животных.
3.7 Воздействие инактивированного штамма Lactobacillus amylovorus БТ-24/88 на неспецифическую резистентность организма гусей
В экспериментах с инактивированным штаммом Lactobacillus amylovorus БТ 24/88 мы попытались изучить еще один возможный механизм реализации положительного влияния лактоамиловорина и лактомикроцикола на иммунный статус организма гусей. Методом групп-аналогов было сформировано две группы суточных гусят по 300 голов в каждой (опыт № 6).
Исследования показали, что введение инактивированного штамма Lactobacillus amylovorus БТ-24/88 не оказало видимого отрицательного воздействия на состояние здоровья гусят. Более того, в опытной группе наблюдалось повышение сохранности птицы, а также незначительное повышение живой массы (табл.8). Данные факты свидетельствуют о том, что инактивированный штамм Lactobacillus amylovorus БТ-24/88 оказывает положительное действие на организм гусей.
Таблица 8 - Сохранность и живая масса гусей
Возраст, сут | Группа | |||
контрольная | опытная | |||
Поголовье, гол | Живая масса, г | Поголовье, гол | Живая масса, г | |
1 | 300 | 100,632,8 | 300 | 100,632,8 |
10 | 291 | 237,244,1 | 294 | 241,324,5 |
20 | 282 | 594,4611,8 | 288 | 610,5315,7 |
30 | 270 | 1412,3713,4 | 285 | 1495,8817,3* |
120 | 264 | 4193,5943,8 | 279 | 4381,7252,1* |
180 | 258 | 4902,6871,9 | 273 | 5067,5482,6 |
Результаты исследований косвенно подтверждают нашу гипотезу об иммуномодулирующем действии пептидогликанов, входящих в состав клеточной стенки штамма Lactobacillus amylovorus БТ 24/88. Это подтверждается в ряде исследований (Бондаренко В.М. с соавт., 2003; Онищенко Г.Г. с соавт., 2002; Парфенов А.И., 2000; Шендеров Б.А., 2001; Clemmesen J., 1989; Cross M.L. et al., 2002; Oda M. et al., 1983; Henderson B. et al., 1996; Perdigon G. et al., 2001; Schell M.A. et al., 2002; Tannock G.W., 2001), в которых авторы считают одним из наиболее значимых механизмов иммуностимуляции организма-хозяина лактофлорой именно за счет наличия пептидогликанов.
Наши исследования показали, что использование инактивированного штамма Lactobacillus amylovorus БТ 24/88 в кормлении гусят позволяет стимулировать бактерицидную активность сыворотки крови, повышать уровень сывороточного лизоцима и увеличивать активность бета-лизина (табл.9).
Таблица 9 - Показатели неспецифической резистентности
Возраст, сут | БАСК, % | изоцим, мкг/мл | Активность бета-лизина, % | |||
контрольная | опытная | контрольная | опытная | контрольная | опытная | |
1 | 58,060,92 | 25,640,98 | 28,040,73 | |||
10 | 52,410,41 | 54,390,54* | 22,070,35 | 23,470,37* | 24,280,30 | 25,490,33* |
20 | 57,640,43 | 59,720,51* | 19,420,41 | 21,030,39* | 21,170,52 | 23,240,49* |
30 | 62,350,52 | 65,880,73* | 16,210,38 | 18,340,40* | 18,200,64 | 21,080,67* |
40 | 66,490,95 | 72,671,12* | 17,020,74 | 19,410,85 | 16,030,43 | 17,820,45* |
60 | 68,231,21 | 74,511,17* | 14,530,41 | 16,290,45* | 12,720,53 | 13,950,49 |
120 | 69,541,58 | 72,461,67 | 12,760,76 | 14,010,68 | 8,120,31 | 8,510,28 |
150 | 77,721,43 | 78,341,52 | 44,051,24 | 44,271,17 | 9,240,27 | 9,330,32 |
180 | 75,971,54 | 76,211,58 | 42,781,05 | 42,810,99 | 4,980,24 | 5,010,26 |
3.8 Репродуктивные качества гусынь при использовании пробиотиков
В экспериментах на гусынях (опыт № 7) биологическое действие лактоамиловорина, микроцикола и лактомикроцикола было аналогично таковому в опытах на гусятах (табл.10), но наблюдавшиеся изменения в физиолого-биохимическом статусе гусынь-несушек были несколько меньшими.
Это объясняется тем, что в желудочно-кишечном тракте взрослой птицы микробиоценоз уже является вполне стабильным, и возможность колонизации и размножения в нем различных микроорганизмов, как патогенных, так и входящих в состав пробиотиков гораздо ниже, чем у суточного молодняка. Кроме этого, активность собственных пищеварительных ферментов также высока, что и не позволяет пробиотикам в этом возрасте проявлять максимальный эффект на организм птицы. Тем не менее все три препарата стимулировали функции гемо- и эритропоэза, а также повышали уровень неспецифической резистентности и концентрации кальция и фосфора в сыворотке крови. При этом воздействие лактоамиловорина и лактомикроцикола было более выраженным на уровень кальция, а микроцикола - на содержание фосфора. Под влиянием микроцикола количество лейкоцитов повышалось, а при использовании лактоамиловорина и лактомикроцикола снижалось. Эта же тенденция наблюдалась и по отношению к общим липидам. Наблюдавшиеся изменения физиолого-биохимического статуса повлекли за собой во всех трех группах увеличение сохранности и повышение живой массы птицы, особенно выраженным это было в группах, где использовали лактоамиловорин и лактомикроцикол.
Таблица 10 - Биохимические и морфологические показатели крови гусынь
Показатель | Группа | |||
контрольная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | |
Середина яйцекладки | ||||
Эритроциты, 1012/л | 2,930,034 | 2,960,036 | 2,980,028 | 2,940,033 |
ейкоциты, 109/ л | 26,910,107 | 26,850,113 | 26,030,098* | 26,990,112 |
Гемоглобин, г/л | 123,62,24 | 135,42,29* | 139,72,16* | 130,82,37 |
БАСК, % | 65,141,12 | 65,941,25 | 66,091,23 | 65,521,16 |
изоцим, мкг/мл | 38,251,93 | 38,821,89 | 39,112,06 | 38,642,01 |
-лизин, % | 8,520,58 | 8,810,49 | 8,830,63 | 8,760,52 |
Общий белок, г/л | 63,81,25 | 64,71,31 | 65,21,32 | 64,31,27 |
Общие липиды, г/л | 25,351,20 | 24,321,17 | 23,191,08 | 25,431,18 |
Глюкоза, г/л | 2,210,06 | 2,290,06 | 2,370,09 | 2,230,07 |
Кальций, ммоль/л | 3,180,017 | 3,210,016 | 3,240,019 | 3,200,015 |
Фосфор, ммоль/л | 2,230,012 | 2,260,015 | 2,270,014 | 2,310,018* |
Конец яйцекладки | ||||
Эритроциты, 1012/л | 2,760,028 | 2,790,029 | 2,800,030 | 2,780,031 |
ейкоциты, 109/ л | 26,430,093 | 26,330,091 | 26,280,089 | 26,450,096 |
Гемоглобин, г/л | 117,52,38 | 124,52,42 | 126,72,43 | 121,82,34 |
БАСК, % | 63,881,05 | 64,291,11 | 64,561,12 | 64,171,09 |
изоцим, мкг/мл | 35,741,76 | 36,541,73 | 37,291,82 | 36,241,69 |
-лизин, % | 8,370,45 | 8,480,51 | 8,520,48 | 8,450,43 |
Общий белок, г/л | 64,51,59 | 66,11,42 | 66,81,45 | 65,71,51 |
Общие липиды, г/л | 22,041,16 | 21,831,19 | 21,071,22 | 22,091,28 |
Глюкоза, г/л | 2,230,08 | 2,270,09 | 2,280,11 | 2,240,08 |
Кальций, ммоль/л | 3,020,026 | 3,080,021 | 3,090,023 | 3,050,024 |
Фосфор, ммоль/л | 2,110,017 | 2,140,018 | 2,150,019 | 2,170,021 |
Однако в группе, где применяли лактоамиловорин, отмечено снижение репродуктивных качеств гусынь-несушек и полученного от них инкубационного яйца (табл. 11, 12). Первой видимой причиной такого снижения может являться увеличение живой массы птицы, что вполне согласуется с тем, что у гусей, чем выше живая масса, тем ниже репродуктивные качества.
Второй причиной может служить некоторое снижение количества каротиноидов в желтке, определяющих инкубационные качества яиц, по причине деконъюгации желчных кислот.
Таблица 11 - Влияние пробиотиков на продуктивные качества гусынь
Показатель | Группа | |||
контрольная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | |
Поголовье на начало опыта, гол | 300 | 300 | 300 | 300 |
Поголовье на конец опыта, гол | 292 | 295 | 297 | 294 |
Яйценоскость на среднюю несушку, шт | 35,62 | 35,46 | 35,30 | 36,55 |
Валовой сбор яиц, шт | 10544 | 10549 | 10538 | 10856 |
в т.ч. инкубационных, шт | 9689 | 9699 | 9687 | 10027 |
Масса яиц, г | 179,233,74 | 183,964,02 | 185,724,58 | 182,813,97 |
Плотность яиц, г/см3 | 1,1020,014 | 1,1100,022 | 1,1080,021 | 1,1170,024 |
Содержание в желтке каротиноидов, мкг/г | 15,971,08 | 15,850,98 | 14,831,03 | 16,991,14 |
Таблица 12 - Инкубационные качества яиц
Показатель | Группа | |||
контрольная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | |
Количество яиц, шт | 9669 | 9679 | 9667 | 10007 |
Средняя масса яиц, г | 178,733,52 | 182,923,89 | 184,914,49 | 183,553,95 |
Оплодотворенность, шт | 8194 | 8191 | 8173 | 8606 |
Кровяное кольцо, шт | 384 | 382 | 386 | 389 |
Замершие, шт | 467 | 469 | 465 | 475 |
Задохлики, шт | 311 | 317 | 314 | 323 |
Тумаки, шт | 289 | 274 | 267 | 286 |
Слабые и калеки, шт | 391 | 391 | 389 | 398 |
Вывод гусят, шт | 6352 | 6358 | 5963 | 6735 |
Вывод гусят, % | 65,69 | 65,69 | 61,68 | 67,30 |
Выводимость, % | 77,52 | 77,62 | 72,96 | 78,26 |
Живая масса гусят, г | 100,82,03 | 102,22,54 | 103,32,81 | 102,02,49 |
Кроме этого, лимитирующим фактором могло явиться снижение количества общих липидов, и в частности холестерола, поскольку холестерол является предшественником половых гормонов (Баранова Е.И. с соавт., 2004; Климов А.Н. с соавт., 1999; Нагорнев В.А. с соавт., 1998; DТAngelo A. et al., 1997; Grundy S.M., 1999; Hansson G.K., 2005; Harpel P.C. et al., 1996; Harvey S. et al., 2003; Hirsch A. et al., 2004; Jacobsen D.W., 1998; Scott T.M. et al., 2004; Wright C.B.et al., 2004).
Вероятно, сниженный уровень холестерола в крови молодняка птицы все же остается в тех пределах, которые не снижают количества половых гормонов, регулирующих в том числе и соотношение катаболизма и анаболизма в организме гусей, однако снижение уровня половых гормонов в крови гусынь-несушек в репродуктивный период уже влечет за собой снижение продуктивных качеств. В то же время микроцикол не оказывает антихолестеринемического воздействия на организм гусей, что в свою очередь не влияет на уровень половых гормонов и не приводит к снижению репродуктивных качеств гусынь-несушек. Повышение репродуктивных показателей в этой группе, по-видимому, является следствием общей интенсификации метаболизма в организме птицы под воздействием пробиотика.
3.9 Воздействие обработки пробиотиками гусиных яиц на их инкубационные качества, выводимость и жизнеспособность молодняка
Создание надлежащей санитарной обстановки при инкубации яиц является одной из приоритетных задач при воспроизводстве птицы. В настоящее время с этой целью используют прединкубационную аэрозольную дезинфекцию яиц и инкубаторов. Этот прием, обычно проводимый с использованием высокоэффективных бактериоцидов, приводит к уничтожению как патогенной, так и естественной микрофлоры поверхности яйца, а вылупившийся молодняк не получает нормальной микрофлоры пищеварительного тракта матерей, и его кишечник впоследствии колонизируется случайным образом нередко потенциально патогенными бактериями (энтеротоксигенные и геморрагические эшерихии, сальмонеллы, протеи, клебсиеллы, кампилобактеры и другие бактерии). Это приводит к заболеваниям и гибели птицы от колибактериоза (до 55% от общих потерь) и сальмонеллеза.
Чтобы установить степень и характер воздействия обработки пробиотиками лактоамиловорином, лактомикроциколом и микроциколом на выводимость гусиных яиц и последующую сохранность и продуктивность вылупившегося молодняка, был проведен опыт № 8.
Для этого отобрано 1200 яиц от гусынь итальянской белой породы, которые методом групп-аналогов подразделили на четыре группы по 300 яиц в каждой. Перед закладкой в инкубатор яйца подвергали плановым ветеринарным мероприятиям. Триста яиц служили контролем, а яйца 1-й, 2-й и 3-й опытных групп перед закладкой в инкубатор погружали на 1 минуту в водные растворы лактоамиловорина, лактомикроцикола и микроцикола соответственно.
После вывода молодняк сортировали. При этом обращали внимание на внешний вид, активность молодняка, его устойчивость на ногах. Слабых и калек сразу же отсаживали в отдельные ящики. Здоровый молодняк передавали на выращивание не позднее 8 ч после выборки. Гусят, выведенных из яиц контрольной, 1-й, 2-й и 3-й опытных групп, сформировали в четыре соответствующие группы.
Наиболее вероятной причиной повышения выводимости молодняка является образование защитной пленки на поверхности яйца, состоящей из бактерий, входящих в состав пробиотиков (табл. 13). защитная пленка не позволяет развиваться патогенным бактериям на поверхности яйца, а также препятствует их проникновению внутрь яйца.
Таблица 13 Ц Инкубационные качества яиц при обработке их пробиотиками
Показатель | Группа | |||
контрольная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | |
Количество яиц, шт | 300 | 300 | 300 | 300 |
Средняя масса яиц, г | 178,23,5 | 177,84,1 | 178,43,7 | 179,14,2 |
Оплодотворенность, шт | 254 | 257 | 252 | 254 |
Кровяное кольцо, шт | 12 | 14 | 9 | 11 |
Замершие, шт | 15 | 16 | 10 | 14 |
Задохлики, шт | 9 | 7 | 5 | 7 |
Тумаки, шт | 9 | 3 | 1 | 5 |
Слабые и калеки, шт | 12 | 14 | 9 | 10 |
Вывод гусят, шт | 197 | 203 | 218 | 207 |
% | 65,7 | 67,7 | 72,7 | 69 |
Выводимость, % | 77,6 | 79,0 | 86,5 | 81,5 |
Живая масса гусят, г | 102,32,4 | 102,52,8 | 102,21,9 | 101,83,1 |
Полученный из опытных яиц молодняк обладал высокой скоростью роста (табл. 14). В момент вылупления гусят их желудочно-кишечный тракт является стерильным, и первым объектом, с которым контактирует молодняк, является внутренняя и внешняя стороны яичной скорлупы.
Таблица 14 Ц Динамика живой массы гусят, г
Возраст, сут | Группа | |||
контрольная | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная | |
1 | 102,32,4 | 102,52,8 | 102,21,9 | 101,83,1 |
10 | 231,64,1 | 239,44,5 | 236,53,9 | 232,84,2 |
20 | 594,111,2 | 679,310,5* | 658,712,4* | 637,414,8* |
30 | 1376,318,6 | 1440,820,4* | 1435,219,7* | 1421,721,3 |
40 | 2025,424,3 | 2117,522,7* | 2114,923,5* | 2102,924,5* |
50 | 2674,725,9 | 2954,227,3* | 2983,126,3* | 2718,426,7 |
Поскольку мы обрабатывали пробиотиками внешнюю сторону скорлупы перед переносом яиц в выводной шкаф, то в их кишечник обязательно поступают бактерии, входящие в состав пробиотика, тогда как у гусят, вылупившихся из необработанных яиц, в кишечник могут попадать потенциально патогенные микроорганизмы. Пробиотические бактерии, попавшие в желудочно-кишечный тракт молодняка, быстро развиваются, предотвращая его заселение патогенами, и благоприятно влияют на становление естественной резистентности и метаболических процессов в организме птицы. Это и проявляется в повышении сохранности и живой массы птиц.
3.10 эффективность выращивания гусей при их инокуляции кишечной микрофлорой в раннем возрасте
Из суточных гусят итальянской белой породы методом групп-аналогов были сформированы две группы по 100 голов в каждой (опыт № 9). В комбикорм для гусят опытной группы вводили микробно-ферментный инокулянт (МФИ) из расчета 500 г на 10 кг комбикорма.
Для приготовления МФИ, в состав которого входили кишечный химус, содержащий нормальную микрофлору, микробные и собственные ферменты гусей, а также измельченная кишечная стенка, забивали клинически здоровых гусаков, проводили анатомическую разделку и лигировали кишечник от мышечного желудка до клоаки. Затем кишечник вырезали, измельчали его вместе с содержимым с помощью бытовой мясорубки и полученный фарш тут же смешивали с комбикормом, который немедленно скармливали гусятам в течение первых трех суток их жизни.
Исследования показали, что включение в комбикорм МФИ в первые три дня жизни гусят не оказало неблагоприятного воздействия на их рост и развитие. Птица была активной и хорошо потребляла корм. При этом скармливание добавки положительно сказалось на сохранности гусят, которая в опытной группе в течение первого критического месяца жизни составила 98%, тогда как в контроле только 90%. В целом за 6-месячный период выращивания в группе птицы, получавшей МФИ, пало всего лишь 4 гусенка, а в контрольной группе - 15 голов (табл. 15).
Использование МФИ привело не только к снижению падежа гусей, но и стимулировало прирост их живой массы. Начиная с 10-дневного возраста и на протяжении всего эксперимента живая масса гусей опытной группы превосходила (P<0,05) таковую контрольной группы. В конце 1, 2 и 3-й декад выращивания гусята, которым скармливали МФИ, превышали по массе своих сверстников из контрольной группы на 15,3; 34,4 и 18% соответственно, а в конце выращивания они весили в среднем на 605 г, или на 12,4%, больше, нежели контрольная птица.
Среди причин положительного действия на рост и развитие гусей кратковременного применения МФИ можно отметить несколько, но главной, по нашему мнению, является своевременная инокуляция гусят полным комплексом отселекционированной микрофлоры желудочно-кишечного тракта взрослых гусей. Это приводит к быстрой колонизации пищеварительного тракта облигатной микрофлорой и тем самым препятствует его заселению условно-патогенными и патогенными бактериями, поступающими в организм птицы из внешней среды с кормом и водой. Адгезируясь на слизистой кишечника, микрофлора способствует активации созревания иммунной системы и принимает участие в переваривании питательных веществ.
Таблица 15 - Сохранность и показатели роста и продуктивности гусей
Показатель | Группа | |
контрольная | опытная | |
Поголовье гусей в возрасте, дней: | ||
1 | 100 | 100 |
10 | 97 | 99 |
20 | 92 | 99 |
30 | 90 | 98 |
120 | 86 | 97 |
180 | 85 | 96 |
Живая масса гусей в возрасте (дней), г 1 | 102,42,3 | 101,92,5 |
10 | 232,74,7 | 268,35,1* |
20 | 589,415,6 | 792,117,8* |
30 | 1341,545,8 | 1583,451,2* |
180 | 4879,2102,5 | 5483,7104,8* |
Среднесуточный прирост живой массы гусей за 6-месячный период выращивания, г | 26,5 | 29,9 |
Выход перо-пухового сырья с одной головы, г | 41,11,3 | 44,151,6 |
Валовой сбор перо-пухового сырья по всему поголовью, кг | 3,533 | 4,283 |
В этом ей активно помогают содержащиеся в МФИ пищеварительные ферменты, как микробного происхождения, так и синтезированные собственными железами гусаков, а образованные в результате переваривания корма в кишечнике взрослой птицы метаболиты (содержащиеся в добавке) легко усваиваются организмом молодняка и тем самым облегчают адаптацию птицы к новым условиям обитания после вылупления.
Экспериментальные данные, полученные при анализе крови, свидетельствуют, что добавка МФИ в первые три дня после вылупления способствовала активизации обменных процессов в организме гусей. Так, в крови гусят опытной группы в течение двух месяцев сохранялась повышенная концентрация гемоглобина, общего белка, кальция и фосфора (P<0,05), достоверно возрастала бактерицидная активность сыворотки крови, а также увеличивалась лизоцимная активность и содержание бета-лизина (табл. 16).
Таким образом, полученные данные позволяют констатировать, что высокая сохранность и стимуляция роста и продуктивности птицы обеспечивались при даче МФИ за счет активации иммунной системы, в частности ее гуморального звена, и повышения уровня обменных процессов в организме гусей.
Таблица 16 - Морфологические и физиолого-биохимические параметры крови гусей
Показатель | Группа и возраст (дней) гусей | |||
контрольная | опытная | |||
30 | 60 | 30 | 60 | |
Эритроциты, 1012/л | 2,650,112 | 2,680,145 | 2,880,143 | 2,790,152 |
ейкоциты, 109/л | 24,390,174 | 25,170,193 | 24,450,182 | 25,230,225 |
Гемоглобин, г/л | 89,41,68 | 106,21,17 | 101,31,42* | 114,11,28* |
Общий белок, г/л | 53,22,55 | 57,32,34 | 67,42,78* | 70,22,53* |
Кальций, ммоль/л | 3,450,034 | 2,580,077 | 3,630,035* | 3,310,085* |
Фосфор, ммоль/л | 1,950,034 | 2,040,083 | 2,090,031* | 2,450,092* |
БАСК, % | 65,910,90 | 68,790,75 | 69,980,93* | 72,080,79* |
изоцим, мкг/мл | 14,120,64 | 10,970,59 | 17,950,78* | 12,630,65 |
-лизин, % | 19,790,58 | 10,090,79 | 20,150,42 | 12,170,78 |
3.11 Результаты производственных испытаний
Производственные испытания проведены в ОАО Спутник Соль-Илецкого района Оренбургской области, а также на базе ЗАО Птицефабрика Оренбургская и СПК Птицефабрика Гайская. Все три препарата повышали сохранность птицы. Увеличивались средний и валовой выход перопухового сырья при проведении прижизненной ощипки. Так, при использовании микроцикола сохранность возрастает на 2,92 %, валовой выход перопухового сырья на 5,65 %, живая масса одной головы при убое - на 4,86 %, при этом возрастает количество протеина в мясе на 1,81 %; под воздействием лактомикроцикола увеличивается сохранность птицы на 4,0 %, валовой выход перопухового сырья на 12,59 %, живая масса одной головы при убое - на 7,73 %, при этом увеличивается содержание протеина в мясе на 5,03 % и снижается количество жира и холестерола на 2,58 и 25,98 % соответственно; при использовании лактоамиловорина живая масса одной головы при убое возрастает на 12,53 %, сохранность увеличивается в среднем на 4,2 %, валовой выход перопухового сырья - на 7,09 %, при этом количество протеина в мясе возрастает на 5,72 %, однако снижается количество холестерола и жира на 49,59 и 3,0 %, что повышает диетическую ценность мяса.
Наилучшие результаты получены в экспериментах с лактоамиловорином, что вполне согласуется с результатами физиолого-биохимических исследований.
Выводы
1. В физиологических и производственных опытах изучено влияние пробиотиков лактомикроцикола, лактоамиловорина и микроцикола на здоровье, обмен веществ и продуктивность гусят итальянской белой породы. Установлены оптимальные дозы пробиотических препаратов, обеспечивающие стимуляцию неспецифической резистентности молодняка, активацию обменных процессов, улучшение использования питательных веществ, повышение продуктивности и качества продукции. Выявлены особенности действия каждого из изученных пробиотиков.
2. Включение в комбикорм для гусят в первый месяц их жизни лактоамиловорина в дозе 7 г/100 кг и выпаивание в первые 3 дня его с водой увеличивает потребление корма, повышает переваримость и усвоение протеина, клетчатки, БЭВ и минеральных веществ, тогда как усвоение липидов снижается. В крови повышается уровень гемоглобина, величины гематокрита, но отмечается снижение числа лейкоцитов на 2,3Ц5,4 %. В сыворотке крови возрастают концентрации общего белка за счет альбуминов и -глобулинов, кальция, фосфора, цинка и меди, а содержание железа уменьшается на 4,6Ц18,2 %. Активность церулоплазмина, содержание глюкозы в сыворотке крови и кислотная ёмкость крови увеличиваются, тогда как уровни общих липидов и холестерола снижаются на 12,6Ц32,7 %. На этом фоне бактерицидная активность сыворотки крови возрастает на 2,2Ц12,5 %, содержание лизоцима - на 13,5Ц35,2 % и активность бета-лизина - на 8,3Ц34,9 %.
Принципиально важным является и тот факт, что при исключении пробиотика из рациона гусей его стимулирующее действие на подавляющее большинство физиолого-биохимических показателей сохраняется до 6-месячного возраста, что может свидетельствовать о приживлении и функционировании штамма L. amylovorus БТ - 24/88, используемого для приготовления лактоамиловорина, в пищеварительном тракте птицы.
3. Применение лактомикроцикола оказывает на организм гусей аналогичное лактоамиловорину биологическое действие. Потребление корма увеличивается на 3,6 %, усвоение большинства питательных веществ корма возрастает, а использование липидов снижается в среднем на 21 %. В крови повышается количество гемоглобина, эритроцитов и величина гематокрита, но снижается количество лейкоцитов на 1,4Ц2,4 %. Сыворотка крови содержит больше общего белка за счет альбуминов и -глобулинов, а также кальция, фосфора, цинка и меди, тогда как количество железа снижается на 1,5Ц3,7 %. Активность церулоплазмина, кислотная ёмкость и количество глюкозы увеличиваются, а концентрации общих липидов и холестерола снижаются на 8,4Ц28,0 %. При этом увеличивается БАСК на 5,2Ц10,2 %, количество лизоцима - на 12,3Ц16,6 % и активность бета-лизина - на 9,2Ц13,8 %.
4. Скармливание микроцикола, как и пробиотиков с лактобациллой, оказывает существенное влияние на обмен веществ в организме гусей, но имеются некоторые особенности. Переваримость и использование питательных веществ корма несколько снижаются, в крови повышается содержание железа, но снижается на 3,4Ц3,9 % концентрация меди. На этом фоне возрастают активность церулоплазмина, кислотная ёмкость крови и уровень глюкозы, тогда как содержание общих липидов и холестерола не изменяется. Применение микроцикола, как и других пробиотиков, стимулировало неспецифическую резистентность гусей (р0,05).
5. Производственные испытания показали, что применение пробиотиков при выращивании гусей существенно повышает их продуктивность. При включении в комбикорм лактоамиловорина, лактомикроцикола и микроцикола сохранность возрастает на 4,2; 4 и 2,9 %, живая масса одной головы при убое - на 12,5; 7,7 и 4,9 %, а валовой выход перопухового сырья - на 7,1; 12,6 и 5,7 % соответственно. В мясе гусей, получавших лактоамиловорин и лактомикроцикол, снижается количество жира и холестерола на 3 и 2,6 %; 49,6 и 26 %, а содержание протеина возрастает на 5,7 и 5 % соответственно, что повышает его диетическую ценность.
6. Установлено, что применение пробиотиков оказывает модулирующее действие на антиоксидантную систему организма гусей. Все изученные пробиотические препараты стимулируют активность супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы и каталазы. При этом общая антиоксидантная активность плазмы крови увеличивается, а концентрация малонового диальдегида снижается. Наиболее существенные изменения в антиоксидантном статусе организма гусей отмечаются при использовании лактоамиловорина.
7. Биологическое действие пробиотических препаратов на гусынь-несушек сходно с таковым на организм гусят, но интенсивность данного воздействия выражена слабее. Тем не менее, применение микроцикола оказывает положительное влияние на репродуктивные функции гусынь и инкубационные качества яиц. Сохранность птиц возрастает на 0,7 %, яйценоскость на среднюю несушку на 2,6 %, а количество некондиционного яйца уменьшается на 0,5 %. Вывод и выводимость молодняка повышаются на 1,6 и 0,7 % соответственно, а его сохранность - на 0,5 %.
8. Показано, что обработка гусиных яиц пробиотиками перед закладкой на инкубацию и при переносе в выводной шкаф положительно влияет на их инкубационные качества и последующую продуктивность вылупившихся гусят. При этом максимальную эффективность проявляет лактомикроцикол, повышая вывод и выводимость молодняка на 7,0 и 8,9 % соответственно и живую массу гусят в 50-дневном возрасте на 11,5 %.
9. Установлено, что эффективным приемом при выращивании гусей является их инокуляция в первые три дня жизни микробно-ферментным инокулятом от здоровой взрослой птицы. Скармливание инокулята повышает сохранность молодняка на 11 %, стимулирует неспецифическую резистентность, активирует синтез гемоглобина, общего белка и обмен макроэлементов в крови, на 12,4 % увеличивает живую массу гусей в 6-месячном возрасте и валовой выход перопухового сырья на 21,2 %.
10. Подтвержден ранее установленный факт иммуномодулирующего действия инактивированных лактобактерий на иммунную систему. Использование убитого нагреванием штамма L. amylovorus БТ-24/88, входящего в пробиотики лактоамиловорин и лактомикроцикол, сопровождалось стимуляцией неспецифической резистентности гусят как в период месячного применения препарата, так и в течение месяца после его отмены, но в последующем наблюдавшаяся разница в показателях гуморального иммунитета нивелировалась. Сохранность гусят с 86 % в контроле повышалась до 91 % в группе, получавшей неактивный лактоамиловорин.
Практические предложения
- Для стимуляции репродуктивных качеств гусынь-несушек и повышения инкубационных качеств полученных яиц целесообразно скармливать им в течение всего продуктивного периода микроцикол в дозе 10 г/100 кг комбикорма. Это позволяет повысить сохранность гусынь, их яйценоскость, выход инкубационного яйца, а также увеличить вывод и выводимость молодняка гусей.
- С целью повышения вывода и выводимости гусят предлагается перед закладкой в инкубатор погружать инкубационные яйца на 1 минуту в водный раствор лактомикроцикола с концентрацией 11 г/л, а перед переносом яиц в выводной шкаф процедуру повторять. Это позволяет повысить эффективность инкубирования гусиных яиц, увеличить сохранность и живую массу молодняка гусей.
- С целью повышения продуктивности и качества продукции предлагается использовать лактоамиловорин в дозе 7 г/ 100 кг комбикорма в течение первого месяца жизни и в первые три дня после вылупления дополнительно вводить в питьевую воду 0,7 г пробиотика в расчете на 10 л. Это обеспечивает лучшую сохранность молодняка, повышает скорость роста гусят и улучшает диетические качества мяса.
Список опубликованных работ
Монографии, рекомендации, учебно-методические пособия
- Ройтер, Я.С. Научные и практические аспекты разведения гусей: монография/ Я.С. Ройтер, А.Ф. Лукьянов, В.В. Герасименко. - М.: Издательство Весь Сергиев Посад, 2004, - 204 с.: ил. - ISB № 5-93585-042-7.
- Родионова, Г.Б. Методы физиолого-биохимических исследований крови: монография/ Г.Б. Родионова, В.В. Герасименко. - Оренбург: Издательский центр ГНУ ВНИИМС, РАСХН, 2005. - 148 с.
- Никулин, В.Н. Биологические основы применения пробиотических препаратов в сельском хозяйстве: монография/ В.Н. Никулин, Б.В. Тараканов, В.В. Герасименко. - Оренбург: Издательский центр ОГАУ, 2007. - 111 с.: ил. - ISB № 978-5-88838-427-5.
- укьянов, А.Ф. Рекомендации по кормлению и использованию пробиотических препаратов при выращивании гусей: методические рекомендации, рассмотрены и одобрены администрацией Оренбургской области департаментом аПК / А.Ф. Лукьянов, В.В. Герасименко. - Оренбург: Изд-во ОГАУ, 2004. - 40 с.: ил.
- Герасименко, В.В. Использование пробиотика лактоамиловорина в животноводстве и ветеринарии: методические рекомендации, одобрены и рекомендованы к изданию ученым советом ВНИИФБиП сельскохозяйственных животных и на заседании секции физиологии и биохимии Россельхозакадемии / ГНУ ВНИИФБиП с.-х. животных; разр. В.В. Герасименко и др.; под общей редакцией засл. деятеля науки РФ, д.б.н., профессора Б.В. Тараканова. - Боровск: Изд-во ГНУ ВНИИФБиП с.-х. животных, 2007. - 24 с.
- Герасименко, В.В. Основы аналитической химии: учебное пособие, допущено МСХ РФ для студентов выс. уч. завед. / В.В. Герасименко, Е.В. Яковлева. - Оренбург: Издательский центр ОГАУ, 2005. - 204 с.: ил. - ISB № 5-88838-254-Х.
- Герасименко, В.В. Биохимия мяса и молока: практическое руководство: учебное пособие, допущено МСХ РФ для студентов выс. уч. завед./ В.В. Герасименко. - Оренбург: Издательский центр ОГАУ, 2005. - 128 с.: ил. - ISB № 5-88838-268-Х.
- Герасименко, В.В. Тесты по химии: программный продукт/ В.В. Герасименко. - Оренбург: ОГАУ, 2003, 786 кбайт.
Статьи в периодических научных изданиях, рекомендуемых для публикаций основных результатов диссертации на соискание учёной степени доктора наук, патентные документы
- Тараканов, Б.В. Обмен веществ и продуктивность гусей при добавлении в рацион пробиотика лактоамиловорин/ Б.В. Тараканов, В.В. Герасименко, В.Н. Никулин // Сельскохозяйственная биология. - 2004. - №4. - С. 52Ц58.
- Тараканов, Б.В. Использование пробиотика при откорме гусят на мясо/ Б.В. Тараканов, В.Н. Никулин, В.В. Герасименко, А.Ф. Лукьянов // Птицеводство. - 2004. - №5. - С. 24Ц25.
- Герасименко, В.В. Морфокинетическое действие микрофлоры желудочно-кишечного тракта на организм гусей/ В.В. Герасименко // Вестник Оренбургского государственного университета. - 2005. - №2. - С. 132Ц136.
- Тараканов, Б.В. Неспецифическая резистентность и продуктивность гусей при использовании лактоамиловорина/ Б.В. Тараканов, В.Н. Никулин, В.В. Герасименко // Ветеринария. - 2005. - № 2. - С. 55Ц58.
- Герасименко, В.В. Воздействие лактобацилл на обмен кальция в организме/ В.В. Герасименко // Вестник Оренбургского государственного университета. - 2005. - № 2. (Биоэлементология). - С. 21Ц22.
- Герасименко, В.В. Характеристика возрастных изменений содержания цинка в сыворотке крови гусей при кратковременном использовании лактомикроцикола/ В.В. Герасименко // Вестник Оренбургского государственного университета. - 2006. - № 12(62). (Биоэлементология). - С. 62Ц64.
- Патент 2270580 Российская Федерация, МПК А23К 1/165, А61К 38/43. Способ снижения содержания свинца в теле кур / Герасименко В.В. [и др.]; заявитель и патентообладатель Госуд. образ. учрежден. высш. проф. образ. Оренбургский государственный университет. - № 2004110916/13; заявл. 09.04.04; опубл. 27.02.06, Бюл. № 6. - 4 с.: ил.
- Никулин, В.Н. Влияние пробиотического препарата микроцикола на некоторые показатели минерального обмена кур-несушек/ В.Н. Никулин, В.В. Герасименко, О.В. Герасимова // Вестник Оренбургского государственного университета. - 2006. - № 12(62). (Биоэлементология). - С. 172Ц174.
- Никулин, В.Н. Метаболизм фосфора в организме гусей под воздействием микроцикола/ В.Н. Никулин, В.В. Герасименко, Б.В. Тараканов // Вестник Оренбургского государственного университета. - 2006. - № 12(62). (Биоэлементология). - С. 175Ц176.
- Ширяева, О.Ю. Влияние пробиотика и препаратов йода на минеральный обмен птицы/ О.Ю. Ширяева, В.Н. Никулин, В.В. Герасименко // Вестник Оренбургского государственного университета. - 2006. - № 12(62). (Биоэлементология). - С. 296Ц298.
- Герасименко, В.В. Воздействие E.coli 5/98 на метаболизм витамина А в организме птицы/ В.В. Герасименко // Вестник Оренбургского государственного университета. - 2006. - № 13(63). - С. 125.
- Герасимова, О.В. Влияние пробиотика микроцикола на минеральный статус птицы/ О.В. Герасимова, П.А. Кабешева, Е.С. Глухова, В.В. Герасименко // Вестник Оренбургского государственного университета. - 2006. - № 13(63). - С. 126Ц127.
- Патент 2271173 Российская Федерация, МПК А61D 7/00. Способ снижения уровня холестерина в организме/ Герасименко В.В. [и др.]; заявитель и патентообладатель Госуд. образ. учрежден. высш. проф. образ. Оренбургский государственный университет. № 2004126075/14; заявл. 25.08.2004; опубл. 10.03.2006, Бюл. № 7. - 5 с.: ил.
- Ширяева, О.Ю. Влияние комплексного применения препаратов иода и лактоамиловорина на специфическую защиту организма/ О.Ю. Ширяева, К.А. Кряжев, В.В. Герасименко // Вестник Оренбургского государственного университета. - 2006. - № 13(63). - С. 195Ц196.
- Тараканов, Б.В. Лактомикроцикол при выращивании гусей/ Б.В. Тараканов, В.В. Герасименко // Птицеводство. - 2007. - № 8. - С. 28.
- Никулин, В.Н Экологические аспекты влияния лактобактерий на переваримость питательных веществ корма сельскохозяйственной птицы при повышенном содержании йода в рационе/ В.Н. Никулин, В.В. Герасименко, Т.В. Синюкова // Вестник Оренбургского государственного университета. Ц2007. - № 75. - С. 244Ц245.
- Тараканов, Б.В. Эффективность выращивания гусей при их инокуляции кишечной микрофлорой в раннем возрасте/ Б.В. Тараканов, Я.С. Ройтер, В.Н. Никулин, В.В. Герасименко // Ветеринарная патология. - 2007. - № 3(22). - С. 145Ц149.
- Патент 2292733 Российская Федерация, МПК А64К 1/00. Способ скармливания ферментного препарата курам-несушкам/ Герасименко В.В. [и др.]; заявитель и патентообладатель Госуд. образ. учрежден. высш. проф. образ. Оренбургский государственный университет. № 2004136100/13; заявл. 9.12.2004; опубл. 10.02.2007, Бюл. № 4. - 4 с.: ил.
- Тараканов, Б. Влияние пробиотиков на выводимость гусиных яиц, последующую сохранность и продуктивность молодняка/ Б. Тараканов, В. Никулин, В. Герасименко, А. Лукьянов // Птицеводство. - 2008. - № 2. - С. 17Ц18.
- Тараканов, Б.В. Использование микроцикола при выращивании гусей/ Б.В. Тараканов, В.В. Герасименко // Зоотехния. - 2008. - № 4. - С. 18Ц19.
Статьи в других периодических изданиях
- Тараканов, Б.В. О целесообразности применения лактоамиловорина при выращивании гусей/ Б.В. Тараканов, В.Н. Никулин, А.Ф. Лукьянов, В.В. Герасименко // Био. - 2002. - №10 (25). - С. 17Ц18.
- Герасименко, В.В. Лактоамиловорин - высокоэффективное средство регуляции обменных процессов и повышения продуктивности гусей/ В.В. Герасименко, В.Н. Никулин, Б.В. Тараканов // Био. - 2004. - №5(44). - С. 6Ц8.
- Никулин, В.Н. Пробиотики и содержание железа в сыворотке крови гусей/ В.Н. Никулин, А.Ф. Лукьянов, В.В. Герасименко // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. - 2004. - №3. - С. 153Ц154.
- Герасименко, В.В. Лактоамиловорин - высокоэффективное средство регуляции обменных процессов и повышения продуктивности гусей/ В.В. Герасименко, В.Н. Никулин, Б.В. Тараканов // Био. - 2004. - №6(45). - С. 13Ц14.
- Герасименко, В.В. Холестерин макроорганизма и пробиотики/ В.В. Герасименко // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. - 2004. - №3. - С. 154Ц156.
- Герасименко, В.В. Возрастные изменения показателей естественной резистентности гусей при использовании пробиотиков/ В.В. Герасименко // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. - 2005. - № 2(6). - С. 37Ц39.
- Герасименко, В.В. Возрастная динамика содержания общего белка и белковых фракций в сыворотке крови гусей/ В.В. Герасименко // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. Ц 2005. - № 4(8). - С. 101Ц103.
- Герасименко, В.В. Опыт использования лактомикроцикола при промышленном выращивании гусей на мясо/ В.В. Герасименко // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. - 2006. - № 1(9). - С. 94Ц96.
- Тараканов, Б.В. Резистентность и продуктивность гусей при скармливании лактоамиловорина/ Б.В. Тараканов, В.Н. Никулин, В.В. Герасименко // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2006. - № 10. - С. 61Ц65.
- Герасименко, В.В. Влияние микроцикола на факторы персистенции энтеробактерий/ В.В. Герасименко, В.Н. Никулин, А.Г. Гудков, О.Л. Карташова, Б.В. Тараканов // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. - 2006. - № 1(9). - С. 98Ц100.
- Герасименко, В.В. Воздействие штамма Escherichia coli S 5/98 на метаболизм железа в организме/ В.В. Герасименко // Микроэлементы в медицине. - 2007. - Т. 8. - Вып. 1. М. - С. 61Ц62.
- Герасименко, В.В. Применение лактоамиловорина и препаратов йода для повышения неспецифической резистентности организма кур-несушек / В.В. Герасименко, В.Н. Никулин, О.Ю. Ширяева // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. - 2007. - № 1(13). - С. 137Ц140.
Статьи в материалах конференций и сборниках научных трудов
- Никулин, В.Н. Биологические предпосылки применения пробиотика лактоамиловорина при выращивании гусей/ В.Н. Никулин, Б.В. Тараканов, А.Ф. Лукьянов, В.В. Герасименко // Проблемы зоотехнии: сб. науч. тр. ф-та ТП и ППЖ. - Оренбург: Изд. центр ОГАУ, 2001. - Вып. IV. - С. 217Ц221.
- Никулин, В.Н. Влияние лактоамиловорина на состояние метаболизма и рост гусей/ В.Н. Никулин, А.Ф. Лукьянов, В.В. Герасименко, Б.В. Тараканов // Пути увеличения производства и повышения качества животноводческой продукции: мат-лы межрегион. науч.-пр. конф. ученых и специалистов. - Оренбург: Изд-во ВНИИМС, 2001. - С. 87Ц88.
- Никулин, В.Н. Влияние лактоамиловорина на мясную продуктивность и химический состав мяса гусей/ В.Н. Никулин, А.Ф. Лукьянов, В.В. Герасименко, Б.В. Тараканов // Вестник ветеринарии: научные труды академии ветеринарной медицины. - Оренбург: Изд. центр ОГАУ, 2002. - Вып. V. - С.163Ц166.
- Никулин, В.Н. Влияние лактоамиловорина на зоотехнические показатели при выращивании гусей/ В.Н. Никулин, Б.В. Тараканов, А.Ф. Лукьянов, В.В. Герасименко // Пути увеличения производства и повышения качества животноводческой продукции: мат-лы межрегион. науч.-пр. конф. ученых и специалистов. - Оренбург: Изд-во ВНИИМС, 2002. - С.102Ц103.
- Тараканов, Б.В. Влияние лактоамиловорина на естественную резистентность гусей/ Б.В. Тараканов, В.Н. Никулин, А.Ф. Лукьянов, В.В. Герасименко // Вестник ветеринарии: научные труды академии ветеринарной медицины. - Оренбург: Изд. центр ОГАУ, 2002. - Вып. V. - С. 220Ц224.
- Герасименко, В.В. Влияние лактоамиловорина на белковый спектр сыворотки крови/ В.В. Герасименко // Пути увеличения производства и повышения качества животноводческой продукции: мат-лы межрегион. науч.-пр. конф. ученых и специалистов. - Оренбург: Изд-во ВНИИМС, 2002. - С.29Ц30.
- Герасименко, В.В. Некоторые аспекты влияния лактоамиловорина на физиолого-биохимические показатели крови гусей/ В.В. Герасименко // Вестник ветеринарии: научные труды академии ветеринарной медицины. - Оренбург: Изд. центр ОГАУ, 2002. - Вып. V. - С.47Ц53.
- Герасименко, В.В. Химический состав мяса и выход перо-пухового сырья при использовании лактоамиловорина в рационах гусей/ В.В. Герасименко, И.В. Герасименко // Пути увеличения производства и повышения качества животноводческой продукции: мат-лы межрегион. науч.-пр. конф. ученых и специалистов. - Оренбург: Изд-во ВНИИМС, 2002. - С.30Ц31.
- Тараканов, Б.В. Применение лактоамиловорина при выращивании гусей/ Б.В. Тараканов, В.Н. Никулин, А.Ф. Лукьянов, В.В. Герасименко // Научно-производственный опыт в птицеводстве: экспресс-информация. Ц Сергиев Посад: Изд-во ВНИТИП, 2003. - №1. - С.39Ц42.
- Герасименко, В.В. Влияние пробиотиков на обмен кальция и фосфора у гусей/ В.В. Герасименко, А.А. Шубина // Здоровьесберегающие технологии в образовании: научные труды I Всероссийской научно-практической конференции. - Оренбург: РИК ГОУ ОГУ, 2003. - С. 193Ц196.
- Никулин, В.Н. Возрастная динамика содержания меди в сыворотке крови гусей и влияние на неё пробиотиков/ В.Н. Никулин, А.Ф. Лукьянов, В.В. Герасименко, А.А. Шубина // Биоэлементы: научные труды I Международной научно-практической конференции. Ц Оренбург: РИК ГОУ ОГУ, 2004. - С. 178Ц181.
- Герасименко, В.В. Влияние пробиотиков на содержание цинка в организме гусей/ В.В. Герасименко // Биоэлементы: научные труды I Международной научно-практической конференции. Ц Оренбург: РИК ГОУ ОГУ, 2004. - С. 151Ц154.
- Герасименко, В.В. Переваримость питательных веществ корма у гусей при использовании пробиотика/ В.В. Герасименко // Материалы региональной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов Оренбургской области: сб. ст. Ч. 1. - Оренбург: ИПК ГОУ ОГУ, 2005. - С. 232Ц234.
- Герасименко, В.В. Возрастная динамика активности церулоплазмина крови гусей и влияние на нее пробиотиков/ В.В. Герасименко // Современные проблемы ветеринарной диетологии и нутрициологии: материалы III Международного симпозиума, посвященного 60-летию со дня победы в Великой Отечественной войне и 5-летию образования ветеринарной ассоциации диетологов и нутрициологов, 11-13 мая: сб. ст. - СПб.: Изд-во СПбГАВМ, 2005. - С. 71Ц72.
- Никулин, В.Н. Гематологические показатели гусей при использовании пробиотиков/ В.Н. Никулин, А.Ф. Лукьянов, В.В. Герасименко, Б.В. Тараканов // Научное наследие П.Н.Кулешова и современное развитие зоотехнической науки и практики животноводства: сборник материалов Международной научно-практической конференции, посвященной 150-летию со дня рождения профессора П.Н. Кулешова, 26-29 октября 2004 г.: сб. ст. - М.: Изд-во РГАУ-МСХА, 2006. - С. 443-446.
- Герасименко, В.В. Особенности воздействия лактомикроцикола на обмен меди в организме гусят/ В.В. Герасименко // Биоэлементы: материалы II Международной научно-практической конференции: сб. ст. - Оренбург: ИПК ГОУ ОГУ, 2006. - С. 121Ц123.
Авторефераты по всем темам >>
Авторефераты по биологии