Авторефераты по всем темам  >>  Авторефераты по биологии  

На правах рукописи

Назарова Екатерина Алексеевна

ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЙ СТАТУС И ПРОДУКТИВНЫЕ КАЧЕСТВА ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ ПРИ КОМПЛЕКСНОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ЛАКТОАМИЛОВОРИНА И СЕЛЕНИТА НАТРИЯ

03.01.04 - биохимия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Боровск - 2012

Диссертационная работа выполнена в ФГБОУ ВПО Оренбургский государственный аграрный университет

Научный руководитель - доктор биологических наук, профессор

Герасименко Вадим Владимирович

Официальные оппоненты - Микулец Юрий Иванович доктор

биологических наук, профессор,

заведующий сектором информатики и

компьютеризации отделения экономики

и земельных отношений

Россельхозакадемии

  Саковцева Татьяна Владимировна

кандидат биологических наук, доцент

кафедры  морфологии и физиологии

Российского аграрного университета-

МСХА имени .А.Тимирязева

Ведущая организация Ц  Институт биоэлементологии ФГБОУ ВПО Оренбургский государственный университет

Защита диссертации состоится  4 июля 2012 года в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 006.030.01 при ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных.

Адрес института: 249013, Калужская область, г. Боровск, пос. Институт, ВНИИФБиП с.-х. животных, тел. 8 (495) 996-34-15, факс: 8 (484-38) 4-20-88.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского государственного научно-исследовательского института физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных.

Автореферат разослан л___________ 2012 г. и размещен на официальном сайте Министерства образования и науки РФ vak.ed.gov.ru  и на сайте института  www.bifip.ru л___________ 2012 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

кандидат биологических наук Лазаренко В.П.

1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Широкий производственный опыт показывает, что у высокопродуктивных птиц в ранний постнатальный период заболеваемость и связанная с ней летальность от желудочно-кишечных болезней, вызванная условно-патогенной микрофлорой, достигает значительных величин ввиду несовершенства адаптационных, защитно-приспособительных механизмов, недостаточности популяционного уровня представителей нормальной микрофлоры (Гулюшин С. и др., 2010; Мартыновченко В., Васильев А., 2010).

В результате нормализации качественного и количественного состава микробного биоценоза возможна оптимизация течения физиолого-биохимических процессов у молодняка сельскохозяйственной птицы. Для коррекции состава микробного консорциума в настоящее время активно применяются пробиотические препараты (Жданов П.И., 1994; Тараканов Б.В., Николичева Т.А., 2000; Каблучеева Т.И., 2001; Крапивина Е.В. и др., 2009; Ноздрин Г.А. и др., 2009; Олива Т.В., 2009; Шевченко А.И. и др., 2009).

Многочисленные исследования по изучению влияния пробиотиков на жизнедеятельность макроорганизма свидетельствуют об улучшении микробного баланса кишечника, что положительно отражается на устойчивости организма к действию негативных внешних факторов, сохранности и продуктивности животных и птиц (Субботин В.В., Степанов К.М., 1998; Ноздрин Г.А., 2003; Брылин А.П., 2006; Панин А.Н., Малик Н.И., 2006; Тараканов Б.В., 2006; Темираев Р.Б. и др., 2009; Пышманцева Н.А. и др., 2011).

Реализация генетического потенциала сельскохозяйственной птицы достаточно сильно зависит от обеспеченности эссенциальными микронутриентами, одним из которых является селен. Он воздействует на интенсивность и направленность метаболических потоков посредством поддержания оптимальной интенсивности свободнорадикальных процессов и сбалансированности функционирования иммунной, антиоксидантной и монооксигеназной систем организма (Галочкин В.А., Галочкина В.П., 2011). Исследованиями сотрудников института питания РАМН установлено, что недостаток селена в организме человека в целом по России диагностируется более чем в 80% случаев (Тутельян В.А. и др., 2002;), не исключение и Оренбургская область (Нотова С.В. и др., 2005; Бурцева Т.И., Бурлуцкая О.И., 2006). В связи с чем, актуальным вопросом является возможность коррекции селенового статуса населения посредством функциональных продуктов питания (Голубкина Н.А. и др., 2002, 2006; Фисинин В.И., 2002). Использование селенсодержащих препаратов в рационах для птиц способствует повышению продуктивности и увеличению содержания микроэлемента в тканях птицы.

Кроме того, Герасименко В.В. (2005), Шевченко А.И. (2009) отмечают положительную роль пробиотических препаратов в поддержании оптимального уровня свободнорадикальных процессов в макроорганизме. Некоторые авторы сообщают, что селен обладает свойствами пребиотика (Блинохватов А.Ф. и др., 2001; Crittenden R.C., 1999). Однако сведений о воздействии пробиотических препаратов на метаболизм селена в организме птицы практически нет. Это и послужило основанием для проведения исследований.

Цель и задачи исследований. Целью работы является изучение общих закономерностей воздействия комплекса лактоамиловорина и селенита натрия на физиолого-биохимический статус и продуктивные качества цыплят-бройлеров.

Для достижения намеченной цели были поставлены следующие задачи:

1. Установить наиболее рациональный способ стимуляции продуктивных качеств цыплят-бройлеров при введении в рацион пробиотика, селена и их комплекса.

2. Дать оценку переваримости и использованию питательных веществ корма при совместном использовании селенита натрия и лактоамиловорина в рационах цыплят-бройлеров.

3. Выявить особенности белкового, углеводного, липидного и минерального обмена у цыплят-бройлеров, при использовании комплекса лактоамиловорина и селенита натрия.

4. Изучить влияние совместного применения лактоамиловорина и селена на гематологические показатели, уровень естественной резистентности и антиоксидантный статус цыплят-бройлеров.

5. Оценить экономическую эффективность применения селенита натрия и лактоамиловорина в рационах цыплят-бройлеров.

Научная новизна. На основании полученных результатов дано физиолого-биохимическое обоснование комплексного применения лактоамиловорина и селенита натрия. Впервые были получены данные об особенностях белкового, углеводного, липидного и минерального обмена в организме цыплят-бройлеров под влиянием комплекса препаратов. Получены новые сведения о воздействии совместного применения пробиотика лактоамиловорина и селенита натрия на гематологические показатели, уровень естественной резистентности и антиоксидантный статус цыплят-бройлеров.

Практическая значимость. Комплексные исследования метаболических процессов, физиолого-биохимических и гематологических показателей при совместном использовании лактоамиловорина и препаратов селена позволяют рекомендовать производству приемы, положительно влияющие  на биологическую ценность получаемой продукции и экономические показатели производства.

Апробация работы. Результаты диссертационной работы представлены, обсуждены и одобрены на Всероссийской молодежной выставке-конкурсе прикладных исследований, изобретений и инноваций (г. Саратов, 2009), II Всероссийской научно-практической конференции Новые технологии в промышленности, науке и образовании (Оренбург, 2010), Международной научно-практической конференции Наука и инновации в сельском хозяйстве (г. Курск, 2011), Международной научно-практической конференции Аграрная наука и образование в условиях становления инновационной экономики (г. Оренбург, 2011), Международной научно-практической конференции Промышленное и декоративное птицеводство: проблемы и перспективы (г. КамТянець-Подльський, 2011), V Всероссийской научно-практической конференции Проблемы экологии Южного Урала (г. Оренбург, 2011), III Международной конференции Биоэлементы (г. Оренбург, 2011), на областной и Всероссийской выставке НТТМ (г. Оренбург, 2011, 2012, г. Москва, 2011), Всероссийском молодежном образовательном форуме Селигер-2011. Работа представлена на конкурсе научно-технических инновационных проектов Прорыв на право получение гранта Оренбургского ГАУ (г. Оренбург, 2011); Всероссийском конкурсе научно-исследовательских работ студентов и аспирантов в области биологических наук (г. Ульяновск, 2011), конкурсе на соискание звания Лауреат премии Губернатора Оренбургской области в сфере науки и техники (г. Оренбург, 2011).

Публикация результатов исследования. По результатам исследования опубликовано 12 печатных работ, в том числе 7 публикаций в изданиях, рекомендованных ВАК Министерства образования и науки РФ.

Положения, выносимые на защиту:

1. Применение комплекса лактоамиловорина и селенита натрия в рационах цыплят-бройлеров способствует повышению использования основных питательных веществ корма, кроме липидов.

2. Результаты биохимических и гематологических исследований свидетельствуют о положительном влиянии лактоамиловорина и селенита натрия на интенсивность метаболических процессов, состояние естественной резистентности и антиоксидантный статус цыплят-бройлеров.

3. Совместное использование лактоамиловорина и селенита натрия экономически целесообразно при выращивании цыплят-бройлеров.

Объем и структура диссертации. Диссертация представлена на 170 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов исследования и их обсуждения, выводов, практического предложения, списка литературы и приложения. Содержит 45 таблиц и 27 рисунков. Список литературы включает 300 источников, в том числе 80 иностранных авторов.

2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования выполнялись в период с 2009 по 2012 год на базе вивария факультета ветеринарной медицины и биотехнологии ФГБОУ ВПО Оренбургский ГАУ, ЗАО птицефабрика Оренбургская Оренбургского района Оренбургской области, межкафедральной комплексной аналитической лаборатории ФВМиБ и кафедры химии ФГБОУ ВПО Оренбургский ГАУ. Объектом исследования являлись цыплята-бройлеры кросса Смена-7. Было проведено 2 научно-хозяйственных опыта и одно производственное испытание. Общая схема исследований представлена на рисунке 1.

Рис. 1 - Общая схема исследований

Целью проведения первого опыта являлось определение характера и степени воздействия скармливания лактоамиловорина, селенита натрия и их комплекса на продуктивные качества цыплят-бройлеров. При этом группы птиц были сформированы в дублях для параллельного определения зоотехнических и некоторых физиолого-биохимических параметров организма цыплят. Второй опыт был выполнен с целью изучения физиолого-биохимических особенностей организма цыплят-бройлеров, получавших комплекс пробиотика лактоамиловорина и селенита натрия. На фоне второго экспериментального исследования был проведен физиологический (балансовый) опыт. Для подтверждения результатов исследования была проведена производственная проверка на ЗАО птицефабрика Оренбургская Оренбургского района Оренбургской области.

В экспериментах использовали селенит натрия (Na2SeO3) ТУ 6-09-17-209-88 квалификации Ч, и пробиотик лактоамиловорин с титром колониеобразующих единиц 8*108-9*108 в 1 г - препарат на основе Lactobacillus amylovorus БТЦ24/88, который получен в лаборатории биотехнологии микроорганизмов ГНУ ВНИИФБиП с.-х. животных (Тараканов Б.В., 1996). При этом расчет дозы вели по отношению к титру 1010 КОЕ/г.

При проведении экспериментальных исследований группы формировались по принципу аналогов методом случайной выборки по 35 цыплят суточного возраста, которые выращивались до 42 дней при клеточном содержании. Условия для всех групп птиц были одинаковы и соответствовали рекомендациям по выращиванию цыплят-бройлеров кросса Смена-7. Кормление птицы осуществляли сухими сбалансированными комбикормами с параметрами питательности, соответствующими рекомендуемым нормам ВНИТИП (2003). В рацион опытных групп препараты вводили методом ступенчатого смешивания согласно схеме, представленной в табл. 1.

Таблица 1 - Схема первого научно-хозяйственного опыта

Группа	Количество голов, шт	Период проведения опыта, дней	Условия кормления цыплят-бройлеров в период проведения опыта
Контрольная	35	1-42	Основной рацион (ОР)
I опытная	35	1-42	ОР+ лактоамиловорин 50 мг/1 кг корма (в пересчете на титр 1010 КОЕ/г) + Na2SeO3 0,2 мг/кг корма (в пересчете на элемент)
II опытная	35	1-42	ОР+ лактоамиловорин 50 мг/1 кг корма (в пересчете на титр 1010 КОЕ/г)
III опытная	35	1-42	ОР+ Na2SeO3 0,2 мг/кг корма (в пересчете на элемент)

Птица имела свободный доступ к корму и воде.

Кровь для изучения физиолого-биохимического статуса цыплят-бройлеров в количестве пяти проб из каждой группы отбирали еженедельно до утреннего кормления. При получении стабилизированной крови, для определения морфологических параметров, в качестве антикоагулянта использовали калиевую соль ЭДТА.

Влияние пробиотического, селенсодержащего препаратов и их композиции на физиолого-биохимический статус и мясную продуктивность цыплят-бройлеров оценивали по следующим показателям:

• Зоотехнические параметры: сохранность поголовья учитывали по количеству павшей птицы ежедневно; живую массу птиц определяли еженедельно на электрических весах Kenwood (индивидуальным взвешиванием всего поголовья); химический состав мяса птиц определяли у 5 тушек из каждой группы (количество белковых веществ, жира, минеральных веществ и воды в мясе по методу предложенному Маслиевой О.В. (1970)); содержание селена в органах определяли методом атомно-абсорбционной спектроскопии;

- Гематологические показатели определяли на автоматическом гематологическом анализаторе PCE 90 Vet, который позволяет провести морфологический анализ крови птиц по таким параметрам как: WBC, *109/L (количество лейкоцитов); RBC, *1012/L (количество эритроцитов); HGB, g/L (концентрация гемоглобина); гематокрит, %; MCV, fL (средний объем эритроцита); MCH, pg (среднее содержание гемоглобина в эритроците); RDW, % (распределение эритроцитов по объему); а также позволяет строить гистограммы эритроцитов, на оси абсцисс которых отражен объем клеток, а на оси ординат количество красных кровяных телец.

- Биохимические показатели определяли в сыворотке крови на фотометре Stat Fax 1904 при помощи наборов фирмы Ольвекс диагностикум по прилагаемым к ним инструкциям: общий белок биуретовым методом; мочевину уреазным фенол-гипохлоритным методом; креатинин псевдокинетическим методом на основе реакции Яффе без депротеинизации; кальций унифицированным колориметрическим методом с о-крезолфталеин комплексоном; фосфор неорганический спектрофотометрическим методом; магний колориметрическим методом без депротеинизации; калий нефелометрическим  методом  без депротеинизации; натрий колориметрическим методом; глюкозу энзиматическим колориметрическим методом без депротеинизации; общий холестерол и триацилглицеролы энзиматическим колориметрическим методом; аланинаминотрансферазу (КФ 2.6.1.2), аспартатаминотрансферазу (КФ 2.6.1.1), -глутамилтрансферазу (КФ 2.3.2.2) энзиматическим кинетическим методом; общее количество антиоксидантов (TAS) устанавливали по реакции образца сыворотки крови с ABTSо (2,2-азино-ди-3-этилбензтиазолин сульфонатом)  и системой Н2О2-метмиоглобин по снижению интенсивности окраски образовавшегося комплекса феррилмиоглобин-ABTSо (лTAS Randox); активность внутриэритроцитарных ферментов исследовали в гемолизате: селензависимой глутатионпероксидазы (GPx) (КФ 1.11.1.9) - по методу Paglia D.E. и Valentine W.N. с использованием тест-системы Ransel Randox Laboratories и супероксиддисмутазы (СОД) (КФ 1.15.1.1) - по методу Sun Y. диагностическим набором Ransod Randox Laboratories; концентрацию ТБК-активных продуктов (активных при реакции с тиобарбитуровой кислотой), определяли по методу Uchiyama M., Mihara M. (1980) с использованием диагностического набора фирмы Агат-Мед на спектрофотометре Unico; разделение белковых фракций проводили на устройстве электрофореза белков сыворотки крови УЭФ-01-Астра на пленках из ацетата целлюлозы по прилагаемой инструкции.

- Показатели естественной резистентности определяли по методикам, описанным Маслянко Р.П. (1984): бактерицидную активность сыворотки крови изучали по О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой; титр лизоцима определяли по З.В. Ермольевой и И.С. Буяновской; определение активности -лизина проводилось по ускоренному методу О.В. Бухарина.

Для определения переваримости питательных веществ был проведен балансовый опыт по методике ВНИТИП (2004). До проведения анализа пробы хранились в холодильнике. Затем образцы корма и помета изучали на предмет химического состава следующими методами: общий азот - по методу Кьельдаля, ГОСТ Р. 51417-99; массовая доля сырого жира - ГОСТ 13496.15-97; массовая доля сырой клетчатки - ГОСТ 13496.2-91;  сырая зола - ГОСТ 26226-95; расчет количества безазотистых экстрактивных веществ (БЭВ) корма проводили по методу ВНИТИП (2004).

Полученные в экспериментах цифровые данные обработаны методом вариационной статистики (Антонова В.С. и др., 2011). При нормальном распределении (то есть тождественности дисперсий в сравниваемых группах и разницы между средней арифметической и медианой менее 10%) оценку статистической значимости различий между группами проводили с помощью t-критерия Стьюдента. Если распределение отличалось от нормального, то использовали U-критерий Манна-Уитни. Достоверными считали различия при р0,05. Вычисления выполняли на персональном компьютере с использованием программы Microsoft Excel 2007 и Statistica 6.0.

3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И

ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Результаты первого экспериментального исследования свидетельствуют о том, что максимальный биологический эффект достигается в результате совместного применения лактоамиловорина и селенита натрия. Хотя данные препараты в отдельности оказывали положительный эффект на организм цыплят бройлеров, их влияние было не столь выраженным. В связи с этим в автореферате считаем целесообразным детальное представление данных воздействия комплекса пробиотика и селенита натрия на физиолого-биохимический статус птиц.

3.1 Переваримость питательных веществ корма

Анализ полученных данных по изучению переваримости основных питательных веществ корма показывает, что совместное использование препаратов оказало стимулирующее влияние на переваримость основных частей корма, исключая сырой жир. Переваримость жира цыплятами-бройлерами в контрольной группе была достоверно выше, чем у цыплят из опытной группы на 16,0%. Птица из опытной группы лучше усваивала протеин на 5,%, клетчатку на 1,2%, минеральные вещества на 5,1% и безазотистые экстрактивные вещества на 3,9%.

3.2 Морфологические показатели крови цыплят-бройлеров

Выраженного влияния использования комплекса лактоамиловорина и селенита натрия на возрастную динамику и содержание лейкоцитов в крови цыплят выявлено не было (таблица 2). Однако абсолютные значения данного показателя в опытной группе были несколько ниже, чем в контрольной группе, что не сказалось отрицательно на иммунном статусе и здоровье птиц.

Таблица 2 - Морфологические показатели крови цыплят-бройлеров

Возраст, сут.	WBC, 109/L		RBC, 1012/L		гематокрит, %		HGB, g/L		MCH, pg
	1	2	1	2	1	2	1	2	1	2
1	24,70,32		2,290,19		25,90,28		89,32,17		38,472,15
7	25,10,21	25,50,25	26,151,34	28,911,56	26,151,34	28,911,56	83,92,96	89,832,17	35,344,23	36,642,55
14	26,60,25	27,20,19	28,143,15	30,651,83	28,143,15	30,651,83	87,822,94	98,523,14*	42,471,17	42,082,17
21	28,20,39	27,80,51	29,092,83	31,781,65	29,092,83	31,781,65	110,13,47	119,272,37*	45,672,54	41,921,68
28	28,90,47	28,10,49	29,321,89	34,151,81	29,321,89	34,151,81	104,12,48	117,211,43*	40,511,11	38,854,14
35	26,50,54	26,90,28	30,081,38	34,831,41*	30,081,38	34,831,41*	111,51,57	121,842,17*	40,41,99	38,572,63
42	28,30,38	28,60,18	30,241,76	34,910,85*	30,241,76	34,910,85*	115,91,63	128,972,34*	42,972,61	40,432,99

Примечание: здесь и далее 1-контрольная группа, 2-опытная группа

*-различия между группами достоверны при р0,05

Пробиотик лактоамиловорин и селенит натрия оказали стимулирующее влияние на эритропоэз, что выражалось в умеренном увеличении содержания эритроцитов в крови птиц из опытной группы в пределах 3,3-19,4%. Величина гематокрита в крови птиц из опытной группы была также закономерно выше на 10,5-15,7%. Клетки красной крови цыплят-бройлеров высокофункциональны ввиду необходимости обеспечения очень высоких темпов роста. В этой связи концентрация гемоглобина находится на высоком уровне в крови птиц обеих изучаемых групп. На протяжении всего экспериментального исследования отмечается преимущество птиц из опытной группы относительно контрольной по данному показателю на 7,0-12,6%.

Сравнивая контрольную и опытную группы, отметим, что с двухнедельного возраста средний объем эритроцита у интактных птиц больше, чем у цыплят-бройлеров из опытной группы. Вероятно, с этим связано более низкое среднее содержание гемоглобина в эритроците цыплят, чей рацион был обогащен лактобактериями и селенитом натрия. Варьирование красных кровяных клеток по размеру в обеих группах на всех возрастных рубежах не было значительным (8,9% - 12,1%).

Установленный факт свидетельствует в пользу улучшения снабжения организма кислородом и более интенсивном течении окислительно-восстановительных процессов. Такие же закономерности воздействия пробиотиков и селена на морфологический состав крови отмечали многие ученые (Кулешов К., Трифонов Г., 2007; Тараканов Б.В. и др., 2007; Перепелкина Л.И., Краснощекова Т.А., 2008; Шевченко А.И., 2009).

3.3 Биохимические показатели крови цыплят-бройлеров

3.3.1 Белковый обмен в организме цыплят-бройлеров

Использование лактоамиловорина и селенита натрия оказало определенное влияние на белковый обмен в организме цыплят-бройлеров. Так, отмечалось повышение содержания общего белка в сыворотке крови птиц из опытной группы (таблица 3).

Таблица 3 - Содержание общего белка и белковых фракций в сыворотке крови цыплят-бройлеров

Воз- раст (сут.)	Общий белок, г/л		Альбумины, %		- глобулины, %		- глобулины, %		- глобулины, %
	1	2	1	2	1	2	1	2	1	2
1	23,670,23		43,170,48		17,150,21		11,470,19		28,210,29
7	24,220,38	24,870,54	43,970,51	44,000,42	17,520,21	17,280,22	12,110,17	11,750,22	26,400,19	26,980,15*
14	23,910,19	24,750,31*	44,820,42	44,970,51	17,290,16	16,770,24	11,340,21	11,140,18	26,550,18	27,120,14*
21	25,470,23	26,840,19*	45,420,21	46,240,24*	17,120,20	16,390,24*	10,950,15	10,230,19*	26,510,17	27,140,18
28	28,590,27	29,920,49*	46,200,27	47,230,31*	17,010,23	16,280,19*	10,620,18	9,820,20*	26,170,14	26,670,16
35	28,710,62	31,140,33*	46,160,34	46,570,28	16,970,25	16,090,24*	10,090,23	9,940,24	26,780,18	27,400,15
42	29,920,54	32,630,53*	45,720,39	46,070,52	16,720,24	16,100,17	10,480,21	10,090,31	27,080,19	27,740,17

Увеличение данного показателя под воздействием препаратов селена наблюдалось в работах Рубцова В. и Алексеевой С. (2006), Беляева В.И. и Балым Ю.П. (2007),  Пономаренко Ю. (2007), Яппарова И.А. (2010). Селенопротеины играют огромную роль в модуляции и контроле множества аспектов метаболизма тиреоидных гормонов, в частности периферического синтеза Т3 из Т4 и регуляции тиреоидальной активности гипофизарно-гипоталамическим путем (Сергина С.Н. и др., 2009; Hawkes W.C., Keim N.L., 2003). Установлено, что гормон щитовидной железы Т3 играет важную роль в обеспечении положительного баланса азота в организме и усилении синтеза белка (May J.D., 1978). В основе повышения содержания общего белка в сыворотке крови птиц под воздействием пробиотика лежит лучшее усвоение его из корма. Увеличение содержания белка в сыворотке крови может быть обусловлено не только этим фактором, но и тем, что применение лактоамиловорина улучшает состояние микробиоценоза кишечника, а микроорганизмы входящие в состав микрофлоры, участвуют в синтезе аминокислот, сами бактерии в результате лизиса также могут быть источником белка для организма цыплят-бройлеров (Никулин В.Н. с соавт., 2007; Braun O.H., Heine W.E., 1995).

Альбумины представляют собой аминокислотный резерв организма. В опытной группе содержание данной фракции белков в сыворотке крови птиц было выше аналогов из контроля, что свидетельствует об активизации белоксинтетической функции печени (Крапивина Е.В. и др., 2009; Трифонов Г.А. и др., 2010). Более высокое содержание альбуминов в сыворотке крови птиц из опытных групп координируется с более высоким приростом живой массы в течение исследуемого периода, поскольку считается, что альбуминовая фракция активно используется для синтеза белков тканей, являясь наиболее мелкодисперсной (Чечеткин А.В., 1982).

Под воздействием пробиотика и селенита натрия изменялось процентное соотношение подфракций глобулинов. Мы наблюдали увеличение -глобулиновой подфракции, при снижении - и -подфракций. Данную закономерность мы склонны объяснять тем, что в состав -глобулинов входят большое количество иммуноглобулинов, обеспечивающих защитные функции организма, что, в конечном итоге, отразилось на повышении сохранности птиц опытной группы. Сходные данные были получены в работах Ноздрина Г.А. с соавт. (2009), Шевченко А.И. с соавт. (2009).

О том, как проходит белковый обмен, можно судить по степени использования азота из корма, который необходим для построения мышечной ткани. В результате исследований мы отметили более высокое потребление кормосмеси и, соответственно, поступление азота в организм птиц опытной группы по сравнению с контролем. Степень усвоения азота также была выше в опытной группе, что свидетельствует о более эффективном использовании корма.

Анализируя динамику содержания мочевины в сыворотке крови птиц опытной группы (таблица 4), можно отметить превалирование над контрольными цифрами в течение опытного периода. Данный факт можно объяснить более высоким уровнем белкового обмена в организме птицы из опытной группы. Аналогичные данные были получены в опытах Шацких Е.В. (2009) на цыплятах-бройлерах при введении в рацион различных форм селена.

Креатинин крови отражает мышечную массу и интенсивность ресинтеза АТФ из АДФ и креатинфосфата в мышечных клетках (Ткачук В.А., 2004). Повышение концентрации креатинина в сыворотке крови птиц, рацион которых был обогащен селенитом натрия и лактоамиловорином, связано с тем, что масса цыплят из опытных групп была выше аналогов из контроля.

Таблица 4 - Некоторые показатели белкового обмена в сыворотке крови цыплят-бройлеров

Воз- раст (сут.)	мочевина, ммоль/л		креатинин, мкмоль/л		АсТ, Ед/л		АТ, Ед/л		-ГТФ, Ед/л
	1	2	1	2	1	2	1	2	1	2
1	2,730,18		28,10,57		68,32,17		9,30,29		45,72,14
7	2,140,13	2,280,14	33,42,14	34,21,35	68,83,21	69,25,41	7,60,32	7,70,17	45,11,28	45,72,17
14	1,980,17	2,110,17	48,62,36	51,41,87	69,41,47	70,34,29	6,10,32	6,80,46	43,22,65	43,62,36
21	1,650,12	1,850,13	46,32,17	51,61,93	72,32,58	71,85,33	6,80,41	7,20,33	42,82,11	43,12,41
28	1,720,13	1,910,11	58,31,84	62,52,14	73,61,61	74,33,21	7,10,25	7,60,27	41,61,97	42,51,08
35	1,810,11	2,150,08	67,21,32	70,61,24	76,32,18	77,62,14	7,60,34	7,50,34	41,21,58	41,92,34
42	1,780,09	2,170,12*	87,31,11	92,41,67*	75,44,33	76,44,32	8,30,29	8,20,28	39,81,63	40,52,61

Интенсивность синтеза белка в организме птицы обуславливается активностью некоторых ферментов, в частности таких как трансаминазы (аспартатаминотрансфераза (АсТ), аланинаминотрансфераза(АТ)) и -глутамилтрансфераза (-ГТФ). Повышение активности ферментов переаминирования при увеличении синтеза общего белка соответствует данным Насировой Ф.П. и др. (1981). Значительное повышение каталитической активности этих трех ферментов в сыворотке крови обусловливается негативными изменениями печени, клетки которой содержат большое количество АсТ, АТ и -ГТФ. При изучении энзимов мы выявили повышение их активности в сыворотке крови птиц опытной группы по отношению к контрольным значениям. При этом отрицательного влияния на состояние птиц отмечено не было и выявленную закономерность мы склонны объяснять именно более высоким уровнем белкового обмена у птиц опытной группы. Что подтверждает анализ литературных данных (Ткачук В.А., 2004; Комаров Ф.И., 2006). Кроме того, исследования Кулешова К. (2010) свидетельствуют о стимулирующем влиянии препаратов селена на активность ферментов переаминирования (АсТ и АТ) и -амилазы.

3.3.2 Некоторые показатели углеводно-липидного обмена в организме цыплят-бройлеров

При изучении переваримости основных питательных веществ корма нами было установлено, что в результате применения лактоамиловорина и селенита натрия увеличивается переваримость клетчатки. Кроме того, известно, что штамм Lactobacillus amylovorus БТЦ24/88 обладает способностью гидролизовать крахмал (Тараканов Б.В., 2007). Указанные процессы способствовали увеличению концентрации глюкозы в сыворотке крови птиц опытной группы относительно аналогов из контроля (таблица 5).

Таблица 5 - Некоторые показатели углеводно-липидного обмена в сыворотке крови цыплят-бройлеров, ммоль/л

Возраст (сут.)	глюкоза		триацилглицеролы		общий холестерол
	1	2	1	2	1	2
1	7,140,27		0,690,01		4,140,11
7	7,310,17	7,550,15	0,770,03	0,690,05	4,210,09	4,190,13
14	9,640,19	9,930,26	0,660,02	0,570,04	4,620,21	4,040,17
21	9,410,34	10,510,37	0,680,03	0,610,04	4,510,12	4,010,15*
28	10,340,28	11,250,34*	0,590,02	0,520,04	4,750,14	3,930,16*
35	10,270,42	11,170,14*	0,610,03	0,570,02	4,710,18	3,870,19*
42	10,480,36	11,230,47	0,570,01	0,510,03	4,720,24	3,740,22*

По данным некоторых авторов (Берзинь Я.М., Самохин В.Т., 1968), селен способствует увеличению содержания глюкозы в крови за счет усиления распада гликогена в печени. Ноздрин Г.А. и др. (2009), Кулешов К. (2010) отмечали аналогичное влияние препарата селена на концентрацию глюкозы в сыворотке крови птиц. Таким образом, совместное действие селена и пробиотика обуславливает отмеченные различия на уровне 3,3-8,8%.

Результаты физиологического опыта свидетельствуют о снижении переваримости жира под воздействием комплекса изучаемых препаратов в организме цыплят-бройлеров. Известно, что штамм Lactobacillus amylovorus БТЦ24/88 способствует деконъюгации желчных кислот. По данным Никулина В.Н. с соавт. (2007), Тараканова Б.В. (2007) деконъюгированные желчные кислоты обеспечивают снижение всасывания липидов в желудочно-кишечном тракте, что способствует прохождению жира транзитом через пищеварительную систему. Соответственно, содержание липидов в сыворотке крови также снижается, что и было зарегистрировано в наших исследованиях. Так, содержание триглицеролов в сыворотке крови птицы из опытной группы было ниже на протяжении всего периода исследований на 0,04-0,09 ммоль/л по отношению к контрольным цифрам. Под влиянием комплекса изучаемых препаратов зарегистрировано снижение концентрации общего холестерола в сыворотке крови птиц из опытной группы на 0,5-17,8%. Это, по-видимому, связано с тем, что некоторые виды лактобацилл способны ассимилировать холестерол в присутствии желчи и в анаэробных условиях из лабораторных сред (Gilliland S.E. et al., 1985).

3.3.3 Содержание макроэлементов в сыворотке крови  цыплят-бройлеров

Введение в рацион комплекса препарата селена и лактоамиловорина повлекло за собой повышение уровня основных макроэлементов в сыворотке крови: общего кальция на 8,0-18,8%,  неорганического фосфора на 7,1-15,6%, калия на 3,0-5,4%, натрия на 1,5-3,4% (таблица 6). При этом достоверных различий в содержании магния выявлено не было.

Таблица 6 - Содержание макроэлементов в сыворотке крови цыплят-бройлеров, ммоль/л

Воз- раст (сут.)	кальций		фосфор неорганичес-кий		магний		натрий		калий
	1	2	1	2	1	2	1	2	1	2
1	2,110,07		1,870,04		1,050,01		146,62,14		4,540,12
7	2,240,03	2,420,1	2,120,03	2,270,06	0,910,02	0,920,05	148,51,84	148,91,12	4,470,12	4,510,11
14	2,180,04	2,340,07	2,250,04	2,340,03	0,950,03	0,970,07	149,21,12	151,41,52	4,400,17	4,530,08
21	2,320,08	2,610,11	2,390,02	2,510,04*	1,010,04	0,990,04	154,31,36	154,71,26	4,320,13	4,430,14
28	2,270,09	2,750,09*	2,380,05	2,540,04*	1,070,01	1,090,03	154,91,24	156,11,32	4,510,08	4,560,08
35	2,390,06	2,620,06*	2,240,04	2,470,06*	1,160,01	1,180,04	157,21,36	158,31,22	4,620,07	4,790,11
42	2,230,08	2,650,08*	2,310,07	2,670,05*	1,110,02	1,150,03	156,71,42	161,71,47*	4,810,09	5,070,08*

Высокая эффективность влияния пробиотических препаратов на метаболизм минеральных веществ в макроорганизме подтверждена исследованиями (Никулин В.Н. и др., 2004; Герасимова О.В., 2006; Ширяева О.Ю. с соавт., 2006; Мирошников С.А. и др., 2010).

3.3.4 Параметры антиоксидантного статуса цыплят-бройлеров при комплексном применения селенита натрия и лактоамиловорина

Заключение об антиоксидантной роли селена до настоящего времени остается основополагающим в метаболических функциях соединений данного микронутриента (Ермаков В.В., 2004). Кроме того, Герасименко В.В. (2005); Шевченко А.И. (2009) отмечают положительную роль пробиотических препаратов в поддержании оптимального уровня свободнорадикальных процессов в макроорганизме. Изучение антиоксидантного статуса цыплят-бройлеров опытной и контрольной групп свидетельствует о позитивном влиянии пробиотика лактоамиловорина и селенита натрия на процессы антирадикальной защиты (таблица 7).

Это подтверждается увеличением каталитической активности ферментативного звена: супероксиддисмутазы на 7,6-15,4% и глутатионпероксидазы на 7,8-25,4%. В результате активизации ферментативного звена антиоксидантной защиты закономерно наблюдается снижение концентрации ТБК-активных продуктов в сыворотке крови цыплят из опытной группы на 8,5-19,5%.

Таблица 7 - Некоторые параметры антиоксидантного статуса цыплят-бройлеров

Воз- раст, сут.	СОД, Ед/г Hb		GPx, Ед/г Hb		TAS, ммоль/л		ТБК-активные продукты, мкмоль/л
	1	2	1	2	1	2	1	2
1	137128		56,71,6		1,320,14		10,60,11
7	120634	132136*	57,81,2	62,31,4*	1,670,12	1,870,05	8,20,09	7,50,12*
14	112925	121524*	52,61,5	61,51,5*	1,640,05	1,820,09	7,60,15	6,90,09*
21	119138	126122	50,31,8	58,11,7*	1,570,05	1,770,07*	5,90,07	5,10,12*
28	105135	114921*	44,12,1	55,31,9*	1,440,13	1,780,06*	4,00,08	3,50,07*
35	107221	122429*	50,31,8	58,21,6*	1,590,08	1,860,08*	4,10,12	3,30,08*
42	108429	125126*	50,51,5	60,81,9*	1,750,07	2,210,11*	2,80,05	2,50,09*

Суммарная концентрация антиоксидантов в сыворотке крови птиц из опытной группы была закономерно выше контрольных значений на 0,2-0,46 ммоль/л в течение учетного периода. Полученные данные согласуются с исследованиями Шацких Е., Лебедевой И. (2006), Цогоевой Ф. (2006) и др.

3.4 Показатели неспецифической резистентности организма цыплят-бройлеров

Совместное использование селенита натрия и лактоамиловорина способствовало повышению уровня естественной резистентности организма цыплят-бройлеров. При этом бактерицидная активность сыворотки крови птиц увеличилась на 5,5-8,2%, содержание лизоцима на 9,4-15,6%, активность -лизина на 1,1-2,7%.

Повышение иммунологического статуса цыплят-бройлеров из опытной группы координируется с увеличением процентного содержания -глобулиновой подфракции в группе цыплят, которым в рацион вводили комплекс пробиотического препарата и селенита натрия. Стимулирующее влияние лактоамиловорина на бактерицидную и лизоцимную активность животных отмечает Гаврилова Е.А. (2008), Тараканов Б.В. с соавт. (2005). Литературные данные свидетельствуют об иммуномодулирующем действии селена. Применение органических и неорганических форм селена в исследованиях Кальницкого Б.Д., Шацких Е.В. (2010) оказывало стимулирующее влияние на иммунный статус цыплят-бройлеров. Шевченко А.И. и др. (2009) отмечают положительное влияние пробиотика ветома 1.1 и Сел-Плекса на иммунологические показатели организма индеек.

3.5 Результаты анатомической разделки и определения химического состава мяса цыплят-бройлеров

Анализ изучаемых показателей мясной продуктивности свидетельствует о положительном влиянии совместного применения препарата селена и пробиотика лактоамиловорина. Живая масса цыплят в опытной группе превосходила значения таковой в контроле на 11,7%. Масса потрошеной тушки в опытной группе была выше контрольных значений в среднем на 147,1 г.

При этом пробиотик и селенит натрия не проявили значимого влияния на отношение съедобной части к несъедобной и на убойных выход, в результате чего масса потрошеной тушки была выше в результате увеличения живой массы. Масса мышц и костей также была пропорционально больше в опытной группе на 12,2% и 11,9% соответственно.

Химический состав мяса претерпевал некоторые изменения под воздействием лактоамиловорина и селенита натрия. Достоверно большим количеством протеина (на 2,6%) характеризовалось мясо птицы опытной группы. Что касается содержания жира, то в этом случае наблюдалась обратная тенденция: мясо птицы из контрольной группы содержало большее количество липидов на 0,46%. Качество мякоти характеризуется отношением содержания белка к содержанию жира, которое было выше в мясе птиц из опытной группы. В составе мяса цыплят-бройлеров из опытной группы отмечается более высокое содержание влаги. Достоверных отличий по содержанию минеральных веществ отмечено не было.

Дополнительное введение комплекса селенита натрия и лактоамиловорина в рацион цыплят-бройлеров способствует накоплению селена в теле птиц. Однако ретенция микронутриента в различных органах и тканях имела неоднозначный характер. Больше всего селена содержалось в печени, почках,  миокарде и головном мозге. Меньшая концентрация была выявлена в тонком и толстом отделе кишечника, крови. Несколько ниже содержание селена было в мышцах - бедренной и грудной, легких и коже.

3.6 Производственная проверка использования селенита натрия и  лактоамиловорина при выращивании цыплят-бройлеров

В результате проведения промышленных испытаний было установлено, что сохранность по окончанию опытного периода в контрольной группе составила 91,4%. В опытной группе данный показатель был выше на 4,3%.

Цыплята-бройлеры из опытной группы характеризовались большими привесами живой массы. В 42-х дневном возрасте данная разница была на уровне 10,5%. Несмотря на более высокое потребление корма на одну голову, использование комплекса селенита натрия и пробиотика лактоамиловорина позволило уменьшить затраты корма на килограмм прироста на 0,11кг. При этом себестоимость килограмма прироста снизилась на 0,8 руб. В опытной группе 80% тушек было отнесено к первой категории упитанности, в то время как в контрольной группе 74%. Применение рекомендуемого комплекса позволило повысить рентабельность на 3,0% и получить дополнительную прибыль в размере 3815,4  руб. в расчете на 1000 голов. Таким образом, введение лактоамиловорина и селенита натрия целесообразно с экономической точки зрения.

Предложение производству

С целью повышения экономической эффективности выращивания цыплят-бройлеров в промышленных условиях рекомендуем комплексное применение селенита натрия в дозе 0,2 мг/кг сухого корма (в пересчете на элемент) и пробиотика лактоамиловорина в дозе 50 мг/кг сухого корма (в пересчете на титр 1010 КОЕ/г). Данная схема применения способствует более полной реализации генетического потенциала продуктивности цыплят-бройлеров за счет повышения естественной резистентности птиц, оптимизации течения физиолого-биохимических процессов.

Выводы

1. Сравнительное изучение эффективности введения в рацион цыплят бройлеров селена, лактоамиловорина и их комплекса показало, что наибольший биологический и экономический эффекты отмечены при комплексном применении пробиотика и микронутриента.

2. Совместное применение селенита натрия и пробиотика лактоамиловорина  способствовало повышению усвоения основных питательных веществ: протеина на 5,5%, клетчатки на 1,2%, безазотистых экстрактивные веществ на 3,9%, минеральных веществ на 5,1%, при этом наблюдалось снижение усвоения липидов на 16,0%.

3. Комплексное использование препарата селена и лактоамиловорина способствовало повышению содержания общего белка в сыворотке крови на 3,5-9,1%.  Фракционный состав сывороточных белков изменялся за счет увеличения содержания альбуминов и -глобулинов и некоторого снижения количества - и -глобулинов. Повышение количества общего белка сопровождалось достоверным увеличением концентрации мочевины к концу исследуемого периода на 0,39 ммоль/л. Уровень креатинина был выше в опытной группе относительно  контроля на 2,4-5,8%. Кроме того, отмечена тенденция к повышению активности аминотрансфераз и -ГТФ.

4. При совместном использовании препаратов происходило снижение концентрации общего холестерола на 0,5-17,8% и триглицеролов на 0,04-0,09 ммоль/л. При этом отмечено повышение концентрации глюкозы в сыворотке крови на 3,3-8,8%. Введение в рацион комплекса препарата селена и лактоамиловорина повлекло за собой повышение уровня основных макроэлементов в сыворотке крови: общего кальция на 8,0-18,8%,  неорганического фосфора на 7,1-15,6%, калия на 3,0-5,4%, натрия на 1,5-3,4%. Включение в рацион цыплят-бройлеров препарата селена и пробиотика лактоамиловорина способствовало увеличению содержание селена в органах и тканях птиц.

5. Применение селенита натрия и лактоамиловорина способствовало повышению уровня естественной резистентности организма цыплят-бройлеров: бактерицидная активность сыворотки крови птиц увеличилась на 5,5-8,2%, содержание лизоцима на 9,4-15,6%, активность -лизина на 1,1-2,7%. Цыплята-бройлеры, получавшие комплекс препаратов, по своим гематологическим показателям отличались от контрольных: отмечено повышение содержания гемоглобина на 7,0 % - 12,6 % и эритроцитов на 3,3-19,4 %, соответственно увеличивалась величина гематокрита на 10,5-15,7 %.

6. В опытной группе наблюдалось увеличение активности ферментативного звена антиоксидантной системы (СОД на 7,6-15,4% и GPx на 7,8-25,4%), что обусловило снижение концентрации ТБК-активных продуктов на 8,5-19,5%. При этом было отмечено повышение общего количества антиоксидантов в сыворотке крови на 0,2-0,46 ммоль/л.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

1. Герасименко В.В., Мустафин Р.З., Назарова Е.А. Способ снижения уровня холестерина в продукции птицеводства // Сборник материалов Всероссийской молодежной выставки-конкурса прикладных исследований, изобретений и инноваций. - Саратов: Изд-во Сарат. ун-та, 2009. С. 65.
2. Герасименко В.В., Мустафин Р.З., Назарова Е.А. Способ оптимизации параметров антиоксидантного статуса макроорганизма // Сборник материалов Всероссийской молодежной выставки-конкурса прикладных исследований, изобретений и инноваций. - Саратов: Изд-во Сарат. ун-та, 2009. С. 63.
3. Герасименко В.В., Назарова Е.А. Способ повышения продуктивности сельскохозяйственной птицы // Вестник ОГУ. № 4. 2010. С. 30-31.
4. Герасименко В.В., Коткова Т.В., Назарова Е.А. Гематологические показатели у цыплят-бройлеров при введении в рацион лактобактерий и селена // Фундаментальные исследования. №8. 2011. ч.I. С. 88-90
5. Никулин В.Н., Герасименко В.В., Коткова Т.В., Назарова Е.А. Способ использования селена в комплексе с пробиотиком лактоамиловорином в кормлении цыплят-бройлеров // Промислове декоративне птахвництво: проблеми та перспективи: матерали мжнародно науково-практично конференцi, проведеноi у рамках Фестивалю Пташиний двр, 12-13 жовтня 2011 р. / Подльський державний аграрно-технчний унверситет. Ч КамТянець-Подльський: видавець Зволейко Д.Г., 2011. 116 с.
6. Никулин В. Н., Герасименко В. В., Коткова Т. В., Назарова Е. А., Абдуллина С. Н. Влияние комплексного использования пробиотического препарата и селенита натрия на антиоксидантную систему защиты организма цыплят-бройлеров // Вестник ОГУ. 2011. №15. С. 95-97.
7. Никулин В. Н., Герасименко В. В., Коткова Т.В., Назарова Е. А. Перспективы комплексного применения селена и пробиотика лактоамиловорина для повышения количества селена в продукции птицеводства Оренбургской области // Вестник ОГУ. 2011. №12. С. 412-414.
8. Герасименко В.В., Назарова Е.А., Береговая Н.Г., Коткова Т.В. Влияние лактобактерий и селена на гематологические показатели цыплят-бройлеров // Наука и инновации в сельском хозяйстве (Материалы международной научно-практической конференции, 26-28 января, 2011 г, г. Курск, ч.3). - Курск: Изд-во Курск. гос. с.-х. ак., 2011.  320 с.
9. Тараканов Б.В., Герасименко В.В., Коткова Т.В., Назарова Е.А., Абдуллина С.Н Влияние совместного применения селена и пробиотика на белковый обмен и продуктивность у цыплят-бройлеров // Проблемы биологии продуктивных животных. 2011. №4. С. 92-97.
10. Никулин В. Н., Герасименко В. В., Коткова Т. В., Назарова Е. А., Абдуллина С. Н. Эффективность комплексного применения  препаратов йода, селена и лактоамиловорина при выращивании цыплят-бройлеров // Зоотехния. 2012. №3. С. 17.
11. Герасименко В.В., Коткова Т.В., Назарова Е.А., Береговая Н.Г. Белковый спектр сыворотки крови цыплят-бройлеров в постинкубационном онтогенезе при введении в рацион пробиотика лактоамиловорина и селена // Аграрная наука и образование в условиях становления инновационной экономики: материалы международной научно-практической конференции. ч.I. Оренбург: издательский центр ОГАУ, 2012. С. 329-332.
12. Никулин В. Н., Герасименко В. В., Коткова Т. В., Назарова Е. А., Абдуллина С. Н. Влияние комбикормов с добавкой йода, селена и пробиотика на продуктивность цыплят-бройлеров // Кормопроизводство. 2012. №4. С. 41-43.

   Авторефераты по всем темам  >>  Авторефераты по биологии