На правах рукописи
МОТАВИНА ЛЮДМИЛА ИВАНОВНА
ЭПИЗООТОЛОГИЯ, ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЙ СТАТУС
КОРОВ-МАТЕРЕЙ И ТЕЛЯТ, ИНФИЦИРОВАННЫХ ВИРУСОМ ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология,
микология с микотоксикологией и иммунология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
Уфа - 2012
Работа выполнена на кафедре паразитологии, микробиологии, эпизоотологии, зоогигиены и ветсанэкспертизы ФГБОУ ВПО Башкирский государственный аграрный университет.
Научные руководители: доктор ветеринарных наук, профессор Галеев Рафаэль Фаррахович доктор ветеринарных наук, профессор Иванов Александр Ильич | |
Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор Исмагилова Эльза Равильевна доктор ветеринарных наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ и РТ Юсупов Расых Халиуллович
Ведущая организация: ФГБОУ ВПО Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина. |
Защита диссертации состоится 31 марта 2012 года в 10 00 часов на заседании диссертационного совета Д 220.003.03 при ФГБОУ ВПО Башкирский государственный аграрный университет (450001, г. Уфа, ул. 50-летия Октября, 34, 2 корпус, ауд. 325).
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО Башкирский государственный аграрный университет.
Автореферат разослан 29 февраля 2012 года, размещен на сайте Министерства образования ианауки Российской Федерации и на официальном сайте ФГБОУ ВПО Башкирский государственный аграрный университет
Отзывы на автореферат направлять по адресу: 450001, г. Уфа, ул. 50-летия Октября, 34, ученому секретарю диссертационного совета.
Ученый секретарь диссертационного совета,
доктор сельскохозяйственных наук,
профессор М.Г. Гиниятуллин
1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Развитие скотоводства как основной отрасли животноводства, обеспечивающей население мясом и молоком, во многом обусловлено благополучием по инфекционным болезням. Среди всех случаев инфекционной патологии крупного рогатого скота в Российской Федерации лейкоз занимает ведущее место. В 2006 году число неблагополучных по лейкозу стад крупного рогатого скота достигало максимальной отметки (10,4%) от числа имеющихся в Российской Федерации (Гулюкин М.И. и др., 2007). Огромный ущерб, наносимый лейкозом животноводству, складывается не только из потерь, связанных с гибелью и преждевременной выбраковкой высокопродуктивных коров, снижением продуктивности, качества молока, затратами на проведение противолейкозных мероприятий, но и рождения телят с иммунодефицитами. Несмотря на значительное число научных исследований по проблеме лейкоза, эта инфекция остается еще малоизученной. Профилактика и борьба с лейкозом базируется на основе строгого выполнения комплекса мер по охране благополучных стад от заноса инфекции вируса лейкоза крупного рогатого скота, выявлении и удалении больных и инфицированных животных (Апалькин В.А., 2000; Джупина С.И., 2001; Гулюкин М.И., 2005; Галеев Р.Ф., 2009; Симонян Г.А., 2011; Алейников А.Ф., 2011; Храмцов В.В., 2011). В последние годы значительно расширился объём научных исследований и получены новые данные по организации профилактических и противоэпизоотических мероприятий, позволяющие эффективно конструировать систему оздоровительных и противоэпизоотических мероприятий в зависимости от степени поражения неблагополучных стад (Смирнов П.Н., 2000; Бусол В.А. и др., 2001; Гулюкин М.И., 2001; Мельникова В.М., 2001; Фогель Л.С., 2005; Храмцов В.В., 2005; Амироков М.А., 2006; Лебедев А.Ф., 2006; Симонян Г.А., 2007; Галеев Р.Ф., 2010, 2011). В этой связи, изучение эпизоотической ситуации и динамики эпизоотического процесса по лейкозу крупного рогатого скота, с учётом региональных особенностей, является актуальным. Огромное значение в развитии лейкозного процесса имеет естественная резистентность организма и иммунологическая реактивность. В литературе недостаточно данных о влиянии иммунодефицитного состояния больных вирусом коров на развитие иммунного статуса.
В связи с этим считаем целесообразным изучение состояния иммунного статуса здоровых и больных лейкозом коров-матерей и телят, полученных от инфицированных и здоровых коров-матерей.
Цель и задачи исследований. Целью наших исследований явилось изучить эпизоотическую ситуацию по лейкозу крупного рогатого скота в Республике Башкортостан, иммунный статус инфицированных коров-матерей, телят и разработать рекомендации по совершенствованию противолейкозных мероприятий.
В связи с этим были поставлены следующие задачи:
1. Выяснить эпизоотическую ситуацию лейкоза крупного рогатого скота в Республике Башкортостан;
2. Провести иммунобиологические исследования крови инфицированных и больных лейкозом коров-матерей;
3. Установить иммунный статус телят, полученных от РИД и РИД + коров-матерей;
4. Изучить динамику колостральных антител в крови телят;
5. Провести сравнительную оценку серологических тест-систем диагностики;
6. Определить экономическую эффективность и разработать рекомендации по совершенствованию противолейкозных мероприятий.
Научная новизна. Впервые изучены степень распространения и эпизоотическая напряженность лейкоза крупного рогатого скота в Республике Башкортостан. Показана динамика эпизоотической ситуации лейкоза крупного рогатого скота. Проведена сравнительная характеристика иммунобиологического статуса коров-матерей, больных лейкозом и телят, инфицированных вирусом лейкоза в пренатальный и постнатальный периоды. Показана сравнительная оценка серологических тестов при диагностике лейкоза крупного рогатого скота в зависимости от возраста. Определена экономическая эффективность проводимых противолейкозных мероприятий.
Теоретическая и практическая значимость работы. Собранные данные по эпизоотологическому мониторингу информируют об эпизоотической ситуации по Республике Башкортостан.
По результатам исследований разработаны методические рекомендации по диагностике и ликвидации лейкоза крупного рогатого скота в Республике Башкортостан.
Полученные результаты могут быть использованы при составлении научной и информационной литературы, в учебном процессе, при проведении лекционных и лабораторно-практических занятий по вирусологии, иммунологии, эпизоотологии инфекционных болезней животных, а также в ветеринарной практике при составлении плана противоэпизоотических мероприятий.
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на IV Всероссийской научно-практической конференции молодых учёных и аспирантов Молодёжная наука и АПК (Уфа, БГАУ, 2009); Международной научно-практической конференции: Научное обеспечение агропромышленного производства: ( г. Курск, 2010); Всероссийской научно-практической конференции Особенности развития агропромышленного комплекса на современном этапе (Уфа, БГАУ, 2011); Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 10-летию факультета пищевых технологий: Состояние, проблемы и перспективы производства и переработки (Уфа, БГАУ, 2011); Всероссийской научно-практической конференции с международным участием Инновации, экобезопасность, техника и технологии в производстве и переработке сельскохозяйственной продукции (Уфа, БГАУ, 2011); Всероссийской научно-практической конференции Научное обеспечение устойчивого развития АПК (Уфа, БГАУ, 2011); Midzynarodowej naukowi-praktycznej konferencji Strategiczne pytania wiatowej nauki (Польша, 2012).
Итоги проведенных исследований доложены на расширенном заседании кафедры паразитологии, микробиологии, эпизоотологии, зоогигиены и ветсанэкспертизы (протокол № 7 от 25 января 2012 г.) - Уфа: ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту:
1. Эпизоотическая ситуация по лейкозу крупного рогатого скота в Республике Башкортостан;
2. Иммунобиологический статус коров-матерей и телят при ВЛКРС;
3. Изучить динамику колостральных антител в крови телят;
4. Сравнительная оценка серологических тест-систем диагностики.
5. Экономическая эффективность и рекомендации по совершенствованию противолейкозных мероприятий крупного рогатого скота.
Публикация результатов исследований. Основные положения диссертационной работы опубликованы в одиннадцати научных работах, в том числе одна - в журнале, рекомендованном ВАК Минобразования и науки РФ.
Объем и структура работы. Диссертационная работа изложена на 132 страницах компьютерного текста; состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов и практических предложений. Работа иллюстрирована 28 таблицами и 28 рисунками. Библиографический список включает 252 источника литературы, в том числе 103 - иностранных авторов.
2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Материалы и методы исследований
Научно-исследовательская работа проводилась с 2007 г. по 2011 г. на базе кафедры паразитологии, микробиологии, эпизоотологии, зоогигиены и ветсанэкспертизы ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ, ГУ Башкирская научно-производственная ветеринарная лаборатория, в иммунологической лаборатории от роддома №3 г. Уфы и в хозяйствах Аургазинского района Республики Башкортостан согласно схемы, приведенной на рисунке 1.
Производственные опыты были выполнены на 30 новорожденных телятах черно-пёстрой породы, принадлежащих неблагополучной по лейкозу МТФ №2 ООО Агромир Аургазинского района, которые по принципу аналогов были разделены на три группы (контрольная и две опытные) по десять голов в каждой. Взятие крови из хвостовой вены с помощью одноразовых закрытых систем Моноветт проводили первый раз до выпойки молозива и далее на 30-й, 60-й, 90-й, 120-й, 150-й, 180-й дни после рождения для гематологических, биохимических, иммунологических и серологических исследований. Из коров-матерей были сформированы три группы (контрольная и две опытные) по десять голов в каждой.
Взятие крови проводили с помощью одноразовых закрытых систем Моноветт сразу же после отела для исследований гематологических показателей.
ююю
Рисунок 1 Общая схема исследований
Последовательность и приёмы эпизоотологического исследования, а также математический расчёт интенсивных и экстенсивных показателей проведены согласно Методическим указаниям по диагностике лейкоза (М., 2000); Методическим рекомендациям по эпизоотологическому исследованию при лейкозе крупного рогатого скота (М., 2001); Математическим методам в эпизоотологии и Методическим подходам в изучении эпизоотической ситуации и динамики эпизоотического процесса лейкоза крупного рогатого скота (Русинович А.А., 2002).
Для постановки РИД использовали набор для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота
Подготовку компонентов реакции к работе осуществляли в соответствии с Наставлением по применению набора для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
Гематологические исследования крупного рогатого скота проводили общепринятыми методами. Взрослые животные (коровы) по результатам серологических (РИД) и гематологических исследований распределялись в соответствии со стадийностью лейкозного процесса, разработанной Г.А. Симоняном (1975).
Для определения количества лейкоцитов использовали электронные счетчики частиц Целлоскоп, Культер, Пикоскел, выполняли в соответствии с наставлением (инструкцией) по их эксплуатации.
Наряду с указанными счетчиками применяли полуавтоматические счётчики крови, автоматические анализаторы, позволяющие определить от 4 до 20 параметров, то есть проводить развёрнутый анализ крови, включая полную дифференцировку лейкоцитов (нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, моноциты и лимфоциты), расчётные показатели красной крови и тромбоцитов и т.д.
Постановку реакции длительного связывания комплемента (РДСК) для выявления антител к вирусу лейкоза осуществляли в описании В.П. Шишкова и Р.Ф. Галеева (2000). В опытах применяли микрометод РДСК с использованием микротитратора Такачи.
Постановку реакции иммунодиффузии проводили в описании Л.Г. Бурбы, А.Ф. Валихова (1977). В качестве преципитирующего антигена использовали гликопротеидный антиген ВЛКРС.
Для проведения ИФА-иммуноферментного анализа использовали прибор Лазурит-автоматический иммуноферментный анализатор, (каталожный № ВБ04; регистрационное удостоверение № ФСЗ 2009/03660) к нему планшеты для иммунологических реакций отечественного производства ТУ 64-2-279-79. Объем всех ингредиентов, вносимых поэтапно в лунки планшета, равен между собой и составляет 0,1см3.
Содержание общего белка в сыворотке крови определяли с помощью рефрактометра ИРФ-454 Б2М. Концентрацию белковых фракции в сыворотке крови определяли нефелометрическим методом по степени мутности растворов, устанавливаемой с помощью фотоэлектроколориметра (КФК-2) (Кондрахин И.П. с соавт., 2004).
Количество Т- и В- лимфоцитов определяли методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана по Wybran et al. (1972). Фагоцитарную активность (ФА) лейкоцитов в крови устанавливали путем реакции фагоцитоза с латексом (Потапов С.Г. с соавт., 1977). Количество циркулирующих иммунных комплексов - по методу Ю.А. Гриневича, Н.И. Алферова (1981). Содержание иммуноглобулинов Е, M и G в сыворотке крови телят определяли методом радиальной иммунодиффузии в геле по Манчини (1965). Бактерицидную активность сыворотки крови определяли по П.А. Емельяненко (1980), лизоцимную - по В.Г. Дорофейчуку (1983).
Экономическую эффективность проведенных противолейкозных мероприятий определяли по методике, утвержденной Департаментом ветеринарии МСХ и П РФ от 21 февраля 1997 года.
Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием пакета статистического анализа для Microsoft Excel. Достоверность различий между группами оценивалась при помощи t - критерия Стьюдента. Различия считали статистически значимыми при р 0,05; р 0,01; р 0,001 (Г.Ф. Лакин, 1990).
2.2 Результаты собственных исследований
2.2.1 Эпизоотическая ситуация и динамика эпизоотического процесса по лейкозу крупного рогатого скота в Республике Башкортостан
Инфицированность вирусом лейкоза крупного рогатого скота в Республике Башкортостан неравномерная. В 2007 году положительно реагировали на РИД - 2,2%. Наибольшее количество сероположительных животных было зафиксировано в Иглинском районе - 10,0%, наименьшее число инфицированных животных обнаружилось в Белорецком районе и составило 0,05%.
В 2008 году инфицированность ВЛКРС варьировало от 0,1 до 14,7 %. 2009 году положительными оказались 2,0%, произошел спад инфицированности на 0,3% по сравнению с 2008 годом. Максимальное количество инфицированных было выявлено в Нуримановском районе - 13,6% (769 гол.), минимальное количество серополижительных обнаружилось в Благовещенском и Белорецком районах по 0,03%.
В 2010 году инфицированность колебалась в пределах от 0,02% до 12,2%, соответственно. В среднем за 4 года количество инфицированных животных варьировало от 0,030,01% до 11,581,99%.
По данным гематологических исследований в Республике Башкортостан за 2007-2010 годы наблюдался рост количества больных животных от 4,7% до 5,04%. В среднем за четыре года максимальное количество гембольных было выявлено в Уфимском районе 35,05% и минимальное в Балтачевском районе - 0,07%. В целом по Республике Башкортостан гембольных в среднем за 2007-2010 гг. выявлено - 4,73%.
Интенсивность инфицированности имеет тенденцию к снижению и варьировал от 2,2 до 1,8%, с 2007 по 2010 год, соответственно. В среднем за четыре года составило 2,080,11% (различия достоверны, р 0,05). Интенсивность заболеваемости показало высокое значение в 2009 году -10,15% и к концу году наших исследований на 2010 год понизился и составил -9,66%.
Серологическому исследованию (РИД) в хозяйствах Аургазинского района в 2007 году было подвергнуто 11 866 голов крупного рогатого скота. Установлено, что из 11 866 исследованных по РИД серопозитивными оказались 235 голов, что составляет по району 1,98%. Максимальное количесвто инфицированных животных было обнаружено в хозяйстве ООО Агромир (40,7%), а минимальное - в СПК Путь Ленина, удельный вес составил 3,9% .
В 2008 году серологическим исследованиям были подвергнуты 11 895 голов крупного рогатого скота из них оказались сероположительными в РИД - 218 голов (40,2%). Наибольшее количество сероположительных животных было зафиксировано в хозяйстве ООО Агромир 36,9%, а в СПК Путь Ленина было выявлено наименьшее количество инфицированных животных (3,3%). За 2009 год при исследовании 11 990 голов инфицированными оказались 202 головы, это составило 36,7% по району. Пик инфицированности был выявлен в хозяйстве ООО Агромир 33,9%, а в СПК Путь Ленина - 2,8%. При исследовании животных в РИД в 2010 году было выявлено 185 голов сероположительных животных из 12 115 голов исследованных, удельный вес по району 33,6%. Удельный вес инфицированности варьировал от 2,3 до 31,3% в хозяйствах СПК Путь Ленина и ООО Агромир, соответственно.
В среднем за 4 года количество инфицированных животных колебалось от 3,080,34 до 35,702,02 в хозяйствах СПК Путь Ленина и ООО Агромир, соответственно.
Число заболевших животных в 2008 году составило 29 голов или 13,30% из 218 исследованных. В хозяйстве СПК Путь Ленина было выявлено 4 положительно реагирующие головы, или 12,9%, а наибольшее число заболевших животных наблюдалось в хозяйстве ООО Агромир - 13,37%. Общее число больных животных в 2009 году составило 21 голову или 14% из 202 гемисследованных. Наибольшее число больных было зафиксировано в СПК Путь Ленина - 30,76%, а наименьшее в хозяйстве ООО Агромир (7,38%). За 2010 год было происследовано 185 голов из них гемположительными животными оказались 15 голов крупного рогатого скота или 8,1%. Пик заболеваемости был отмечен в СПК Путь Ленина - 23,81%, а минимум - в ООО Агромир, где больных было выявлено из 164 исследованных - 10 голов или 6,09%.
В среднем за 4 года количество заболевших животных варьировало от 9,351,64 до 21,043,95 в СПК Путь Ленина и ООО Агромир, соответственно.
Из таблицы 1 видно, что (2007-2010г.г.) интенсивность инфи-цированности вирусом лейкоза крупного рогатого скота имеет склонность к снижению с 1,98 до 1,5%, с 2007 по 2010 год, соответственно. Среднее значение за четыре года - 1,740,10%. Значение интенсивности заболеваемости имело высокое значение в 2008 году, составило 13,3% и к концу году наших исследований понизился и составил 8,1%. Среднее значение за четыре года - 10,801,09.
Максимальную онкозаболеваемость регистрировали в 2008 году, к концу наших исследований (2010 г.) понизился и составил 0,24%. Среднее значение за четыре года - 0,190,03%.
Значение инцидентности в период наших исследований имел, тенденцию к снижению и составило 0,3%. Высокое значение регистрировалось 2007 году и к концу наших исследований понизился и составил 1,52%. Среднее значение за четыре года - 1,750,10%.
Таблица 1 Показатели проявления эпизоотического процесса ВЛКРС в хозяйствах Аургазинского района Республики Башкортостан за 2007-2010 г.г.
№ п/п | Эпизоотологические показатели | 2007 г. | 2008 г. | 2009 г. | 2010 г. | Средний показатель за 4 года, Мm |
1 | Интенсивность инфицированности, % | 1,98 | 1,8 | 1,68 | 1,5 | 1,740,10 |
2 | Интенсивность заболеваемости, % | 11,5 | 13,3 | 10,3 | 8,1 | 10,801,09 |
3 | Онкозаболеваемость, % | 0,23 | 0,24 | 0,17 | 0,12 | 0,190,03 |
4 | Коэффициент очаговости | 13,5 | 14,5 | 10,5 | 7,5 | 11,501,58 |
5 | Инцидентность, % | 1,98 | 1,83 | 1,68 | 1,52 | 1,750,10 |
Примечание: р 0,05
Коэффициент очаговости имел наивысшее значение в первый год исследований и составил 13,5 а низкое значение очаговости было выявлено в 2010 году - 7,5.
Отсюда следует отметить, что показатели эпизоотического процесса, лейкоза крупного рогатого скота в хозяйствах Аургазинского района Республики Башкортостан за 2007-2010 годы, имеют тенденцию к снижению.
2.2.2 Показатели изменения крови инфицированных и больных лейкозом коров-матерей
2.2.2.1 Биохимические исследования
Анализ белкового спектра сыворотки крови показал, что у больных и инфицированных животных количество общего белка находилось на уровне 61,17 ±3,89 - 75,474,33 г/л, альбуминов от 35,3±0,84г/л до 37,231,95 г/л, -глобулинов от 13,761,87 до 16,35±0,45 г/л, -глобулинов от 11,380,95 до 22,83±1,44 г/л, -глобулинов от 25,8±1,04 до 37,62,68 г/л.
У гембольных и контрольных коров количество глюкозы сравнимо, а у инфицированных вирусом животных отмечается резкое снижение этого показателя на 45%, по сравнению с контролем. У больных коров, снижено количество мочевины достоверно (p<0,05) это, скорее всего, свидетельствует о нарушении синтеза мочевины в печени. Аминотрансферазы соответствуют нормативным показателям по аспартатаминотрансферазе, которая незначительно увеличена у инфицированных коров, что может свидетельствовать о некомпенсируемой сердечной нагрузке. Содержание аланинаминотрансферазы в сыворотке крови у коров всех групп резко увеличено, что свидетельствует о поражении печени. Однако, у гембольных коров этот показатель выше на 16%, чем у коров других групп.
Таким образом, при анализе данных биохимических исследований установлено: у больных лейкозом коров понижено содержание общего белка в сыворотке крови (p<0,001), фракционный состав белка изменён, за счёт увеличения - глобулиновой фракции и снижения -глобулиновой фракции. Повышение уровня -глобулинов говорит о наличии в организме инфекции и воспаления, снижение может свидетельствовать об иммунодефиците.а
2.2.2.2 Гематологические исследования
5
У инфицированных вирусом лейкоза коров, по сравнению с неинфицированными, установилось достоверное снижение уровня содержания в сыворотке крови магния, цинка и железа. Содержание кальция повышено у инфицированных коров, тогда как у неинфицированных и больных лейкозом коров этот показатель аналогичен. Снижение количества каротина в сыворотке крови инфицированных и больных лейкозом коров, по сравнению с контролем, достоверно (р<0,01). По результатам гематологических исследований было установлено: снижение количества гемоглобина у больных лейкозом коров достоверно (р<0,01) по сравнению с другими двумя группами и, несмотря на незначительное снижение количества эритроцитов, прослеживается тенденция к развитию анемии, об этом свидетельствует достоверное (р<0,001) снижение цветового показателя на 20% по отношению к контрольной группе и на 17,5 % - с инфицированной группой. У больных животных наблюдается значительное увеличение содержания лейкоцитов периферической крови и абсолютного количество лимфоцитов, такая же картина наблюдается и по лейкограмме, что неудивительно, так как эти показатели характеризуют клиническое развитие болезни у инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота.
Анализируя данные гематологических исследований, следует заключить: наличие иммунодефицитного состояния, которое регистрируется в группе коров, больных лейкозом, чему свидетельствует значительное снижение количества нейтрофильных гранулоцитов; понижение содержания количества моноцитов у коров, неинфицированных вирусом лейкоза, по сравнению с коровами-матерями двух других групп.
2.2.2.3 Иммунологические исследования
Результаты иммунологических исследований коров, больных лейкозом, свидетельствуют об изменении активности поглощения фагоцитами переферической крови антигенных компонентов, чему свидетельствуют возросшие фагоцитарное число и фагоцитарный индекс.
У гембольных животных наблюдается увеличение количества Т- и В-лимфоцитов, в процентном, так и в абсолютном значениях, что, вероятно, связано с повышением общего количества лимфоцитов у животных этой группы. Однако, функциональная активность В-лимфоцитов, продуцирующих иммуноглобулин класса М, значительно снижена, этому свидетельствует достоверно пониженное количество иммуноглобулина этого класса в сыворотке крови коров, больных лейкозом. У контрольной группы животных бактерицидная активность сыворотки крови ниже на 38,9% по сравнению с инфицированными и на 20,7% выше, чем у больных животных.
Анализ показал, что у больных животных достоверно снижаются показатели, характеризующие активность микробицидной системы фагоцитов, но увеличивается их поглотительная способность, при этом фагоцитарная активность остаётся без каких либо существенных изменений. У инфицированных вирусом лейкоза коров-матерей и больных лейкозом, увеличиваются количество Т- и В- лимфоцитов, отсюда, снижается способность В- клеток продуцировать иммуноглобулин класса М.
2.2.3 Состояние естественной резистентности телят, полученных
от РИД - и РИД + коров-матерей
2.2.3.1 Динамика изменения гематологических показателей
ейкоцитоз в крови телят от РИД+ коров-матерей прогрессировал по срокам исследований (табл.2). К 30 дню опыта содержание лейкоцитов в крови коров 3 группы увеличилось, по сравнению с фоновым и контрольным уровнем, в 1,04 и 2,3 раза (на 0,8 и 9,74 тыс/мкл), к 60 дню в 1,81-3,74 раза (на 13,3 и 21,76 тыс/мкл), к 90 дню в 1,93 и 3,83 раза (на 15,3 и 23,44 тыс/мкл), к 120 дню в 2,12 и 4,26 раза (на 18,4 и 29,64 тыс/мкл), к 150 дню в 2,17 и 4,42 раза (на 19,2 и 27,56 тыс/мкл), к 180 дню в 1,98 и 4,31 раза (на 20,1 и 28,96 тыс/мкл).
Таблица 2 Динамика содержания лейкоцитов в крови телят, полученных от РИД- и РИД+ коров-матерей
Срок исследования, дни | Результаты исследований (Mm, n=10) | ||
Контроль-здоровые | РИД- родитель | РИД+ родитель | |
ейкоциты, тыс./мкл | |||
1 | 8,070,09** | 13,00,10*** | 16,40,11** |
30 | 7,480,10*** | 12,90,18** | 17,20,15*** |
60 | 7,940,08*** | 12,40,13*** | 29,70,35*** |
90 | 8,290,12** | 10,80,17* | 31,70,41** |
120 | 8,160,11** | 10,10,16*** | 34,80,29** |
150 | 8,040,06*** | 9,90,09*** | 35,60,31*** |
180 | 7,540,08*** | 9,60,08*** | 36,50,32*** |
Примечание: *-достоверность различий значений показателей крови р 0,05; ** - р 0,01; *** - р 0,001
Содержание лейкоцитов в крови телят от РИД- коров-матерей в процессе жизни незначительно понижалось, но по сравнению с первоначальным уровнем, во все сроки было выше, чем у животных 1 контрольной группы: к 30, 60, 90, 120, 150 и 180 дням, соответственно, в 1,72, в 1,56, в 1,3, в 1,22, в 1,23 и 1,27 раза (на 5,44, на 4,46, на 2,54, на 1,84, на 1,86 и 2,06 тыс/мкл).
Содержание эозинофилов в крови телят 1 контрольной группы, за период опытов, колебалось в пределах от 6,9 до 7,7%. В крови телят от РИД- и, особенно, РИД+ коров-матерей наблюдалось к началу опытов (фон) развитие эозинофилии.
У животных, полученных от РИД - коров содержание эозинофилов к началу опытов превышало контрольный уровень в 1,07-1,1 раза (на 0,5-0,7%), от РИД+ коров - в 1,37-1,42 раза (на 2,6-2,9%).
Уровень палочкоядерных нейтрофилов (табл.3) в крови телят контрольной группы выявлялся в пределах от 1,74 до 1,83%.
В крови телят, полученных от РИД- и РИД+ коров-матерей к началу исследований регистрировалась некоторая нейтрофилия со стороны палочкоядерных клеток нейтрофильного ряда. Их уровень в крови телят от РИД- коров- матерей был увеличен до 1,89-1,99%, от РИД+ коров-матерей - до 2,22-2,24%.
Таблица 3 Динамика содержания палочкоядерных нейтрофильных гранулоцитов в крови телят, полученных от РИД- и РИД+ коров-матерей
Срок исследования, дни | Результаты исследований (Mm, n=10) | ||
Контроль-здоровые | РИД- родитель | РИД+ родитель | |
Палочкоядерные НГ, % | |||
1 | 1,74±0,38** | 1,99±0,55** | 2,24±0,32* |
30 | 1,76±0,32** | 1,96±0,54*** | 2,32±0,33** |
60 | 1,79±0,33** | 2,16±0,53** | 2,49±0,36*** |
90 | 1,8±0,35** | 2,27±0,48** | 2,87±0,28*** |
120 | 1,83±030*** | 2,49±0,49** | 3,46±0,30*** |
150 | 1,81±0,31*** | 2,51±0,50*** | 3,83±0,29*** |
180 | 1,73±0,28*** | 2,54±0,52*** | 4,18±0,31*** |
Примечание: *-достоверность различий значений показателей крови р 0,05; ** - р 0,01; *** - р 0,001
Палочкоядерные нейтрофилы в крови телят, от РИД- коров, в последующие сроки опыта изменялись в сторону дальнейшего увеличения их содержания. Они превысили фоновый и контрольный уровень к 60 дню опыта в 1,08 и 1,2 раза (на 0,17 и 0,37%), к 90 дню в 1,14 и 1,26 раза (на 0,28 и 0 47%), к 120 дню в 1,25 и 1,36 раза (на 0,5 и 0,67%), к 150 дню 1,26 и 1,39 раза (на 0,52 и 0,7%), к 180 дню в 1,27 и 1,46 раза (на 0,55 и 0,81%).
Содержание палочкоядерных нейтрофилов в крови телят от РИД+ коров-матерей, в дальнейшие дни проводимых опытов, имело тенденцию к повышению. Их уровень увеличился по сравнению с фоновым и контрольным значением к 30 дню опыта в 1,03 и 1,31 раза (на 0,08 и 0,56%), к 60 дню в 1,11 и 1,39 раза (на 0,25 и 0,7%), к 90 дню в 1,28 и 1,59 раза (на 0,63 и 1,07%), к 120 дню в 1,54 и 1,9 раза (на 1,22 и 1,64%), к 150 дню 1,7 и 2,12 раза (на 1,59 и 2,02%), к 180 дню в 1,86 и 2,41 раза (на 1,94 и 2,45%) .
Уровень сегментоядерных нейтрофилов в крови телят контрольной группы находился в пределах от 17,1 до 18,2%, не имея существенных колебаний по срокам исследований. В начале опытов у телят, полученных от РИД- и РИД+ коров-матерей, в картине крови наблюдалась нейтропения. В крови телят, от РИД- коров фоновый уровень нейтрофилов в крови был понижен на 1,8-2,0%, телят 3 группы от РИД+ коров-матерей на 4,2-4,7%. В процессе опыта уровень сегментоядерных нейтрофилов в крови животных 2 группы незначительно увеличивался, у 180 дневных животных они составили 21,6%.
Данные, свидетельствуют о том, что у телят, полученных от РИД- и, особенно, от РИД+ коров- матерей в процессе роста и развития в крови проявляются явления анемии, эозинофилии и нейтрофилии.
2.2.3.2 Динамика изменения показателя бактерицидной активности
Результаты изучения динамики изменения показателя бактерицидной активности сыворотки крови телят представлены в таблице 4.
Бактерицидная активность сыворотки крови телят контрольной группы, за период опытов не имела существенных колебаний и изменялась на уровне от 43,8 до 49,3%, повышаясь до 90 дня исследований в возрастном аспекте.
Таблица 4 Динамика изменения показателя бактерицидной активности
сыворотки крови телят, полученных от РИД- и РИД+ коров-матерей
Срок исследования, дни | Результаты исследований (Mm, n=10) | ||
Контроль-здоровые | РИД- родитель | РИД+ родитель | |
Бактерицидная активность, % | |||
1 | 43,80,97** | 30,70,69*** | 19,50,13*** |
30 | 44,61,18*** | 30,00,73*** | 17,60,23*** |
60 | 46,91,09*** | 28,40,65*** | 16,10,18*** |
90 | 49,31,27*** | 26,30,87*** | 14,30,21*** |
120 | 47,41,21*** | 24,30,51*** | 12,10,19*** |
150 | 47,11,20*** | 23,50,42*** | 11,20,17*** |
180 | 46,51,18** | 22,60,34*** | 10,20,16*** |
Примечание: *-достоверность различий значений показателей крови р 0,05; ** - р 0,01; *** - р 0,001
Значение бактерицидной активности в сыворотке крови телят от РИД- коров-матерей уступало контрольной цифре в 1,42-1,43 раза (на 13,0-13,3%), от РИД+ коров-матерей - в 2,24-2,31 раза (на 24,2-24,8%). Бактерицидная активность сыворотки крови телят от РИД- коров-матерей, понизилась в процессе исследований по сравнению с фоновым и контрольным значением к 30 дню опыта в 1,02 и 1,48 раза (на 0,7 и 14,6%), к 60 дню в 1,15 и 1,65 раза (на 2,3 и 18,5 %), к 90 дню в 1,16 и 1,87 раза (на 4, 4 и 23,1%), к 120 дню в 1,26 и 1,95 раза (на 6,4 и 23,1%), к 150 дню в 1,3 и 2,0 раза (на 7,2 и 23,6%), к 180 дню в 1,35 и 2,05 раза (на 8,1 и 23,9%).
Таким образом, уровень бактерицидной активности в сыворотке крови является интегральным показателем антимикробных свойств сыворотки крови. Падение его указывает на глубокие нарушения в иммунитете и служит неблагоприятным прогностическим признаком, повышение уровня бактерицидной активности - оценивается положительно.
2.2.3.3 Динамика изменения показателя лизоцимной активности
Показатель лизоцимной активности сыворотки крови животных 1 контрольной группы за период опытов колебался на уровне от 21,7 до 23,4%.
Данный показатель в сыворотке крови телят 2 и 3 опытных групп, к началу исследований был понижен, по сравнению с контрольным значением. Его уровень у телят от РИД- коров-матерей был ниже контрольных цифр в 1,26-1,39 раза(на 4,7-6,3%), от РИД+ коров-матерей - в 1,71-1,74 раза (на 9,3-9,5%). Лизоцимная активность сыворотки крови телят 2 группы в процессе опыта имела тенденцию к дальнейшему понижению. На 30 день исследований, показатель лизоцимной активности уступал фоновому и контрольному уровням в 1,13 и 1,53 раза (на 1,9 и 7,5%), на 60 день в 1,26 и 1,84 раза (на 3,4 и 10,6%), на 90 день в 1,48 и 2,11 раза (на 5,2 и 12,0%), на 120 день в 1,56 и 2,29 раза (на 5,7 и 13,2%), на 150 день в 1,64 и 2,38 раза (на 6,3 и 13,5%), на 180 день в 1,72-2,47 раза (на 6,7 и 13,7%).
Значительное понижение лизоцимной активности сыворотки крови регистрировалось у телят от РИД+ коров-матерей. Активность лизоцима сыворотки крови телят этой группы уступала фоновому и контрольному уровням на 30 день опыта в 1,12 и 1,89 раза (на 1,4 и 10,2%), на 60 день в 1,28 и 2,32 раза (на 2,8 и 13,2%), на 90 день в 2,09 и 2,71 раза (на 4,4 и 14,4%), на 120 день в 2,09 и 3,83 раза (на 6,7 и 17,3%), на 150 день в 2,33 и 4,22 раза (на 7,3 и 17,7%), на 180 день в 2,61 и 4,69 раза (на 7,9 и 18,1%).
Таким образом, значение показателя лизоцимной активности сыворотки крови понижается, что говорит о значительной гипоактивизации данной системы защиты пропорционально состоянию животных.
2.2.3.4 Показатели Т- и В- систем иммунитета
В крови телят контрольной группы за период исследований (табл. 5) Т-лимфоциты колебались на уровне от 41,6 до 44,7%. Значение содержания Т-клеток в крови телят, от РИД- коров-матерей, было ниже, чем в контроле в 1,53-1,54 раза (на14,5-14,7%), а в крови телят от РИД+ коров - в 1,88-1,92 раза (на 19,5-20%).
Уровень Т-лимфоцитов в крови животных 2 группы по ходу опытов постепенно понижался и уступал фоновому и контрольному значениям на 30 день опыта в 1,07 и 1,69 раза (на 1,9 и 17,4%), на 60 день- в 1,16 и 1,93 раза (на 3,8 и 21,5%), на 90 день в 1,31 и 2,14 раза (на 6,5 и 23,4%), на 120 день в 1,35 и 2,23 раза (на 7,0 и 24,6%), на 150 день в 1,39 и 2,3 раза (на 7,6 и 25,0%), на 180 день в 1,44 и 2,37 раза (на 8,3 и 25,6%).
Таблица 5 Динамика Т-лимфоцитов в крови телят, полученных от РИД- и РИД+ коров-матерей
Срок исследования, дни | Результаты исследований (Mm, n=10) | ||
Контроль-здоровые | РИД- родитель | РИД+ родитель | |
Т-лимфоциты, % | |||
1 | 41,65,01** | 26,91,21** | 22,10,09** |
30 | 42,45,22*** | 25,00,12*** | 20,10,54*** |
60 | 44,75,09*** | 23,11,05*** | 18,41,23** |
90 | 43,85,02*** | 20,40,91** | 16,31,09** |
120 | 44,54,91*** | 19,90,89*** | 14,70,18*** |
150 | 44,34,81*** | 19,31,05*** | 13,61,02*** |
180 | 44,24,04** | 18,61,25** | 12,50,98** |
Примечание: *-достоверность различий значений показателей крови р 0,05; ** - р 0,01; *** - р 0,001
Здесь, описываемый показатель, понизился по сравнению и с первоначальным, и с контрольным уровнем: к 30 дню исследований: в 1,09 и 2,1 раза (на 2,0 и 22,3%), к 60 дню в 1,2 и 2,42 раза (на 3,7 и 26,2%), к 90 дню в 1,35 и 2,68 раза (на 5,8 и 27,5%), к 120 дню в 1,5 и 3,02 раза (на 7,4 и 29,8%), на 150 день в 1,63 и 3,26 раза (на 8,5 и 30,7%), к 180 дню в 1,76 и 3,53 раза (на 9,6 и 31,7%).
Уровень Т-хелперов в крови животных контрольной группы не имел выраженных изменений по срокам опыта и колебался в пределах от 20,4 до 22,7%. Показатели Т-хелперов в крови телят опытных групп уже к началу исследований были ниже, чем в контроле. Их фоновое значение в крови телят от РИД- коров- матерей к началу опытов составило 16,4-16,8%, от РИД+ коров-матерей -13,0-13,2%. По срокам опыта, в крови телят 2 группы, регистрировалось понижение уровня хелперных реакций. Уровень Т-хелперов в крови телят 3 группы, полученных от РИД+ коров-матерей, прогрессивно падал по срокам исследований.
Уровень Т-супрессоров в крови телят контрольной группы за период наших исследований не имел выраженных колебаний и находился в пределах от 13,8 до 14,4%. Содержание Т-супрессоров в крови животных от РИД - и особенно от РИД + коров-матерей к началу опытов было повышено. Их фоновое значение в крови телят, полученных от РИД- коров-матерей, составило 17,2-17,7%, а в крови телят от РИД+ родителя - 19,4-19,6%. Значительная активизация Т-супрессоров отмечалась в организме телят 3 группы. Здесь наблюдалось повышение описываемого показателя по сравнению с его уровнем до опыта и в контроле к 30 дню исследований в 1,0,3 и 1,44 раза (на 0,7 и 6,2%), к 60 дню в 1,12 и 1,54 раза (на 2,5 и 7,7%), к 90 дню в 1,18 и 1,64 раза (на 3,6 и 9,0%), к 120 дню в 1,22 и 1,66 раза (на 4,3 и 9,5%), к 150 дню в 1,21 и 1,65 раза (на 4,0 и 9,2%), к 180 дню в 1,21 и 1,64 раза (на 4,1 и 9,2%).
Уровень В-лимфоцитов в крови телят контрольной группы за период опытов колебался в пределах от 16,3 до 18,4%, повышаясь до 90 дня опыта. Фоновый показатель содержания В-лимфоцитов в крови животных опытных групп был понижен у телят от РИД- коров-матерей до 13,7-14,1%, у телят полученных от РИД+ коров матерей до 12,6-12,8%.
Таким образом, снижение абсолютного количества В-лимфоцитов свидетельствует о физиологической гипоглобулинемии, которая наблюдается при отсутствии пассивного переноса иммуноглобулинов у новорожденных, о приобретённом дефекте синтеза иммуноглобулинов, недостаточности гуморального звена иммунитета.
2.2.3.5 Динамика изменения иммуноглобулинов в сыворотке крови телят
Показатель уровня IgG в сыворотке крови телят 2 группы в процессе опыта имел тенденцию к дальнейшему умеренному понижению (рис.2). Более выраженным этот процесс был в сыворотке крови телят 3 группы.
Рисунок 2 Динамика изменения содержания иммуноглобулинов класса G
в крови телят, полученных от РИД- и РИД+ коров-матерей
К 30 дню опыта уровень IgG в сыворотке крови телят 2 и 3 групп понизился, по сравнению с показателем контроля, в 1,38 и 1,68 раза (на 6,6 и 9,7%), к 60 дню в 1,34 и 1,64 раза (на 5,6 и 8,6%), к 90 дню в 1,5 и 1,98 раза (на 7,8 и 11,5%), к 120 дню в 1,61 и 2,34 раза (на 8,9 и 13,4%), к 150 дню в 1,60 и 2,51 раза (на 8,7 и 13,9%), к 180 дню в 1,56 и 2,75 раза (на 8,3 и 14,6%).
Уровень иммуноглобулинов класса G в крови телят контрольной группы за период опытов колебался в пределах от 21,9 до 23,3%, повышаясь до 120 дня опыта в возрастном аспекте.
Уровень IgM в сыворотке крови телят 2 группы продолжал повышаться по ходу опытов. В сыворотке крови телят 2 группы описываемый показатель увеличился, по сравнению с контрольной цифрой, к 30, 60, 90, 120, 150, 180 дням опыта соответственно в 1,26 раза (на 0,57 мг/мл), в 1,54 раза (на 1,01 мг/мл), в 1,44 раза (на 0,9мг/мл), в 1,47 раза (на 1,01мг/мл), в 1,59 раза (на 1,16 мг/мл), в 1,64 раза (на 1,21 мг/мл).
Рисунок 3 Динамика изменения содержания иммуноглобулинов класса Е в крови телят, полученных от РИД- и РИД+ коров-матерей
Более выраженное повышение уровня IgM регистрировалось в сыворотке крови телят 3 группы.
Уровень IgE (рис.3) телят опытных групп к началу исследований был значительно повышен. Их значение в сыворотке крови телят 2 группы (от РИД- коров-матерей) составило 136,8-139,4 МЕ/мл, а 3 группы (от РИД+ коров-матерей)-182,0-186,4 МЕ/мл.
Повышенные уровни общего IgE связаны с гиперчувствительностью немедленного типа. У животных, инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота, IgE повышен, как во время скрытого периода инфицирования так и болезни, так и между ними.
Концентрация IgE зависит от длительности заболевания и числа предшествующих контактов с источником болезни.
2.2.4 Циркулирующие иммунные комплексы в сыворотке крови
телят полученных от РИД- и РИД+ коров-матерей
Циркулирующие иммунные комплексы в сыворотке крови телят 1 контрольной группы выделялись в процессе опыта в пределах от 25,6 до 27,8 у.е. В сыворотке крови телят 2 группы (от РИД- коров-матерей) ЦИК к началу опытов составили 36,9-37,6 у.е., а в сыворотке крови телят 3 группы данный показатель был повышен до 44,9-45,1 у.е. Исследование содержания ЦИК в сыворотке крови животных 2 группы показало дальнейшее их повышение по ходу опытов. В этих группах их значение увеличилось к 30 дню опыта в 1,39 и 1,71 раза (на 10,7 и 19,6 у.е.), к 60 дню в 1,45 и 1,82 раза (на 12,4 и 22,4 у.е. ), к 90 дню в 1,57 и 2,01 раза (на 14,6 и 25,9 у.е.), к 120 дню в 1,45 и 1,92 раза (на 12,6 и 25,8 у.е.), к 150 дню в 1,47 и 1,95 раза (на 13,0 и 26,2 у.е.), к 180 дню в 1,44 и 1,93 раза (на 12,3 и 25,5 у.е.).
Установлено, что в организме телят, полученных от РИД- и особенно от РИД+ коров-матерей в процессе роста и развития развиваются выраженные иммунодефициты, затрагивающие механизмы как клеточного, так и гуморального звена иммунитета.
2.2.5 Длительность персистирования в крови колостральных антител
у телят, получавших молозиво больных лейкозом коров-матерей
У телят после рождения перед первым скармливанием молозива в первые 10 часов жизни подсчитывали количество лейкоцитов в крови общепринятым в гематологии методом и определяли наличие антител в РИД с гликопротеидным антигеном ВЛКРС. В среднем 21% телят, родившихся от инфицированных ВЛКРС коров был инфицирован в пренатальный период онтогенеза. Титр антител к ВЛКРС в сыворотках крови телят заметно снижается к месячному возрасту. В месячном возрасте 19 телят имели титр антител в РДСК 1:64 (63,3%), 2 телят - 1:32 (36,7%). К 3-месячному возрасту у 14 телят антитела не были выявлены в сыворотке крови, 6 телят имели титр 1:4 и 10 - 1:16. В возрасте 4 месяца антитела к ВЛКРС сохранялись у 15 телят (10 телят с титром 1:4 и 5 телят с титром 1:8), которые к пятимесячному возрасту стали серологически отрицательными.
Следует заключить, что все телята, родившиеся от больных лейкозом коров-матерей и содержащиеся в изоляторах, в месячном возрасте имели антитела к ВЛКРС.
2.2.6 Сравнительная оценка диагностических тестов при диагностике лейкоза КРС в зависимости от возраста
Эффективность тест-сравнения составил: РДСК - от 71,4 до 94,8%, РИД - от 73,0 до 96,9% и ИФА - от 73,5 до 98,1%. РДСК - применяется для изучения процессов, сопровождающихся изменением количества антигена или антител. Иммуноферментный анализ рекомендуется использовать на начальном этапе разделения неблагополучного стада и на завершающей стадии оздоровления хозяйства. Иммуноферментный анализ (ИФА) по сравнению с РИД обладает большей чувствительностью, но, как и РИД, выявляет антитела в сыворотке крови лишь через 1,5-2 месяца после заражения. Гематологическому исследованию подвергали животных, в сыворотке крови которых методами РИД или ИФА были обнаружены специфические антитела к вирусу лейкоза КРС.
Таким образом, тест-сравнительный анализ эффективности методов РДСК-РИД-ИФА при диагностике вируса лейкоза крупного рогатого скота показал, что ни один из вышеперечисленных методов не позволяет полностью 100% выявить всех животных-вирусоносителей.
2.2.7 Экономическая эффективность противолейкозных мероприятий
Противолейкозные мероприятия были проведены в ООО Агромир Аургазинского района в 2007-2010 годы. В период оздоровления было выявлено инфицированных животных в 2007 году - 199 гол; в 2008 году - 187 гол; в 2009 году - 176 голов; в 2010 году - 164 голов (табл.6).
Общий экономический ущерб хозяйству, причиненный лейкозом крупного рогатого скота составил 57087020 руб. Затраты на проведение мероприятий по ликвидации лейкоза крупного рогатого скота составили 125056 руб.
Таблица 6 Заболеваемость, вынужденный убой от лейкоза крупного рогатого скота в ООО Агромир Аургазинского района в 2007-2010 г.г.
Год | Наличие восприимчивого поголовья | РИД + (гол.) | % | Из них, вынужденно убитых, гол. |
2007 | 489 | 199 | 40,7 | 21 |
2008 | 507 | 187 | 36,9 | 25 |
2009 | 519 | 176 | 33,9 | 13 |
2010 | 525 | 164 | 31,3 | 10 |
Экономический эффект от противолейкозных мероприятий на рубль затрат составил 44,63 руб.
2.2.8 Рекомендации
по совершенствованию противолейкозных мероприятий
Оздоровительные мероприятия проводили в ООО Агромир Аургазинского района путем изолированного выращивания здорового молодняка от больных и инфицированных коров.
В начале проведения оздоровительных мероприятий (2007-2008 гг.) в хозяйстве было 40,7% серопозитивных коров. Сдача на убой больных и инфицированных животных уменьшило число серопозитивного поголовья, но не обеспечивало оздоровления. При последующем исследовании, весной 2009 г., инфицированных коров осталось 32,7%, а больных коров - 7,3%.
В дальнейшем, нами была выбрана ферма для размещения серонегативного молодняка и изолированная ферма - для серопозитивных коров, которые подвергались гематологическому исследованию. В хозяйстве при каждом очередном исследовании уменьшалось число вновь выявленных гематологически больных животных. Потомство от них с 6-месячного возраста проверяли в РИД и отрицательно реагирующих животных переводили на изолированную ферму молодняка, а положительно реагирующие телки направлялись на откорм. Исследование серопозитивных коров показало, что ежегодно из числа неблагополучных по лейкозу групп коров, болезнь проявлялась у 3,7% коров, а у 2,1% - отмечалось незначительное повышение числа лейкоцитов, характерное для подозрительных в заболевании лейкозом животных. В результате оздоровления неблагополучного хозяйства этим методом показало, что все поголовье коров выбраковывается по причинам потери продуктивности и сдачи их на мясо в течение 3,5 лет.
Таким образом, представляется возможным создать достаточное количество здоровых нетелей для замены коров и при оздоровлении от лейкоза и ВЛКРС инфекции при ежеквартальном серологическом исследовании телок с 6-месячного возраста и удаления из стада положительно реагирующих в РИД животных.
ВЫВОДЫ
1. Лейкоз крупного рогатого скота в Республике Башкортостан имеет широкую и неодинаковую тенденцию к распространению. В 2007-2008 годы было отмечено увеличение на 4,6%, а в последующие годы с 2008-2010 годы наблюдалось уменьшение инфицированности на 4,4%, 4,2% и 3,9%, соответственно.
Показатели проявления эпизоотического процесса лейкоза крупного рогатого скота в хозяйствах Аургазинского района Республики Башкортостан были в среднем за четыре года:
- интенсивность инфицированности - 1,740,10%;
- интенсивность заболеваемости - 10,801,09%;
- онкозаболеваемость - 0,190,03%;
- коэффициент очаговости - 11,501,58%;
- инцидентность - 1,750,1%.
2. Иммунобиологические показатели крови инфицированных и больных лейкозом коров-матерей были следующие:
- активность В-лимфоцитов, продуцирующих иммуноглобулин класса М, значительно снижена;
- бактерицидная активность сыворотки крови у контрольной группы животных ниже на 38,9% по сравнению с инфицированными и на 20,7% выше, чем у больных животных;
- количество Т- и В- лимфоцитов увеличено, при этом значительно снижена способность В- клеток продуцировать иммуноглобулин класса М.
3. В организме телят, полученных от РИД- и РИД+ коров-матерей развиваются первичные иммунодефициты, характеризующиеся:
- нарушением гематологических показателей (анемией, эозинофилией, нейтрофилией, лейкоцитозом);
- понижением факторов естественной резистентости (лизоцимной активности сыворотки крови в 2,49 и 4,69 раза (на 13,9 и 18,2%), бактерицидной в 2,07 и 4,56 раза (на 23,8 и 36,4%);
- уменьшением содержания Т- лимфоцитов в крови в 2,37 и 3,53 раза (на 25,6 и 31,7%), Т- хелперов в 1,88 и 2,77 раза (на 9,9 и 13,5%), В- лимфоцитов в 1,26 и 2,02 раза (на 3,8 и 9,2%), усилением реакции Т- супрессоров в крови в 1,37 и 1,64 раза (на 5,4 и 9,2%);
- затормаживанием продукции сывороточного IgG в 1,56 и 2,75 раза (на 8,3 и 14,6%), активизацией IgM в 1,64 и 2,23 раза (на 1,21 и 2,33%) и IgE в 3,14 и 4,36 раза (на 124,2 и 194,4 МЕ/мл) и повышением уровня циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в 1,44 и 1,93 раза (на 12,3 и 25,5 у.е.).
4. Выявлено постоянное снижение титров к 6-месячному возрасту и лишь у 19% телят обнаруживали антитела в титре 1:16. Телят в этот период защищали от заражения ВЛКРС молозивные антитела.
5. Эффективность серологического тест-сравнения составил: РДСК - от 71,4 до 94,8%, РИД - от 73,0 до 96,9% и ИФА - от 73,5 до 98,1%.
6. Экономический эффект от проведённых противолейкозных мероприятий на один рубль затрат составил 44,63 руб.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1. При проведении противолейкозных мероприятий необходимо учитывать иммунный статус коров-матерей и телят. Результаты серологического тестирования использовать при подборе родительских пар и осеменении коров; использовать для воспроизводства коров с клинико-гематологическим проявлением лейкоза или подозрительных по заболеванию; при выпаивании молозива и использование при выращивании телят сборного молока, полученного на фермах при совместном содержании инфицированных и интактных коров.
2. Иммуноферментный анализ рекомендуется использовать на начальном этапе разделения неблагополучного стада и на завершающей стадии оздоровления хозяйства.
3. Для реализации в условиях практической ветеринарии Республики Башкортостан разработаны методические рекомендации, утверждены начальником Управления ветеринарии Республики Башкортостан. Материалы диссертации рекомендуется использовать при написании монографии, учебных пособий, а также чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий со студентами биологических, ветеринарных факультетов ВУЗов и в научно-исследовательских лабораториях соответствующего профиля.
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Рамеев, Т.В. Современный, научно-обоснованный метод оздоровления от лейкоза крупного рогатого скота в Зауралье Республики Башкортостан / Т.В. Рамеев, А.Х. Таюпов, Л.И. Мотавина // Молодёжная наука и АПК: проблемы и перспективы. Материалы III Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и аспирантов.- Уфа: ФГОУ ВПО Башкирский ГАУ, 2009.- С. 54-56.
2. Рамеев, Т.В. Опыт оздоровления от лейкоза крупного рогатого скота в Хайбуллинском районе Республики Башкортостан /Т.В. Рамеев, А.Х. Таюпов, Л.И. Мотавина // Молодёжная наука и АПК: проблемы и перспективы. Материалы III Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и аспирантов.- Уфа: ФГОУ ВПО Башкирский ГАУ, 2009. - С. 56-58.
3. Рамеев, Т.В. Длительность персистирования в крови, напряженность иммунитета и титр колостральных антител в динамике у телят, получавших молозиво больных лейкозом коров-матерей /Т.В. Рамеев, .И. Мотавина, А.Х. Таюпов, И.С. Сахаутдинов // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии, 2010 - № 4. - С. 19-20.
4. Мотавина, Л.И. Динамика персистенции колостральных антител у телят, родившихся от инфицированных вирусом лейкоза коров / Л.И. Мотавина // Научное обеспечение агропромышленного производства (материалы Международной научно-практической конференции, 20-22 января 2010 г., г. Курс, ч. 2) - Курск, 2010.- С. 82-84.
5. Рамеев, Т.В. Передача вируса и распространение лейкоза крупного рогатого скота в хозяйствах Аургазинского района Республики Башкортостан /Т.В. Рамеев, Л.И. Мотавина, Р.Ф. Галеев//Научное обеспечение инновационного развития АПК. Материалы всероссийской научно-практической конференции в рамках XX Юбилейной специализированной выставки АгроКомплекс-2010 (2-4 марта 2010 г.). Часть II. - Уфа: Башкирский ГАУ, 2010. - С. 224-226.
6. Галеев, Р.Ф. О диагностике лейкоза крупного рогатого скота /Р.Ф. Галеев, Л.И. Мотавина//Материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 10-летию факультета пищевых технологий - Уфа: ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ, 2011. - С. 60-67.
7. Галеев, Р.Ф. Иммунобиологический статус потомства коров, инфицированных вирусом лейкоза/Р.Ф. Галеев, Л.И. Мотавина // Материалы Международной научно-практической конференции, посвященной 10-летию факультета пищевых технологий - Уфа: ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ, 2011. - С. 60-67.
8. Мотавина, Л.И. Современный, научно-обоснованный метод профилактики и оздоровления от лейкоза крупного рогатого скота хозяйств Аургазинского района Республики Башкортостан /Л.И. Мотавина // Инновации, экобезопасность, техника и технологии в производстве и переработке сельскохозяйственной продукции (материалы II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием, 24-25 ноября 2011 г.) - Уфа: ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ, 2011. - С. 87-88.
9. Мотавина, Л.И. Иммунобиологические реакции у телят, инфицированных внутриутробно и спонтанно /Л.И. Мотавина // Инновации, экобезопасность, техника и технологии в производстве и переработке сельскохозяйственной продукции (материалы II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием, 24-25 ноября 2011 г.) - Уфа: ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ, 2011.- С. 85-87.
10. Мотавина, Л.И. Иммунобиологический статус коров-матерей, больных лейкозом и телят инфицированных ВЛКРС, внутриутробно и спонтанно /Л.И. Мотавина, А.И. Иванов // Научное обеспечение устойчивого развития АПК: материалы Всероссийской научно-практической конференции (13-15 декабря 2011 г.). - Уфа: ФГБОУ ВПО Башкирский ГАУ, 2011. - С. 147-149.
11. Мотавина, Л.И. Особенности эпизоотического процесса лейкоза крупного рогатого скота в условиях Республики Башкортостан / Л.И. Мотавина, А.И. Иванов / Materiay VIII Midzynarodowej naukowi-praktycznej konferencji Strategiczne pytania wiatowej nauki - 2012 Volume 27. Rolnictwo. Weterynaria.: Przemyl. Nauka i studia - 96 str. (8 февраля 2012г.). - Польша, 2012.- С. 78-79.
Подписано в печать ннннн___ ______________ 2012 года. Формат 60 х 84 1/16. Бумага офсетная. Печать трафаретная с материала заказчика. Гарнитура Таймс. Усл. печ.л. - 1,0. Заказ № ______. Тираж 100 экз. |
Типография ФГБОУ ВПО Башкирского государственного аграрного университета. 450001, г. Уфа, ул. 50-летия Октября, 34. |