![](images/doc.gif)
На правах рукописи
ИВАНОВА НАТАЛЬЯ НИКОЛАЕВНА
ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ СИСТЕМЫ АЦЕТИЛХОЛИН-АЦЕТИЛХОЛИНЭСТЕРАЗА И АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ
В ТКАНЯХ ПЕЧЕНИ И ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ У СВИНЕЙ
В ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ
03.03.01 - физиология
Автореферат
диссертации на соискание учёной степени
кандидата биологических наук
Казань 2012
Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном
образовательном учреждении высшего профессионального образования
Чувашская государственная сельскохозяйственная академия
Научный руководитель: | доктор биологических наук, профессор, зав. кафедрой биологии и экологии ФГБОУ ВПО Чувашская государственная сельскохозяйственная академия Игнатьев Николай Георгиевич |
Официальные оппоненты: | доктор биологических наук, доцент кафедры физиологии ФГБОУ ВПО Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана Каримова Руфия Габдельхаевна |
доктор биологических наук, профессор кафедры нормальной физиологии ГБОУ ВПО Казанский государственный медицинский университет Нигматуллина Разина Рамазановна | |
Ведущая организация: | ФГБОУ ВПО Мордовский государственный университет им. Н. П. Огарева |
Защита диссертации состоится л__ ________ 2012 г. в л__ часов на заседании диссертационного совета Д - 220.034.02 при федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана по адресу: 420029, г. Казань, Сибирский тракт, 35.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана
Автореферат разослан л__ _________ 2012 г. и опубликован на сайтах и л__ _________ 2012 г.
Учёный секретарь диссертационного совета,
доктор биологических наук,
профессор Гильмутдинов Р.Я.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Система ацетилхолин-ацетилхолинэстераза играет важную роль в деятельности парасимпатического отдела автономной нервной системы, участвующего в регуляции функций висцеральных систем, в том числе и органов пищеварения. Показателями данной системы являются концентрация медиатора ацетилхолина, активность разрушающего его фермента ацетилхолинэстеразы, а также величина их соотношения - холинергический индекс. Кроме этого, по современным представлениям, функции ацетилхолина не ограничиваются только передачей нервных импульсов. Ацетилхолин опосредованно влияет на механизмы энергообеспечения, белковый, углеводный, жировой, нуклеотидный, электролитный и водный виды обмена (Н.Н. Демин, 1971; Г.Н. Крыжановский, 1973; В.Н. Гурин, 1975; Н.И. Разумовская, 1979; Э.Н. Бергер, 1980; П.П. Денисенко, 1980; С.Н. Голиков, 1985; И.И. Кривой, 2000).
В связи с этим выявление закономерностей становления системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза в тканях печени и поджелудочной железы, а также определение ее взаимосвязи с активностью внутриклеточных ферментов, которые являются показателями уровня обменных процессов в тканях органов, вызывает значительный теоретический и практический интерес.
Вместе с тем исследования по определению характера и темпов развития системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза и ферментных систем в органах пищеварения у сельскохозяйственных животных немногочисленны (Т.Ц. Батоева, 1985; Н.Г. Игнатьев, 1998, 2010; Т.В. Кузнецова, 2008; М.Г. Терентьева, 2009; Д.П. Мишина, 2010), однако имеется определенный материал по изучению становления данных систем у лабораторных животных (Н.Г. Игнатьев, 2003; О.П. Максимова, 2003; Н.К. Кириллов, 2004; Г.Г. Ефремов, 2004, 2006; Ю.В. Башкиров, 2008; Г.М. Ефремова, 2008). Известно, что каждый вид животного имеет индивидуальные особенности созревания органов, становления нервных структур и ферментных систем. В изученной научной отечественной и зарубежной литературе работ по установлению закономерностей развития системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза в тканях различных долей печени и поджелудочной железы у свиней в ранние фазы постнатального периода не обнаружено, нет сведений о ее взаимосвязи с ферментными системами и влияния на ее параметры межпородного скрещивания.
Цель и задачи исследований. На основании вышеизложенного была сформулирована цель исследования: выявить закономерности возрастных изменений параметров системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза и активности ферментов в крови, тканях печени и поджелудочной железы у чистопородных и помесных свиней в раннем постнатальном онтогенезе.
Для достижения цели исследования были поставлены следующие задачи:
- Выяснить закономерности становления системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза в тканях печени и поджелудочной железы у разновозрастных чистопородных и помесных поросят;
- Определить особенности возрастных изменений активности ферментов аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы, а-амилазы, щелочной и кислой фосфатаз в тканях печени и поджелудочной железы и аминотрансфераз в сыворотке крови у поросят в онтогенезе.
- Сопоставить закономерности становления системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза и активности ферментов в тканях печени и поджелудочной железы у чистопородных и помесных поросят;
- Установить взаимосвязь возрастных изменений массы, длины печени и массы поджелудочной железы с изменениями живой массы поросят.
Научная новизна исследований. Впервые выявлены закономерности возрастных изменений параметров системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза в тканях различных долей печени и поджелудочной железы у чистопородных и помесных поросят. Установлены возрастные изменения активности аспартат- и аланинаминотрансфераз, а-амилазы, щелочной и кислой фосфатаз в тканях изученных органов и их взаимосвязь с системой ацетилхолин-ацетилхолинэстераза.
Теоретическая и практическая значимость работы. Полученные в результате проведенных исследований данные расширяют представления о закономерностях становления системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза в тканях крупнейших пищеварительных желез у свиней в постнатальном онтогенезе и вносят существенное дополнение в определение особенностей структурно-химического становления органов.
Представленные результаты исследований могут быть использованы в качестве физиологической нормы содержания ацетилхолина и активности ферментов в тканях органов, поэтому их необходимо учитывать при профилактике, диагностике и лечении болезней органов пищеварения у растущего молодняка, при применении препаратов холиномиметического, либо холинолитического действия. Также они могут быть использованы в научно-исследовательской работе нейрофизиологического и нейрофармакологического направлений, как углубляющий материал при чтении лекций и проведении занятий по темам Физиология молодняка сельскохозяйственных животных, Возрастная физиология органов пищеварения.
Реализация результатов работы. Результаты исследований были включены в методические рекомендации Коэффициент де Ритиса в сыворотке крови и тканях печени - показатель здоровья животных (Н.Г. Игнатьев, Н.Н Иванова, 2011) и используются в учебном процессе на кафедре биологии и экологии, кафедре морфологии, физиологии и зоогигиены ФГБОУ ВПО ЧГСХА.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту.
- Закономерности возрастных изменений концентрации медиатора ацетилхолина, активности ацетилхолинэстеразы в тканях различных долей печени и поджелудочной железы у чистопородных и помесных поросят в постнатальном онтогенезе.
- Характер и интенсивность возрастных колебаний активности ферментов аланин- и аспартатаминотрансфераз, а-амилазы, щелочной и кислой фосфатаз в тканях печени и поджелудочной железы у чистопородных и помесных поросят и корреляция их уровней с показателями системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза.
- Возрастная динамика активности аланин- и аспартатаминотрансфераз в сыворотке крови у поросят разных пород.
- Динамика живой массы и морфометрических показателей печени и поджелудочной железы у чистопородных и помесных поросят.
Апробация работы. Материалы диссертации были доложены на Международной научно-практической конференции Инновационному развитию АПК - научной обеспечение, посвященной 80-летию Пермской ГСХА (Пермь, 2010); Международной научно-практической конференции Актуальные вопросы совершенствования технологии производства и переработки продукции сельского хозяйства: Мосоловские чтения (Йошкар-Ола, 2011); ХIV Международной научно-практической конференции Инновационные направления развития АПК и повышение конкурентоспособности предприятий, отраслей и комплексов - вклад молодых ученых (Ярославль, 2011); VII Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых, аспирантов и студентов Молодые ученые в решении актуальных проблем сельского хозяйства, посвященной 80-летию Чувашской государственной сельскохозяйственной академии (Чебоксары, 2011); Всероссийской научно-практической конференции Инновационные направления развития животноводства, проводимой в рамках Дней молодежной науки в Оренбургской области (Оренбург, 2011); Всероссийской научно-практической конференции Аграрная наука - сельскому хозяйству, посвященной 80-летию ФГБОУ ВПО ЧГСХА (Чебоксары, 2011).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 15 работ, в том числе 5 статей в научных трудах, рекомендованных ВАК РФ.
Структура и объем диссертации. Диссертационная работа включает следующие разделы: введение, обзор литературы, результаты собственных исследований и их обсуждение, заключение, выводы, предложения и рекомендации, список литературы, приложение.
Диссертация изложена на 166 страницах печатного текста, который содержит 26 таблиц и 46 рисунков. Список литературы включает 242 источника, из них 43 зарубежных автора.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
абораторные и научно-производственные исследования выполнены в условиях свинокомплекса ОАО Вурнарский мясокомбинат и биохимической лаборатории кафедры биологии и экологии Чувашской государственной сельскохозяйственной академии в 2010 - 2012 гг. Животные свинокомплекса содержались в соответствии с рекомендованными нормами и рационами (Калашников А.П. и др., 2003), соблюдались соответствующие зоотехнические и ветеринарные требования. Работа выполнена в соответствии с планом научных исследований Чувашской ГСХА (номер госрегистрации 01.200.201827).
Схема проведения исследований представлена на рисунке 1.
Система ацетилхолин-ацетилхолинэстераза в тканях органов пищеварения
у поросят (1, 7, 14, 21, 28, 60, 120 суток)
Чистопородные Помесные
(крупная белая порода) (крупная белая х дюрок
х йоркшир)
Возрастные изменения параметров системы АХ - АХЭ
и активности ферментов в тканях печени и поджелудочной железы
АХ; АХЭ; ААТ; АсАТ; КФ; ЩФ; а-амилаза
Доли печени Доли поджелудочной железы
Правая медиальная Левая
евая медиальная Правая
Правая латеральная
евая латеральная
Квадратная
Возрастная динамика массы тела поросят, массы и длины печени и поджелудочной железы
Рисунок 1 - Схема исследований
Для исследований использовали поросят крупной белой породы (чистопородные) и помесных поросят в возрасте 1, 7, 14, 21, 28, 60 и 120 суток, полученных от свиноматок 2-4 опоросов. Помесные поросята были получены путем последовательного скрещивания свиноматок крупной белой породы с хряком породы дюрок, полученных свиноматок помесей покрывали хряком породы йоркшир. В работе использовали чистопородных (28 гол.) и помесных (28 гол.) хрячков и боровков первого поколения. Возрастные группы поросят были сформированы по принципу аналогов с учетом происхождения, пола, живой массы, типа нервной системы и здоровья. Кастрация проводилась в 15 - 16-суточном возрасте. Отъем поросят осуществляли в четырехнедельном возрасте. Поросят убивали, из них извлекали органы пищеварения, в том числе печень и поджелудочную железу. Изучаемые органы взвешивали, определяли длину, из каждой доли печени и поджелудочной железы брали пробы тканей. Пробы тканей промывали холодным физиологическим раствором и для дальнейших исследований замораживали в жидком азоте.
В сыворотке крови определяли активность ферментов аспартатаминотрансфераза (АсАТ) и аланинаминотрансфераза (ААТ), тканях правой медиальной, левой медиальной, правой латеральной, левой латеральной, квадратной долей печени и левой и правой долей поджелудочной железы определяли концентрацию ацетилхолина (АХ), активность ферментов ацетилхолинэстеразы (АХЭ), аспартатаминотрансферазы, аланинаминотрансферазы, -амилазы, щелочной (ЩФ) и кислой (КФ) фосфатаз.
Концентрацию АХ определяли по методу И.В. Шуцкого (1967), активность АХЭ - по методу С. Хестрина (S. Hestrin, 1949) в модификации А.Н. Панюкова (1966). Активность ферментов АсАТ и ААТ определяли по методу Райтмана и Френкеля. Уровень КФ, ЩФ определяли по методу Бессея - Лоури - Брока. Активность -амилазы измеряли по методу Каравея.
Использованные методы описаны в справочном пособии, изданном под редакцией профессора Б.Д. Кальницкого. (1997). При определении активности ферментов использовали набор реактивов ООО Витал Диагностикс СПб. Расчёт активности ферментов и содержания АХ провели по калибровочным графикам.
Статистическую обработку данных исследований проводили общепринятыми методами вариационной статистики, рекомендованными Р.Х. Тукшаитовым (2001). При статистической обработке полученных данных определялось среднее арифметическое (М) и вычислялась относительная ошибка (м). Статистическую достоверность определяли критерием Стьюдента. Для определения степени взаимосвязи рядов данных вычисляли коэффициент корреляции Пирсона, где коэффициент корреляции: r=0,5-0,7 - средняя или умеренная; r=0,7-1,0 - сильная связь.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Возрастные изменения содержания ацетилхолина, активности
ацетилхолинэстеразы и величины холинергического индекса в тканях
печени и поджелудочной железы у разновозрастных чистопородных
и помесных поросят
Анализ полученных результатов свидетельствует о том, что поросята рождаются с неодинаковой концентрацией АХ (мкмоль/г), активностью АХЭ (мкмоль/гч), величиной холинергического индекса (ХИ) в тканях различных долей печени (табл. 1).
Таблица 1- Содержание АХ, активность АХЭ, величина ХИ в тканях печени у односуточных чистопородных и помесных поросят
Доли печени | АХ (мкмоль/г) | АХЭ (мкмоль/гч) | ХИ | |||
Чист. | Помеси | Чист. | Помеси | Чист. | Помеси | |
Правая медиальная | 2,150,11 | 2,930,06 | 2,830,13 | 2,280,06 | 0,76 | 1,29 |
евая медиальная | 2,470,18 | 2,650,14 | 2,410,14 | 2,560,09 | 1,02 | 1,04 |
Правая латеральная | 3,790,09 | 2,980,18 | 2,020,13 | 1,660,08 | 1,88 | 1,80 |
евая латеральная | 2,830,07 | 2,460,09 | 1,650,06 | 1,370,06 | 1,72 | 1,80 |
Квадратная | 3,430,13 | 2,210,11 | 2,620,16 | 1,180,09 | 1,31 | 1,87 |
У односуточных чистопородных поросят по уровню содержания АХ в тканях доли печени в убывающем порядке располагаются следующим образом: правая латеральная, квадратная, левая латеральная, левая медиальная, правая медиальная. По активности АХЭ доли печени располагаются таким образом: правая медиальная, квадратная, левая медиальная, правая латеральная, левая латеральная. Значение ХИ у односуточных чистопородных поросят наибольшее в тканях правой латеральной доли. Меньшее в тканях левой латеральной, квадратной, левой медиальной долей и самое низкое в тканях правой медиальной.
У односуточных помесных поросят по концентрации АХ в тканях в уменьшающемся порядке доли печени располагаются следующим образом: правая латеральная, правая медиальная, левая медиальная, левая латеральная и квадратная. По активности АХЭ находятся таким образом: левая медиальная, правая медиальная, правая латеральная, левая латеральная и квадратная. Величина ХИ у односуточных помесных поросят наивысшая в тканях квадратной доли. Меньшее значение ХИ имеет в тканях правой латеральной, левой латеральной, правой медиальной и левой медиальной долей.
Результаты исследований свидетельствуют о том, что содержание АХ, активность АХЭ и величина ХИ с возрастом у поросят в различных долях печени изменяются неравномерно, с различной интенсивностью.
У чистопородных (рис. 2Ц6) поросят наиболее интенсивные возрастные изменения концентрации АХ в тканях правой медиальной доли печени выявляются с недельного по двухнедельный и с четырехнедельного по двухмесячный возраст; в тканях левой медиальной - с двухнедельного по трехнедельный и с четырехнедельного по двухмесячный; в тканях правой латеральной - с недельного по двухнедельный и с трехнедельного по четырехнедельный; в тканях левой латеральной - с трехнедельного по четырехнедельный; в тканях квадратной - с трехнедельного по четырехнедельный. Стабилизация содержания АХ в тканях печени у чистопородных поросят определяется с двухмесячного возраста.
Рисунок 2 - Правая медиальная доля печени Рисунок 3 - Левая медиальная доля печени
Рисунок 4 - Правая латеральная доля печени Рисунок 5 - Левая латеральная доля печени
Рисунок 6 - Квадратная доля печени
Значительные возрастные колебания активности АХЭ в тканях правой медиальной и левой медиальной долей у чистопородных поросят обнаруживаются с первых по седьмые сутки и с седьмых по четырнадцатые; в тканях правой латеральной и квадратной - с первых по седьмые; в тканях левой латеральной - с седьмых по четырнадцатые, с четырнадцатых по двадцать первые. Относительная стабилизация уровня данного фермента выявляется в тканях левой медиальной и правой латеральной долей с четырехнедельного возраста, а в тканях правой медиальной, левой латеральной и квадратной - с двухмесячного.
Высокие темпы возрастных изменений величины ХИ у чистопородных поросят в тканях правой медиальной доли обнаруживаются с односуточного по недельный и с четырехнедельного по двухмесячных срок; в тканях левой медиальной - с односуточного по недельный и с трехнедельного по четырехнедельный; в тканях правой латеральной - с односуточного по недельный, с недельного по двухнедельный; в тканях левой латеральной - с двухнедельного по трехнедельный и с четырехнедельного по двухмесячный; в тканях квадратной - с односуточного по недельный и с четырехнедельного по двухмесячный.
У помесных поросят содержание АХ наиболее интенсивно изменяется в тканях правой медиальной доли с двухнедельного по трехнедельный и с четырехнедельного по двухмесячный возраст; в тканях левой медиальной - с четырехнедельного по двухмесячный; в тканях правой латеральной - с недельного по двухнедельный; левой латеральной и квадратной - с двухнедельного по трехнедельный. Стабилизация концентрации медиатора в тканях всех долей печени выявляется с двухмесячного возраста поросят.
Наиболее высокими темпами активность АХЭ у помесных поросят изменяется в тканях правой медиальной доли с четырехнедельного по двухмесячный возраст; в тканях левой медиальной и левой латеральной - с односуточного по недельный; в тканях правой латеральной и квадратной - с трехнедельного по четырехнедельный. Относительная стабилизация уровня изученного фермента обнаруживается с двухмесячного возраста.
Существенные возрастные колебания величины ХИ в тканях правой медиальной доли отмечаются с односуточного по недельный и с недельного по двухнедельный; в тканях левой медиальной - с трехнедельного по четырехнедельный и с четырехнедельного по двухмесячный; в тканях правой латеральной - с недельного по двухнедельный и с двухнедельного по трехнедельный; в тканях левой латеральной - с недельного по двухнедельный; в тканях квадратной - с двухнедельного по трехнедельный и с четырехнедельного по двухмесячный.
Анализ результатов исследований показал, что между изучаемыми показателями в тканях печени у чистопородных и помесных поросят существуют определенные отличительные особенности.
Достоверное различие содержания АХ между двумя группами обнаруживается во всех изученных промежутках жизни поросят. В возрасте одних и семи суток концентрация медиатора у помесных поросят выше, чем у чистопородных, в тканях правой медиальной доли печени; двух недель - правой латеральной; трех недель - правой медиальной, левой медиальной и правой латеральной; четырех недель - правой медиальной, левой медиальной и левой латеральной долей печени.
Активность АХЭ достоверно выше у помесных по сравнению с чистопородными в возрасте одной недели в тканях правой медиальной, левой медиальной, правой латеральной и квадратной долей; трех недель - левой медиальной, правой латеральной и левой латеральной; четырех недель - правой медиальной, левой медиальной и квадратной, двух месяцев - левой медиальной и левой латеральной; четырех месяцев - левой медиальной и левой латеральной долей.
Результаты исследований свидетельствуют о том, что поросята рождаются с отличающейся в тканях разных долей поджелудочной железы концентрацией медиатора АХ и активностью АХЭ, величиной ХИ (табл. 2).
Таблица 2 - Содержание АХ, активность АХЭ, величина ХИ в тканях поджелудочной железы у односуточных чистопородных и помесных поросят
Доли печени | АХ (мкмоль/г) | АХЭ (мкмоль/гч) | ХИ | |||
Чист. | Помеси | Чист. | Помеси | Чист. | Помеси | |
евая | 4,080,19 | 2,020,11 | 0,870,08 | 1,820,15 | 4,69 | 1,11 |
Правая | 4,340,21 | 2,320,13 | 0,960,09 | 1,680,14 | 4,52 | 1,38 |
У односуточных чистопородных поросят наивысшее содержание АХ выявляется в тканях правой доли поджелудочной железы, меньшее - в тканях левой. Высокая активность фермента АХЭ определяется в тканях правой доли по сравнению с левой. Значение ХИ у односуточных поросят обнаруживается на самом высоком уровне в тканях левой доли. В тканях правой доли величина этого показателя ниже.
У односуточных помесных поросят высокая концентрация АХ определяется в тканях правой доли поджелудочной железы, меньшая - в тканях левой. Самая высокая активность АХЭ выявляется в тканях левой доли, более низкая - в тканях правой. Наивысшее значение ХИ обнаруживается в тканях правой доли поджелудочной железы, меньшее - в тканях левой.
Данные исследований показывают, что концентрация АХ, активность АХЭ, величина ХИ с возрастом поросят в различных долях поджелудочной железы изменяются неравномерно, гетерохронно.
У чистопородных поросят (рис. 7-8) наиболее интенсивные возрастные колебания концентрации АХ в тканях левой доли поджелудочной железы выявляются с односуточного по недельный и с двухнедельного по трехнедельный возраст; в тканях правой - с односуточного по недельный и с трехнедельного по четырехнедельный. Относительная стабилизация содержания медиатора в тканях левой доли обнаруживается с четырехнедельного срока, в тканях правой - с двухмесячного.
Рисунок 7 - Левая доля Рисунок 8 - Правая доля
Значительные возрастные изменения активности АХЭ в тканях левой доли определяются с односуточного по недельный и с трехнедельного по
четырехнедельный срок; в тканях правой - с недельного по двухнедельный и с трехнедельного по четырехнедельный. Относительная стабилизация уровня этого фермента выявляется в тканях левой доли с четырехнедельного, а правой - с двухмесячного возраста.
Наиболее высокими темпами величина ХИ у чистопородных поросят в тканях левой доли изменяется с односуточного по недельный и с недельного по
двухнедельный промежуток жизни; в тканях правой - во все изученные промежутки до двухмесячного возраста.
У помесных поросят наиболее существенные изменения содержания АХ в тканях левой доли поджелудочной железы отмечаются с односуточного по
недельный и с четырехнедельного по двухмесячный возраст; в тканях правой - с односуточного по недельный и с трехнедельного по четырехнедельный. Стабилизация концентрации медиатора в тканях правой доли происходит с четырехнедельного, левой - двухмесячного возраста поросят.
Высокими темпами активность АХЭ в тканях левой доли изменяется с недельного по двухнедельный промежуток жизни, в тканях правой - с четырехнедельного по двухмесячный. Относительная стабилизация фермента в тканях обеих долей поджелудочной железы выявляется с двухмесячного возраста поросят. Величина ХИ наиболее интенсивно изменяется в тканях левой доли с четырехнедельного по двухмесячный срок жизни, правой - с трехнедельного по четырехнедельный.
Полученные нами данные свидетельствуют о том, что между содержанием АХ и активностью АХЭ в тканях поджелудочной железы у чистопородных и помесных поросят также выявляются достоверные различия. Концентрация АХ у помесных поросят выше, чем у чистопородных в тканях обеих долей в возрасте семи суток и трех недель. Уровень АХЭ у односуточных помесных поросят достоверно выше, чем у чистопородных, в тканях левой и правой долей поджелудочной железы; двух- и четырехнедельных - правой; двух- и четырехмесячных - левой.
Возрастные изменения активности аминотрансфераз, фосфатаз и
-амилазы в тканях печени и поджелудочной железы у разновозрастных
чистопородных и помесных поросят
Результаты исследований представлены в таблицах 3 и 4.
Таблица 3 - Активность ААТ, АсАТ, КФ, ЩФ и а-амилазы в тканях печени у односуточных чистопородных поросят
Доли печени | ААТ (мкмоль/гч) | АсАТ (мкмоль/гч) | КФ (мкмоль/гч) | ЩФ (мкмоль/гч) | а-амилаза (мг/сг) |
Правая мед. | 74,015,34 | 48,073,02 | 6,380,12 | 12,550,37 | 0,1030,016 |
евая мед. | 53,874,01 | 39,492,84 | 6,980,14 | 11,760,52 | 0,1720,025 |
Правая латер. | 71,474,89 | 49,453,15 | 12,160,86 | 10,980,29 | 0,1580,014 |
евая латер. | 75,075,03 | 34,092,02 | 11,620,27 | 10,920,72 | 0,1210,013 |
Квадратная | 58,983,21 | 36,842,34 | 8,170,46 | 8,490,37 | 0,2970,036 |
Таблица 4 - Активность ААТ, АсАТ, КФ, ЩФ и а-амилазы в тканях поджелудочной железы у односуточных чистопородных поросят
Доли подж. железы | ААТ (мкмоль/гч) | АсАТ (мкмоль/гч) | КФ (мкмоль/гч) | ЩФ (мкмоль/гч) | а-амилаза (мг/с*г) |
евая | 47,022,11 | 29,032,12 | 5,560,24 | 15,490,56 | 0,5560,023 |
Правая | 42,431,76 | 28,392,03 | 4,180,13 | 22,751,36 | 0,5780,024 |
Полученные в результате исследований данные свидетельствуют о том, что поросята рождаются с неодинаковым уровнем ААТ, АсАТ, КФ, ЩФ (мкмоль/гч), а-амилазы (мг/сг) в тканях различных долей печени и поджелудочной железы.
С возрастом у поросят активность ферментов ААТ, АсАТ, КФ, ЩФ и а-амилазы в различных долях печени и поджелудочной железы изменяются неравномерно, с различной интенсивностью.
Наиболее выраженные возрастные изменения уровня ААТ у чистопородных поросят в тканях правой медиальной и левой латеральной долей печени определяются с семисуточного по двухнедельный и с двухнедельного по трехнедельный возраст; в тканях левой медиальной - с недельного по двухнедельный и с трехнедельного по четырехнедельный; в тканях правой латеральной - с односуточного по недельный и с недельного по двухнедельный; в тканях квадратной - с односуточного по недельный и с недельного по двухнедельный. Относительная стабилизация активности ААТ обнаруживается только в тканях левой медиальной доли с двухмесячного возраста.
Наиболее интенсивные возрастные колебания активности АсАТ выявляются в тканях правой медиальной доли с недельного по двухнедельный срок; в тканях левой медиальной - с недельного по двухнедельный и с двухнедельного по трехнедельный; в тканях правой латеральной - с односуточного по недельный и с недельного по двухнедельный; в тканях левой латеральной - с четырехнедельного по двухмесячный; в тканях квадратной - с односуточного по недельный. Относительная стабилизация уровня данного фермента происходит лишь в тканях левой медиальной доли с трехнедельного возраста.
С наивысшей интенсивностью коэффициент де Ритиса в тканях правой медиальной доли печени изменяется с недельного по двухнедельный и с двухнедельного по трехнедельный срок; в тканях левой медиальной - с односуточного по недельный и с трехнедельного по четырехнедельный; в тканях правой латеральной - с недельного по двухнедельный и с трехнедельного по четырехнедельный; в тканях левой латеральной - с недельного по двухнедельный и с двухнедельного по трехнедельный; в тканях квадратной - с недельного по двухнедельный и с двухмесячного по четырехмесячный.
Высокие темпы возрастных изменений активности КФ в тканях правой медиальной доли у чистопородных поросят выявляются с первых по седьмые сутки и с первой по вторую неделю; в тканях левой медиальной - с рождения по седьмые сутки и с первой по вторую неделю; в тканях правой латеральной - со второй по третью неделю и с четырех недель до двух месяцев; в тканях левой латеральной - с рождения по седьмые сутки и со второй по третью неделю; в тканях квадратной - с рождения по седьмые сутки и со второго по четвертый месяц. Относительная стабилизация активности КФ в тканях печени в исследованный промежуток жизни поросят не происходит.
Значительные возрастные колебания уровня ЩФ у чистопородных поросят отмечаются в тканях правой медиальной доли с недельного по двухнедельный возраст; в тканях левой медиальной - с четырехнедельного по двухмесячный и с двухмесячного по четырехмесячный; в тканях правой латеральной - с односуточного по недельный; в тканях левой латеральной - с недельного по двухнедельный и с двухнедельного по трехнедельный; в тканях квадратной - с односуточного по недельный и с двухнедельного по трехнедельный. Относительная стабилизация уровня данного фермента в тканях печени в исследованный период жизни поросят не выявляется.
Существенные возрастные изменения активности а-амилазы в тканях правой медиальной доли происходят с первых по седьмые сутки; в тканях левой медиальной и правой латеральной - со второй по четвертую недели; в тканях левой латеральной - с первых по седьмые сутки и с четвертой недели по второй месяц; в тканях квадратной - с четвертой недели по второй месяц. Относительная стабилизация уровня а-амилазы в тканях правой медиальной и левой медиальной долей определяется с трехнедельного срока жизни поросят, а правой латеральной, левой латеральной и квадратной - с двухмесячного.
Существенные колебания уровня ААТ в тканях поджелудочной железы обнаруживаются в тканях левой доли с односуточного по недельный и с четырехнедельного по двухмесячный возраст; в тканях правой доли - с односуточного по недельный и с четырехнедельного по двухмесячный. Относительная стабилизация активности данного фермента в исследованный промежуток жизни поросят не происходит.
Наиболее выраженные возрастные изменения активности АсАТ в тканях левой доли поджелудочной железы у чистопородных поросят определяются с недельного по двухнедельный и с двухнедельного по трехнедельный возраст; в тканях правой - с недельного по двухнедельный. Относительная стабилизация уровня АсАТ в тканях правой доли обнаруживается с двухнедельного срока жизни, а левой - с трехнедельного.
С наибольшей интенсивностью коэффициент де Ритиса в тканях обеих долей поджелудочной железы колеблется с односуточного по недельный и с четырехнедельного по двухмесячный период.
Значительные возрастные колебания уровня КФ в тканях левой доли выявляются с односуточного по недельный и с двухнедельного по трехнедельный возраст; в тканях правой - с односуточного по недельный и с двухнедельного по трехнедельный. Относительная стабилизация активности изученного фермента в тканях правой доли определяется с трехнедельного, левой - с четырехнедельного срока жизни поросят.
Наиболее высокими темпами активность ЩФ в тканях левой доли поджелудочной железы изменяется с четырехнедельного по двухмесячный возраст; в тканях правой доли - с недельного по двухнедельный и с четырехнедельного по двухмесячный. Относительная стабилизация уровня данного фермента в тканях обеих долей происходит с двухмесячного возраста.
Наиболее интенсивные возрастные изменения уровня а-амилазы в тканях левой доли у чистопородных поросят определяются с трехнедельного по четырехнедельный срок; в тканях правой - с четырехнедельного по двухмесячный. Относительная стабилизация этого фермента выявляется в тканях обеих долей с двухмесячного возраста.
Анализ результатов исследований показал, что между изученными показателями в тканях исследованных органов у чистопородных и помесных поросят существуют определенные отличительные особенности.
Активность ААТ в тканях печени у двух- и трехнедельных помесных поросят выше, чем у чистопородных, в тканях всех долей печени; четырехнедельных и двухмесячных - правой медиальной, правой латеральной, левой латеральной и квадратной; четырехмесячных - левой медиальной. Активность АсАТ в суточном возрасте определяется на более высоком уровне у помесных поросят по сравнению с чистопородными в тканях левой медиальной доли; недельном - левой латеральной; двухнедельном - в тканях всех долей, за исключением правой латеральной; трехнедельном - левой латеральной; четырехнедельном - правой медиальной, левой латеральной и квадратной. Уровень КФ у односуточных помесных поросят выше, чем у чистопородных, в тканях правой латеральной доли; недельных - правой медиальной, левой медиальной, правой латеральной и квадратной; двухнедельных - левой медиальной, правой латеральной и левой латеральной; трехнедельных - левой медиальной, правой латеральной и квадратной; четырехнедельных - левой медиальной, правой латеральной и левой латеральной; двухмесячных - левой медиальной; четырехмесячных - квадратной. Активность ЩФ в возрасте одних суток у помесных поросят достоверно выше, чем у чистопородных, в тканях правой медиальной, левой медиальной и квадратной долей; семи суток - правой медиальной, левой латеральной и квадратной; трех и четырех недель - левой медиальной и квадратной. Уровень а-амилазы у недельных помесных поросят по сравнению с чистопородными выше в тканях левой медиальной доли; двухнедельных - правой медиальной, правой латеральной и левой латеральной; трех- и четырехнедельных - левой латеральной и квадратной.
Активность ААТ в тканях обеих долей поджелудочной железы у помесных поросят выше, чем у чистопородных, в односуточном и четырехмесячном возрасте. Уровень АсАТ у помесных поросят в возрасте трех и четырех недель определяется на более высоком уровне по сравнению с чистопородными в тканях правой; двух месяцев - обеих долей; четырех месяцев - правой доли. Активность КФ у трех-, четырехнедельных, двух- и четырехмесячных помесных поросят в тканях обеих долей достоверно выше, чем у чистопородных. Уровень ЩФ у помесных поросят достоверно выше по сравнению с чистопородными в тканях левой доли поджелудочной железы в возрасте двух и трех недель. Активность а-амилазы у помесных поросят в возрасте двух и трех недель в тканях обеих долей существенно выше, чем у чистопородных.
Динамика массы тела, массы печени и поджелудочной железы у
разновозрастных чистопородных и помесных поросят
Наиболее интенсивно живая масса чистопородных и помесных поросят изменяется с недельного по двухнедельный и с четырехнедельного по двухмесячный возраст. Масса печени и масса поджелудочной железы наиболее высокими темпами увеличивается с односуточного по недельный и с трехнедельного по четырехнедельный возраст, длина печени - с односуточного по недельный и с недельного по двухнедельный.
При оценке живой массы чистопородных и помесных поросят выявляется то, что, начиная с четырехнедельного возраста, этот показатель достоверно превышает таковой у чистопородных. Масса печени у помесных поросят достоверно выше, чем у чистопородных, в возрасте одних суток, двух, четырех недель и четырех месяцев. Длина печени у помесных поросят достоверно больше, чем у чистопородных, с четырехнедельного срока. Достоверное различие массы поджелудочной железы между чистопородными и помесными поросятами обнаруживается в возрасте двух, трех и четырех недель. У помесных она выше, чем у чистопородных.
ВЫВОДЫ
1. Поросята рождаются с различной концентрацией АХ, активностью АХЭ и величиной ХИ в тканях различных долей печени и поджелудочной железы. Высокая концентрация АХ выявляется в тканях правой латеральной доли печени (3,790,09 у чистопородных и 2,980,18 у помесных); уровень АХЭ наивысший в тканях правой медиальной доли (соответственно 2,830,13 и 2,280,06); величина ХИ наибольшая в тканях правой латеральной доли печени (соответственно 1,88 и 1,80). Наибольшее содержание АХ обнаруживается в тканях правой доли поджелудочной железы (4,340,21 у чистопородных и 2,320,13 у помесных); активность АХЭ наивысшая в тканях правой (0,960,09 у чистопородных) и левой долей (1,820,15 у помесных); величина ХИ высокая в тканях левой (4,69 у чистопородных) и правой (1,38 у помесных) долей поджелудочной железы.
2. Возрастные изменения концентрации АХ, активности АХЭ в тканях печени и поджелудочной железы у чистопородных и помесных поросят имеют неравномерный, гетерохронный характер. Наиболее интенсивные изменения содержания АХ у чистопородных поросят происходят в тканях правой медиальной и левой медиальной долей печени с четырехнедельного по двухмесячный возраст (в 1,7 раза), правой латеральной и квадратной - с трехнедельного по четырехнедельный (в 1,8-3 раза), левой латеральной - с двухнедельного по трехнедельный (в 1,5 раза). Высокими темпами уровень АХЭ у чистопородных поросят изменяется в тканях правой медиальной, левой медиальной и левой латеральной долей печени с недельного по двухнедельный промежуток жизни (в 2,3-2,8 раза), в тканях правой латеральной и квадратной - с односуточного по недельный (на 61-71%). У помесных поросят характер и закономерности возрастных изменений концентрации АХ и активности АХЭ совпадает с чистопородными.
3. Наиболее интенсивно концентрация АХ у чистопородных и помесных поросят в тканях обеих долей поджелудочной железы изменяется с односуточного по недельный возраст (в 2,2-2,9 раза). Активность АХЭ у чистопородных поросят в тканях обеих долей наиболее существенно колеблется с недельного по двухнедельный промежуток жизни (в 2,6-2,8 раза). Относительная стабилизация содержания АХ, активности АХЭ в тканях обеих изученных пищеварительных желез у чистопородных и помесных поросят обнаруживается с двухмесячного возраста.
4. Активность ферментов ААТ, АсАТ, КФ, ЩФ и а-амилазы с возрастом у обеих групп поросят в тканях изученных органов изменяется неравномерно, с различной интенсивностью. Существенное изменение активности ААТ и АсАТ в тканях печени и поджелудочной железы выявляется у одно- и двухнедельных поросят. Возрастные изменения активности КФ наиболее выражены в тканях печени у поросят в течение первых двух недель жизни, а-амилазы - второго месяца и ЩФ - четвертого. В тканях поджелудочной железы значительные изменения активности КФ обнаруживаются в течение первых трех недель, ЩФ - второго месяца. Относительная стабилизация активности а-амилазы в тканях печени у поросят обеих групп отмечается с 2 месячного возраста. Стабилизация активности ферментов ААТ, АсАТ, КФ, ЩФ в исследуемый период жизни поросят в тканях печени не выявляется. В тканях поджелудочной железы относительная стабилизация активности изучаемых ферментов, в отличие от тканей печени, происходит со 2 месяца жизни поросят.
5. Корреляция между возрастными изменениями показателей системы АХ-АХЭ в тканях печени и активности ААТ, АсАТ и КФ Ц положительная, уровнем ЩФ и а-амилазы - отрицательная; между показателями системы АХ-АХЭ в тканях поджелудочной железы и уровнем ААТ, АсАТ, ЩФ, а-амилазы - отрицательная, КФ - положительная.
6. Постнатальные изменения массы тела поросят и морфометрических показателей печени и поджелудочной железы имеют неравномерный, гетерохронный характер. Наиболее выраженные возрастные изменения (в 1,2-2,7 раза) морфометрических параметров поросят обнаруживаются в течение первых четырех недель жизни поросят. Достоверные различия (р<0,05-0,01) массы тела между чистопородными и помесными поросятами обнаруживаются с четырехнедельного возраста, массы печени - двух- и четырехнедельного, массы поджелудочной железы - двух- и трехнедельного.
ПРЕДЛОЖЕНИЯ И РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Результаты исследований возрастных изменений параметров системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза и активности ферментов аланин- и аспартатаминотрансфераз, щелочной и кислой фосфатаз, а-амилазы в тканях печени и поджелудочной железы рекомендуем использовать в качестве физиологической нормы данных показателей.
2. Установленные закономерности становления системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза и активности ферментов рекомендуется учитывать при профилактике, диагностике и лечении болезней органов пищеварения у растущего молодняка свиней.
3. Полученные результаты исследований могут использоваться в научно-исследовательской работе, а также как углубляющий материал при чтении лекций и проведении занятий по темам Физиология молодняка сельскохозяйственных животных, Возрастная физиология органов пищеварения.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Иванова, Н. Н. Активность а-амилазы и фосфатаз в тканях печени у поросят в ранний постнатальный период / Н. Н. Иванова, Н. Г. Игнатьев // Ученые записки КГАВМ им. Н. Э. Баумана. - Казань. - 2010. - Т. 204. - С. 103-107. *
2. Иванова, Н. Н. Активность аминотрансфераз в тканях печени у разновозрастных поросят / Н. Н. Иванова, Н. Г. Игнатьев // Ученые записки КГАВМ им. Н. Э. Баумана. - Казань. - 2010. - Т. 204. - С. 98-103. *
3. Игнатьев, Н.Г. Активность а-амилазы и фосфатаз в тканях поджелудочной железы у поросят / Н.Г. Игнатьев, Н.Н. Иванова // Ветеринарный врач . - 2011. - № 1. - С. 43-46. *
4. Игнатьев, Н. Г. Возрастные изменения аминотрансфераз в тканях поджелудочной железы у чистопородных и помесных поросят / Н. Г. Игнатьев, Н. Н. Иванова // Ветеринарный врач. - 2011. - № 5. - С. 36-39. *
5. Иванова, Н. Н. Коэффициент де Ритиса в сыворотке крови, в тканях печени и поджелудочной железы у поросят крупной белой породы в постнатальном онтогенезе / Н. Н. Иванова // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. - 2011. - № 3 (31). - С. 136-138. *
6. Иванова, Н. Н. Влияние трехпородного скрещивания на систему ацетилхолин-ацетилхолинэстераза поджелудочной железы у поросят / Н. Н. Иванова // Инновационному развитию АПК - научное обеспечение. Сборник научных статей Международной научно-практической конференции, посв. 80-летию Пермской ГСХА им. Д. Н. Прянишникова. - Пермь. - 2010. - Ч. 3. - С. 84-86.
7. Иванова, Н. Н. Параметры системы ацетилхолин-ацетилхолинэстераза в тканях печени у разновозрастных поросят крупной белой породы / Н. Н. Иванова, Н.Г. Игнатьев // Материалы III-й Международной научно-практической конференции молодых ученых Молодежь и наука ХХI века. - Ульяновск. - 2010. - С. 188-191.
8. Иванова, Н. Н. Система ацетилхолин-ацетилхолинэстераза в тканях печени у разновозрастных помесных поросят / Н. Н. Иванова, Н. Г. Игнатьев // Актуальные вопросы совершенствования технологии производства и переработки продукции сельского хозяйства: Мосоловские чтения: материалы международной научно-практической конференции. Вып. XIII. - Йошкар-Ола. - 2011. - С. 107-108.
9. Терентьева, М. Г. Сезонные изменения активности сывороточных аминотрансфераз, а-амилазы, щелочной и кислой фосфатаз у поросят крупной белой породы / М. Г. Терентьева, Н. Н. Иванова, Н. Г. Игнатьев // Актуальные вопросы совершенствования технологии производства и переработки продукции сельского хозяйства: Мосоловские чтения: материалы международной научно-практической конференции. Вып. XIII / Мар. гос. ун-т. - Йошкар-Ола. - 2011. - С. 118-119.
10. Иванова, Н. Н. Система ацетилхолин-ацетилхолинэстераза в тканях поджелудочной железы у поросят крупной белой породы / Н. Н. Иванова // Инновационные направления развития АПК и повышение конкурентоспособности предприятий, отраслей и комплексов - вклад молодых ученых. Сборник научных трудов по материалам ХIV Международной научно-практической конференции. - Ярославль. - 2011. - С. 124-127.
11. Терентьева, М. Г. Уровень сывороточных ферментов у помесных поросят в разные сезоны года / М. Г. Терентьева, Н. Н. Иванова, Н. В. Мардарьева // Инновационные направления развития АПК и повышение конкурентоспособности предприятий, отраслей и комплексов - вклад молодых ученых. Сборник научных трудов по материалам ХIV Международной научно-практической конференции. - Ярославль. - 2011. - С. 194-197.
12. Иванова, Н. Н. Уровень а-амилазы и фосфатаз в тканях печени у разновозрастных поросят, полученных от помесных свиноматок / Н. Н. Иванова // Молодые ученые в решении актуальных проблем сельского хозяйства: материалы VII Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 80-летию ЧГСХА. - Чебоксары. - 2011. - С. 101-105.
13. Иванова, Н. Н. Масса и долина печени у поросят / Н. Н. Иванова // Молодые ученые в решении актуальных проблем сельского хозяйства: материалы VII Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 80-летию ЧГСХА. - Чебоксары. - 2011. - С. 98-101.
14. Иванова, Н. Н., Терентьева М. Г. Возрастные изменения массы поджелудочной железы у разновозрастных чистопородных и помесных поросят / Н. Н. Иванова, М. Г. Терентьева // Молодые ученые в решении актуальных проблем сельского хозяйства: материалы VII Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 80-летию ЧГСХА. - Чебоксары. - 2011. - С. 95-98.
15. Иванова, Н. Н. Аминотрансферазы в тканях печени у помесных поросят / Н. Н. Иванова, Н. Г. Игнатьев // Всероссийская научно-практическая конференция Аграрная наука - сельскому хозяйству, посвящённая 80-летию ФГБОУ ВПО ЧГСХА. - Чебоксары. - 2011. - Ч. 1. - С. 165-169.
*- работа, опубликованная в ведущем рецензируемом научном журнале, определенном ВАК РФ
Подписано в печать 22.10.2012 г.
Формат 60х84/16. Бумага офсетная. Усл. печ. л. 1,0..Тираж 100 экз. Заказ №
Полиграфический отдел ФГБОУ ВПО Чувашская государственная сельскохозяйственная академия
428000, г. Чебоксары, ул. К. Маркса, 29. Тел. 62-20-27.
![](images/doc.gif)