Авторефераты по всем темам  >>  Авторефераты по биологии  

На правах рукописи

Кобелев Максим Владимирович

ИЗМЕНЕНИЕ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО МЕТАБОЛИЗМА И

АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ ЛИПИДОВ КРОВИ

ПРИ РАЗЛИЧНЫХ СПОСОБАХ ХОЛЕЦИСТЭКТОМИИ,

ИХ КОРРЕКЦИЯ АЛЬФА-ТОКОФЕРОЛОМ

03.01.04 - Биохимия

Автореферат

диссертации на соискание ученой
степени кандидата медицинских наук

Тюмень - 2012

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном  учреждении высшего профессионального образования Тюменская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения  и социального развития Российской Федерации

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Кадочникова Галина Дементьевна 

Официальные оппоненты:

Шаповалов Петр Яковлевич - доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой гигиены с основами экологии ГБОУ ВПО Тюменская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения  и социального развития Российской Федерации.

Сумная Дина Борисовна - доктор медицинских наук, профессор, профессор кафедры биохимии ГБОУ ВПО Уральский государственный университет физической культуры. 

Ведущая организация: ГБОУ ВПО Омская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации.

Защита состоится л 24 мая 2012 года в 10.00 часов на заседании диссертационного совета Д 208.101.02 при ГБОУ ВПО Тюменская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения  и социального развития Российской Федерации по адресу г.Тюмень,  ул. Одесская, 54.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО Тюменская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения  и социального развития Российской Федерации.

Автореферат разослан л 20   апреля  2012 года

Ученый секретарь

диссертационного совета С.А. Орлов

 

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. В последнее десятилетие актуальной становиться проблема лечения желчнокаменной болезни (ЖКБ) [П.С. Ветшев и др., 2004; Г.Ю. Феденко и др., 2008]. По данным клинических наблюдений, в последние 40 лет заболеваемость ЖКБ за каждые 10 лет удвоилась, а по некоторым данным за последние 25 лет она выросла примерно в 2,8 раза [В.В. Стрижелецкий, 2004.].

В настоящее время хирургический метод сохраняет лидирующие позиции в лечении желчнокаменной болезни [Г.Ю. Феденко и др., 2008; П.С. Ветшев и др., 2004; С.А. Гордеев и др., 2008]. Основной операцией используемой для лечения неосложненного калькулезного холецистита является холецистэктомия, существующие способы её выполнения имеют свои показания и противопоказания [В.С. Савельев, 2006; А.Д. Тимошин и др., 2003]. Классическим методом оперативного лечения, так называемым золотым стандартом, с которым сравнивают эффективность и безопасность новых технологий, считают традиционную холецистэктомию (ТХЭ), преимущества которой - широкий обзор операционного поля, наименьшее число интраоперационных осложнений. Недостатки - значительное травматическое воздействие на ткани, выраженный болевой синдром в послеоперационном периоде. К преимуществам лапароскопической холецистэктомии (ЛХЭ) можно отнести малую травматичность, возможность ревизии почти всей брюшной полости и выполнение сочетанных вмешательств. Однако, существуют многочисленные данные, где отмечается существенный риск нарушений функций дыхания при ЛХЭ как следствие напряженного карбоксиперитонеума, что может потребовать коррекции параметров искусственной вентиляции легких и других компонентов общей анестезии [С.Р. Добровольский и др., 2004; В.С. Савельев, 2006; M. Pelosi и др., 1993].

Существенную роль в развитии ЖКБ отводят свободно-радикальным процессам липидов. Одним из наиболее важных патогенетических механизмов, связанных с процессом пероксидации, является способность образующихся свободных радикалов взаимодействовать с фосфолипидами клеточных мембран. В результате наступают структурные изменения мембран, нарушается взаимосвязь функциональной активности системы пероксидного окисления липидов - антиоксидантной защиты (ЛПОЦАОЗ), происходит накопление токсических продуктов окисления и изменение метаболизма липидов в клетке [С.С. Абидова и др., 2003; Т.С. Брюзгина и др., 1991]. Нарушение липидного обмена в мембранах характеризуется изменением соотношения между количеством фосфолипидов и холестерола, концентрация последнего значительно повышается [Е.Б. Бурлакова и др., 1985]. Существующая взаимообусловленность между скоростью окисления и изменением состава липидов рассматривается как физико-химическая основа гомеостаза процесса липидпероксидации [З.С. Баркаган и др., 1999; Е.Б. Бурлакова, 1980].

Оперативное лечение в свою очередь может вызвать дополнительную активацию ЛПО, как ответ организма на хирургический стресс [В.А. Бородач и др., 2002; П.С. Ветшев и др., 2002]. Было доказано, что активацию ЛПО могут индуцировать препараты, используемые для анестезии. Показано прямое воздействие анестетиков, выражающееся в их антиоксидантном или прооксидантном эффекте, и опосредованное влияние путем изменения метаболизма липидов, активности ферментов, уровня гормонов, кровоснабжения тканей и органов [А.И. Вислобоков и др., 2001; О.А. Долина и др., 1987; И.В. Косникова, 2004]. Операционный стресс, хирургическое вмешательство и его последствия, течение раневого процесса приводят к повышению интенсивности липидпероксидации на фоне истощения факторов антиоксидантной защиты [А.В. Александрович, 1993; Т.Д. Звягинцева и др., 1998; Е.В. Макаренко и др., 1989]. В литературе не достаточно освещены данные о влиянии хирургического доступа на процессы липидпероксидации и антиоксидантной защиты у оперируемых пациентов.

Очень значима степень нарушения функций жизненно важных органов непосредственно во время операции и в ближайшие часы после нее. К часто встречающимся периоперационным осложнениям относят тромбоэмболические осложнения [Н.В. Безручко и др., 2008; С.А. Шапошников и др., 2008], несмотря на проводимую тромбопрофилактику. Причины тромбоэмболических осложнений различны, среди них нарушения свойств сосудистой стенки, реологии крови, длительный карбоксиперитонеум, высокое инсуфляционное давление в брюшной полости  [С.А. Шапошников и др., 2008; C.M. Samama и др., 1998].

Знание динамики протекания процессов ЛПО и АОЗ во время операции и в ближайшем послеоперационном периоде, правильная оценка и своевременная коррекция этих изменений позволит избежать более глубоких нарушений в послеоперационном периоде.

Цель исследования. Изучить процесс окислительного метаболизма липидов мембран эритроцитов, тромбоцитов и плазмы крови у больных хроническим калькулезным холециститом при выполнении холецистэктомии в зависимости от выбора оперативного доступа и выявить возможность фармакологической коррекции процесса -токоферолом.

Задачи исследования.

1. Исследовать изменение показателей системы ЛПО-АОЗ плазмы крови, мембран эритроцитов и тромбоцитов у больных при лапароскопической холецистэктомии в периоперационный период.
2. Определить особенности динамики показателей системы ЛПО-АОЗ плазмы крови, мембран эритроцитов и тромбоцитов у больных при традиционной холецистэктомии в периоперационный период.
3. Изучить особенности окислительного метаболизма липидов эритроцитов, тромбоцитов и плазмы крови при различных способах холецистэктомии, определить его взаимосвязь с выраженностью процесса ЛПО.
4. Выявить эффективность использования -токоферола для коррекции равновесия в системе ЛПО-АОЗ липидов плазмы крови, мембран эритроцитов и тромбоцитов у больных а зависимости от способа  холецистэктомии.
5. Оценить результаты лечения и эффективность применения α-токоферола для коррекции окислительного  метаболизма липидов плазмы крови, мембран эритроцитов и тромбоцитов у больных ЖКБ при различных способах холецистэктомии.

Научная новизна исследования. Впервые проведен комплексный анализ изменений в системе ЛПО-АОЗ в условиях лапароскопической и традиционной холецистэктомии интраоперационно и в раннем послеоперационном периоде. Получены новые данные, существенно дополняющие сведения о характере окислительного  метаболизма липидов крови в зависимости от выбора способа  холецистэктомии.

       Впервые выявлен разнонаправленный эффект метаболического влияния способа холецистэктомии на этапах оперативного лечения. Окислительный метаболизм липидов характеризуется интраоперационным однонаправленным  изменением скорости окисления липидов и увеличением содержания  продуктов ЛПО, при одновременном снижении концентрации общих липидов. Указанные изменения наиболее выражены  в условиях ЛХЭ в сравнение с ТХЭ.

Полученные данные свидетельствуют о значительном угнетении процесса ЛПО в условиях анестезии с тиопенталом натрия на интраоперационном этапе, что подтверждается снижением скорости окисления липидов, динамикой изменений содержания фракций фосфолипидов  (увеличение) и холестерола (снижение), при сопряженном снижении коэффициента ОХС/ОФЛ. Установленный антиоксидантный эффект компонентов анестезии с тиопенталом натрия наиболее выражен в мембранных липидах, в сравнении с липидами плазмы.

Впервые показано, что процесс перфузии тканей в раннем послеоперационном периоде имеет существенные различия в динамике показателей ЛПО-АОЗ в зависимости от  варианта ХЭ. Метаболические изменения носят фазный характер с максимальной активацией ЛПО и снижением АОЗ на 3-сутки после операции в липидах эритроцитов, менее выраженные - тромбоцитов в условиях ЛХЭ. Указанные изменения носят более стабилизирующий характер в условиях ТХЭ. 

Впервые установлено, что антирадикальный и мембранотропный эффект α-токоферола проявляется на всех этапах исследования и более выражен в условиях ТХЭ,  сопровождается угнетением ЛПО, увеличением содержания ОФЛ и снижением коэффициента ОХС/ОФЛ. Эффект стабилизирующего влияния α-токоферола проявляется в большей степени в мембранных липидах, затем плазматических.

Выявленные метаболические сдвиги в системе ЛПО-АОЗ на этапах оперативного лечения позволяют определить адекватность анестезиологической защиты больного от хирургического стресса, возможность ограничивать гомеостатические и гемокоагуляционные сдвиги путем введения в протокол анестезии компонентов с антиоксидантными свойствами, а также прогнозировать возможные направления послеоперационных осложнений.

Практическая значимость работы. Полученные результаты показали разнонаправленный характер влияния варианта ХЭ на состояние системы ЛПО-АОЗ, что необходимо учитывать при хирургическом лечении холецистита с целью повышения компенсаторных возможностей организма.

Установленные нарушения процессов ЛПО-АОЗ в условиях холецистэктомии, дальнейшая активация на этапах лечения и их патогенетическая роль усиливают актуальность проблемы профилактики и коррекции этих нарушений антиоксидантами в период подготовки больного к операции, а так же во время операции и в ближайшее время после ее окончания.

Результаты исследования обращают внимание практикующих врачей на возможность ограничивать гомеостатические и гемокоагуляционные сдвиги путем введения в протокол лечения хирургических больных препаратов с антиоксидантной активностью, что обеспечивает более высокую гемодинамическую стабильность, нормализует метаболические процессы мембранных и плазматических липидов, улучшает АОЗ в клетке, снижает риск послеоперационных осложнений.

Полученные данные использованы при подготовке кафедрами биологической и аналитической химии ТюмГМА книги: Окислительный метаболизм липидов крови при критических состояниях (Тюмень: 000 Печатник, 2010. - 88 с.).

По материалам исследования подготовлены и опубликованы методические рекомендации: Анализ состояния системы липидпероксидации и антиоксидантной защиты крови при критических состояниях (Тюмень, 2008. - 69 с.); Состояние системы липидпероксидации крови у больных при хирургическом лечении хронического калькулезного холецистита в зависимости от выбора анестетика (Тюмень, 2008. - 27 с.); Использование эндогенных антиоксидантов у больных при хирургическом лечении хронического калькулезного холецистита (Тюмень, 2008. - 35 с.).

Комплексный анализ состояния системы ЛПО-АОЗ клетки включен в рекомендательный протокол лечения больных при критических состояниях в отделения анестезиологии и реанимации ГБУЗ ТО ОКБ №2, ГБУЗ ТО ОКБ №1 (6 актов внедрения), а также используется в элективных курсах кафедр аналитической и органической химии, биологической химии ГБОУ ВПО ТюмГМА Минздравсоцразвития России (2 акта внедрения).

Положения, выносимые на защиту.

1. Хирургическое лечение холецистита сопровождается разнонаправленным изменением показателей ЛПО-АОЗ крови, динамика и диапазон которых зависит от выбора варианта холецистэктомии и этапа оперативного лечения.
2. Специфический эффект влияния способа холецистэктомии на состояние системы ЛПО-АОЗ (активация или угнетение) не имеет существенных различий интраоперационно, снижается в первые сутки после операции  и зависит от мембран клеток-мишеней (эритроцитов, тромбоцитов или плазмы крови). 
3. Процесс перфузии тканей в раннем послеоперационном периоде, имеющий существенные различия в динамике показателей ЛПО-АОЗ от выбора способа холецистэктомии, характеризуется усилением ЛПО и снижением АОЗ на 3-сутки после операции в условиях ЛХЭ, в условиях ТХЭ установлен более стабилизирующий характер процесса.
4. Активацию ЛПО можно уменьшить путем введения в протокол хирургического лечения α-ТФ, антирадикальный и мембранотропный эффект которого более выражен в условиях ТХЭ в сравнение с ЛХЭ.

Апробация работы. Результаты работы доложены на общем заседании кафедр аналитической и органической химии, биохимии, гигиены  (2012); конгрессе терапевтов "Урал-2009";  VI съезде ассоциации анестезиологов-реаниматологов северо-запада России (Санкт-Петербург, 2011); на Всероссийской научно-практической  конференции "Актуальные вопросы клиники, диагностики и лечения в многопрофильном лечебном учреждении" (Санкт-Петербург, 2011); межрегиональных научно-практических  конференциях (Екатеринбург, 2009; Тюмень, 2009); 42-й и 45-й Всероссийских научных конференциях с международным участием студентов и молодых ученых (Тюмень, 2008, 2011).

Публикации. Материалы диссертации опубликованы в 18 печатных работах, включая 5 статей в медико-биологических изданиях, рекомендованных ВАК для публикации диссертационных исследований, и два раздела в монографии Окислительный метаболизм липидов крови при критических состояниях - Тюмень: ООО Печатник, 2010. - С. 18-28, 35-41.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 144 страницах машинописного текста, включает Введение, Обзор литературы, Материалы и методы исследований, Результаты собственных исследований, Обсуждение результатов, Заключение, Выводы и Список литературы (233 отечественных и 70 зарубежных источников). Работа представлена 20 таблицами и иллюстрирована 27 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Характеристика групп исследования. Проведено комплексное обследование 127 больных калькулезным холециститом (женщины, возраст 45,24,4 года). Всем пациентам выполнена холецистэктомия в 2006-2010 гг. ГБУЗ ТО ОКБ №1. У 106 (83,5%) больных имелась сопутствующая патология: хронические обструктивные заболевания легких - 27 (21,3%), сахарный диабет - 24 (18,9%), ожирение - 95 (74,8%), ИБС - 86 (67,7%). Отбор пациентов в группы проводили на основании данных клинического обследования до операции, тестирования состояния системы ЛПО-АОЗ по показателям ЛПО эритроцитов: СО, ПИ, ДК и ОЛ. Окончательное формирование групп проводили в зависимости от варианта холецистэктомии и использования α-токоферола: 1-я группа (34 пациента) - ЛХЭ; 2-ая группа (32 пациента) - ТХЭ; 3-я группа (31 пациент) - ЛХЭ + α-ТФ; 4-ая группа (30 пациентов) - ТХЭ + α-ТФ. Назначали α-ТФ (Эвитол, фирма КРКА) в виде 20% раствора внутримышечно по схеме: 600 мг за 12 часов до операции; 200 мг - во время вводного наркоза; 200 мг - во время основного наркоза; далее в течение 5-ти суток  по 600 мг/сутки.  В протокол анестезиологического обеспечения всех исследуемых групп были включены следующие препараты: тиопентал натрия (не более 1000 мг за операцию), фентанил (5-10 мкг/кг в час), миоплегия поддерживалась ардуаном  (0,05-0,1 мг/кг в час). Тиопентал натрия, фентанил (подавляют процесс ЛПО), ардуан (нет данных о влиянии на ЛПО) [О.А. Долина и др., 2002; П.Г. Сторожук и др., 1999]. Длительность операции: 58,6±3,8 мин. Интраоперационных и послеоперационных осложнений в исследуемых группах не было. Группы больных ЖКБ сравнимы по возрасту, сопутствующим заболеваниям, уровню исследуемых показателей в предоперационном периоде.

Используемые приемы и методы. Кровь на исследование брали из периферической вены на следующих этапах: 1 - предоперационный, данные характеризуют исходное состояние системы ЛПО-АОЗ крови; 2 - интраоперационный (через 50,3 ± 3,4 мин. от начала операции), выявляется влияние компонентов анестезии на состояние системы ЛПО-АОЗ на фоне хирургического стресса; 3 - (1-е сутки),   4 - (на 3-и сутки) и 5 - (на 5-е сутки)  - послеоперационного периода, в течение которого возможно усиление ЛПО за счет процесса реперфузии тканей. Состояние окислительного метаболизма липидов (ЛПО и АОЗ) оценивали в эритроцитах, тромбоцитах и плазме крови. Липиды  эритроцитов и плазмы экстрагировали 10-кратным избытком смеси гептана и изопропилового спирта (1:1), тромбоцитов - 50-кратным избытком этой же смеси.

Показатели ПО определяли в гептановой  фазе [В.Н. Ушкалова и др., 1987]: скорость окисления (СО, мм3/мин), период индукции (ПИ, мин/мл) определяли при инициированном динитрилазобисизомасляной кислотой  окислении липидов и выражали ПИ как время поглощения пробой 25 мм3 О2, а СО - как угол наклона линейного участка кинетической кривой;  содержание диеновых коньюгатов (ДК, мкМ/мл) устанавливали по оптической плотности  (λ = 232 нм); общие липиды (ОЛ, мг/мл) - по величине оптической плотности (λ = 534 нм), после реакции с фосфорнованилиновым реактивом. Содержание фосфолипидов (ФЛ, мкМ/мл) - по реакции неорганического фосфора с  малахитовым зеленым (λ = 260 нм);  содержание СХС и ЭХС  (мкМ/мл) - по реакции с хлоридом железа (III) (λ = 540 нм) [В.С. Карпищенко, 2002].

Анализ результатов. Математическую обработку полученных количественных данных проводили с помощью медико-биологической программы Biostat 4.03 (С.А. Гланц, 1998)  методом вариационной статистики для малых рядов наблюдений, вычисляя среднюю арифметическую (М), среднюю ошибку средней арифметической (m) и среднее квадратичное отклонение (). Достоверность отличий оценивали, вычисляя доверительный коэффициент Стъюдента (t) и степень вероятности (p). Взаимосвязи переменных анализировали методом ранговой корреляции Спирмена (rs). Различия  между сравниваемыми группами рассматривали как достоверные при значениях степени вероятности <0,05. Графический анализ результатов проводили в системе Microsoft Graf (приложение  WS Word 2003) с построением графиков, корректность которых характеризовали коэффициентами аппроксимации (R2).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Динамика показателей состояния системы ЛПОЦАОЗ в мембранных липидах в зависимости от варианта холецистэктомии. Операционный стресс, хирургическое вмешательство и его последствия (ацидоз, гипоксия), течение раневого процесса приводят к повышению интенсивности ЛПО на фоне истощения факторов АОЗ, что свидетельствует о дисбалансе системы ЛПО-АОЗ. Полученные данные показали, что у больных при ЛХЭ (1-ая группа) изменения показателей (содержание ДК и ОЛ, величина СО и ПИ), отражающие состояние системы ЛПО-АОЗ в эритроцитах, носят фазовый характер в зависимости от этапа исследования (табл. 1).

На интраоперационном этапе содержание ДК в мембранах эритроцитов увеличивалось на 49,78% (р<0,01), в сравнении с предоперационным состоянием. Далее выявлено снижение концентрации ДК практически до исходного уровня (3-й этап). На 3 сутки после операции (4-й этап) вновь наблюдалось увеличение показателя на 18,15% (р<0,05) и на 5-е сутки величина ДК не имеет достоверных различий с исходным уровнем. Одновременно установлены нарушения в системе липолиз - липогенез, на что косвенно указывало прогрессирующее снижение концентрации ОЛ к 5-м суткам в 2,05 раза (р<0,001) в сравнении с исходным уровнем, при этом не получено достоверной корреляции между исследуемыми показателями. Указанные изменения свидетельствуют о развитии тканевой гипоксии, универсальными механизмами которой являются - интенсификация процессов свободно-радикального окисления липидов, активация фосфолипазы А2 и анаэробный гликолиз.

Таблица 1

Динамика показателей состояния системы ЛПОЦАОЗ липидов эритроцитов в условиях ЛХЭ и дополненной α-ТФ (M m)

Показатели	Этапы исследования
	предопера ционный (1 этап)		интраопера ционный (2 этап)		послеоперационный
					1-е сутки (3 этап)		3-и сутки (4 этап)		5-е сутки (5 этап)
	Стандартный протокол  (1-ая группа)
ДК, мкмоль/мл	2,270,12	3,400,12 c		2,330,11 с		2,750,09 а		2,300,11 a
СО, мм3/мин	0,280,011	0,160,013 c		0,320,008 c		0,410,009 c		0,310,011 b
ПИ, мин/мл	231,44,35	277,66,31а		226,74,39 а		179,35,47 a		219,26,01 a
ОЛ, мг/мл	4,210,15	3,320,12 a		2,850,12 a		2,330,11 a		2,050,13 a
	Стандартный протокол + α-ТФ (3-ая группа)
ДК, мкмоль/мл	2,290,11	1,740,12 b		2,260,11 b		2,310,09		2,280,13
СО, мм3/мин	0,310,011	0,190,012 c		0,320,008 c		0,250,008 b		0,230,013
ПИ, мин/мл	227,44,32	253,86,12		221,24,53		244,35,62 c		245,76,15
ОЛ, мг/мл	3,890,15	4,540,13 a		3,930,11		3,430,11		2,920,14 a

Примечание: a) - p<0,05 b)- p<0,01  c)- p<0,001 в сравнении с предыдущим этапом.

Показатель СО на интраоперационном этапе изменяется разнонаправлено (снижение на 42,86%; р<0,01) в сравнении с показателем ДК. Выявленное обстоятельство может свидетельствовать об изменении фракционного состава фосфолипидов мембран эритроцитов в сторону компонентов, имеющих в своем составе меньше высших ненасыщенных жирных кислот, и служит подтверждением антиоксидантной активности компонентов анестезии с тиопенталом натрия. В раннем послеоперационном периоде (4-й этап) динамика СО и ДК не имеет различий (увеличением на 46,43% и 18,15%; р<0,05 соответственно).

Результаты исследований показали разнонаправленный характер изменения показателей ПИ и СО, более высокой скорости окисления соответствует наименьшее значение периода индукции (r = Ц0,98; p<0,05) с максимальными изменениями на 2-м этапе (повышение ПИ на 19,97 %; p<0,05 и снижение СО на 42,86%; р<0,01) и 4-м этапе (снижение ПИ на 22,52%; р<0,05 и повышение СО на 28,12%; р<0,05).  К 5-м суткам показатели ПИ и СО не имеют различий с дооперационными значениями.

Усиление ЛПО в раннем послеоперационном периоде (4-й этап) является следствием развития тканевой гипоксии при наложении карбоксиперитонеума и процесса реоксигенации. Этот факт является неблагоприятным для клетки и организма в целом, поскольку первичные продукты ЛПО являются наиболее токсичными и инициируют каскад окислительных реакций, которые приводят к истощению АОЗ клетки и дестабилизации морфофункциональной организации мембраны эритроцитов, что значительно ускоряет процессы дезинтеграции и гибели эритроцитов. Поврежденная популяция клеток утрачивает необходимую функциональную активность, усугубляя развивающиеся патологические изменения в организме.

Проведенные исследования состояния системы ЛПО-АОЗ в эритроцитах показали, что у больных 2-й группы в условиях ТХЭ, также как и при ЛХЭ в 1-й группе, динамика исследуемых показателей (содержание ДК и ОЛ, величина СО и ПИ) на интраоперационном этапе изменяется разнонаправленно, но с меньшей выраженностью при ТХЭ (табл. 2). На 1-е сутки (3-й этап) выявлена активация ЛПО, интенсивность которой сохраняется к 5-м суткам  и не достигает предоперационного уровня показателей (~ на 17% увеличение ДК, СО и снижение ПИ), в отличие от ЛХЭ. Выявленная динамика может свидетельствовать о более выраженном хирургическом стрессе при лапаротомии и снижение антиоксидантной  активности компонентов анестезии с тиопенталом натрия.

Динамика показателя ОЛ свидетельствует о менее выраженных нарушениях в системе липолиз-липогенез в условиях ТХЭ в сравнение с ЛХЭ, что подтверждается уменьшением содержания ~ в 2 раза меньшем диапазоне изменения (на 21,13% и на 51,42% соответственно) к 5-м суткам по отношению к 1-м. Выявленная динамика ОЛ указывает об активации липолиза и угнетении липогенеза в условиях ЛХЭ в большей степени в сравнение с ТХЭ, как результат более выраженной гипоксии.

Таблица 2

Динамика показателей состояния системы ЛПОЦАОЗ липидов эритроцитов в условиях ТХЭ и дополненной α-ТФ (M m)

Показатели	Этапы исследования
	предопера ционный (1 этап)		интраопера ционный (2 этап)		послеоперационный
					1-е сутки (3 этап)		3-и сутки (4 этап)		5-е сутки (5 этап)
	Стандартный протокол  (2-ая группа)
ДК, мкмоль/мл	2,350,13	2,110,11		2,950,12 c		2,760,13		2,710,12
СО, мм3/мин	0,350,007	0,260,009 b		0,510,009 c		0,470,008		0,410,007
ПИ, мин/мл	219,34,21	183,43,39a		155,84,07a		138,15,01		180,84,77 b
ОЛ, мг/мл	4,120,12	4,230,13		4,290,09		4,310,11		3,050,13 b
	Стандартный протокол + α-ТФ (4-ая группа)
ДК, мкмоль/мл	2,410,13	2,280,11		2,310,12		2,270,13		2,390,12
СО, мм3/мин	0,330,007	0,280,009 a		0,390,009 b		0,300,008a		0,260,007
ПИ, мин/мл	229,54,21	233,43,39		183,14,07a		225,95,01b		257,64,77a
ОЛ, мг/мл	4,050,12	3,440,13a		3,510,09		4,420,11b		4,580,13

Примечание: a) - p<0,05 b)- p<0,01  c)- p<0,001 в сравнении с предыдущим этапом.

Особенности влияния хирургического доступа на процесс липидпероксидации, установленные в мембранах эритроцитов, сохраняются и при воздействии на тромбоцитарные мембраны (табл. 3 и 4). Одновременно не получено достоверных различий в тромбоцитах между данными показателей 5-го этапа в сравнении с исходным уровнем в группах сравнения, кроме содержания ОЛ. В условиях ЛХЭ показано снижение ОЛ (на 41,44%; р<0,01), в отличие от недостоверного изменения показателя в условиях ТХЭ.

Таблица 3

Динамика показателей состояния системы ЛПОЦАОЗ липидов тромбоцитов

в условиях ЛХЭ и дополненной α-ТФ (M m)

Показатели	Этапы исследования
	предопера ционный (1 этап)		интраопера ционный (2 этап)		послеоперационный
					1-е сутки (3 этап)		3-и сутки (4 этап)		5-е сутки (5 этап)
	Стандартный протокол  (1-ая группа)
ДК, мкмоль/мл	2,86 0,13	3,570,11 b		2,990,12 a		3,69 0,13 b		2,29 0,12 b
СО, мм3/мин	0,44 0,007	0,37 0,009a		0,48 0,009b		0,86 0,008 c		0,51 0,007 c
ПИ, мин/мл	148,3 4,21	152,5 3,39		139,1 4,07		87,4 5,01 b		149,8 4,77 c
ОЛ, мг/мл	5,310,12	4,410,13 a		3,840,09 a		3,54 0,11		3,11 0,13 a
	Стандартный протокол + α-ТФ (3-ая группа)
ДК, мкмоль/мл	2,790,12	2,210,11 a		2,450,13		2,680,12		2,810,121
СО, мм3/мин	0,690,008	0,410,009c		0,350,012 a		0,260,009b		0,270,012
ПИ, мин/мл	167,44,41	178,63,37		158,14,56		239,24,26 c		230,54,41
ОЛ, мг/мл	3,750,11	3,840,11		3,760,12		2,960,13a		2,450,13 a

Примечание: a) - p<0,05 b)- p<0,01  c)- p<0,001 в сравнении с предыдущим этапом.

Полученные данные изменения показателей ЛПО свидетельствуют о более высоком антиоксидантном потенциале в мембранах тромбоцитов при ТХЭ, в сравнении с ЛХЭ. Предполагается, что связь между липидпероксидацией и гемостазом реализуют тромбоциты через изменение синтеза простагландинов, соединения антиоксидантного типа ограничивают гемокоагуляционные сдвиги при гипероксидации, снижая при этом частоту тромбических осложнений.

Дополнение α-ТФ в протокол хирургического лечения больных при различных вариантах холецистэктомий выявило различия в характере и глубине изменений показателей ЛПО-АОЗ на этапах исследования в сравнении с 1-й и 2-й группами. Необходимо отметить, что в условиях холецистэктомии α-ТФ проявляет выраженный антирадикальный эффект, на что указывают отсутствие статистически значимых изменений содержания ДК в мембранах эритроцитов, уменьшение СО на 2-м, а также на 4-м этапах, при сопряженном повышении ПИ на этапах исследования и в сравнении с 1-м этапом. Наиболее стабилизирующая динамика установлена для показателей ЛПО в условиях ТХЭ. Дополнительным подтверждением служит прогрессирующее повышение содержания ОЛ к 5-м суткам до предоперационных значений, в отличие от ЛХЭ, где показано снижение показателя на 24,94% (р<0,05).

Таблица 4

Динамика показателей состояния системы ЛПОЦАОЗ липидов тромбоцитов

в условиях ТХЭ и дополненной α-ТФ (M m)

Показатели	Этапы исследования
	предопера ционный (1 этап)		интраопера ционный (2 этап)		послеоперационный
					1-е сутки (3 этап)		3-и сутки (4 этап)		5-е сутки (5 этап)
	Стандартный протокол  (2-ая группа)
ДК, мкмоль/мл	2,730,13	2,980,11		2,820,12		3,150,13		2,860,12
СО, мм3/мин	0,380,007	0,220,009 c		0,45 0,009 c		0,41 0,008		0,330,007 b
ПИ, мин/мл	154,34,21	238,13,39c		149,74,07b		153,45,01		181,14,77 a
ОЛ, мг/мл	5,170,12	4,930,13		5,080,09		5,110,11		5,030,13
	Стандартный протокол + α-ТФ (4-ая группа)
ДК, мкмоль/мл	2,560,13	2,310,11		2,290,12		2,490,13		2,630,12
СО, мм3/мин	0,320,007	0,260,009 a		0,290,009		0,300,008		0,280,007
ПИ, мин/мл	223,64,21	233,43,39		230,14,07		229,55,01c		235,74,77
ОЛ, мг/мл	4,930,12	5,230,13		5,280,09		5,310,11		5,490,13

Примечание: a) - p<0,05 b)- p<0,01  c)- p<0,001 в сравнении с предыдущим этапом.

В тромбоцитах антирадикальный эффект α-ТФ более выражен, чем в эритоцитах в условиях ЛХЭ, что проявляется снижением показателя СО (60,81%; р<0,001), повышением ПИ (на 37,72%; р<0,05) к 5-м суткам в сравнение с 1-м этапом. При этом получены недостоверные изменения показателей в условиях ТХЭ. Активация липолиза сохраняется в тромбоцитах при ЛХЭ (снижение ОЛ на 34,67%; р<0,05), в отличие от ТХЭ, где не получено достоверных различий в сравнении с 1-м этапом.

Анализ полученных данных свидетельствует, что дополнительное назначение α-ТФ пациентам при выполнении ХЭ позволило уменьшить влияние операционного стресса на гомеостатические сдвиги в организме.

Динамика показателей состояния системы ЛПОЦАОЗ в липидах плазмы крови в зависимости от варианта холецистэктомии. Проведенные исследования состояния системы ЛПО-АОЗ липидов плазмы крови в зависимости от варианта холецистэктомии пациентов 1-ой и 2-ой групп показали, что изменение показателей имеют некоторые различия в сравнении с мембранными липидами (табл. 5 и 6). Следует обратить особое внимание на однонаправленное изменение показателя СО (повышение на 29,41% и 61,92%, соответственно при ЛХЭ и ТХЭ), в отличие от мембранных липидов, где установлено его снижение при всех вариантах холецистэктомии на интраоперационном этапе. Отличительной особенностью ЛПО в плазме является прогрессирующее снижение (примерно в 2 раза, р<0,01) содержания ОЛ в группах сравнения к 5-му этапу в сравнении с предоперационным уровнем. Выявленный факт, вероятно, можно объяснить многократно большей растворимостью тиопентала натрия в липидном слое мембран клеток крови, чем в плазме, что и обусловливает снижение антиоксидантного эффекта на интраоперационном этапе.

Таблица 5

Динамика показателей состояния системы ЛПОЦАОЗ липидов плазмы крови в условиях ЛХЭ и дополненной α-ТФ (M m)

Показатели	Этапы исследования
	предопера ционный (1 этап)		интраопера ционный (2 этап)		послеоперационный
					1-е сутки (3 этап)		3-и сутки (4 этап)		5-е сутки (5 этап)
	Стандартный протокол  (1-ая группа)
ДК, мкмоль/мл	2,210,11	2,650,11 b		2,430,14		3,50,14 c		2,380,13 c
СО, мм3/мин	0,170,007	0,220,009 b		0,190,008 a		0,390,010 c		0,180,008 c
ПИ, мин/мл	265,33,37	235,24,41		252,15,68		173,84,05 c		253,44,25 c
ОЛ, мг/мл	5,020,12	4,360,13		3,710,15 a		3,260,09		2,930,13
	Стандартный протокол + α-ТФ (3-ая группа)
ДК, мкмоль/мл	2,410,11	2,120,11		2,360,12		2,550,14		2,390,12
СО, мм3/мин	0,210,009	0,230,009		0,170,011b		0,110,011 c		0,130,009 a
ПИ, мин/мл	232,13,19	233,44,45		261,25,24		294,54,62		279,64,28
ОЛ, мг/мл	4,520,14	5,730,15 b		5,150,13		4,280,12 a		3,640,12 a

Примечание: a) - p<0,05 b)- p<0,01  c)- p<0,001 в сравнении с предыдущим этапом.

Величина периода индукции в плазме крови разнонаправленно изменяется в сравнении с показателями ДК и СО на этапах исследования, при этом динамика изменения ПИ более сходна с таковым в эритроцитах. В целом следует отметить достоверное снижение антиоксидантного потенциала на 5-е сутки в сравнении с предоперационным состоянием.

Сравнительный анализ окислительной стабильности мембранных и плазматических липидов на интраоперационном этапе показал (2-ой этап), что наибольший диапазон изменений характерен для липидов эритроцитов, затем тромбоцитов и плазмы, вне зависимости от варианта холецистэктомии. При этом важно отметить, что направление изменений стабилизирующего характера на состояние системы ЛПОЦАОЗ в раннем послеоперационном периоде, в большей степени проявляется при ТХЭ.

Таблица 6

Динамика показателей состояния системы ЛПОЦАОЗ липидов плазмы крови в условиях ТХЭ и дополненной α-ТФ (M m)

Показатели	Этапы исследования
	предопера ционный (1 этап)		интраопера ционный (2 этап)		послеоперационный
					1-е сутки (3 этап)		3-и сутки (4 этап)		5-е сутки (5 этап)
	Стандартный протокол  (2-ая группа)
ДК, мкмоль/мл	2,350,11	2,130,11		2,190,14		2,330,14		2,180,13
СО, мм3/мин	0,210,007	0,340,009c		0,190,008 c		0,380,010 c		0,370,008
ПИ, мин/мл	233,43,37	181,74,41b		242,95,68c		179,44,05 c		180,54,25
ОЛ, мг/мл	5,110,12	4,180,13 a		4,080,15		2,930,09 b		2,340,13 b
	Стандартный протокол + α-ТФ (4-ая группа)
ДК, мкмоль/мл	2,360,11	2,120,11		2,280,14		2,110,14		2,170,13
СО, мм3/мин	0,250,007	0,210,009a		0,170,008 a		0,220,010 b		0,270,008 a
ПИ, мин/мл	259,73,37	246,14,41		254,25,68		243,34,05		225,44,25
ОЛ, мг/мл	5,050,12	4,380,13 a		4,230,15		4,860,09 a		4,970,13

Примечание: a) - p<0,05 b)- p<0,01  c)- p<0,001 в сравнении с предыдущим этапом.

Дополнительное введение α-ТФ при ХЭ приводит к снижению активности ЛПО на всех этапах исследования, наиболее выраженные изменения установлены в условиях ТХЭ, в сравнение с ЛХЭ. Указанные изменения характеризуются снижением содержания ДК и СО, повышением ПИ, снижением ОЛ в меньшем диапазоне  при сравнении показателей в 1-й и 2-й группах.

Динамика показателей окислительного метаболизма липидов в зависимости от варианта холецистэктомии. Исследование процесса липидпероксидации показало, что специфические различия влияния способов холецистэктомии более выражены в послеоперационном периоде. В то же время, на 3-и и 5-е сутки исследования для большинства показателей системы ЛПО-АОЗ выявлен однонаправленный характер динамики, имеющиеся различия касаются в большей степени диапазона изменений.

В мембранах эритроцитов в условиях ЛХЭ установлен интраоперационно более высокий уровень ОФЛ (в 1,83 раза; p<0,05), который не имеет достоверных различий с уровнем ОФЛ на послеоперационном этапе (табл. 7). Указанные факты отражают разнонаправленное изменение фракций ФЛ: увеличение ФЭА - на 31,21% (p<0,05), ФХ - на 48,47% (p<0,01), ЛФХ - на 79,17% (p<0,01) в сравнении с предоперационным состоянием. Выявлено интраоперационное снижение ОХС и его фракции (СХС на 27,84%, ЭХС на 52,73%), в ранний послеоперационный период показано повышение ОХС, что привело к повышению коэффициента ОХЛ/ОФЛ ~ в 3 раза в сравнении с исходным уровнем. Указанное обстоятельство свидетельствует о деструктивных изменениях в мембранах, как внутреннего слоя (ФЭА), так и наружного (ФХ), и отражает резко возросшую потребность клеток в антиоксидантном потенциале для их нормального функционирования в послеоперационном периоде. При ЛХЭ в эритроцитах установлена слабая корреляционная зависимость с положительным вектором между ФЛ (ФЭА+ФХ) и ДК (r = 0,58; р<0,05), при этом не найдено корреляционной зависимости с показателем СО.  Холестерол относится к трудноокисляемым компонентам липидов, поэтому повышение концентрации холестерола, а соответственно и увеличение коэффициента ОХС/ОФЛ, приводит к ослаблению корреляционной зависимости между указанными показателями.

Таблица 7

Динамика показателей липидного состава эритроцитов в зависимости от способа холецистэктомии (M m)

Показа тели (мкМ/мл)	Этапы исследования
	предопера ционный (1 этап)	интраопера ционный (2 этап)	послеопера ционный 1-е сутки (3 этап)	послеопера ционный 3-и сутки (4 этап)	послеопера ционный 5-е сутки (5 этап)
ХЭ (1-ая группа)
ОФЛ	0,735 0,002	1,3450,004 c	0,794 0,003 c	0,6370,002 a	0,7810,003 a
ФЭА	0,1730,002	0,2270,001c	0,1680,002b	0,1350,002 a	0,1820,002 b
ФХ	0,262 0,003	0,389 0,002c	0,279 0,003 b	0,2240,002 a	0,2510,003
ФХ	0,0480,002	0,0860,001 c	0,0440,002 c	0,0320,002 b	0,0390,002 a
СХС	2,2560,025	1,6280,018 b	2,4410,015c	2,3420,016	2,3440,018
ЭХС	1,6330,09	0,7720,007 b	3,0710,014 c	5,7820,021 c	1,8670,011 c
ОХС	3,8890,018	2,4000,016 b	5,5120,017 c	8,1240,017 c	4,2110,016 c
ТХЭ  (2-ая группа)
ОФЛ	0,7970,002	1,4390,004 c	0,9060,008 b	1,8330,003 c	0,8940,002 c
ФЭА	0,1630,002	0,2780,001c	0,2200,002a	0,2560,002 a	0,2060,001 a
ФХ	0,2110,001	0,2680,001b	0,1530,001c	0,3260,001c	0,1870,001 c
ФХ	0,0620,001	0,1130,002c	0,0750,001c	0,0910,001 b	0,0460,001 c
СХС	2,2090,025	0,9820,018 c	2,7590,015c	3,7270,016c	2,1810,014 c
ЭХС	1,5430,09	1,2330,007 a	4,3170,014 c	5,2530,01 a	4,3170,014 a
ОХС	3,7520,018	2,2150,016 c	7,7060,017c	8,980,017 a	6,4980,015 b

  Примечание. а) - р<0,05; b)  -  р<0,01;  c) - р<0,001  по сравнению с предыдущим этапом.

Таблица 8

Коэффициенты отношений фракций ОХС/ОФЛ в зависимости

от  способа ХЭ (M m)

Группа	Этапы исследования
	предопера ционный (1 этап)	интраопера ционный (2 этап)	послеопера ционный 1-е сутки (3 этап)	послеопера ционный 3-и сутки (4 этап)	послеопера ционный 5-е сутки (5 этап)
эритроцитов
ХЭ	4,460,03	1,680,02 c	7,190,03	12,750,02 c	5,390,03 c
ТХЭ	4,710,03	1,540,02 c	7,810,03 b	4,890,02b	7,270,03c
тромбоцитов
ХЭ	15,90,03	7,950,02c	21,010,02c	31,040,03c	16,050,02c
ТХЭ	20,680,03	7,360,02c	15,910,02c	15,290,02	16,480,02
плазмы крови
ХЭ	10,130,03	6,280,03c	13,960,002c	13,290,003	18,390,002c
ТХЭ	9,650,03	4,130,03c	8,520,02c	6,300,02b	10,680,02c

При изучении показателей, отражающих обмен ФЛ и ХС в мембранах эритроцитов в условиях ТХЭ, не получено существенных различий в динамике показателей в сравнении с ЛХЭ. Однако изменения были более выраженные на всех этапах исследования в условиях ТХЭ. Наблюдается увеличение уровня ОФЛ на интраоперационном этапе в 1,81 раза (р<0,01), на третьи сутки - 2,3 раза (р<0,01) по сравнению к исходному уровню. На 5 сутки происходит восстановление уровня до исходного состояния.  В условиях  ТХЭ установлены максимальное снижение ХС и его фракций на интраоперационном этапе и повышение на 3 сутки послеоперационного периода в 2,4 раза (р<0,01).

Разнонаправленный характер изменения содержания ОХС и ОФЛ при обоих вариантах холецистэктомий приводит к фазному изменению коэффициента ОХС/ОФЛ на этапах операции с тенденцией увеличения к 5-му этапу в большей степени в условиях ТХЭ (табл. 8). Выявленная динамика изменений коэффициента ОХС/ОФЛ на этапах операции свидетельствует о сохранении интенсивности ЛПО в эритроцитах групп сравнения.

При исследовании липидной фазы мембран тромбоцитов при ЛХЭ (табл. 9) не получено различий в динамике показателей в сравнении с эритроцитами, однако, изменения носили менее выраженный характер. Диапазон изменений (от 26% до 75%) зависит от этапа исследования и характеризуется разнонаправленным изменением содержания фракций ФЛ (увеличением) и ХС (снижением). Указанная тенденция сохраняется  к 5-му этапу в сравнении с 1-м, что обеспечивает не достоверное изменение коэффициента ОХС/ОФЛ.

Таблица 9

Динамика показателей липидного состава тромбоцитов в зависимости от способа холецистэктомии (M m)

Показа тели (мкМ/мл)	Этапы исследования
	предопера ционный (1 этап)	интраопера ционный (2 этап)	послеопера ционный 1-е сутки (3 этап)	послеопера ционный 3-и сутки (4 этап)	послеопера ционный 5-е сутки (5 этап)
ХЭ (1-ая группа)
ОФЛ	0,2530,003	0,3530,002 b	0,2280,005 b	0,1850,002 a	0,2820,003 c
ФЭА	0,0540,001	0,0710,002b	0,0430,004c	0,0320,001 b	0,0670,002 c
ФХ	0,067 0,002	0,09850,001c	0,067 0,001ннb	0,0530,002 a	0,0750,001 c
ФХ	0,0150,001	0,0180,002 a	0,0170,002	0,0140,001 a	0,0110,001 a
СХС	1,5210,015	0,9110,016c	1,3450,011c	1,2110,012	1,4030,014 a
ЭХС	2,6470,009	1,9130,011b	3,2560,007c	4,5320,006 c	3,1220,008 b
ОХС	4,1680,015	2,8240,014b	4,6010,018	5,7430,016b	4,5250,017 a
ТХЭ
ОФЛ	0,2240,003	0,3840,002c	0,2480,005b	0,3570,002 c	0,2560,002 b
ФЭА	0,0520,001	0,0870,002c	0,0530,004c	0,0870,002 c	0,0490,001 c
ФХ	0,0620,002	0,0950,002c	0,0630,001c	0,0940,002 c	0,0510,001 c
ФХ	0,0120,001	0,0150,001b	0,0130,001	0,0170,002 b	0,0120,001b
СХС	1,7070,015	0,5460,016c	1,1340,011c	1,6320,013 c	0,8190,012 c
ЭХС	2,9250,009	1,9790,011b	2,5130,007b	3,8440,010 c	3,4020,009
ОХС	4,6320,015	2,8250,014c	3,9470,018c	5,4760,013	4,2210,016

Примечание. а) - р<0,05; b)  -  р<0,01;  c) - р<0,001  по сравнению с предыдущим этапом.

Изучение окислительного метаболизма  в условиях ТХЭ не выявило существенных различий в динамике показателей ФЛ на этапах исследования при одновременном более выраженном изменении СХС (снижение на 52,63%; р<0,001), недостоверных различиях ЭХС и ОХС в группах сравнения по отношению к 1-му этапу. Полученные данные имеют положительное прогностическое значение на течение послеоперационного периода. Степень интенсивности процессов ЛПО в данном случае может служить маркером структурной целостности и функциональной активности клеток, так как повышение агрегационной способности эритроцитов и тромбоцитов тесно сопряжено с изменениями липидного состава и активацией процессов ЛПО в их мембранах.

Исследование метаболизма липидов плазмы крови (табл. 10) показало, что стрессорный ответ организма при ЛХЭ вызывает однотипное изменение параметров, как и в мембранных липидах. Установлено интраоперационое увеличение ОФЛ и его фракций (диапазон изменений от 15% до 57%), при сопряженном снижение ХС и его эфиров (диапазон изменений от 26% до 35%). Указанные изменения наименее выражены в плазме, значения которых в 1,5 - 2 раза (р<0,01) меньше по сравнению с мембранными липидами. В раннем послеоперационном периоде выраженность изменений в липидах плазмы значительно увеличивается, что совпадает по направленности показателей, соответствующих динамике в мембранных липидах. Коэффициент отношения ОХС/ОФЛ в липидах плазмы прогрессирующе увеличивается к 5-му этапу (на 81,54%; р<0,01).  Таблица 10

Динамика показателей липидного состава

плазмы крови в зависимости от способа холецистэктомии (M m)

Показа тели (мкМ/мл)	Этапы исследования
	предопера ционный (1 этап)	интраопера ционный (2 этап)	послеопера ционный 1-е сутки (3 этап)	послеопера ционный 3-и сутки (4 этап)	послеопера ционный 5-е сутки (5 этап)
ХЭ (1-ая группа)
ОФЛ	0,6350,003	0,8500,004 b	0,7440,002	0,9130,003 a	0,7210,002 a
ФЭА	0,1100,001	0,1730,002c	0,0810,002c	0,1540,002 c	0,1320,001 a
ФХ	0,1880,001	0,2690,002c	0,2840,002	0,3960,002 c	0,2030,002 c
ФХ	0,0750,002	0,1150,003 c	0,0850,001 b	0,1340,002 c	0,0870,001c
СХС	1,9140,018	1,2780,016c	3,4140,013c	4,7050,010c	5,8480,012 b
ЭХС	5,3700,008	3,9410,009b	7,3220,011c	7,4280,007	7,4090,013
ОХС	7,2840,017	5,2190,015b	11,7360,019c	12,1330,014	13,2570,016
ТХЭ
ОФЛ	0,8120,003	1,5730,007c	0,9540,010c	1,6250,004 c	1,1570,003 b
ФЭА	0,1320,001	0,1750,002b	0,0980,002c	0,1860,002 c	0,1510,001 a
ФХ	0,1680,001	0,3650,002c	0,1720,002c	0,3890,002 c	0,1870,001 c
ФХ	0,0720,001	0,1530,002c	0,1340,002	0,1910,001c	0,1020,001 c
СХС	2,5220,018	4,2450,016c	4,9430,013a	4,3520,015	4,7970,014
ЭХС	5, 3120,008	2,2560,009c	3,1930,011c	5,8920,008 c	7,5610,011 b
ОХС	7,8340,017	6,5010,015a	8,1360,019b	10,2440,015 b	12,3580,016a

Примечание. а) - р<0,05; b)  -  р<0,01;  c) - р<0,001  по сравнению с предыдущим этапом.

Физико-химические свойства мембран во многом определяются жирнокислотным составом фракций фосфолипидов. Мембраны клеток, формирующие различные органы, существенно не отличаются по фосфолипидному составу. Поэтому исследование мембран, особенно эритроцитарных, вполне отражает состав фосфолипидов в любом органе, в том числе и гепатоцитов печени. На восстановление структуры и функции мембран, повышение активности гепатоцитов печени, как положительный результат выбора варианта ХЭ, указывает положительная динамика холестеролсинтезирующей функции печени, что подтверждается повышением в эритроцитах коэффициентов  в условиях ЛХЭ и ТХЭ: ФХ/СХС (недостоверно), ФЭА/СХС (недостоверно и на 27,31%), ЭХ/СХС (на 54,43% и в 2,84 раза), ФЭА/ФХ (недостоверно и на 42,56%) , а также снижение ЛФХ (на 18,75% и 25,81%) в сравнении с 1-ми сутками (табл. 7, 11).

Таблица 11

Коэффициенты отношений фракций фосфолипидов эритроцитов в зависимости от  способа ХЭ (M m)

Отношения фрак ций	Группа	Этапы исследования
		предопера ционный (1 этап)	интраопера ционный (2 этап)	послеопера ционный 1-е сутки (3 этап)	послеопера ционный 3-и сутки (4 этап)	послеопера ционный 5-е сутки (5 этап)
ЭХС/ СХС	ХЭ	0,5160,011	0,4740,008	1,2580,013c	2,4690,011c	0,7960,012b
	ТХЭ	0,6980,009	1,2560,011c	1,5650,011b	1,4090,014	1,9790,013c
ФЭА / СХС	ХЭ	0,0770,001	0,1390,011c	0,0690,01c	0,0580,002a	0,0780,002b
	ТХЭ	0,0740,002	0,2830,011c	0,0790,001c	0,0890,002	0,0940,003
ФХ/ СХС	ХЭ	0,1160,011	0,2390,012c	0,1140,009c	0,0960,001a	0,1070,009
	ТХЭ	0,0960,001	0,2730,011c	0,0550,001c	0,0870,002c	0,0860,001
ФЭА/ ФХ	ХЭ	0,6600,012	0,5840,012	0,6020,011	0,6030,011	0,7250,012a
	ТХЭ	0,7730,013	1,0370,013c	1,4380,012b	0,7850,011c	1,1020,012c

  Примечание. а) - р<0,05; b)  -  р<0,01;  c) - р<0,001  по сравнению с предыдущим этапом.

Специфичность варианта доступа, выражающаяся в разном диапазоне изменения показателей окислительного метаболизма липидов, проявлялась в мембранных и плазматических липидах крови на всех этапах исследования. Установленный характер изменения ФЛ и ХС в плазме и мембранах клеток крови свидетельствует об активном обмене между ними жирнокислотными компонентами и холестеролом. Это факт может рассматриваться как компенсаторный процесс, необходимый для нормализации функций мембран, который способствует снижению активности ЛПО, путем регуляции состава липидов мембран клетки.

Как показали исследования, окислительный стресс и активация фосфолипаз являются одним из ведущих механизмов окислительного метаболизма мембранных и плазматических липидов. Дополнение α-ТФ протокола хирургического лечения больных оказывает корригирующее влияние на состояние системы ЛПО-АОЗ и усиливает мембранотропный эффект в мембранных и плазматических липидах крови, что позволяет рекомендовать их включение в комплексную интенсивную терапию  хирургических больных.

ВЫВОДЫ

1. Метаболическое влияние варианта холецистэктомии на липиды эритроцитов и тромбоцитов у больных при хирургическом лечении хронического калькулезного холецистита сопровождается однонаправленным изменением показателей ЛПО-АОЗ на интраоперационном этапе: повышением содержания первичных продуктов липидпероксидации, уменьшением концентрации общих липидов, увеличением периода индукции, снижением скорости окисления липидов. В тоже время для липидов плазмы крови установлено снижение периода индукции и повышение скорости окисления.
2. В раннем послеоперационном периоде влияние варианта холецистэктомии на окислительный метаболизм липидов эритроцитов, тромбоцитов и плазмы крови у больных при хирургическом лечении хронического калькулезного холецистита сопровождается разнонаправленным изменением показателей ЛПО-АОЗ, имеющие максимальное увеличение или уменьшение на 3-и сутки. Метаболические изменения носят фазный характер, более выраженные в направлении стабилизации в условиях ТХЭ в сравнении с предоперационным уровнем.
3. Хирургический стресс в сочетании с влиянием способа холецистэктомии активируют нарушения в системе липолиз - липогенез в клеточных мембранах и плазме крови, разнонаправлено изменяют содержание фосфолипидов и холестерола. На интраоперационном этапе не выявлено существенных различий в зависимости от способа холецистэктомии, специфические метаболические нарушения липидного обмена проявляются в раннем послеоперационном периоде и более выражены в мембранных липидах в условиях ЛХЭ, по сравнению с ТХЭ.
4. Окислительный метаболизм и липолиз на этапах исследования в условиях ТХЭ вызывают наименьшие деструктивные изменения в липидах тромбоцитов, более выраженные - эритроцитов и плазмы крови, в сравнении с ЛХЭ.
5. Антирадикальный и мембранотропный эффект α-токоферола при хирургическом лечении холецистита при ТХЭ на всех этапах операции сопровождается выраженным угнетением ЛПО, более широким диапазоном изменений содержания фракций ФЛ и холестерола в мембранных и плазматических липидах, в отличие от метаболического эффекта α-ТФ в условиях ЛХЭ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Учитывая наличие изменений в состоянии системы ЛПО-АОЗ при хирургическом лечении хронического калькулезного холецистита, целесообразно проводить профилактику α-токоферолом на этапе подготовки больных и во время операции, а также в послеоперационном периоде.
2. Необходимо обратить внимание врачей на возможность ограничения гомеостатических и гемокоагуляционных сдвигов путем введения в протокол хирургического лечения больных α-токоферола, что обеспечит более высокую гемостатическую стабильность, нормализует метаболические процессы мембранных и плазматических липидов, улучшит антиоксидантную защиту в клетке.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Кадочникова Г.Д. Эффекты альфа-токоферола на окислительный метаболизм липидов эритроцитов в условиях анестезии с пропофолом / Г.Д. Кадочникова, С.Л. Галян, М.В. Кобелев, В.В. Тихонова // Материалы медико-фармацевтической научно-практической конференции УраФО Актуальные вопросы лекарственного обеспечения населения УраФО в системе дополнительного лекарственного обеспечения. - Тюмень, 2006. - С. 153Ц158.
2. Галян С.Л. Влияние альфа-токоферола на липидпероксидацию эритроцитов в условиях анестезии с пропофолом / С.Л. Галян, Г.Д. Кадочникова, М.В. Кобелев, В.В. Тихонова // Материалы медико-фармацевтической научно-практической конференции УраФО Актуальные вопросы лекарственного обеспечения населения УраФО в системе дополнительного лекарственного обеспечения. - Тюмень, 2006. - С. 148Ц153.
3. Кадочникова Г.Д. Влияние компонентов анестезии на процесс липидпероксидации крови у хирургических больных / Г.Д. Кадочникова, М.В. Кобелев, О.З. Мустаев//Материалы Всероссийской научно-методической конференции Пути и формы совершенствования фармацевтического образования. Создание новых физиологически активных веществ.ЦВоронеж, 2007.ЦС.149Ц151.
4. *Кобелев М.В. Окислительный метаболизм липидов мембран эритроцитов в зависимости от выбора протокола анестезии при лапароскопической холецистэктомии / М.В. Кобелев, А.В. Финкель, Г.Д. Кадочникова, А.В. Махнев, Н.С. Бессонова // Медицинская наука и образование Урала.  - Тюмень, 2008. - № 5. - С. 62Ц64.
5. Кадочникова Г.Д. Влияние компонентов анестезии на развитие окислительного метаболизма липидов эритроцитов в раннем послеоперационном периоде при холецистэктомии / Г.Д. Кадочникова, М.В. Кобелев, В.Н. Немцов, Т.Д. Журавлева // Актуальные проблемы фармацевтической помощи в современных условиях. - Тюмень, 2008. - С. 135-138.
6. Финкель А.В. Влияние выбора анестетика на развитие окислительного стресса при хирургическом лечении желчекаменной болезни / А.В. Финкель, Г.Д. Кадочникова, С.Л. Галян,  М.В. Кобелев, Н.С. Бессонова // Вестник интенсивной терапии. - Москва, 2008. - № 5. - С. 104-106.
7. Бессонова Н.С. Сравнительная оценка влияния компонентов анестезии на развитие окислительного стресса при хирургическом лечении желчекаменной болезни / Н.С. Бессонова, М.В. Кобелев, А.В. Финкель // Материалы 42-й Всероссийской научной конференции с международным участием студентов и молодых ученых Актуальные проблемы теоретической, экспериментальной, клинической медицины и фармации. - Тюмень, 2008. - С. 31-32.
8. Кобелев М.В. Воздействие анестезиологических препаратов на липидпероксидацию мембран эритроцитов при холецистэктомии / М.В. Кобелев, Н.С. Бессонова, А.В. Финкель // Материалы 42-й Всероссийской научной конференции с международным участием студентов и молодых ученых Актуальные проблемы теоретической, экспериментальной, клинической медицины и фармации. - Тюмень, 2008. - С. 37-38.
9. Кадочникова Г.Д. Метаболические эффекты компонентов анестезии на липолиз в эритроцитах / Г.Д. Кадочникова,  Н.С. Бессонова, А.В. Финкель, М.В. Кобелев // Межрегиональный сборник материалов научно-практической конференции Фармацевтическая наука, образование и практика: реалии и перспективы развития. - Тюмень, 2009. - С. 194Ц198.
10. Кадочникова Г.Д. Оценка эффектов компонентов анестезии на процесс липидпероксидации в эритроцитах / Г.Д. Кадочникова,  М.В. Кобелев, Н.С. Бессонова, А.В. Финкель // Межрегиональный сборник материалов научно-практической конференции Фармацевтическая наука, образование и практика: реалии и перспективы развития. - Тюмень, 2009. - С. 198Ц201.
11. *Кадочникова Г.Д. Влияние комбинированной анестезии с использованием изофлурана на процесс липидпероксидации эритроцитов при лапароскопической холецистэктомии / Г.Д. Кадочникова, А.В. Финкель,  В.А. Петров, М.В. Кобелев, Н.С. Бессонова // Материалы V съезда ассоциации анестезиологов-реаниматологов северо-запада России. - Эфферентная терапия. - Санкт-Петербург, 2009. - Т. 15. - № 1-2. - С. 63-65.
12. Кадочникова Г.Д. Окислительный метаболизм липидов эритроцитов в условиях анестезии с изофлураном / Г.Д. Кадочникова, А.В. Финкель, В.А. Петров, М.В. Кобелев, Н.С. Бессонова, Н.С. Киянюк // Материалы конгресса терапевтов Актуальные вопросы диагностики и лечения наиболее распространенных заболеваний внутренних органов. - Тюмень, 2009. - С. 63-64.
13. *Кадочникова Г.Д. Исследование процессов липероксидации в эритроцитах и плазме крови в условиях анестезии с пропофолом и тиопенталом натрия / Г.Д. Кадочникова, А.В. Финкель, М.В. Кобелев, А.В. Махнев, В.А. Петров // Медицинская наука и образование Урала.-Тюмень, 2010.Ц№ 2.ЦС.62Ц64.
14. Кобелев М.В. Исследование процессов липидпероксидации крови в условиях анестезии с пропофолом или тиопенталом натрия / М.В. Кобелев, А.В. Махнев // Глава в монографии  С.Л. Галян, Г.Д. Кадочникова, Т.Д. Журавлева Окислительный метаболизм липидов крови при критических состояниях. - Тюмень: ООО "Печатник", 2010. - С. 18-28.
15. Бессонова Н.С. Исследование влияния анестезии с тиопенталом натрия на метаболизм липидов / Н.С. Бессонова, М.В. Кобелев, В.А. Петров // Глава в монографии С.Л. Галян, Г.Д. Кадочникова, Т.Д. Журавлева Окислительный метаболизм липидов крови при критических состояниях. - Тюмень: ООО "Печатник", 2010. - С. 35-41.
16. *Кобелев М.В. Активность процессов свободно-радикального окисления и антиоксидантной активности липидов крови при анестезии пропофолом или тиопенталом натрия / М.В. Кобелев, Г.Д. Кадочникова, А.В. Финкель // X Юбилейная Всероссийская научно-практическая конференция Актуальные вопросы клиники, диагностики и лечения в многопрофильном лечебном учреждении. - Вестник Российской Военно-медицинской академии. - Санкт-Петербург, 2011. - № 1 (33). - С. 424-425.
17. Кобелев М.В. Свободно-радикальное окисление и антиоксидантная активность липидов крови при анастезии тиопенталом натрия и пропофолом / М.В. Кобелев, Д.А. Мальцев, Д.И. Бояринцев // Материалы 45-й Всероссийской научной конференции с международным участием студентов и молодых ученых Актуальные проблемы теоретической, экспериментальной, клинической медицины и фармации. - Тюмень, 2011. - С. 35.
18. *Кадочникова Г.Д. Оценка влияния кетамина и тиопентала натрия на окислительный метаболизм липидов крови / Г.Д. Кадочникова, Н.С. Бессонова, М.В. Кобелев, В.А. Петров, Т.Ю. Ильиных // Материалы VI съезда ассоциации анестезиологов-реаниматологов северо-запада России. - Эфферентная терапия. - Санкт-Петербург, 2011. - Т. 17. - № 3. - С. 42Ц43.

( * -  публикации в журналах, рекомендованных ВАК)

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

α-ТФ Ц	альфа-токоферол	ОХС  Ц	общий холестерол
АОЗ  Ц	антиоксидантная защита	ПИ  Ц	период индукции
ДК  Ц	диеновые конъюгаты	СО  Ц	скорость окисления
ЖКБ Ц	желчнокаменная болезнь	СХС  Ц	свободный холестерол
ПО Ц	ипидпероксидация	ФХ  Ц	фосфатидилхоин
ФХ Ц	изофосфатидилхолин	ФС  Ц	фосфатидилсерин
ОЛ  Ц	общие липиды	ФЭА Ц	фосфатидилэтаноламин
ОФЛ Ц	общие фосфолипиды	ЭХС Ц	эфиры холестерола
ТХЭ  -         -	традиционная холецистэктомия	ХЭ -	апароскопическая холецистэктомия
АКМ - активные кислородные метаболиты

Кобелев Максим Владимирович

ИЗМЕНЕНИЕ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО МЕТАБОЛИЗМА И

АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ ЛИПИДОВ КРОВИ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ СПОСОБАХ ХОЛЕЦИСТЭКТОМИИ,

ИХ КОРРЕКЦИЯ АЛЬФА-ТОКОФЕРОЛОМ

03.01.04 - Биохимия

Автореферат

диссертации на соискание ученой
степени кандидата медицинских наук

Подписано в печать 01.03.2012
Формат 60х84/16. Печ. л. 1,0. Печать ризограф.
Тираж 100. Зак. № 04/13.

Типография ООО Печатник, лицензия ПД № 17-0027

Тюмень, ул. Республики, 148 корп. 1/2.

Тел. (3452) 20-51-13, тел./факс (3452) 32-13-86

     Авторефераты по всем темам  >>  Авторефераты по биологии