Авторефераты по всем темам >>
Авторефераты по химии
На правах рукописи
ОРЛОВ АНДРЕЙ ВЛАДИМИРОВИЧ
Модификация пентациклических тритерпеноидов лупанового ряда с использованием ацетилена в суперосновной среде КОН-ДМСО
02.00.03 - Органическая химия
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата химических наук
Уфа - 2012
Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Институте органической химии Уфимского научного центра Российской академии наук.
Научный руководитель: кандидат химических наук, доцент
Комиссарова Наталия Григорьевна
Официальные оппоненты: доктор химических наук, профессор
Ишмуратов Гумер Юсупович
кандидат химических наук, доцент
Савченко Римма Гафуровна
Ведущая организация: Федеральное государственное бюджетное учреждение науки
Институт органической и физической химии им. А.Е. Арбузова
КН - РАН (г. Казань)
Защита диссертации состоится л14 сентября 2012 г. в 16.00 часов на заседании диссертационного совета Д 002.004.01 в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Институте органической химии Уфимского научного центра Российской академии наук по адресу: 450054, Башкортостан, г. Уфа, проспект Октября, 71, зал заседаний; факс (347) 2356066; e-mail: chemorg@anrb.ru
С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Уфимского научного центра РАН.
Автореферат разослан л14 августа 2012 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета
доктор химических наук, профессор Ф.А. Валеев
Общая характеристика работы
Актуальность работы. Интенсивное изучение биологической активности растительных пентациклических тритерпеноидов и их синтетических аналогов, проводимое в мире на протяжении последних двух десятилетий, свидетельствуют о перспективности использования этого класса природных соединений для создания лекарственных препаратов, применяемых в лечении вирусных инфекций, туберкулеза, диабета, онкологических и многих других заболеваний человека. Поиск соединений с необходимыми фармакологическими характеристиками, предполагает создание массивов библиотек модификантов и стимулирует применение новых методов и реагентов для направленного введения в соединение-лидер функциональных групп и структурных фрагментов других биологически активных веществ. К простым и эффективным методам модификации можно отнести реакции ацетилена в суперосновных средах основание-ДМСО. Реакция кетоксимов с ацетиленом в сверхосновных средах (реакция Трофимова) позволяет одностадийно вводить в молекулы тритерпеноидов пиррольный фрагмент, отвечающий за многие виды биологической активности. Прямое винилирование тритерпеновых спиртов или кетоксимов в суперосновных каталитических системах приводит к О-виниловым эфирам, представляющим интерес как в качестве новых биологически активных соединений, так и интермедиатов для дальнейших трансформаций. Основными преимуществами данных реакций являются доступность и дешевизна используемых реагентов, экологичность и выполнение принципов лэкономии атомов (реакции, в которых все атомы исходных соединений входят в состав продукта).
Работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Института органической химии УН - РАН по темам Алкалоиды, терпеноиды и липиды - источник биологически активных соединений (регистрационный № 0120.0601535) и Химия, и биологическая активность растительных веществ флоры РФ; их биогенез и функция (регистрационный № 0120.0801441) при финансовой поддержке гранта Президента РФ Поддержка ведущих научных школ (НШ-1725.2008.3, НШ-3756.2010.3), Программы фундаментальных исследований Отделения химии и наук о материалах РАН (№ 10 ОХНМ), Программы Президиума Российской академии наук № 8, № 18, № 7), Российского фонда фундаментальных исследований (грант 08-03-90265-Узб_а), гранта Президента РФ в поддержку молодых российских ученых (МК-7360.2010.3) и Федеральной целевой программы Научные и научно-педагогические кадры инновационной России (гос. контракт 14.740.11.0367).
Цель работы: Синтез пиррольных и винилоксипроизводных пентациклических тритерпеноидов ряда лупана и олеанана потенциально биологически активных соединений и интермедиатов для дальнейших трансформаций с использованием реакций ацетилена в суперосновной среде KOH-ДМСО.
В соответствии с целью работы были поставлены следующие задачи:
- разработка методов получения по реакции Трофимова производных пентациклических тритерпеноидов ряда лупана с различной локализацией пиррольного/N-винилпиррольного цикла на основе С-3- и С-20-кетоксимов;
- изучение поведения в условиях реакции Трофимова диоксимов пентациклических тритерпеновых дикетонов и кетоальдегидов;
- изучение возможности получения О-винилкетоксимов в ряду пентациклических тритерпеноидов лупанового ряда;
- разработка методов получения О-виниловых эфиров пентациклических тритерпеновых спиртов и диолов прямым винилированием ацетиленом в суперосновной среде КОН-ДМСО;
- изучение поведения О-виниловых эфиров бетулина в реакциях циклопропанирования и 1,3-диполярного циклоприсоединения нитрилоксидов.
Научная новизна и практическая значимость. Впервые продемонстрированы возможности реакций нуклеофильного присоединения спиртов и кетоксимов к ацетилену в суперосновной среде основание/ДМСО для модификации пентациклических тритерпеноидов лупанового и 18(Н)-олеананового ряда. По реакции Трофимова получены новые представители гибридных структур тритерпеноид/пиррол(N-винилпиррол) - потенциальные биологически активные соединения и интермедиаты для последующих модификаций.
На основе реакции прямого О-винилирования ацетиленом в суперосновной среде КОН-ДМСО разработаны препаративные методы получения моно- и дивиниловых эфиров бетулина перспективных мономеров в синтезе полимерных материалов медицинского назначения и реакционноспособные винильные соединения для трансформаций С-3-, С-28-положений пентациклических тритерпеноидов.
Прямым винилированием оксимов 29-нор-лупан-20-онов ацетиленом в суперосновной среде КОН-ДМСО получены первые представители О-винилкетоксимов в ряду пентациклических тритерпеноидов новый тип стабильных О-винилкетоксимов ключевых интермедиатов реакции Трофимова. На примере реакций 18(Н)-олеанан-3,19,28-триола и диоксима 28-OTr-луп-20(29)-ен-2,3-диона обнаружен редкий случай внутримолекулярной циклизации с образованием тетрагидрофуранового или 1,2,5-оксадиазольного цикла в результате элиминирования винилового спирта, протекающей в условиях винилирования ацетиленом в суперосновной среде КОН-ДМСО. Изучено поведение О-виниловых эфиров бетулина в реакциях циклопропанирования дихлоркарбеном и 1,3-диполярного циклоприсоединения 4-метоксифенилнитрилоксида. Синтезированы новые производные пентациклических тритерпеноидов лупанового ряда, содержащие в положениях С-3, С-28 гем-дихлорциклопропановый или 4,5-дигидроизоксазольный цикл.
Установлено, что некоторые из полученных пиррольных производных ингибируют антикарнозиновую активность S.аAureus, антилизоцимную или антикарнозиновую активность K.аpneumoniae.
Апробация работы. Результаты исследований представлены на Международном конгрессе по органической химии, посвященном 150-летию теории строения органических соединений Бутлерова (Казань, 2011 г.); Международной научно-практической Интернет-конференции "Научные исследования и их практическое применение. Современное состояние и пути развития 2011." (Одесса, 2011 г.); Международной школе-конференции для студентов, аспирантов и молодых ученых Фундаментальная математика и её приложения в естествознании (Уфа, 2011 г.); Международном симпозиуме ASOC-2010 (Мисхор, Крым, 2010 г.); V Международной научно-технической конференции Инновации и перспективы сервиса (Уфа, 2008 г.); Международных конференциях Актуальные проблемы химии природных соединений (Ташкент 2009, 2010 гг.); XV Всероссийской конференции по органической химии с молодежной научной школой (Уфа, 2012 г.); Всероссийской конференции с элементами научной школы для молодежи Актуальные проблемы органической химии (Казань, 2010 г.); Всероссийской конференции по органической химии, посвященной 75-летию со дня основания Института органической химии им. Н.Д. Зелинского РАН (Москва, 2009 г.); научно-практической конференции Биологически активные вещества: фундаментальные и прикладные вопросы получения и применения (Новый свет, Крым, Украина, 2011 г.); VI и IX Республиканской конференции молодых ученых Научное и экологическое обеспечение современных технологий (Уфа, 2009 г., 2012 г.).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК и тезисы 14 докладов в сборниках докладов научных конференций и симпозиумов.
Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы на тему "Ацетилен и его производные в полном синтезе и модификациях алкалоидов и пентациклических тритерпеноидов", обсуждения результатов, экспериментальной части, выводов, списка цитируемой литературы и приложения. Работа изложена на 142 страницах (в том числе 6 страниц приложения), содержит 2 таблицы и 1 рисунок. Список цитируемой литературы включает 191 наименование.
Автор выражает благодарность заведующему лабораторией биоорганической химии ИОХ УН - РАН академику Марату Сабировичу Юнусову за постоянное внимание и консультации при выполнении данной работы.
ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Пентациклические тритерпеноиды лупанового и олеананового ряда содержат одну или несколько гидроксильных групп, легко трансформирующихся в оксимные функции, и являются перспективными субстратами реакций нуклеофильного присоединения спиртов и оксимов к ацетилену в суперосновных средах основание-ДМСО, открывающих подходы к новым функционализированным и гетероциклическим производным с потенциальной биологической активностью.
1. Реакция Трофимова в ряду пентациклических тритерпеноидов
Производные лупановых тритерпеноидов, содержащие конденсированный с кольцом А, D или E пиразиновый, хиноксалиновый, пиразольный, пиримидиновый или индольный цикл обладают цитотоксической активностью в отношении различных клеточных линий в ряде случае во много раз превосходящей активность бетулиновой кислоты. К моменту начала наших исследований в литературе отсутствовали сведения о подобных соединениях, содержащих пиррольный фрагмент. Позднее появилось сообщение о синтезе N-Bn-4-фенилпирроло[2,3-b]лупан-28-овой кислоты, полученной конденсацией бензиламина с дигидробетулоновой кислотой и последующим взаимодействием по Михаэлю образующегося имина с PhCH=CHNO2. Интерес к пиррольному фрагменту связан с его присутствием в качестве ключевого структурного звена в молекулах основных жизнеобеспечивающих природных соединений и различных фармацевтических препаратов. Разработка методов синтеза гибридных молекул пентациклических тритерпеноидов с пиррольным циклом открывает подходы к биологически активным соединениям с новыми или улучшенными фармакологическими свойствами.
Эффективным способом формирования конденсированного пиррольного цикла является реакция Трофимова, сделавшая доступным большое число ранее неизвестных пиррольных и N-винилпиррольных соединений различного строения, но практически не изученная в приложении к высшим терпеноидам.
Оксимы 3-кетопроизводных пентациклических тритерпеноидов лупанового ряда являются удобными объектами реакции Трофимова. Присутствие в -положении к 3-кетогруппе гем-диметильного заместителя обеспечивает образование оксима в виде одного изомера и региоспецифичность гетероциклизации оксимов с ацетиленом.
Реакция Трофимова изучена нами на примере оксимов С-3-кетонов с различной функциональностью в положении С-28 и С-19.
_________
Автор глубоко признателен сотрудникам Иркутского института химии им. А.Е. Фаворского СО РАН д.х.н. проф. А.И. Михалевой и д.х.н. А.М. Васильцову за консультации, оказанные при подготовке эксперимента.
1.1. Синтез пирроло[2,3-b]-лупанов из оксимов тритерпеновых 3-кетонов
Для разработки метода нами использован оксим 28-OTr-лупен-3-она (1), выбор которого обусловлен его доступностью и устойчивостью тритильной группы в суперосновных условиях реакции.
Схема 1
В большинстве случаев пирролизация кетоксимов ацетиленом в суперосновных средах протекает при 80-120оС, часто при давлении 14-23 атм. в широком временном интервале от 5 мин до 8 ч. В качестве основания обычно используют доступный и наиболее эффективный в этих реакциях КОН, реже NaOH, LiOH и t-BuOK. Для оптимизации условий применяют добавки, повышающие основность среды, такие как CsF. Выходы пирролов в реакции Трофимова, в зависимости от природы субстрата, варьируются от 3% до 90%1
.
Взаимодействие кетоксима (1) с ацетиленом в суперосновной среде КOH-ДМСО протекало при атмосферном давлении при температуре 65-80С с образованием двух соединений пиррола (2) и N-винилпиррола (3), которые выделяли в индивидуальном виде методом КХ на Al2O3.
Таблица 1. Влияние условий реакции оксима (1)* с ацетиленом на выходы соединений (2) и (3) (атм. давление, KOH-ДМСО)
N пп | Соотношение, (1):КОН:ДМСО | Т, оС | Время, мин | Выход, % | |
(2) | (3) | ||||
1 2 3 4 5 | 1:10:330 1:5:330 1:5:100 1:5:100 1:5:100** | 65 80 80 80 80 | 15 50 25 240 60 | 41 46 60 - - | 15 13 14 13 следы |
*Во всех случаях конверсия (1) - 100%, ** P = 16 атм
Было изучено влияние условий реакции на выходы пиррольных производных (2) и (3) (Табл. 1). Так, при одинаковом соотношении (1):ДМСО=1:330 (Табл. 1, примеры 1, 2) увеличение количества щелочи позволяло снизить температуру и сократить время реакции, не влияя практически на выходы (2) и (3). При соотношении (1):KOH:ДМСО =1:5:100 через 25 мин выходы соединений (2) и (3) после хроматографической очистки составили 60% и 14% (Табл. 1, пример 3). Увеличение продолжительности реакции до полной конверсии образующегося пиррола (2) с целью повышения выхода N-винилпиррольного производного (3) приводили к осмолению реакционной массы и повышению доли побочных неидентифицируемых продуктов.
Схема 2
Выход (3) в данном случае не превышал 13% (Табл. 1, пример 4). Проведение реакции при повышенном давлении в автоклаве (начальное давление ацетилена 16 атм., 1 ч) также сопровождалось сильным осмолением, затруднявшим выделение N-винилпиррола (3), образование которого в минорных количествах было зафиксировано по спектру ЯМР 1Н.
Соотношение оксим:KOH:ДМСО=1:5:100 выбрано нами в качестве базового для проведения реакции Трофимова с оксимами (6), (7), (18), (25).
Селективное образование пиррольных производных (8) (46%) и (9) (49%) наблюдалось при взаимодействии оксимов (4) и (5) с ацетиленом при соотношении (оксим):ДМСО = 1:330 при 100оС и 80оС соответственно. Оксим (5) получен гидролизом известного 3-гидроксииминолупен-20(29)-ен-28-ил ацетата действием Са(ОН)2 (МеОН-СHCl3).
Взаимодействие оксима лупенона (6) с ацетиленом в суперосновной среде КОН-ДМСО (разбавление 1:100, P атм), протекало при 120С в течение 25 мин с образованием в качестве основного продукта N-винилпиррола (11) (38%) и минорного пиррольного производного (10) (10%).
В ряду лупановых тритерпеноидов с 2,3-конденсированным индольным циклом наиболее активными цитостатиками являются соединения, содержащие С-28-амидную или карбоксильную функцию и незамещенный атом азота в гетероцикле. Синтез пиррольных производных на основе тритерпеновых С-28 карбоновых кислот по реакции Трофимова осложняется выделением целевых продуктов из-за образования солей в суперосновной среде, тогда как использование С-28 амидов позволяет избежать этих осложнений.
На примере оксима 3-кето-28-бензиламида бетулоновой кислоты нами показана возможность получения по реакции Трофимова пиррольных производных лупановых С-28-амидов. Реакция ацетилена с амидом (7) гладко протекала в стандартных условиях при соотношении (оксим):КОН:ДМСО=1:5:100, 80оС с образованием пиррола (12) (выход 65%) и N-винилпиррола (13) (выход 21%).
Оксимы (4) и (7) получены соответственно из 28-OTr-лупан-3-она (14) и бензиламида бетулоновой кислоты (15) оксимированием действием NH2OHHCl (MeOH-Py, кип. 4 ч). Кетон (14) синтезирован обработкой дигидробетулина (16) TrCl (4-ДМАП, ДМФА, кип. 8 ч) и окислением полученного 28-OTr-лупан-3-ола (17) действием ПХХ в CH2Cl2. Бензиламид (15) синтезирован из бетулоновой кислоты и бензиламина хлорангидридным методом (1. (COCl)2, CH2Cl2, 2 ч; 2. BnNH2, Et3N, CH2Cl2, 1,5 ч).
Структура соединений (2), (3) и (8)-(13), однозначно установлена методом ЯМР 1Н и 13С спектроскопии2. Спектры ЯМР 1Н пирролов (2), (8)- (10), (12) содержали набор характеристичных равноинтенсивных сигналов протонов пиррольного цикла в области 5.80-5.85 м.д. (Н-4') и 6.62м.д. (Н-5') и уш. синглет в области 7.7 м.д. (NH). В спектре ЯМР 13С сигналы атомов углерода пиррольного цикла наблюдались в области 107.5 (C-4), 113.7 (C-3), 115.8 (C-5), 133.5-133.9 м.д. (C-2). Присутствие N-винильной группы в спектрах ЯМР 1Н подтверждали три однопротонных сигнала при 4.57 д (HA, J 8.6), 4.98 д (HB, J 15.5) и 7.17дд (HX, J 15.5, 8.6), а в спектре ЯМР 13С сигналы в области 97.8 м.д. (N-винил, C-) и 133.4 м.д. (N-винил, C-).
1.2. Синтез пирроло[2,3-b]-луп-20(29)-ен-28-карбонитрила
Альдоксимы в условиях реакции Трофимова претерпевают 1,2-дегидратацию с образованием нитрилов. Вовлечение в реакцию Трофимова кетоальдоксима бетулонового альдегида (18) позволяет в одну стадию вводить в молекулу тритерпеноида пиррольный цикл и нитрильную группу часто ответственных за биологическую активность соединений.
Взаимодействие кетоальдоксима (18) с ацетиленом ((18):KOH:ДМСО = 1:5:100, 80С) протекало без осложнений, приводя через 40 мин к образованию пирроло[2,3-b]-луп-20(29)-ен-28-карбонитрила (19) и его N-винилпиррольного производного (20) с выходами 60% и 13% соответственно (Табл. 2, пример 1). Повышение температуры реакции до 100С позволяло повысить выход
Схема 3
N-винилпиррола (20) до 36% (КХ, Al2O3). Пиррольное производное (19) в данном случае обнаружено не было. При уменьшении соотношения (18):ДМСО до 1: 50 пиррольные производные (19) и (20) были выделены с выходами 50% и 3% соответственно. Использование в реакции Трофимова гидроксида натрия часто позволяет остановить процесс на стадии пирролизации. В нашем случае замена KOH на NaOH приводила к образованию смеси (19) (36%) и (20) (9%) c преобладанием первого из них, увеличивало продолжительность реакции и снижало общий выход продуктов. Спектры ЯМР 1Н и 13С соединений (19) и (20), аналогично указанным выше пиррольным производным, содержали весь набор характеристичных сигналов пиррольного цикла и N-винильной группы.
Таблица 2. Влияние условий реакции диоксима (18)* с ацетиленом на выходы соединений (19) и (20) (P атм.)
N пп | Соотношение, (18):МОН:ДМСО** | Т, оС | Время, мин | Выход, % | |
(19) | (20) | ||||
1 2 3 4 | 1:5:100 1:5:100 1:5:100 1:5:50 | 80 100 80 80 | 40 50 120 60 | 60 - 36 50 | 13 36 9 3 |
*Во всех случаях конверсия (18) - 100%; **M = К (примеры 1,2,4); M=Na (пример 3)
Рис. 1. Молекулярная структура соединения (19)
Сигнал атома С-28 в углеродном спектре наблюдался при 123.47 м.д. (CN). Структура луп-20(29)-ен-28-карбонитрила (19) подтверждена также методом РСА3 (Рис. 1).
Таким образом, на широком круге оксимов тритерпеновых 3-кетонов лупанового ряда, продемонстрирована возможность применения реакции Трофимова для синтеза тритерпеноидов, конденсированных с пиррольным или N-винилпиррольным циклом. Умеренные выходы получаемых соединений компенсируются уникальностью их структур и доступностью реагентов.
2. Синтез 1,2,5-оксодиазоло[2,3-с]-28-OTr-луп-20(29)-ена
из диоксима 2,3-дикетона
С целью расширения круга объектов вовлекаемых в реакции с ацетиленом изучено поведение 2-гидроксиимино-3-кетона (22) и 2,3-диоксима (23) в суперосновной среде KOH-ДМСО.
2-Гидроксиимино-3-кетон (22) получали оксимированием кетона (21) изоамилонитритом в присутствии t-BuOK, а диоксим (23) обработкой (22) NH2OHHCl в растворе MeOH-Py.
Взаимодействие ацетилена с 2-кетоксимом 2,3-дикетона (22) в суперосновной среде КОН-ДМСО (80оС, P атм, 1 ч, (22):ДМСО=1:100) приводило к сильному осмолению реакционной массы с образованием неидентифицируемой смеси продуктов.
Схема 4
Реагенты и условия: a: t-BuOK/t-BuOH, i-AmNO2, 2 ч; б: NH2OHHCl, Py, MeOH, кип., 4.5 ч; в: ацетилен, КОН-ДМСО, 80С, 1 ч
Взаимодействие диоксима 2,3-дикетона (23) с ацетиленом в тех же условиях давало 1,2,5-оксадиазол (24), выход которого составил 60% (КХ, Al2O3). Образование оксадиазола (24) возможно в результате О-винилирования наименее стерически затрудненной С-2-кетоксимной группы и последующего внутримолекулярного нуклеофильного замещения винилиоксигруппы, образующимся в основной среде оксимат-анионом, с элиминированием винилового спирта из интермедиата А. При нагревании диоксима (23) (80оС, 7 ч) в растворе КОН-ДМСО в отсутствии ацетилена диоксим не претерпевает изменений, что подтверждает участие ацетилена в процессе циклизации. Ранее образование 1,2,5-оксадиазольного цикла наблюдали Трофимов Б.А. с сотр. в реакции ацетилена с дифенилглиоксимом в суперосновной системе KOH-ДМСО (100оС, 14 атм, 1ч, выход 22%).
Циклизация глиоксимов под действием ацетилена в суперосновной среде КОН-ДМСО вероятно, может служить способом формирования конденсированного 1,2,5-оксадиазольного цикла при условии толерантности соединений к суперосновным условиям реакции.
3. О-Винилирование кетоксимов в ряду пентациклических тритерпеноидов
Реакция ацетилена в суперосновной средах с кетоксимами, не содержащими метиленовой группы в -положении, служит общим методом синтеза О-винилкетоксимов - ключевых интермедиатов в синтезе пирролов по Трофимову. К настоящему времени накоплен большой опыт использования данного метода в синтезе различных О-винилоксимов, выходы которых в одних случаях составляют несколько процентов, а в других приближаются к количественным.
3.1. Синтез 20-О-винилоксикетоксимов и С-19-пирролов на основе 3,28-диметокси-29-нор-лупан-20-она
Нами описан первый пример синтеза O-винилкетоксимов в ряду пентациклических тритерпеноидов лупанового ряда из кетоксимов 3,28-дигидрокси- и 3,28-диметокси-29-нор-лупан-20-онов (25)-(E) и (26)-(E)4
. Винилирование оксима дигидрокси-29-нор-лупан-20-она (25) ацетиленом в суперосновной среде KOH/ДМСО (разбавление 1:330, 80оС, 75 мин.) протекало с образованием дивинилоксипроизводного (30), наряду с минорным количеством тривинилоксипроизводного (31) и значительной доли продуктов осмоления. С выходом ~20% выделена смесь О-винильных производных (30) и (31) в соотношении ~ 9:1 (ЯМР 1Н). В спектре ЯМР 1Н первому из них принадлежал двойной набор сигналов в области 3.97-4.55 (все дд, О-винил, О-винилоксим) и два дублета дублетов при 6.53 и 6.87 м.д. (HX, О-винил и О-винилоксим). В углеродном спектре О-винилоксигруппам соответствовали сигналы 85.76, 87.11 м.д. (C-, О-винил, О-винилоксим) и сигнал при 152.59 м.д. (C-, О-винил, О-винилоксим). О присутствии в смеси соединения (31) свидетельствовал малоинтенсивный характеристический сигнал при 6.35 м.д. (HX, С3-О-винил).
Схема 5
Реагенты и условия: a: O3, CH2Cl2, -60С, Me2S; б: NH2OHHCl, Py, MeOH, кип., 6 ч; в: Ca(OH)2, 70 ч, 50C; г: ацетилен, КОН/ДМСО, 80С, 75 мин.
Защита ОН-групп оксима (25)-(E) позволяет свести к минимуму процессы полимеризации, протекающие с участием О-винильных двойных связей. Винилирование оксима (26)-(E) в суперосновной среде КОН-ДМСО при 80оС (разбавление 1:100) через 15 мин приводило О-винилкетоксиму (32) с выходом 66% (КХ, Al2O3). Спектры ЯМР 1Н и 13С содержали сигналы протонов О-винилоксимной группы при 4.05, 4.52 и 6.85 (все дд, НА, HB, HX) и сигналы атомов углерода при 86.97 (С-) и 152.54 м.д. (С-). Оксим (25)-(E) получен гидролизом оксима (29)-(E). Оксимы (29)-(E), (26)-(E) получены озонолизом диацетокси- или диметоксибетулина (27), (33) и последующим оксимированием кетонов (28) и (34).
При повышении температуры реакции до 110С реакция оксима (26)-(E) с ацетиленом приводит к образованию производного (35) с N-винилпиррольным циклом в С-19-боковой цепи с выходом 4% (без оптимизации). В спектре ЯМР 1Н соединения (35) сигналы протонов пиррольного цикла наблюдались при 5.87 (H-4'), 6.10 (H-3') и 6.85 м.д. (H-5'). В спектре ЯМР 13С пиррольному циклу соответствовали сигналы при 104.63 (C-4'). 108.97 (С-3'), 115.38 м.д. (C-5') и синглет при 140.02 м.д. (С-2').
Схема 6
Таким образом, на основе реакции 20-кетоксимов с ацетиленом получены первые представители нового типа функционализированных производных пентациклических тритерпеноидов О-винилкетоксимы, представляющие интерес в качестве мономеров и интермедиатов для дальнейших модификаций.
4. О-Винилирование тритерпеновых спиртов ряда лупана и 18(Н)-олеанана
Трансформация гидроксильной функции тритерпеновых спиртов в оксивинильную переводит их в разряд высокореакционноспособных ,- ненасыщенных соединений, способных вступать в реакции циклоприсоединения, гетеродиенового синтеза, гомо- и сополимеризации, открывая тем самым подходы к новым гетероциклическим производным и полимерным соединениям медицинского назначения.
Винилирование спиртов ацетиленом в суперосновной среде КОН-ДМСО изучено нами на примере бетулина (36) и других доступных гидроксилсодержащих пентациклических тритерпеноидов лупанового и 18(H)-олеананового ряда - дигидробетулина (16), 28-трифенил-метилоксилуп-20(29)-ен-3-ола (39), аллобетулина (43) и 18(H)-олеанантри-3,19,28-ола (45). Рассмотрено также поведение О-виниловых эфиров бетулина в реакциях циклопропанирования дихлоркарбеном по Макоши и 1,3-диполярного циклоприсоединения ароматических нитрилоксидов.
4.1. Синтез О-виниловых эфиров тритерпеновых спиртов ряда лупана
Основываясь на литературных данных и используя свой опыт, нами разработаны способы получения ди- и моновиниловых эфиров (37) и (38) О-винилированием бетулина (36) ацетиленом в суперосновной среде КОН-ДМСО. Так, диэфир (37) получен винилированием (36) в стальном автоклаве при давлении ацетилена 19 атм, 80оС (1 ч) и соотношении (36):КОН:ДМСО=1:3:15. Моновиниловый эфир (38) синтезирован винилированием (36) при атмосферном давлении (80оС, 2.5 ч) и соотношении (36):КОН:ДМСО=1:5:100. Эфиры (37) и (38) выделены c выходами 58% и 78% (КХ, SiO2/Et3N). Вторичная винилоксигруппа эфира (37) легко подвергается гидролизу в процессе хроматографирования на силикагеле, не обработанном Et3N. Полный гидролиз с образованием (36) происходит при продолжительном контакте эфира (37) с сорбентом или при обработке раствора эфира в EtOAc или МТБЭ в присутствии следов кислоты (HCl, H2SO4, AcOH).
Схема 7
Реагенты и условия: а: ацетилен, КОН-ДМСО, 16 атм., 80С, 1 ч;
б: ацетилен, КОН-ДМСО, 80С, 2,5 ч; в: ацетилен, КОН-ДМСО, 130С, 2 ч;
Винилирование других спиртов ряда лупана - дигидробетулина (16) и 28-трифенилметилоксибетулина (39) при прочих равных условиях протекало
с полной конверсией исходных спиртов при 80оС (1 ч 45 мин) и при 130оС (2 ч). Моно- и дивиниловый эфиры дигидробетулина (41) и (42) получены с выходами 22% и 16% (КХ, SiO2/Et3N) соответственно. Преобладающими в данном случае являются продукты дальнейшего взаимодействия образующихся винилоксипроизводных с ацетиленом. 3-О-Виниловый эфир (40) получен с выходом 52% (SiO2/Et3N). Следует отметить, что винилирование вторичной 3-ОН-группы в бетулине (36) и в дигидробетулине (16) протекает при более низкой температуре, чем в 28-ОTr-защищенном спирте (39). Более легкое винилирование, по сравнению с винилированием спиртов, описано для моновиниловых эфиров 1,2- и 1,3-диолов простого строения, что объясняют их способностью участвовать в реакциях, активируемых щелочами5.
Дивиниловый эфир (37) устойчив при хранении в течение длительного времени (более двух лет), тогда как моновиниловые эфиры (38), (41) и 3-винилоксипроизводное (40) с течением времени переходят в исходные спирты.
В спектре ЯМР 1Н дивинилового эфира (37) присутствовали шесть однопротонных дублетов дублетов при 6.35 м.д. (С-3-О-винил, HX, J 14.4, 6.8 Гц) и 6.55 м.д. (С-28-О-винил, HX, J 14.4, 6.8 Гц), 3.94 м.д. (С-28-О-винил, НА, J 6.8, 1.8 Гц), 3.97 м.д.(С-3-О-винил, НА, J 6.8, 1.3 Гц), 4.17 (28-О-винил, НB, J 14.4, 1.8 Гц) и 4.27 (С-3-О-винил, НB, J 14.4, 1.3 Гц). ЯМР 1Н моновинилового эфира (37) содержал один набор аналогичных сигналов при 6.55, 3.95 и 4.17 м.д. Cпектры ЯМР 13С эфиров (37) и (38) полностью соответствовали предлагаемым структурам.
Схема 8
С использованием импульсной последовательности INADEQUATE измерены значения КССВ 13С-13С между ядрами углерода С-С обеих О-винильных групп дивинилового эфира (37), которые являются критерием их конформационного состояния6. Так, величина КССВ 1J,(C-28) = 78.35 Гц свидетельствуют о предпочтительной s-цис-конформация для С28-винилоксигруппы (лит. 1Js-цис = 78.5-79.3; 1Js-транс = 80.9-84 Гц). Тогда как,
С3-винилоксигруппа эфира (37) существует в растворе в виде равновесной смеси s-цис- и s-транс-конформеров - 1J,(C-3) = 80.08 Гц ( лит. 1J, ~79.6-80.2 Гц).
- Винилирование тритерпеновых спиртов ряда 18(Н)-олеанана ацетиленом в суперосновной среде КОН-ДМСО
Пентациклические тритерпеноиды ряда олеанана наряду с лупановыми тритерпеноидами рассматриваются в качестве перспективных соединений природного происхождения для создания лекарственных препаратов нового поколения различного фармакологического действия. Аллобетулин (43) один из наиболее доступных тритерпеноидов ряда 18(Н)-олеанана, легко получаемый кислотно-катализируемой перегруппировкой бетулина (36). Триол (45) был синтезирован недавно благодаря разработанным простым способам получения из (36).
Винилирование аллобетулина (43) ацетиленом в суперосновной системе КОН/ДМСО протекало гладко при атмосферном давлении при 110оС с образованием винилового эфира (44) с выходом 77% (флэш-хроматография на SiO2/Et3N). Так же, как и в случае виниловых эфиров бетулина C3- винилоксигруппа в эфире (44) егко подвергается гидролизу в процессе хроматографирования на силикагеле, необработанном Et3N, с образованием исходного аллобетулина (43).
Схема 9
В результате винилирования триола (45) можно было ожидать образование нескольких региоизомерных винилоксипроизводных и продукта исчерпывающего винилирования.
Схема 10
Реагенты и условия: а: ацетилен, KOH-ДМСО,
соотношение (45):ДМСО = 1:40, 110оС, 1,5 ч
Однако взаимодействие (45) с ацетиленом в присутствии каталитической системы KOH-ДМСО при 110оС в течение 1,5 ч приводило к образованию аллобетулина (43) и эфира (44) в соотношении ~1:3. Превращение (45) в (43), протекает, по-видимому через селективное винилирование первичного С-28-гидроксила с образованием промежуточного эфира (45a) и последующую внутримолекулярную циклизацию в результате элиминирования винилового спирта. Винилирование стерически затрудненной 3-ОН-группы, как видно на примере бетулина (36) и аллобетулина (43), требует более жестких условий и замыкает последовательность указанных превращений. Участие винилоксигруппы в образовании тетрагидрофуранового цикла подтверждается инертностью триола (45) при нагревании (80оС-110оС) в растворе ДМСО-КОН в отсутствии ацетилена. Данное превращение является примером внутримолекулярной циклизации цис-диолов, характеризующим винилоксигруппу, как хорошую уходящую группу. В литературе описана подобная циклизация с образованием винилового эфира морфолина протекающая при нагревании дивинилового эфира триэтаноламина (170оС) в присутствии щелочи.
- Реакции циклизации на основе виниловых эфиров бетулина
Реакции циклизации с участием электронодонорной двойной связи виниловых эфиров спиртов являются одним из способом синтеза биологически активных соединений, содержащих карбо- или гетероциклические фрагменты. Многие из этих реакций протекают в присутствии кислотных катализаторов. Виниловые эфиры бетулина (37) и (38) относятся к кислоточувствительным соединениям, поэтому круг реакций, протекающих с их участием, достаточно ограничен. В связи с этим нами выбраны два типа реакций, простых в исполнении и не требующих кислых условий: 1,3-диполярное циклоприсоединение нитрилоксидов с образованием дигидроизоксазолов и цикло-пропанирование дихлоркарбеном, генерируемым по методу Макоши.
5.1. 1,3-Диполярное циклоприсоединение нитрилоксида анисового альдегида
Сообщения о реакциях 1,3-диполярного циклоприсоединения виниловых эфиров и арилнитрилоксидов носят в литературе единичный характер и содержат, как правило скудные сведения о регио- и стереоселективности процесса. В качестве источника нитрилоксидов нами были опробованы оксимы бензальдегида, анисового альдегида (46), ванилина и 2,3-диметоксибензальдегида, варьировался порядок прибавления реагентов, степень разбавления, природа растворителя (CHCl3, ДМФА). Для генерирования нитрилоксидов использована система N-хлорсукцинимид-Py в СHCl3. В большинстве изученных реакций образовывались трудноидентифицируемые смеси соединений. Результаты, поддающиеся интерпретации, получены нами в реакции эфиров (37), (38) с альдегидом (46) (соотношение эфир : альдегид 1:2).
Так, взаимодействие эфиров (37) или (38) с нитрилоксидом, генерируемым из (46), приводило к образованию многокомпонентных смесей соединений. В первом случае нами идентифицированы региоизомерные гомо-4,5-дигидроизоксазолы (47а,б) (5'R/5'S) и (48а,б) (4'R/4'S) (выход 24%, КХ), во втором - один из региоизомеров бис-4,5-дигидроизоксазол (49а-г) (5'R/5'S,5''R/5''S) (выход 26%, КХ, SiO2). Образование продукта региоспецифичного присоединения нитрилоксида по обеим двойным связям обусловлено, по-видимому, взаимным стерическим влиянием двух винилоксигрупп.
Cхема 11
Идентификация полученных изоксазолов проведена на основании данных 1D- и 2D-спектров ЯМР 1Н и 13С смесей (47а,б) и (48а,б) и (49а-г). В углеродных спектрах указанных соединений каждый из атомов углерода тритерпенового скелета представлен группой из четырех или двух (при совпадении хим. сдвигов) сигналов. В спектре ЯМР 1Н региоизомерной смеси соединений (47а,б) (5'R/5'S) и (48а,б) (4'R/4'S) первому из них соответствуют сигналы ацетальных H-5'-протонов в области 5.6 м.д. и сигналы протонов На-4' и Нб-4' в области 3.2-3.4 м.д. В спектре ЯМР 13С ацетальным С-5'-атомам углерода соответствуют сигналы с близкими хим. сдвигами в области 103 м.д. Сигналы протонов изоксазольного цикла в (48а,б) перекрываются сигналами других протонов оксасодержащих групп и идентифицированы из двумерных спектров. В спектре COSY НН для атомов Н-4', На-5' и Нб-5' диастереомеров (48а,б) наблюдаются кросс-пики (3. м.д.1-3.6 м.д.), (3.4 м.д.-3.6 м.д.) и (3.8 м.д.-3.3 м.д.), которым по данным спектра HSQC соответствуют сигналы углеродных атомов в области 70 м.д. Сигналы диастереотопных атомов На-28 и Нб-28 в одних стереомерах магнитно эквивалентны и имеют вид синглета (3.60 м.д.), а в других - наблюдаются в виде двух дублетов при 3.2 м.д. и 3.9 м.д. (J 9 Гц). В спектре ЯМР 1Н бис-4,5-дигидроизоксазолов (49а-г) характеристичными являются четыре равноинтенсивных дублета ацетальных Н-5'- и Н-5"-протонов в области 5.6-5.8 м.д., которым в углеродном спектре соответствуют сигналы в области 99.0 и 105.43 м.д. (C3-изоксазол, С-5') и в области 103 м.д. (C28-изоксазол, С-5''). Сигналы протонов На-4' и Нб-4' находятся в области 3.2 и 3.4 м.д.
В реакции дивинилового эфира (37) с 2 экв. нитрилоксида наряду с 4,5-дигидроизоксазолами (49а-г) (выход 24%) были выделены 3-гидрокси-28-гомо-4,5-дигидроизоксазолы (47а,б) (6%). Образование последних происходит, вероятно, в результате гидролиза при хроматографировании 28-гомо-аддуктов дивинилового эфира (37) и нитрилоксида. Отсутствие второго региоизомера существенно упрощало интерпретацию спектра ЯМР 1Н и подтверждало правильность отнесений, сделанных ранее. В спектре соединения (47а,б) присутствовали только сигналы характеристичных ацетальных Н-5'-протонов в области 5.6 м.д. и сигналы протонов На-4' и Нб-4' - в области 3.2 м.д.
5.2. Циклопропанирование дихлоркарбеном по Макоши
Реакция дивинилового эфира бетулина (37) с дихлоркарбеном, генерируемым из CHCl3 (50% NaOH, ТЭБАХ), приводит к продукту исчерпывающего циклопропанирования с образованием всех возможных диастереомеров (50) (60%, КХ, SiO2). Ранее на примере диацетата бетулина (27) нами показана высокая стереоселективность циклопропанирования С-20-двойной связи дихлоркарбеном (20R/20S ~ 95:5), которая сохраняется и в данном случае. На основании данных ЯМР спектров аддукта (50) установлено, что циклопропанирование С-3-О-винильный связи (37) протекает стереоселективно (32R(S)/32S(R) ~ 3:1), а С-28-О-винильной связи - с потерей стереоселективности (33R/33S ~ 1:1).
Схема 12
Соотношение диастереомеров установлено по интенсивности сигнала протона Н-3 (3.05 и 3.34 м.д.) в спектре ЯМР 1Н. Полное отнесение сигналов в спектре ЯМР 13С позволило установить, что в С-32-диастереомерах магнитно неэквивалентными являются атомы углерода соответствующего циклопропанового цикла (C-, 60.65 и 63.55 м.д.) и колец А, В, а в С-33 диастереомерах - атомы углерода С-28 (66.25 и 69.66 м.д.), циклопропанового цикла (C-, 62.84 и 63.73 м.д.) и колец D и Е. Диагностическими сигналами 20S-стереомеров являются сигналы четвертичных атомов углерода тритерпенового остова и циклопропанового фрагмента (C-31, 70.61, 70.51, 70.90, 71.00 м.д.).
6. Биологическая активность соединений (2) и (19)
Получены первичные сведения о влиянии пиррольных производных (2), (19) на факторы персистентности микроорганизмов7 антилизоцимную (АЛА) и антикарнозиновую (АКрА) активность. Материалом для исследования служили штаммы S. aureus и K. pneumoniae.
В экспериментах inаvitrо установлено, что изученные соединения оказывают разноплановое действие на АЛА и АКрА указанных микроорганизмов. Так, пиррол (2) в концентрации 15 мг/мл стимулирует АЛА и АКрА S.аaureus и умерено подавляет АЛА и АКрА K. pneumoniae. Пирролокарбонитрил (19) в концентрации 5 мг/мл повышает уровень антилизоцимного признака S. aureus и антикарнозинового признака K.аpneumoniae и эффективно (на 96%) подавляет антикарнозиновый признак S.аaureus. В отличии от пиррольных производных бетулин (36) (c 40 мг/мл) не оказывает влияния на АЛА и АКрА S. aureus, но ингибирует АЛА и АКрА K. pneumoniae на 64 и 50% соответственно.
Определена острая токсичность соединения (19)8. Установлено, что по степени воздействия на организм соединение (19) относится к четвертому классу опасности.
ВЫВОДЫ
1. Разработаны эффективные способы получения производных пентациклических тритерпеноидов лупанового ряда, содержащих пиррольный/N-винилпиррольный фрагменты, основанные на реакции Трофимова.
2. Разработаны препаративные способы селективного и исчерпывающего О-винилирования ацетиленом в суперосновной среде КОH-ДМСО тритерпеновых спиртов ряда лупана и 18(Н)-олеанана.
3. Прямым винилированием кетоксима 3,28-диметокси-29-нор-луп-20(29)-ен-20-она ацетиленом в суперосновной среде KOH-ДМСО получен первый представитель новой группы O-винилкетоксимов.
4. Обнаружена внутримолекулярная циклизация с образованием тетрагидрофуранового или 1,2,5-оксадиазольного циклов, протекающая в результате элиминирования винилового спирта при взаимодействии 18(Н)-олеанан-3,19,28-триола или диоксима луп-20(29)-ен-2,3-диона с ацетиленом в суперосновной системе KOH-ДМСО.
5. На основе О-виниловых эфиров бетулина 1,3-диполярным циклоприсоединением п-метоксифенилнитрилоксида и циклопропани-рованием дихлоркарбеном по реакции Макоши получены 28-гомо- и 3,28-бис-4,5-дигидроизоксазольные и три-(гем-дихлорциклопропановые) произ-водные бетулина.
Основное содержание работы изложено в следующих публикациях:
1. Орлов А.В., Хазипова Г.Р., Комиссарова Н.Г., Шитикова О.В., Спирихин Л.В., Юнусов М.С. Синтез 2,3-аннелированных с пирролом производных бетулина по реакции Трофимова // Химия природных соединений. 2010. № 6. С. 771774.
2. Орлов А.В., Комиссарова Н.Г., Шитикова О.В. Синтез виниловых эфиров бетулина прямым винилированием ацетиленом в суперосновной среде ДМСО/КОН // Химия в интересах устойчивого развития. - 2011. №19. - С. 223Ц226.
3. Орлов А.В., Комиссарова Н.Г., Шитикова О.В., Юнусов М.С. Синтез N-винилпирроло[2,3-b]луп-20(29)-ена из оксима лупенона по реакции Трофимова // Научные исследования и их практическое применение. Современное состояние и пути развития 2011: Материалы Международной научно-практической конференции. 4-15 октября 2011 г. Т. 28. Одесса: Внешрекламсервис. 2011. С. 32-35.
4. Орлов А.В., Комиссарова Н.Г., Янборисов В.М., Юнусов М.С. О-виниловые эфиры бетулина. Синтез и превращения. // Инновации и перспективы сервиса: сборник научных статей V Международной научно-технической конференции. 23 декабря 2008 г. Уфа: РИО УГАЭС. 2008. С. 185187.
5. Орлов А.В., Галеева Л.У., Комиссарова Н.Г., Юнусов М.С. Синтез О-виниловых эфиров тритерпеновых спиртов ряда лупана и германикана винилированием ацетиленом в суперосновной среде // Abs. Int. Symposium ASOC, Miskhor, Crimea. 2010. June 21-25. P. 165.
6. Orlov A.V., Khazipova G.R., Komissarova N.G., Yunusov M.S. The first synthesis of O-vinylketoxymes in the pentacyclic triterpenoids series. // Abs. Int. Congress on Organic Chemistry dedicated to the 150-th anniversary of the ButlerovТs Theory of Chemical Structure of Organic Compounds. Kazan. 2011. September 18-23. P. 379.
7. Орлов А.В., Комиссарова Н.Г., Шитикова О.В., Юнусов М.С. Винилирование тритерпеновых спиртов и кетоксимов ацетиленом в суперосновной среде КОН-ДМСО // Тезисы докладов Международной школы-конференции для студентов, аспирантов и молодых ученых Фундаментальная математика и её приложения в естествознании. - Уфа 2011. - С. 197.
8. Орлов А.В., Комиссарова Н.Г., Янборисов В.М., Юнусов М.С. Синтез пиррольных и N-винилпиррольных производных тритерпеноидов лупанового ряда по реакции Трофимова // Тезисы докладов конференции Актуальные проблемы химии природных соединений. Ташкент 2009. С. 318.
9. Орлов А.В., Комиссарова Н.Г., Янборисов В.М., Юнусов М.С. Синтез А-конденсированных пиррольных производных тритерпеноидов лупанового ряда по реакции Трофимова // Тезисы докладов Всероссийской конференции по органической химии, посвященной 75-летию со дня основания Института органической химии им. Н. Д. Зелинского РАН. - Москва 2009. - С. 330.
10. Орлов А.В., Комиссарова Н.Г., Юнусов М.С. Винилирование олеанан-3,19,28-триола ацетиленом в суперосновной каталитической системе t-BuOK/ДМСО // Тезисы докладов конференции Актуальные проблемы химии природных соединений. Ташкент 2010. С. 183.
11. Орлов А.В., Дубовицкий С.Н., Уткина Т.М., Карташова О.Л. Антиперсистентные и антиоксидантные свойства бетулина и его пиррольных производных // Тезисы докладов Всероссийской конференции с элементами научной школы для молодежи Актуальные проблемы органической химии. - Казань 2010. - С. 179.
12. Хисамутдинова Р.Ю., Басченко Н.Ж., Макара Н.С., Орлов А.В., Комиссарова Н.Г., Юнусов М.С. Гепатозащитное действие нового гетероциклического производного бетулина // Тезисы докладов научно-практической конференции Биологически активные вещества: фундаментальные и прикладные вопросы получения и применения. Новый свет 2011. - С. 617618.
13. Валеева А.А., Шитикова О.В., Орлов А.В., Комиссарова Н.Г. Спектроскопия ЯМР 13С в определении стереохимии гем-дихлорциклопропановых производных бетулин // Тезисы докладов VI Республиканской студенческой научно-практической конференции Научное и экологическое обеспечение современных технологий. - Уфа 2009. С. 38.
14. Орлов А.В., Третьякова Э.В., Шитикова О.В., Комиссарова Н.Г., Юнусов М.С. 1,3-диполярное циклоприсоединение 4-метоксифенилнитрилоксида к О-виниловым эфирам бетулина // Тезисы докладов XV Всероссийской конференции по органической химии с молодежной научной школой. - Уфа - 2012. С. 208.
15. Третьякова Э.В., Орлов А.В., Туйгильдина Г.Р. Внутримолекулярная циклизация 18(Н)-олеанан-3,19,28-триола и диоксима 28-OTr-луп-20(29)-ен-2,3-диона под действием ацетилена в суперосновной среде КОН-ДМСО // Тезисы докладов IX Республиканской конференции молодых ученых Научное и экологическое обеспечение современных технологий. - Уфа 2012. С. 124.
16. Орлов А.В., Туйгильдина Г.Р. Синтез пирроло[2,3-b]луп-20(29)-ен-17-карбоксамидов // Тезисы докладов IX Республиканской конференции молодых ученых Научное и экологическое обеспечение современных технологий. - Уфа 2012. С. 119.
1 Trofimov B.A., Advan. Hetercyclic Chem. Ed. A.R. Katritzky, Frs, Academic Press.- Inc. 1990. V. 51. P. 1-177.
2 Автор выражает искреннюю благодарность сотрудникам лаб. физико-химических методов анализа ИОХ УН - РАН: зав. лабораторией к.х.н. Спирихину Л.В., к.х.н. Шитиковой О.В. за помощь в интерпретации спектральных данных и к.х.н. Лобову А.Н. за проведение спектральных экспериментов.
3 Автор выражает благодарность с.н.с. лаб. рентгеноструктурных исследований ИНЭОС им. А.Н. Несмеянова РАН к.ф.-м.н. Супоницкому К.Ю. (зав. лаб. чл.-корр. РАН Антипин Ю.М.) за проведение рентгеноструктурных исследований.
4 Vystril A. et all. // Collect., 1986. Vol. 51. N. 3. P. 581-592.
5 Паршина Л.Н. Дис. Едокт. хим. наук. - Иркутск, 2005. - 341 с.
6 Кривдин Л.Б. и соав. ЖОрХ. 1986. Т. 22. N. 5. С. 972-977.
7 Испытания проведены в Институте клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН (г. Оренбург) д.б.н., проф. О. Л. Карташовой и к.б.н. Т. М. Уткиной.
8 Острая токсичность определена в группе фармакологических исследований при лаб. биоорганической химии ИОХ УН - РАН под рук. к.б.н. Н. Ж. Басченко
Авторефераты по всем темам >>
Авторефераты по химии