На правах рукописи
ЯППАРОВ ИЛЬДАР АХТАМОВИЧ
ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ СЕЛЕНОРГАНИЧЕСКИХ КОРМОВЫХ
ДОБАВОК В ЖИВОТНОВОДСТВЕ
06.02.03. - ветеринарная фармакология с токсикологией
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
доктора биологических наук
Краснодар - 2012
Работа выполнена в Государственном научном учреждении Татарский научно-исследовательский институт агрохимии и почвоведения Российской академии сельскохозяйственных наук, г. Казань и Государственном научном учреждении Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук, г. Краснодар
Научный консультант: | Заслуженный деятель науки РФ, член-корреспондент РАСХН, доктор ветеринарных наук, профессор Антипов Валерий Александрович |
Официальные оппоненты: | доктор ветеринарных наук, профессор Семененко Марина Петровна доктор биологических наук, профессор Матюшевский Леонид Артемович доктор биологических наук, профессор Беляев Василий Иванович |
Ведущая организация: | ФГБОУ ВПО Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана |
Защита диссертации состоится л_17_ _мая_ 2012 г. в _1200_ часов на заседании диссертационного совета Д 220.038.07 при ФГБОУ ВПО Кубанский государственный аграрный университет по адресу: 350044, РФ г. Краснодар, улица Калинина, 13.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО Кубанский государственный аграрный университет по адресу: 350044, РФ г. Краснодар, улица Калинина, 13.
Отзывы на автореферат просим выслать по адресу: 350044, РФ г. Краснодар, улица Калинина, 13.
Автореферат разослан л _______ 201__г. и размещен на сайте: www.kubsau.ru и oфициaльнoм сайте ВAК РФ -
Ученый секретарь диссертационного совета И.А. Родин
1.ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность исследований. Селен является одним из микроэлементов, которому в последние десятилетия уделяется особое внимание ученых. Однако на сегодняшний день недостаточно изучены его физиологическое и биологическое значение для организма сельскохозяйственных животных. Биологическую роль селена, теоретические и практические вопросы применения этого элемента для животных и человека исследовали многие ученые (В.А. Кокорев и др., 2000; В.А. Тутельян и др., 2002; В.И.Фисинин и др., 2003; И.И. Ибатуллин и др., 2004; В.А. Антипов, 2005; Г.Ф. Кабиров, Н.М., Машковцев, 2005; А. Шимкус и др., 2006; Е.В. Шацких и др., 2007; Н.З. Хандаева, 2008). В этих работах сообщается, что гипоселенемия приводит к нарушению метаболизма, снижению естественной резистентности и иммунобиологической реактивности организма, необходимости изыскания и применения кормовых добавок, восполняющих эту микроэлементную недостаточность.
Неорганические соли биогенных металлов, в частности, селенит натрия, обладают токсичностью, их абсорбция в организме составляет не более 20-30% от примененного количества (В.И. Георгиевский и др.,1979). Препарат ДАФС-25 (диацетофенонлселенид), содержащий 25% органически связанного селена, снижает дефицит этого микроэлемента (В.И. Древко, 1998; Т.Н. Родионова, 2004). Однако в качестве источника восполнения микроэлементной недостаточности перспективна разработка и применение комплексных кормовых добавок с использованием природных минеральных ресурсов - цеолитов, бентонитов, вермикулитов и др.
Природные минералы, содержащие разнообразные макро- и микроэлементы, находят широкое применение в животноводстве в качестве кормовых добавок. Исследованиями последних лет установлена способность цеолитсодержащих, вермикулитовых и бентонитовых природных минералов к ионному и каталитическому обмену элементов в организме животных, а также сорбции и выведению солей тяжелых металлов, радионуклидов и других токсинов (А.В. Якимов и др., 2001-2008; М.Я. Тремасов и др., 2002; Л.К. Герунова, 2005; К.Х. Папуниди, 2005; В.Е. Улитько, 2008).
Таким образом, в современных условиях недостаточности минерального питания сельскохозяйственных животных необходима научно обоснованная разработка селенорганических кормовых добавок в сочетании с природными агроминералами, проведение комплексных исследований по выяснению их свойств, взаимосвязи содержания макро- и микроэлементов, действию на организм разных сельскохозяйственных животных с учетом особенностей пищеварения.
Цель и задачи исследований. Цель исследований - научно и практически обосновать разработку комплексных нативных и наноразмерных кормовых добавок селена, изучить их свойства и влияние на организм некоторых млекопитающих животных.
Для реализации этой цели были поставлены следующие задачи:
- разработать комплексные селенсодержащие кормовые добавки селебен, селецел, селевер на основе селенорганического препарата ДАФС-25 и природных минералов бентонита, цеолита, вермикулита;
- изучить физико-химические показатели, микро и наноструктуру ДАФС-25, бентонита, цеолита, вермикулита и созданных на их основе кормовых добавок;
- провести сравнительную оценку влияния различных доз селебена, селевера и селецела на концентрацию селена в органах и тканях, метаболизм и продуктивность плотоядных животных (норок);
- изучить фармако-токсикологические, биологические, морфо-физиологические, сорбентные свойства селебена на лабораторных животных и их органах;
- исследовать влияние различных доз селебена на метаболизм и продуктивность самок норок с учетом их физиологического состояния, с определением концентрации селена в органах и тканях системы мать - плоды - щенки и выявлением оптимальной дозы;
- применить различные дозы селебена в рационах щенков норок с определением концентрации селена в органах и тканях в зависимости от возраста и изучить влияние кормовой добавки на метаболизм и качество меховой продукции;
- определить влияние кормовых добавок селена на метаболизм, продуктивность, количественные и качественные показатели мяса всеядных животных в зависимости от возраста и условий техногенной нагрузки окружающей среды;
- провести анализ влияния различных доз селебена на организм травоядных животных с определением содержания селена в органах и тканях;
- рассчитать экономическую эффективность применения комплексных кормовых добавок селена в рационах норок.
Научная новизна. В работе решена крупная научная проблема, имеющая важное народно-хозяйственное значение. Впервые разработаны комплексные селенорганические кормовые добавки селебен, селецел, селевер с использованием диацетофенонилселенида и природных минералов - бентонитов, цеолитов и вермикулитов. На светооптическом и наноструктурном уровнях изучены их физико-химические свойства с установлением лучших показателей у селебена. Представлены два патента на изобретение №2429715 Кормовая добавка - Селевер от 27.09.2011 г. и Кормовая добавка - Селебен №2432774 от 10.11.2011 г., подана заявка на патент с положительным решением: Кормовая добавка на основе наноструктурного вермикулита от 05.09.2011 г.
Впервые проведены токсикологическая оценка, биологическое тестирование, морфо-физиологическое обоснование, выяснение сорбентных свойств селебена, селевера, селецела на лабораторных животных, in vitro, на молодняке норок с определением концентрации селена в органах и тканях и выявлением оптимальной дозы кормовых добавок.
Теоретически обосновано и экспериментально доказано положительное влияние разработанных комплексных селенорганических кормовых добавок на интенсивность роста, репродуктивную функцию, морфологические и биохимические показатели крови, структурно-функциональное состояние органов пищеварения и иммуногенеза на клеточном уровне, хозяйственно-полезную продуктивность некоторых сельскохозяйственных животных с повышением реализации их биоресурсного потенциала.
Впервые установлено влияние разработанных кормовых добавок на метаболизм некоторых млекопитающих животных с учетом особенностей их кормления и пищеварения: плотоядных (норки разного возраста и физиологического состояния), всеядных (свиньи разного возраста и физиологического состояния - беременные, подсосные, откормочные), травоядных (овцы разного возраста).
Практическая значимость работы заключается в том, что дано научное обоснование и разработана технология использования селенорганических кормовых добавок в обеспечении интенсификации производства пушнины, свинины и баранины. По результатам исследований, проведенных на разных видах животных, обобщена, доложена и опубликована на Международном, Российском и региональном уровнях информация о разработке новых комплексных селенорганических кормовых добавок, их свойствах и влиянии на продуктивность и метаболизм некоторых плотоядных, всеядных и травоядных животных.
Разработаны нормативные документы по применению селенорганических кормовых добавок разным видам животных, утвержденные Российской академией сельскохозяйственных наук Токсикологическая оценка и биологическое тестирование кормовой добавки селебен (2008), Главным управлением ветеринарии Кабинета министров Республики Татарстан Рекомендации по использованию препарата ДАФС-25 в составе кормосмеси (2006), ГНУ Татарский НИИАХП Россельхозакадемии Приемы оптимизации метаболизма у молодняка норок применением природных бентонитов (2009), Технология применения селебена (селен + бентонитовые глины) в регионе наивысшей техногенной нагрузки Республики Татарстан (2009), Приемы применения природных сорбентов, обеспечивающих производство качественной нормативно соответствующей продукции сельского хозяйства (2010).
На Российской агропромышленной выставке Золотая осень, г. Москва в 2004 г. фрагменты диссертационной работы награждены бронзовой медалью и Дипломом III степени; в 2008 г. - серебрянной медалью и Дипломом II степени; в 2010 г. - серебрянной медалью и Дипломом II степени, в 2008 г. - золотой медалью и Дипломом I степени; в 2010 г. - золотой медалью и Дипломом I степени За разработку нанотехнологий в области кормопроизводства. На V Московском международном салоне инноваций и инвестиций в 2005 г. разработка Применение агроминерального сырья (бентонитов) для производства экологически безопасной продукции животноводства удостоена золотой медали и Диплома I степени.
По темам: Разработка технологии применения местного агроминерального сырья для производства экологически безопасной продукции животноводства в зонах различной техногенной нагрузки Республики Татарстан (2005) и Влияние различных доз органического селена на организм сельскохозяйственных животных и птицы (2006) на конкурсе Академии наук РТ утверждены два гранта.
Разработка и внедрение нового селенорганического препарата селебена в рационах сельскохозяйственных животных и влияние на их метаболический статус, количественные и качественные показатели получаемой животноводческой продукции отмечена Дипломом в конкурсе л50 лучших инновационных идей Республики Татарстан.
Апробация работы. Тема диссертации, направление исследований и результаты рассмотрены и обсуждены с положительной оценкой на Ученых советах ГНУ Татарский НИИАХП Россельхозакадемии и ГНУ Краснодарский НИВИ Россельхозакадемии (2004-2011).
Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на Международных конференциях: Научные основы обеспечения защиты животных от экотоксикантов, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний, Казань, 2005; Агроэкологическая безопасность в условиях техногенеза, Казань, 2006; Актуальные вопросы ветеринарной медицины, Екатеринбург, 2007; Агрохимические приемы рационального применения средств химизации как основа повышения плодородия почв и продуктивности сельскохозяйственных культур, Москва, 2007; Современные проблемы интенсификации производства свинины, Ульяновск, 2007; Актуальные вопросы аграрной науки и образования, Ульяновск, 2008; Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения, Ульяновск, 2009, 2010; Кадровое и научное обеспечение инновационного развития отрасли животноводства, Казань, 2010; IV Всеукраинской научно-практической конференции молодых ученых Экологические проблемы сельскохозяйственного производства, Скол, 2010; Ветеринарная медицина XXI века: инновации, опыт, проблемы и пути их решения, Ульяновск, 2011; Всероссийских - по актуальным проблемам агропромышленного комплекса, Казань, 2005-2011; Киров, 2007; Владимир, 2010.
Реализация результатов исследований. Результаты исследований по применению селенорганических кормовых добавок в животноводстве применяются в хозяйствах Бавлинского, Зеленодольского, Лаишевского, Мамадышского, Новошешминского и Сабинского районов РТ в соответствии с приемами, рекомендациями и технологиями.
Теоретические и практические аспекты работы используются в учебном процессе Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, Казанского научно-исследовательского технологического университета, Кубанского аграрного университета.
Публикации. По результатам выполненных исследований опубликовано 46 работ, в том числе 16 статей в реферируемых изданиях, рекомендованных ВАК, в трудах Международных, Всероссийских и Межрегиональных конференций, рекомендациях, технологиях, приемах, методических указаниях, утвержденных Российской академией сельскохозяйственных наук, Главным управлением кабинета министров РТ и ГНУ Татарский НИИАХП Россельхозакадемии.
Основные положения, выносимые на защиту. На защиту выносятся вопросы разработки, изучения свойств и механизма действия селенорганических кормовых добавок и комплекс научно обоснованных подходов к выяснению влияния их на метаболизм и проявление потенциала количественных и качественных показателей продуктивности у некоторых плотоядных, всеядных и травоядных животных:
- разработанные комплексные селенсодержащие кормовые добавки, включающие органические (ДАФС-25) и неорганические (природные минералы - бентониты, цеолиты, вермикулиты) вещества, являются химическими соединениями, сходными по свойства с хелатокомплексами для применения животным при селеновой недостаточности (гипоселенозе);
- нативные и наноструктурные селебен, селевер и селецел на светооптическом и ультраструктурном уровнях раскрывают их физико-химические свойства и механизм ионного и сорбционного действия в организме;
- токсикологическая оценка, биологическое тестирование, параматры метаболизма, концентрация селена в организме и структурно-функциональное состояние некоторых органов пищеварения и иммуногенеза на клеточном уровне свидетельствуют о лучших показателях и большей перспективности использования селебена для животных;
- применение селебена норкам-самкам в дозе 2,0, 3,0 и 5,0% к сухому веществу рациона повысило их рост и развитие, репродуктивную функцию, кинетику селена в органах и тканях системы мать - плод - щенок с лучшими показателями у получавших 2,0 и 3,0% кормовой добавки;
- биологические основы влияния разных доз селебена 2,0, 3,0 и 5,0% к сухому веществу рациона меховому молодняку норок характеризовались дозозависимым увеличением концентрации селена в органах и тканях, улучшением показателей метаболизма, количественных и качественных параметров меховой продукции с лучшими показателями при применении 2,0 и 3,0% добавки к сухому веществу рациона;
- использование селенсодержащих кормовых добавок в рационах супоросных и подсосных свиноматок улучшает репродуктивные показатели, повышает живую массу и сохранность подсосных поросят, сорбирует соли тяжелых металлов в условиях техногенной нагрузки на организм;
- у поросят на доращивании и откорме применение селебена повышает количественные и улучшает качественные показатели мясной продуктивности;
- у овец применение селебена улучшает продуктивность и повышает сохранность ягнят, оптимизирует концентрацию селена в органах и тканях у баранчиков.
Объем и структура работы. Диссертационная работа изложена на 365 страницах компьютерной верстки, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов исследований и их обсуждения, заключения, выводов, предложений производству, приложения. Работа иллюстрирована 80 таблицами и 105 рисунками. Список использованной литературы включает 407 наименований, в том числе 71 зарубежных авторов.
2. МатериалЫ и методЫ исследований
Работа выполнена в отделах животноводства и разработки био- и нанотехнологий в земледелии и животноводстве Государственного научного учреждения Татарский научно-исследовательский институт агрохимии и почвоведения Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ Татарский НИИАХП Россельхозакадемии) и Государственного научного учреждения Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт Россельхозакадемии (ГНУ Краснодарский НИВИ РАСХН) по программам Фундаментальные и приоритетные прикладные исследования по научному обеспечению развития агропромышленного комплекса Российской Федерации на 2001-2005, 2006-2010 гг., утвержденным Российской академией сельскохозяйственных наук.
Экспериментальную часть работы проводили в ГНУ Татарский НИИАХП Россельхозакадемии. Отдельные исследования выполняли на базе ФГАОУВПО Казанский (Приволжский) федеральный университет г. Казань, ГОУ ВПО Казанский государственный технологический университет г. Казань, ЗАО Научно-исследовательский институт меховой промышленности г. Москва, ФГОУ ВПО Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана г. Казань, Научно-исследовательского института пушного звероводства и кролиководства им. В.А. Афанасьева г. Москва, Саратовского аграрного университета им. Н.Н. Вавилова г. Саратов, Научно-исследовательского инновационно-прикладного центра Наноматериалы и нанотехнологии г. Казань, ассоциации независимых клинико-диагностических лабораторий ООО Ситилаб г. Казань, ФГУ Татарская межрегиональная ветеринарная лаборатория г. Казань.
Научно-производственные опыты и апробацию результатов научных исследований на норках проводили в ООО Агрофирма Берсутский Мамадышского и ООО Матюшинский Лаишевского районов, на овцах - в КФХ Архангельское Новошешминского, на свиньях - в ООО Агрофирма Саба Сабинского, ООО Агрофирма Васильевская Альметьевского и ООО Хазеев Бавлинского районов Республики Татарстан.
В экспериментах и научно-производственных опытах были использованы белые мыши - 336, кролики - 18, норки - 920, свиньи - 399, овцы - 440 голов. Направление и объем исследований представлены на рисунке 1, а в таблице 1 - схема и условия опытов.
Селенсодержащие кормовые добавки селебен, селевер и селецел были разработаны и созданы с применением органически связанного селена - диацетофенанилселенида и природных агроминералов. При создании и изучении свойств селенорганических кормовых добавок были использованы методы ультразвукового воздействия в установке УЗУ-0,25, прерывисто-контактной атомно-силовой микроскопии (АСМ) и сканирующей туннельной микроскопии (СТМ) на сканирующем зондовом микроскопе MultiMode V фирмы Veeco (США), синхронного термического анализа на совмещенном термоанализаторе SDT Q 600 фирмы TA Instruments (США) и атомно-эмиссионной спектрометрии на анализаторе iCAP 6300 DUO (США).
Определение сорбционных свойств бентонита в составе селебена проводили in vitro. Группы животных в экспериментах формировали методом подбора аналогов с учетом породы, пола, возраста, живой массы, происхождения и физиологического состояния (А.И. Овсянников, 1976).
При составлении рациона кормления использовали нормативные данные по кормлению сельскохозяйственных животных Нормы и рационы кормления сельскохозяйственных животных (А.П. Калашников и др., 2003).
Кормление свиней осуществляли полноценными комбикормами с добавлением соответствующей дозы премикса: для супоросных свиноматок - комбикорм СПК-1-50, (премикс П51-1), поросят подсосных - ПК-50-1007, (П52-3), в период доращивания - ПК-51-1010, (П52-3), период откорма - СПК-7-48, (П54-4). Кормление овец и норок проводили по хозяйственным рационам, отвечающим возрасту и физиологическим потребностям животных. Белых мышей кормили согласно лабораторных рационов в зависимости от возраста и длительности экспериментов.
Таблица 1
Схема опытов
Группа животных | Число животных | Продолж. опыта, суток | Условия кормления |
РАЗДЕЛ 1. Разработка комплексных кормовых добавок селена и изучение их свойств Опыт №1 (поисковый)
| |||
Сравнительная оценка влияния различных селенорганических кормовых добавок селебен, селевер, селецел на организм молодняка норок Опыт №2 (научно-производственный) Влияние на рост, развитие и прирост живой массы, морфо-биохимические показатели крови, содержание селена в органах и тканях, морфометрию тела и шкуры, морфологию некоторых паренхиматозных органов, размер и качество мехового сырья | |||
- К II - О III - О IV - О V - O VI - O VII - O VIII - O IX - O X - O | 40 40 40 40 40 40 40 40 40 40 | 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 | Основной рацион (ОР) ОР + 2% селебена к сухому веществу рациона ОР + 3% селебена к сухому веществу рациона ОР + 5% селебена к сухому веществу рациона ОР + 2% селевера к сухому веществу рациона ОР + 3% селевера к сухому веществу рациона ОР + 5% селевера к сухому веществу рациона ОР + 2% селецела к сухому веществу рациона ОР + 3% селецела к сухому веществу рациона ОР + 5% селецела к сухому веществу рациона |
Токсикологическая оценка, биологическое тестирование, морфо-физиологическое обоснование использования селебена на лабораторных животных и их органах | |||
Опыт №3 (поисковый) Изучение сорбентных свойств селебена in vitro | |||
Опыт №4 (научно-экспериментальный) Определение острой оральной токсичности селебена на белых мышах | |||
- К II - О III - О IV - О | 10 10 10 10 | 3 3 3 3 | однократно - внутрижелудочно дистилированная вода 1 см3 однократно - внутрижелудочно 10 г/кг живой массы однократно - внутрижелудочно 15 г/кг живой массы однократно - внутрижелудочно 20 г/кг живой массы |
Опыт №5 (научно-экспериментальный) Определение кумулятивных свойств селебена на белых мышах | |||
- К II - О | 20 20 | 25 25 | ОР + внутрижелудочно дистилированная вода 1 см3 ОР + внутрижелудочно возрастающие дозы селебена, начиная с 2 г/кг живой массы |
Опыт №6 (научно-экспериментальный) Влияние различных доз кормовой добавки селебен на поедаемость кормов, живую массу и морфологию внутренних органов белых мышей | |||
- К II - О III - О IV - О | 12 12 12 12 | 30 30 30 30 | ОР ОР + 10% селебена к сухому веществу рациона ОР + 15% селебена к сухому веществу рациона ОР + 20% селебена к сухому веществу рациона |
Опыт №7 (научно-экспериментальный) Влияние различных доз селебена на метаболизм, прирост живой массы, морфологию и гистологию внутренних органов молодняка белых мышей | |||
- К II - О III - О IV - О | 20 20 20 20 | 30 30 30 30 | ОР ОР + 2% селебена к сухому веществу рациона ОР + 3% селебена к сухому веществу рациона ОР + 5% селебена к сухому веществу рациона |
Биотестирование на кроликах Опыт №8 (научно-экспериментальный) Определение кожно-раздражающего действия селебена | |||
- К II - О III - О IV - О | 3 3 3 3 | 3 3 3 3 | Апликация на кожу - дистилированная вода 1 мг/см2, Селебен 10 мг/см2 Селебен 20 мг/см2 Селебен 30 мг/см2 |
Опыт №9 (научно-экспериментальный) Конъюнктивальная проба | |||
- К II - О | 1 3 | 3 3 | Дистиллированная вода 0,5 мл Селебен 50,0 мг |
РАЗДЕЛ 2. Влияние селебена на организм плотоядных животных (норки) | |||
Опыт №10 (научно-производственный) Влияние селебена на рост, развитие и индекс упитанности самок норок, прирост живой массы, репродуктивную функцию, морфологические и биохимические показатели крови, на распределение селена в их организме с учетом физиологического состояния, в органах и тканях новорожденных щенков, морфометрия внутренних органов и качество меховой продукции | |||
- К II - О III - О IV - О | 50 50 50 50 | 480 480 480 480 | Основной рацион (ОР) ОР + 2% селебена к сухому веществу рациона ОР + 3% селебена к сухому веществу рациона ОР + 5% селебена к сухому веществу рациона |
Опыт №11 (научно-производственный) Влияние селебена на рост и развитие молодняка самцов, обмен и накопление селена в органах и тканях, морфологические и биохимические показатели крови | |||
- К II - О III - О IV - О | 40 40 40 40 | 60 60 60 60 | Основной рацион (ОР) ОР + 2% селебена к сухому веществу рациона ОР + 3% селебена к сухому веществу рациона ОР + 5% селебена к сухому веществу рациона |
Опыт №12 (научно-производственный) Влияние разных доз селебена на качество меховой продукции норок (размер и качество шкурок, толщина и масса кожевой ткани в сырье и полуфабрикате, прочность различных категорий волоса в сырье и полуфабрикате, густота волосяного покрова шкурок норок в сырье и полуфабрикате, структура волосяного покрова шкурок норок в сырье и полуфабрикате, качественные показатели волосяного покрова в сырье и полуфабрикате, механическая прочность шкурок в сырье и полуфабрикате, качество кожевой ткани шкурок, экономическая эффективность шкурковой продукции) | |||
- К II - О III - О IV - О | 40 40 40 40 | 120 120 120 120 | Основной рацион (ОР) ОР + 2% селебена к сухому веществу рациона ОР + 3% селебена к сухому веществу рациона ОР + 5% селебена к сухому веществу рациона |
РАЗДЕЛ 3. Влияние кормовых добавок селена на организм всеядных животных (свиньи разного возраста и физиологического состояния) Опыт №13 (научно-хозяйственный) Влияние селебена на продуктивность и структурно-функциональное состояние некоторых органов свиноматок | |||
I - К II - О | 11 11 | 90 90 | Основной рацион (ОР) ОР + 1% селебена к сухому веществу рациона |
Опыт №14 (научно-хозяйственный) Продуктивность и микроморфология некоторых органов и тканей свиней при их выращивании и откорме с использованием в их рационах селебена | |||
- К II - О III - О IV - О | 26 26 26 26 | 207 207 207 207 | Основной рацион (ОР) ОР + 1% селебена к сухому веществу рациона ОР + 2% селебена к сухому веществу рациона ОР + 3% селебена к сухому веществу рациона |
Опыт №15 (научно-хозяйственный) Сравнительная оценка мясной продуктивности и качества мяса свиней при использовании в их рационах селебена и селенита натрия, аминокислотный состав мяса, соотношение белка мяса к лизину и яичному белку | |||
I - К II - О III - О | 32 32 32 | 122 122 122 | Основной рацион (ОР) ОР+премикс П51-1+селенит натрия 1мг/кг к сухому веществу рациона ОР+премикс П51-1+селебен 1% к сухому веществу рациона |
Опыт№ 16 (научно-хозяйственный) Сравнительная оценка влияния селебена и бентонитов на сорбцию солей тяжелых металлов в организме супоросных свиноматок в условиях техногенной нагрузки, исследование некоторых органов и тканей на содержание солей кадмия, никеля и свинца, морфо-биохимические показатели крови | |||
- К II - О III - О | 7 7 7 | 60 60 60 | Основной рацион (ОР) ОР + 1% селебена к сухому веществу рациона ОР + 1% бентонитов к сухому веществу рациона |
Опыт№ 17 (научно-хозяйственный) Сравнительная оценка влияния селебена и бентонитов на сорбцию солей тяжелых металлов в организме подсосных свиноматок в условиях техногенной нагрузки, исследование некоторых органов и тканей на содержание солей кадмия, никеля и свинца, морфо-биохимические показатели крови | |||
- К II - О III - О | 7 7 7 | 60 60 60 | Основной рацион (ОР) ОР + 1% селебена к сухому веществу рациона ОР + 1% бентонитов к сухому веществу рациона |
Опыт№ 18 (научно-хозяйственный) Сравнительная оценка влияния селебена и бентонитов на прирост живой массы и сохранность подсосных поросят в условиях техногенной нагрузки | |||
- К II - О III - О | 45 45 45 | 60 60 60 | Основной рацион (ОР) ОР + 1% селебена к сухому веществу рациона ОР + 1% бентонитов к сухому веществу рациона |
РАЗДЕЛ 4. Влияние селебена на организм травоядных животных (овцы) Опыт №19 (научно-производственный) Влияние различных доз кормовой добавки селебен на прирост живой массы и сохранность ягнят | |||
- К II - О III - О | 120 120 120 | 60 60 60 | Основной рацион (ОР) ОР + 2% селебена к сухому веществу рациона ОР + 3% селебена к сухому веществу рациона |
Опыт №20 (научно-производственный) Влияние селебена на динамику накопления селена в органах и тканях баранчиков | |||
I - К II - О | 40 40 | 10 10 | Основной рацион (ОР) ОР + 2% к сухому веществу рациона |
*K- контрольная; **О - опытные группы.
Токсикологическую оценку селебена проводили на лабораторных животных с изучением: острой оральной токсичности по методике Определение токсичности на белых мышах (ГОСТ 28178-89); общей токсичности на кроликах (кожно-раздражающее действие и конъюнктивальная проба) (ГОСТ 13496.7-97); кумулятивных свойств селебена по методике Lim R. еt al. (1961); влияния различных доз селебена на поедаемость кормов при добавлении его
к основному рациону взрослых мышей, энергию роста молодняка определяли по общепринятым методикам ВИЖа.
Содержание гемоглобина, количество эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов определяли на гемоанализаторе Hema-Screen фирмы Hospitex diagnostic, скорость оседания эритроцитов - на аппарате Панченкова, выведение лейкоформулы - на счетчике лабораторном С-5М - стимул плюс.
Биохимические исследования сыворотки крови выполняли с использованием анализатора OLYMPUS для in vitro диагностики с автоматической программой расчета. Щелочную фосфатазу определяли колориметрическим количественным методом, фосфор неорганический - ферментативным UV тестом, общий кальций, общий белок и фракции белка - колориметрическим фотометрическим количественным тестом.
Убой животных проводили обескровливанием с перерезкой тканей и сосудов верхней трети шеи после предварительного обездвиживания (оглушения) воздействием электрического тока напряжением 220 В, согласно Правилам работы с животными в экспериментах.
Химический состав мяса животных анализировали с использованием методов Н.К. Журавской, Л.Т. Алехиной, Л.М. Отряшенковой (1985). В мышечной ткани определяли количество воды (ГОСТ 97936-74), внутримышечного жира - экстрагированием в аппарате Сокслета (ГОСТ 23042-86), зольного остатка - сжиганием в муфельной печи, рН - потенциометрически, калорийность - общепринятым методом, количество белка - по Кьельдалю (ГОСТ 26889-86), белково-качественный показатель - на анализаторе Т-339 (Козаренко Т.Д. и др., 1975, 1981), триптофан - по Гремм, Смит и др. в модификации Вербицкого и Детерджа (1982), оксипролин - по Нойману и Логану в модификации Вербицкого (ГОСТ 23041-78).
Для гистологических исследований кусочки органов и тканей фиксировали в 10%-ном нейтральном водном растворе и в спирт-формоле. Уплотнение материала проводили заливкой в парафин. Изготовление гистосрезов проводили на микротоме МС-2 ТУ64-1-1629-78. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином, азуром II-эозином по Романовскому-Гимзе. Микропрепараты анализировали на световом микроскопе МБИ-6. Микрофотографирование проводили с использованием цифровой фотокамеры Nikon.
Для определения экономической эффективности применения селебена из пяти шкурок от всех групп зверей были изготовлены изделия: пластины и воротники. В зависимости от площади изделий и цены реализации были определены наиболее эффективные дозы кормовой добавки.
Цифровые показатели анализировали по стандартным программам вариационной статистики согласно пакету программ Microsoft Office Excel-2003 с определением критерия достоверности.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Разработка комплексных кормовых добавок селена и
изучение их свойств
При разработке селенсодержащих кормовых добавок использовали селенорганический диацетофенонилселенид (препарат ДАФС-25) и в качестве наполнителей - активнодействующие агроминералы: бентониты Тарн-Варского месторождения РТ, цеолиты Татарско-Шатрашанского месторождения РТ и вермикулиты Татарского месторождения Красноярского края РФ. Кормовые добавки являлись смесью ДАФС-25 в пропорции 2 мг и 10 г наполнителя.
При разработке кормовых добавок, в состав которых входили агроминералы, провели исследование их химического состава, которое показало, что содержание солей тяжелых металлов в них не превышало максимально-допустимый уровень (МДУ) для кормов и кормовых добавок.
По своим физико-химическим свойствам бентонит - это плотный агроминерал, во влажном состоянии липкий и вязкий, имеет цвет от зелено-голубого до желто-коричневого, относится к тонкодисперсным глинам. Минеральный состав представлен (в %): монтмориллонит - 80,0-82,0, гидрослюда 6,0-8,0, каолинит 6,0 и кварц 5,0-7,0; химический состав (в %): SiO2 - 66,57, TiO2 - 0,58, Al2O3 - 17,04, Fe2O3 - 5,51, MnO - 0,03, CaO - 0,80, MgO - 1,5, Na2O - 0,2, K2O - 2,57, P2O5 - 0,09, SO3 - 0,42, п.п.п. - 5,11, органические вещества 0,61-1,62%. Использованные бентониты являлись щелочно-земельной породой минералов с магниево-кальциевым обменным комплексом и по Технологической классификации бентонитовых глин Республики Татарстан как адсорбционного сырья относились к глинам среднего качества и маркам М2Т2 - С2Т2 (ГОСТ 28177-89). Минеральный состав цеолита представлен (в %): кальцит - 40,0-42,0, опалкристаболит - 28,0-30,0, клиноптилолит - 17,0-19,0, монтмориллонит - 10,0-11,0, кварц - 1,0-3,0; химический состав (в %): SiO2 - 58,54, Al2O3 - 6,02, Fe2O3 - 1,88, CaO - 14,43, MgO - 1,86, Na2O - 0,2, K2O - 1,10, P2O5 - 0,08. Вермикулит имеет минеральный состав (в %): опалкристобалит - 5,0-7,0; клиноптилолит - 20,0-30,0; кальцит - 8,0-10,0; монтмориллонит - 7,0-15,0; гидрослюда - 26,0-50,0; опалтридимид - 8,0-12,0; химический состав (в %): SiO2 - 42,57; TiO2 - 1,21; Al2O3 - 11,34; Fe2O3 - 15,87; FeO - 0,26; MnO - 0,11; CaO - 1,58; MgO - 19,18; Na2O - 0,33; K2O - 4,52; P2O5 - 0,17; SO3 - 0,03; п.п.п. - 2,91.
При исследовании структуры агроминералов было выявлено, что бентониты имеют подвижную ленточно-слоистую структуру с разбухающими пакетами, что обусловливает как ионообменные, так и адсорбционные свойства. Вермикулит характеризуется пластинчатой структурой, образующей червеобразные столбики или нити с поперечным делением на тончайшие чешуйки со слабо разбухающими сквозными пакетами, в которых протекают преимущественно ионообменные процессы. Структура цеолитов представлена кристаллической решеткой из 4, 5, 6 и более сложных колец, сформированных кремнекислородными тетраэдрами, в которых происходит избирательный ионный обмен и адсорбция.
Активные ионообменные и сорбционные свойства агроминералов зависят от обменных катионов и их величины емкости обмена. Наибольшая емкость катионного обмена выявлена у вермикулита (130-150 мг-экв/100г), далее у цеолита (64,0-88,0) и бентонита (40,0-60,0 мг-экв/100г). Обменный комплекс бентонита представлен в основном катионами кальция и магния, вермикулита - катионами кальция, магния и натрия, а в цеолите основная роль в обмене принадлежит катионам кальция.
Изучение структуры ДАФС-25 в световой микроскопии показало, что он представляет собой вытянутые цилиндрические трубки и их фрагменты от металлического белого до желтоватого цвета размером менее 0,13 мм.
Изучение микрокартины бентонита выявило, что он является порошкообразным веществом темно-коричневого цвета с частицами менее 0,002 мм, образующими большие скопления. Микроскопически цеолит представлял собой порошкобразное вещество от грязно-белого до светло-желтого цвета, состоящее из комкообразных слипшихся соединений размером 0,002-0,003 мм. Микроструктура вермикулита характеризовалась отдельными чешуйками размером 0,1-1,6 мм характерного металлического оттенка.
Изучение микрокартины смеси ДАФС-25 и бентонита показало, что мелкие частицы бентонита притянулись и покрыли цилиндрическую основу ДАФС-25, образуя селебен. При этом, как правило, наблюдали гантелеобразность в соединении объектов: в средней части цилиндров - притяжение частиц бентонита было примерно в один слой, а на концах отмечали образование конгломератов из бентонитовых частиц. ДАФС-25 и бентонит не отторгались друг от друга, что позволило сделать вывод о том, что органически связанный диацетофенонилселенид и минеральный бентонит - совместимы.
При исследованиях структуры цеолита и селецела (ДАФС-25 + цеолит) установили, что в отличие от селебена в местах соединения ДАФС-25 и цеолита происходила меньшая степень соприкосновения и проникновения компонентов и отсутствие булавообразности при наслоении агроминерала на органические цилиндры ДАФС-25.
При микроскопии селевера установлено, что ДАФС-25 и вермикулит слабо соединялись друг с другом.
Таким образом, изучение сочетания ДАФС-25 с агроминералами, имеющими строение от кристаллических до аморфных структур, установило лучшее сочетание ДАФС-25 и бентонита.
Для подтверждения создания новой кормовой добавки был проведен современный, применяющийся в наноисследованиях синхронный термический анализ исходных материалов ДАФС-25, бентонита и, созданного на их основе селебена. Метод совмещенного DSC-TGA термического анализа позволил более полно раскрыть и интерпретировать физическую сущность исследуемого вещества, обосновать фундаментальную доказательную базу его новизны и объяснить элементы механизма ионного обмена. Было установлено, что совмещенные DSC-TGA кривые теплового потока и массы селебена не идентичны кривым бентонита и ДАФС-25, что указывает на создание абсолютно нового вещества с новыми свойствами и специфическим действием на организм животных, отличающегося от ДАФС-25 и бентонита. Изучение селебена и его исходных компонентов методом совмещенного DSC-TGA анализатора показало потерю массы веществ при нагревании и раскрыло механизм ионного обмена при прохождении их через желудочно-кишечный тракт животных.
Ультразвуковая обработка ДАФС-25 и бентонита, и анализ изображений при идентичном увеличении микроскопа позволил сделать заключение, что объекты, разрозненные ультразвуком, имеют больший объем и размеры их частиц существенно отличаются друг от друга.
При АСМ исследовании нативного ДАФС-25 наблюдали два вида образований - со средними размерами 5,0-8,0 мкм и более 13,0 мкм, а наноразмерный ДАФС-25 имел 90,0% частиц величиной от 85,0 до 95,0 нм и 10,0% - размером 2,2-4,5 нм.
При исследовании топографии поверхности бентонита выявили, что он состоял из мелких образований величиной 120,0-300,0 нм, количество которых было 5,0%, средних образований с размером 350,0-400,0 нм, составлявших 65,0% и крупных образований с размерами 0,8-1,3 мкм, количество которых достигало 30,0%. Ультразвуковая обработка бентонита позволила разбить крупные конгломераты и получить наноразмерный бентонит с величиной частиц 55,0-82,0 нм до 40,0%, 33,0-35,0 нм - 50,0% и 85,0-95,0 нм около 10,0%.
Сравнительный анализ строения и структуры макроаналогов с наноразмерными показал, что у нанообъектов не только увеличился объем за счет разъединения и разрозненности слипшихся в конгломераты частиц, но и, каждая частица имеет максимальное количество открытых связей и максимальную поверхность соприкосновения для контакта. Этим объясняется механизм ионообменных свойств, потому что открытые межмолекулярные связи позволяют в силу каталитической активности контактируемого вещества либо притягивать к себе его элементы и удерживать их в своей структуре (сорбция), либо самим притягиваться (ионообмен).
3.2. Сравнительная оценка влияния различных доз селенорганических кормовых добавок селебен, селевер, селецел на метаболизм, рост, развитие молодняка норок и качество шкурковой продукции
Научно-производственный опыт продолжительностью 60 суток был проведен на десяти группах самцов норок в возрасте 4-х месяцев, сформированных по 40 голов, из которых звери I контрольной группы содержались на основном рационе (ОР), звери II, III и IV дополнительно к ОР получали селебен, V, VI, VII - селевер, VIII, IX, X - селецел в дозах 2,0; 3,0 и 5,0% к рациону. В опыте изучали рост и развитие норок, гематологические показатели, концентрацию селена в органах и тканях, морфологию и гистологию некоторых паренхиматозных органов, размер и качество пушнины.
Анализ данных роста и развития молодняка норок контрольной и опытных групп выявил лучшие результаты у щенков, получавших различные дозы селенорганических кормовых добавок. Обхват груди у норок, получавших селебен, был больше на 9,6-10,4%, селевер - на 8,5-11,8%, селецел - на 7,8-8,9%, чем у контрольных аналогов. Примерно одинаковыми были показатели увеличения длины тела: при применении разных доз селевера превышение к контролю составило 7,7-9,9%, селебена - 6,8-9,4% и селецела - 5,8-8,8%. Сравнительно лучшие результаты по приросту живой массы были достигнуты у норок, потреблявших селебен, что было больше контрольных значений на 9,0-11,5%, по селеверу - на 8,1-10,9% и селецелу - на 8,1-10,1%. Следует отметить, что, оптимальной для всех видов кормовых добавок была доза 3,0%, с более лучшими показателями при использовании селебена.
Для выяснения влияния селенсодержащих кормовых добавок на метаболизм норок провели сравнительную оценку гематологических показателей и установили, что на 30-е сутки опыта у получавших различные дозы селебена, количество эритроцитов в сравнении с контролем повысилось на 3,8-6,4%, у получавших селевер и селецел - на 6,4-8,9% и 2,5-5,1%, соответственно. При этом лучшие результаты были у зверей II, VI и IX групп. Увеличение количества эритроцитов у норок сохранялось до конца опытного периода и составило при применении селебена 8,1-15,1%, селевера - 11,6-17,4% и селецела - 10,5-13,9% в сравнении с контрольными животными. Достоверную разницу с контрольными к концу эксперимента выявляли у норок II, III, V, VI, IX групп. Однако лучшие показатели были у норок VI и IX опытных групп, получавших 3,0% кормовых добавок к сухому веществу корма.
На 30-е сутки у норок, получавших в качестве кормовых добавок различные дозы селебена, отмечали повышение гемоглобина на 6,5-8,0%, селевера - 5,8-8,4% и селецела - 5,4-7,1%, к концу опыта эти показатели были выше контрольных аналогов на 7,1-9,8; 7,6-11,9 и 7,8-8,2%, соответственно. Лучшие показатели были у норок III, VI и IX опытных групп, получавших селенорганические кормовые добавки в дозе 3,0% к сухому веществу корма.
Применение селенсодержащих кормовых добавок обусловило увеличение в крови зверей концентрации общего кальция и неорганического фосфора, что является крайне востребованным при формировании организма в период роста и развития костной ткани скелета у молодняка. На 30-е сутки опыта увеличение общего кальция в крови зверей, получавших различные дозы селебена и селецела, составило 8,3-12,5% (Р<0,05), селевера - 4,2-12,5% (Р<0,05) к контрольным аналогам. Подобная тенденция сохранилась до конца опытного периода. Однако необходимо отметить, что большее физиологическое соответствие соотношения кальция и фосфора наблюдалось у зверей, получавших 3,0% кормовых добавок к сухому веществу корма.
На 60-ые сутки применения селенорганических кормовых добавок у норок контрольной и опытных групп было изучено содержание селена в органах и тканях. Анализ полученных данных показал, что использование разных доз добавок способствовало повышению содержания селена в организме у получавших селебен на 31,3-53,6%, селевер - 29,3-51,9% и селецел - 24,9-43,6% к контрольным показателям.
Было выявлено превышение концентрации селена в мышечной и костной тканях у норок, получавших различные дозы селебена, на 17,6-47,1% и 23,1-46,1% в сравнении с контрольными. У норок, получавших селецел, селена было сравнительно больше, чем у получавших селевер, и выше таковых у контрольных аналогов на 29,4-41,2 и 17,6-35,3%, соответственно. Относительно невысокий показатель по содержанию селена у зверей, получавших селевер, по нашему мнению, объяснется, как наиболее подвижным ионообменным комплексом вермикулита, так и высокими обменными процессами в самой мышечной ткани, которая способствует быстрому использованию селена.
Особый интерес представлял анализ данных по содержанию селена в органах, имеющих непосредственный контакт с селенорганическими кормовыми добавками. Установлено повышение концентрации селена в стенке желудка норок получавших различные дозы селебена, селевера и селецела на 5,3-15,8%, 5,3-26,3 и 5,3-26,3%, соответственно; в стенке тонкого отдела кишечника - на 54,5-81,8%, 36,4-72,7 и 54,5-63,6% по сравнению с контролем. В то же время в стенке тонкого кишечника наибольшая концентрация селена выявлена у норок III и IV групп, получавших селебен, что выгодно отличает его от изученных селенсодержащих аналогов.
Особенный интерес представляло изучение концентрации селена в подкожной жировой ткани и волосе, так как эти ткани обусловливают качество пушного сырья. Установлено, что в подкожном жире и волосе опытных норок содержание селена было значительно больше, чем у контрольных: у получавших селебен - на 25,0-75,0 и 76,2-85,7%, соответственно, селевер - на 50,0-62,5 и 66,6-76,2% и селецел - на 25,0-62,5 и 33,3-57,1%. Следует отметить, что в период исследований у зверей полностью прошла линька, следовательно, созрел зимний волосяной покров, который стабилизировался, как по структуре, так и по минеральному составу.
Таким образом, добавление в рацион норок разных доз селенорганических кормовых добавок селебена, селецела и селевера обусловило повышение концентрации селена в органах и тканях с тенденцией оптимальных значений у зверей, получавших селебен.
Кормление норок с использованием селенсодержащих кормовых добавок способствовало не только увеличению длины тела, обхвата груди и живой массы, но и увеличению размеров шкурки.
Результаты показали, что у всех норок опытных групп площадь шкурок была больше контрольных аналогов: у получавших селебен - на 4,5-7,6% или на 4,4-7,5 см2, селевер - на 0,5-6,0% или 4,2-5,9 см2 и селецел - на 4,2-6,2% или 4,1-6,1 см2. Наибольший размер шкурок установлен у норок, получавших 3,0% всех видов добавок и 2,0% селебена и селецела. В этих группах длина шкурок соответствовала особо крупным А и Б.
При изучении морфологии и весовых показателей сердца, печени, селезенки, почек, семенников норок контрольной и опытных групп было установлено, что органы соответствовали физиологической норме и видовым анатомическим параметрам. Однако, применение селенсодержащих кормовых добавок обусловило увеличение массы тела, шкурки и паренхиматозных органов норок. Лучшие показатели были у зверей в группах, получавших все виды кормовых добавок в дозе 2,0 и 3,0% к рациону.
В органах норок опытных групп выявляли некоторые однотипные особенности морфологии, обусловленные композицией ДАФС-25 и агроминералов. По этим изменениям дифференцировать воздействие разновидностей селенсодержащих кормовых добавок на световом уровне микроскопа было невозможно ввиду их аналогичности. Так, у норок, получавших селебен, селевер и селецел в дозе 2,0 % к рациону, в тощей кишке выявляли хорошо сформированную систему ворсинка-крипта, поверхность ворсинок была выстлана энтероцитами с более четко выраженной каймой на апикальном полюсе клеток. Среди каемчатых энтероцитов отмечали единичные бокаловидные клетки, в которых выявляли ядра, прижатые к базальному полюсу. В просвете кишечника отмечали умеренное количество слизи. Сосуды основы составляющих оболочек кишечника были полнокровны. Дуоденальные железы подслизистой имели расширенные концевые отделы. Микрокартина отражала усиление пристеночного пищеварения. В селезенке наблюдали умеренную активацию иммунокомпетентных клеток, насыщенность фолликулов белой пульпы лимфоидными клетками, хорошо сформированные периартериальную, мантийную и маргинальную зоны клеток. Светлые (герминативные) центры фолликулов содержали бластные клетки и фигуры митозов. Периартериально Т-лимфоциты локализовались в 3-4 ряда, что свидетельствовало о гиперплазии лимфоидной ткани в органе и усилении иммуной защиты организма.
3.3. Токсикологическая оценка, биологическое тестирование,
морфо-физиологическое обоснование использования селебена
на лабораторных животных и их органах
Сравнительная оценка влияния кормовых добавок селебена, селевера и селецела на организм норок показала увеличение концентрации селена в органах и тканях зверей, и выявила более высокое его количество в организме животных, получавших селебен. Кроме этого, сравнительно лучшие результаты по росту, развитию, гематологическим, морфологическим показателям норок и качеству шкурковой продукции были достигнуты у зверей, получавших к основному рациону различные дозы селебена. Поэтому более детально изучали свойства селебена in vitro и на лабораторных животных.
Эксперименты in vitro были проведены для определения влияния физиологических процессов пищеварения на селебен и выявления степени удержания и высвобождения органически связанного селена ионообменным комплексом бентонитов. Полученные результаты показали, что селен в кислой среде слабо высвобождается, и основной его выход из селебена происходит в щелочной среде.
Определение острой оральной токсичности проводили на самках половозрелых белых мышей в возрасте 4-х месяцев, живой массой 19,0-20,0 г. Было создано четыре группы животных: первая - контрольная, второй опытной группе вводили однократно внутрижелудочно селебен в дозе 10,0; третьей - 15,0; четвертой - 20,0 г/кг живой массы. Учет реакции вели через 1, 4 и 72 часа после введения селебена. В эти же сроки проводили убой мышей для изучения морфологии внутренних органов.
Непосредственно после введения селебена общее состояние животных всех опытных групп было угнетенным.
Мыши II группы, получившие селебен в дозе 10,0 г/кг живой массы, к концу первого часа полностью восстанавливались и начинали употреблять корм. При вскрытии не установлены какие-либо отклонения внутренних органов по морфологическим показателям от нормы. Через четыре часа после введения селебена наблюдали общее бодрое состояние мышей, они активно принимали воду и корм. В течение последующих трех суток отклонений в поведении животных, кормовой и водной возбудимости не наблюдалось. Внутренние органы по своей морфологии, как на 4-й учетный час, так и на 72-й не отличались от контрольных.
Активность мышей III группы, получивших селебен в дозе 15,0 г/кг живой массы, к концу первого часа была несколько снижена, однако они начали употреблять воду и корм. При вскрытии отмечали незначительную гиперемию слизистой оболочки и выраженное полнокровие сосудов желудка, паренхиматозные органы были идентичны контрольным аналогам. Через четыре часа наблюдали общее бодрое состояние, животные активно принимали воду и корм. Патологоанатомическое вскрытие в этот период показало, что гиперемия слизистой желудка отсутствовала, слизистая в толстом отделе кишечника была без изменений. В течение последующих трех суток отклонений в поведении животных, кормовой и водной возбудимости не наблюдалось, морфология внутренних органов соответствовала контролю.
Через час после внутрижелудочного введения селебена в дозе 20,0 г/кг живой массы у мышей V группы отмечали выраженное угнетение и малоподвижность, обусловленные растяжением и заполнением желудка и механическим сдавливанием других органов и тканей. У некоторых мышей наблюдали цианотичность ушей, хвоста и конечностей. В продолжение часа эти мыши полностью отказывались от воды и корма, и имели расстройство пищеварения в виде диареи. При вскрытии выявляли гиперемию желудочно-кишечного тракта с единичными кровоизлияниями. Поведенческие реакции животных полностью восстановились к четвертому часу после введения селебена. Мыши начали проявлять водную и кормовую активность. При вскрытии слизистая оболочка толстого отдела кишечника по всей длине была ровная с мелкоточечными кровоизлияниями, паренхиматозные органы имели незначительное напряжение капсулы органов. В последующие трое суток, животные этой группы по поведению, клинико-физиологическому состоянию, кормовой и водной активности и морфологии внутренних органов не отличались от контрольных.
Таким образом, при изучении острой оральной токсичности селебена не было установлено критической дозы, которая вызывала бы смерть животных (ЛД50 и ЛД100). Доза 15,0 г/кг живой массы при однократном введении явилась критической, при которой отмечали изменения поведения и морфологии внутренних органов.
Биотестированием на кроликах по определению кожно-раздражающего действия селебена выявляли реакцию кожи через 1, 4, 24 и 72 часа по наличию воспалительных явлений. На первый час после экспозиции отмечали слабую гиперемию кожного покрова на участках с нанесением селебена в количестве 20 мг/см2 и 30 мг/см2. К четвертому часу выявляли гиперемию кожного покрова на участке при дозе 20 мг/см2, гиперемию и небольшой отек кожного покрова при дозе 30 мг/см2. Однако к концу первых суток эти признаки исчезали, и кожный покров у опытных и контрольных кроликов был идентичным, не имел изменений, шелушения или уплотнений. Аналогичное состояние кожи отмечали и на третьи сутки.
При проведении конъюнктивальной пробы через час после нанесения селебена и воды наблюдали повышенное слезотечение из обоих глаз животного. В правых глазных яблоках отмечали гиперемию конъюнктивы, отечность и гиперемию сосудов слизистой оболочки век. Исследование через четыре часа выявило гиперемию сосудов слизистых оболочек глаз с внесением селебена. К концу первых суток после внесения селебена структурно-функциональные изменения глаз отсутствовали и глазные яблоки не отличались от контрольных аналогов. В последующие трое суток не было отмечено функциональных изменений, что свидетельствует об отсутствии токсического и раздражающего действия селебена на слизистую глаз.
Кумулятивные свойства селебена изучали по методике Lim R. еt al. (1961). Для проведения опыта использовали 20 половозрелых белых мышей живой массой 20,0-22,0 г. За минимальную дозу вводимого внутри-желудочно вещества принимали 1/10 часть от наивысшей дозы в опытах по определению острой оральной токсичности. Согласно методике через каждые четверо суток количество селебена увеличивали в 1,5 раза от объема предыдущего периода. Учет влияния на организм вели на основании сохранности поголовья, общего клинико-физиологического состояния мышей, морфологических исследований их внутренних органов.
Введение нарастающих количеств селебена до 16 суток с получением 1300 мг кормовой добавки вызывало изменение поведенческих реакций с понижением активности и угнетением водной и кормовой возбудимости, которая полностью восстанавливалась через 20-45 минут.
Увеличение количества селебена на 17 сутки до суммарного поступления 2110 мг способствовало проявлению клинических изменений: синюшности морды, ушей, хвоста, конечностей, отмечали диарею. Наблюдали пониженную активность, скучивание, вялость животных и отказ от воды и корма. При патологоанатомическом вскрытии выявляли гиперемию слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта с единичными кровоизлияниями. Почки и печень были несколько увеличены в объеме, капсулы органов напряжены. Поведенческая и кормовая активность возобновлялись через 2,0-2,5 часа.
При суммарном показателе 3324,8 мг с 21 по 24 сутки введения селебена у мышей отмечали диспепсию, цианотичность и анемию видимых слизистых оболочек, отказ от воды и корма. На вскрытии наблюдали катарально-геморрагическое воспаление желудка и кишечника, на слизистой оболочке - точечные кровоизлияния. Паренхиматозные органы были увеличены в объеме с единичными кровоизлияниями. Картина вскрытия отражала компенсаторные механизмы организма белых мышей, характеризующиеся высоким уровнем обмена веществ, в ответ на ежедневное введение нарастающих доз селебена, при котором происходило активное его выведение. Через 5 часов животные по своим поведенческим реакциям соответствовали нормативным, а через 8 часов - восстанавливали водную и кормовую активность.
Эксперимент завершился на 25 сутки в связи с физиологической неисполнимостью введения в желудок водной взвеси селебена в количестве 455,5 мг/гол. Все животные были живы. Введение возрастающих количеств селебена не вызывало смертность мышей, что не позволило выявить летальную дозу (ЛД50 и ЛД100). Изменения в клинических проявлениях и поведенческих реакциях мышей в период опыта имели обратимый характер, и животные физиологически полностью восстанавливались. Клинические и патологоанатомические проявления были обусловлены лишь механическим раздражением органов в связи с очень большими количествами введенного селебена.
При изучении влияния различных доз кормовой добавки селебен на поедаемость кормов и живую массу половозрелых белых мышей установили, что включение в рацион селебена в количестве 10,0% к рациону способствовало незначительному увеличению прироста живой массы, не вызывало изменений морфологии внутренних органов, не оказывало влияния на поведенческие реакции и клиническое состояние. Селебен в количестве 15,0% к рациону мышей обусловил снижение прироста живой массы, напряжение паренхиматозных органов и воспалительную реакцию со стороны желудочно-кишечного тракта и некоторую гиперактивность животных. Применение селебена в количестве 20,0% к рациону явилось причиной снижения прироста живой массы, развития патологии внутренних органов и повышенной возбудимости взрослых животных.
Изучение влияния разных доз селебена на прирост живой массы и морфологию внутренних органов было проведено на молодняке белых мышей в возрасте 30 суток, живой массой 10,3-12,8 г. На протяжении опытного периода молодняк мышей всех опытных групп по клиническому состоянию и поведенческим реакциям не отличался от аналогов контрольной группы, они охотно поедали корм, активно реагировали на внешние раздражители, были подвижны. Применение селебена в дозах 2,0; 3,0 и 5,0% к рациону не оказывало вредного действия на организм молодняка, а в дозах 2,0 и 3,0% способствовало стимулированию их роста и развития.
Изучение микрокартины селезенки, кишечника и печени мышей, потреблявших 2,0 % селебена, не выявило патологических отклонений от видовых и возрастных показателей развития молодняка. В то же время была установлена умеренная активация иммуннокомпетентных клеток в селезенке и рыхлой соединительной ткани тонкого кишечника. В селезенке отмечали гиперплазию лимфоидной ткани белой пульпы и насыщение лимфоцитами красной пульпы. В тонком отделе кишечника наблюдали слущивание эпителия верхушек некоторых ворсинок с усилением регенерации клеток кишечника. Наблюдали более выраженную сформированность системы крипта-ворсинка и увеличение организованности щеточной каймы. Совокупность протекающих процессов в селезенке позволяет сделать вывод об усилении процессов иммуногенеза, а в кишечнике - об активации и улучшении процессов пристеночного пищеварения.
3.4. Влияние селебена на организм половозрелых
плотоядных животных (норки)
Изучение влияния селебена на рост, развитие, прирост живой массы, индекс упитанности, репродуктивную функцию, гематологические показатели, морфометрию внутренних органов, распределение селена в организме с учетом физиологического состояния и накопления в органах и тканях новорожденных щенков проводили в научно-производственном опыте на самках норок в течение 480 суток. Были сформированы четыре группы норок по 50 голов, в возрасте 60 суток, из которых норки I контрольной группы находились на общепринятом в хозяйстве рационе (ОР), звери II, III и IV опытных групп дополнительно к ОР получали кормовую добавку селебен в количестве 2,0; 3,0 и 5,0%, соответственно, к сухой массе корма.
Исследование влияния селебена на рост, развитие, морфологию внутренних органов и репродуктивную функцию самок норок показало, что в физиологический период подготовки к гону длина тела у них была на 3,4-6,4% (Р<0,05), обхват груди на 2,9-8,8% и живая масса на 5,3-10,1% больше по сравнению с контрольными показателями. Норки, как контрольной, так и опытных групп имели показатели индекса упитанности, соответствующие показателям для воспроизводства. У самок норок, получавших с рационом селебен, наблюдали тенденцию к увеличению количества покрытых самок, уменьшение пропустовавших и отсутствие абортированных. В связи с этим получено больше щенков в расчете на самку: во II группе - на 4,5, III - 3,7 и IV - 2,7% в сравнении с контрольными зверями. Установлена высокая сохранность щенков у самок II группы - 93,1%, далее III - 92,6%, IV - 90,3%, при показателе у норок контрольной группы 84,4%. Полученные результаты могут свидетельствовать о положительном влиянии селебена, имеющего в составе необходимые органически связанный селен и микро- и макроэлементы, на воспроизводительную функцию самок. Главным образом, стимулирующий эффект проявлялся в синхронном созревании фолликулов в период гона зверей.
Изучение влияния селебена в дозах 2,0; 3,0 и 5,0% к рациону на показатели морфологического и биохимического состава крови у самок норок на 1, 120, 240 и 360 сутки опыта выявило, что показатели крови во все периоды исследований находились в пределах физиологических границ. Однако применение селебена в разные периоды физиологического состояния способствовало оптимизации параметров крови и обусловило увеличение количества эритроцитов, содержания гемоглобина, общего кальция, неорганического фосфора, щелочной фосфатазы и общего белка. Следует особо отметить, что в критический период лактации самок и отсадки щенков гематологические показатели самок, получавших селебен, были в пределах средних значений нормы, а у контрольных зверей - на нижних нормативных границах.
Было изучено содержание селена в некоторых органах и тканях самок норок на фоне естественного поступления элемента, в периоды покоя и гона. В период покоя ряд по убыванию концентрации селена располагался в следующем порядке: матка > почки > волос > кость > печень > мозг > мышечная ткань > легкие > сердце > селезенка. Самое большое долевое содержание селена было в матке - 17,2 и почках - 15,5%, далее 13,8% приходилось на волосы, 12,1% - на костную ткань, 10,3% - на печень, по 8,6% - на мышечную ткань и головной мозг. Ряд по убыванию концентрации селена в период гона был подобен состоянию покоя: матка > волос > почки > кость > мышечная ткань > печень > мозг > легкие > сердце > селезенка. Однако долевое соотношение селена увеличилось в матке (до 22,0%) и волосе (до 20,0%).
Для уточнения механизма распределения селена в органах и тканях самок норок были вычислены коэффициенты его поглощения и накопления. Анализ результатов позволил установить, что коэффициенты равные или превышающие единицу имели матка (1,08) и волос (1,00 ед.). Остальные органы и ткани имели коэффициенты ниже единицы, как в период покоя, так и гона.
Особый интерес вызывало изучение органов воспроизводства самок, эмбрионов, плодов и щенков в зависимости от концентрации селена. Сопоставление содержания селена в матках самок в период покоя и перед гоном выявило, что содержание его в органе перед гоном повышалось в два раза - с 0,20 до 0,40 мг/кг. В матке первой половины беременности отмечали снижение концентрации селена до 0,30 мг/кг, а к периоду щенения содержание этого элемена увеличивалось до уровня гона и составило 0,40 мг/кг. Эмбрионы I половины беременности содержали 0,30 мг/кг селена, плоды во II половине беременности - 0,20 мг/кг, что было на 33,3% меньше предыдущего периода. Уровень селена у щенков постнатального периода, когда они питались лишь материнским молоком, был 0,20 мг/кг; у молодняка месячного возраста, получавшего дополнительную подкормку, содержание селена составляло 0,30 мг/кг, или больше на 50,0%.
Было установлено, что наибольшее количество селена в организме новорожденных щенков содержится в сердце - 37,0%, селезенке - 26,0%, легких - 8,0%, что, по-видимому, обусловлено физиологическими процессами приспособления щенков от внутриутробного к внешним условиям существования. Ряд органов и тканей по убыванию концентрации селена у новорожденных щенков выглядел следующим образом: сердце > селезенка > легкие мышечная ткань головной мозг >печень > почки > желудочно-кишечный тракт костная ткань кожа.
Включение в рацион самок норок селебена в дозах 2,0; 3,0 и 5,0% способствовало увеличению содержания селена в органах и тканях, особенно в волосе на 59,5; 56,7 и 83,8%; в матке, соответственно, на 22,5; 22,5 и 20,0%; в почках - на 25,9; 37,1 и 37,1%; печени - 55,6; 55,6 и 66,7% в сравнении с контрольными норками. По содержанию селена в органах и тканях у контрольных норок составлен ряд по убыванию в следующем порядке: матка > волос > почки > костная ткань > мышечная ткань > печень > мозг > легкие > сердце > селезенка. Подобный ряд для норок всех опытных групп был одинаков, и выглядел следующим образом: волос > матка > почки > печень > костная ткань > мышечная ткань > мозг > сердце > легкие > селезенка. Идентичность расположения органов и тканей норок опытных групп независимо от поступления в организм разных доз селебена по существу доказывает, что накопительная способность этих органов и тканей находится всегда в определенных соотношениях.
У норок контрольной группы, получавших общий рацион, микроструктура селезенки и печени характеризовалась проявлением гемодинамических расстройств в виде застойной гиперемии, нарушением белкового и жирового обмена, проявляющегося зернистой дистрофией и мелкокапельным липидозом гепатоцитов. У норок, получавших различные дозы селебена, отмечали улучшение метаболизма, снижение проявления дистрофических процессов. В качестве дозозависимой особенности микроструктуры селезенки и печени следует отметить степень большей интенсивности проявления иммуностимулирующего действия у норок при увеличении дозы кормовой добавки.
3.5. Применение селебена в рационах щенков норок
В научно-производственном опыте изучали влияние разных доз селебена на рост и развитие молодняка самцов норок, обмен и накопление селена в их органах и тканях, морфологические и биохимические показатели крови. Были сформированы четыре группы зверей в возрасте 120 суток: I контрольная группа находилась на общепринятом в хозяйстве рационе (ОР), звери II, III и IV опытных групп дополнительно к ОР получали кормовую добавку селебен в количестве 2,0; 3,0 и 5,0% к рациону.
Анализ результатов взвешивания на 30-е сутки применения кормовой добавки показал, что более высокие показатели живой массы были у норок II и III опытных групп и превышали контрольные на 47,4 и 46,4 г, соответственно. На 60-е сутки опыта отмечали более существенное влияние селебена на изменения живой массы норок по сравнению с предыдущим периодом. У молодняка опытных групп живая масса была выше, чем у контрольных аналогов на 27,7-120,8 г. Наибольшую живую массу имели самцы II и III опытных групп, которые превосходили своих сверстников из контрольной группы на 120,8 и 90,2 г, соответственно.
Обмен и накопление селена в организме молодняка норок изменялись в зависимости от возраста животных. Исследования на содержание селена в органах и тканях у норок в 120-суточном возрасте выявили, что наибольшее его количество было в головном мозге, мышечной ткани и волосе. На их долю приходилось 35,9% селена, содержащегося в обследованных органах. Наименьшее содержание обнаружили в почках, сердце и костной ткани, на долю которых приходилось всего 21,0% к общему содержанию селена. Ряд селена по степени уменьшения концентрации в органах и тканях у 120-суточных норок расположился следующим образом: головной мозг > мышечная ткань > волос > печень > легкие > селезенка > семенники > костная ткань > сердце > почки. Концентрация селена в организме 180-суточных норок была сходной с показателями у молодняка 120-суточного возраста. Ряд селена по степени концентрации в убывающем порядке в организме 180-суточных норок представлен: головной мозг > мышечная ткань > волос > селезенка > легкие > печень > семенники > сердце > костная ткань > почки.
Количественной характеристикой способности накапливать химические элементы является безразмерный коэффициент биологического поглощения. Определение этого коэффициента необходимо для прогнозирования ожидаемого уровня элемента в организме животных. Наибольший коэффициент поглощения селена у 120- и 180-суточных норок отмечали в головном мозге - 0,051 и 0,054, несколько меньше была степень поглощения мышечной тканью - 0,05 и 0,052, волосом - 0,047 и 0,049, очень незначительное накопление регистрировали в сердце - 0,032 и 0,035 и почках - 0,030 и 0,033, соответственно.
Изучение влияния селебена в дозах 2,0; 3,0 и 5,0% к рациону на распределение селена в органах и тканях норок провели на 60-е сутки опыта. Было установлено, что применение селебена обусловило увеличение концентрации селена в головном мозге на 23,1-35,1%, мышечной ткани - 2,1-5,6%, костной ткани - 8,4-33,3%, печени - 48,9-67,0%, миокарде - 45,6-49,7%, семенниках - 1,3-4,6% в сравнении с контролем. Долевое соотношение селена в органах и тканях у норок опытных групп отражало количество поступившего элемента, то есть чем выше было поступление, тем больше была доля селена из общей структуры содержания элемента.
3.6. Влияние разных доз селебена на качество
меховой продукции норок
Изучение влияния селебена на качество меховой продукции проводили в научно-производственном опыте на норках. Контрольные звери содержались на основном рационе, опытные в течение 120 суток до убоя на мех получали 2,0; 3,0 и 5,0% селебена к сухой массе корма. После убоя для исследований на качественные показатели в сырье и в полуфабрикате были отобраны по 5 шкурок методом случайной выборки из каждой группы.
У норок II опытной группы 60,0% шкурок в сырье были отнесены к размерам Б, тогда как в III группе этот показатель составил 20,0%, в то время как в I контрольной и IV группах таких шкурок не было. После выделки во II группе 60,0% шкурок перешли по размерам в группу А, в III и IV группах требованиям А соответствовали 20,0% шкурок, что было лучше показателей контрольной группы.
Наилучший зачет по качеству шкурок в сырье был у II группы - 93,0, в III - 88,4, IV - 80,0 и в контрольной - 67,0%; в полуфабрикате - у шкурок II - 91,2, III - 82,6, IV и контрольной - по 80,0%.
Для объективного представления о влияние разных доз селебена на качество шкурок норок была подготовлена сводная таблица всех изученных показателей в сырье и полуфабрикате по тридцати позициям и баллам. Проводили визуально-органолептическая и инструментальную оценку по баллам. При такой оценке более выгодную позицию занимают шкурки норок II и III опытных групп, получавших 2,0 и 3,0% селебена (табл. 2).
2. Оценка шкурок в баллах
Вариант | Балл и количество шкурок | |||||||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | ||||||
шт. | % | шт. | % | шт. | % | шт. | % | шт. | % | |
I - контроль (ОР) | 2 | 13,9 | 15 | 88,4 | 7 | 41,6 | 2 | 11,5 | 4 | 25,0 |
II - ОР+2% селебен | 12 | 86,1 | 4 | 55,0 | 4 | 45,2 | 5 | 46,1 | 5 | 47,8 |
III - ОР+3% селебен | 3 | 16,7 | 3 | 16,7 | 4 | 25,0 | 12 | 93,2 | 8 | 58,4 |
IV - ОР+5% селебен | 7 | 44,5 | 5 | 30,5 | 7 | 47,2 | 8 | 55,5 | 3 | 22,3 |
Для определения экономической эффективности из пяти шкурок норок всех групп были изготовлены изделия площадью: II - 44,1, III - 36,9, IV - 33,2 и контрольной - 27,4 дм2 на сумму 8379, 7011, 6308 и 5204 руб., соответственно. В среднем каждое изделие было реализовано: из II группы - по 1675,8, III - 1402,2, IV - 1261,6 и контрольной - 1041,2 рубля, что дороже к показателям контрольной группы на 161,0, 134,7 и 121,2% (табл. 3).
3. Оценка изделий из шкурок норки
Вариант | Номер шкурки | Показатель оценки изделий | ||||
вид изделия | сорт, группа пороков | площадь, дм2 | цена, х 190,0 руб/дм2 | средняя цена реализации, руб. | ||
1 - контроль | 1 | пластина | 1 с/д | 6,4 | 1216,0 | 1041,2 |
2 | пластина | 1 с/д | 5,0 | 950,0 | ||
3 | пластина | 1 с/д | 5,0 | 950,0 | ||
4 | пластина | 1 с/д | 5,0 | 950,0 | ||
5 | пластина | 1 с/д | 6,0 | 1140,0 | ||
II - опыт | 1 | пластина | 1 с/д | 9,2 | 1748,0 | 1675,8 |
2 | воротник | 1 м/д | 10,7 | 2033,0 | ||
3 | воротник | 1 с/д | 10,6 | 2014,0 | ||
4 | воротник | 1 м/д | 6,9 | 1311,0 | ||
5 | пластина | 1 с/д | 6,7 | 1273,0 | ||
III - опыт | 1 | пластина | 1 с/д | 5,0 | 950,0 | 1402,2 |
2 | пластина | 1 с/д | 7,2 | 1363,0 | ||
3 | воротник | 1 с/д | 9,7 | 1843,0 | ||
4 | воротник | 1 м/д | 9,4 | 1786,0 | ||
5 | пластина | 1 с/д | 5,6 | 1064,0 | ||
IV - опыт | 1 | пластина | 1 с/д | 5,2 | 988,0 | 1261,6 |
2 | пластина | 1 с/д | 6,0 | 1140,0 | ||
3 | пластина | 1 с/д | 6,8 | 1292,0 | ||
4 | воротник | 1 м/д | 9,7 | 1843,0 | ||
5 | пластина | 1 с/д | 5,5 | 1045,0 |
3.7. Влияние кормовых добавок селена на организм всеядных
животных (свиньи разного возраста и физиологического состояния)
Были проведены исследования по изучению влияния селебена на продуктивность супоросных свиноматок. С начала супоросности и до конца третьего месяца прирост живой массы у свиноматок опытной группы увеличился на 2,5 кг по сравнению с контрольными аналогами. Количество поросят, полученных от опытной группы свиноматок, превысило число контрольных на 15,5%, а их масса при рождении была больше на 4,62%, чем у контрольных аналогов. Некоторое увеличение в росте и развитии у поросят опытных групп сохранилось и в подсосный период. Поросята опытной группы достигли периода отъема с более высоким показателем среднесуточного прироста, который составил 210,0 г и был на 11,7% выше, чем у контрольных сверстников. Добавление в рационы супоросных свиноматок селебена оказало положительное влияние на жизнеспособность новорожденного молодняка, что обеспечило более высокую сохранность - 94,01%, чем у животных в контрольной группе - 89,13%.
Животные в период беременности и лактации имеют повышенную нагрузку на органы, обеспечивающие гомеостаз, среди которых особое значение имеют почки, печень и органы пищеварения. Напряженный обмен веществ, применение новой кормовой добавки требуют контроля структурно-функционального состояния этих органов. При гистологическом исследовании у свиноматок контрольной группы в органах выявили умеренно выраженные гемодинамические расстройства в виде застойной гиперемии, зернистую дистрофию паренхиматозных клеток печени и почек, что свидетельствует о нарушении белкового обмена. У свиней, получавших селебен, при гистологическом исследовании отмечали снижение проявления дистрофических процессов, сосудистых расстройств, катарального состояния слизистой кишечника, обусловленных технологией содержания подсосных свиноматок.
В научно-хозяйственном опыте изучали влияние разных доз селебена на рост и развитие свиней в период доращивания и откорма. Опыт проводили с 35 до 242 суточного возраста с применением селебена в дозах 1,0; 2,0 и 3,0%.
Прирост живой массы у поросят II и III групп в период доращивания был достоверно (Р0,05) выше на 4,6 и 6,9%, в конце откорма - на 2,7 и 5,7%, а за весь период опыта - на 3,9 и 5,5%, соответственно, в сравнении с контрольными аналогами. В IV группе отмечено несущественное повышение прироста живой массы по сравнению с контролем. Общий расход корма на образование прироста живой массы свиней за весь период доращивания и откорма, а также затраты корма на 1 кг прироста были меньше у животных, получавших 1,0 и 2,0% селебена к сухому веществу рациона, чем у контрольных сверстников.
Исследования по изучению влияния селебена на продуктивность откормочного поголовья свиней выявили, что из трех вариантов самым оптимальным оказался вариант с дозой 2,0% добавки, в котором были наилучшие показатели прироста живой массы. В связи с этим были проведены сравнительные морфологические исследования печени, почек, двенадцатиперстной кишки и длиннейшей мышцы спины у откормочных свиней контрольной и опытной групп, получавших 2,0% селебена к сухой массе корма.
Гистологически у свиней контрольной группы выявили полнокровие сосудов печени и почек в связи с гемодинамическими расстройствами, обусловленными сердечно-сосудистой недостаточностью. Гепатоциты и эпителий канальцев нефронов были с признаками зернистой дистрофии. Перипортальные гепатоциты организованы в печеночные балки. Междольковая соединительная ткань разрыхлена, отечна и состояла из волокнистых структур и незначительного количества клеток. Сосуды триады полнокровны.
В двенадцатиперстной кишке выявляли альтерацию - повреждение энтероцитов ворсинок с признаками слизистой дистрофии; экссудацию в виде гемодинамических расстройств (гиперемия); пролиферацию - размножение клеток основы слизистой, что, в целом, являлось верификацией подострого катарального дуоденита.
У контрольных свиней мышечная ткань длиннейшей мышцы спины в области мышечного глазка характеризовалась набухшими мышечными волокнами, сглаженностью рисунка продольной и поперечной исчерченности в отдельных их участках, отечностью эндомизия-интерстиция, что свойственно водянистой свинине с признаками PSE.
Гистологические исследования печени свиней, получавших селебен, показали, что кровеносные сосуды органа были умеренно полнокровны. Центролобулярные и перипортальные гепатоциты организованы в балки, без особой зернистости в цитоплазме клеток.
Исследования микрокартины почек свиней опытной группы выявили, что капилляры гломерул и сосуды микроциркулярного русла интерстиция содержат незначительное количество крови. Эпителий проксимальных канальцев органа без видимых в световом микроскопе изменений. Просветы капсул нефронов и канальцев расширены, заполнены прозрачным содержимым, что свидетельствует об активации процессов мочеобразования.
При исследовании микроморфологии двенадцатиперстной кишки свиней было установлено, что рисунок системы крипта-ворсинка хорошо сформирован, дуоденальные железы содержат концевые отделы с эпителиальными клетками умеренной функциональной активности. Ворсинки покрыты преимущественно каемчатыми энтероцитами с хорошо сформированной щеточной каймой, что свидетельствует об активации пристеночного пищеварения. Бокаловидные клетки на их поверхности единичные, количество слизи на поверхности стенки незначительно.
Мышечная ткань длиннейшей мышцы спины представлена симпластами мышечных волокон с отчетливым продольным и поперечным рисунком исчерченности, ткань умеренно полнокровна, отечность эндомизия не отмечали, что свидетельствует о нормализации функционально - технологических свойств свинины и отсутствии признаков PSE в ней.
Применение кормовой добавки селебен в дозе 2,0% (оптимальная) к сухому веществу рациона оказало иммуностимулирующее действие, о котором свидетельствует увеличение количества лимфоидно-гистиоцитарных клеток в междольковой соединительной ткани печени свиней; активизировало пристеночное пищеварение в двенадцатиперстной кишке, на что указывает выстилание ворсинок каемчатыми энтероцитами с хорошо сформированной щеточной каймой; улучшило структуру мышечной ткани за счет уменьшения отечности эндомизия. В исследованных органах снизилось проявление дистрофических процессов, сосудистых расстройств, катарального состояния слизистой кишечника, что привело к оптимизации метаболизма животных и улучшению качества мясного сырья.
Применение селена в животноводстве многих стран показало положительные результаты его влияния на рост, развитие и сохранность молодняка. Однако мало научных работ по изучению влияния селена на качество мяса и мясную продуктивность. Отсутствуют данные по использованию совершенно новой кормовой добавки селебен, которая имеет в составе органически связанный селен и агроминерал. Поэтому проведение опыта по сравнительной оценке селенита натрия и селебена, считаем весьма актуальным и целесообразным. Научно-хозяйственный опыт был проведен на свиньях породы крупная белая, живой массой 74-75 кг, в возрасте 6 месяцев. Были сформированы три группы по 32 животных: I - контрольная на основном рационе СПК 1-49 (ОР), II - опытная ОР + премикс П51-1 + селенит натрия 1 мг/кг к сухому веществу рациона, III - ОР + премикс П51-1 + селебен 1,0% к сухому веществу рациона. Продолжительность эксперимента 122 суток.
Наибольшая масса парной туши была у свиней III опытной группы и составила 82,4 кг, что на 17,2% больше контрольной и на 6,9% выше показателей II группы. При химическом анализе мяса установлено, что белково-качественный показатель мяса свиней III группы был выше на 0,71 по сравнению с аналогами II группы, и на 0,91 превышал показатель в контрольной.
Изучение количественных показателей аминокислот выявило тенденцию к увеличению их содержания в длиннейшей мышце спины свиней опытных групп в сравнении с контрольными аналогами, и с более ярким проявлением у животных, получавших к основному рациону селебен, в сравнении с таковыми, получавшими селенит натрия. По сумме аминокислот мясо свиней III группы на 358,0 и 298,0 мг превосходило мясо свиней контрольной и II групп, соответственно. В группе незаменимых аминокислот в длиннейшей мышце спины свиней, получавших селебен, повысилось содержание лизина на 6,5% (Р<0,05), треонина - на 2,17 и триптофана - на 4,3%, а у свиней, получавших селенит натрия, превышение составило 0,3; 0,2 и 1,9%, соответственно, в сравнении с контрольными аналогами. В группе заменимых аминокислот в мышечной ткани животных, получавших селебен, установили повышение аспарагиновой кислоты на 3,3, глицина - на 1,08, глутамина - на 2,47 и цистина - на 4,4%, а у животных, получавших селенит натрия, эти показатели были больше на 0,7; 0,1; 3,1 и 2,0%, соответственно, в сравнении с контролем.
Скармливание кормовых добавок селебен и селенит натрия не оказало отрицательного воздействия на аминокислотный баланс и их соотношение в мышечной ткани, в то же время повысило количественное содержание аминокислот в ней. Мясо животных опытных групп по аминокислотному составу было более полноценным.
Комплексная селенорганическая кормовая добавка селебен содержит в своем составе бентонит, обладающий свойствами сорбировать токсины в организме животных и восполнять микроэлементную недостаточность.
Научно-хозяйственный опыт по сравнительному изучению влияния селебена и бентонита на метаболизм и сорбцию солей кадмия, никеля и свинца в организме супоросных, подсосных свиноматок и их поросят провели в регионе техногенной нагрузки.
Было сформировано три группы супоросных свиноматок. Животные I группы являлись контролем. Свиноматки II и III опытных групп ежедневно дополнительно к ОР получали 1,0% селебена и 1,0% бентонита к сухому веществу корма, соответственно. Группы животных формировали на 50-52 сутки после осеменения, кормовые добавки скармливали в течение 60 суток - до опороса. Исследование показателей крови у супоросных свиноматок при скармливании им селебена и бентонита выявило, что они были в пределах границ нормы и имели тенденцию к увеличению количества эритроцитов, содержания гемоглобина, общего кальция, неорганического фосфора и резервной щелочности.
Включение в рацион супоросных свиноматок селебена обеспечило снижение солей тяжелых металлов в организме на 14,6-66,6%, в том числе в печени: кадмия - на 66,6, никеля - на 31,6 и свинца - на 52,1%, в мышечной ткани, соответственно, на 28,6, 40,0 и 37,3%, в почках - на 14,6, 53,9 и 41,0% к контролю. Аналогичную картину отмечали в органах и тканях свиноматок, получавших бентонит, где уровень изучаемых солей за период опыта снизился на 6,5-62,2%, при этом в длиннейшей мышце спины содержание солей кадмия снизилось на 14,3, никеля - на 36,5% и свинца - на 32,2%, в то же время более существенное снижение токсикантов отмечали в печени и почках - на 62,2; 33,7; 39,9% и 6,5; 51,9; 35,3%, соответственно. Сравнительная оценка двух групп животных, получавших различные кормовые добавки, с показателями контрольных аналогов на конец опыта, выявила более высокий процент снижения содержания солей кадмия, никеля и свинца у свиноматок, получавших селебен, против животных, получавших бентонит.
Для изучения влияния селебена и бентонита на организм подсосных свиноматок были сформированы три группы подсосных свиноматок крупной белой породы, массой 180 кг, по третьему опоросу. Животные I контрольной группы содержались на основном рационе (ОР). Свиноматки II и III опытных групп ежедневно дополнительно к ОР получали 1,0% селебена и 1,0% бентонита к сухому веществу корма, соответственно. Кормовые добавки скармливали 60 суток - до отъема поросят.
Применение селебена и бентонита оптимизировало параметры крови подсосных свиноматок до средних нормативных значений по количеству эритроцитов, содержанию гемоглобина, общего кальция и неорганического фосфора, у контрольных животных эти же показатели были на уровне нижних нормативных значений.
Использование селебена и бентонита в кормлении подсосных свиноматок способствовало постепенному и значительному выведению солей кадмия, никеля и свинца из организма животных при нарастающих показателях у контрольных аналогов. Сравнительный анализ полученных данных показал, что в мясе свиноматок II группы снизилось содержание солей кадмия, никеля и свинца на 33,3; 64,6 и 37,8%, при подобных условиях у получавших бентонит - на 16,7; 58,7 и 27,0%, соответственно. В печени опытных групп животных в сравнении с контрольными аналогами наблюдали снижение содержания этих же солей у свиноматок, потреблявших селебен, - на 62,3; 39,2 и 48,8% и бентонит - на 38,8; 38,2 и 37,2%. Более интенсивное выведение токсинов у свиноматок, получавших селебен, в сравнении с получавшими бентонит прослеживалась и при анализе показателей содержания токсикантов в почках. Концентрация солей кадмия, никеля и свинца у свиней, получавших селебен, снизилась на 49,5; 44,8 и 40,9%, в то время как у животных, потреблявших бентонит, снижение составило 51,5; 37,9 и 38,1% в сравнении с контролем на конец опыта. Кроме этого было установлено, что процессы детоксикации и выведения из организма подсосных свиноматок химических веществ протекали более интенсивно в сравнении с супоросными свиноматками, потому что были, вероятно, обусловлены естественными процессами выведения их с молоком. Скармливание кормовых добавок селебена и бентонита подсосным свиноматкам обусловило снижение солей тяжелых металлов до уровня допустимой нормы, что позволило производить убой выбракованных животных с нормативным содержанием солей кадмия, никеля и свинца в мясе и субпродуктах.
Сравнительная оценка влияния селебена и бентонита на живую массу и сохранность поросят была проведена в научно-хозяйственном опыте на трех группах подсосных поросят по 45 голов: I - контрольная - на основном рационе (ОР), II - опытная ОР + 1,0% селебена, III - ОР + 1,0% бентонита. Анализ полученных данных выявил, что на 30 сутки применения кормовых добавок у поросят II группы живая масса была больше на 13,2%, а у поросят III группы - на 10,2% по сравнению с контрольными аналогами. Среднесуточный прирост живой массы у контрольных поросят составил 183 г, у животных II группы - 211 г, III - 205 г, что было на 15,3 и 12,0% больше, чем в контроле. К концу опытного периода у поросят, получавших селебен, живая масса была высоко достоверно (при Р<0,001) больше на 10,3%, а у поросят, получавших бентонит, - на 8,0% (при Р<0,001) в сравнении с контрольными животными. Среднесуточный прирост живой массы в этот период у контрольных поросят составил 331,5 г, у животных, получавших селебен, - 400,0 г, у поросят, получавших бентонит, - 393,0 г, что было на 20,7 и 18,6% больше, чем у контрольных поросят. Анализ показателей сохранности выявил сравнительно лучшие данные у животных, получавших селебен, где сохранность была выше, чем у контрольных на 8,9% и на 2,2%, чем у получавших бентонит.
3.8. Влияние селебена на организм травоядных животных (овцы)
Для изучения влияния селебена на прирост живой массы и сохранность молодняка овец был проведен научно-производственный опыт. Для этого были сформированы по три группы баранчиков и ярочек: I - контрольная - ягнята на общепринятом рационе (ОР), II - ОР + селебен в дозе 2,0%, III - ОР + селебен 3,0%. Продолжительность опыта составила 60 суток.
На 30-е сутки скармливания селебена прирост живой массы у ягнят II и III групп был выше контрольных на 4,6 и 2,9%. Аналогичную картину наблюдали у опытных ярочек, которые были больше, соответственно, на 5,1 и 4,8%. Среднесуточный прирост живой массы у баранчиков II и III групп был больше контрольных показателей на 42,0 и 40,0 г, и у ярочек - на 15,0 и 8,0 г. Лучшие результаты по приросту живой массы были у баранчиков и ярочек II группы. На 60-ые сутки живая масса баранчиков II и III групп была выше контрольных аналогов на 6,8 и 4,5%, и ярочек - на 6,7 и 5,2%, соответственно. Баранчики II и III групп имели живую массу на 2,1 и 1,8 кг, ярочки на 1,15 и 0,6 кг больше контрольных аналогов. Сохранность у баранчиков опытных групп составила 94,8 и 94,3%, у контрольных - 93,5%, соответственно у ярочек - 94,5 и 94,5%, в контроле 92,6%. Сравнительно лучшие показатели были достигнуты в группе животных, получавших кормовую добавку селебен в дозе 2,0% к рациону.
Влияние селебена на динамику накопления селена в органах и тканях изучали в научно-производственном опыте на 2 группах баранчиков-аналогов. Животные первой контрольной группы содержались на основном рационе, второй опытной группе давали кормовую добавку селебен в количестве 2,0% к рациону. С момента включения селебена в рацион животных через 3, 6, 9, 12, 24, 48, 72, 144, 240 часов проводили изучение физиологического процесса всасывания и элиминации селена в органах и тканях: печени, почках, легких, сердце, селезенке, стенке желудка (сычуге), стенке тонкого отдела кишечника и скелетной мышце. Анализ полученных результатов по концентрации селена в органах и тканях показал, что значительное его количество накопилось в печени с 6 до 9 часов опытного периода и составило от 0,500,02 до 1,210,04 мкг/кг, то есть за 3 часа накопление селена увеличилось в 2,4 раза, а в последующие три часа увеличение составило лишь 0,08 мкг/кг. С учетного времени 12 часов и до конца опыта концентрация селена умеренно снизилась до уровня 0,600,02 мкг/кг.
Содержание селена в почках имело более умеренный сегмент, где его накопление и элиминация проходила равномерно и к 240 часам достигала показателей контроля. Максимальное накопление селена наблюдали на 12 и 24 часы опытного периода - 1,210,04 и 1,190,03 мкг/кг, соответственно.
Всасывание и элиминация селена в селезенке происходили аналогично другим органам, накопление его за весь опытный период составило 4,87 мкг/кг. В селезенке селен концентрировался на достаточно высоком уровне и к 9 часам опыта достигал до 1,190,04 мкг/кг, что было выше показателя контроля более чем в 4 раза. Однако далее интенсивность накопления становилась менее значительной и к 12 часам рост концентрации селена составлял лишь 0,02 мкг/кг. Далее процесс снижения содержания селена шел равномерно до конца опыта. Следует отметить, что к концу опыта концентрация селена в селезенке значительно превышала контрольный показатель.
Был проведен сравнительный анализ по содержанию селена в организме у опытных животных через 9, 12, 24 часа, то есть в период самого большого накопления селена в организме баранчиков после приема кормовой добавки селебен. Наибольшая концентрация селена у баранчиков перед применением селебена была в почках - 19,0% и печени - 16,0%, наименьшая - в легких - 9,0% и сердце - 6,0%. Содержание селена в селезенке, стенке желудка, стенке тонкого отдела кишечника и в скелетной мышце было примерно одинаковым и находилось в пределах 11,0-14,0%. Анализ полученных данных позволил вывести ряд по убыванию содержания селена в организме контрольных баранчиков: печень > почки > сычуг > селезенка > тонкий отдел кишечника > легкие > скелетная мышца > сердце.
Ряд по убыванию концентрации селена через 9 часов после скармливания селебена выглядел следующим образом: печень селезенка > почки легкие сычуг > тонкий отдел кишечника скелетная мышца > сердце. Лидером по доле накопления элемента осталась печень - 15,0%, значительно уменьшилось содержание его в почках - с 19,0 до 14,0% и понизилось количество в сердце - с 6,0 до 4,0% в массовом объеме. Однако, в этом временном промежутке выявлено увеличение доли содержания селена в селезенке на 2,0%, в легких - на 5,0 и скелетной мышце - на 1,0%.
Через 12 часов после скармливания селебена наибольшая доля селена сохранялась в печени - 16,0%, далее чуть меньше - по 14,0% - содержалось в почках, селезенке и стенках желудка.
Ряд по убыванию концентрации выглядел следующим образом: печень > селезенка почки сычуг > легкие тонкий отдел кишечника > скелетная мышца > сердце. В течение опытного периода в долевом соотношении продолжалась тенденция увеличения селена в печени и стенке тонкого кишечника, и выявляли его снижение в легких. Увеличение количества селена в стенке тонкого кишечника характеризовало встраивание селена в процессы метаболизма.
Исследование внутриорганного распределения селена через 24 часа после применения селебена установило, что по-прежнему наибольшая доля элемента приходилась на печень - 20,0%, что позволяет сделать вывод о накоплении селена в этом органе. Доля селена повысилась в почках до 18,0% и незначительно в сердце - до 5,0%, в легких снизилась - до 10,0% в сравнении со значением в 12-часовой период, но была выше, чем в контроле - 9,0%. Ряд по убыванию концентрации селена выглядел следующим образом: печень > почки > сычуг > тонкий отдел кишечника > селезенка > скелетная мышца > легкие > сердце.
ВЫВОДЫ
- Разработанные комплексные селенорганические кормовые добавки на основе диацетофенонилселенида и природных минералов (бентонита, цеолита, вермикулита) являются химическими соединениями, обладающими особыми физико-химическими свойствами, ионообменным и сорбционным действием в организме животных при лечении и профилактике гипоселеноза.
- Нативные и наноразмерные селебен, селевер и селецел при использовании их в качестве кормовых добавок плотоядным (норки), всеядным (свиньи) и травоядным (овцы) животным оптимизируют метаболизм, повышают концентрацию селена в органах и тканях, увеличивают количественные и улучшают качественные показатели продуктивности особенно в условиях техногенной нагрузки окружающей среды.
- Сравнительная оценка влияния добавок селебена, селевера и селецела в количестве 2,0; 3,0 и 5% к сухой массе рациона молодняка норок в течение 60 суток на метаболизм, рост, развитие щенков, качество меховой продукции показала лучшие результаты у зверей всех опытных групп по сравнению с таковыми у контрольных животных. При этом оптимальной была доза 2,0%, с более высоким показателем при использовании селебена.
- Токсикологическая оценка селебена, биологическое тестирование, результаты структурно-функциональных исследований in vitro на модели желудочной и кишечной среды и in vivo на белых мышах и кроликах установили отсутствие острой оральной токсичности, раздражающего действия на кожу и конъюнктиву, кумулятивных свойств препарата, патологии внутренних органов и нарушений клинического статуса при активизации метаболизма животных; улучшение процессов пристеночного пищеварения и иммуногенеза.
- Применение селебена в кормлении половозрелых самок норок в периоды: выращивания и подготовки к воспроизводству, гона, беременности, щенения, лактации и отсадки щенков обусловило увеличение количества покрытых зверей, уменьшение пропустовавших и отсутствие абортированных, оптимизацию морфологического и биохимического состава крови, увеличение содержания селена в органах и тканях у самок, эмбрионов и новорожденных щенков, улучшение показателей метаболизма и иммуногенеза при снижении проявлений дистрофии паренхиматозных органов и гемодинамических расстройств.
- Использование селебена в рационах мехового молодняка норок оказало положительное воздействие на рост и развитие, метаболизм, морфологию и биохимию крови, количественные и качественные показатели меховой продукции.
- У всеядных животных применение селебена в рационах свиней разного возраста и физиологического состояния обусловило:
- у супоросных свиноматок - увеличение живой массы на 10,6%, повышение количества новорожденных поросят на 9,3% с большей сохранностью их на 4,9%, снижение содержания солей тяжелых металлов (кадмия, никеля и свинца) до нормативных показателей в органах и тканях животных в регионе с высокой степенью техногенной нагрузки сравнительно с таковыми у контрольной группы животных;
- у лактирующих и подсосных свиноматок - снижение проявления дистрофии в паренхиматозных органах, гемодинамических расстройств, усиление процессов пристеночного пищеварения, иммуногенеза и гемопоэза;
- у поросят в период доращивания и откорма - повышение среднесуточного прироста живой массы, снижение затрат кормов на 1 кг прироста, оптимизацию показателей метаболизма, улучшение качества мясного сырья с повышением содержания незаменимых аминокислот: лизина - на 6,5%, треонина - на 2,17%, триптофана - на 4,3%.
- У травоядных животных при применении кормовой добавки селебен, как у баранчиков, так и у ярочек, происходило:
- повышение среднесуточного прироста живой массы у баранчиков на 4,5, у ярок - на 5,2%; сохранности - на 94,3 и 94,5% соответственно;
- внутриорганное распределение селена с увеличением концентрации элемента в первые 9-12 часов после скармливания кормовой добавки в печени на 15,0, селезенке - на 13,0, почках - на 12,0, стенке сычуга - на 11,0, легких - на 10,0, стенке тонкого отдела кишечника, длиннейшей мышцы спины, миокарде - на 10,0-11,0%.
Предложения производству
На основании результатов, полученных в лабораторных, научно-хозяйственных опытах и апробации их в условиях Республики Татарстан, рекомендуем использовать разработанные нами селенорганические кормовые добавки сельскохозяйственным животным в соответствии с рекомендациями, наставлениями, приемами и технологиями:
- Рекомендация Токсикологическая оценка и биологическое тестирование кормовой добавки селебен, утвержденная Российской академией сельскохозяйственных наук, 2008 г.
- Рекомендации по использованию препарата ДАФС-25 в составе кормосмеси, утвержденные Главным управлением ветеринарии Кабинета министров РТ, 2006 г.
- Приемы оптимизации метаболизма у молодняка норок с применением природных бентонитов, утвержденные ГНУ Татарский НИИАХП Россельхозакадемии, 2009 г.
- Технология применения селебена (селен + бентонитовая глина) в регионе наивысшей техногенной нагрузки Республики Татарстан, утвержденная ГНУ Татарский НИИАХП Россельхозакадемии, 2009 г.
- Приемы применения местных природных сорбентов, обеспечивающих производство качественной, нормативно соответствующей продукции сельского хозяйства, утвержденные ГНУ Татарский НИИАХП Россельхозакадемии, 2010г.
Теоретические и практические аспекты диссертации целесообразно использовать в учебной работе при чтении лекций, проведении лабораторно-практических занятий и научных исследований профильных учреждений высшего профессионального образования, а также при написании монографий, справочников и учебных пособий.
Список работ, опубликованных по теме диссертации
- Яппаров, И.А. Микроэлементный состав почв в Атнинском районе Республики Татарстан /И.А. Яппаров // Материалы Междунар. симпозиума Научные основы обеспечения защиты животных от экотоксикантов, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний. - Казань, 2005. - С. 582-585.
- Яппаров, И.А. Содержание селена в системе почва - растение - животное - продукция животноводства /И.А. Яппаров // Материалы конф. молодых ученых и специалистов КГАВМ. - Казань, 2006. - С. 81-82.
- Яппаров, И.А. Селен в почвах, растениях, организме животных /И.А. Яппаров // Материалы Всерос. науч.-практ. конф. КГАВМ. - Казань, 2006. - С. 299.
- Яппаров, И.А. Определение токсичности селебена при кормлении поросят / И.А. Яппаров, Т.Н. Родионова // Ученые записки КГАВМ. - 2006. - Т. 182. Ц С. 394-398.
- Яппаров, И.А. Некоторые вопросы миграции селена по трофической цепи почва - растение - животное - продукция животноводства /И.А. Яппаров // Материалы Междунар. симпозиума Агроэкологическая безопасность в условия техногенеза. - Казань, 2006. - С. 17.
- Яппаров, И.А. Миграция селена по трофической цепи почва - растение - животное - животноводческая продукция /И.А. Яппаров // Сб. материалов Междунар. симпозиума Агроэкологическая безопасность в условиях техногенеза. - Казань, 2006. - Ч.2. - С. 427-431.
- Яппаров, И.А. Рекомендации по использованию препарата ДАФС-25 в составе кормосмеси /И.А. Яппаров // Рекомендации, утв. Главным управлением ветеринарии Кабинета министров РТ. - Казань, 2006. - 12 с.
- Яппаров, И.А. Испытание селебена на растущих кроликах /И.А. Яппаров, Т.Н. Родионова // Кролиководство и звероводство. - 2006. Ц №6. - С. 11.
- Яппаров, И.А. Влияние селебена на обмен веществ у поросят /И.А. Яппаров, Т.Н. Родионова // Ученые записки КГАВМ. - 2006. - Т. 182. Ц С. 398-402.
- Яппаров, А.Х. Конверсия корма при кормлении откормочного молодняка кроликов с разным уровнем БВМК в рационе /А.Х. Яппаров, Н.П. Кириллов, И.А. Яппаров // Ученые записки КГАВМ, 2006. Ц Т. 184. - С. 273-278.
- Яппаров, А.Х. Продуктивность молодняка кроликов при кормлении их с разным содержанием БВМК в рационах /А.Х. Яппаров, Н.П. Кириллов, И.А. Яппаров // Ученые записки КГАВМ. - 2006. - Т. 184. - С. 278-281.
- Яппаров, И.А. Токсикологическая оценка препарата селебен при скармливании его белым крысам /И.А. Яппаров // Материалы Междунар. науч.-практ. конф. Актуальные вопросы ветеринарной медицины. - Екатеринбург, 2007. - Т. 1. - С. 42-45.
- Яппаров, И.А. Токсикологическая оценка препарата селебен при скармливании его поросятам /И.А. Яппаров // Материалы Междунар. науч.-практ. конф. Актуальные вопросы ветеринарной медицины. - Екатеринбург, 2007. - Т. 1. - С. 39-42.
- Яппаров, И.А. Влияние селебена в рационах свиноматок на их продуктивность /И.А. Яппаров // Материалы Междунар. науч.-практ. конф. Современные проблемы интенсификации производства свинины. - Ульяновск, 2007. - С. 208.
- Яппаров, И.А. Продуктивность и морфо-биохимический состав крови поросят при выращивании и откорме с использованием в их рационах селебена /И.А. Яппаров // Материалы Междунар. науч.-практ. конф. Современные проблемы интенсификации производства свинины. - Ульяновск, 2007. - С. 216.
- Яппаров, И.А. Сравнительная оценка качества мяса свиней при использовании в их рационах селебена и селенита натрия /И.А. Яппаров // Материалы Всерос. науч.-практ. конф. Теоретические и практические вопросы ветеринарной медицины. - Киров, 2007. - С. 144-147.
- Яппаров, И.А. Влияние селебена на морфо-биохимические показатели крови и продуктивность поросят на доращивании /И.А. Яппаров // Материалы Всерос. науч.-практ. конф. Особенности физиологических функций животных в связи с возрастом, составом рациона, продуктивностью, экологией и этологией. - Казань, 2007. - С. 113.
- Ишкаев, Т.Х. Агроэкологические аспекты комплексного использования местных сырьевых ресурсов и нетрадиционных агроруд в сельском хозяйстве / Т.Х. Ишкаев, Ш.А. Алиев, И.А. Яппаров // Казань: Центр инновационных технологий, 2007. - 230 с.
- Яппаров, И.А. Апробация селебена при скармливании его поросятам /И.А. Яппаров // Материалы Всерос. науч.-практ. конф. молодых ученых Повышение эффективности растениеводства и животноводства - путь к рентабельному производству. - Казань, 2008. - С. 444.
- Яппаров, И.А. Токсикологическая оценка и биологическое тестирование кормовой добавки селебен / И.А. Яппаров, В.О. Ежков / Рекомендация утв. РАСХН. - Москва, 2008. - 40 с.
- Яппаров, И.А. Влияние селебена на качество мяса свиней и кроликов /И.А. Яппаров // Ученые записки КГАВМ. - 2008. - Т. 193. Ц С. 256-260.
- Яппаров, И.А. Определение токсичности кормовой добавки селебен на лабораторных животных /И.А. Яппаров // Сб. докл. Всерос. науч. конф. ГНУ Татарский НИИАХП Россельхозакадемии. - Казань, 2008. - С. 179-182.
- Ежкова, А.М. Коррекция содержания солей тяжелых металлов бентонитами в системе почва - растение - животное - животноводческая продукция в регионах различной степени техногенной нагрузки / А.М. Ежкова, А.Х. Яппаров, И.А. Яппаров, В.О. Ежков // Казань: Центр инновационных технологий, 2008. - 340 с.
- Яппаров, И.А. Кинетика селена в организме самцов норок при применении селенсодержащей кормовой добавки / И.А. Яппаров, Н.П. Кириллов // Материалы Междунар. науч.-практ. конф. - Ульяновск, 2009. - Т. 2, - С. 135-138.
- Яппаров, И.А. Влияние селебена на прирост и качество шкурок норок /И.А. Яппаров // Ученые записки КГАВМ. - 2009. - Т. 199. - С. 213.
- Яппаров, И.А. Биологическое тестирование кормовой добавки селебен /И.А. Яппаров, Н.П. Кириллов, В.О. Ежков // Материалы второго съезда ветеринарных фармакологов и токсикологов России Современные проблемы ветеринарной фармакологии и токсикологии ФЦТРБ-ВНИВИ. - Казань, 2009. - С. 382-385.
- Яппаров, И.А. Строение печени норок, получавших кормовую добавку Селебен /И.А. Яппаров, В.О. Ежков // Морфология. - 2009. - Т. 136. - С 162-163.
- Ежков, В.О. Особенности морфологии и гистологии органов и тканей у сельскохозяйственных животных при применении агроминералов в виде кормовых добавок /В.О. Ежков, И.А. Яппаров, Н.П. Кириллов // Материалы науч. конф. НИИАХП. - Казань, 2009. - С. 64-69.
- Яппаров, И.А. Технология применения селебена (селен + бентонитовая глина) в регионе наивысшей техногенной нагрузки Республики Татарстан /И.А. Яппаров, А.Х. Яппаров, А.М. Ежкова, Н.П. Кириллов // Технология, утв. ГНУ Татарский НИИАХП Россельхозакадемии. - Казань, 2009.Ц28 с.
- Ежков, В.О. Приемы оптимизации метаболизма у молодняка норок применением природных бентонитов / В.О. Ежков, И.А. Яппаров, В.А. Ковальчук // Приемы, утв. ГНУ Татарский НИИАХП Россельхозакадемии. - Казань, 2009. - 24 с.
- Яппаров, И.А. Влияние различных доз селебена на внутриорганное распределение селена у молодняка норок /И.А. Яппаров, Н.П. Кириллов // Материалы Междунар. науч.-практ. конф. - Ульяновск, 2010. - Т. 2. - С. 115-118.
- Ежков, В.О. Сравнительная оценка действия вермикулита и селевера на физиологическое развитие норок /В.О. Ежков, А.М. Ежкова, И.А. Яппаров // Ученые записки КГАВМ. - 2010. - Т. 201. - С. 245-249.
- Яппаров, И.А. Функциональная морфология некоторых органов у свиней при применении кормовой добавки селебен /И.А. Яппаров, В.О. Ежков // Ученые записки КГАВМ. Ц 2010. - Т. 201. - С. 365-369.
- Яппаров, И.А. Влияние препарата ДАФС-25 и кормовой добавки селебен на динамику селена в сыворотке крови овец /И.А. Яппаров// Овцы, козы, шерстяное дело. Ц 2010. Ц № 4. Ц С. 61-63.
- Яппаров, И.А. Гематологические показатели у молодняка норок при введении в рацион перспективной кормовой добавки селебен /И.А. Яппаров// Сельскохозяйственная биология. Ц 2010. - № 4. - С. 90-96.
- Яппаров, И.А. Сравнительная морфология некоторых органов у откормочных свиней при применении бентонита /И.А. Яппаров, В.О. Ежков // Материалы IV Всеукраинской науч.-практ. конф. молодых ученых. - Скол, 2010. - С. 210-212.
- Яппаров, И.А. Технология использования кормовой добавки селебен, биологическая и физиологическая оценка влияния его на продуктивность животных / И.А. Яппаров // Казань: Центр инновационных технологий, 2010. - 172 с.
- Яппаров, А.Х. Приемы применения местных природных сорбентов, обеспечивающих производство качественной, нормативно соответствующей продукции сельского хозяйства / А.Х. Яппаров, А.М. Ежкова, В.О. Ежков, И.А. Яппаров, Н.П. Кириллов, Р.Н. Файзрахманов, Т.Ю. Мотина /Приемы, утв. ГНУ Татарский НИИАХП Россельхозакадемии. - Казань, 2010. - 28 с.
- Яппаров, И.А. Особенности возрастных изменений содержания селена у молодняка норок /И.А. Яппаров // АПК. - 2011. - № 1. - С. 69-71.
- Яппаров, И.А. Эффективность применения нового селенсодержащего препарата Селебен в комбикормах для молодняка кроликов. /И.А. Яппаров, В.С. Александрова // Кролиководство и звероводство. - 2011. Ц № 2. Ц С. 12.
- Ежков, В.О. Микроморфология некоторых паренхиматозных органов самок норок, получавших в рационе бентонит и селебен / В.О. Ежков, М.С. Ежкова, И.А. Яппаров, Н.П. Кириллов// Ученые записки КГАВМ. Ц 2011. - Т. 207. - С. 227-231.
- Яппаров, А.Х. Влияние различных доз вермикулита на показатели продуктивности норок / А.Х. Яппаров, А.М. Ежкова, Н.П. Кириллов, В.О. Ежков, И.А. Яппаров // Ученые записки КГАВМ. Ц 2011. - Т. 208. - С. 388-391.
- Яппаров, И.А. Сравнительная оценка влияния различных селенсодержащих кормовых добавок на морфо-биохимические показатели крови молодняка норок /И.А. Яппаров, В.О. Ежков, Н.П. Кириллов, А.Х. Яппаров, А.М. Ежкова // Материалы Всеросс. науч-практ. конф. Актуальные проблемы развития агропромышленного комплекса в Верхневолжье. - Суздаль, 2011. - С. 357-362.
Патенты РФ:
- Кормовая добавка - Селевер - патент на изобретение №2429715 от 27.09.2011 г.
- Кормовая добавка - Селебен - патент на изобретение №2432774 от 10.11.2011 г.
- Кормовая добавка на основе наноструктурного вермикулита заявка на патент от 05.09.2011 г.