Авторефераты по темам  >>  Разные специальности - [часть 1]  [часть 2]

БИОХИМИЧЕСКИЙ СТАТУС НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ ПРИ СОЧЕТАННОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ЭНТЕРОСОРБЕНТА, БИОЦИДНОГО ПРЕПАРАТА И РЕОЛОГИЧЕСКИХ СРЕДСТВ

Автореферат кандидатской диссертации

 

На правах рукописи

 

 

Павлов максим николаевич

 

 

биохимический статус новорожденных телят при сочетанном использовании энтеросорбента, биоцидного препарата и реологических средств

 

а

03.01.04 - биохимия

 

АВТОРЕФЕРАТа

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

.

Курск - 2012

Работа выполнена в ФГБОУ ВПО Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. Иванова

Научный руководитель: адоктор ветеринарных наук

Наумов Михаил Михайлович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Шапошников Андрей Александрович

а аа кандидат биологических наук, доцент

Чепелев Николай Александрович

Ведущая организация: аФГБОУ ВПО Белгородская государственная сельскохозяйственная академия имени В.Я. Горина

Защита состоится л___ ___________ 2012 г. в ___ часов на заседании диссертационного совета Д 220.040.03 при ФГБОУ ВПО Курская государственная сельскохозяйственная академия им. проф. И.И. Иванова по адресу: 305021, г. Курск, ул. К. Маркса, 70.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО Курская государственная сельскохозяйственная академия им. проф. И.И. Иванова.

Автореферат разослан л___ ___________ 2012 г.

Ученый секретарьаа Г.Ф. Рыжкова

1. Общая характеристика работы

Актуальность темы. Изучением клинической биохимии новорожденных телят при различных патологиях занимались многие ученые (В.Т. Самохин, 1982; А.А. Шапошников, 2003; М.И. Рецкий, 2004), что позволило им предложить и обосновать применение большого количества лечебно-профилактических средств. В настоящее время одной из наиболее острых проблем современного животноводства остаются диспепсии телят. Так, например, летальность при диспепсиях достигает 20 - 80 % (В.Г. Данилов, 2001). Причиной высокого падежа больных диспепсией животных, в частности, является однобокий подход в лечении, при котором воздействия осуществляются, главным образом, на отдельные этиологические или патогенетические аспекты болезни. В связи с чем весьма перспективна разработка комплексных способов лечения заболевших диспепсией животных, при которых воздействуют на ряд основных причин и патогенетических сдвигов болезни. Кроме того, эффективность терапии больных диспепсией новорожденных телят во многом зависит от наших познаний в патогенезе болезни. Вопросам же агрегации и внутрисосудистой активации тромбоцитов новорожденных телят в доступной научной литературе уделено недостаточно внимания. Надо указать, что морфофункциональное состояние тромбоцитова может изменяться при различных патологиях, усугубляя при этом течение основного заболевания, а в ряде случаев выступая и в качестве главного нарушения (А.С. Шитикова, 1997; Д.Г. Чинчаладзе, 2006). Поэтому изучение агрегационной функции и внутрисосудистой активности тромбоцитова новорожденных телят в норме и при диспепсии является актуальной и заслуживающей пристального внимания проблемой. Исходя из вышесказанного, нами было предложено сочетанное использовании энтеросорбента Полисорб-ВП, биоцидного препарата Биопаг-Д и реологических средств (реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида) в качестве нового комплексного способа лечения заболевших диспепсией телят с коррекцией возникающих нарушений агрегации тромбоцитов (АТ) и их внутрисосудистой активации (ВАТ). Испытания указанного способа были проведены в рамках данной работы.

Цель работы. Определить биохимический статус новорожденных телят при сочетанном использовании энтеросорбента Полисорб-ВП, биоцидного препарата Биопаг-Д и реологических средств (реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида), применяемых для лечения диспепсии и коррекции патологической активации тромбоцитов.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи исследований:

1. Изучить изменения агрегации и внутрисосудистой активации тромбоцитов у новорожденных телят, больных диспепсией, по сравнению со здоровыми новорожденными телятами.
2. Установить влияние сочетанного использования энтеросорбента Полисорб-ВП, биоцидного препарата Биопаг-Д и реологических средств (реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида) на биохимический статус новорожденных телят, их клинико-физиологическое состояние, морфологические свойства крови.
3. Апробировать в промышленных условиях сочетанное использование энтеросорбента Полисорб-ВП, биоцидного препарата Биопаг-Д и реологических средств (реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида) в качестве способа лечения больных диспепсией телят с учетом необходимости коррекции нарушений АТ и ВАТ.

Научная новизна. Впервые изучено влияние сочетанного использования аПолисорба-ВП, Биопага-Д, реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида на биохимический статус новорожденных телят, их клинико-физиологическое состояние, морфологические свойства крови. Установлено, что при сочетанном использовании больным диспепсией новорожденным телятам указанных средств не наблюдается отрицательного влияния на белковый обмен, активность ферментов переаминирования, содержание общего билирубина и средних молекул, происходит снижение интенсивности пероксидного окисления липидов плазмы крови и тромбоцитов. Впервые изучены показатели АТ и ВАТ у новорожденных телят, больных простой и токсической диспепсией, в разные стадии болезни.

Теоретическая и практическая значимость работы. Дано биохимическое обоснование сочетанного использования энтеросорбента Полисорб-ВП, биоцидного препарата Биопаг-Д и реологических средств (реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида) в качестве способа лечения больных диспепсией новорожденных телят с коррекцией патологической активации тромбоцитов (патент РФ на изобретение № 2377995). Показана высокий терапевтический эффект и дана экономическая оценка использования предложенного способа для лечения больных телят.

На основе полученных данных по агрегации и внутрисосудистой активации тромбоцитов предложен новый способ прогнозирования развития токсической формы диспепсии у новорожденных телят с начальными признаками диспепсии (патент РФ на изобретение № 2419093).

На защиту выносятся следующие основные положения:

1. Индуцированная агрегация и внутрисосудистая активация тромбоцитов больных диспепсией новорожденных телят в разные стадии болезни.
2. Биохимический статус новорожденных телят, их клинико-физиологическое состояние, морфологические свойства крови при сочетанном использовании энтеросорбента Полисорб-ВП, биоцидного препарата Биопаг-Д и реологических средств (реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида).
3. Сочетанное использование энтеросорбента Полисорб-ВП, биоцидного препарата Биопаг-Д и реологических средств (реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида) в качестве способа лечения больных диспепсией новорожденных телят с коррекцией патологической активации тромбоцитов.

Апробация работы и публикации. Материалы диссертационной работы доложены и одобрены на: Международной научной конференции по патофизиологии животных, г. Санкт- Петербург, 10 - 12 мая 2006 г.; Международной научно-производственной конференции Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных, посвященной 100-летию со дня рождения профессора А.А. Авророва,а г. Воронеж, 22 - 23 июня 2006 г.; Международном научно-практическом конгрессе Актуальные проблемы ветеринарной медицины, г. Санкт-Петербург, 28 - 29 августа 2006 г.; Всероссийской научно-практической конференции Региональные проблемы повышения эффективности агропромышленного комплекса, г. Курск, 20 - 22 мая 2007 г.; Международной научно-практической конференции Актуальные проблемы ветеринарной медицины, посвященной 125-летию ветеринарии Курской области, г. Курск, 23 мая 2008 г.

По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ, в том числе 3 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК, и 1 монография. Получено 2 патента РФ на изобретения.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 150 страницах компьютерного текста и включает следующие разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, предложения для производства, список литературы, приложения. Список литературы состоит из 246 источников, в том числе 68 иностранных. Работа иллюстрирована 24 таблицами и 3 рисунками.

2. Материалы и методы исследований

Основным объектом исследования являлись новорожденные телята черно-пестрой породы до 10-дневного возраста при нормальном состоянии и с диспепсией. Работа проводилась в два этапа. На первом этапе ана базе ФГУП Учебно-опытное хозяйство Знаменское КГСХА имени профессора И.И. Иванова были изучены основные клинико-биохимические показатели, АТ и ВАТ новорожденных телят в норме и при диспепсии. Для этого по принципу аналогов с учетом происхождения, возраста и живой массы при рождении были сформированы 2 группы телят (рис.1). Условия содержания, кормления и ухода за животными были одинаковыми. Агрегационную функцию тромбоцитов (АТ) определяли визуальным микрометодом Шитиковой А.С. (1984). Внутрисосудистую активацию тромбоцитов аоценивали визуально с использованием фазовоконтрасного микроскопа (А.С. Шитикова, 1997). При этом определяли процентное соотношение различных в зависимости от активации форм тромбоцитов: дискоцитов, дискоэхиноцитов, сфероцитов, сфероэхиноцитов и биполярных форм тромбоцитов, а также производили подсчет суммы активных форм тромбоцитов, определяли число малых, средних и больших агрегатов на 100 свободных кровяных пластинок.

На втором этапе исследований на базе СХПК Имени Черняховского Курского района Курской области были проведены испытания сочетанного использования энтеросорбента, биоцидного препарата и реологических средств. Схема опыта второго этапа работы представлена в таблице 1.

Таблица 1 - Схема опыта второго этапа исследований

Группа	Количество голов в группе	Получаемое лечение	Дозировка препаратов
I	10	Препарат Биопаг-Д	0,1 мл 0,1%-ного раствора на 1 кг живой массы теленка 2 раза в сутки внутрь с молозивом-молоком
II	10	Препарат Биопаг-Д	0,1 мл 0,1%-ного раствора на 1 кг живой массы теленка 2 раза в сутки внутрь с молозивом-молоком
		Реополиглюкин с глюкозой	5 - 10 мл на 1 кг живой массы в сутки внутривенно
		Изотонический раствор натрия хлорида	50 - 400 мл на животное внутривенно
III	10	Энтеросорбент Полисорб-ВП	0,2 г/кг массы тела животного внутрь в виде водной взвеси за 1 час перед дачей молозива-молока или через 2 часа после кормления
IV	10	Энтеросорбент Полисорб-ВП	0,2 г/кг массы тела животного внутрь в виде водной взвеси за 1 час перед дачей молозива-молока или через 2 часа после кормления
		Реополиглюкин с глюкозой	5 - 10 мл на 1 кг живой массы в сутки внутривенно
		Изотонический раствор натрия хлорида	50 - 400 мл на животное внутривенно
V	10	Препарат Биопаг-Д	0,1 мл 0,1%-ного раствора на 1 кг живой массы теленка 2 раза в сутки внутрь с молозивом-молоком
		Энтеросорбент Полисорб-ВП	0,2 г/кг массы тела животного внутрь в виде водной взвеси за 1 час перед дачей молозива-молока или через 2 часа после кормления
		Реополиглюкин с глюкозой	5 - 10 мл на 1 кг живой массы в сутки внутривенно
		Изотонический раствор натрия хлорида	50 - 400 мл на животное внутривенно
VI	10	Тилан-50 (тилозин-50)	0,2 мл/кг внутримышечно 1 раз в сутки до выздоровления
		Отвар конского щавеля на изотоническом растворе натрия хлорида	Внутрь утром и вечером по 0,5 л

Биохимический статус новорожденных телят, их клинико-физиологическое состояние, морфологические свойства крови при сочетанном применении энтеросорбента Полисорб-ВП, биоцидного препарата Биопаг-Д, реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида, а также терапевтическая эффективность с учетом эффективности коррекции нарушений АТ и ВАТ предложенного способа была определена в сравнении с результатами от отдельного использования Полисорба-ВП, Полисорба-ВП + реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида; Биопага-Д; Биопага-Д + реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида и от лечения, применяемого в хозяйстве. Экспериментальные группы второго этапа исследований формировались из телят с начальными признаками диспепсии по принципу аналогов (с учетом возраста, массы тела и клинического состояния телят). Условия содержания, кормления и ухода для всех животных были одинаковыми.

Клинические исследования проводили общепринятыми методами с определением габитуса, температуры тела, исследования слизистых оболочек, кожи, лимфатических узлов и систем организма: кровообращения, дыхания, пищеварения, мочевой и нервной.

Морфо-биохимический анализ крови включал определение следующих компонентов: эритроцитов и лейкоцитов путем подсчета их в счетной камере Горяева; гематокритной величины - по Й. Тодорову (1963); количество общего белка - рефрактометрическим методом; белковых фракций - унифицированным методом электрофоретического разделения белков сыворотки крови в агаровом геле. Содержание средних молекул в плазме крови

определяли спектрофотометрически по методу Габриэляна Н.И., Липатовой Л.И. (1984). Интенсивность течения процессов пероксидного окисления липидов (ПОЛ) в плазме крови и отмытых и ресуспензированных тромбоцитах оценивали по концентрации малонового диальдегида (МДА) (А.А. Чиркин, 2002). Билирубин в сыворотке крови определяли по диазореакции (метод ЕндрассикаЦКлеггорнаЦГрофа); активность ферментов аспартатаминотрансферазы (АсАТ) и аланинаминотрансферазы (ААТ) в сыворотке крови устанавливали динитрофенилгидрозоновым методом (И.П. Кондрахин, 2004). Антиокислительную активность (АОА) плазмы крови и тромбоцитов определяли путем установления способности биологического материала тормозить окислительно-восстановительную реакцию в системе Fe2+ - 2,6-дихлорфенолиндофенол (2,6-ДХФИФ) (И.П. Кондрахин, 2004).а

Тромбоциты для исследования выделяли из богатой тромбоцитами плазмы дифференциальным центрифугированием.

Статистическую обработку данных производили на ПК с помощью программы Exсel из пакета прикладных программ MS Office 2003. Результаты представлены в виде среднего арифметического и стандартной ошибки. Достоверность различий между показателями устанавливали с помощью критерия Крамера-Уэлча (Д.А. Новиков, 2005) при заданном уровне значимости 0,05.

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Индуцированная агрегация и внутрисосудистая активация тромбоцитов клинически здоровых и больных диспепсией новорожденных телят

Средний показатель агрегации тромбоцитов клинически здоровых новорожденных телят с 1 по 10 сутки жизни составил: 29,921,16с для коллагена; 38,971,61с для АДФ; 41,021,61с для ристомицина и 97,054,01са для адреналина. Средние показатели внутрисосудистой активации тромбоцитов здоровых новорожденных телят оказались равными следующим величинам: 82,020,72 % - доля дискоцитов; 17,980,72 % - сумма активных форм тромбоцитов. Среднее содержание дискоэхиноцитов, сфероцитов, сфероэхиноцитов и биполярных форм тромбоцитов в крови здоровых новорожденных телят с 1 по 10 сутки жизни составило 10,270,42; 4,640,20; 2,570,08; 0,510,03 процентов соответственно. Среднее число малых агрегатов равнялось 3,590,14; а средних и больших агрегатов на 100 свободных тромбоцитов - 0,140,03.

В начале простой диспепсии установленные параметры агрегации тромбоцитов хотя и опережали средние показатели, но находились в пределах границ, свойственных здоровым новорожденным телятам. В разгар же болезни отмечалось более существенное усиление индуцированной агрегации со всеми используемыми агонистами. Так феномен снежной бури у больных диспепсией телят в простой форме в разгар болезниа наступал быстрее, чем в среднем у здоровых новорожденных особей на 4,62с при использовании коллагена; на 6,03с - с АДФ; на 4,85с - с ристомицином и на 21,52с быстрее при использовании адреналина. Ускорение составило 15,44; 15,47; 11,82 и 22,17 процента для коллагена, АДФ, ристомицина и адреналина соответственно (р?0,05). В стадию выздоровления параметры агрегации тромбоцитов телят, больных простой диспепсией, возвратились в границы, характерные для здоровых новорожденных особей, и составили 29,290,07с при применении коллагена; 37,060,07с при применении АДФ; 39,490,08с при применении ристомицина и 94,070,06с при применении адреналина.

При токсической диспепсии в начале болезни результаты агрегации тромбоцитов укладывались в рамки естественных колебаний, свойственных здоровым новорожденным телятам. Однако уже на данном этапе болезни проявлялось заметное усиление агрегации тромбоцитов. Так ускорение в сравнении с показателями АТ в начале простой диспепсией составило 0,66с при использовании коллагена; 0,83с - с АДФ; 0,77с - с ристомицином и 2,22с при применении адреналина или 2,33; 2,27; 1,99 и 2,43 процента соответственно (р?0,05). Но наиболее ярко нарушения агрегации тромбоцитов проявились в разгар токсической диспепсии, когда феномен снежной бури обнаруживался значительно раньше, чем у здоровых новорожденных телят. Так при использовании индуктора коллагена ускорение АТ происходило на 12,33с или 41,21%; с АДФ - на 15,94с или 40,90%; с ристомицином - на 16,91с или 41,22%; и при применении адреналина агрегация ускорялась на 39,98с или 41,19%. АТ в разгар токсической диспепсии наступала также быстрее (на 30,47; 30,08; 33,34 и 24,44 процента для коллагена, АДФ, ристомицина и адреналина соответственно), чем и в аналогичный период у телят с простой диспепсией, что свидетельствует о более глубоких изменениях функционирования тромбоцитов при данной форме болезни. Об этом говорит и тот факт, что в стадию выздоровления от токсической диспепсии установленные параметры агрегации тромбоцитов, равные 25,470,11с для коллагена; 34,130,14с для АДФ; 36,330,18с для ристомицина и 87,670,48с для адреналина, не возвращались к значениям начала болезни и соответственно отличались от данных здоровых новорожденных телят.

У телят с простой диспепсией отмеченные в начале болезни и в стадию выздоровления параметры ВАТ укладывались в пределы естественных колебаний здоровых новорожденных телят, тогда как показатели в разгар простой диспепсии выходили за эти пределы. При сопоставленииа со средними значениями здоровых телят в разгар простой диспепсии количество дискоцитов снижалось, а сумма активированных форм тромбоцитов увеличивалась на 3,22 %. При этом доля тромбоцитов с начальными признаками активации - дискоэхиноцитов возрастала на 1,83%; а более активированных сфероцитов и сфероэхиноциов - на 0,86 и 0,53 процента соответственно (р?0,05). Одновременно увеличивалось число малых агрегатов на 0,71 % и средних и больших агрегатов - на 0,26 % при р?0,05. Выявить зависящее от стадии заболевания изменение числа биполярных форм тромбоцитов при простой диспепсии не удалось. Их содержание составило 0,50 % и недостоверно отличалось от рассчитанного среднего показателя здоровых новорожденных телят.

При токсической диспепсии были обнаружены существенные сдвиги во внутрисосудистой активации тромбоцитов. По сравнению со здоровыми новорожденными телятами уже в начале токсической диспепсии отмечалось достоверное снижение на 2,45% числа интактных кровяных пластинок при одновременном увеличении на тот же процент суммы активных форм тромбоцитов, происходящем как за счет дискоэхиноцитов, так и за счет более активированных форм - сфероцитов и сфероэхиноцитов, а также биполярных тромбоцитов. Кроме того, в начале токсической диспепсии в 1,39 раза увеличилосьа число малых и в 5,07 раза - число средних и больших агрегатов на 100 свободных кровяных пластинок.а Описанные тенденции повышения внутрисосудистой активации тромбоцитов при токсической диспепсии усилились в разгар болезни, когда содержание дискоцитов снизилось, а сумма активированных форм тромбоцитов увеличилась на 15,02% в сопоставлении со средними данными здоровых новорожденных телят. При этом доля дискоэхиноцитов возросла на 6,31%; сфероцитов - на 5,07% и сфероэхиноцитов - на 3,43% при р?0,05. Биполярных форм в разгар болезни насчитывалось 0,710,18%, что соответствовало уровню в начале диспепсии. Число малых агрегатов составило 12,140,26; а средних и больших агрегатов насчитывалось 4,430,37 на 100 свободных тромбоцитов, что превышало средние показатели здоровых телят в 3,38 и 31,64 раза соответственно (р?0,05). В стадию выздоровления количество неактивированных дискоцитов повышалось до 78,330,42%, но еще оставалось существенно (на 3,69 %) ниже значений, свойственных здоровым новорожденным телятам. Сумма активных форм тромбоцитов в стадию выздоровления от токсической диспепсии снижалась до 21,670,42%, но была на 3,69 % больше средних значений здоровых телят. В этот периода болезни происходило также снижение числа малых агрегатов на 57,41 % и числа средних и больших агрегатов на 84,88 % от данных в разгар болезни (р?0,05).а

Из представленного выше материала видно, что при диспепсии (преимущественно в разгар болезни) происходит патологическая активация тромбоцитов: усиливается агрегационная функция с одновременными снижением в кровотоке доли дискоцитов и увеличением суммы активных форм тромбоцитов. У больных телят в кровотоке увеличивается число малых, средних и больших агрегатов на 100 свободных кровяных пластинок. Описываемые тенденции более отчетливо проявляются при токсической диспепсии. Кроме того, в стадию выздоровления от токсической диспепсии параметры агрегационной функции и внутрисосудистой активации тромбоцитов достоверно отличаются от таковых у здоровых новорожденных телят, т.е.а при выздоровлении от токсической диспепсии сохраняется повышенная функциональная активность тромбоцитов. В связи с чем возникает необходимость применять такое лечение заболевших диспепсией телят, которое кроме купирования диспепсии корректировало бы возникающую гиперактивность тромбоцитов. Апробирование такого лечения мы произвели в рамках второго этапа исследований.

3.2. Апробация в промышленных условиях сочетанного использования энтеросорбента Полисорб-ВП, биоцидного препарата Биопаг-Д и реологических средств (реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида)

Больным диспепсией новорожденным телятам применяли энтеросорбент Полисорб-ВП, биоцидный препарата Биопаг-Д, реополиглюкин с глюкозой и изотонический раствор натрия хлорида. Полисорб ВП - полифункциональный энтеросорбент на основе высокодисперсного кремнезема. Он обладает выраженными сорбционными и детоксикационными свойствами. В просвете желудочно-кишечного тракта препарат связывает и выводит из организма эндогенные и экзогенные токсические вещества различной природы. Биопаг-Д - антимикробный препарат, изготовленный на основе полигексаметиленгуанидин хлорида, имеет широкий спектр биоцидного действия: он эффективен против грамположительных и грамотрицательных бактерий, различного рода грибов. Реополиглюкин с глюкозой уменьшает вязкость крови, восстанавливает кровоток в мелких капиллярах, нормализует артериальное и венозное кровообращение, предотвращает и снижает агрегацию форменных элементов крови, оказывает дезинтоксикационное действие. Входящая в состав препарата глюкоза усиливает реологическое действие препарата и служит дополнительным источником энергии. Раствор натрия хлорида изотонический применяется при обезвоживании различного происхождения, в качестве дезинтоксикационного средства, при состояниях приводящих к дефициту ионов натрия, хлора. Хорошо совместим и рекомендуется для совместного использования с реополиглюкином.

В результате сочетанного применения указанных средств планировалось купировать основные признаки диспепсии (диарею, обезвоживание, интоксикацию), восполнить возникающий дефицит в организме ионов натрия, снизить повышенную интенсивность процессов пероксидного окисления липидов, скорректировать нарушения со стороны агрегации тромбоцитов и их внутрисосудистой активации.

Биохимический статус новорожденных телят, их клинико-физиологическое состояние, морфологические свойства крови при сочетанном применении указанных препаратов, а также терапевтическая эффективность с учетом эффективности коррекции нарушений АТ и ВАТ предложенного способа была определена в сравнении с результатами в группах животных при отдельном использовании Полисорба-ВП (I группа), Полисорба-ВП + реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида (II группа); Биопага-Д (III группа); Биопага-Д + реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида (IV группа) и от лечения, применяемого в хозяйстве (VI группа).

3.2.1. Биохимический статус больных диспепсией новорожденных телят при сочетанном использовании энтеросорбента Полисорб-ВП, биоцидного препарата Биопаг-Д и реологических средств (реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида)

В начале диспепсии содержание общего белка по группам подопытных телят колебалось от 57,350,53 до 59,980,47 г/л. При этом альбуминов насчитывалось от 25,770,87 до 26,570,88; альфа-глобулинов - от 10,290,85 до 11,140,53; бета-глобулинов - от 11,550,93 до 12,920,82 и гамма-глобулинов - от 9,190,66 до 9,650,81 г/л.

В разгар диспепсии во всех группах больных телят происходило увеличение содержания общего белка и его фракций (табл. 2).

В I группе уровень общего белка относительно начала диспепсии повысился на 6,99%, альбуминов - на 7,44%; альфа-глобулинов - на 7,01%; бета-глобулинов - на 4,54% и гамма-глобулинов - на 8,71%. Во II группе повышение составило 5,25% для общего белка и 5,90; 4,96; 3,33 и 7,25 процентов для альбуминов, альфа-глобулинов, бета-глобулинов и гамма-глобулинов соответственно. В III группе общий белок составил 63,12 г/л, что на 5,24% выше показателя в начале диспепсии. Содержание альбуминов в III группе увеличилось на 5,31%, альфа-глобулинов - на 6,81%; бета-глобулинов - на 2,25%; гамма-глобулинов - на 7,07%. В IV группе уровень общего белка повысился на 5,20%; альбуминов - на 5,37%; альфа-глобулинов - на 6,07%; бета-глобулинов - на 5,31% и гамма-глобулинов - на 4,56%. В V группе в разгар диспепсии содержание общего белка превысило значения начала болезни на 4,15%; альбуминов - на 4,06%; альфа-глобулинов - на 4,22%; бета-глобулинов - на 3,98% и гамма-глобулинов - на 4,57%. В VI группе подъем содержания общего белка составил 7,20%;а а по отдельным белковым фракциям повышение в сравнении с началом диспепсии составило 6,34; 11,08; 5,37 и 7,71 процентов для альбуминов, альфа-глобулинов, бета-глобулинов и гамма-глобулинов соответственно. Отмечаемая в разгар диспепсии гиперпротеинемия у телят всех групп обусловлена, по нашему мнению, развивающимся эксикозом. При этом чем выше гематокритная величина у телят, тем более выражено было повышение содержания общего белка и его фракций в крови.

Таблица 2. Содержание общего белка и белковых фракций в крови больных диспепсией телят исследуемых групп в разгар диспепсии

Группы животных	Показатели
	общий белок, г/л	альбумины, г/л	альфа-глобулины, г/л	бета-глобулины, г/л	гамма-глобулины, г/л
I (n=10) Биопаг	61,670,63	27,730,93	11,610,76	12,210,88	10,110,84
II (n=10) Биопаг + Реополи-глюкин с глюкозой + Физраствор	61,120,58	27,290,93	11,430,66	12,410,95	10,060,81
III (n=10) Полисорб	63,120,61*	27,980,90	11,770,64	13,210,92	10,150,79
IV (n=10) Полисорб + Реополи-глюкин с глюкозой + Физраствор	62,330,55	27,680,92	11,530,71	13,100,86	10,090,79
V (n=10) Биопаг + Полисорб + Реополи-глюкин с глюкозой + Физраствор	61,430,71	27,410,93	11,610,64	12,810,52	9,610,73
VI (n=10) контрольная	61,480,65	27,830,91	11,430,90	12,170,97	10,060,85

* - р?0,05 по сравнению с результатами в VI группе животных, находящихся на принятом в хозяйстве лечении

В стадию выздоровления уровень общего белка и его фракций (г/л) у всех телят снижался до следующих величин: 58,620,58 - 59,990,56 - общий белок; 26,080,83 - 26,830,89 - альбумины; 10,760,92 - 11,330,55 - альфа-глобулины; 11,880,79 - 12,860,85 - бета-глобулины; 9,370,67 - 9,640,78 - гамма-глобулины.

Белковый коэффициент (отношение альбуминов к глобулинам) во всех группах животных во все периоды диспепсии находился в пределах физиологических границ и колебался от 0,80 до 0,84.

Активность аспартатаминотрансферазы (нмоль/сл) в начале диспепсии у телят всех групп находилась в пределах 92,740,67 - 93,710,73 и по группам животных существенно не различалась. В разгар диспепсии активность АсАТ относительно начала болезни повышалась на 4,46% в I группе; 4,48% во II группе; 3,34% в III группе; 3,24% в IV группе; 2,26% в V группе и на 4,44% в VI группе. В стадию выздоровления происходило снижение активности АсАТ до 96,110,71 в I группе; 96,070,67 во II группе; 94,150,53 в III группе; 94,480,49 в IV группе; 93,210,57 в V группе и до 96,120,68 нмоль/сл в VI группе (табл. 3).

Таблица 3. Активность АсАТ у больных диспепсией телят исследуемых групп в разные стадии болезни

Группы животных	АсАТ, нмоль/сл
	начало диспепсии	разгар диспепсии	стадия выздоровления
I (n=10) Биопаг	93,710,73	97,890,76	96,110,71
II (n=10) Биопаг + Реополи-глюкин с глюкозой + Физраствор	93,560,77	97,750,77	96,070,67
III (n=10) Полисорб	92,740,67	95,840,71*	94,150,53*
IV (n=10) Полисорб + Реополи-глюкин с глюкозой + Физраствор	93,010,66	96,020,69*	94,480,49*
V (n=10) Биопаг + Полисорб + Реополи-глюкин с глюкозой + Физраствор	92,770,69	94,870,63*	93,210,57*
VI (n=10) контрольная	93,680,74	97,840,72	96,120,68

* - р?0,05 по сравнению с результатами в VI группе животных, находящихся на принятом в хозяйстве лечении

Активность аланинаминотрансферазы (нмоль/сл) от начала диспепсии к стадии выздоровления снижалась: в I группе от 83,400,61 до 83,030,55; во II группе от 83,110,75 до 83,010,68; в III группе от 82,020,63 до 81,120,59; в IV группе от 82,560,71 до 82,040,69; в V группе от 82,150,58 до 81,820,60 и в VI группе от 83,110,64 до 82,930,61.

Содержание в крови телят общего билирубина (мкмоль/л) в начале диспепсии колебалось от 4,590,33 до 4,710,22. В разгар болезни концентрация общего билирубина в сравнении с началом диспепсии повышалась на 3,83% у телят I группы; на 3,65%а во II группе; на 3,05% в III группе; на 3,47% в IV группе; на 1,30% в V группе и на 2,97% в VI группе. В стадию выздоровления уровень общего билирубина в крови снижался до 4,820,23 в I группе; 4,810,26 во II группе; 4,670,32 в III группе; 4,690,21 в IV группе; 4,610,26 в V группе и до 4,800,23 в VI группе (табл. 4).

Таблица 4. Содержание общего билирубина в крови больных диспепсией телят исследуемых групп в разные стадии болезни

Группы животных	Билирубин общий, мкмоль/л
	начало диспепсии	разгар диспепсии	стадия выздоровления
I (n=10) Биопаг	4,700,20	4,880,27	4,820,23
II (n=10) Биопаг + Реополи-глюкин с глюкозой + Физраствор	4,660,21	4,830,19	4,810,26
III (n=10) Полисорб	4,590,33	4,730,28	4,670,32*
IV (n=10) Полисорб + Реополи-глюкин с глюкозой + Физраствор	4,610,27	4,770,22	4,690,21*
V (n=10) Биопаг + Полисорб + Реополи-глюкин с глюкозой + Физраствор	4,620,29	4,680,19	4,610,26*
VI (n=10) контрольная	4,710,22	4,850,25	4,800,23

* - р?0,05 по сравнению с результатами в VI группе животных, находящихся на принятом в хозяйстве лечении

Описываемое повышение в разгар диспепсии активности АсАТ в крови телят всех групп является, на наш взгляд, малосущественным, поскольку не превышает верхних физиологических границ. А установленное снижение активности ААТ от начала болезни к стадии выздоровления полностью вписывается в характерныеаа для новорожденныхаа телятаа особенности функционирования ферментной системы печени (снижение активности ААТ с увеличением возраста). При этом важно, что и уровень общего билирубина в крови телят, хотя и повышался в разгар диспепсии, но оставался в пределах физиологических норм. Все это указывает на отсутствие выраженных нарушений в функциональной активности печени.

В начале диспепсии, установленная по концентрации малонового диальдегида, интенсивность пероксидного окисления липидов плазмы и тромбоцитов по группам телят достоверно не различалась. Аналогично и антиокислительная активность (чмин-1 10-3) плазмы и тромбоцитов в начале диспепсии по группам телят существенно не различалась и колебалась от 1,630,08 до 1,650,09 в плазме крови и от 1,790,07 до 1,820,11 в тромбоцитах.

В разгар болезни происходило увеличение концентрации малонового диальдегида как в плазме крови, так и в тромбоцитах при одновременном снижении в исследуемых образцах антиокислительной активности. Наиболее выраженной эта тенденция была в I и II группах больных телят, у которых концентрация МДА в плазме превысила значения начала диспепсии на 50,59% (в I группе) и 51,72% (во II группе).а В тромбоцитах увеличение содержания МДА составило 43,04 и 40,00 процентов дляа I и II группы соответственно. При этом АОА плазмы крови в I группе уменьшилась на 21,95%; а во II группе - на 22,70%. АОА тромбоцитов сократилась на 20,44% у животных I группы и на 18,99%а - у животных II группы. Самым низким рост интенсивности пероксидного окисления липидов был в V группе. У животных данной группы в разгар диспепсии концентрация МДА превысила значения начала болезни в плазме крови на 35,71%; а в тромбоцитах - на 29,49%. Антиокислительная активность плазмы крови у животных V группы в сравнении с началом диспепсииа была снижена на 12,43%; а АОА тромбоцитов - на 10,99%. В III группе концентрация МДА в плазме крови в разгар болезни была на 40,70% выше значений начала болезни, а концентрация МДА в тромбоцитах - на 37,18% выше. АОА плазмы крови и тромбоцитов животных данной группы была снижена на 17,58 и 15,39 процентов соответственно. В IV группе МДА в плазме крови в разгар диспепсии накопилось на 43,02% больше, чем в начале болезни; а в тромбоцитах - на 36,71% больше. При этом АОА плазмы крови была уменьшена на 18,29%; а АОА тромбоцитов - на 15,00%. У животных VI группы концентрация МДА в плазме крови в разгар диспепсии превысила значения начала болезни на 48,24%; а в тромбоцитах аналогичное превышение составило 38,75%. АОА плазмы крови и тромбоцитов у животных VI группы в разгар диспепсии была ниже начала болезни на 20,73 и 18,33 процента соответственно.

В стадию выздоровления показатель интенсивности ПОЛ (концентрация МДА) в плазме крови и тромбоцитах всех телят, участвующих во втором этапе исследований, снижался до значений, сопоставимых с началом диспепсии а(0,810,08 - 0,890,12 мкмоль/мл - содержание МДА в плазме; 0,740,05 - 0,790,07 мкмоль/мл - концентрация МДА в тромбоцитах). А антиокислительная активность (ч мин-110-3) плазмы и тромбоцитов в стадию выздоровленияа была существенно ниже, чем в начале болезни, и колебалась в следующих пределах: 1,500,08 Ц1,570,11 - АОа плазмы; 1,600,11 Ц1,700,16 - АОА тромбоцитов.

Уровень средних молекул с максимумом поглощения при 254 нм в крови телят в начале диспепсии по группам животных существенно не различался и составлял 0,390,03 - 0,410,04 усл.ед. В разгар диспепсии эндогенная интоксикация у телят всех групп относительно начала болезни достоверно усиливалась. Концентрация СМ254 составила 0,430,03 - в I и II группах; 0,410,02 - в III, IV и V группах и 0,420,03 усл.ед. - в VI группе, что превышало значения начала болезни на 7,50; 4,89; 5,13; 2,50; 2,50 и 5,00 процентов для I, II, III, IV, V и VI группы соответственно. В стадию выздоровления уровень СМ254 в крови телят всех групп снижался до 0,380,04 - в I группе; 0,360,03 - во II группе; 0,350,03 - в III группе; 0,330,02 - в IV группе; 0,320,02 - в V группе и 0,350,03 - в VI группе.

3.2.2. Влияние сочетанного использования энтеросорбента Полисорб-ВП, биоцидного препарата Биопаг-Д и реологических средств (реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида) на клинический статус и морфологические свойства крови больных диспепсией новорожденных телят

Исходные клиническое состояние и морфологические параметры крови по группам телят, участвующих во втором этапе исследований, существенно не различались. Температура тела больных диспепсией новорожденных телят в начале болезни колебалась от 39,200,04 до 39,310,08 ?С; частота сердечных сокращений в 1 минуту - от 124,700,94 до 125,800,81; а частота дыхания в 1 минуту - от 33,300,48 до 34,520,53. Эритроцитов в крови насчитывалось от 5,580,27 до 6,000,31 1012/л; лейкоцитов - от 8,440,30 до 8,700,33 109/л. Гематокритная величина находилась в пределах 39,430,29 - 39,680,35 об.%.

В разгар диспепсии происходило снижение температуры тела телят, участвующих в эксперименте, при одновременном увеличении частоты сердечных сокращений и дыхательных движений в 1 минуту. Наиболее выраженной эта тенденция была у телят первой, третьей и шестой групп, а менее выраженной - во второй, четвертой и пятой группах. С увеличением гематокритной величины повышалось содержание эритроцитов и лейкоцитов в крови больных телят. Эритроцитов в разгар диспепсии насчитывалось в I группе 6,830,31; во II группе - 6,810,28; в III группе - 6,920,30; в IV группе - 6,910,27; в V группе - 6,890,23 и в VI группе - 6,770,41 1012/л. Лейкоцитов содержалось 9,310,45 в I группе; 9,290,44 во II группе; 9,070,46 в III группе; 8,970,37 в IV группе; 8,720,27 в V группе и 9,020,39 109/л в VI группе. Гематокритная величина (об.%) наиболее высокой была в I группе животных (43,381,40); во II группе - равнялась 42,511,47; в III группе - 41,861,54; в IV группе - 41,430,93; в V группе - 40,180,32 и в VI группе - 41,791,66.

В стадию выздоровления во всех группах телят в сравнении с разгаром диспепсии повышалась температура тела, сокращались частота сердечных сокращений и дыхательных движений в 1 минуту. На фоне снижения гематокритной величины уменьшалось содержание эритроцитов и лейкоцитов. При этом температура тела располагалась на уровне 39,120,05 - 39,320,06 ?С. Частота сердечных сокращений в 1 минуту колебалась от 104,111,31 до 109,674,07; а частота дыхания в 1 минуту - от 30,000,67 до 31,831,05. Эритроцитов насчитывалось от 6,200,26 до 6,780,14 1012/л; лейкоцитов - от 7,910,17 до 8,290,27 109/л.

3.2.3. Влияние сочетанного использования энтеросорбента Полисорб-ВП, биоцидного препарата Биопаг-Д и реологических средств (реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида) на агрегацию и внутрисосудистую активацию тромбоцитов больных диспепсией новорожденных телят

В начале болезни показатели индуцированной агрегации во всех группах животных существенно не различались между собой и находились в границах, свойственных здоровым новорожденным телятам. В разгар болезни самой низкой и наиболее приближенной к значениям здоровых новорожденных телят была агрегационная функция тромбоцитов животных V группы, которым комплексно применяли энтеросорбент Полисорб-ВП, биоцидный препарат Биопаг-Д, реополиглюкин с глюкозой и изотонический раствор натрия хлорида. У них индуцированная агрегация равнялась с коллагеномаа 26,551,16; с АДФ - 33,171,61; с ристомицином - 36,261,61 и с адреналином - 75,633,24с. Замедление в сравнении с показателями VI контрольной группы составило 15,53% для коллагена; 10,75% для АДФ; 11,47% для ристомицина и 8,09% для адреналина (р?0,05). Агрегация тромбоцитов в стадию выздоровления по всем группам животных находилась в пределах, свойственных здоровым новорожденным телятам.

При определении исходного состояния внутрисосудистой активации тромбоцитов было установлено, что доля интактных дискоцитов, сумма активных форм тромбоцитов и число агрегатов кровяных пластинок различного размера различались несущественно. В разгар болезни максимальная доля интактных тромбоцитов отмечалась у телят V группы, комплексно получавших Полисорб-ВП, Биопаг-Д, реополиглюкин с глюкозой и изотонический раствор натрия хлорида . В их кровотоке содержалось 80,100,85% дискоцитов, а сумма активных форм кровяных пластинок составила 19,900,85%. Дискоэхиноцитов насчитывалось 11,300,54%, сфероцитов - 5,200,31% и сфероэхиноцитов - 2,900,23%, что на 2,20; 1,70 и 1,10 процента соответственно ниже, чем у животных VI контрольной группы. Число малых агрегатов по сравнению с контролем было уменьшено в 1,68 раза, а средних и больших - в 6,96 раза.а Содержание биполярных форм кровяных пластинок в разгар диспепсии по группам животныха достоверно не различалось. В стадию выздоровления во всех группах животных происходила коррекция внутрисосудистой активации тромбоцитов по количеству дискоцитов и сумме активных форм тромбоцитов, однако наиболее приближенными к оптимальным значениям здоровых телят были параметры, полученные в V группе, где животных лечили сочетанным применением энтеросорбента, биоцидного препарата и гемореологических средств.

4. ВЫВОДЫ

1. У больных диспепсией новорожденных телят в сравнении с клинически здоровыми телятами происходит патологическая активация тромбоцитов: АТ в разгар простой диспепсии усиливается на 15,44% при применении коллагена; на 15,47% при применении АДФ; на 11,82% при использовании ристомицина и на 22,17% при использовании адреналина; в разгар токсической диспепсии аналогичное усиление составляет 41,21%; 40,90%; 41,21% и 41,19% для коллагена, АДФ, ристомицина и адреналина соответственно.
2. В кровотоке больных диспепсией новорожденных телят в сравнении со здоровыми телятами увеличивается сумма активированных тромбоцитов на 3,22% при простой диспепсии и на 15,02% при токсической диспепсии. Число малых агрегатов тромбоцитов возрастает на 0,71% при простой и в 3,38 раза при токсической диспепсии, а число средних и больших агрегатов - на 0,26% и в 31,64 раза при простой и токсической диспепсии соответственно.
3. Сочетанное использование энтеросорбента Полисорб-ВП, биоцидного препарата Биопаг-Д и реологических средств (реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида) не влияет отрицательно на клинический статус, морфологические свойства крови, белковый обмен, активность ферментов переаминирования (АсАТ, ААТ) и содержание общего билирубина в крови больных диспепсией новорожденных телят.
4. При сочетанном использовании энтеросорбента Полисорб-ВП, биоцидного препарата Биопаг-Д и реологических средств (реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида) происходит снижение в сравнении с контролем интенсивности пероксидного окисления липидов (содержания МДА) плазмы крови и тромбоцитов на 9,52% и 9,01% соответственно.
5. При сочетанном использовании энтеросорбента Полисорб-ВП, биоцидного препарата Биопаг-Д и реологических средств (реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида) наблюдаются 90%-ный атерапевтический эффект и максимальная в сравнении с контролем коррекция нарушений со стороны агрегации тромбоцитов и их внутрисосудистой активации: АТ снижается на 15,53% при использовании коллагена; 10,75% при применении АДФ; 11,47% при добавлении ристомицина и на 8,09% при использовании адреналина. Сумма активированных тромбоцитов уменьшается на 5,00%; число малых агрегатов сокращается в 1,68 раза, а средних и больших - в 6,96 раза. Однако полного устранения функциональной гиперактивности кровяных пластинок не наступает. а

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Сочетанное применение энтеросорбента Полисорб-ВП, антимикробного препарата Биопаг-Д, реополиглюкина с глюкозой и изотонического раствора натрия хлорида может применяться в качестве эффективного способа лечения больных диспепсией новорожденных телят с коррекцией возникающих нарушений агрегации и внутрисосудистой активации тромбоцитов (патент РФ на изобретение № 2377995).

2. Предложен способ прогнозирования развития токсической формы диспепсии у новорожденных телят с начальными признаками диспепсии (патент РФ на изобретение № 2419093). При выявлении у новорожденных телят с начальными признаками диспепсии ускорения агрегации тромбоцитов свыше 7% от контроля можно прогнозировать развитие токсической диспепсии.

3. Разработаны и опубликованы Практические рекомендации по применению гуанидинсодержащих препаратов в ветеринарии.

Список опубликованных работ

* - работы, опубликованные в рекомендованных ВАК РФ изданиях

1. Наумов, М.М. Способ ранней диагностики, своевременного лечения и профилактики нарушения пищеварения и задержки развития у новорожденных телят при диспепсии / М.М. Наумов, С.М. Сулейманов, И.Н. Медведев, Е.В. Баскаков, М.Н. Павлов // Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных: мат-лы междунар. научн.-производ. конф., г. Воронеж, 22 - 23 июня 2006 г. - Воронеж, 2006. - С. 739 - 742.
2. Медведев, И.Н. Перспективы применения энтеросорбентов при желудочно-кишечной патологии у новорожденных телят / И.Н. Медведев, М.М. Наумов, М.Н. Павлов // Актуальные проблемы ветеринарной медицины: мат-лы междунар. научн.-практ. конгресса., г. Санкт-Петербург, 28 - 29 августа 2006 г. - СПб, 2006. - С. 156 - 159.
3. *Медведев, И.Н. Агрегационная активность тромбоцитов у новорожденных телят с диспепсией / И.Н. Медведев, И.А. Горяинова, М.М. Наумов, М.Н. Павлов // Известия Тимирязевской сельскохозяйственной академии. - 2006. Ца № 4. - С. 172 - 176.
4. Практические рекомендации по применению гуанидинсодержащих препаратов в ветеринарии / Сост. А.Ю. Айдиев, М.М. Наумов, И.Н. Медведев ... М.Н. Павлов. - Курск: Изд-во ЦР Лоцман, 2007. - 28 с.
5. аНаумов, М.М. Функциональная гиперактивность тромбоцитов новорожденных телят как патогенетический аспект диспепсии / М.М. Наумов, М.Н. Павлов // Актуальные проблемы ветеринарной медицины: мат-лы междунар. научн.-практ. конф., г. Курск, 22 - 23 мая 2008 г. - Курск, 2008. - С. 274 - 278.
6. Полимерные биоциды-полигуанидины в ветеринарии / М.М. Наумов, Л.А. Жукова, З.Д. Ихласова, М.Н. Павлов и др. - Курск: Изд-во Курск. гос. с/х. ак., 2010. - 84 с.
7. *Наумов, М.М. Уровень эндогенной интоксикации и функционирование системы антиоксидантной защиты у больных диспепсией новорожденных телят при комплексной терапии / М.М. Наумов, М.М. Павлов // Вестник Курской государственной сельскохозяйственной академии. - 2010. Ца № 4. - С. 70 - 72.
8. *Наумов, М.М. Активность ферментов переаминирования и содержание общего билирубина в крови новорожденных телят при комплексной терапии / М.М. Наумов, М.М. Павлов // Вестник Курской государственной сельскохозяйственной академии. - 2011. Ца № 6. - С. 71 - 72.

Патенты РФ

• аСпособ лечения больных диспепсией новорожденных телят с коррекцией патологической активации тромбоцитов / М.М. Наумов, М.Н Павлов // Патент РФ на изобретение № 2377995. Приоритет от 16.06.2008. Опубл.10.01.2010. Бюл. № 1.
• Способ прогнозирования развития токсической формы диспепсии у новорожденных телят с начальными признаками диспепсии / М.М. Наумов, М.Н Павлов // Патент РФ на изобретение № 2419093. Приоритет от 18.11.2009. Опубл.20.05.2011. Бюл. № 14.
     Авторефераты по темам  >>  Разные специальности - [часть 1]  [часть 2]