Авторефераты по всем темам >>
Авторефераты по биологии
На правах рукописи
Габунщина Ольга Даниловна
Морфологические и биохимические показатели крови
верблюдов калмыцкой породы разного пола и возраста
в связи с сезонами года
03.03.01- физиология
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
Боровск -2012
Диссертационная работа выполнена на кафедре общей биологии и физиологии ФГБОУ ВПО Калмыцкий государственный университет и в лаборатории энергетического питания ВНИИ физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных Россельхозакадемии.
Научный руководитель: доктор биологических наук
Решетов Вадим Борисович
Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор
Грушкин Александр Георгиевич
доктор сельскохозяйственных наук
Зулаев Михаил Санджиевич
Ведущая организация: ГНУ Всероссийский научно-исследовательский
институт животноводства Россельхозакадемии
Защита диссертации состоится л26 декабря 2012 года в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 006.030.01 в ГНУ ВНИИ физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных Россельхозакадемии.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ ВНИИ физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных Россельхозакадемии.
Адрес института: 249013, Калужская область, г. Боровск, пос. Институт, ВНИИФБиП с-х. животных. Телефон 8(495)996-34-15, факс: 8(48438) 4-20-80.
Автореферат разослан л___________2012 года и размещён на официальных сайтах: Министерства образования и науки РФ и института www.bifip.ru.
Ученый секретарь
диссертационного совета,
кандидат биологических наук В.П. Лазаренко
1.Общая характеристика работы
Актуальность темы
Состав крови животных отличается как относительным постоянством, обеспечивая сохранение индивидуальных и породных особенностей, так и значительной изменчивостью за счет непрерывного взаимодействия с внешней средой. Использование данных о возрастных и сезонных особенностях морфологических и биохимических показателей крови, а также оценка неспецифической резистентности верблюдов дают возможность добиться хороших результатов по сохранности поголовья этих животных, предотвращению заболеваний и получению от них качественной продукции.
Научно-исследовательская работа по изучению биологии верблюдов в нашей стране ведет свое начало с организации в 1922 году племенного хозяйства в Урде, где под руководством М. Мусина изучали пищеварение у двугорбых верблюдов (бактрианов). В период 1930 - 1970 гг. была проведена работа по вопросам разведения, гибридизации и изучению продуктивности верблюдов (В.В. Благовещенский, 1959; А.Г. Бестужев, 1951; Ю.Н. Барминцев, 1939; 1973). Коллективом Института коневодства и Узбекской комплексной зональной станцией (Ю.Н. Барминцев, 1938; И.Н. Чашкин 1938; 1938а; П.Д. Лысагоров, 1938) было проведено зоотехническое обследование районов разведения верблюдов, полученный экспедиционный материал лег в основу породной и видовой классификации верблюдов.
Исследования бактрианов калмыцкой породы на территориях Сталинградской области, Калмыцкой АССР и Астраханской области было осуществлено С.М. Терентьевым (1950) и И.И. Лакозой (1938). Полученные результаты были опубликованы в Государственной племенной книге верблюдов (1950). В период с 1963 по 1970 гг. под руководством А.А. Ахмедиева (1964; 1966), А.В Баймуканова (1969), И.К. Джумагулова (1950) шло активное изучение продуктивности бактрианов и гибридов разных поколений. В результате были даны экстерьерные характеристики этих животных, изучен химический состав мяса и молока и способность верблюдов к нагулу.
Масштабное определение показателей крови бактрианов до 1970 года было проведено М.А. Малышевым (1928), П.В. Ивановым (1934), А.А. Фроловым (1938), Х.Ф. Кушниром с соавт. (1938), Н.Р. Семушкиным (1941), П.А. Карасевым с соавт. (1955), Д.А. Ковинько (1958), С. Доржпурвом (1969) и Б. Лувсаном (1969). Однако обобщения материала по морфологическим и биохимическим показателям крови не проводилось в связи с большой амплитудой полученных данных. В последние годы ведутся исследования по вопросам экстерьера верблюдов, их продуктивности, технологиям кормления и содержания, вопросам механизации, стрижки, доения и переработки продукции. При этом получены разрозненные данные о содержании в крови у бактрианов общего белка (И.И. Сиденко, 1999; Ц.С. Санжаев, 2004; Р.Д. Сейдахметова с соавт. 2007; Н.В. Захаркина, 2009; Л.А. Селимсултанова, 2010) и глюкозы (И.И. Сиденко, 1999, Н.В. Захаркина, 2009). Многие особенности физиологии и биохимии верблюдов до настоящего времени остаются слабо изученными.
Отсутствие достаточной информации, характеризующей морфологические и биохимические показатели крови и неспецифическую резистентность бактрианов в зависимости от пола, возраста, и сезона года, не позволяют проводить полноценный мониторинг состояния животных, оценивать физиологические резервы, прогнозировать нарушения обмена веществ и обеспечивать их профилактику, а также проводить объективную оценку технологических нововведений.
Цель и задачи исследования Целью исследований являлось изучение физиолого-биохимического статуса верблюдов калмыцкой породы в постнатальном онтогенезе в связи с полом, возрастом и воздействии сезонных факторов. Для этого были поставлены следующие задачи:
- изучить зависимость морфологических и биохимических показателей крови верблюдов от пола, возраста и сезонов года;
- изучить физиолого-биохимический статус верблюдов в связи с физиологическим состоянием (беременность, лактация);
- оценить состояние неспецифической резистентности верблюдов;
- определить с помощью структурного анализа сыворотки крови состояние компенсаторных механизмов организма верблюдов.
Научная новизна и теоретическая значимость
В серии исследований, проведенных на территории Астраханской области, определен в постнатальном онтогенезе физиолого-биохимический статус бактрианов калмыцкой породы разного пола и возраста при различном физиологическом состоянии в разные сезоны года. Определены параметры и изучена зависимость морфологических и биохимических показателей крови верблюдов от пола, возраста и сезонов года. Впервые была проведена оценка неспецифической резистентности верблюдов по морфологическим показателям крови. Показана эффективность использования метода клиновидной дегидратации для экспресс-мониторинга физиологического состояния племенных верблюдов.
Практическая значимость работы
Результаты исследований могут служить дополнительной основой для оптимизации системы формирования групп при чистопородном разведении бактрианов калмыцкой породы. Полученные в экспериментах данные имеют прикладное значение для создания физиологических норм морфологических и биохимических показателей крови бактрианов аридной зоны юга России. Результаты исследований могут быть использованы в качестве справочного материала для зоотехнического и ветеринарного контроля состояния верблюдов калмыцкой породы.
Основные положения, выносимые на защиту:
- Морфологические и биохимические показатели крови верблюдов в постнатальном онтогенезе претерпевают адаптивные изменения, связанные с полом, возрастом, физиологическим состоянием животных и условиями среды.
- Уровень естественной неспецифической резистентности верблюдов зависит от пола, возраста и физиологического состояния животных и сезона года.
- Структурный анализ сыворотки крови методом клиновидной дегидратации позволяет осуществлять экспресс-мониторинг физиологического состояния племенных верблюдов калмыцкой породы.
Апробация работы
Материалы диссертационной работы доложены: на Международной научной конференции, посвященной 140-летию Российского государственного аграрного университета МСХА им К.А. Тимирязева, секция 9. Москва, 2005; на Научно- практической конференции, посвященной 30-летию биологического факультета КГУ, Элиста, 2006; III съезде физиологов СНГ. Украина, Ялта, 2011.
Публикации результатов исследования
По материалам диссертационной работы опубликованы 5 статей в изданиях, рекомендованных ВАК Министерства образования и науки РФ.
Структура и объем работы
Диссертация изложена на 120 страницах компьютерного текста и состоит из общей характеристики работы, обзора литературы, материалов и методов собственных исследований, их результатов и обсуждения, выводов, практических предложений. Содержит 17 рисунков и 14 таблиц. Список литературы включает в себя 180 источников, в том числе 22 работы на иностранных языках.
2. Собственные исследования
2.1. Материалы и методы исследований
Было проведено 4 научно-производственных опыта на бактрианах калмыцкой породы в СХП ПЗ Родина села Байбек Красноярского района Астраханской области.
Племенное стадо верблюдов состояло из 150 животных разного возраста и пола. Исследование выполнено во все сезоны года, в каждый сезон обследовано 40 животных. Формирование подопытных групп животных было осуществлено с учетом пола, возраста и идентичности физиологического состояния. В состав I группы (n=11) вошли самки 3-5- летнего возраста, имевшие высоту в холке от 1,75 до 2,1 м, живую массу от 250 до 500 кг. В состав II группы (n=8) вошли самки 11-17- летнего возраста, имевшие высоту в холке от 1,95 до 2,6 м, живую массу от 720 до 780 кг. Самки этой группы имели от 3 до 5 предшествующих беременностей. Зимой 2005 года самки II группы были беременны. В состав III группы (n=9) вошли верблюжата-самцы 8-месячного возраста, имевшие высоту в холке от 1,1 до 1,7 м, живую массу от 100 до 180 кг. IV группу (n=10) составили самцы 1-3 - летнего возраста, имевшие высоту в холке от 1,5 до 2,3 м, живую массу от 250 до 780 кг. СамецЦпроизводитель 13Цлетнего возраста отличался превосходными экстерьерными качествами - высота в холке этого животного равнялась 2,7 м, живая масса - 1000 кг.
В первом опыте, зимой, определяли морфологические и биохимические показатели крови, определяли уровень неспецифической резистентности молодых животных I и IV групп, беременных самок II группы и самцаЦпроизводителя (рис 1).
Во втором опыте, весной, изучали морфологические и биохимические показатели крови, определяли уровень неспецифической резистентности, а также проводили структурный анализ сыворотки крови методом клиновидной дегидратации у молодых животных I и IV групп, лактирующих самок II группы и самца - производителя.
В третьем и четвертом опытах, летом и осенью, изучаемые показатели определяли у самок I группы, лактирующих самок II группы, верблюжат III группы и самца - производителя.
Кровь для исследования брали из ярёмной вены в утренние часы у ненакормленных животных, находившихся в загоне. Количество эритроцитов и лейкоцитов в крови подсчитывали в камере Горяева; содержание гемоглобина определяли унифицированным гемиглобинцианидным методом (И.П. Кондрахин с соавт. 2004); СОЭ определяли микрометодом Панченкова, лейкоцитарную формулу - в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимза.
Уровень неспецифической резистентности (НРО) рассчитывали по данным лейкоцитарной формулы. Интегральный критерий оценки функционального состояния, указывающего на уровень НРО - индекс Бредекка (иБ) определяли по формуле: иБ = лимфоциты, %/ палочкоядерные нейтрофилы, % (С.Н. Удинцев с соавт. 2005). Индекс, отражающий соотношение клеток неспецифической и специфической защиты, свидетельствующий о напряжении неспецифического звена иммунитета - индекс соотношения нейтрофилов к лимфоцитам (ИСНЛ) рассчитывали по формуле В.М. Угрюмова (1974): ИСНЛ = нейтрофилы, %/ лимфоциты, %. Индекс, отражающий наличие стрессорной реакции адаптационного синдрома - лимфоцитарный индекс или суммарный показатель неспецифической реактивности (ЛИ; СПНР) определяли по формуле: СПНР = лимфоциты, %/ сегментоядерные нейтрофилы, % (Л.Х. Гаркави, Е.Б. Квакина, Т.С. Кузьменко, М.А. Уколова, 1979; 1982; 1990; 2006).
Для оценки состояния обмена веществ по рекомендуемым методикам лабораторных клинических исследований (И.П. Кондрахин с соавт. 2004) определяли в сыворотке крови: концентрацию общего белка в сыворотке крови биуретовым методом; концентрацию альбумина - унифицированным колориметрическим методом; фракция глобулина рассчитывалась путем вычитания альбумина от общего белка, белковый коэффициент рассчитывали делением концентрации альбумина на концентрацию глобулина, его величину оценивали, учитывая материалы исследований на верблюдах Р.Д. Сейдахметовой с соавт. (2002); определение концентрации глюкозы, триглицеридов и общего холестерина в сыворотке крови производили энзиматическим колориметрическим методом.
Рис. 1. Схема исследований
Для мониторинга физиологического состояния верблюдов использовали метод клиновидной дегидратации, разработанный В.Н.Шабалиным и С.Н. Шатохиной (1999; 2000; 2001; 2001а), основанный на изучении структур, образующихся в капле высушенной сыворотки крови. Формирование фации (сухой структурированной пленки), происходит за счет испарения жидкости с поверхности капли. Многокомпонентный химический состав биологических жидкостей обуславливает сложность данного процесса, протекающего по стадиям, в ходе которых формируются концентрационные волны твердой фазы, разделенной на две зоны - центральную и периферическую. В зависимости от изменений химического состава внутренней среды организма, самоорганизация биологической жидкости упорядочивается в виде структур, которые используются как маркеры общей реакции организма на внешние факторы, и дает возможность получать информацию о гомеостазе организма в целом.
Для проведения исследований этим методом сыворотку крови в объеме 0,02 мл наносили с помощью микродозатора Plastomed на расположенное строго горизонтально предметное стекло, покрытое тонким слоем лецитина (0,02%). Капля высушивалась при температуре 20-25С0 и относительной влажности 60-70% при полной неподвижности предметного стекла в течение 24 часов. Исследование системной организации дегидратированной капли сыворотки крови проводилось с помощью стереомикроскопа MZ-12 фирмы Leica и цветной телевизионной камеры Pixera. Для описания и оценки структур фаций использовали предложенные авторами метода приемы. В весенний сезон методом клиновидной дегидратации изучалась сыворотка крови 5 верблюдов, в летний сезон - 8 верблюдов, контрольное исследование данным способом было проведено в осенний сезон - 11 верблюдов.
Формирование выборок для статистического однофакторного анализа зависимости показателей от возраста делали следующим образом. В группу л1-5 лет вошли самцы IV группы (n=10) и самки I группы (n=11) в 4 сезона года (n=84), в группу л11-17- лет - самки II группы (n=8) и самец - производитель в 4 сезона года (n=36). Формирование групп по полу - с учетом пола верблюдов. В состав группы самки вошли самки I группы (n=11) и II группы (n=8) в 4 сезона (n=76), группу самцы составили самцы IV группы (n=10) зимой и весной и самец - производитель в 4 сезона (n=24). Группы для анализа зависимости от физиологического состояния составили беременные и лактирующие самки II группы (n=8) и небеременные самки I группы (n=11).
Для выявления статистически значимых различий использован однофакторный дисперсионный анализ и t-тест Стьюдента, при этом различия признавались достоверными при р<0,05 (Н.А. Плохинский, 1970; Г.Ф. Лакин, 1990).
2.2. Результаты собственных исследований и их обсуждение
2.2.1. Морфологические и биохимические показатели крови верблюдов
в зависимости от сезона года
Сравнительный анализ гематологических и биохимических показателей крови верблюдов показал существенные сезонные изменения некоторых показателей крови, что связано, по нашему мнению, с их зависимостью от периодической смены природно-климатических и хозяйственных факторов в течение года. Несколько более высокие показатели уровня гемоглобина и количества эритроцитов у верблюдов наблюдаются в летний сезон - от 87,4 до 128,8 г/л и 4,7 - 5,51012/л соответственно, ниже - зимой (от 78,5-125,0 г/л и 4,5- 5,41012/л) (табл. 1). Полученные данные согласуются с результатами исследований А.И. Израэля (1936), К.Ф. Авдеевой (1957) М.В. Кудряшова (1939), Е.В. Эйдригевича с соавт. (1966), описывающих аналогичные сезонные изменения у крупного рогатого скота, овец и лошадей.
Достоверные изменения в составе белой крови - количестве лейкоцитов и процентном соотношении сегментоядерных форм нейтрофилов, лимфоцитов и эозинофилов в течение года наблюдали у самок II группы и верблюжат III группы по сравнению с другими группами, что было обусловлено физиологическим состоянием этих животных (беременность и лактация) и возрастом животных. У соотношения базофилов, палочкоядерных нейтрофилов и моноцитов сезонные изменения незначительны и соответствуют значениям для верблюдов и вообще для млекопитающих. Процентное содержание палочкоядерных нейтрофилов у обследованных групп верблюдов составило от 5,7 до 9,0 %, базофилов - от 0,8 до 1,0 %, моноцитов - от 2,8- 4,0 %, что согласуется с данными других исследований по бактрианам (М.А. Малышев, 1928; Н.Р. Семушкин, 1949; С. Доржпурэв, 1969; Т.В. Лобанова с соавт. 2000; Н.И. Захаркина, 2009; Л.А. Селимсултанова, 2010).
Таблица 1
Морфологические показатели крови верблюдов в разные сезоны года
Показатели | Группы | Сезоны года | |||
зима | весна | ето | осень | ||
Гемоглобин, г/л | I (n=11) | 87,0 0,72 | 89,0 1,02З | 89,8 0,7З | 87,6 0,7 |
II (n=8) | 78,5 2,41,4 | 82,7 2,8З | 87,4 1,9З,В | 86,8 1,2З | |
III (n=9) | 91,0 0,7 | 89,4 0,9 | |||
IV (n=10) | 89,0 0,92 | 90,0 0,7З | |||
Самец Ц производитель | 125,0 | 127,5 | 128,8 | 125,0 | |
Эритроциты, 1012/л | I (n=11) | 4,5 0,072 | 4,6 0,04 2,З | 4,7 0,04 2,З,В | 4,5 0,062,Л |
II (n=8) | 5,1 0,061,4 | 5,1 0,041,3,З | 5,2 0,021,3,З,В | 5,2 0,021,3, | |
III (n=9) | 4,7 0,022 | 4,6 0,022 | |||
IV (n=10) | 4,5 0,032 | 4,6 0,022,З | |||
Самец Ц производитель | 5,4 | 5,4 | 5,5 | 5,3 | |
ейкоциты, 109/л | I (n=11) | 11,9 0,12 | 11,8 0,1 | 11,9 0,12 | 11,80,12,3, |
II (n=8) | 10,8 0,21,3 | 11,7 01З | 9,4 0,11,3,З,В | 9,8 0,11,3,З,В,Л | |
III (n=9) | 12,1 0,12 | 12,1 0,1 1,2 | |||
IV (n=10) | 11,9 0,12 | 11,9 0,1 | |||
Самец Ц производитель | 10,2 | 10,4 | 11,7 | 11,8 | |
Нейтрофилы палочкоядерные % | I (n=11) | 5,7 0,22,4 | 5,9 0,22,4 | 5,7 0,42,3 | 6,5 0,23,З |
II (n=8) | 7,8 0,31 | 7,5 0,31 | 8,1 0,21 | 7,5 0,5 | |
III (n=9) | 7,8 0,31 | 8,0 0,31 | |||
IV (n=10) | 7,6 0,31 | 7,7 0,31 | |||
Самец Ц производитель | 8 | 9 | 7 | 7 | |
Нейтрофилы сегментоядерные, % | I (n=11) | 32,4 0,52,4 | 32,6 0,44 | 32,6 0,72 | 31,6 0,72 |
II (n=8) | 40,8 0,51,4 | 32,9 0,54,З | 39,6 1,01,3,В | 36,0 1,11,З,В,Л | |
III (n=9) | 33,0 1,52 | 33,9 1,6 | |||
IV (n=10) | 28,1 1,01,2 | 28,3 0,9 1,2 | |||
Самец Ц производитель | 33 | 31 | 30 | 29 | |
имфоциты, % | I (n=11) | 53,8 0,52 | 53,2 0,32 | 53,4 0,72 | 54,1 0,42 |
II (n=8) | 43,6 0,61,3 | 52,3 0,31,З | 42,0 0,91,3,В | 47,1 0,61,3,З,В,Л | |
III (n=9) | 52,7 1,02 | 51,7 1,12 | |||
IV (n=10) | 53,6 0,72 | 53,4 0,7 | |||
Самец Ц производитель | 49 | 48 | 53 | 54 | |
Эозинофилы, % | I (n=11) | 3,8 0,23 | 3,8 0,23 | 3,8 0,32,3 | 3,7 0,22,3 |
II (n=8) | 3,4 0,23 | 3,4 0,33 | 6,4 0,6 1,3,З,В | 5,4 0,31,3,З,В | |
III (n=9) | 2,40,41,2 | 2,8 0,31,2 | |||
IV (n=10) | 6,20,41,2 | 6,40,11,2 | |||
Самец Ц производитель | 6 | 7 | 6 | 6 | |
Продолжение таблицы | |||||
Базофилы, % | I (n=11) | 0,8 0,1 | 0,9 0,1 | 0,9 0,1 | 0,9 0,1 |
II (n=8) | 0,9 0,1 | 0,8 0,2 | 0,8 0,2 | 0,8 0,2 | |
III (n=9) | 0,9 0,1 | 0,9 0,1 | |||
IV (n=10) | 0,8 0,1 | 0,8 0,1 | |||
Самец Ц производитель | 1 | 1 | 1 | 1 | |
Моноциты, % | I (n=11) | 3,50,2 | 3,5 0,2 | 3,5 0,2 | 3,3 0,2 |
II (n=8) | 3,5 0,2 | 3,30,3 | 3,1 0,2 | 3,3 0,2 | |
III (n=9) | 3,2 0,3 | 2,8 0,2 | |||
IV (n=10) | 3,4 0,2 | 3,4 0,2 | |||
Самец Ц производитель | 3 | 4 | 3 | 3 | |
СОЭ, мм/час | I (n=11) | 1,3 0,143 | 1,6 0,23 | 1,7 0,13 | 1,9 0,2 3,З |
II (n=8) | 1,03 | 1,3 0,23 | 1,5 0,2 3,З | 1,8 0,2 3,З,В | |
III (n=9) | 2,3 0,21,2 | 2,7 0,2 1,2 | |||
IV (n=10) | 2,7 0,21,2 | 2,9 0,11,2 | |||
Самец Ц производитель | 1,0 | 2,0 | 2,0 | 2,0 | |
Примечание: здесь и далее: 1- достоверная разница по сравнению с I группой; 2- достоверная разница по сравнению со II группой; 3 - достоверная разница с III группой; 4- достоверная разница с IV группой; З - достоверная разница с зимой, В - достоверная разница с весной, - достоверная разница с летом, р<0,05 по t критерию.
ейкоцитарная формула крови 1-3 летних самцов и 3-5- летних самок (I и IV группы) по сезонам года варьировала в узких пределах. Количество лейкоцитов у животных этих групп составило от 11,8 до 11,9109/л, палочкоядерных нейтрофилов - от 5,7 до 7,7 %, сегментоядерных нейтрофилов - от 28,1 до 32,6 %, лимфоцитов - от 53,2 до 54,1%, что входит в пределы значений приведенных для дромедаров и бактрианов (М.А. Малышев, 1928; Н.Р. Семушкин, 1949; Y. Hassan et al. 1968; С. Доржпуэрв, 1969; S.M. Eissa et al.1974; C. Chartier, 1986; S. Raghvendar at al. 2000; H.Y Hassan et al. 2000; M. El Boshy et al. 2009).
В отношении скорости оседания эритроцитов необходимо отметить, что за исключением самок старшего возраста (II группа) отличающихся от других групп по физиологическому состоянию, достоверных сезонных отличий по этому показателю нами зарегистрировано не было. Данный показатель сохранял относительное постоянство по сезонам года и более всего зависел от пола животного. Скорость оседания эритроцитов находилась в пределах от 1,0 до 2,9 мм/ч, что указывало на замедленный тип СОЭ и входило в пределы значений указанные в исследованиях И.Г. Галузо (1933), А.А. Фролова (1936), С. Доржпурэва (1969) и Н.И. Захаркиной (2009) для бактрианов.
Оценка параметров белкового обмена позволила установить его закономерные изменения по сезонам года. Выраженная депрессия уровня общего белка в исследованных группах верблюдов наблюдалась зимой - от 60,5 до 70,0 г/л. Увеличение уровня данного показателя начиналось весной - до 64,8Ц78,0 г/л. Максимальные значения данного показателя регистрировали осенью - 69,0-82,3 г/л. (табл. 2).
У молодых самок I группы прирост уровня общего белка осенью по сравнению с зимой составил 17,3% (р<0,05), у самок II группы 16,7% (р<0,05), у верблюжат III группы по сравнению с летом на 5,8% (р<0,05). У молодых самцов IV группы прирост этого показателя весной по сравнению с зимой составил 11,8% (р<0,05).
Таблица 2
Биохимические показатели крови верблюдов в разные сезоны года
Показатели | Группы | Сезоны года | |||
зима | весна | ето | осень | ||
Общий белок, г/л | I (n=11) | 60,50,92 | 65,52,04,З | 68,9 1,9 2,З | 73,22,0 2,З,В,Л |
II (n=8) | 66,91,21,4 | 64,8 2,14 | 73,6 0,91,3,З,В | 80,3 1,4 1,3,З,В,Л | |
III (n=9) | 65,00,92 | 69,0 0,62,Л | |||
IV (n=10) | 62,61,32 | 71,0 1,11,2,З | |||
Самец Ц производитель | 70,0 | 78,0 | 78,0 | 82,3 | |
Альбумины, г/л | I (n=11) | 31,11,42 | 34,61,24 | 38,3 1,12,З,В | 40,61,12,3,З,В,Л |
II (n=8) | 35,10,81 | 34,51,34 | 36,80,91 | 38,11,1,3,В,Л | |
III (n=9) | 48,90,8 | 46,70,71,2, | |||
IV (n=10) | 33,81,4 | 39,71,1 1,2,З | |||
Самец Ц производитель | 35,0 | 39,3 | 43,1 | 46,9 | |
Глобулины, г/л | I (n=11) | 28,91,5 | 30,91,1 | 30,61,42,3 | 32,61,62,3 |
II (n=8) | 31,91,7 | 30,32,1 | 36,80,9 1,3,З,В | 42,21,71,3,З,В,Л | |
III (n=9) | 16,11,21,2 | 22,31,11,2, | |||
IV (n=10) | 28,82,0 | 31,41,0 | |||
Самец Ц производитель | 35,0 | 38,7 | 34,9 | 35,1 | |
Белковый коэффициент | I (n=11) | 1,130,1 | 1,130,1 | 1,280,1 3,В | 1,270,12,4 |
II (n=8) | 1,130,1 | 1,180,1 | 1,00,043 | 0,90,11,4 | |
III (n=9) | 3,180,3 1,2 | 2,140,11,2,Л | |||
IV (n=10) | 1,260,1 | 1,280,1 | |||
Самец Ц производитель | 1,0 | 1,0 | 1,2 | 1,3 | |
Глюкоза, ммоль/л | I (n=11) | 2,40,32 | 3,10,2 2,З | 3,6 0,2 2,3,З,В | 4,20,3 2,3,З,В,Л |
II (n=8) | 5,60,31,4 | 6,40,21,4 | 5,9 0,21,3 | 5,7 0,11,3,В | |
III (n=9) | 2,50,21,2 | 3,1 0,2 1,2,Л | |||
IV (n=10) | 2,50,22 | 3,2 0,32,З | |||
Самец Ц производитель | 5,7 | 6,0 | 4,6 | 5,0 | |
Холестерин, ммоль/л | I (n=11) | 1,20,1 | 1,60,2З | 1,9 0,3З,В | 1,50,1З,Л |
II (n=8) | 1,10,2 | 1,50,1З | 1,40,2 | 1,20,1В | |
III (n=9) | 1,70,2 | 1,40,1 | |||
IV (n=10) | 1,30,2 | 1,70,3З | |||
Самец Ц производитель | 1,1 | 1,7 | 1,8 | 1,2 | |
Триглицериды, ммоль/л | I (n=11) | 0,30,042,4 | 0,40,042,4 | 0,30,12,3 | 0,40,12,3 |
II (n=8) | 1,10,21,4 | 0,80,11,4,З | 0,90,11 | 1,10,71,В,Л | |
III (n=9) | 0,80,11 | 1,10,11, | |||
IV (n=10) | 0,70,1 1,2 | 1,10,11,2,З | |||
Самец Ц производитель | 1,2 | 1,14 | 1,4 | 1,21 | |
Динамика изменений уровня общего белка у верблюдов калмыцкой породы согласуется с результатами исследований А.А. Ахмедиева (1972), установившего период максимального прироста живой массы у верблюдов - весной и осенью. Зарегистрированные в нашем исследовании максимальные значения данного показателя у верблюдов осенью согласуются с данными Ц.Б. Санжаева (2004) и Л.А. Селимсултановой (2010) по бактрианам. Характер изменений уровня общего белка, поЦвидимому обусловлен природно-климатическими особенностями аридной зоны Астраханской области и качеством кормовой базы верблюдов.
В период весна - лето верблюдами поедаются бобовые и злаки. Основная масса кормовых дикорастущих злаков относится к длительновегетирующим растениям с периодом летнего полупокоя и вторичной вегетацией осенью. На 100 кг злаковых кормов приходится от 48,0 до 79,0 кормовых единиц и от 3,7 до 8,6 переваримого протеина. Доля растений семейства бобовых среди пастбищных растений поедаемыми верблюдами невелика, период вегетации у этих растений более длительный, чем у злаковых, они меньше грубеют. На 100 кг корма бобовых приходится от 44,0 до 93,0 к.ед. и от 4,5 до 11,1 кг переваримого протеина (В.Н.Чуриков, 1974; Т.И. Бакинова, соавт. 2002; Р.Р. Джапова, 2006; 2008).
Осенью и зимой верблюдами поедаются в основном полыни и солянки. По питательной ценности полыни близки к злакам, но зимой их ценность выше, чем у злаков. Растения данного семейства поедаются в период снижения количества эфирных масел и веществ, придающих им горечь. На 100 кг корма семейства астровых приходится от 38,0 до 54,0 к.ед. и от 3,3 до 7,6 кг переваримого протеина. Поедаемость марьевых зависит от содержания в них солей. На 100 кг корма сухих и сочных солянок приходится 44,0 - 57,0 к.ед. и от 5,3 до 9,0 кг переваримого протеина (З.С.Куринова, с соавт. 1989; Т.И. Бакинова, соавт. 2002; Р.Р. Джапова, 2006; 2008).
Анализ характера изменений белковых фракций и соответственно, белкового коэффициента показал, что сезонные изменения данных показателей происходят параллельно изменениям количества общего белка, но степень их изменений зависят от возраста животных.
Основным показателем, характеризующим углеводный обмен, который влияет на обмен других классов веществ, служит концентрация глюкозы в сыворотке крови. Результаты наших исследований свидетельствуют о высоких значениях уровня глюкозы у верблюдов калмыцкой породы - в пределах от 2,6 - 6,0 ммоль/л. Полученные данные входят в пределы значений указанных для дромедаров и бактрианов в исследованиях R. Bengoumi (1991), S. Nazifi et al. (1998), M. El Boshy et al. (2009) и Н.И. Захаркиной (2009) - в пределах от 3,5 до 5,3 ммоль/л.
Характер изменений этого показателя указывает на его зависимость от сезона года, физиологического состояния верблюдов, пола и возраста. По материалам наших исследований, низкий уровень глюкозы в крови самцов и самок I и IV групп регистрировали зимой - 2,4- 2,5 ммоль/л. Повышение уровня глюкозы - весной до 3,1-3,2 ммоль/л (р<0,05) соответственно. Осенью, у самок I группы уровень глюкозы повысился по сравнению с летом на 14,3% до 4,2 0,3 ммоль/л (р<0,05), у верблюжат III группы на 19,4% до 3,10,2 ммоль/л (р<0,05). Известно, что всасывание глюкозы в пищеварительном тракте жвачных происходит в малых количествах, и пополнение пула глюкозы происходит в основном за счет глюконеогенеза из пропионата и аминокислот. Высокие значения уровня глюкозы у молодых самок I группы осенью по сравнению с зимой, весной и летом, у верблюжат III группы по сравнению с летом указывает на удовлетворительное вольноЦпастбищное содержание и кормление в эти сезоны.
Концентрация холестерина и триглицеридов в сыворотке крови являются важными показателями липидного обмена. Жирные кислоты являются источником энергии для метаболических процессов и одним из предшественников жира молока, холестерин - предшественник витамина D, стероидных гормонов и важнейший компонент клеточных мембран.
Уровень холестерина у обследованных верблюдов в течение года составил от 1,1 до 1,9 ммоль/л, что согласуется с данными приведенными в исследованиях S. Nazifi et al. (1998) для дромедаров на территории Ирана - 1,0-3,0 ммоль/л. Результаты проведенных исследований свидетельствуют о сезонной изменчивости этих показателей и их зависимости от физиологического состояния и пола. Низкие значения концентрации холестерина были отмечены у исследуемых животных зимой - в пределах 1,1-1,3 ммоль/л. Весной, происходило достоверное увеличение данного показателя до 1,5-1,7 ммоль/л (р<0,05). Максимальное содержание холестерина регистрировали летом - от 1,4 до 1,9 ммоль/л. Осенью отмечено снижение данного показателя до 1,2- 1,5 ммоль/л.
По нашим данным, содержание триглицеридов в крови верблюдов не имело достоверных изменений в зависимости от сезона года и более зависело от пола, возраста и физиологического состояния. Следует отметить, что у молодых самок I группы концентрация триглицеридов в течение года варьировало в узких пределах 0,3-0,4 ммоль/л, аналогичную картину регистрировали у молодых самцов IV группы - 0,7-1,1 ммоль/л и в группе верблюжат- 0,8-1,1 ммоль/л. Установленные значения триглицеридов у обследованных животных в пределах - 0,3-1,36 ммоль/л выше значений по этому показателю указанных в исследованиях R. Bengoumi (1991), S Nazifi et al (1998) и S. Raghvendar et al (2000) по дромедарам на территориях Джибути, Ирана - 0,3 - 0,13 ммоль/л и значений этого показателя у бактрианов территории Индии - 0,28 ммоль/л.
Таким образом, проведенный анализ динамики изменений морфологических и биохимических показателей крови разных половозрастных групп верблюдов в течение года свидетельствует о сезонных изменениях количества эритроцитов, уровня гемоглобина, уровня общего белка, глюкозы и холестерина.
Сравнение полученных результатов с отрывочными данными по некоторым показателям крови верблюдов монгольской породы, в связи с продуктивностью верблюдов, оптимизацией питания этих животных и изучения их инвазированности показывает, что характер и степень сезонных изменений определяются сочетанием отдельных факторов внешней среды и кормовой базой верблюдов (С. Доржпурэв, 1969; Б.К. Болаев, 2000; В.А. Сидоркин, с соавт. 2003; Ц.Б. Санжаев, 2004; Н.И. Захаркина, 2009; Л.А. Селимсултанова, 2010).
2.2.2. Морфологические и биохимические показатели крови верблюдов в зависимости от физиологического состояния, возраста и пола животных
Верблюды отличаются от других сельскохозяйственных животных большей продолжительностью беременности (в среднем 12 месяцев) и длительностью лактационного периода - от 10 до 17,6 месяцев (И.И. Сиденко, 1999; Ц.Ц. Балдандоржиева, 2005). У верблюдов данного племенного хозяйства I фаза лактации приходилась на зимне-весенний период, II фаза Ц на летне-осенний период, III фаза - осенне-зимний период, IV фаза Ц зимне-весенний период.
Сравнительный анализ данных двух групп - беременных, лактирующих самок и небеременных самок с помощью t-критерия Стьюдента показал статистически значимые различия по количеству эритроцитов, уровню гемоглобина, количеству лейкоцитов, процентному содержанию палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, лимфоцитов, эозинофилов и зависимость их содержания от физиологического состояния животных (табл. 3).
Заключительный этап беременности самок зимой, характеризовался низким уровнем гемоглобина по сравнению с небеременными самками, и более высоким количеством эритроцитов - 78,5 2,4 г/л против 87,0 0,7 г/л (р<0,05) и 5,10,06 и 4,50,071012/л (р<0,05) соответственно. Весной и летом в исследуемых группах регистрировали
Таблица 3
Морфологические и биохимические показатели крови верблюдов в зависимости
от физиологического состояния
Показатели | Сезоны года | |||||||
Зима | Весна | ето | Осень | |||||
Самки беременные (n=8) | Самки (n=11) | Самки лактирующие (n=8) | Самки (n=11) | Самки лактирующие (n=8) | Самки (n=11) | Самки лактирующие (n=8) | Самки (n=11) | |
Эритроциты, 1012/л | 5,1 0,06 | 4,5 0,07* | 5,1 0,04 | 4,6 0,04* | 5,2 0,02 | 4,7 0,04* | 5,2 0,02 | 4,5 0,06* |
Гемоглобин, г/л | 78,5 2,4 | 87,0 0,7* | 82,7 2,8 | 89,0 1,0 | 87,4 1,9 | 89,8 0,7 | 86,8 1,2 | 87,6 0,7 |
ейкоциты, 109 /л | 10,8 0,2 | 11,90,1* | 11,7 01 | 11,8 0,1 | 9,4 0,1 | 11,9 0,1* | 9,8 0,1 | 11,8 0,1* |
имфоциты, % | 43,6 0,6 | 53,80,5* | 52,3 0,3 | 53,2 0,3* | 42,0 0,9 | 53,4 0,7* | 47,1 0,6 | 54,1 0,4* |
Нейтрофилы палочкоядерные, % | 7,8 0,3 | 5,7 0,2* | 7,5 0,3 | 5,9 0,2* | 8,1 0,2 | 5,7 0,4* | 7,5 0,5 | 6,5 0,2 |
Нейтрофилы сегментоядерные, % | 40,8 0,5 | 32,4 0,5* | 32,9 0,5 | 32,6 0,4 | 39,6 1,0 | 32,6 0,7* | 36,0 1,1 | 31,6 0,7* |
Эозинофилы, % | 3,4 0,2 | 3,8 0,2 | 3,4 0,3 | 3,8 0,2 | 6,4 0,6 | 3,8 0,3* | 5,4 0,3 | 3,7 0,2* |
Общий белок, г/л | 66,91,2 | 60,50,9* | 64,8 2,1 | 65,52,0 | 73,6 0,9 | 68,9 1,9* | 80,3 1,4 | 73,22,0* |
Альбумины, г/л | 35,10,8 | 31,11,4* | 34,51,3 | 34,61,2 | 36,80,9 | 38,3 1,1* | 38,11,1 | 40,61,1* |
Глобулины, г/л | 31,91,7 | 28,91,5 | 30,32,1 | 30,91,1 | 36,80,9 | 30,61,4* | 42,21,7 | 32,61,6* |
Глюкоза, ммоль/л | 5,60,3 | 2,40,3* | 6,40,2 | 3,10,2* | 5,9 0,2 | 3,6 0,2* | 5,7 0,1 | 4,20, |
Триглицериды, ммоль/л | 1,10,2 | 0,30,04* | 0,80,1 | 0,40,04* | 0,90,1 | 0,30,1* | 1,10,7 | 0,40,1* |
Примечание: здесь и далее: *p<0,05 по t - критерию.
повышение уровня гемоглобина - в группе лактирующих самок (I - II фазы лактации) этот показатель увеличился на 10,1% (р<0,05), у небеременных самок - на 3,1%, осенью регистрировали его снижение в двух группах. Количество эритроцитов в эти периоды у лактирующих и небеременных самок изменялось мало - 5,1-5,21012/л и 4,5-4,71012/л соответственно.
Количество лейкоцитов в группе небеременных самок было выше, чем в группе беременных, лактирующих самок - 11,8-11,9109/л против 9,4-11,7109/л. Существенное снижение этого показателя на 9,2% (р<0,05) было отмечено в начале II фазы лактации, летом.
Группа небеременных самок характеризовалась высоким процентным содержанием лимфоцитов во все исследуемые периоды - 53,2 - 54,1%, по сравнению с беременными, лактирующими самками - 42,0-52,3% (р<0,05). Низкое процентное содержание лимфоцитов было отмечено на заключительном этапе беременности, зимой и в начале II фазы лактации, летом - 43,60,6 (р<0,05) и 42,0 0,9% (р<0,05) соответственно (табл. 3). Процентное содержание палочкоядерных и сегментоядерных клеток у беременных, лактирующих самок было выше, чем у небеременных самок и изменялось в обратном порядке по отношению к лимфоцитам. Высокое процентное содержание нейтрофилов регистрировали зимой и летом - 48,6% (р<0,05) и 47,7% (р<0,05) соответственно. Существенное повышение содержания эозинофилов на 49,6%(р<0,05) в группе лактирующих самок было отмечено летом, в начале II фазы лактации. Определение соотношения базофилов и моноцитов в период беременности и лактации показало, что их изменения незначительны. Статистически значимых различий между беременными, лактирующими и небеременными самками в течение года по СОЭ нами зарегистрировано не было.
Беременные и лактирующие самки во все исследуемые периоды отличались высоким уровнем общего белка, по сравнению с небеременными самки - 64,8-80,3 г/л против 60,5-73,2 г/л (р<0,05). Сравнительный анализ значений этого показателя в 2 группах свидетельствовал о его зависимости от сезона года. Так, осенью, у самок во II фазе лактации и небеременных самок уровень общего белка регистрировали как максимальные значения - 80,3 1,4 г/л и 73,22,0 г/л (р<0,05) соответственно. Тем не менее, в I фазе лактации, весной, у лактирующих самок регистрировали снижение уровня общего белка на 3,1%, в то время как в группе небеременных самок этот показатель увеличился на 7,6% (р<0,05).
Анализ данных в отношении фракций общего белка показал, что уровень фракции альбуминов у беременных самок выше, чем у небеременных самок - 35,12,0 г/л против 31,1 1,4 г/л (р<0,05) соответственно. В период II фазы лактации (лето-осень) у самок регистрировали нарастание фракции глобулинов на 28,2% (р<0,05). У небеременных самок в этот период регистрировали увеличение фракции альбуминов на 14,8% (р<0,05).
Результаты определения содержания глюкозы в крови верблюдов свидетельствуют о достоверных различиях по этому показателю среди беременных, лактирующих и не беременных самок (табл.3). Анализ данных указывает на увеличение уровня глюкозы у самок в I фазе лактации по сравнению с заключительным этапом беременности с 5,6 до 6,4 ммоль/л (р<0,05) и последующую тенденцию снижения этого показателя со II фазы лактации - до 5,7 ммоль/л (осень). Полученные результаты согласуются с данными Н.И. Захаркиной (2010), указывающей на высокие значения уровня глюкозы у верблюдиц калмыцкой породы - 4,6 0,44 ммоль/л и частично согласуются с данными И.И. Сиденко (1999), сообщающего о снижении уровня глюкозы во II фазе лактации у верблюдиц этой породы (с 2,0 до 1,8 ммоль/л).
Уровень холестерина в заключительном этапе беременности был незначительно ниже, чем у небеременных самок. В I фазе лактации регистрировали его увеличение с 1,1 0,2 до 1,5 0,1 ммоль/л, во II фазе лактации - его снижение до 1,4 0,2 ммоль/л летом и 1,2 0,1 ммоль/л осенью. Пониженное содержание холестерина у беременных и лактирующих самок - 1,3 0,1 ммоль/л по сравнению с небеременными самками 1,6 0,1ммоль/л (р<0,05) по-видимому, отражают большие энергетические затраты верблюдиц во время отела и периода лактации. Высокий уровень триглицеридов в крови беременных, лактирующих самок в течение года, чем у небеременных самок - 1,0 0,06 ммоль/л против 0,4 0,02 ммоль/л (р<0,05) вероятно обусловлен усилением липидного обмена в связи с интенсивным продуцированием молока.
Таким образом, закономерностью изменения морфологических и биохимических показателей крови на заключительном этапе беременности и лактации верблюдиц является - изменения количества эритроцитов и уровня гемоглобина, количества лейкоцитов и лейкоцитарной формулы, уровня общего белка, глобулинов, глюкозы, холестерина и триглицеридов. Динамика изменений показателей крови беременных, лактирующих самок тесно связаны с сезоном года, условиями кормления и возрастом верблюдов. Беременность и лактация вызывают существенные изменения показателей красной крови вследствие усиления обмена веществ и физиологического напряжения организма.
Результаты исследований указывают на однотипные возрастные изменения количества эритроцитов и уровня гемоглобина - их уменьшение с возрастом (табл. 4). У верблюдов 11-17-летнего возраста количество эритроцитов и уровень гемоглобина на 10,4% и 5,6% ниже, чем у животных 1-5-летнего возраста - 4,30,041012/л против 4,80,041012/л (р<0,05) и 83,73,9 г/л против 88,70,4 г/л (р<0,05) соответственно.
Таблица 4
Морфологические показатели крови верблюдов
в зависимости от возраста и пола
Показатели | По возрасту | По полу | ||
1-5 лет (n=84) | 11-17 лет (n=36) | Самки (n=76) | Самцы (n=24) | |
Эритроциты,1012/л | 4,80,04 | 4,30,04* | 4,50,03 | 5,10,04* |
Гемоглобин, г/л | 88,70,4 | 83,73,9* | 86,40,6 | 93,31,7* |
ейкоциты,109 /л | 11,90,03 | 11,10,2* | 11,50,1 | 11,90,05 |
Нейтрофилы палочкоядерные, % | 6,70,2 | 7,70,2* | 6,70,1 | 7,80,1* |
Нейтрофилы сегментоядерные, % | 30,50,5 | 36,31,0* | 34,40,4 | 30,60,7* |
имфоциты, % | 53,50,3 | 48,01,0* | 50,50,5 | 52,70,4* |
Эозинофилы, % | 5,00,2 | 3,70,3* | 4,20,1 | 4,90,3* |
Базофилы, % | 0,80,05 | 0,80,1 | 0,80,04 | 0,90,05 |
Моноциты, % | 3,40,1 | 3,40,1 | 3,40,07 | 3,20,1 |
СОЭ, мм/час | 2,10,1 | 1,20,1* | 1,50,06 | 2,60,1* |
Сравнительный анализ изменений количества лейкоцитов и лейкоцитарной формулы указывают на значительные колебания в содержании некоторых видов клеток в зависимости от возраста животного. Количество лейкоцитов в онтогенезе верблюдов изменяется, тем не менее, достоверные возрастные различия относительно данного показателя, напрямую связаны с физиологическим состоянием животных вошедших в эту группу, а не с возрастом верблюдов. Закономерностями для динамики нейтрофилов, лимфоцитов и эозинофилов является: высокое содержание лимфоцитов и эозинофилов у молодых относительно полновозрастных верблюдов - 53,50,3% против 48,01,0% (р<0,05) и 5,00,2% против 3,70,3% (р<0,05) соответственно и низкое содержание нейтрофилов 37,2% против 44,0% (р<0,05). Возрастные изменения содержания базофилов и моноцитов не установлены. Результаты исследований возрастных изменений количества лейкоцитов и лейкоцитарной формулы верблюдов согласуются с законом онтогенеза белой крови, сформулированным В.Н. Никитиным (1947). Оценка данных по скорости оседания эритроцитов у верблюдов свидетельствует о возрастных различиях данного показателя, но в рамках значений установленных для бактрианов от 1,0 до 3,0 мм/час. У молодых животных СОЭ выше на 30% (р<0,05), по сравнению с полновозрастными верблюдами.
Возрастные отличия были установлены в отношении уровня глобулинов, что нашло свое отражение в изменениях белкового коэффициента. Уровень глобулинов у полновозрастных животных выше, чем у молодых верблюдов - 33,7 1,3 г/л против 30,00,7 г/л (р<0,05) (табл. 5). Так, например, увеличение уровня общего белка осенью, у самок 3-5 летнего возраста происходило за счет прироста фракции альбуминов - 40,61,1 г/л, у 11 - 17- летних самок за счет фракции глобулинов - 42,2 1,7 г/л.
Таблица 5
Биохимические показатели крови верблюдов в зависимости
от возраста и пола
Показатели | По возрасту | По полу | ||
1-5 лет (n=84) | 11-17 лет (n=36) | Самки (n=76) | Самцы (n=24) | |
Общий белок г/л | 64,80,9 | 66,81,3 | 68,80,9 | 67,90,8 |
Альбумины, г/л | 34,70,8 | 32,00,7 | 36,10,5 | 41,91,0* |
Глобулины, г/л | 30,00,7 | 33,71,3* | 32,70,7 | 26,01,2* |
Белковый коэффициент | 1,30,05 | 1,00,06* | 1,10,03 | 1,90,1* |
Глюкоза, ммоль/л | 2,80,1 | 5,90,2* | 4,40,2 | 3,10,2* |
Холестерин, ммоль/л | 1,50,09 | 1,30,1 | 1,50,06 | 1,530,09 |
Триглицериды, ммоль/л | 0,60,05 | 1,00,1* | 0,60,05 | 0,90,04* |
Кроме того, полновозрастные животные в отличие от молодых, характеризовались высокими значениями уровня глюкозы - 5,90,2 ммоль/л против 2,8 0,1 ммоль/л (р<0,05) и триглицеридов - 1,0 0,1 ммоль/л против 0,6 0,05 ммоль/л (р<0,05).
Таким образом, анализ полученных данных свидетельствует о возрастных различиях по количеству эритроцитов, уровню гемоглобина, процентного содержания нейтрофилов, лимфоцитов, эозинофилов, СОЭ, уровню глобулинов, белкового коэффициента, глюкозы и триглицеридов.
По материалам наших исследований самцы характеризуются более высокими показателями красной крови в отличие от самок. Достоверные различия между самцами и самками были установлены для уровня гемоглобина - 93,31,7 г/л против 86,40,6 г/л, количества эритроцитов - 5,10,041012/л против 4,50,031012/л и СОЭ - 2,60,1 мм/ч против 1,50,06 мм/час (табл.4). Половые различия по количеству лейкоцитов нами выявлено не было, тем не менее, у самцов верблюдов по сравнению с самками достоверно ниже процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов и выше содержание палочкоядерных нейтрофилов, лимфоцитов и эозинофилов.
Сравнительный анализ данных в течение года показал высокое содержание эозинофилов у самцов 1-5 - летнего возраста по сравнению с самками 3-5 - летнего возраста - 6,2-6,4% против 3,4-3,8%, что согласуется с результатами исследований по самцам монгольской и казахской пород бактрианов (А.А. Фролов, 1936; Н.Р. Семушкин, 1941; С. Доржпуэрв, 1969). Содержание эозинофилов у верблюжат составили минимальные значения этого показателя среди исследованных групп и регистрировались в пределах от 2,4 до 2,8%, что согласуется с результатами исследований С. Доржпурэва (1969) по верблюжатам монгольской породы.
Половые различия по уровню общего белка установлены не были. Сравнительный анализ фракций общего белка указывает на существенные различия между самцами и самками. Самцы в отличие от самок характеризуются высокими значениями альбуминов - 41,91,0 г/л против 36,10,5 г/л (р<0,05) и низким содержание глобулинов - 26,01,2 г/л против 32,70,7 г/л (р<0,05). Следует отметить, что уровень общего белка и его фракций как у самцов, так и у самок тесно связаны с сезоном года и возрастом верблюдов (табл. 5). Проведенная нами оценка половых различий показателей углеводного и липидного обменов показала, что самцы отличаются от самок низкими значениями уровня глюкозы - 3,10,2 ммоль/л против 4,40,2 ммоль/л (р<0,05) и более высокими значениями уровня триглицеридов 0,9 0,04 ммоль/л против 0,60,05 ммоль/л (р<0,05). В отношении уровня холестерина достоверно значимых половых различий выявлено не было.
Обращает на себя внимание некоторые показатели крови самца - производителя характеризующегося не только превосходными экстерьерными качествами, но и максимальными значениями уровня гемоглобина и общего белка в течение года.
Установленные различия между самцами и самками по некоторым морфологическим и биохимическим показателям крови, по-видимому, обусловлены более интенсивным обменом веществ у самцов, чем у самок. Полученные данные согласуются с результатами исследований Х.Ф. Кушнира (1938), Б.А. Алиева (1948), Е.В. Громыко (2005) считающих, что половые различия показателей крови самцов и самок сельскохозяйственных животных обусловлены в значительной степени высоким уровнем андростеронов у самцов.
2.2.3. Оценка уровня неспецифической резистентности верблюдов
калмыцкой породы
Для определения уровня неспецифической резистентности организма использовали интегральный критерий оценки функционального состояния организма - индекс Бредекка (иБ), индекс соотношения нейтрофилов и лимфоцитов (ИСНЛ) отражающего соотношение клеток неспецифической и специфической защиты и лимфоцитарный индекс или индекс адаптации по Гаркави (ЛИ/СПНР) - для оценки состояния адаптации организма верблюдов (табл.6).
Значения иБ у верблюдов в течение указанных сезонов изменялись неравномерно и зависели от физиологического состояния животных, их возраста и пола. Наиболее выражен этот процесс у самок II группы - в I фазе лактации регистрировали повышение иБ с 5,7 до 7,1 (р<0,05), что было, по-видимому, проявлением активации естественной резистентности животных в этот период. В начале II фазы лактации, летом, регистрировали его снижение до 5,2 (р<0,05) и повышение иБ осенью, к концу II фазы - до 6,5 (р<0,05).
Весной по сравнению с зимой за исключением самок II группы, было установлено снижение уровня иБ с 9,5 до 9,1 единиц - у молодых самок I группы, с 7,2 до 7,0 - в группе молодых самцов IV группы и с 6,1 до 5,3 единиц - у самца - производителя. Максимальные значения иБ регистрировали летом - у самок I группы - 9,8, самца- производителя - 7,7 и верблюжат III группы - 6,8, осенью - их повторное снижение. Таким образом, высокие значения иБ у молодых самок и верблюжат I и IV группы и самца - производителя регистрировали летом - 9,8, 6,8 и 7,7соответственно, у самок II группы весной -7,1, у молодых самцов зимой - 7,2. Молодые животные характеризовались высокими показателями иБ в отличие от полновозрастных самок и самца - производителя - 7,0-9,8 против 5,2-7,7 (р<0,05), у самок иБ выше, чем у самцов - 5,2-9,8 против 6,5-7,7 (р<0,05).
Расчет ИСНЛ в обследованных группах верблюдов показал, что у животных с высоким уровнем неспецифической резистентности - I, III, IV групп и самца - производителя, индекс был менее единицы - от 0,7 до 0,8. У самок II группы ИСНЛ в
Таблица 6
ейкоцитарные индексы верблюдов калмыцкой породы в различные сезоны года
Сезон | Группа | Индекс Бредекка | Индекс соотношения нейтрофилов и лимфоцитов (ИСНЛ) | И/Индекс адаптации (СПНР) по Гаркави Л.Х |
Зима | I | 9,5 0,42,4 | 0,7 0,022 | 1,7 0,042 |
II | 5,7 0,21,4 | 1,1 0,02 1,4,В,О | 1,1 0,031,4,В | |
IV | 7,2 0,31,2 | 0,7 0,032 | 1,9 0,12 | |
Самец- производитель | 6,1 | 0,84 | 1,5 | |
Весна | I | 9,1 0,42,4 | 0,7 0,01 | 1,6 0,03 |
II | 7,1 0,31,4,З | 0,8 0,01 | 1,6 0,03 | |
IV | 7,0 0,31,2 | 0,7 0,03 | 1,9 0,1 | |
Самец- производитель | 5,3 | 0,8 | 1,6 | |
ето | I | 9,8 0,9 3,В | 0,7 0,032 | 1,7 0,12 |
II | 5,2 0,2 3,В | 1,1 0,11,3,В,О | 1,1 0,11 ,3,В | |
III | 6,8 0,21,2 | 0,8 0,12 | 1,6 0,12 | |
Самец- производитель | 7,6 | 0,7 | 1,8 | |
Осень | I | 8,4 0,23,З,В,Л | 0,7 0,02 | 1,7 0,1 |
II | 6,5 0,4З,В,Л | 0,9 0,03 | 1,3 0,1 | |
III | 6,5 0,21 | 0,8 0,1 | 1,6 0,1 | |
Самец- производитель | 7,7 | 0,7 | 1,9 |
период беременности и I и II фаз лактации (зима-лето) был выше единицы - 1,1 и свидетельствовал о напряжении неспецифического звена иммунитета у животных в этот период.
Учение о стрессе как об общем адаптационном синдроме при действии повреждающих агентов было сформировано Г. Селье. Наряду с этим были открыты адаптационные реакции организма более низких, по сравнению со стрессом, уровней. JI.X. Гаркави с соавт. (1979, 1982, 1990, 2006) установлено, что при воздействии на организм различных по силе раздражителей развиваются адаптационные реакции, которые в свою очередь подразделяются на реакцию тренировки (РТ), реакцию спокойной активации (РСА), реакцию повышенной активации (РПА) и острый стресс. Наибольшая величина СПНР регистрируется при РПА - больше 0,7, при РСА величина этого показателя лежит в пределах - 0,5 - 0,7, при РТ - от 0,3 до 0,5, при стрессе, в крови регистрируется дефицит лимфоцитов с преобладанием незрелых форм нейтрофилов и уровень СПНР падает до 0,3 и ниже. Результаты наших исследований указывают, что у верблюдов с высоким уровнем неспецифической резистентности, СПНР течение года изменялся мало - от 1,5 - 1,9 и соответствовал РПА, характеризующейся адекватным повышением активности защитных систем в ответ на раздражитель средней силы, что соответствует оптимальному уровню защитного ответа организма. Снижение значений СПНР у самок II группы в сторону единицы свидетельствовал о снижении уровня реактивности у этих животных. Так, тип реакции определяется процентным содержанием лимфоцитов, а уровень реактивности - процентным содержанием других элементов лейкоцитарной формулы. Снижение уровня реактивности у самок II группы сопровождалось отклонением от нормы количества лейкоцитов - их уменьшение на 19,7% в начале II фазы по сравнению с I фазой лактации, увеличением содержания эозинофилов на 47 % (р<0,05), палочкоядерных нейтрофилов - на 7,4% и увеличением СОЭ с 1,3 до 1,5 мм/час в этот период.
Таким образом, нами установлен высокий уровень неспецифической естественной резистентности у молодых животных по сравнению с полновозрастными верблюдами. Достоверные половые различия по уровню индекса Бредекка - высокие значения у самок по сравнению с самцами. На основании ИСНЛ и СПРН установлено напряжение неспецифического звена иммунитета на заключительном этапе беременности и во II фазе лактации у самок.
2.2.4. Оценка состояния верблюдов методом клиновидной дегидратации
Выборочный морфологический анализ сыворотки крови методом клиновидной дегидратации у 5 верблюдов (100%) I, II и IV групп весной, свидетельствовал о формировании частично-радиального типа фации свидетельствующего о напряжении функциональных систем и защитных механизмов у этих животных.
В фациях 80% животных было отмечено формирование штриховых трещин в краевой и центральной зонах - маркера реактивности организма, а также отмечались изменения характерные для гипоксии - жгутовые трещины в центральной зоне. Присутствие токсических бляшек и складчатости - маркеров повышенного содержания в организме токсических продуктов установлены у 60% верблюдов. В фациях 80% животных регистрировали трехлучевые трещины - маркера венозного застоя, серповидные образования - маркера нарушений микроциркуляции и гребешковые структуры - маркера ангиоспазма. Незавершенные конкреции - маркер изменений концентрации общего белка были установлены у 60% животных. Языковые структуры - маркер воспалительного процесса регистрировали у двух лактирующих самок II группы.
В летний сезон было обследовано 8 животных - самок I и II групп и верблюжат III группы. В 62,5% случаев регистрировали радиальный тип фации, не содержащий патологических образований, в 25% - частитично-радиальный тип фации, в 12,5% случаев - формирование двойной фации, указывающий на метаболические нарушения.
Результаты исследований фаций на наличие патологических структур показали наличие у обследованных животных жгутовых трещин, трехлучевых трещин и незавершенных конкреций. В 87,6% случаев исследованных фаций верблюдов было отмечено наличие токсических бляшек, в 62,5% - складчатости. Наличие гребешковых структур обнаружено в 62,5% фаций, серповидные образования в 37,5% случаев, штриховые трещины зарегистрированы в 75% исследованных фациях.
Контрольное обследование 11 верблюдов осенью показало формирование у 100% случаев животных - частично - радиального типа фации. Исследование фаций на наличие патологических структур свидетельствовало о присутствии в 100% случаев маркеров реактивности организма и гипоксии - штриховых трещин и жгутовых трещин. В 90% исследованных фаций содержались гребешковые структуры, в 81,8% случаев присутствовали трехлучевые трещины. У 2 верблюдоматок II группы (18,2 %) регистрировали маркер воспалительных процессов.
Таким образом, морфологический анализ сыворотки крови по типу фации в течение года у 24 верблюдов разных групп показал, что в 83,3 % случаев фиксировали типы фации, которые рассматриваются как варианты нормы. В 54,2% случаев регистрировали частично - радиальный тип фации, свидетельствующий о высоком уровне компенсаторных механизмов, в 29,2 % случаев - радиальный тип фации, указывающий на хорошее состояние животных в рамках физиологической нормы. Двойной тип фации регистрировали у 16,7 % обследованных животных - весной, у животных I, II и IV групп №№03.00, 26.92, 11.02, летом - у самки I группы №77.02. Формирование двойного типа фации в большей степени было обусловлено появлением бляшкообразных структур - признака интоксикации и в меньшей степени низкими значениями морфологических и биохимических показателей крови. Отсутствие в фациях токсических бляшек осенью, привело к восстановлению структуропостроения фаций у этих животных.
По данным наших исследований регистрация штриховых трещин в 80-100% случаев - маркера высокого уровня компенсаторных механизмов, подтверждается результатами исследований лейкограммы животных и лейкоцитарных индексов, свидетельствующих о высоком напряжении иммунитета у обследованных верблюдов.
Регистрация маркеров венозного застоя, нарушений микроциркуляции и ангиоспазма, у верблюдов по нашему мнению связана с условиями забора крови - за неделю предшествующую забору крови стадо собиралось в ограниченном загоне.
Установленные весной и летом маркер изменений уровня общего белка - незавершенные конкреции и их отсутствие осенью, подтверждаются биохимическими исследованиями крови бактрианов. Уровень общего белка весной, у самки I группы составил 60,0 г/л. Летом, у животных №№ 02.00; 01.01; 11.02; 77.02; 83.02, I группы данный показатель составил от 65,2 до 70,0 г/л, у верблюжат III группы №№ 04.05 и 05.05 - 64,1 г/л. Осенью, при контрольном обследовании верблюдов уровень общего белка у указанных животных I группы составил- 72,1- 82,3 г/л, у животных III группы - 70,0 г/л.
Регистрация у животных жгутовых трещин отражающих гипоксическое состояние организма некоторых верблюдов в нашем исследовании подтверждаются клиническими анализами. Так, весной у животных I группы уровень гемоглобина соответствовал 89,01,02 г/л, разброс значений этого показателя в группе - от 82,5 до 93,7 г/л. Уровень гемоглобина у самки №03.00 составил - 84,1 г/л, методом клиновидной дегидратации было установлено наличие жгутовых трещин в фации этого животного. У животных II группы №№13.90 и 26.90 уровень гемоглобина составил 76,9 и 73,1 г/л соответственно, при среднем значении этого показателя в группе - 82,72,8 г/л (73,1-95,6 г/л). У животных IV группы №№ 03.04 и 11.02 уровень гемоглобина соответствовал 88,1 и 86,3 г/л, при среднем значении данного показателя в группе молодых самцов - 90,00,7 г/л (86,3-93,7).
В летний сезон у животных разных групп было отмечено присутствие жгутовых трещин, что соответствовало низким значениям уровня гемоглобина. Так, у молодых самок I группы №02.00, 01.01, 11,02, 77.02, 83,02 этот показатель соответствовал пределам от 86,5 до 88,2 г/л, при среднем значении в группе - 89,80,7 г/л (86,5-93,5 г/л). У лактирующей самки № 57.92 - 81,2 г/л, при среднем значении этого показателя в группе - 87,41,9 г/л (79,4 - 95,3 г/л). У верблюжат, животных №№04.05 и 05.05 соответствовал 90,5 и 86,5 г/л, при среднем значении уровня гемоглобина в группе - 91,00,7 г/л (86,5-93,5 г/л). Осенью жгутовые трещины присутствовали в фациях животных I группы №№ 01.00, 02.00, 03.00, 83.02. Концентрация гемоглобина у данных животных составила от 85,0 до 87,0 г/л, средние значения - 87,6 0,7г/л (83,0-90,0 г/л).
Таким образом, в проведенных нами исследованиях установлено, что морфологический анализ крови методом клиновидной дегидратации позволяет оперативно характеризовать отклонения в физиологическом состоянии верблюдов, которые согласуются с данными морфологических и биохимических показателей.
Выводы
1. Морфологические и биохимические показатели крови верблюдов в постнатальном онтогенезе претерпевают адаптивные изменения, связанные с полом, возрастом, физиологическим состоянием животных и условиями среды:
1.1. Половые различия морфологических и биохимических показателей крови верблюдов обусловлены интенсивным обменом веществ у самцов за счет высокого уровня андростеронов. У самцов в отличие от самок:
- выше уровень гемоглобина - на 7,4% (р<0,05), количество эритроцитов - на 11,8% (р<0,05) и СОЭ - на 42,3% (р<0,05);
- ниже содержание сегментоядерных нейтрофилов - на 11%(р<0,05) и выше процентное содержание палочкоядерных нейтрофилов - на 14,1%(р<0,05), лимфоцитов - на 4,2% (р<0,05) и эозинофилов - на 14,3% (р<0,05);
- уровень альбуминов выше на 13,8% (р<0,05) и ниже содержание глобулинов - на 20,5% (р<0,05);
- ниже уровень глюкозы - на 29,5% (р<0,05) и выше уровень триглицеридов на 33,3% (р<0,05).
1.2. Возрастные изменения морфологических и биохимических показателей крови верблюдов характеризуются:
- уменьшение с возрастом количества эритроцитов и уровня гемоглобина - у животных 1-5-летнего возраста данные показатели были выше на 10,4% (р<0,05) и 5,6% (р<0,05) по сравнению с животными 11-17-летнего возраста;
- содержание лимфоцитов и эозинофилов у молодых животных по сравнению с полновозрастными верблюдами выше на 10,3% (р<0,05) и 26% (р<0,05) соответственно и ниже содержание нейтрофилов - на 15,5% (р<0,05);
- у молодых животных СОЭ выше на 30% (р<0,05), по сравнению с полновозрастными верблюдами;
- уровень глобулинов у полновозрастных животных выше на 10,9% (р<0,05) по сравнению с молодыми верблюдами;
- уровень глюкозы и триглицеридов у полновозрастных животных в отличие от молодых верблюдов выше на 52,5% (р<0,05) и 40% (р<0,05) соответственно.
1.3. Сезонная динамика показателей крови у верблюдов калмыцкой породы характеризовалась однонаправленными изменениями: повышением уровня гемоглобина на 3-10%, количества эритроцитов на 2-4% и уровня холестерина на 21-32% летом по сравнению с зимой, повышением уровня общего белка на 6-17% и глюкозы на 12-42% осенью по сравнению с зимой.
2. Беременность и лактация вызывают существенные изменения показателей крови вследствие усиления обмена веществ и физиологического напряжения организма. Общей закономерностью изменения морфологических и биохимических показателей крови у беременных и лактирующих верблюдиц по сравнению с небеременными самками является:
- низкий уровень гемоглобина 78,52,4 против 87,00,7 г/л (р<0,05) и более высокие показатели количества эритроцитов на заключительном этапе беременности;
- низкое количество лейкоцитов - 9,4-11,7109/л против 11,8-11,9109/л (р<0,05);
- низкое процентное содержание лимфоцитов - 42,0-52,3% против 53,2 - 54,1%(р<0,05);
- высокое процентное содержание нейтрофилов - 40,4-48,6% против 38,1-39,5%(р<0,05);
- высокий уровень общего белка - 64,8-80,3 г/л против 60,5-73,2 г/л (р<0,05);
- высокий уровень фракции альбуминов у беременных самок - 35,12,0 г/л против 31,1 1,4 г/л (р<0,05);
- увеличение уровня глюкозы в I фазе лактации с последующей его тенденции к снижению во II фазе лактации;
-низкое содержание холестерина - 1,30,1 против 1,60,1ммоль/л (р<0,05) отражающее большие энергетические затраты верблюдиц во время отела и периода лактации;
- высокое содержание триглицеридов - 1,0 0,06 против 0,4 0,02 ммоль/л (р<0,05) за счет усиления липидного обмена в связи с интенсивным продуцированием молока.
3. Уровень неспецифической резистентности у верблюдов находится в зависимости от пола и возраста животных, сезона года и их физиологического состояния:
- высокие значения иБ у молодых животных - 7,0- 9,8 в отличие от полновозрастных верблюдов - 5,2- 7,7 (р<0,05);
- высокие значения иБ в группе самок - 5,2-9,8 по сравнению с самцами- 6,5-7,7 (р<0,05);
- высокие значения иБ у молодых самок и верблюжат и самца - производителя летом - 9,8, 6,8 и 7,7 (р<0,05)соответственно, у полновозрастных самок, весной - 7,1 (р<0,05) у молодых самцов, зимой - 7,2;
-на основании ИСНЛ и СПРН установлено напряжение неспецифического звена иммунитета и снижение уровня реактивности на заключительном этапе беременности и во II фазе лактации у самок.
4. Морфологический анализ сыворотки крови верблюдов методом клиновидной дегидратации показал, что в 83,3% случаев фиксировали типы фации, указывающих на высокой уровень компенсаторных механизмов и хорошее состояние животных. Определение маркеров дает возможность провести экспресс - мониторинг общей реакции организма верблюдов на внешние факторы и получить информацию о гомеостазе организма верблюдов в целом.
Практические предложения
- Данные о параметрах морфологических и биохимических показателей крови верблюдов предлагается использовать в качестве детальных физиологических норм при составлении справочников и руководств.
- Для оценки уровня неспецифической резистентности разных половозрастных групп верблюдов рекомендуется использовать комплекс показателей, включающий индекс Бредекка, ИСНЛ, СПНР.
- Для экспересс-оценки физиологического состояния племенных верблюдов рекомендуется использование структурного анализа сыворотки крови методом клиновидной дегидратации, отличающегося своей экономичностью, простотой и однозначностью интерпретации образовавшихся структур
Список работ, опубликованных по материалам диссертации
Статьи в печатных изданиях, рекомендованных Перечнем ВАК РФ:
- Габунщина О.Д. Физиолого-биохимические особенности верблюжат бактрианов калмыцкой породы и их использование в племенной работе// Научная мысль Кавказа. - 2010. - № 10 (4) часть 2. - С. 106-109.
- Габунщина О.Д. Некоторые параметры гомеостаза у племенных самцов верблюдов бактрианов калмыцкой породы//Естественные науки. -2011. - №1 (34). - С. 110-114.
- азько М.В. Габунщина О.Д. Использование морфологического анализа сыворотки крови верблюдов бактрианов калмыцкой породы в селекционно-племенной работе// Естественные науки. -2011. - №1 (34). - С. 165-172.
- Габунщина О.Д. Протеиновый состав сыворотки крови верблюдов бактрианов калмыцкой породы разводимых в условиях аридной зоны Астраханской области// Зоотехния. -2011. -№11. ЦС.24 -26.
- Габунщина О.Д. Лейкограмма и лейкоцитарные индексы крови верблюдов калмыцкой породы (Camelus Bactrianus)//Актуальные вопросы ветеринарной биологии - Санкт-Петербург, издательство института ветеринарной биологии. -2012. -№1(13). ЦС. 5-12.
Публикации в других изданиях:
- Габунщина О.Д. Лейкоцитарные показатели верблюдов калмыцкой породы// Сб. научных статей Физиологические механизмы адаптации живых систем Сухум: издательство Абхазского государственного университета. 2011. - С. 33-40.
- Габунщина О.Д. Сезонные различия в протеиновом составе сыворотки крови чистопородных бактрианов калмыцкой породы// Тезисы. III съезд физиологов СНГ, Ялта, Украина, 2011. - С. 322.
Авторефераты по всем темам >>
Авторефераты по биологии