Geum.ru

Цитофизиологические особенности крови промысловых рыб Волго-Каспийского канала

Вид материалаАвтореферат
Анализ физиологического состояния рыб в зависимости от состояния гематологических показателей и инвазированности паразитами
Общее среднее
В летний период
3.3. Анализ физиологического состояния организма леща европейского
Анализ состояния периферической крови исследованных особей леща
Общее среднее
Анализ патоморфологических изменений в структуре эритроцитов леща
Подобный материал:
1   2   3
Глава 3. Анализ физиологического состояния рыб в зависимости от состояния гематологических показателей и инвазированности паразитами

3.1. Типы патологических изменений форменных элементов периферической крови промысловых рыб Волго-Каспийского канала

При анализе мазков крови среди нормальных клеточных элементов, были установлены разнообразные типы отклонений их структуры. Присутствие их в составе периферической крови с определённой статистической частотой рассматриваются как свидетельство проявления хронического токсикоза организма рыб В-К канала. Характерными патологическими изменениями структуры эритроцитов крови, обнаруженными при анализе мазков крови промысловых рыб, были следующие: пойкилоцитоз (появление в крови эритроцитов различной формы); анизоцитоз (разноразмерность); нарушение осморезистентности мембраны клетки; псевдоагглютинация; цитолиз (разрушение эритроцитов); ядра-тени; вакуолизация.

Среди нарушений структуры ядер эритроцитов установлены следующие: хроматинолиз (уменьшение видимого количества хроматина, ядро окрашено в светлые тона, контуры его сохраняются); протуберанцы кариоплазмы во внутриклеточное пространство; гиперхроматоз стенки ядра эритроцитов (ядра имеют форму кольца, контур четко окрашен, центр ядра светлый, за счет концентрации хроматина по периметру ядра); кариолизис; кариорексис; инвагинация ядра; деформация ядра; пристеночные ядра; эксцентричные ядра (ядро смещено от центра); шистоцитоз; амитоз. Отмеченные нарушения, относимые ранее к артефактам, в условиях В-К канала в настоящее время представляют собой реальные этапы гематологических процессов. Так, появление фестончатых краев эритроцитов, ядерных теней, безъядерных эритроцитов, по-видимому, есть последовательные звенья одной цепи. Аналогичное мнение высказано ранее Житеневой Л.Д., 1999.


3.2. Оценка физиологического состояния особей судака обыкновенного (Stizostedion lucioperca) по состоянию показателей крови и инвазированности паразитами

Исследование инвазированности судака Волго-Каспийского бассейна показало, что паразитические сообщества были представлены 16 видами гельминтов, относящихся к 7 классам. Частота встречаемости особей, зараженных гельминтами за период исследования, в среднем составляла 98,0 % весной и 96,0 % осенью, т.е. практически вся рыба была заражена паразитами. Отмечено незначительное снижение уровня заражения рыб паразитами к осени. Паразитирование гельминтов в организме судака может отражаться на изменении параметров периферической крови. Обнаружена корреляционная зависимость между паразитированием в организме судака гельминтов и изменением параметров периферической крови рыб. Паразитирование отдельных гельминтов вызывало снижение количества эритроцитов в объеме крови (R=-0,57 при р<0,05), увеличение содержания гемоглобина в крови (R=+0,60, р<0,05), повышение содержания Нф (R=+0,53 при р<0,05) и Пэф (R=+0,67 при р<0,05), увеличение абсолютного количества лейкоцитов литре крови (R=+0,51, р<0,05), что является ответной реакцией организма, направленной на нейтрализацию неблагоприятного эндогенного воздействия.

Показатели периферической крови судака приведены в таблице 3.2.1. Осенью 2006 г. отмечено недостаточное содержание гемоглобина и общего количества эритроцитов в литре крови судака. При этом наблюдались относительно низкие показатели СОЭ. В 2007 году было отмечено повышенное содержание гемоглобина у большинства исследованных рыб в летний (48%) и осенний (48%) периоды исследования. Количество эритроцитов было на достаточном уровне у 56% исследованных рыб летом и 52% рыб осенью. Концентрация гемоглобина в крови особей судака в 2008 году была достоверно ниже его уровня в 2007 году (при р<0,05). Данные, приведённые в табл. 3.2.1, свидетельствуют о некотором снижении содержания гемоглобина и количества эритроцитов в литре крови рыб летом и осенью 2008 года в сравнении с аналогичными периодами 2007 года.

Таблица 3.2.1

Показатели крови, отражающие физиологическое состояние

особей судака В-К канала

Показатели крови:
Условная норма
2006
2007
2008
Среднее
Общее среднее

M±m

Осень

M±m
Лето

M±m
Осень

M±m
Лето

M±m
Осень

M±m
Лето

M±m
Осень

M±m

Hb, г/л
70,0-72,0
61,9±2,2
76,2±2,8
75,0±2,2
63,8±1,9
66,9±1,2
70,0±2,3
67,9±2,2
69,0±2,3*

СОЭ, мм



1,8±0,2
1,6±0,2
1,5±0,1
1,0±0,1
1,5±0,1
1,3 ± 0,1
1,6±0,2
1,4±0,2

СГЭ, пг
22,4-42,2
46,3±2,6
38,0±1,5
39,5±1,6
39,0±1,2
38,1±1,2
38,5±1,3
41,3±1,8
39,9±1,6*

Колич.

эритроцитов *1012 в л
Лето:

1,67-1,72 Осень

1,70-1,85
1,30±0,10
1,88±0,08
1,84±0,08
1,54±0,06
1,64±0,05
1,71±0,07
1,59±0,08
1,65±0,07*

Колич.

лейкоцитов *109 в л
35,0-95,0
-
89,5±12,3
90,0±10,9
149,2±16,9
69,2±7,4
119,3±14,6
79,6±9,1
99,5±11,9

ПЭФ, %
3,0
0,4±0,2
0,1±0,09
0,04 ± 0,03
0,0
0,2±0,08
0,07±0,04
0,2±0,05
0,13±0,05

ЭФ, %



0,5±0,20
0,09±0,07
0,0
0,36±0,15
0,08±0,06
0,23±0,11
0,19±0,09
0,21±0,09

НФ, %
0,1-2,0
4,0±1,30
9,8±2,50
11,9±4,4
2,70±1,07
1,74±0,36
6,25±1,79
5,88±2,02
6,06±1,90

ЛФ, %
86,4
93,0±1,30
86,0±3,10
84,7±5,0
96,3±1,1*
97,5±0,4
91,1±2,1
91,7±2,2
91,4±2,2*

Молодые лейкоциты

%
-
0,0
3,1±0,7
0,0
0,02±0,02
0,10±0,04
1,56±0,36
0,03±0,01
0,83±0,19

Мн, %
2,1
0,1±0,06
0,5±0,48
3,4±0,7
0,68±0,20
0,56±0,13
0,6±0,34
1,35±0,3
0,98±0,32

Повышение количества Нb и Эр может зависеть от воздействия многих токсических факторов, к этому может приводить также нехватка кислорода в воде. Насыщение эритроцита гемоглобином (СГЭ, пг) во все периоды исследования соответствовало норме.

«Белая» кровь исследуемых особей судака носила ярко выраженный лимфоидный характер. Гранулярные формы лейкоцитов были представлены псевдоэозинофилами (Пэф), эозинофилами (Эф) и нейтрофилами (Нф). Агранулярные формы: моноцитами (Мн), лимфоцитами (Лф). Особенности в соотношении различных форм лейкоцитов в периферической крови судака осенью 2006 г. были представлены относительно невысоким содержанием фагоцитов (моноциты, палочкоядерные, сегментоядерные нейтрофилы), что может объясняться физиологическими особенностями рыб. Абсолютное количество лейкоцитов в крови рыб на протяжении 2007 г. было в пределах нормы. Анализ иммунограммы показал, что весной 2007 г. у рыб наблюдалась выраженная моноцитопения. Низкий процент моноцитов в лейкограмме может быть связан с тем, что основная масса моноцитов сконцентрировалась в очагах воспаления, трансформируясь в макрофаги, что часто наблюдается при длительном воздействии неблагоприятных факторов среды (Житенева Л. Д. и другие, 2004). Количество нейтрофилов было повышенным, но они были на стадии молодой клетки имеющей слабую функциональную активность. Осенью 2007 г. наблюдался моноцитоз и нейтрофилия, проявляющиеся на фоне снижения содержания остальных клеток гранулярного ряда. Это может свидетельствовать о неблагоприятном состоянии организма рыб и иммунологической недостаточности. Изменения в соотношении различных форм лейкоцитов в 2008 г. были представлены значительным повышением количества лимфоцитов, на фоне снижения эозинофилов и моноцитов, хотя количество нейтрофилов колебалось в пределах нормы, также как и в 2007 г. отмечали их слабую фагоцитарную активность. Деструктивные изменения нейтрофилов (вакуолизация цитоплазмы) охватывали не более 0,1 % клеток на мазке крови у 3,0 % исследованных особей. Зрелые лимфоциты были представлены, в основном, клетками узкоплазменной формы. У отдельных рыб в 2008 г. (20,0 % весной, 48,0 % осенью) отмечали явление кариолиза в лимфоцитах в яркой форме (рис. 3.2.1).


Рисунок 3.2.1. Кариолиз лимфоцитов судака обыкновенного В-К канала (осень 2008г.).

ув. × 1000

Подобные деструктивные изменения ядерных структур могут быть спровоцированы наличием токсических агентов в организме, а также при заболеваниях (вирусные, паразитарные). Исследованные особи судака были неоднородны по характеру гематологических показателей, что может быть обусловлено индивидуальной резистентностью их организма.

Гематологические показатели находятся в тесной связи с возрастом и стадиями зрелости гонад рыб, отражая физиологическое состояние их организма. По мере созревания гонад наблюдается изменение ряда гематологических показателей, отмечено повышение гемоглобина, СГЭ, количество лейкоцитов в пересчете на литр крови, это было отмечено ранее и другими авторами (Житенева Л.Д., 1986; Головина Н.А., 1997). После нереста (VI-II СЗГ) отмечено снижение гемоглобина, СГЭ и СОЭ. У самок после нереста возросло количество Нф, что, вероятно, объясняется резорбцией остаточных ооцитов и пустых фолликулов. Повысилось количество моноцитов, что возможно связано с участием этих клеток в процессе овуляции, они выделяют ферменты, обеспечивающие освобождение созревших яйцеклеток фолликула (Житенева Л.Д., 1987; Иванов А.А., 2003), и, в среднем, у самок отмечено повышенное количество моноцитов (0,64%) по сравнению с самцами (0,18%). Установлено, что у самок, находящихся на II СЗГ и, в среднем, количество гемоглобина было выше. У самцов количество эритроцитов и лейкоцитов в пересчете на литр крови рыб ниже, чем у самок. Полученные результаты свидетельствуют, что организм рыб обладает большими компенсаторными возможностями. Физиологическое состояние организма рыб, его ослабление проявляется в зависимости от зрелости гонад. Значительные отклонения большинства показателей крови от условной нормы, можно рассматривать не только как естественные изменения. Значительное количество патологических изменений показателей крови связано с проявлением хронического токсикоза рыб.

Таблица 3.2.2

Типы цитопатологических нарушений в эритроцитах судака В-К канала

Основные типы нарушений
Количество особей (%) с нарушениями структуры клеток

от общего количества обследованных рыб

2006
2007
2008
Среднее

Осень
Лето
Осень
Лето
Осень
Лето
Осень

Пойкилоцитоз

32,0*
78,0*
46,0*
88,0**
72,0*
83
50

Анизоцитоз

8,0*
74,0*
25,0*
92,0**
84,0**
83
39

Агглютинация
12,0*
17,0*
8,0
68,0*
8,0*
42
23

Изменение внешней плазматической мембраны
76,0**
96,0**
83,0*
72,0*
52,0*
84
70

Смещение ядер к периферии
0,0
100,0
100,0
60,0*
28,0*
80
64

Пикноз
0,0
43,0*
0,0
68,0*
52,0*
55
26

Деформация ядер
32,0*
56,0*
71,0*
0,0
0,0
28
34

Кариорексис
20,0*
56,0*
21,0*
76,0*
56,0*
66
32

Инвагинация ядра
0,0
56,0*
96,0**
76,0*
48,0*
66
72

Разрушение клетки
0,0
70,0*
92,0**
76,0*
36,0*
73
64

Ядра-тени
0,0
65,0*
42,0*
100,0
52,0*
82
47

Хроматинолиз
0,0
56,0**
4,0
16,0*
8,0*
36
6

Ядра-кольца
0,0
0,0
0,0
56,0*
28,0*
-
-

Протуберанцы
-
-
-
16,0*
16,0*
-
-

Вакуолизация цитоплазмы
0,0
22,0*
37,5*
48,0*
4,0
35
21

Кариолиз
0,0
17,0*
4,0
44,0*
12,0*
30
8

Шистоциты
4,0
9,0*
25,0*
0,0
0,0
9
14

Амитоз
32,0*
13,0*
8,0
44,0*
12,0*
28
17

Амитоз – деление только ядра
0,0
13,0*
21,0*
8,0*
12,0*
10
16

Количество исследованных рыб
25
23
24
25
25
24
25

Примечание: * - р<0,05; ** -р<0,01 (р – достоверность доли, уровень значимости)

В периферической крови особей судака были обнаружены изменения в структуре эритроцитов, отличающиеся степенью проявления патоморфологических нарушений (табл. 3.2.2). К их числу относится: пойкилоцитоз эритроцитов, который отмечен во все сезоны исследования, в основном, их полиморфностью (максимально до 15,0 % клеток на мазке). Отмечены клетки грушевидной, серповидной, ромбовидной формы. Патологическая форма эритроцитов с отростками (характерна для угнетения эритропоэза) встречалась единично, у отдельных особей, независимо от сезона исследования. Снижение эластичности клеточной мембраны эритроцитов косвенно указывает на изменение её осмотических свойств. У одной особи (2008 г.) пойкилоцитоз охватывал до 72,0 % эритроцитов. У этой особи судака отмечено максимальное количество трематод Rossicotrema donicum (90 экз.), поражающих покровы тела. У всех исследованных рыб нарушения эритроцитарной мембраны проявлялись гемагглютинирующим эффектом без явных признаков деструкции. Этот показатель значительно снижался (до 8,0 %) осенью. Подобные явления, как правило, являются результатом действия неблагоприятных факторов как вне, так и внутри организма (интоксикация различной этиологии).

В летний период исследования отмечено увеличение доли рыб с эритроцитами, имеющими морфологические нарушения. Так, доля (%) рыб с эритроцитами меньшего диаметра в сравнении с нормоцитами, по отношению к общему количеству обследованных особей в 2007 и 2008 гг. возрастала в весенне-летний период относительно осени. Наличие микроцитов в периферическом русле не превышало 5,2 % от общего пула эритроцитов у отдельных особей и отражало относительно нормальный процесс гемопоэза судака. К числу патоморфологических изменений на мазках крови относятся эритроциты в стадии разрушения.








Рисунок 3.2.2. Разрушение эритроцитов (судак, осень 2008), ув.×1000







Рисунок 3.2.3. Тени эритроцитов (судак, осень 2008), ув. х1000

У отдельных особей в 2007 г., отмечен высокий уровень цитолиза клеток крови (57% от общего числа исследованных клеток указанных экземпляров рыб) (рис. 3.2.2). В остальные периоды исследования встречаемость данного типа отклонений на мазках крови была не высокой, хотя и данное нарушение отмечали более чем у половины исследованных рыб. В 2007 и 2008 гг. в периферической крови рыб регистрировали разрушившиеся эритроциты (полный лизис). В летний период 2008 г. у всех исследованных особей рыб на мазках крови, регистрировали ядра-тени (рис. 3.2.3).

Деструктивные изменения эритроцитов были представлены деформацией, пикнозом ядра. Явление кариорексиса, хроматинолиза, гиперхроматоза стенки ядра (ядра-кольца), кариолиза с явлениями близкими фрагментозу (ареол хроматина вокруг ядра, «протуберанцы» кариоплазмы во внутриклеточное пространство) чаще отмечали в летний период (рис. 3.2.4.).


Рисунок 3.2.4. Доля особей судака (%) с нарушениями

в эритроцитах крови




Подобные патологические изменения ядра встречаются при различных повреждениях клетки. Изменение коллоидно-осмотического состояния ядра и цитоплазмы происходит вследствие торможения транспорта веществ через внешнюю плазматическую мембрану клетки (Шиффман Ф. Дж., 2001). На мазках крови были отмечены эритроциты в стадии амитоза. Уменьшение частоты встречаемости и интенсивности проявления цитопатологических изменений к осени (рис. 3.2.4.) может свидетельствовать: о некоторой стабилизации токсикологической и гидрохимической обстановки водной среды в осенний период, о более благополучном физиологическом состоянии рыб в результате летнего нагульного периода. Этому способствовало и небольшое снижение количества полостных паразитов рыб осенью.


Рисунок 3.2.5.

Доля особей судака с цитопатологическими отклонениями (средний %)

в эритроцитах крови



В период с 2007 по 2008 гг. возросло количество рыб с нарушениями в структуре ядра эритроцитов (рис. 3.2 5), кариорексис, хроматинолиз, кариолиз. С 2006 по 2008 гг. возрастает количество (% особей рыб) со структурными нарушениями в эритроцитах: пойкилоцитоз, разноразмеренность. Такие нарушения эритроцитарной мембраны возникают при контакте с токсическими веществами, обладающими повреждающим действием.

Согласно данным токсикологической характеристики воды Волго-Каспийского канала, в период с 2006 по 2009 гг. было отмечено увеличение содержания в воде некоторых токсических компонентов: марганец, нефть и др. (Ежегодник. «Качество поверхностных вод», 2007; 2008; 2009).

Большинство показателей цитопатологических изменений в количественном отношении не выходили за пределы «условной нормы». Однако, большое разнообразие форм патологических изменений, связанных с проявлением хронического токсикоза в виде нарушений структуры ядра эритроцитов и высокое их общее (суммарное) количество, создаёт общую неблагоприятную картину физиологического состояния рыб.


3.3. Анализ физиологического состояния организма леща европейского (Abramis brama) Волго-Каспийского канала по гематологическим показателям и инвазированности паразитами

Исследование инвазированности особей леща Волго-Каспийского бассейна по сезонам года с 2006 г. по 2008 г., показало, что паразитические сообщества были представлены 16 видами гельминтов, относящихся к 6 классам, степень инвазии рыб во всех случаях соответствовала бессимптомному паразитоносительству. Ни в одном из исследованных случаев инвазия не сопровождалась наличием необратимых видимых патологических изменений. Интенсивность поражения рыб не достигала летального порога, однако почти все особи леща (весной 96 %) были заражены паразитами. Исследованием установлено существование корреляционной зависимости между паразитированием в организме леща гельминтов и изменением некоторых параметров периферической крови рыб (также как и для судака). Следовательно, паразитирование гельминтов в организме леща отражается непосредственно на изменении параметров периферической крови рыб.

Анализ состояния периферической крови исследованных особей леща осенью 2006 года обнаружил пониженное (недостаточное) содержание гемоглобина и количества эритроцитов в одном литре периферической крови особей леща (табл. 3.3.1.). У этих же рыб был отмечен относительно низкий уровень СОЭ. В 2007 году, как и в 2006, было отмечено пониженное содержание гемоглобина. Насыщение эритроцита гемоглобином (СГЭ) было достаточно низким. При этом наблюдался низкий уровень СОЭ у этих же рыб. Количество эритроцитов в литре крови находилось в пределах нормы. В 2008 году отмечено недостаточное содержание гемоглобина и уровень СОЭ. Количество эритроцитов в литре крови весной было незначительно выше условной нормы, а осенью - ниже. Преобладающими клетками в составе белой крови рыб являются лимфоциты, которые составляли у отдельных особей до 100 % всех лейкоцитов, но средний уровень их был в пределах нормы (Справочник…, 1986, Методические указания…, 1974, 1999; Эколого-гематологические характеристики, 1997). Общее количество лейкоцитов в литре крови леща в течение исследования было в пределах нормы. Однако, в лейкограмме выявлены существенные различия в составе популяций клеток. В период с 2006 по 2008 гг. отмечено понижение содержания псевдобазофилов в крови рыб, количество псевдоэозинофилов увеличилось с 2006 по 2008 гг., но всегда находилось в пределах нормы. На фоне снижения нейтрофилов из года в год и относительно условной нормы, происходило увеличение доли клеток лимфоидного ряда как относительно нормы, так и с 2006 по 2008 год.

Таблица 3.3.1.

Показатели крови, отражающие физиологическое состояние особей леща

Показатели крови:

Условная норма
2006
2007
2008
Среднее

по сезонам
Общее среднее

M±m

Осень

M±m
Весна

M±m
Осень

M±m
Весна

M±m
Осень

M±m
Весна

M±m
Осень

M±m

Hb, г/л
92,0-101,0
75,9±3,8
79,7±2,2
88,1±4,3
82,8±3,0
82,8±4,6
81,2±2,6
82,3±4,2
81,8±3,4*

СОЭ, мм
4,7
2,5±0,3
2,7±0,4
2,1±0,2
3,6±0,3
0,5±0,07
3,2±0,4
1,7±0,2
2,4±0,3

Колич.

эритроцитов

*1012 в л
1,36
1,11±0,11
1,35±0,04
1,38±0,08
1,51±0,1
1,1±0,09
1,43±0,07
1,20±0,09
1,31±0,08

СГЭ, пг
70,2
70,4±9,0
52,9±1,4
58,8±3,8
54,9±3,4
73,7±5,1
53,9±2,4
67,7±5,9
60,8±4,2

Колич. лейкоцитов *109 в л
45,0-120,0
-
65,5±7,7
80,3±9,9
72,7±7,4
77,4±11,0
69,1±7,5
78,8±6,9
74,0±7,3

ПЭФ, %
4,9
1,73±0,40
1,71±0,32
2,0±0,57
0,05±0,03
2,52±1,86
0,88±0,17
2,08±0,9
1,48±0,56

ПБФ, %



10,38±1,2
2,62±0,69
0,9±0,27
0,6±0,14
0,12±0,06
1,61±0,41
3,8±0,51
2,70±0,46

НФ, %
5,5-14,4
4,96±0,69
7,5±1,25
3,0±0,4
3,0±0,44
2,8±0,56
5,25±0,84
3,6±0,5
4,41±0,70

ЛФ, %
81,0-89,0
82,3±1,67
86,59±1,6
93,7±0,64
95,6±0,5*
93,7±1,93
91,1±1,07*
89,9±1,4
90,5±1,2**

Молодые лейкоциты,%
-
0,0
0,66±0,25
0,3±0,11
0,18±0,14
0,28±0,12
0,42±0,19
0,19±0,08
0,3±0,1

Мн, %
2,3-8,4
0,0
0,91±0,23
0,2±0,08
0,6±0,27
0,5±0,12
0,75±0,25
0,23±0,07
0,5±0,2

Содержание моноцитов (%) всегда находилось ниже условной нормы. Отмеченный лимфоцитоз – увеличение содержания лимфоцитов относительно всего пула клеток, на фоне монопении, а также снижение количества нейтрофилов и их малой функциональной активности, свидетельствует о неблагополучном состоянии организма, иммунологической недостаточности, что может быть спровоцировано хроническим воздействием токсических веществ или наличием инфекционных заболеваний неизвестной этиологии. Описанное физиологическое состояние особей леща нельзя оценивать как угнетенное. По-видимому, наблюдаемая картина крови с её отклонениями есть результат адаптации организма рыб к существованию в условиях хронического токсикоза и интенсивной антропогенной нагрузки.


Анализ патоморфологических изменений в структуре эритроцитов леща
  1. Патоморфологические изменения клеток красной крови леща соответствуют аналогичным нарушениям, обнаруженным в крови особей судака (табл. 3.3.2). Пойкилоцитоз эритроцитов был выражен, как и у судака, полиморфностью клеток. Эритроциты с отростками (характерные для угнетения эритропоэза), встречались единично, у отдельных особей. Осенью 2007 г. у 96% особей в крови рыб регистрировали эритроциты различной формы, но данное изменение формы вполне обратимо и может быть возвращено в нормальное состояние при изменившихся условиях.
  2. На мазках крови исследованных особей рыб отмечены случаи амитоза эритроцитов, находящихся на различных стадиях деления. Отдельно выделяли эритроциты с ядрами в стадии деления. Снижение частоты встречаемости данного признака отмечено от весны к осени, что может быть обусловлено физиологическим состоянием организма рыб. Доказано, что при токсическом воздействии происходит первая ответная реакция организма в виде увеличения концентрации гемоглобина в крови рыб. Повышение частоты встречаемости делящихся клеток путем амитоза приводит к увеличению их количества и, как следствие, к увеличению общего количества гемоглобина. Такая реакция эритроцитов может иметь компенсаторный характер и служить элементом адаптации организма рыб при токсикозах. Амитотическое деление эритроцитов может быть результатом воздействия повреждающих токсических веществ на ядерные структуры клетки. Разноразмеренность клеток красной крови отмечали у исследованных особей во все периоды исследования. Однако частота встречаемости данного показателя у отдельных рыб не превышала 4,3 % от общего пула эритроцитов, и отражало нормальный процесс гемопоэза. В крови рыб отмечали эритроциты, находящиеся на стадии разрушения.
  3. Таблица 3.3.2.

Типы цитопатологических нарушений в эритроцитах особей леща

Основные типы нарушений
Количество особей (%) с нарушениями структуры клеток

от общего количества обследованных рыб

2006
2007
2008
Среднее

Осень
Лето
Осень
Лето
Осень
Лето
Осень

Пойкилоцитоз
68,0*
65,0*
96,0**
100,0
88,0*
83
84

Анизоцитоз

4,0
5,0

52,0*
95,5**
52,0*
50
36

Агглютинация
40,0*
15,0*
4,4
41,0*
4,0
28
16

Изменение внешней плазматической мембраны
12,0*
30,0*
52,0*
73,0*
88,0*
52
51

Смещение ядер к периферии
0,0
100,0
61,0*
95,5**
80,0*
98
75

Пикноз
60,0*
5,0
48,0*
95,5**
44,0*
50
51

Деформация ядер
36,0*
90,0**
48,0*
86,0*
76,0*
88
53

Кариорексис
12,0*
10,0*
39,0*
91,0**
28,0*
50
26

Инвагинация ядра
0,0
50,0*
39,0*
77,0*
40,0*
63
40

Разрушение клетки
0,0
15,0*
96,0**
95,5**
72,0*
55
84

Ядра-тени
0,0
0
44,0*
100
88,0*
50
66

Хроматинолиз
0,0
20,0*
30,0*
91,0**
40,0*
55
35

Ядра-кольца
0,0
0,0
0,0
45,0*
80,0*
-
-

Протуберанцы
-
-
-
36,0*
24,0*
-
-

Вакуолизация цитоплазмы
0,0
35,0*
17,0*
14,0*
0,0
24
9

Кариолиз
0,0
5,0
26,0*
68,0*
32,0*
37
29

Шистоциты
0,0
10,0*
4,0
27,0*
8,0*
19
6

Амитоз
40,0*
60,0*
30,0*
55,0*
28,0*
58
33

Амитоз – деление только ядра
0,0
70,0**
40,0*
77,0*
40,0*
74
40

Количество исследованных рыб
25
20
23
22
25
21
24
  1. У всех исследованных рыб в 2008 г. встречались эритроциты в предгемолитическом состоянии (95% весной и 72% осенью). Полностью разрушенные эритроциты, ядра-тени, отмечались у всех исследованных рыб весной и у 88% особей осенью 2008 г. Частота их встречаемости (% от общего количества исследованных эритроцитов), в среднем, составляла 1,1 % весной и 0,9 % осенью, и не превышала летального порога.

При исследовании крови леща (как и судака) регистрировали увеличение количества (%) особей с цитопатологическими нарушениями в весенний период (по сравнению с осенью). Снижение частоты встречаемости и интенсивности проявления цитопатологии к осени может свидетельствовать: о некоторой стабилизации токсикологических процессов водной среды в осенний период, о более благополучном физиологическом состоянии рыб после летнего нагульного периода. Это указывает на влияние сезонного фактора, на физиологическое состояние рыб. С 2006 по 2008 гг. возросло количество особей леща с патологическими нарушениями эритроцитов крови – пойкилоцитоз, анизоцитоз. Возросло с 2006 по 2008 г. количество структурных нарушений в ядре эритроцитов крови – хроматинолиз, кариолиз, кариорексис (рис. 3.3.1.).


Рисунок 3.3.1.

Уровень (средний %) цитопатологических отклонений в эритроцитах крови леща



Возросла доля (процентное содержание рыб в выборке) с нарушениями в структуре ядра эритроцитов периферической крови леща (так же как и судака). Доля (%) особей леща с присутствием явления кариорексиса в эритроцитах в 2006, 2007, 2008 гг. составила 12%, 24% и 59% соответственно, количество особей судака с нарушением в структуре ядра (кариорексис) в 2006 г. составило 20%, в 2007г. – 38%, в 2008 г. – 66%. Для периферической крови судака и леща с 2006 по 2008 гг. отмечено достоверное возрастание количества (%) особей с другими структурными нарушениями ядра эритроцитов (кариолиз, хроматинолиз)