Авторефераты по всем темам  >>  Авторефераты по сельскому хозяйству  

На правах рукописи

Семенов Анатолий Сергеевич

ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЙ СКРИНИНГ

В РАЗЛИЧНЫХ ПОПУЛЯЦИЯХ
ГОЛШТИНИЗИРОВАННОГО СКОТА

06.02.07 - Разведение, селекция и генетика
сельскохозяйственных животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора сельскохозяйственных наук

Новосибирск  2010

Работа выполнена на кафедре кормления и разведения сельскохозяйственных животных ФГОУ ВПО Пермская государственная сельскохозяйственная академия имени академика Д.Н. Прянишникова

Научный консультант:        доктор сельскохозяйственных наук,

академик Россельхозакадемии

Эрнст Лев Константинович

Официальные оппоненты:        доктор биологических наук, профессор

                                Куликова Светлана Геннадьевна

                                доктор биологических наук, профессор

                                Жигачев Анатолий Иванович

                              доктор сельскохозяйственных наук, профессор

                              Погребняк Виктор Алексеевич

Ведущая организация:  Всероссийский научно-исследовательский институт 

животноводства Россельхозакадемии

Защита состоится л ___ _______________ 2010 г. в ______ час. на заседании диссертационного совета Д 220.048.03 в ФГОУ ВПО Новосибирский государственный аграрный университет по адресу: 630039, г. Новосибирск, ул. Добролюбова, 160.

Тел./ факс (383) 264 29 34, e-mail: norge@ ngs.ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО Новосибирский государственный аграрный университет.

Автореферат разослан л____ _____________ 2010 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета                                 Маренков В.Г.

                                                                               

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. В улучшении питания населения продуктами животноводства ведущее место принадлежит скотоводству.

Главной задачей в области молочного скотоводства является повышение продуктивности животных и улучшение качества продукции. Интенсификация отрасли предусматривает рост валового производства молока не за счет увеличения численности стада, а за счет повышения его генетического потенциала. Этого можно достигнуть при условии создания прочной кормовой базы, улучшения племенного дела, внедрения новейших методов обработки полученных данных с целью повышения их достоверности. Полученные при этом животные должны сочетать высокий потенциал продуктивности и хорошее качество продукции с приспособленностью к эксплуатации на промышленных комплексах.

В настоящее время проблемы работы в отрасли молочного скотоводства требуют внедрения в производство эффективных методов быстрого выведения высокопродуктивных стад. Наиболее простым методом повышения генетического потенциала может стать использование генофонда быков-лидеров импортных пород и их потомков (Прудов, 1986; Бич, Сакса, 1987; Солдатов, Белостоцкий, 1991; Логинов, 1996).

Мировой опыт показал, что наиболее высоким генетическим потенциалом продуктивности, специализированным молочным типом и лучшей приспособленностью к эксплуатации в условиях промышленной технологии производства молока обладает голштинская порода американской и канадской селекции.

В настоящее время известно, что селекция, направленная на повышение продуктивности, приводит к усилению интенсивности обменных процессов. Организм все более приближается к пределу физиологических возможностей, что обусловливает большую подверженность мутагенезу (Качура, 1982; Бакай, Перчихин, 1985; Жигачев, 1987; Кленовицкий и др., 1999).

В аспекте задач селекционно-племенной работы в животноводстве к профилактическим мерам надо относить разработку и применение контроля генетической полноценности племенных животных (Носач, Авакова, 1985) с целью выявления и выбраковки носителей генетического брака - особей, обладающих вредными мутациями и повышенной мутабильностью.

Наиболее реальным и дешевым путем регистрации последствий мутационных воздействий является исследование хромосомных и геномных изменений, то есть цитогенетическое исследование кариотипической изменчивости. Цитогенетика, вначале ставившая себе целью установление структуры нормального кариотипа, постепенно переносит свой основной интерес к изучению различных кариотипических аномалий, а также частоты их встречаемости. Именно цитогенетические методы, как отмечают многие исследователи, являются ведущими при изучении мутагенности различных факторов и практически единственными при изучении мутабильности в животноводстве (Bongzo, Basrur, 1976; Gustavsson, 1980;Бакай, Перчихин, 1985, Яковлев, 1985, Жигачев и др., 1989; Куликова, Петухов, 1989).

Таким образом, использование цитогенетических методов в селекции позволяет говорить о практической возможности массового и всестороннего контроля генетической (кариотипической) стабильности, которая, будучи характеристикой генетической полноценности племенных животных, сама в то же время находится под генетическим контролем и наследуется как количественный признак.

В Российской Федерации изучением скрещивания черно-пестрых коров с голштинскими быками заняты многие исследователи. Следует отметить, что эти изыскания проводятся преимущественно в отдельных племенных стадах, без учета решения проблемы контроля генетической полноценности животных.

Основным подходом для решения вышеуказанных проблем следует считать генетический мониторинг (Яковлев, 1985; Жигачев, 1987), т.е. контроль изменения генетических характеристик отдельных особей и популяции в целом.

Исходя из того, что в организме животных зрелые клетки красной крови отделены от камбиальной ткани и доступны исследователю без вмешательства в кроветворные органы, представляется обоснованным их использование в качестве объекта исследования с целью оценки и прогнозирования физиологического состояния организма животного (Терсков, Гительзон, 1957; Рябов, Шостка, 1973; Sankari, Lindstrom, 1986; Новиков и др., 1999).

Таким образом, тематику наших исследований следует считать актуальной в теоретическом и практическом отношениях.

Исследования проводились по плану НИР Пермской государственной сельскохозяйственной академии имени академика Д.Н. Прянишникова.

Целью настоящей работы явилось определение перспективных путей использования цитогенетических тестов в селекции и обоснование методов оценки и контроля динамики генетического груза; изучение генетических параметров воспроизводительной способности коров и разработка системы генетического мониторинга голштинизированного скота в разных регионах России.

В связи с этим были поставлены задачи:

1. Изучить стабильность генома в популяциях голштинизированного скота разных регионов России.

2. Выявить связь кариотипической изменчивости с молочной продуктивностью у коров разных генотипов.

3. Определить корреляцию кариотипической изменчивости с воспроизводительной функцией крупного рогатого скота.

4. Провести ретроспективный анализ стабильности генома у коров различных генотипов в разных регионах России.

5. Установить некоторые генетические параметры воспроизводительной способности быков, выявить межлинейные различия и перспективы селекции в направлении улучшения рассматриваемых показателей.

6. Определить некоторые показатели спермопродукции быков голштинской породы.

7. Изучить кислотную и суммарную резистентность эритроцитов и распределение их по объему у коров с разным уровнем числовых и структурных нарушений хромосом.

8. Дать рекомендации по использованию генетического скрининга при селекции голштинизированного скота.

Научная новизна. На основе генетического скрининга голштинизированного скота в разных регионах России впервые охарактеризован кариотипический статус и функциональное состояние эритроцитов у коров разных генотипов, с различным уровнем молочной продуктивности и воспроизводительных качеств.

Разработан и зарегистрирован в качестве изобретения способ индивидуального отбора сельскохозяйственных животных по уровню неконституциональной кариотипической изменчивости, отражающей степень устойчивости генетического аппарата клеток к воздействию повреждающих факторов.

Впервые проведен анализ связи воспроизводительной способности крупного рогатого скота голштинской породы по целому ряду отдельных показателей. Выявлены корреляции показателей воспроизводительной способности с молочной продуктивностью, соматической хромосомной нестабильностью и состоянием эритроцитов.

Установлено, что у низкопродуктивных и высокопродуктивных коров основная часть животных сосредоточена в группах с высоким и средним генетическим риском, тогда как животные со средней продуктивностью более часто встречаются среди коров с низким и средним уровнем генетического риска.

Выявлена ассоциация высокой соматической нестабильности с повышенной частотой нарушения воспроизводительной функции животных.

Показано, что высокая соматическая хромосомная нестабильность ведет к нарушениям воспроизводительных функций организма.

У животных с высоким уровнем аберраций и анеуплоидии снижаются некоторые показатели естественной резистентности.

Практическая значимость работы и реализация результатов исследований. Результаты исследований имеют принципиальное значение:

Ц в совершенствовании основ анализа имеющихся племенных ресурсов отечественного голштинизированного скота и методов оценки племенных качеств животных;

Ц в определении параметров отбора животных по воспроизводительным качествам с учетом их кариологического и физиологического статуса;

Ц в обосновании необходимости и практической значимости контроля генетической полноценности животных.

Низкие коэффициенты наследуемости и повторяемости показателей воспроизводительной способности маточного поголовья голштинизированного скота свидетельствуют о неэффективности массовой селекции по этим признакам. Однако отбор быков-производителей с учетом показателей воспроизводства, как собственных, так и их дочерей, будет способствовать улучшению показателей воспроизводства в целом по стадам.

Материалы научных исследований реализованы при разработке и подготовке:

Ц учебно-методических разработок по кариотипическим исследованиям сельскохозяйственных и лабораторных животных;

Ц рекомендаций по племенной работе в животноводстве;

Ц при написании перспективного плана племенной работы со стадом черно-пестрого скота ряда хозяйств Пермского края и Московской области;

Ц при разработке программы селекционно-племенной работы с основными видами сельскохозяйственных животных и птицы Пермской области на период 2006-2010 гг.

Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе ряда аграрных и других образовательных учреждений высшего профессионального образования Российской Федерации.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на научно-практических конференциях МГАВМиБ им. К.И.аСкрябина (1990, 1991, 1992, 1996, 2002, 2004, 2005, 2007) и ПГСХА им. Д.Н.аПрянишникова (1988, 1990, 1991, 1994, 1998, 2002, 2003, 2005, 2007, 2008, 2009), всероссийских совещаниях по совершенствованию молочного скота в Российской Федерации (г. Москва, 1988, 1992), на юбилейной научно-практической конференции, посвященной 80-летию МВА, Всероссийском совещании по координации селекционно-племенной работы в породах сельскохозяйственных животных (г. Москва, 2001), на заседаниях координационно-методического Совета по племенной работе с черно-пестрым скотом областей и республик Урала (1989, 1992, 1997, 2002, 2007, 2009).

Публикация результатов исследований. По результатам исследований опубликовано всего 52 работы, в том числе книг - 3; научных статей - 26, из них 1 авторское свидетельство и 8 статей в изданиях, рекомендованных ВАК (журналы Доклады ВАСХНИЛ, Сельскохозяйственная биология, Международный сельскохозяйственный журнал, Естественные науки, Российский ветеринарный журнал).

Основные положения, выносимые на защиту:

Ц животные с высоким уровнем соматических хромосомных аберраций чаще имеют нарушения воспроизводительных качеств;

Ц генофонд голштинских линий оказал влияние на увеличение молочной продуктивности при создании уральского и московского типов черно-пестрого скота;

Ц ассоциация кислотной резистентности эритроцитов с соматической хромосомной нестабильностью является одним из показателей естественной резистентности. Животные с высоким уровнем хромосомной нестабильности имеют больший процент пониженностойких эритроцитов;

Ц животные московского типа черно-пестрой породы отличаются от коров уральского типа по некоторым показателям кариотипической изменчивости, а именно по относительно большей частоте полиплоидии, аберраций и ассоциаций хромосом. В то же время среди коров уральского типа выше процент гипер- и гипоплоидии.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 222 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материала и методик исследований, результатов собственных исследований, выводов, предложений производству, списка используемой литературы. Работа иллюстрирована 50 таблицами и 11 рисунками.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

В данной главе рассмотрены вопросы использования голштинской породы при совершенствовании черно-пестрого скота; морфофункционального состояния эритроцитов коров с разным уровнем кариотипической изменчивости; освещены проблемы спонтанной хромосомной мутабильности в связи продуктивными и воспроизводительными качествами крупного рогатого скота.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Материал исследований

Материалом для исследования послужили коровы московского и уральского типачерно-пестрой породы с разной долей кровности по голштинской (улучшающей) породе, принадлежащие хозяйствам двух регионов России: АОЗТ Вохринка и ПЗ Заря Подмосковья Московской области и ПТФ Комсомольская и СХПК Труженик Пермского края, используемые в период с 1993 по 2003 гг. включительно. Всего в исследование было вовлечено 727 голов крупного рогатого скота, изучено 116320 препаратов метафазных хромосом.

2.2. Методы исследований

Пробы крови для анализов брали перед утренним кормлением, стабилизировали гепарином из расчета 6-10 ед./мл. Транспортировалась кровь к месту исследований в термосумке со льдом.

Кариотипический анализ. Препараты хромосом готовили по общепринятым методикам.

Кислотную резистентность эритроцитов определяли методом химических эритрограмм, который является одним из объективных методов дифференцированного анализа популяции циркулирующих красных кровяных клеток.

Общая схема исследований включала следующие методы: цитогенетический, популяционно-статистический, генеалогический, феногенетический, зоотехнический и др.

В процессе исследований учитывали следующие показатели при кариотипическом анализе: морфология хромосом, анеуплоидия (гиперплоидия и гипоплоидия; полиплоидия: 3n, 4n и т.п.); пространственное расположение хромосом (ассоциации акроцентриков; сближение гомологичных хромосом, парное расположение половых хромосом).

Статистическая обработка полученных данных проводилась общепринятыми методами вариационного анализа с использованием стандартных пакетов для ПК (Excel, Stаtistica).

Работа выполнена на материалах племенного учета разных региональных зон: первый регион - Московская область (московский тип), второй регион - Пермский край (уральский тип).

Анализ воспроизводительной способности маточного поголовья скота проводился по следующим показателям: продолжительность межотельного периода, сервис-периода и стельности; процент оплодотворяемости после первого осеменения; число осеменений на одно оплодотворение; частота многоплодных отелов; частота мертворождений и абортов. Изучали средние показатели воспроизводительной способности, их изменчивость, наследуемость, повторяемость, некоторые корреляции.

Проведена оценка генотипа быков-производителей по удою, проценту жира и молочному жиру их дочерей за первую лактацию.

Проведены исследования по изучению показателей спермопродукции быков голштинской породы, принадлежащих ФГУП Пермское по племенной работе. Определяли объем эякулятов, густоту спермы, активность спермиев, их концентрацию, осмотическую резистентность и процент патологических форм спермиев по методике ВИЖа. Изучали также способность спермы сохранять активность при хранении в замороженном состоянии.

  1. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. СПОНТАННАЯ КАРИОТИПИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ

У КОРОВ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ИХ ПРОИСХОЖДЕНИЯ

В последнее время, в результате антропогенного воздействия на природную среду, заметно усилилось действие спонтанного мутагенеза, который наносит ущерб здоровью человека и животных, заметно осложняет увеличение производства продукции животноводства. Стал необходимым строгий и точный учет спонтанного мутагенеза не только в популяциях человека, но и в популяциях сельскохозяйственных животных. Без этого невозможно добиться повышения приспособленности животных к новым внешним условиям, повышения сопротивляемости их действию мутагенных факторов.

Наиболее перспективным для этого является цитогенетический скрининг, в связи с достаточной разработанностью технических приемов и методических подходов микроскопического анализа кариотипов основных видов сельскохозяйственных животных. По сравнению с генными мутациями, геномные и хромосомные мутации, диагносцируемые в виде кариотипических аномалий, встречаются на порядок чаще и могут быть выявлены с меньшей затратой времени, сил и средств.

Случаи конституциональной кариотипической изменчивости обнаруживаются достаточно редко. В то же время у любого животного с нормальным кариотипом и фенотипом можно выявить клетки с различными аномалиями числа и структуры хромосом. Количество таких клеток с нарушениями у отдельных особей колеблется в довольно широких пределах.

В связи с тем, что такие аномалии числа и структуры хромосом различны у одного и того же животного, нет оснований говорить об общем происхождении таких клеток. Такая кариотипическая изменчивость называется неконституциональной. Ее источником является спонтанный прижизненный мутагенез в соматических тканях. Смысл изучения неконституциональной кариотипической изменчивости хромосом в соматических тканях состоит, во-первых, в контроле спонтанного мутагенеза, которому подвергаются сами изучаемые животные. Это дает возможность выявлять и освобождаться от носителей высокого уровня хромосомных нарушений. Во-вторых, существует определенное соответствие хода мутационного процесса в генеративной ткани и в тканях, доступных для прижизненного цитологического анализа (клетки системы крови). Это позволяет проводить прогностический анализ генетической полноценности потомства, которое может быть получено от исследуемых особей.

Из многих типов и форм аномалий, образующих спонтанную кариотипическую изменчивость, можно выделить следующие: числовые или геномные (гаплоидия, полиплоидия, анеуплоидия) и структурные или хромосомные (пробелы, разрывы, фрагменты, делеции, транслокации, инверсии, инсерции).

Все эти составляющие со значительной долей вероятности способствуют образованию дефектных гамет.

3.1.1. Анеуплоидия

Анализ спонтанной кариотипической нестабильности мы начали с изучения анеуплоидии в различных популяциях крупного рогатого скота разных регионов.

Анеуплоидия относится к довольно распространенному типу кариотипических изменений. Она образуется вследствие нерасхождения хромосом или хроматид во время митоза или мейоза, а также элиминации поврежденных хромосом. Качественными производными этих нарушений являются образовавшиеся гипоплоидные и гиперплоидные клетки. Данные литературы свидетельствуют, что частота образования анеуплоидных клеток, по-видимому, находится под генетическим контролем. Повышенная частота анеуплоидии имеет связь с ухудшением воспроизводительных функций и с различными заболеваниями у животных уральского и московского типов.

В 1993 г. в ПТФ Комсомольская использовались коровы, полученные от быков, принадлежащих к ведущим заводским линиям голштинской породы Вис Бэк Айдиал 1013415 и Силлинг Трайджун Рокит 252803.

Кариотипический анализ показал, что гиперплоидные клетки в генофонде составляли незначительную часть общей анеуплоидии (0,45-0,82%), в то время как доля гипоплоидных клеток достигала 13,04-15,59%. В итоге анеуплоидные клетки встречались с частотой от 13,72 до 16,04%. Следует отметить, что достоверных различий по уровню гипоплоидии и суммарной анеуплоидии не отмечено, в то время как показатели гиперплоидии между потомками различных быков и линий различались достоверно. Так, например, в линии Вис Бэк Айдиал 1013415 дочери быка Малыша 121 превосходили (Р>0,999) дочерей Бизона 119 по частоте гиперплоидных клеток (0,82% против 0,45%).

Отмечены достоверные различия в уровне гиперплоидии и между линиями. Так, у коров линии Вис Бэк Айдиал 1013415, частота гиперплоидных клеток составляла 0,64%, что достоверно выше, при Р>0,99, чем у коров линии Силлинг Трайджун Рокит 252803, у которых средний уровень гиперплоидии составил 0,50%.

В 1998 г. в ПТФ Комсомольская лактировали дочери быков Старбукс 278 и Магистр 262 линии Вис Бэк Айдиал 1013415 и Милый 06286 линии Силлинг Трайджун Рокит 252803.

Было установлено, что частота гиперплоидных клеток у коров линии  Вис Бэк Айдиал 1013415 превышает этот показатель у коров линии Силлинг Трайджун Рокит 252803 (Р>0,99).

Результаты исследования анеуплоидии в этом же хозяйстве в 2003 г. показали, что различия по частоте гиперплоидии были не существенными и различались только между коровами линий Вис Бэк Айдиал 1013415 и коровами линии Рефлекшн Соверинг 198998 (Р>0,999).

Цитогенетический анализ коров в СХПК Труженик Пермского края обнаружил аналогичную картину. В 1993 г. в СХПК Труженик лактировали потомки быков Бард 172 и Леопольд 902, принадлежащих линии Монтвик Чифтейна 95679. Оба быка имели одинаковый процент гипоплоидных клеток, в то время как по проценту гиперплоидных клеток бык Бард 172 значительно превосходил (0,64 против 0,47%) Леопольда 902.

В 1998 г. в этом хозяйстве лактировали дочери быков Вернера 8186 и Горца 32 линии Вис Бэк Айдиал 1013415 и быка Илота 392 линии Рефлекшн Соверинг 198998. По уровню анеуплоидии у быков обеих линий достоверных различий не обнаружено. Как и в других случаях наблюдалось значительное превышение числа гипоплоидных клеток над гиперплоидными.

В этом хозяйстве в 2003 г. у дочерей быка Магната 1736 частота встречаемости гиперплоидных клеток (0,44%) была значительно ниже, чем у дочерей Венца 1672 линии Монтвик Чифтейна 95679 и быка Дюйма 625 линии Вис Бэк Айдиал 1013415 (0,7%).

При анализе анеуплоидии в АОЗТ Вохринка в 1993 г. мы не обнаружили достоверных различий по частоте анеуплоидных клеток. В этот год в хозяйстве лактировали дочери быка Сон 191, принадлежащего к линии Монтвик Чифтейна 95679, и быка Мираж 685 линии Силлинг Трайджун Рокит 252803. Процент гиперплоидных клеток у них составил 0,61 и 0,63, а гипоплоидных 14,66 и 14,14%, соответственно.

При анализе анеуплоидии в 1998 г. обнаружены различия по частоте анеуплоидных клеток у дочерей быка Астронавта 1458744 линии Вис Бэк Айдиал 1013415, Апаша 407 линии Монтвик Чифтейна 95679 и быка Эйви 205 линии Рефлекшн Соверинг 198998. Анализ показал, что у дочерей Астронавта 1458744 частота гиперплоидных клеток составила 0,72%, в то время как у дочерей Апаша 407 она была равна 0,61%, у дочерей Эйви 205 - 0,57%.

По частоте гипоплоидных клеток дочери Эйви 205 достоверно превышали этот показатель у дочерей Астронавта 1458744, (15,8 против 12,2%). Это указывает на необходимость при анализе анеуплоидии учитывать частоту гиперплоидных клеток и проводить расчет истинной анеуплоидии.

В 2003 г. в АОЗТ Вохринка лактировали дочери быка Снега 481555 линии Рефлекшн Соверинг 198998, а также Клерка 244 и Шейка 632 линии Монтвик Чифтейна 95679. Наименьшая частота гиперплоидных клеток была у дочерей Клерка 244 (0,32%). У дочерей остальных быков этот показатель составил от 0,45 до 0,59%.

При анализе анеуплоидии в племзаводе Заря Подмосковья в 1993 г. было обнаружено, что наименьший процент гиперплоидных клеток (всего 0,22%) был у дочерей Пикланда 39864 линии Монтвик Чифтейна 95679. В то же время у дочерей Жордана 400530 этой же линии процент гиперплоидии был в два раза выше (0,46%). Аналогичная картина наблюдалась и среди дочерей быков линии Рефлекшн Соверинг 198998. Так, у дочерей Криптона 1884253 процент гиперплоидных клеток был равен 0,69%, а у дочерей Ротейшн 928291 только 0,37%. Это указывает на то, что контроль кариотипической нестабильности необходимо проводить у всех быков, в том числе и принадлежащих к одной линии.

В 1998 г. в племзаводе Заря Подмосковья лактировали дочери быка Амадея 15 линии Пабст Говернор 882933-9274, у которых был отмечен самый низкий показатель гиперплоидии, всего 0,19%. В то же время у дочерей Дебюта 98 линии Силлинг Трайджун Рокит 252803 этот показатель составил 0,7%.

Такой результат мог указывать на то, что у дочерей быков линии Пабст Говернор 882933-9274 очень редко всречаются гиперплоидные клетки. Однако при кариотипировании дочерей быков Марио 21 и Нарзана 24 линии Пабст Говернор 882933-9274 в 2003 г. мы обнаружили, что дочери Марио 21 достоверно превосходили дочерей Нарзана 24 по уровню гиперплоидии (0,77 против 0,33%). Дочери Шкипера 394946 линии Рефлекшн Соверинг 198998 занимали промежуточное положение. У них частота гиперплоидных клеток составила 0,52%. Таким образом и здесь мы видим достоверные различия по частоте анеуплоидных клеток среди представителей одной и той же линии.

Превышение частоты гипоплоидных клеток над частотой гиперплоидных трудно объяснить только естественными причинами.

Большая часть гипоплоидных клеток, вероятно, имеет артефактное происхождение и связана с техническими приемами при обработке культур и приготовлением препаратов хромосом.

Действительно, манипуляции, применяемые при приготовлении препаратов хромосом, например, центрифугирование и особенно гипотонизация, могут повышать частоту гипоплоидных клеток. Интенсивное разбрасывание по предметному стеклу клеток, предварительно набухших в гипотонической среде, также может приводить к утере части хромосомного набора. Иногда при микроскопировании некоторые из таких хромосом обнаруживаются недалеко от основной метафазной клетки. Однако установить принадлежность отсутствующих или дополнительных хромосом к какой-либо паре затруднительно вследствие ненадежности их идентификации.

Потеря хромосом может иметь и другую природу, как результат элиминации поврежденных хромосом.

Напротив, в случае гиперплоидных клеток, эти соображения вряд ли применимы, поскольку трудно предположить, чтобы гиперплоидия могла возникнуть за счет механического проникновения добавочных хромосом, утерянных из других клеток. В связи с этим необходимо подчеркнуть, что основным механизмом образования анеуплоидии является нерасхождение хромосом в мейозе или митозе. Тогда число возникших вследствие этого гипоплоидных клеток должно быть равным числу гиперплоидных, так как, если одна дочерняя клетка получила лишние хромосомы, то другая, естественно, останется с нехваткой этих хромосом. Следовательно, за критерий истинной анеуплоидии можно принять число гиперплоидных клеток, умноженное на два.

3.1.2. Полиплоидия

Как генетический феномен, полиплоидия состоит в кратном увеличении гаплоидного числа хромосом в ядрах клеток. Изучено влияние генотипа быков на частоту полиплоидии у дочерей.

В популяции уральского типа черно-пестрого скота (ПТФ Комсомольская) в 1993 г. средняя частота полиплоидии составила 0,44%. Наибольший процент полиплоидных клеток был у дочерей Мрамора 741 линии Силинг Трайджун Рокит 252803 (0,55%) и Малыша 121 линии Вис Бэк Айдиал 1013415 (0,51%). Наименьшее число полиплоидных клеток (0,25%) было у дочерей Бизона 119 линии Вис Бэк Айдиал 1013415 (Р>0,99).

В 1998 г. частота полиплоидных клеток у дочерей Старбрукса 278 линии Вис Бэк Айдиал 1013415 (0,74%) была в 2,6 раза выше, чем у дочерей Милого 06286 (0,29%) линии Силинг Трайджун Рокит 252803.

И в 2003 г. среди дочерей быков четырех линий наблюдалась вариабельность по частоте полиплоидных клеток от 0,27% у дочерей Метила 1106 до 0,52% у дочерей Федула 538.

При анализе полиплоидии в СХПК Труженик было установлено, что в 1993 г. у дочерей быка Барда 172 полиплоидия составила в среднем 0,41%, в то время как у дочерей Леопольда этот показатель был равен 0,74 %.

В 1998 г. частота полиплоидии среди дочерей Вернера 8186, Горца 32 и Илота 392 была в пределах от 0,5 до 0,65%.

Более заметные колебания отмечались в 2003 г. Здесь достоверные различия были выявлены при исследовании полиплоидии у дочерей Венца 1672 (0,71%) и дочерей Магната 1736 - 0,24%.

Исследование частоты полиплоидии в популяции черно-пестрого скота московского типа (АОЗТ Вохринка и ПЗ Заря Подмосковья) обнаружило различия в частоте полиплоидии лишь в первом хозяйстве в 1998 г. между дочерьми Эйви 205, у которых полиплоидия составила 0,81%, и дочерьми Апаша 407, у которых полиплоидные клетки встречались с частотой 0,44%.

Свойства полиплоидных клеток, исследованные в последние годы, таковы, что распространенное ранее представление о полиплоидии, как форме клеточной дегенерации, пересмотрено. Напротив, есть все основания считать, что появление полиплоидных клеток связано с восстановительными процессами, регенерацией, функциональной активностью органов и тканей.

Таким образом, в исследованных популяциях двух типов обнаружены одни и те же закономерности - влияние генотипа производителя на частоту полиплоидии у потомства.

3.1.3. Аберрации хромосом

Помимо вышеперечисленных спонтанных хромосомных нарушений, нередко в кариотипе животных обнаруживаются такие аномалии, как хроматидные и изохроматидные пробелы, разрывы, делеции и образующиеся в результате этого различные фрагменты генетического материала.

Установлено, что селекционные мероприятия способствуют элиминации особей с повышенной мутабильностью. Авторами показано, что в результате селекции у быков-производителей частота клеток со структурными аберрациями составила 1%, у племенных коров - 12,2%, а у выбракованных животных доля таких клеток достигла 41,9% (Качура, 1982; Жигачев, 1987, 1989; Бакай и др., 1997, 2004 и др.).

Анализ метафазных хромосом с целью выявления спонтанных структурных аберраций мы проводили под иммерсией при большом увеличении и на микрофотографиях. При анализе найдены и регистрировались в качестве аберраций пробелы, хроматидные и изохроматидные разрывы, фрагменты, делеции.

В большинстве случаев в клетках крови животных наблюдались разрывы и пробелы аутосом, а также выявлены подобные аберрации Х-хромосом. Лишь в отдельных случаях было обнаружено наличие множественных разрывов и фрагментов хромосом.

Результаты анализа частоты аберраций хромосом у коров ПТФ Комсомольская показали, что в 1993 г. в хозяйстве использовались быки 2-х линий: Вис Бэк Айдиал 1013415 и Силлинг Трайджун Рокит 252803. Частота аберраций хромосом у дочерей быков Малыша 121 и Бизона 119 (линия Вис Бэк Айдиал 1013415) составила в среднем 3,85%, (3,38 и 4,43%, соответственно).

У дочерей быка Мрамора 741 линии Силлинг Трайджун Рокит 252803 частота аберраций хромосом достигла 6,0%. Близкие величины были получены в аналогичных исследованиях А.И. Жигачева (1989) и др.

В 1998 г. в этом хозяйстве использовались дочери быков Старбукса 278 и Магистра 262 линии Вис Бэк Айдиала 1013415 и дочери Милого 06286 линии Силинг Трайджун Рокит 252803. Частота клеток с аберрациями хромосом у дочерей всех этих быков была в пределах от 5,79 до 7,06%.

В 2003 г. в ПТФ Комсомольская исследовались дочери быков Груза 1096 линии Вис Бэк Айдиала 1013415, Метила 1106 линии Силинг Трайджун Рокита 252803, Банкира 551 Монтвик Чифтейна 95679 и Федула линии Рефлекшн Соверинга 198998. Наибольший процент клеток с аберрациями был обнаружен у дочерей Метила (7,64%) и Федула (6,97%). У дочерей остальных быков частота аберраций хромосом была в пределах 5,35Ц5,60%. Проведенный анализ указывает на то, что частота хромосомных аберраций у коров больше связана с влиянием отца, чем с их линейной принадлежностью.

В СХПК Труженик в 1993 г. исследовали дочерей Барда 172 и Леопольда 902 линии Монтвик Чифтейна 95679. Средняя частота клеток с аберрациями у них составила 6,04%.

Аналогичная картина наблюдалась и в 1998 г. В этот год в хозяйстве исследовались дочери быков Вернера 8186 и Горца 32 линии Вис Бэк Айдиал 1013415 и Илота 392 линии Рефлекшн Соверинг 198998. Частота аберраций хромосом была в пределах от 4,56 до 7,97%.

Анализ частоты аберраций хромосом в АОЗТ Вохринка показал, что во все периоды исследований частота аберраций хромосом была на среднем уровне и составляла 5,7Ц7,28%.

Исследование хромосом в ПЗ Заря Подмосковья показало, что средняя частота аберраций хромосом у коров линий Рефлекшн Соверинг 198998 и Вис Айдиал 933122 была в пределах среднего уровня - 4,31-5,42%. Уровень аберраций хромосом у дочерей Пикланда 39864 линии Монтвик Чифтейна 95679 был выше в 1993 г. (8,73%, Р>0,999). В 1998 г. увеличение частоты аберраций хромосом наблюдалось у дочерей Амадея 15 линии П. Говернора 882933-9274 - 6,08%.

В 2003 г. в ПЗ Заря Подмосковья у дочерей Марио 21 и Нарзана 24 линии П. Говернора 882933-9274, а также Шкипера 394946 линии Рефлкшн Соверинг 198998 достоверных различий по частоте клеток с аберрациями хромосом обнаружено не было.

*  *  *

Итак, рассмотрев результаты анализа хромосомной нестабильности у животных отдельных хозяйств двух регионов, считаем целесообразным привести данные о средних значениях показателей кариотипической изменчивости по регионам (табл. 1) за весь период исследований.

Таблица 1

Средние показатели кариотипической изменчивости в популяциях голштинизированного скота разных регионов (1993-2003 гг.)

Число голов

Гиперплоидия

Гипоплоидия

Полиплоидия

Аберрации хромосом

Ассоциации хромосом

Московская область

341

0,540,004

13,810,018

0,590,005

5,930,013

73,42,37

Пермский край

359

0,610,007

14,800,019

0,500,004

5,800,012

72,92,34

Из данных таблицы видно, что в популяции Московского типа черно-пестрой породы установлено некоторое увеличение процента полиплоидии, аберраций и ассоциаций хромосом по сравнению с популяцией Уральского типа черно-пестрого скота. При этом в последней выше процент гипер- и гипоплоидии. Сумма анеуплоидии у животных Пермского края составила 15,41%, что на 1,06% выше данного показателя в популяции черно-пестрого скота московского региона.

3.1.5. Кислотная резистентность эритроцитов коров вазависимостиаотакариотипическогоастатуса

Исходя из того, что в организме животных зрелые клетки красной крови отделены от камбиальной ткани и доступны исследователю без вмешательства в кроветворные органы, представляется обоснованным их использование в качестве объекта исследования с целью оценки и прогнозирования физиологического состояния организма животного. Показано, что мембраны эритроцитов способны в общей форме отражать особенности функции мембран некоторых тканей организма.

В этой связи представляет интерес изучение связи кариотипической нестабильности с качеством эритропоэза.

Исследование эритроцитов проводили в АОЗТ Вохринка и ПТФ Комсомольская.

Для анализа кислотной резистентности эритроцитов животные были распределены на две группы в зависимости от уровня кариотипической нестабильности. В группу с низким уровнем анеуплоидии вошли животные, у которых частота анеуплоидных клеток была ниже 14%. В группу с высоким уровнем анеуплоидии вошли животные с частотой анеуплоидии более 16%. На рис. 1 представлена эритрограмма коров с высоким (более 16%) и низким (до 14%) уровнем анеуполиплоидных клеток. В эритрограммах коров с высоким и низким уровнем анеуплоидии нами обнаружены существенные различия.

Так, эритрограммы коров с низким уровнем анеуплоидии сдвинуты вправо с одновременным увеличением максимума и снижением левого крыла, что указывает на наличие в крови большого количества эритроцитов повышенной стойкости.

У коров с низким уровнем анеуплоидии в правом крыле эритрограммы, точка окончания гемолиза и точка максимума сдвинуты вправо на 1,0 мин. по сравнению с аналогичными показателями эритрограммы коров с высоким уровнем анеуплоидии. Ширина интервала стойкости при этом также увеличилась у коров с низким уровнем анеуплоидии на 1,0 мин. Примечательно, что у этой группы животных регистрируются два дополнительных максимума в левом крыле эритрограммы на второй и третьей минутах. Перечисленные выше отличия указывают на наличие в крови коров с низким уровнем анеуплоидии групп эритроцитов разной резистентности, большего количества повышенностойких, что расширяет интервал их стойкости.

Результаты распределения популяций циркулирующих эритроцитов по группам стойкости указывают на достоверное увеличение популяций повышенностойких красных кровяных клеток до 62,9% и снижение среднестойких и пониженностойких до 23,5 и 13,6% соответственно. У коров с высоким уровнем анеуплоидии наоборот количество среднестойких клеток составило 67,1% и повышенностойких клеток 17,6%, табл. 2. У коров с низким уровнем анеуплодии основную массу составляют повышенностойкие эритроциты, вызывающие увеличение площади максимума эритрограммы.

Анализ показателей резистентности эритроцитов коров с разным уровнем анеуплоидии позволяет сделать вывод, что увеличение суммарной резистентности красных кровяных клеток происходит за счет увеличения числа повышенностойких и одновременном снижении среднестойких. Количество пониженностойких эритроцитов в процентном отношении в обеих группах коров практически одинаково, что согласуется с формой эритрограмм.

Таблица 2

Показатели кислотной резистентности эритроцитов коров с высоким и низким уровнем анеуплоидии в ПТФ Комсомольская

Группа эритроцитов

Уровень анеуплоидии

низкий, до 14%

высокий, более 16%

Пониженностойкие, %

13,61,8

15,31,9

Среднестойкие, %

23,51,4

67,12,8

Повышенностойкие, %

62,93,1

17,62,3

Первый максимум у коров с высоким уровнем анеуплоидии приходится на отметку 3 мин., у коров с низким уровнем анеуплоидии на 1,5 мин., т.е. сдвинут влево на 1,5 мин. Однако на 3-й мин. у них наблюдается второй максимум. Второй максимум эритрограмм у коров с высоким уровнем анеуплоидии происходит на 4-й мин. У коров с низким уровнем анеуплоидии на 5-й мин. наблюдается третий максимум, и точка окончания гемолиза приходится на 6-ю мин., что увеличивает площадь максимума эритрограммы.

Результаты распределения популяций циркулирующих эритроцитов по группам стойкости у коров с низким уровнем анеуплодии указывают на достоверное увеличение популяций повышенностойких красных кровяных клеток до 61,5% и снижение среднестойких и пониженностойких до 24,4% и 14,1%, соответственно. У коров с высоким уровнем анеуплоидии наоборот количество пониженностойких клеток составило 16,2%, среднестойких - 68,7% и повышенностойких - 15,1%, табл. 3.

Аналогичные результаты получены и при анализе эритрограмм в стаде АОЗТ Вохринка, рис. 2.

Таблица 3

Показатели кислотной резистентности эритроцитов коров с высоким и низким уровнем анеуплоидии в АОЗТ Вохринка

Группа эритроцитов

Уровень анеуплоидии

низкий,

до 14%

высокий,

более 16%

Пониженностойкие, %

14,11,7

16,21,8

Среднестойкие, %

24,41,5

68,72,4

Повышенностойкие, %

61,53,1

15,12,3

Таким образом, можно сделать вывод, что коровы с низким уровнем кислотной резистентности эритроцитов обладают высоким уровнем частоты встречаемости анеуплоидных клеток.

Мы также составили эритрограммы коров, различающихся по частоте клеток с аберрациями хромосом. Для этого было выделено по две группы животных с низким (до 5%) и высоким (от 7%) уровнем аберраций хромосом.

Эритрограммы коров ПТФ Комсомольская представлена на рис. 3. Следует, отметить, что эритрограммы коров с разным уровнем аберраций хромосом не имеют таких больших различий, как у коров с разным уровнем анеуплоидии.

евое крыло эритрограммы коров с низким уровнем аберраций хромосом расположено ниже, чем у коров с высоким уровнем аберраций, что указывает на наличие у последних большего количества пониженностойких и среднестойких эритроцитов. Примечательно, что левое крыло эритрограмм обеих групп животных имеет дополнительные максимумы, которые значительно уступают основным максимумам по величине и выраженности. Наивысшая точка основного максимума у коров с низким уровнем аберраций хромосом находится на отметке 5-й мин., у коров с высоким уровнем аберраций хромосом - на отметке 4,5 мин. При этом правое крыло эритрограммы расположено выше, чем у коров с высоким уровнем аберраций, что свидетельствует о присутствии в крови животных с низким уровнем аберраций хромосом большего количества повышенностойких эритроцитов.

Распределение популяций эритроцитов по группам стойкости в ПТФ Комсомольская представлено в табл. 4. Анализ данных табл. 4 показал, что у коров с низким уровнем аберраций хромосом 72,1% эритроцитов относится к группе повышенностойких, 21,6% - к группе среднестойких и 6,3% - к группе пониженностойких. У коров с высоким уровнем аберраций хромосом пониженностоких эритроцитов 10,2%, среднестойких - 27,4% и повышенностойких - 62,4%.

Таблица 4

Показатели кислотной резистентности эритроцитов коров с высоким и низким уровнем аберраций хромосом в ПТФ Комсомольская

Группа эритроцитов

Уровень аберраций хромосом

низкий,

до 5%

высокий,

более 7%

Пониженностойкие, %

6,30,7

10,21,7

Среднестойкие, %

21,62,1

27,42,8

Повышенностойкие, %

72,13,0

62,43,4

Анализ эритограмм в АОЗТ Вохринка показал следующую картину, рис. 4. Основные различия обнаружены в правом крыле эритрограмм. Основной максимум у коров с высоким уровнем аберраций хромосом приходится на отметку 4,5 мин. и окончание гемолиза - на 5,5 мин. У коров с низким уровнем аберраций хромосом основной максимум сдвинут вправо на 0,5 мин. и окончание гемолиза приходит на отметку 6,0 мин.

Показатели кислотной резистентности эритроцитов представлены в табл. 5.

Таблица 5

Показатели кислотной резистентности эритроцитов коров с высоким и низким уровнем аберраций хромосом в АОЗТ Вохринка

Группа эритроцитов

Уровень аберраций хромосом

низкий, до 5%

высокий, более 7%

Пониженностойкие, %

10,31,4

12,11,2

Среднестойкие, %

22,12,3

48,93,0

Повышенностойкие, %

67,63,1

39,02,7

Анализ данных табл. 5 показал, что у коров с низким уровнем аберраций хромосом наибольший процент повышенностойких эритроцитов и наименьший процент пониженностойких. У коров с высоким уровнем аберраций хромосом, наоборот, меньше повышенностойких эритроцитов (39,0 против 67,6%) и больше пониженностойких (12,1 против 10,3%).

Таким образом, изучив кислотную резистентность эритроцитов у коров в связи с частотой анеуплоидии и аберраций хромосом, можно сделать вывод, что данные типы кариотипической нестабильности чаще встречаются у животных с пониженной кислотной резистентностью эритроцитов.

3.2. ХОЗЯЙСТВЕННО-ПОЛЕЗНЫЕ ПРИЗНАКИ И кариотипическая изменчивость КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА РАЗНЫХ РЕГИОНОВ

3.2.1. Ретроспективный анализ молочной продуктивности коров
и ее связь с кариотипической изменчивостью

В хозяйствах Московской области и Пермского края производится индивидуальное закрепление быков-производителей голштинского происхождения. В ПТФ Комсомольская использование голштинских производителей, обладающих большой племенной ценностью, позволило в короткие сроки улучшить продуктивные и племенные качества животных стада.

Коровы, чьи отцы принадлежали к ведущей линии Вис Бэк Айдиал 1013415, имели удой по первой лактации 5069 кг, что выше на 1129 кг, чем у потомков линии Силинг Трайджун Рокит 252803 - 3940 кг (Р>0,999). Примечательно, что коровы линии Вис Бэк Айдиал 1013415 по количеству молочного жира превосходили своих сверстниц на 40,6 кг. Достоверное превосходство установлено и между дочерьми отдельных быков в разрезе линий. Лучшими по показателям молочной продуктивности за первую лактацию оказались дочери Малыша 121, которые имели удой 5792 кг при максимальном содержании жира 3,85% (табл. 6). Следует обратить внимание на то, что дочери быка Бизона этой же линии уступали по удою на 1408 кг молока за лактацию (P>0,99).

Таблица 6

Влияние генотипа отцов на молочную продуктивность дочерей за первую лактацию

(ПТФ Комсомольская, 1993 г.)

иния

Бык

n

Параметр

Удой, кг

МДЖ, %

Молочный жир, кг

Вис Бэк

Айдиал 1013415

Малыш 121

25

S

Cv

5792 117

990

17,1

3,85 0,03

0,14

3,63

222,9

Бизон 119

25

S

Cv

4384 99

680

15,5

3,80 0,03

0,09

2,4

166,5

Итого

50

S

Cv

5069 118

837

16,5

3,77 0,26

0,11

2,9

191,1

Силлинг

Трайджун

Рокит 252803

Мрамор 741

28

S

Cv

3940 116

614

15,5

3,82 0,03

0,16

4,2

150,5

Итого по хозяйству

3524

3,67

129,3

Изучение молочной продуктивности у первотелок в 1998 г. в том же хозяйстве (табл. 7) показало, что потомки линии Вис Бэк Айдиал 1013415, сохраняют высокую молочную продуктивность 4781 кг, против 5069 кг разница составила лишь 288 кг по сравнению с 1993 г. Среди использовавшихся быков голштинских линий следует признать лучшими по удою дочерей быка Старбукс 278 ,а по содержанию жира в молоке дочерей быка Магистр 262. Следует отметить, что через пять лет в этом хозяйстве среди всех учтенных потомков наблюдалась выравненность по удою. Достоверных различий по удою и содержанию жира в молоке не установлено. Коэффициенты изменчивости по удою в разрезе линий находились в пределах от 16,3 до 20,5%.

В 2003 г. в ПТФ л Комсомольская использовались быки линий Вис Бэк Айдиал 1013415 - Груз 1096; Силинг Трайджун Рокит 252803 - Метил 1106; Монтвик Чифтейн 95679 - Банкир 551; Рефлекшн Соверинг 198998 - Федул 538.

Таблица 7

Влияние генотипа отцов на молочную продуктивность дочерей за первую лактацию

(ПТФ Комсомольская, 1998 г.)

иния

Бык

n

Параметр

Удой, кг

МДЖ, %

Молочный жир, кг

Вис Бэк
Айдиал

1013415

Старбукс

278

20

S

Cv

4976 109

836

16,8

3,78 0,04

0,12

3,2

188,0

Магистр 262

24

S

Cv

4587 152

747

16,3

4,0 0,04

1,14

3,5

183,4

Итого

44

S

Cv

4781 107

712

14,9

3,90 0,03

0,12

3,1

186,4

Силинг

Трайджун

Рокит 252803

Милый 06286

15

S

Cv

4612 244

945

20,5

3,97 0,05

0,19

4,8

183,1

Итого по хозяйству

4522

3,66

165,5

Анализ молочной продуктивности коров первотелок (табл. 8), проводимый в течение 10 лет в ПТФ Комсомольская, показал, что использование голштинских быков на протяжении этого периода позволило улучшить продуктивные качества животных. Потомки линий сохраняют достаточно высокие показатели. Так, дочери быка Метила 1106 линии Силинг Трайджун Рокит 252803 имели удой 5824 кг, при достаточно высоком содержании жира - 4,07%.Они по первой лактации превосходили сверстниц линии Монтвик Чифтейн 95679 на 675 кг.

Таблица 8

Влияние генотипа отцов на молочную продуктивность дочерей за первую лактацию (ПТФ Комсомольская, 2003 г.)

иния

Бык

n

Параметр

Удой, кг

МДЖ, %

Молочный жир, кг

Вис Бэк Айдиал 1013415

Груз 1096

29

S

 

Cv 

5690 164

1115

19,6

3,92 0,04

0,30

7,6

223,0

Силлинг Трайджун Рокит 252803

Метил 1106

15

S

Cv

5824 152

937

16,1

4,07 0,05

0,22

5,4

237,0

Монтвик Чифтейн 95679

Банкир 551

15

S

 

Cv 

5149 261

1076

20,9

3,85 0,04

0,26

6,8

198,2

Рефлекшн Соверинг 198998

Федул 538

15

S

 

Cv 

5547 326

1408

25,3

3,79 0,02

0,27

7,1

210,2

Итого по хозяйству

5370

3,78

203,0

По мере проведения голштинизации, при постепенном росте надоев, обусловленном усиливающимся влиянием голштинской крови, первотелки, потомки голштинских быков, имеют присущие улучшающим породам высокие удои и жирномолочность.

В период с 1993 по 2003 гг. СХПК Труженик (табл. 9-11) использовались потомки быков Бард 172, Леопольд 902, Вернер 8186, Горец 32, Илот 392, Венец 1672, Магнат 1736, Дюйм 625. Лучшими в 1993 г. оказались дочери Барда 172 линии МонтвикЧифтейн 95679, удой которых за первую лактацию составил 4606 кг с содержанием жира 3,88%, они имели на 548 кг молока больше, чем дочери быка Леопольд 902, и не уступали дочерям быков Дюйм 625 и Венец 1672, которые использовались в 2003 г. в хозяйствах Пермского края (Р> 0,99).

Таблица 9

Влияние генотипа отцов на молочную продуктивность дочерей за первую лактацию (СХПК Труженик в 1993 г.)

иния

Бык

n

Параметр

Удой, кг

МДЖ, %

Молочный жир, кг

Монтвик Чифтейн 95679

Бард 172

25

S

 

Cv 

4606 94,8

469

10,2

3,88 0,03

0,09

2,3

178,7

еопольд

902

16

S

 

Cv 

3758 201

805

21,4

3,85 0,04

0,09

2,3

144,6

Итого

41

S

 

Cv 

4183 94

602

14,4

3,87 0,03

0,11

2,9

161,8

Итого по хозяйству

3669

3,92

143,8

Таблица 10

Влияние генотипа отцов на молочную продуктивность дочерей за первую лактацию (СХПК Труженик в 1998 г.)

иния

Бык

n

Параметр

Удой, кг

МДЖ, %

Молочный жир, кг

Вис Бэк Айдиал 1013415

Вернер 8186

20

S

Cv

3731 126,6

491

13,18

4,0 0,04

0,11

2,7

149,2

Горец 32

20

S

Cv

3590 168,4

664

18,5

3,65 0,04

0,11

3,01

131,0

Итого

40

S

Cv

3671 133,9

580

15,8

3,78 0,03

0,09

2,3

138,7

Монтвик Чифтейн 95679

Илот 392

15

S

Cv

3526 144,4

601

17,06

3,36 0,04

0,18

5,4

118,4

Итого по хозяйству

3466

3,84

133,1

Таблица 11

Влияние генотипа отцов на молочную продуктивность дочерей за первую лактацию (СХПК Труженик в 2003 г.)

иния

Бык

n

Параметр

Удой, кг

МДЖ, %

Молочный жир, кг

Монтвик Чифтейн 95679

Венец 1672

15

S

Cv

5332 200

826

15,5

3,66 0,04

0,13

3,5

195,2

Рефлекшн Соверинг 198998

Магнат 1736

12

S

Cv

5397 193

782

14,5

3,61 0,53

0,16

4,4

194,8

Вис Бэк Айдиал 1013415

Дюйм 625

25

S

Cv

4608 151

576

12,5

3,75 0,03

0,13

3,8

172,8

Итого по хозяйству

5002

3,82

196,1

Ретроспективный анализ молочной продуктивности коров различных генотипов в учтенных хозяйствах пермского региона в очередной раз подтвердил превосходство быков голштинского происхождения, оказавших свое влияние на продуктивные качества потомства.

В рамках поглотительного скрещивания, которое осуществлялось в АОЗТ Вохринка, коровы (табл. 12) первотелки в 1993 г. имели средний удой по хозяйству 3996 кг, в разрезе линий лучшими оказались потомки Миража 685, принадлежащего к линии Силинг Трайджун Рокит 252803. Следует отметить, что потомки этой линии также использовались в дальнейшей селекции в этом хозяйстве и имели достоверно высокие показатели молочной продуктивности. В 1993 г. у дочерей быка Мираж 685 удой составил 4805 кг, в 1998 г. потомки быка Апаш 407 той же линии имели удой по первой лактации 5835 кг (Р > 0,999).

Таблица 12

Влияние генотипа отцов на молочную продуктивность дочерей за первую лактацию (АОЗТ Вохринка в 1993 г.)

иния

Бык

n

Параметр

Удой, кг

МДЖ, %

Молочный жир, кг

Монтвик

Чифтейн 95679

Сон 191

46

S

Cv

4562 128

646

14,2

3,77 0,03

0,18

4,8

171,9

Силлинг
Трайджун
Рокит 252803

Мираж 685

12

S

Cv

4805 171

728

15,2

3,81 0,05

0,16

4,2

183,0

Итого по хозяйству

3996

3,60

143,8

Потомки линии Силинг Трайджун Рокит 252803, использовавшиеся в 1998 г. (табл. 13), достоверно превосходили дочерей быка Эйви 205 линии Рефлекшин Соверинг 198998 (Р>0,999) и не уступали дочерям быка Астронавт 1458744. В 2003 г. средняя продуктивность первотелок составила 6072 кг, причем, последовательная селекция в течение 10 лет позволила увеличить продуктивность животных с 3996 кг до 6072 кг, прирост составил 2076 кг молока (Р>0,999). Следует отметить, что тандемная селекция осуществлялась на жирномолочность с 1993 г., все потомки голштинских быков показали увеличение содержания жира в молоке у коров: именно с увеличением молочной продуктивности увеличивалась и жирномолочность. В 1998 г. коэффициенты изменчивости как по удою (11,1-13,4%), так и жирномолочности (3,9-6,0%) были низкими.

Таблица 13

Влияние генотипа отцов на молочную продуктивность дочерей за первую лактацию (АОЗТ Вохринка в 1998 г.)

иния

Бык

n

Параметр

Удой, кг

МДЖ, %

Молочный жир, кг

Вис Бэк Айдиал 1013415

Астронавт 1458744

40

S

Cv

5534 110,0

616

11,1

3,85 0,03

0,15

3,9

213,0

Силлинг Трайджун Рокит 252803

Апаш 407

25

S

Cv

5835 135,9

763

13,1

3,96 0,04

0,16

4,2

231,0

Рефлекшн Соверинг 198998

Эйви 205

15

S

Cv

4434 136,2

593

13,4

3,84 0,05

0,23

6,0

170,2

Итого по хозяйству

4800

3,71

178,1

Дальнейший зоотехнический анализ (табл. 14) использования голштинских быков показал, что в 2003 г. в АОЗТ Вохринка использовались потомки линий Рефлекшин Соверинг 019899 и Монтвик Чифтейна 95678.

Установлено, что дочери быков Клерка 244, Шейка 632 имели достоверно высокий удой по первой лактации и достоверно высокий процент жира в молоке, по сравнению с первотелками, использовавшимися в 1993 г.

Сравнение потомков линии Монтвик Чифтейн 95679, которые использовались в хозяйстве в течение 10 лет, показало увеличение молочной продуктивности от 4562 кг и жирномолочности 3,77 % до 6266 кг и содержание жира увеличилось до 4,0% в разрезе одной линии, что дало прибавку в 1704 кг молока и 0,23% жира (Р>0,999).

Сравнительный анализ молочной продуктивности первотелок АОЗТ Вохринка и коров ПЗ Заря Подмосковья по результатам 1993, 1998, 2003 гг. также оказался в пользу молодых коров АОЗТ Вохринка. При региональном ретроспективном анализе именно коровы, принадлежащие АОЗТ Вохринка, имели среднюю продуктивность по первой лактации 6036 кг и содержание жира 4,07%.

Таблица 14

Влияние генотипа отцов на молочную продуктивность дочерей за первую лактацию (АОЗТ Вохринка в 2003 г.)

иния

Бык

n

Параметр

Удой, кг

МДЖ, %

Молочный жир, кг

Рефлекшн Соверинг

019899

Снег 481555

40

S

Cv

5426 129

732

13,4

4,23 0,03

0,17

4,23

229,5

Монтвик Чифтейн 95679

Клерк 244

10

S

Cv

6322 166

1094

17,3

4,0 0,06

0,27

6,75

252,8

Шейк 632

10

S

Cv

6131 146

1066

17,4

4,07 0.06

0.28

6,9

249,5

Итого

20

S

Cv

6266 118

896

14,3

4,0 0,04

0,18

4,5

250,6

Итого по хозяйству

6072

3,87

234,9

Стадо ПЗ Заря Подмосковья является базовым в Московской области и создано путем простого воспроизводительного скрещивания. Животные данного хозяйства наиболее полно отвечают требованиям промышленной технологии. Современное состояние молочной продуктивности первотелок обусловлено длительной селекцией на повышение молочной продуктивности (табл. 15). Как показали результаты исследований в 1993 г. в ПЗ Заря Подмосковья использовались потомки линий Монтвик Чифтейн 95679, Рефлекшн Соверинг 198998, Вис Айдиал 933122. Среди всех первотелок лучшими оказались дочери быка Криптон 1884253, они имели удой по первой лактации 4709 кг и превосходили по данному показателю сверстниц, принадлежащих к линии Вис Айдиал 933122.

Таблица 15

Влияние генотипа отцов на молочную продуктивность дочерей за первую лактацию (ПЗ Заря Подмосковья в 1993 г.)

иния

Бык

n

Параметр

Удой, кг

МДЖ, %

Молочный жир, кг

Монтвик Чифтейн 95679

Жордан 400530

10

S

Cv

4482 316

1002

22,3

3,84 0,06

0,28

4,4

172,1

Пикланд 39864

12

S

Cv

4615 159

779

16,9

3,75 0,05

0,21

5,8

173,0

Итого

22

S

Cv

4418 143

759

17,2

3,79 0,04

0,18

4,4

167,4

Рефлекшн Соверинг 198998

Криптон

1884253

10

S

Cv

4709 347

1099

23,3

3,66 0,05

0,27

7,4

172,3

Ротейшин

1928291

10

S

Cv

4547 454

973

21,4

3,87 0,06

0,22

5,9

175,9

Итого

20

S

Cv

4628 279

1059

22,9

3,76 0,04

0,2

5,3

174,0

Вис  Айдиал 933122

Атолл 486

20

S

Cv

4433 130

625

14,1

3,80 0,04

0,18

4,8

168,4

Итого по хозяйству

4246

3,75

159,2

Молочная продуктивность коров ПЗ Заря Подмосковья в 1998 г. представлена в табл. 16. Из данных таблицы видно, что черно-пестрые коровы - потомки голштинских быков - уже за первую лактацию отличаются высокими удоями. Так, средний удой по голштинизированным первотелкам составляет 4813 кг, наибольший удой зарегистрирован у потомков линии Силинг Трайджун Рокит 0252803 - 5350 кг с содержанием жира 3,63%. Приведенные данные свидетельствуют о высоком генетическом потенциале молочной продуктивности голштинизированных коров.

В табл. 17 включены данные об удоях, проценте жира и выходе молочного жира за первую лактацию коров, лактировавших в племзаводе в 2003 г.

Среди всех анализируемых первотелок дочери быка Марио 21, принадлежащего к линии Рефлекшн Соверинг 198998, были лучшими по удою (6505 кг) и содержанию жира (3,89%). Фенотипическая изменчивость по удою первотелок равнялась 650-850 кг молока и наибольшей была у потомков линии Силинг Трайджун Рокит 252803 в 2003 г. 850 кг.

Было установлено, что с начала 1993 по 2003 гг. наибольшее значение фенотипической изменчивости выявлено у дочерей быка Ротейшин 1928291-1436 кг, в целом по линии Рефлекшн Соверинг 198998 изменчивость была достаточно высокая и равнялась 1247 кг. Наименьшее значение данного показателя отмечалось у дочерей Пикланда 39864, принадлежащего к линии Монтвик Чифтейн 95679Ц550 кг. Коэффициент изменчивости за все учтенные периоды по удою находился в пределах от 14,4 до 21,1%.

Таблица 16

Влияние генотипа отцов на молочную продуктивность дочерей за первую лактацию (ПЗ Заря Подмосковья в 1998 г.)

иния

Бык

n

Параметр

Удой, кг

МДЖ, %

Молочный жир, кг

Пабст.
Говернор

882933-9274

Амадей 15

10

S

Cv

5080156

782

15,4

3,770,06

0,19

5,12

191,5

Силинг Трайджун

0252803

Дебют 98

23

S

Cv

5350199

952

17,8

3,630,04

0,24

6,7

194,2

Итого по хозяйству

4813

3,76

180,9

Дочери всех перечисленных производителей обладают достаточно высокой продуктивностью по первой лактации. В то же время лучшими следует признать первотелок потомков ведущих голштинских линий, использовавшихся за последние 10 лет в АОЗТ Вохринка.

Таблица 17

Влияние генотипа отцов на молочную продуктивность дочерей за первую лактацию (ПЗ Заря Подмосковья в 2003 г.)

иния

Бык

n

Параметр

Удой, кг

МДЖ, %

Молочный жир, кг

Рефлекшн Соверинг 198998

Марио 21

10

S

Cv

6505298

962

14,8

3,890,06

0,15

3,85

253,0

Нарзан 24

13

S

Cv

5477249

788

14,4

3,850,05

0,16

4,15

210,9

Итого

23

S

Cv

5991180

875

14,6

3,880,04

0,14

3,60

232,5

Силлинг Трайджун Рокит 252803

Шкипер 394946

10

S

Cv

5026336

1060

21,1

3,840,06

0,19

4,9

193,0

Итого по хозяйству

5843

3,90

227,9

Ретроспективный анализ молочной продуктивности первотелок, используемых в московском регионе, показал, что увеличение доли крови голштинов, дает увеличение молочной продуктивности и повышение жирномолочности. Нами установлено, что именно быки-производители оказали наибольшее влияние на увеличение молочной продуктивности. В результате анализа установлено, что в обоих регионах дочери представителей разных линий и даже внутри одной линии имели различные показатели продуктивности.

Представления о проведении комплексной оценки кариотипической изменчивости, схема и алгоритм расчета обобщенного показателя, названного генетический риск, разработаны Ю.А. Перчихиным (1986). Этот показатель рассчитывается на основе первичных данных о частоте полиплоидных, гипо- и гиперплоидных клеток, клеток с ассоциациями и аберрациями хромосом.

В результате расчета уровня генетического риска все обследованные животные распределились на следующие группы: с низким генетическим риском (группа Н) - в нее вошли 20,6% всей выборки животных; со средним генетическим риском (группа С) - 48,1%; с высоким генетическим риском (группа В) - 31,3%. Связь уровня генетического риска с молочной продуктивностью показана на рис. 5.

Среди низкопродуктивных коров (удой до 4000 кг) основная часть животных сосредоточена в группах с высоким и средним генетическим риском. В то же время животные со средней продуктивностью более часто встречаются среди коров с низким и средним уровнем генетического риска, нежели с высоким. Среди высокопродуктивных коров соотношение обратное: их доля невелика в группе животных с низким генетическим риском (12,5%), но по мере увеличения генетического риска повышается до 45%.

3.2.3. Цитогенетический скрининг коров с нарушениями
воспроизводительных качеств

В задачу наших исследований входило определить перечень признаков неконституциональной кариотипической изменчивости у коров, подходящих для индивидуальной оценки.

3.2.3.1. Анеуплоидия и воспроизводительная способность коров

Для более полной оценки животных мы посчитали необходимым провести анализ связи анеуплоидии с некоторыми показателями воспроизводительной способности коров различных генотипов. С этой целью в стадах двух регионов России были отобраны коровы с нормальной и нарушенной воспроизводительной способностью. В первую группу вошли коровы с нормальной воспроизводительной способностью. Вторую группу составили животные, у которых имелись различные нарушения при отелах и беременности (спонтанные аборты, мертворождения), а также коровы с сервис-периодом 100 дней и более и числом осеменений больше трех на одно оплодотворение.

В табл. 18 представлены данные гипоплоидии у коров в связи с их воспроизводительными способностями. Между животными двух альтернативных групп имеются четкие и статистически достоверные различия в частоте гипоплоидных клеток (Р> 0,999).

Голштинизированные коровы первого региона с нарушениями воспроизводительных функций имели уровень гипоплоидии на 5,83% больше, чем животные с нормальными воспроизводительными качествами. Животные второго региона с нарушениями воспроизводительных способностей также превосходили животных с нормальным воспроизводством на 10,1% (25,40 и 15,30% соответственно).

Таблица 18

Гипоплоидия у коров разных регионов в связи с показателями воспроизводительной способности

Группа животных

n

± S

Lim

min/max

Cv, %

1 регион

Без нарушений воспроизводства

25

15,69±0,79

10,05 - 25,01

25,2

С нарушениями воспроизводства

25

21,52±2,23

10,0 - 32,0

26,5

2 регион

Без нарушений воспроизводства

25

15,30± 3,00

9,34 - 26,64

17,6

С нарушениями воспроизводства

25

25,40±0,76

10,47 - 30,52

15,1

При исследовании частоты встречаемости гиперплоидных клеток у животных с нормальными и нарушенными воспроизводительными способностями (табл. 19) различия еще более внушительны.

Таблица 19

Гиперплоидия у коров разных регионов в связи с показателями воспроизводительной способности

Группа животных

n

± S

Lim

min/max

Cv, %

1 регион

Без нарушений воспроизводства

25

0,96±0,04

0,00 - 2,01

35,0

С нарушениями воспроизводства

25

2,05±0,05

1,11 - 3,44

32,7

2 регион

Без нарушений воспроизводства

25

1,45±0,07

0,00 - 2,80

34,8

С нарушениями воспроизводства

25

4,41±0,16

1,47 - 7,90

49,0

Так, у голштинизированных коров первого региона с нормальными воспроизводительными способностями гиперплоидные клетки составляли в среднем 0,96%, в то время как у коров с нарушениями воспроизводства этот показатель был равен 2,05%, что в 2,13 раза (Р>0,999) больше, чем у нормальных.

У животных второго региона разница между альтернативными группами еще более выражена. Так, коровы с нарушениями воспроизводства имели гиперплоидных клеток в 3,04 раза больше, чем коровы без нарушений (4,41 против 1,45%, Р>0,999).

Соответственно и показатели анеуплоидии у коров с нарушенной воспроизводительной способностью превышали таковые у коров с нормальным воспроизводством, табл. 20.

Таблица 20

Анеуплоидия у коров разных регионов в связи с показателями воспроизводительнойаспособности

Группа животных

n

± S

Lim

min/max

Cv, %

1 регион

Без нарушений воспроизводства

25

16,55±0,49

8,55 - 25,04

30,0

С нарушениями воспроизводства

25

23,78±0,71

11,19 - 35,61

27,1

2 регион

Без нарушений воспроизводства

25

16,34±0,48

9,00 - 24,60

26,9

С нарушениями воспроизводства

25

29,96±0,81

14,0 - 37,00

31,4

Так, анализ табл. 20 показал, что среди животных первого региона коровы с нарушениями воспроизводительных способностей имели анеуплоидных клеток на 7,23% больше, чем в группе нормальных без нарушений воспроизводства (23,78 против 16,55%). Аналогичная картина наблюдалась и у коров второго региона (29,96 против 16,34%, Р> 0,999).

Таким образом, частота анеуплоидных клеток, может быть надежным показателем воспроизводительных способностей коров.

3.2.3.2. Полиплоидия и воспроизводительная способность у коров

Проблема полиплоидии у млекопитающих и птиц в настоящее время привлекает внимание многих исследователей. Значительное место в этой проблеме занимают вопросы полиплоидизации тканей в индивидуальном развитии животных.

Подсчет числа хромосом мы проводили при просмотре метафаз и на микрофотографиях. У каждого животного исследовали не менее 300 метафазных клеток.

У крупного рогатого скота при определении плоидности клеток вспомогательным моментом является подсчет половых хромосом, каждая из которых соответствует одному гаплоидному набору.

Результаты анализа полиплоидии представлены в табл. 21.

Таблица 21

Полиплоидия у коров с разной воспроизводительной способностью

Группа животных

n

± S

Lim

min/max

Cv, %

1 регион

Без нарушений воспроизводства

25

0,67 ± 0,06

0,00 - 2,10

50,1

С нарушениями воспроизводства

25

0,72 ± 0,06

0,00 - 3,36

43,0

2 регион

Без нарушений воспроизводства

25

0,46± 0,04

0,00 - 2,67

85,0

С нарушениями воспроизводства

25

0,87 ± 0,10

0,00 - 3,60

65,5

Современные данные литературы позволяют высказать предварительное, самое общее соображение о значении самого феномена полиплоидии. Увеличение количества ДНК в клетке - один из возможных показателей усиленной метаболической активности. Увеличение количества ДНК может сказаться на усилении синтеза РНК и белка в полиплоидной клетке сравнительно с диплоидной. Классическим примером физиологической полиплоидизации соматических тканей является суточная периодичность в появлении полиплоидных клеток в печени животных в связи с гликогенообразовательной реакцией.

Свойства полиплоидных клеток, исследованные в последние годы, таковы, что распространенное ранее представление о полиплоидии, как форме клеточной дегенерации, пересмотрено. Напротив, есть все основания считать, что появление полиплоидных клеток связано с восстановительными процессами, регенерацией, функциональной активностью органов и тканей.

3.2.3.3. Хромосомные аберрации и воспроизводительная способность у коров

Среди маточного поголовья (табл. 22) голштинизированных коров как первого, так и второго регионов, имевших и не имевших нарушений воспроизводства, в большинстве случаев в клетках крови наблюдались разрывы и пробелы аутосом. Лишь в отдельных случаях было обнаружено наличие многочисленных разрывов и фрагментов хромосом в одной клетке.

Среди изученных групп животных выявлены значительные различия в частоте аберраций хромосом. Так, коровы с нормальной воспроизводительной способностью имели в два раза меньше клеток с аберрациями хромосом, чем коровы с нарушениями воспроизводства (Р> 0,999). Можно видеть, что среди голштинизированных коров встречаются животные как с отсутствием хромосомных аберраций, так и с высокой долей аномальных клеток (от 0,00 до 18,46). В данном случае следует говорить об индивидуальной характеристике коров, так как животные с нормальными репродуктивными способностями могут иногда иметь высокие значения частных цитогенетических аномалий. И, наоборот, при невысоких значениях отдельных аномалий можно встретить выраженную репродуктивную патологию. Часто у одних и тех же особей одни аномалии более выражены, чем другие, что затрудняет определение генетической полноценности таких животных. Комплексная оценка кариотипического статуса - уровень генетического риска - дает возможность лучшей дифференциации особей по способности образовывать цитогенетически аномальные клетки, в том числе и гаметы. Высокий коэффициент изменчивости (до 41%) указывает на возможность селекции животных с использованием данного показателя кариотипической изменчивости.

Таблица 22

Аберрации хромосом у коров разных регионов в связи с воспроизводительной способностью

Группа животных

n

± S

Lim

min/max

Cv, %

1 регион

Без нарушений воспроизводства

25

6,34 ± 0,37

0,00 - 15,10

18,7

С нарушениями воспроизводства

25

9,84 ± 0,14***

0,00 - 18,46

41,1

2 регион

Без нарушений воспроизводства

25

5,40 ± 0,12

0,00 - 16,14

20,2

С нарушениями воспроизводства

25

8,16 ± 0,14***

0,00 - 18,00

37,2

Таким образом, по увеличению частоты встречаемости спонтанных структурных изменений хромосом можно с достаточной достоверностью судить о нарушениях у данного животного воспроизводительных способностей.

3.2.3.4. Ассоциативная способность хромосом и воспроизводительные качества коров

Результаты исследования связи ассоциативной способности акроцентрических хромосом с воспроизводительной способностью коров представлены в табл. 23.

Более детальный анализ табл. 23 показал, что у коров первого региона без нарушений воспроизводительных способностей частота клеток с ассоциациями составила 71,24± 0,85%, что на 6,5% меньше, чем у коров с нарушениями воспроизводства. Разница достоверна, Р> 0,999.У животных второго региона коровы с нарушениями воспроизводства превосходили своих сверстниц без нарушений воспроизводства на 5,15 %, Р> 0,999. Что касается доли клеток с хромосомными ассоциациями, то наиболее резкие различия частот имеются в группах коров первого региона. Среди коров первого региона с нарушениями воспроизводительных качеств лимиты имеют следующие величины - от 49,5 до 85,16%. Сверстницы второго региона имели разброс клеток с ассоциациями в пределах от 51,6 до 88,34%. Причем, у коров с нарушениями воспроизводства средний уровень достаточно высокий - 78,26%. У коров с нарушениями воспроизводительных качеств увеличивается не только число клеток с ассоциациями, но число таких клеток, в которых много ассоциаций. При анализе изменения доли клеток с разным числом ассоциаций установлено, что количество клеток с одной ассоциацией меняется незначительно, с 2Ц3 ассоциациями становится несколько выше, в то время как доля клеток с 4Ц5 ассоциациями и более возрастает.

Таблица 23

Ассоциации акроцентрических хромосом у коров с разной воспроизводительной способностью

Группа животных

n

± S

Lim

min/max

Cv, %

1 регион

Без нарушений воспроизводства

25

71,24 ± 0,85

49,50Ц 84,0

44,3

С нарушениями воспроизводства

25

77,73 ± 0,91***

44,1 - 88,60

41,2

2 регион

Без нарушений воспроизводства

25

73,11 ± 0,82

50,0 - 88,34

50,2

С нарушениями воспроизводства

25

78,26 ± 0,74***

52,3 - 89,02

51,2

Таким образом, установление параметров, характеризующих пространственную структуру ядер соматических клеток крупного рогатого скота, позволяет регистрировать изменение этих показателей при некоторых физиологических и патологических состояниях и, следовательно, использовать их в качестве дополнительных тестов.

3.2.3.5. Кариотипическая изменчивость у коров с различными нарушениями функции воспроизводства

В целом можно сказать, что для всех кариотипических признаков в той или иной мере справедлив вывод, что высокая частота аномальных клеток чаще всего встречается у коров с нарушениями воспроизводства.

Рассматривая материалы табл. 24, можно видеть резкое возрастание уровней цитогенетических аномалий у коров имевших хотя бы по одному случаю абортов в ранний или средний периоды стельности (группа 2) по сравнению с коровами, у которых не было репродуктивных нарушений (группа 1). Уровень гипоплоидии во 2 группе на порядок выше, чем в 1 группе, уровень гиперплоидии вдвое выше, клеток с аберрациями в 10 раз больше. В то же время поздние аборты и мертворождения в меньшей степени связаны с цитогенетическими аномалиями (3 группа), хотя их уровень все же заметно выше, чем в 1 группе (но заметно ниже, чем во 2 группе).

Представляет интерес дифференциация случаев большого числа осеменений (группы 4, 5 и 6 и далее). В этих группах уровни цитогенетических аномалий намного выше, чем в 1 группе, но если группа 4 и группа 5 в целом сходны по аномалиям, то в группе 6 их уровень несколько ниже, чем в группах 4 и 5. Следовательно, большое число осеменений в меньшей степени связано с цитогенетическими нарушениями.

Продолжительность сервис-периода может быть связана с цитогенетическими аномалиями в тех случаях, когда эмбрион гибнет, но аборт не фиксируется. У коров (группа 8), у которых не зарегистрировано ни одного случая длительного сервис-периода при совпадении с числом осеменений больше 2, или с абортом, или с мертворождением, уровни аномалий (не считая гипоплоидии) выше, чем в 1 группе, но ниже, чем в 7 группе, в которой случай абортов или мертворождения отмечены после менее чем 90-дневного сервис-периода, в течение которого проведено не более 2 осеменений. Еще заметнее рост аномалий в 9 группе, где отмечены многократные осеменения в течение длительного сервис-периода, и тем более в 10 группе, где в дополнение к таким случаям отмечены аборты и мертворождения. В наибольшей степени заметно возрастание уровня хромосомных аберраций. По сравнению с 8 группой, в группе 10 уровни полиплоидии и аберраций, гипер-, гипоплоидии значительно увеличились.

Таблица 24

Цитогенетическая характеристика голштинизированных коров, имевших нарушения воспроизводительной функции

Тип репродуктивных нарушений

Исследовано метафаз

Параметр

Полиплоидия

Гиперплоидия

Гипоплоидия

Аберрации

1. Без нарушений (1-2) осеменения, без абортов и м/р

1000

± S

0,10±0,01

0,50±0,29

7,50±1,32

1,75± 0,48

2. Аборты в 1-м и 2-м триместрах

680

± S

1,0±0,01

5,33±1,45

13,33±4,37

10,67± 3,28

3. Поздние аборты и мертворождения

1000

± S

0,20±0,2

2,20±0,73

13,20±4,22

8,80± 1,20

4. Случаи 3, 4, и 5 осеменений

1200

± S

0,83±0,19

3,38±1,08

14,83±2,98

16,50± 2,16

5. Случаи 6 и 7 осеменений

1200

± S

0,33±0,21

3,50±0,62

20,3±2,21

17,0±0,89

6. Случаи 8 и более осеменений

660

± S

0,12±0,01

1,67±0,88

11,33±2,19

15,33± 2,73

7. Случаи м/р при сервис-периоде менее 90 дней при числе осеменений не более 2

800

± S

0,5±0,29

3,0±0,82

7,5±1,04

13,25± 1,97

8. Отсутствие случая более 100 дней сервис-периода при числе осеменений более 2, или аборта или м/р

1200

± S

0,17±0,17

1,17±0,48

10,5±2,38

12,5± 1,26

9. Наличие одного случая 3-кратного осеменения и больше при сервис-периоде 100 дней и выше

2370

± S

0,45±0,16

3,36±0,73

16,45±2,02

14,82± 1,17

10. Случаи м/р или аборта при сервис-периоде выше 90 дней и числа осеменений 3 и более

880

± S

0,50±0,29

3,75±1,65

19,0±4,02

17,5± 2,87

Таким образом, можно сделать вывод, что уровни цитогенетических аномалий у коров в достаточной мере могут характеризовать их воспроизводительные качества. Следует указать, что цитогенетический анализ в большей степени информативен, когда речь идет о таких репродуктивных проявлениях, которые отражают гибель или нарушения развития эмбриона в эмбриональный период, и в меньшей степени, когда репродуктивные нарушения связаны со снижением способности матери воспринять и доносить плод.

3.2.3.6. Анализ связи кариотипических показателей и воспроизводительных качеств уаголштинизированных коров разных регионов

Нами были определены коэффициенты корреляции сервис-периода с некоторыми показателями кариотипической нестабильности, табл. 25.

Анализ табл. 25 позволяет сделать вывод о существовании значительной корреляции величины сервис-периода с анеуплоидией и структурными нарушениями хромосом среди всех исследуемых коров двух регионов России. В то же время коэффициенты корреляции величины сервис-периода и полиплоидии оказались значимыми только в ПЗ л Заря Подмосковья и СХПК Труженик .

Таким образом, показатели анеуплоидии и частоты структурных аберраций хромосом являются наиболее информативными и могут быть рекомендованы для использования при оценке генетического риска у крупного рогатого скота.

Таблица 25

Коэффициенты корреляции сервис-периода с показателями кариотипической нестабильности

Признак

АОЗТ Вохринка

± S

ПЗ Заря Подмосковья

± S

ПТФ Комсомольская

± S

СХПК Труженик

± S

Сервис-период - анеуплоидия

0,48 ± 0,05

0,44 ± 0,06

0,55 ± 0,08

0,73 ± 0,09

Сервис-период - полиплоидия

0,10 ± 0,01

0,50 ± 0,09

0,11 ± 0,02

0,43 ± 0,12

Сервис-период - аберрации

0,41 ± 0,05

0,70 ± 0,07

0,42 ± 0,09

0,62 ± 0,10

Мы предприняли попытку установления возможности прогнозирования одних кариотипических показателей по уровню других, связанных с ними, при этом расчет вели по группам коров с нарушениями воспроизводства и без них. С этой целью был проведен расчет парных коэффициентов корреляций, который представлен в табл. 26.

Из данных табл. 26 видно, что величина связи между некоторыми показателями кариотипической измечивости у животных значительно варьирует в зависимости от принадлежности к региону и наличия нарушений воспроизводства. Так, у коров первого региона с нарушениями воспроизводства мы четко отмечаем высокие коэффициенты корреляций между такими показателями, как ассоциации и гипоплоидия - 0,64, тогда как во втором регионе коэффициент равен 0,40; ассоциации и аберрации - 0,67; гипоплоидия и гиперплоидия - 0,67; гиперплоидия и аберрации - 0,61; полиплоидия и аберрации - 0,74.

Таблица 26

Коэффициенты корреляций между кариотипическими показателями уаголштинизированныхакоров разных регионов

Показатель

1 регион

2 регион

Без нарушен.

воспр-ства

± S

С нарушениями

воспр-ства

± S

Без нарушений

воспр-ства

± S

С нарушениями

воспр-ства

± S

Ассоциации -

Гипоплоидия

0,20 ± 0,11

0,64 ± 0,11

0,19 ± 0,15

0,40 ± 0,08

Ассоциации -

Гиперплоидия

0,29 ± 0,13

0,49 ± 0,13

0,30 ± 0,14

0,46 ± 0,07

Ассоциации -

Полиплоидия

0,13 ± 0,15

0,27 ± 0,14

0,14 ± 0,17

0,26 ± 0,06

Ассоциации -

Аберрации

0,30 ± 0,12

0,67 ± 0,14

0,28 ± 0,12

0,67 ± 0,07

Гипоплоидия -

Гиперплоидия

0,59 ± 0,13

0,67 ± 0,11

0,56 ± 0,16

0,69 ± 0,07

Гипоплоидия - Полиплоидия

0,40 ± 0,15

0,47 ± 0,13

0,60 ± 0,11

0,48 ± 0,07

Гипоплоидия - Аберрации

0,36 ±0,15

0,64 ±0,11

0,39 ± 0,12

0,64 ± 0,06

Гиперплоидия -

Аберрации

0,47 ± 0,13

0,67 ± 0,11

0,44 ± 0,12

0,65 ± 0,08

Полиплоидия -

Аберрации

0,30 ± 0,15

0,74 ± 0,14

0,34 ± 0,12

0,75 ±0,07

Гиперплоидия -

Полиплоидия

0,28 ± 0,11

0,40 ± 0,11

0,30 ± 0,13

0,41 ± 0,06

Следует отметить, что средние значения коэффициента корреляции между аберрациями и другими признаками кариотипической изменчивости находятся примерно на одном уровне у коров без нарушений воспроизводства; у коров первого и второго региона с нарушениями воспроизводства эти величины имеют высокие значения (0,74-0,75).

Коэффициент корреляции между гипо- и гиперплоидией оказался  большим  и составил у коров с нарушениями воспроизводства - 0,69. Гипо- и гиперплоидия являются двумя неразрывно связанными составляющими анеуплоидии, чем и обьясняется заметная величина коэффициента корреляции между этими показателями.

Таким образом, данные табл. 26 еще раз подтверждают генетическую природу кариотипической изменчивости. В практической селекции использование животных с известным кариотипическим статусом позволит в некоторой степени прогнозировать уровень кариотипической изменчивости в их потомстве и в популяции в целом.

ВЫВОДЫ

1. Установлены средние популяционные значения показателей кариотипической изменчивости у голштинизированных коров черно-пестрой породы, которые составили по московскому и пермскому регионам соответственно: гиперплоидия - 0,54 и 0,61%; гипоплоидия - 13,81 и 14,80%; полиплоидия - 0,59 и 0,50%; аберрации хромосом - 5,93 и 5,80%; ассоциации хромосом - 73,4 и 72,9%.

В популяции московского типа черно-пестрой породы установлено некоторое увеличение процента полиплоидии, аберраций и ассоциаций хромосом по сравнению с популяцией уральского типа черно-пестрого скота. При этом в последней выше процент гипер- и гипоплоидии. Сумма анеуплоидии у животных Пермского края составила 15,41%, что на 1,06% выше данного показателя в популяции черно-пестрого скота московского региона.

Разработан способ индивидуального отбора сельскохозяйственных животных по уровню неконституциональной кариотипической изменчивости путем суммирования частот клеток, выраженных в баллах, со структурными и числовыми аномалиями хромосом.

2. Отмечено влияние генофонда голштинских линий на частоту ряда показателей соматической хромосомной нестабильности. Так, у коров Вис Бек Айдиала 1013415 частота структурных аберраций хромосом была на 1,1% ниже, чем у животных линии Силлинг Трайджун Рокит 252803.

3. Показано влияние быков-производителей не только разных линий, но и в пределах одной линии, на параметры кариотипической изменчивости. У дочерей быка Милого 06286 (ПТФ Комсомольская) процент клеток с аберрациями был на 3,8% выше в сравнении с дочерьми быка той же линии Малыша 121 (Р>0,999).

4. В течение 10-летнего цитогенетического скрининга в популяциях коров двух регионов в целом не установлено значительных изменений уровня анеуплоидии, полиплоидии, структурных аберраций и ассоциаций хромосом. Наблюдается снижение уровня гипо- и гиперплоидии среди животных московского региона на 0,76 и на 0,06%, соответственно (Р>0,999).

5. Результаты распределения популяций циркулирующих эритроцитов по группам стойкости у коров с низким уровнем анеуплодии указывают на достоверное увеличение популяций повышенностойких красных кровяных клеток до 61,5% и снижение среднестойких и пониженностойких до 24,4 и 14,1%, соответственно.

У коров с высоким уровнем анеуплоидии количество пониженностойких клеток составило 16,2%, среднестойких клеток - 68,7% и повышенностойких клеток - 15,1%. Таким образом, коровы с низким уровнем кислотной резистентности эритроцитов обладают высоким уровнем частоты встречаемости анеуплоидных клеток.

У коров с низким уровнем аберраций хромосом отмечен наибольший процент повышенностойких эритроцитов и наименьший процент пониженностойких. У коров с высоким уровнем аберраций хромосом наоборот, меньше повышенностойких эритроцитов (39,0 против 67,6%) и больше пониженностойких (12,1 против 10,3%).

6. Ретроспективный анализ молочной продуктивности коров различных генотипов в учтенных хозяйствах пермского региона в очередной раз подтвердил превосходство быков голштинского происхождения, оказавших свое влияние на продуктивные качества потомства. Сравнительная оценка продуктивности первотелок, используемых в московской регионе, показала, что увеличение доли крови голштинов дает увеличение молочной продуктивности и повышение жирномолочности. Установлено, что именно быки-производители оказали наибольшее влияние на увеличение молочной продуктивности. В обоих регионах дочери представителей разных линий и даже внутри одной линии имели различные показатели продуктивности.

7. У низкопродуктивных коров основная часть животных (более 80%) сосредоточена в группах с высоким и средним генетическим риском. В то же время животные со средней продуктивностью более часто встречаются среди коров с низким и средним уровнем генетического риска, нежели с высоким. Среди высокопродуктивных коров соотношение обратное: их доля невелика в группе животных с низким генетическим риском (12,5%), но по мере увеличения генетического риска повышается до 45%.

8. Среди коров пермского региона многоплодных отелов больше, разница составила 0,89 (2,34 против 1,47), Р>0,99.

Животные пермского региона после первого отела имели большее количество мертворожденных телят и абортов - 7,93 против 5,83 в московском регионе.

9. Установлена корреляция между частотой гиперплоидных клеток и нарушениями воспроизводительной способности у животных. Коровы с высоким уровнем гиперплоидии характеризовались более частыми нарушениями воспроизводительных функций (в 2,1 раза) в сравнении с животными, имеющими низкий процент гиперплоидии.

Показано влияние региона на степень нарушения воспроизводительных функций у коров с высоким уровнем гиперплоидии и других кариотипических аномалий. У животных пермского региона разница между альтернативными группами более выражена - в 3,04 раза (4,41 против 1,45%, Р>0,999). У животных московского региона коровы с нарушениями воспроизводства имели гиперплоидных клеток в 2,1 раза больше, чем коровы с нормальным воспроизводством.

10. Наличие конституциональных хромосомных мутаций и высокой частоты различных неконституциональных аномалий совпадает с репродуктивными нарушениями и может служить маркером повышенной вероятности снижения воспроизводительных функций.

11. Анализ как общего процента патологических форм спермиев в эякулятах быков-производителей, так и соотношения отдельных форм патологии выявил значительные индивидуальные различия, свидетельствующие о том, что этот признак может быть одним из селекционируемых.

12. Показатели повторяемости воспроизводительных качеств в ряде случаев выше, чем показатели их наследуемости, причем, в московском регионе повторяемость многих показателей выше, чем в пермском. Так, коэффициент повторяемости продолжительности межотельного периода в популяции коров первого региона был равен 0,40, в то время как среди животных Пермского края он составил всего 0,03. Это, возможно, обусловлено большей генетической однородностью стада московского региона за счет продолжительной селекции.

РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ

1. Наличие связи хромосомных аберраций с хозяйственно-полезными признаками животных указывает на целесообразность проведения систематического контроля состояния кариотипа. Необходимо ввести специальную графу в племенную карточку животного, где должна быть отражена его цитогенетическая полноценность.

2. Цитогенетическому контролю подлежат быки, проходящие испытание на племпредприятиях и элеверах, а также высокоценные быкопроизводящие коровы и доноры эмбрионов.

3. Для отбора коров на ремонт, особенно в быкопроизводящую группу, необходимо сочетать высокую молочную продуктивность с низкой кариотипической изменчивостью.

Список основных публикаций по теме диссертации

  1. Бакай, А.В. Спонтанная кариотипическая изменчивость у крупного рогатого скота черно-пестрой породы / А.В. Бакай, Ю.А. Перчихин, А.С. Семенов // Докл. ВАСХНИЛ. - 1986. - № 11. - С. 18Ц19.
  2. Способ индивидуального отбора сельскохозяйственных животных / В.Ф. Красота, А.В. Бакай, А.С. Семенов, Перчихин Ю.А., Адамов В.Я. - Авторское свидетельство на изобретение № 1400567  А1 А 01 К 67/02 от 07.06.1988 г. // Бюл. №21. - С. 28Ц31.
  3. Бакай, А.В. Роль соматического мутагенеза в оценке адаптивности популяций / А.В. Бакай, Ю.А. Перчихин, А.С. Семенов // Тез. докл. Всесоюзн. совещ. по пробл. зоокультуры. - М., 1986. - С. 18Ц22.
  4. Семенов, А.С. Связь кариотипической изменчивости с хозяйственно-полезными признаками у крупного рогатого скота / А.С. Семенов // Деп. в ВНИИТЭИ агропром. - 12.09.86. - № 388 ВС-86. - РЖ Животноводство. - 1987. - № 1. - С. 78Ц81.
  5. Семенов, А.С. Оценка кариотипа и хозяйственно-полезных качеств коров / А.С. Семенов // Пути повышения эффективности сельскохозяйственного производства в системе АПК: тез. докл. науч.-техн. конф. молодых ученых и специалистов. - Пермь: ПСХИ, 1988. - С. 18Ц21.
  6. Семенов, А.С. Характеристика коров по комплексу признаков кариотипической изменчивости / А.С. Семенов // Повышение породных и продуктивных качеств крупного рогатого скота: межвуз. сб. науч. тр. - Пермь: ПСХИ, 1988. - С. 34Ц38.
  7. Бакай, А.В. Влияние уровня кариотической изменчивости на репродуктивные качества коров черно-пестрой породы / А.В. Бакай, Ю.А. Перчихин, А.С. Семенов, А.В. Бертазин, Ф.Р. Чернева // Цитогенетика и биотехнология: материалы 2-й Всесоюзн. конф. по цитогенетике с.-х. животных. - Л.; Пушкин, 1989. - С. 23Ц31.
  8. Тунгусков, В.Я. Использование генофонда молочного скота / В.Я. Тунгусков, А.С. Семенов, И.А. Габова, Е.С. Семлянских // Использование генофонда в молочном скотоводстве РСФСР: тез. докл. участников науч. сессии. - Л.; Пушкин, 1990. - С. 36Ц41.
  9. Семенов, А.С. Кариотипическая оценка племенных животных / А.С. Семенов // Материалы межвуз. науч.-практич. конф. - Пермь: ПСХИ, 1990. - С. 51Ц54.
  10. Семенов, А.С. Оценка состояния кариотипа быков-производителей / А.С. Семенов // Материалы межвуз. науч.-практич. конф. - Пермь: ПСХИ, 1991. - С. 43Ц46.
  11. Бакай, А.В. Цитогенетическая характеристика коров в связи с голштинизацией / А.В. Бакай, Ю.А. Перчихин, А.С. Семенов, Иванов С.И. // Использование пород мирового генофонда для совершенствования пород отечественного скота: тез. докл. Всесоюзн. науч.-техн. конф. - Плавск, 1991. - С. 23Ц26.
  12. Семенов, А.С. Цитогенетическая оценка быков-производителей / А.С. Семенов // Пути и методы повышения продуктивности сельскохозяйственных животных: межвуз. сб. науч. тр. - Пермь: ПСХИ, 1991. - С. 53Ц56.
  13. Бакай, А.В. Комплексный подход в оценке племенной ценности животных / А.В. Бакай, А.С. Семенов, Ф.Р. Бакай // Сб. науч. тр. М.: МГАВМ и Б., 2002. С. 27Ц34.
  14. Бакай, А.В. Цитогенетическая оценка племенных животных / А.В. Бакай, А.С. Семенов // Сб. науч. тр. - М: МГАВМиБ., 2002. - С. 33Ц36.
  15. Семенов, А.С. Кариотипические исследования сельскохозяйственных и лабораторных животных / А.С. Семенов, А.В. Бакай, Ф.Р. Бакай. Ц  М.: МГАВМ и Б., 2002. - 37 с.
  16. Бакай, Ф.Р. Анеуплоидия и полиплоидия в онтогенезе черно-пестрого скота / Ф.Р. Бакай, А.С. Семенов // Современные проблемы зоотехнии и агробизнеса: сб. науч. тр. - М.: МГАВМиБ., 2003. - С. 7Ц9.
  17. Бакай, Ф.Р. Структурные аберрации хромосом и их ассоциативная способность / Ф.Р. Бакай, А.В. Бакай, А.С. Семенов, Г.Г. Скрипниченко // Современные проблемы зоотехнии и агробизнеса: сб. науч. тр. - М.: МГАВМ и Б., 2004. - С. 35Ц36.
  18. Мугниев, Э.П. Воспроизводительные качества голштинизированных черно-пестрых коров / Э.П. Мугниев, А.В. Бакай, А.С. Семенов // Материалы международной учебно-метод. и науч.-практич. конф., посвящ. 85-летию академии. - М.: МГАВМ и Б., 2004. - С. 22Ц23.
  19. Мугниев, Э.П. Молочная продуктивность коров черно-пестрой породы и 5/8 - кровных помесей по голштинской породе / Э.П. Мугниев, Ф.Р. Бакай, А.С. Семенов // Материалы междунар. учеб.-метод. и науч.-практич. конф., посвящ. 85-летию академии. - М.: МГАВМиБ., 2004. - С. 20Ц22.
  20. Семенов, А.С. Цитогенетический мониторинг голштинизированного скота черно-пестрой породы / А.С. Семенов // Материалы международной учеб.-метод. и науч.-практич. конф., посвящ. 85-летию академии. - М.: МГАВМ и Б., 2004. - С. 4Ц5.
  21. Семенов, А.С. Кариотипическая нестабильность у крупного рогатого скота / А.С. Семенов // Агротехнология: альманах. - Пермь: Изд-во ПГСХА, 2005. - С. 56Ц62.
  22. Борисова, Н.М. Программа селекционно-племенной работы с основными видами сельскохозяйственных животных и птицы Пермской области на период 2006-2010 гг.: Программа Пермской области / Н.М. Борисова, Н.Г. Махова, А.С. Семенов [и др.]. - Пермь, 2005. - 143 с.
  23. Скрипниченко, Г.Г. Генетика аномалий и болезней / Г.Г. Скрипниченко, Ф.Р. Бакай, А.С. Семенов. - Пермь: ПГСХА, 2006. - 82 с.
  24. Семенов, А.С. Цитогенетический мониторинг голштинизированного крупного рогатого скота разных регионов: монография /. - Пермь: ФГОУ ВПО Пермская ГСХА, 2007. - 161 с.
  25. Красота, В.Ф. Цитологический скрининг коров с нарушениями воспроизводительной функции / В.Ф. Красота, А.В. Бакай, А.С. Семенов // Сельскохозяйственная биология. Сер. биология животных. - 2007. - № 6. - С. 27Ц30.
  26. Семенов, А. Продуктивные и биологические особенности помесей КРС в условиях Южного Урала / А. Семенов, Л. Дронин, П. Болховский // Международный сельскохозяйственный журнал. - 2007. - № 5. С. - 54Ц56.
  27. Семенов, А.С. Хромосомные аберрации у коров разных регионов / А.С. Семенов // Международный сельскохозяйственный журнал. - 2007. - № 5. - С. 59.
  28. Мишин, Ю.М. Количественные и качественные показатели молока у коров разных генотипов / Ю.М. Мишин, Н.Е. Добровольская, А.С. Семенов, А.В. Несмелова // Международный сельскохозяйственный журнал. - 2007. - № 5. - С. 44Ц45.
  29. Бакай, А.В. Сроки использования и репродуктивные качества голштинизированных коров с разным уровнем кариотипических аномалий / А.В. Бакай, Ф.Р. Бакай, А.С. Семенов // Российский ветеринарный журнал. - 2009. - № 3. - С. 38Ц40.
  30. Семенов, А.С. Биохимические и гематологические исследования крови голштинизированных коров / А.С. Семенов, Ф.Р. Бакай // Естественные науки. - 2009. - № 2. - С. 186Ц189.
  31. Семенов, А.С. Анеуплоидия у голштинизированного крупного рогатого скота в связи с показателями воспроизводительной способности / А.С. Семенов, Ф.Р. Бакай // Естественные науки. - 2009. - № 2. - С. 189Ц190.
   Авторефераты по всем темам  >>  Авторефераты по сельскому хозяйству