На правах рукописи
Семененко Марина Петровна
Фармакология и применение бентонитов в ветеринарии
16.00.04 - ветеринарная фармакология с токсикологией
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
доктора ветеринарных наук
Краснодар - 2008
Работа выполнена в ГНУ Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт Россельхозакадемии
Научный консультант: Заслуженный деятель науки РФ,
доктор ветеринарных наук,
член-корреспондент РАСХН
Антипов Валерий Александрович
Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор
Папуниди Константин Христофорович
доктор ветеринарных наук, профессор
Слободяник Виктор Иванович
доктор ветеринарных наук
Богосьян Адам Аведисович
Ведущая организация: Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана
Защита состоится "___" ____________ 2008 г., в ________ часов, на заседании диссертационного совета Д 220.038.07 при Кубанском государственном аграрном университете (350044, Краснодар, ул. Калинина, 13)
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Кубанского государственного аграрного университета.
Автореферат разослан "___" ____________ 2008 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета
доктор ветеринарных наук Родин Игорь Алексеевич
- ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Важным направлением совершенствования технологии ветеринарно-профилактических мероприятий является внедрение в производство новых методов и средств предупреждения и лечения болезней животных, в том числе, с применением препаратов, обладающих биоактивными свойствами, способными оказывать регулирующее влияние на интенсивность обменных процессов, усиливать функциональную активность органов и систем организма, повышать уровень естественной резистентности животных.
К таким веществам относится обширная группа алюмосиликатных минералов, обладающих ценными специфическими свойствами - сорбционными, ионообменными, связующими, тиксотропными. В эту группу входят и бентонитовые (монтмориллонитовые) глины (И.И. Гинзбург, И.А. Рукавишникова,1951; Р.Е. Грим, 1959).
С середины 60-х годов XX века накоплен большой опыт применения природных алюмосиликатов - бентонитов и цеолитов в сельском хозяйстве. Их используют в земледелии, в ирригационном строительстве, в производстве комбикормов, а также в качестве кормовой добавки для повышения продуктивности животных и птиц (В. Великанов, Ю. Пчелкин, С. Смагулов, 1983; Т.Н. Коков 1998; В.Г. Мамателашвили, П.Д. Болквадзе, М.С. Мерабишвили, 1971; Л. Оустеркоут, 1970; Ротэрмель З.А. и др., 1964, 1970; Петкова Г., Иванов К, 1982; Кириллов М.П., Бурихонов А., 1993; Thomas G.M.et al, 1963; Mendel V.R., 1971; Collings G.F.et al., 1980). Препараты на основе цеолитовых глин нашли широкое применение в здравоохранении и ветеринарии. При этом бентониты, в полной мере относящиеся к слоистым каркасным силикатам, в ветеринарной практике до недавних пор использовались весьма ограниченно, из-за отсутствия четко разработанной системы их применения в качестве эффективных и безопасных лечебно-профи-лактических средств. Актуальность настоящего исследования, его цель и задачи продиктованы тем, что ранее проводимые эксперименты по изучению физико-химических и токсикологических свойств бентонитовых глин и их использование в животноводстве далеко не полные и нуждаются в дальнейшей разработке. Отсутствие единого представления о характере и механизме их действия на живой организм указывает на необходимость комплексных исследований фармако-токсикологических свойств бентонитовых глин различных месторождений и научно обоснованного использования в качестве лечебно-профилактических средств в ветеринарной медицине.
Цель и задачи исследования. Основной целью исследований явилась разработка научно-обоснованной системы практического применения бентонитов для профилактики, лечения и повышения продуктивности животных и ее внедрение в промышленное сельскохозяйственное производство.
Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи:
- изучить физико-химические свойства бентонитов различных месторождений, дать характеристику основных требований и норм их контроля;
- изучить параметры общетоксического действия бентонитов на организм животных;
- провести исследования их фармакологической активности;
- определить лечебно-профилактическую эффективность бентонитов в ветеринарии при различных показаниях;
- разработать нормативную документацию по применению и контролю бентонитов, внедрить их в промышленное производство и практику животноводства.
Научная новизна работы. Впервые на основании комплексных исследований дано теоретическое и практическое обоснование использования природных бентонитов в животноводстве и ветеринарии. Изучен химический состав и токсикологические свойства бентонитов, установлено их положительное действие на организм в целом и функции различных органов и систем животных. Экспериментально доказана эффективность их применения для оптимизации обменных процессов, коррекции микроэлементной недостаточности, повышения уровня неспецифической резистентности организма животных.
Установлен высокий уровень биологической активности и лечебно-профилактической эффективности при гипотрофии, анемии, микотоксикозах, болезнях обмена веществ, стрессах животных. Подтверждено их высокое профилактическое и терапевтическое действие при желудочно-кишечных заболеваниях неинфекционной этиологии у молодняка свиней.
Результаты исследований, представленные в работе, существенно дополняют и расширяют имеющиеся сведения о биологическом влиянии природных бентонитов на организм животных и птицы.
Полученные экспериментальные данные позволяют проводить исследования в направлении дальнейшего изучения бентонитов и создания новых комплексных лечебных и кормовых средств на их основе.
Научная новизна исследований защищена патентом РФ на изобретение (№ 2316323 от 10.02.2008) и 3 положительными решениями на выдачу патентов РФ (№ 2006 115511/13 от 03.09.2007; № 2006 119285/15 от 02.11.2007; № 2006 № 2006145616/15 от 20.12.2006).
Практическая значимость работы и внедрение результатов исследований. Разработана и научно обоснована технология использования бентонитов для стимуляции продуктивности и нормализации обменных процессов, коррекции минерального обмена и повышения устойчивости животных к заболеваниям, а также в качестве средств, обладающих выраженной лечебно-профилактической эффективностью при ряде патологий крупного рогатого скота, свиней и птицы.
Практическая ценность бентонитов подтверждается положительными результатами широких производственных исследований, на основании которых разработана нормативная документация, определяющая условия производства и применения препаратов, требования к качеству и методам контроля, утвержденная в установленном порядке вышестоящими органами (временное наставление № 13-5-2/1620 по применению моренита в ветеринарии, одобренное Ветфармбиосоветом и, в установленном порядке, утвержденное Департаментом ветеринарии МСХП РФ 01.06.99 г.; наставление по применению бентонита кормового и технические условия на серийное производство, утвержденные Департаментом ветеринарии МСХП РФ 04.10.99 г., регистрационный № 13-5-2/1747).
Производство препарата моренит освоено ОАО Ильский завод Утяжелитель - НПО Бурение (Краснодарский край) и бентонита кормового - ОАО Журавский охровый завод Воронежская область.
На основании собственных исследований, а также обобщения данных литературы, в соавторстве разработаны:
- Методические рекомендации по эффективным зооветеринарным технологиям повышения воспроизводства, сохранности и продуктивности животных (утверждены заместителем главы администрации Краснодарского края 12 апреля 2005 года);
- Методические рекомендации по комплексной этиопатогенетической фармакотерапии и профилактики болезней молодняка сельскохозяйственных животных в условиях Краснодарского края (утверждены начальником управления Федеральной службы по ветеринарному надзору по Краснодарскому краю и Республике Адыгея 11 ноября 2005 года;
- Методические рекомендации по применению бентонитов в животноводстве (утверждены заместителем руководителя Федеральной службы по ветеринарному и фитосанитарному надзору Российской Федерации, Москва, 2007).
Апробация работы. Результаты экспериментальных и клинических исследований, явившиеся основой диссертации, доложены, обсуждены и одобрены на: заседаниях Ученых Советов Краснодарского НИВИ 1996-2008 гг.; заседаниях кафедры фармакологии КГАУ 2000-2007 гг.; заседаниях Ветфармбиосовета 1996-2005 гг.; на международных и Всероссийских научно-практических конференциях в гг. Москве, Санкт-Петербурге, Воронеже, Краснодаре, Казани, Волгограде, Троицке и др. в 1997-2007 годах..
Основные положения, выносимые на защиту:
- физико-химические свойства и минеральный состав бентонитовых глин различных месторождений Краснодарского края, Ростовской и Воронежской областей, основные требования к их контролю;
- токсикологическая оценка изучаемых препаратов;
- фармакологические свойства бентонитов и их биологическое влияние на организм животных;
- обоснование применения бентонитов в качестве лечебно-профилактических средств при различной патологии у животных и птиц;
- результаты внедрения бентонитов и экономическая эффективность их применения в сельскохозяйственном производстве.
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 49 научных работ в сборниках всероссийских и международных конференций, центральных журналах и отдельных изданиях (из них 8 в рецензируемых научных изданиях, рекомендованных ВАК Минобразования РФ - Ветеринария, Вестник Российской академии наук, Ветеринарная патология, Птицеводство, Свиноводство, Молочное и мясное скотоводство, Труды Кубанского государственного аграрного университета), в том числе 2 брошюры и 3 методических рекомендации.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 348 страницах стандартного компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений и приложения. Библиографический список включает 364 источника, в том числе - 109 иностранных авторов. Работа иллюстрирована 87 таблицами и 9 рисунками.
- МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Работа выполнена с 1995 по 2007 годы в Краснодарском научно-исследовательском ветеринарном институте на базе лабораторий ветеринарной фармакологии, микологии и терапии, а также в ряде хозяйств Краснодарского края, Белгородской, Воронежской и Ростовской областей в соответствии с Государственными планами научных исследований РАСХН. Она является частью заданий 04.01.01. с № госрегистрации 01.9.80. 006905; 06.02.01. с № госрегистрации 01.9.80. 006905; и 06.01.01. с № госрегистрации 006908.
Основные объекты исследований - природные алюмосиликатные минералы - щелочные и щелочноземельные бентонитовые глины, опытные и промышленные образцы которых получены из Миллеровского, Тарасовского (Ростовская область), Черноморского (Краснодарский край), Дашуковского (Украина), Герпегежского (Кабардино-Балкария), Никольского и Кантемировского (Воронежская область) месторождений. Производители - Ильский завод Утяжелитель - Краснодарский край и ОАО Журавский охровый завод Воронежская область.
Экспериментальные и научно-производственные опыты проведены в соответствии с требованиями к врачебно-биологическому исследованию по подбору аналогов, постановке контроля, соблюдению одинаковых условий кормления и содержания животных в период проведения работы и учета результатов. При постановке опытов были использованы токсикологические, фармакологические, физиологические, клинические, биохимические, морфологические, иммунологические и другие методы исследований.
В лабораторных и научно-хозяйственных опытах использовано 390 белых беспородных крыс, 12 морских свинок, 10 кроликов, 338650 свиней, 260770 голов крупного рогатого скота, 58310 птицы.
Физико-химические свойства бентонитовых глин различных месторождений изучали по отобранным средним пробам в соответствие с определенными методиками и стандартами, установленными ГОСТ Р 51740. Радиоактивность определяли методами, утвержденными ГСЭН Российской Федерации.
Общетоксические свойства бентонитов оценивали путем определения острой и хронической токсичности, возможных побочных свойств и отдаленных последствий в соответствии с Методическими указаниями по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве, утвержденными ГУВ СССР и Методическими рекомендациями по токсико-экологической оценке лекарственных средств, применяемых в ветеринарии, одобренных секцией отделения ветеринарной медицины РАСХН (1998). Препараты вводили лабораторным животным непосредственно в желудок с помощью полиэтиленового зонда и шприца Рекорд.
Определение острой токсичности проводили на белых крысах, поросятах и цыплятах, по методу Deishmann и Le Blank. Исследуемые бентониты вводили в виде вводной взвеси внутрижелудочно. Основной целью проведения эксперимента по определению острой токсичности было установление различных доз LD при однократном внутрижелудочном введении препарата.
Показателями определения острой токсичности служили: внешний вид животных, состояние кожного покрова, поведение (возбуждение или угнетение, подвижность, изменение походки, реакции на внешние раздражения, выделения из глаз, рта, мышечные подергивания, тремор, судороги, параличи, парезы и т.д.). Во время клинических наблюдений учитывали внешний вид, поведение, потребление корма, изменение массы тела, морфологическую и биохимическую картину крови.
Параметры хронической токсичности изучали по общепринятым методикам на белых крысах, телятах и поросятах. Бентониты задавали ежедневно течение 3-х месяцев по непрерывной схеме в дозах, превышающих условно-терапевтическую в 3 и 5 раз. При ежедневных наблюдениях учитывали клинические показатели: общее состояние, аппетит, показатели дыхания, пульса, температуры тела, функции органов пищеварения и мочеотделения, динамику прироста массы тела. Взвешивание животных осуществляли в начале опыта, через 45 и 90 дней, кровь для морфологических исследований брали три раза (фоновое, на 45 и 60 сутки). По окончанию эксперимента проводили биохимические исследования сыворотки крови.
В хронических опытах на свиньях оценивали влияние препаратов на функцию почек и пищеварительного тракта, для чего каждые 20 дней от животных собирали мочу и фекалии. При этом в моче определяли цвет, консистенцию, запах, концентрацию водородных ионов, удельный вес, содержание белка, углеводов, кровяных и желчных пигментов.
В фекалиях определяли цвет, запах, консистенцию (органалептически), наличие крови (бензидиновой пробой), желчных пигментов, билирубина (пробой Фуше), жира и крахмала (микроскопически), рН-лакмусовой бумагой.
Во время проведения экспериментов у животных определяли морфологический состав крови, выводили лейкоформулу, СОЭ, гематокрит, содержание гемоглобина.
Выявление кожно-резорбтивного действия изучаемых веществ проводилось по методике И.В. Саноцкого, (1970) на белых крысах методом погружения хвоста в раствор препарата. Местное действие проверяли на морских свинках массой 200-250 г методом накожных аппликаций и на кроликах - конъюнктивальной пробой (Хмельницкий Г.А., 1987).
Исследования по изучению эмбриотоксической и тератогенной активности бентонитов были проведены общепринятыми методами на белых крысах с массой тела 180-230 г при ежедневном скармливании препаратов на протяжении всего срока беременности. За молодняком, полученным от крыс, используемых в опыте, которым в корма вводили бентониты, вели наблюдения. Показателями общего постнатального развития служили динамика их массы, время открытия глаз, появление шерсти, двигательная активность, способность к координации движений и выживаемость.
О качестве мяса после применения препаратов судили по результатам ветеринарно-санитарной экспертизы, включающей в себя органолептическую и дегустационную оценку мяса и жира, а также биохимические исследования, при которых определяли рН бульона, через час и сутки после убоя, степень бактериальной обсемененности туш методом отпечатков с поверхности и глубоких слоев мышц, реакцию на пероксидазу, формольную реакцию и определение коэффициента кислотность-окисляемость по методике Сенченко Б.С. (2001).
Наряду с этим были проведены патоморфологические исследования органов и тканей животных, использованных в опыте по изучению хронической токсичности. В качестве объекта для изучения послужили внутренние органы белых нелинейных крыс - печень, селезенка, почки, легкие и сердце, а также внутренние органы поросят крупной белой породы в возрасте 4 месяцев - желудок, тонкий и толстый кишечник, печень, почки, селезенка, сердце, мезентериальные лимфоузлы и кусочки поперечно-полосатой мышечной ткани из различных участков туши. Убой был проведен с полным извлечением и описанием внутренних органов.
Патоморфологические исследования проводили на кафедре анатомии сельскохозяйственных животных Кубанского ГАУ.
О фармакодинамике препаратов судили по клиническим показателям, изменениям в белковом, липидном, углеводном, минеральном и витамин- ном обмене, общей неспецифической резистентности, интенсивности роста и продуктивности животных.
При гематологических исследованиях определяли количество эритроцитов и лейкоцитов в камере Горяева, выводили лейкоформулу по В.Г. Мухину, содержание гемоглобина (гемоглобинцианидным методом), высчитывали цветовой показатель, СОЭ в аппарате Панченкова, гематокрит в капиллярах с центрифугой МЦГ-8.
Биохимические исследования состояли из определения в сыворотке крови общего белка (колориметрически), белковых фракций (нефелометрически), мочевины (цветной реакцией с диацетилмонооксимом и тиосемикарбазидом), общего кальция (с орто-кризолфталеином), неорганического фосфора (с ванадат-молибдатным реактивом), глюкозы (ферментативно). Активность трансаминаз, щелочной фосфатазы, мочевую кислоту, билирубин, холестерин, общие липиды, креатинин оценивали с помощью наборов фирмы ДДС. Микроэлементный состав крови (железо, цинк, медь) исследовался атомно-абсорбционным методом.
Для определения факторов неспецифической резистентности использовали тест бактериального фагоцитоза нейтрофилов с учетом степени его завершенности по отношению к бактериям Staphylococcus aureus (№ 209 Р) по И.В. Нестеровой с соавт. (1996). Бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК) определяли по О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966), лизоцимную (ЛАСК) - по Д.Г. Дорофейчук, Т-, В-, NК-лимфоциты методом Пирса в модификации Н.Н. Гугушвили с соавт. (2000) с прочным синим и нафтилацетатом. Содержание иммуноглобулинов - методом Манчини с сооавт. (Кондрахин И.П., 1985; Меньшиков В.В., 1978), а также согласно методическим указаниям по применению унифицированных методов исследований крови, мочи и молока в ветеринарных лабораториях, 1981).
Исследования по фармако-токсикологической и клинической оценке влияния бентонитовых глин на продуктивность и сохранность животных проведены на животноводческих комплексах и птицефабриках яичного направления.
Формирование групп животных для проведения экспериментов проводили по принципу аналогов. Контрольные группы животных получали основной рацион, предусмотренный технологией кормления. Опытные группы животных дополнительно получали бентониты в количестве от 1% до 3% к сухому веществу корма.
Терапевтические свойства препаратов выявляли на больных животных, профилактические - на клинически здоровых. Как здоровых, так и больных животных, взятых в опыт, подвергали клиническим исследованиям по общепринятым методикам. При этом у больных животных оценивали общее состояние, упитанность, задержку роста и развития.
Профилактическую и лечебную эффективность препаратов на основе бентонитов оценивали по их способности восстанавливать показатели эритро- и гемопоэза, белкового, углеводного, минерального обмена веществ, неспецифической резистентности и нормализации физиологических функций организма больных животных.
Заключение о положительном действии препаратов делали на основании результатов комплексных клинических, биохимических, гематологических методов исследования.
На основании полученных данных высчитывали средний и среднесуточный приросты массы тела животного. У сельскохозяйственной птицы учитывали интенсивность яйцекладки, товарные качества и массу яйца. У коров дополнительно изучали молочную продуктивность.
Экономическая эффективность применения бентонитов для стимуляции продуктивности, профилактики и лечения заболеваний рассчитана в соответствии с Методикой определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий. - М., 1982, Методическими указаниями по определению экономической эффективности ветеринарных мероприятий, утвержденными Департаментом ветеринарии МСХ РФ (2002), и на основании Методических рекомендаций по определению общего экономического эффекта от использования результатов научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ в Агропромышленном комплексе (2007).
Полученные в опытах данные подвергнуты биометрической обработке с помощью программного обеспечения фирмы Microsoft ®, фирмы Carl Zeiss ®. Критерий достоверности определяли по таблице Стъюдента.
- РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Состав и физико-химические свойства бентонитов
Бентониты представляют собой смесь природных алюмосиликатных минералов, основу которых составляет монтмориллонит Al2O3.4SiO2n.H2O (60-70%). В результате естественного замещения атомов кремния в кристаллической решетке бентонитов магнием, железом или ионами других металлов, в их составе содержится сапонит - Al2O3[MgO]4SiO2n.H2O, нонтронит - Al2O3[Fe2 O3]4SiO2n.H2O, бейделит - Al2O3 . 3SiO2n . H2O и пирофиллит - Al2[Si4O10](OH)2. В небольших количествах в бентонитах присутствуют иллит, каолинит, цеолит, вермикулит и другие минералы. Поскольку в кристаллической структуре бентонитов преобладает монтмориллонит, их часто называют монтмориллонитами.
Химический состав природных бентонитовых глин в породах различных месторождений варьирует и зависит от химического состава исходного вулканогенного материала. Поэтому, при проведении исследований бентонитов нами использовался глинопорошок из бентонитсодержащего сырья Миллеровского, Тарасовского (Ростовская область), Дашуковского (Украина), Черноморского (Краснодарский край), Герпегежского (Кабардино-Балкария) месторождений, а также их смеси, изготавливаемые Ильским заводом Утяжелитель. Кроме того, в ряде экспериментов, работали с бентонитами щелочноземельного типа, расположенными на территории Воронежской области - Кантемировского месторождения, производство которых организовано на базе ОАО Журавский охровый завод.
По внешнему виду бентониты представляют собой однородный сыпучий порошок от серого до светло-желтого цвета, без запаха и вкуса. Слабо гигроскопичны, с водой образуют гели.
Анализ химического состава (таблица 1) показывает, что бентониты характеризуются высоким (более 54%) содержанием SiO2; концентрация Al2O3 находится на уровне 13,7-18,3%. Во всех пробах довольно высокое суммарное содержание железа (от 5,0 до 9,0%).
Таблица 1 - Химический состав бентонитовых глин различных месторождений
Химический состав бентонитовых глин, мас.% | Месторождения | |||||
Никольское (Воронежская обл) | Милле- ровское (Ростов-ская обл) | Тарасовское (Ростовская обл) | Дашуковское (Украина) | Черноморское (Краснодарский край) | Герпегежское (Кабардино- Балкария) | |
SiO2 | 67,7 | 62,06 | 65,50 | 54,52 | 59,54 | 68,0 |
Al2O3 | 14,56 | 18,26 | 13,74 | 15,41 | 17,09 | 14,9 |
CaO | 0,65 | 2,08 | 3,05 | 1,80 | 2,59 | 2,56 |
MgO | 1,42 | 2,50 | 1,94 | 2,17 | 0,94 | 1,36 |
Fe2O3 | 4,83 | 9,38 | 6,01 | 6,60 | 7,89 | 5,70 |
Na2O+K2О | 2,56 | 1,04 | 1,72 | 0,28 | 2,50 | 3,13 |
SO42- | 0,74 | 2,06 | 0,60 | 0,18 | 2,06 | 0,56 |
Бентонитовые глины обогащены солями щелочных и щелочноземельных металлов и включают в себя большой набор макро- и микроэлементов, жизненно-важных для организма - Cu, Zn, Mn, Co, Ag, Ca, Mg, Cr, J, Fe и др.
Исследования радионуклеидов в пробах бентонитов показали, что содержание в них Cs 137, K 40 и J 90 менее 370 Бк/кг и не превышает допустимых пределов. Уровень тяжелых металлов в 3-25 раз ниже показателей, предусмотренных нормативными документами.
Отличительной особенностью Никольского месторождения бентонитов является высокое содержание в них аморфного кремнезема - 24,6-37,2% и оксида калия, что позволяет отнести их к редкой разновидности силицитовой группы.
Учитывая, что существенных различий в составах и физико-химических свойствах бентонитов различных месторождений не установлено, а также исходя из экономических соображений, при оценке их фармакологических и токсикологических свойств использовались монтмориллонитовые глины Тарасовского месторождения, производимые ОАО Ильский завод Утяжелитель, получившие название моренит.
- 3.2. Токсикологическая характеристика бентонитов
Эксперименты по изучению токсикологических свойств проводили на интактных крысах, кроликах, морских свинках, птице и поросятах. Острую токсичность препарата определяли при внутрижелудочном способе введения, на крысах, поросятах и цыплятах в диапазоне доз с 1,4 до 24,0 г/кг массы тела.
Проведенное, согласно общепринятым методам, изучение токсикологических свойств моренита не позволило установить его основные характеристики: среднесмертельную дозу (LD50) и дозу, вызывающую появление клинической картины токсикоза. В течение периода наблюдения препарат не вызывал гибели и острой интоксикации животных и птиц, не влиял на их общее состояние и поведение. Рефлексы оставались сохраненными. Нарушения функциональной активности органов пищеварения и мочеотделения не наблюдали.
Экспериментальные исследования на лабораторных и сельскохозяйственных животных позволили сделать вывод о том, что моренит обладает слабой токсичностью, не вызывая явлений токсического характера и гибели животных в дозе до 24 г/кг массы тела, и по ГОСТ 12.1.007-76 Вредные вещества относится к 4-му классу опасности (незначительно опасные вещества).
Изучение хронической токсичности на крысах показало хорошую переносимость включения в их рационы моренита. На протяжении всего срока эксперимента гибели животных не наблюдалось, крысы были клинически здоровы, с хорошо выраженным аппетитом. Визуальное наблюдение не выявило каких-либо изменений в поведении опытных животных в сравнении с контролем.
При длительном скармливании препарата была выявлена положительная динамика прироста массы тела в опытных группах, причем, наибольший эффект наблюдали при введении препарата в дозе 3 г/кг массы тела. Так, прирост на 1 животное в группе, получавшей моренит в дозе 1 г/кг массы тела, составил 14,8%, в группе, получавшей моренит в дозе 3 г/кг массы тела - 33,3% и в группе, получавшей препарат в дозе 5 г/кг массы тела - 18,8% по отношению к контролю. А дополнительный прирост опытных групп за весь период эксперимента составил 120, 270 и 153 г к контролю соответственно.
Морфологические исследования крови опытных крыс также не выявили токсического влияния моренита. Средние результаты содержания эритроцитов, лейкоцитов, цветового показателя и лейкоцитарной формулы мало отличались от показателей контрольных животных и были характерны для физиологической нормы растущих животных. Отличительной особенностью морфологических изменений крови крыс опытных групп явилось недостоверное увеличение гемоглобина (на 1,7-4,8% в среднем по группам). Кроме того, в лейкоформуле крыс третьей опытной группы на 45-е сутки эксперимента наблюдали незначительный лимфоцитоз, который, однако, в сочетании с физиологически нормальным содержанием эритроцитов (8,070,83 1012/л) в крови животных указывает на усиление деятельности лимфопоэтического ряда красного костного мозга при отсутствии угнетения эритропоэза.
При патоморфологическом и гистологическом исследовании органов и тканей экспериментальных животных отклонений и каких-либо особенностей в строении выявлено не было. Лишь, у отдельных гепатоцитов печени опытных и контрольных групп отмечалась атрофия ядра и наблюдалась белковая зернистая дистрофия, характеризующаяся отложением в цитоплазме ацидофильной зернистости, которую, судя, по незначительности патологического процесса, можно отнести к погрешностям кормления. В желудке и кишечнике наблюдалось умеренное утолщение слизистой оболочки за счет гипертрофии железистых структур, а также незначительное удлинение ворсинок в тонком отделе с усилением репаративных процессов. Эти изменения носили обратимый характер и отражали адаптационно-компенсаторные сдвиги в органах в ответ на сравнительно длительное воздействие препарата.
При взвешивании внутренних органов (печень, селезенка, почки, легкие, сердце) установлено, что средняя масса органов опытных животных существенно не отличалась от таковых показателей в контроле, что может свидетельствовать об отсутствии дополнительной нагрузки на органы, а также токсического воздействия изучаемого препарата и о его хорошей переносимости организмом.
При анализе данных хронического эксперимента на поросятах, в ходе которого изучали влияние моренита на функцию почек и пищеварительного тракта, установлено, что его длительное применение не оказывает отрицательного влияния на функции органов пищеварения и мочеотделения, что было подтверждено аналогичными физико-химическими показателями мочи и фекалий животных опытных и контрольной групп.
Исследования биохимических показателей сыворотки крови поросят установили достоверное возрастание концентрации общего белка на 5,9-9,1%, углеводов - на 14,8-26,2%. Остальные показатели не отличались от контрольных.
Результаты исследований по изучению влияния моренита на функциональное состояние печени при длительном скармливании показали, что применение препарата вызвало позитивные изменения в гомеостазе животных. К концу эксперимента было отмечено повышение уровня общего белка (на 12,4%) и оптимизация его фракционного состава. Увеличилась концентрация мочевины, что коррелирует с возрастанием общего белка в крови. Уровень глюкозы в сыворотке крови опытных поросят повысился на 22,1%. Аналогичная картина отмечалась и в контрольной группе, однако динамика изменения обменных процессов в ней отслеживалась менее интенсивно. По остальным показателям (количественное содержание билирубина, AST и ALT) достоверных изменений между группами выявлено не было. Это служит подтверждением того, что моренит при длительном назначении не только не оказывает токсического действия на печень, но и способствует активизации в ней процессов биологического синтеза.
Ветеринарно-санитарная экспертиза продуктов убоя поросят не установила отрицательного действия препарата на качество и вкусовые свойства мяса. Отличий в цвете, запахе, консистенции и качестве бульона не наблюдали. При лабораторных исследованиях разницы в показателях опытных и контрольной группы не регистрировали.
Изучение кожно-резорбтивного и аллергизирующего действия моренита не выявило его негативного влияния, как в месте нанесения, так и на общую ответную реакции организма. Это характеризует его как препарат, не оказывающий местного аллергизирующего действия на организм животных.
При оценке эмбриотоксического и тератогенного действия установлено, что назначение моренита беременным животным не оказывает негативного влияния на течение беременности и роды. Потомство, рожденное от крыс, получавших бентониты во время беременности, не отличалось от крысят контрольных животных. Различий в их росте, развитии и поведении не обнаружено.
- 3.3. Сорбционная способность бентонитов
Изучение сорбционных характеристик бентонитов, проводимое в нескольких сериях опытов, в отношении различных соединений как органического, так и неорганического происхождения, выявило их выраженное адсорбирующее действие. Так, поглотительная способность монтмориллонитов в отношении метиленовой сини была достаточно велика при различных концентрациях (от 200 до 100 мг бентонитов в 0,5%-ном растворе метиленовой сини поглощает от 96,77% до 92,56% красителя) и даже при малых количествах (50 мг) их активность составляла 30,56 %.
Изучение сорбционной способности бентонитов в отношении условно-патогенной микрофлоры подтвердило их высокое положительное действие. Количество выросших колоний после контакта бактериальной массы с бентонитом было в 15-30 раз меньше, чем при посеве культуры, не контактировавшей с препаратом. Причем, следует отметить, что сорбционная способность препарата более существенна в отношении стафилококков, чем у кишечной палочки. Так, если снижение количества колоние образующих единиц в каждом разведении у E. сoli после взаимодействия с бентонитом снижалось в 7-15 раз, то St.aureus - в 20-30 раз.
Исследования по определению сорбционной способности моренита и щелочноземельных бентонитов в отношении наиболее распространенных сочетаний микотоксинов (Т-2, охратоксина, зеараленона и фумонизина В1) (таблица 2), показали, что испытуемые препараты обладают адсорбционными свойствами в следующих процентных соотношениях:
Моренит - от 4,0% (в кислой среде при рН 2) до 64,0% (в щелочной среде при рН 8) в зависимости от токсина в большей степени адсорбировал в порядке убывания ФУМ > ЗЕН > Т-2;
Таблица 2 - Сорбционная активность бентонитов
Исходный материал | 0,5% (рН 8) | 1,0% (рН 8) | 2,0% (рН 8) | 3,0% (рН 8) | 1,0% (рН 2) | 2,0% (рН 2) | |
Моренит | |||||||
Т-2 | 62,9 мкг/кг | 59,8 6% | 53,4 15% | 50,9 19% | 25,7 59% | 60,3 4% | 58,4 7% |
ОА | 36,2 мкг/кг | 31,8 12% | 30,4 16% | 30,0 17% | 25,3 30% | 33,3 8% | 32,9 9% |
ЗЕН | 69,0 мкг/кг | 63,4 8% | 54,5 21% | 42,8 38% | 25,5 63% | 65,5 5% | 64,1 7% |
ФУМ | 1,199 мкг/кг | 1,055 12% | 0,923 23% | 0,815 32% | 0,431 64% | 1,019 15% | 0,995 17% |
Бентонит Кантемировского месторождения | |||||||
Т-2 | 62,9 мкг/кг | 58,8 6,5% | 52,8 16% | 51,5 18% | 28,9 54% | 61,0 3% | 57,8 8% |
ОА | 36,2 мкг/кг | 32,2 11% | 31,1 14% | 29,3 19% | 26,0 28% | 33,6 7% | 33,4 8% |
ЗЕН | 69,0 мкг/кг | 62,1 10% | 52,4 24% | 47,6 31% | 26,9 61% | 64,17 7% | 64,17 7% |
ФУМ | 1,199 мкг/кг | 1,043 13% | 0,935 24% | 0,839 31% | 0,407 66% | 1,031 14% | 1,0 1 6% |
Приложение: верхняя цифра в столбце - концентрация микотоксина после адсорбции; нижняя цифра - процент поглощения микотоксина.
Щелочноземельный бентонит - аналогично, от 3,0% до 66,0% в зависимости от токсина также в большей степени адсорбировал в порядке убывания ФУМ > ЗЕН > Т-2. Причем, в увеличении сорбционной активности большую роль играет концентрация адсорбента. Наиболее выраженные сорбционные свойства отмечаются при повышении количества алюмосиликатов с 1 до 3%: у моренита в 1,7-3,1 раза, у бентонита - в 1,5-3 раза соответственно. При этом сорбционная активность адсорбентов возрастает при повышении рН среды.
3.4. Фармакологические свойства бентонитов
3.4.1.Влияние бентонитов на показатели обмена веществ животных
Включение бентонитов в рационы жвачных оказало положительное влияние на основные обменные процессы организма, рост и развитие животных.
Научно-производственный опыт проводили на коровах черно-пестрой породы, находящихся на 2-4 месяце лактации. Животные, использованные в эксперименте, были разделены на две группы по 30 голов в каждой с учетом возраста, массы тела и продуктивности. Все подопытные коровы были клинически здоровы. Коровы контрольной группы получали корма основного рациона, опытной группе животных с концентратами дополнительно скармливали бентонит из расчета 3% от сухого вещества рациона.
На протяжении трех месяцев физиологическое состояние животных оценивали по результатам морфологических и биохимических исследований крови, отслеживая в динамике изменения в обменных процессах организма коров.
Проведенные исследования показали, что бентониты, включенные в состав рациона подопытных животных, обладают выраженным фармакологическим действием.
В картине красной крови коров отмечено достоверное (Р 0,05) увеличение эритроцитов и гемоглобина. При этом уровень гемоглобина в первый месяц эксперимента возрос на 12,4% относительно фоновых показателей, а через 60 и 90 дней его концентрация увеличилась до 14,7% и 16,1% соответственно (106,041,2 г/л и 107,438,5 г/л против 92,429,7 г/л фоновых показателей). Увеличение количества эритроцитов у опытных животных за весь период исследований варьировало в пределах 8,6-11,7%.
Применение бентонита оказало позитивное влияние на биохимический гомеостаз животных (таблица 3).
Таблица 3 - Влияние бентонита на биохимические показатели крови коров (Mm;)
Показатели | Фон | Контроль (n=30) | Опыт (n=30) | ||
ч/з 60 дн. | ч/з 90 дн. | ч/з 60 дн. | ч/з 90 дн. | ||
Общий белок, г/л | 87,210,4 | 86,413,6 | 90,111,9 | 89,613,5 | 98,318,1* |
Белковые фракции: % альбумины | 40,16,7 | 42,45,5 | 39,26,0 | 43,75,9* | 46,36,7* |
-глобулины | 13,40,9 | 12,11,1 | 11,50,8 | 14,02,6 | 16,72,8 |
-глобулины | 14,85,6 | 6,91,3 | 10,22,8 | 12,01,7 | 12,92,4 |
-глобулины | 31,75,7 | 38,65,1 | 39,13,6 | 30,36,2 | 24,13,2 |
Глюкоза, ммоль/л | 1,410,3 | 1,940,51 | 1,830,4 | 2,380,5 | 2,50,8 |
Мочевина, ммоль/л | 4,70,9 | 7,80,8 | 6,30,4 | 4,80,66 | 6,50,7 |
AST, Ед/мл | 26,53,2 | 39,04,8 | 41,26,3 | 34,52,9 | 38,73,6 |
ALT, Ед/мл | 15,72,0 | 14,33,5 | 24,45,2 | 16,64,8 | 19,92,7 |
Кальций общий, ммоль/л | 1,570,2 | 1,680,3 | 1,90,34 | 1,840,55 | 2,30,7 |
Фосфор неорганич., ммоль/л | 2,40,25 | 2,80,4 | 2,70,39 | 2,10,44 | 2,140,49 |
Железо, мкмоль/л | 20,583,1 | 22,63,5 | 24,02,6 | 27,44,0* | 28,83,6* |
Цинк, мкмоль/л | 13,91,8 | 12,40,9 | 14,62,0 | 16,52,4 | 17,33,2 |
Медь, мкмоль/л | 13,42,2 | 14,64,5 | 13,95,1 | 14,04,7 | 14,92,5 |
Марганец, ммоль/л | 1,060,5 | 1,120,4 | 1,010,35 | 1,090,8 | 1,060,3 |
Каротин, мкмоль/л | 0,470,02 | 0,570,04 | 0,420,03 | 0,490,06 | 0,50,02 |
Примечание: * - степень достоверности Р 0,05
Его использование, в значительной степени, изменило показатели протеинограмм опытных животных, не только повышая на 14,0-16,0% уровень общего белка в сыворотке крови, но увеличивая долю альбуминовой фракции на 8,9% - 15,5% (за 60 дней опытного периода). Применение бентонита повысило уровень глюкозы - основной показатель углеводного обмена (в 1,4-1,8 раза), а также способствовало активизации минерального обмена. Через 60 дней его скармливания содержание кальция в крови опытных коров увеличилось на 17,7% (против 7,0% контрольной группы), а к окончанию эксперимента - на 46,5%. Уровень фосфора, напротив, снизился. При этом, Са : Р соотношение изменилось в сторону увеличения кальция, составив 1,07 против 0,56 фоновых значений.
Разница в содержании микроэлементов у опытных животных в отличие от контрольных оказалась более существенной. Так, концентрация железа в крови коров, получавших бентонит, к концу исследований повысилась на 39,9%, цинка - на 24,5%, меди - на 11,2%. В контрольной группе животных эти показатели оставались на уровне фоновых исследований (разница к концу опыта колебалась в пределах 3,7 - 5,0%). Лишь по уровню железа значения были выше (116,6%), однако достоверности изменения показателей отмечено не было. На уровень магния и каротина бентонит существенного влияния не оказал.
При изучении динамики среднесуточного удоя у коров опытной группы его увеличение через 30 дней эксперимента составило 0,870,02 кг в сутки или 4,73%, а к 60-му дню - 1,140,03 кг или 6,8%. В среднем количество молока у опытных коров за экспериментальный период возросло на 7,3 - 7,8%.
Скармливание телятам черно-пестрой породы 3-х месячного возраста дополнительно к кормам основного рациона 1% моренита и БКМ (бентонит Кантемировского месторождения) к сухому веществу рациона, оказало положительное влияние на состав и функциональную активность форменных элементов крови. При этом у животных опытных групп морфологические показатели крови отличались более высокими значениями. Количество эритроцитов в этих группах составляло 6,910,17х1012/л и 6,80,23х1012/л против 6,180,14х1012/л в контроле. Их применение не только стабилизировало количество гемоглобина в крови животных, но и способствовало его достоверному увеличению (Р0,05). Увеличение содержания гемоглобина крови экспериментальных животных по сравнению с фоновыми значениями составило 13,2-11,4%.
Добавка в корма телят бентонитов способствовала достоверному (Р0,05) повышению уровня микроэлементов в сыворотке крови, в частности, железа на 51,2%-56,2%, цинка - на 22,2%, меди - на 12,5% соответственно.
Благоприятные изменения отмечены и в углеводном обмене. Уровень глюкозы под влиянием моренита и БКМ у опытных животных увеличился в 1,58 и 1,47 раза. Препараты оказали выраженное позитивное влияние на концентрацию ферментов, в частности, аланинаминотрансферазы, уровень которой вырос в опытных группах на 32,7% и 36,3% от исходного, сохраняясь в рамках физиологических значений.
Использование бентонитов в составе комбикормов в рационах телят оказало положительное влияние на энергию их роста, повысив прирост массы тела животных на 3,9-6,0%.
Результаты исследований по использованию природных минералов в свиноводстве, проводимые по схеме мать-приплод, показали, что дополнительное введение бентонитов в дозах от 1% до 3% от сухого вещества рациона, оказывает стимулирующее влияние на рост и развитие новорожденных поросят, повышая их массу при рождении - на 3,8%. Причем, преимущество этих поросят в росте сохранялось как в подсосный, так и отъемный периоды. Они достигали технологической массы тела с более высоким среднесуточным приростом (210 г против 188 г или на 11,7% больше), с одновременным снижением затрат корма на 1 кг прироста массы тела на 4,1-6,4%.
Исследования крови подсосных свиноматок показали, что назначение им бентонита оказывает стимулирующее действие на эритро- и гемопоэз, повышая в крови содержание эритроцитов и насыщенность их гемоглобином (17,32-1012 г, 17,72.1012 г против 21,57.1012 г в контроле).
В сыворотке крови подсосных свиноматок опытных групп отмечено повышение концентрации общего белка. на 2,0%-5,4%. Содержание мочевины снизилось на 15,2-28,2%. Концентрация глюкозы в крови повысилась (при степени достоверности результатов Р0,05) на 18,0%-23,5%, липидов - на 4,9%-5,7% соответственно. Уровень билирубина снизился в 1,3-1,5 раза.
Содержание кальция и фосфора в опытных группах возросло на 7,5-28,9% и 22,9-36,1% соответственно.
Применение бентонита оказало благоприятное влияние на показатели белкового обмена поросят и стабилизацию его фракционного состава. Наиболее существенные изменения отмечены в группе, в которой алюмосиликаты скармливали в дозе 3% к сухому веществу рациона, где увеличение уровня общего белка составило 10,0-18,1% (при Р0,05) относительно фона и 9,5-17,6% относительно контроля. Протеинограммы животных опытных групп отличались более высокими значениями уровня альбуминов (на 10,7-13,8%) и -глобулинов (на 15,8-18,6%). Количество -глобулинов, напротив, снизилось на 15,1-26,8%.
Длительное применение бентонита в дозах от 1% до 3% при откорме поросят подтвердило положительное влияние на их организм. Преимущество в росте и развитии отмечалось у животных на протяжении всего эксперимента, составляя в период доращивания 4,6%, возрастая к концу откорма до 5,8%.
3.4.2. Влияние бентонитов на показатели неспецифической
резистентности организма животных
Под влиянием природных бентонитов в организме происходят изменения не только в обменных процессах, обеспечивающих физиологическое здоровье животных, но и в показателях, характеризующих состояние естественной резистентности. Результатами исследований установлено, что их применение с кормами в дозе 1% от сухого вещества рациона активизирует органы кроветворения, повышая концентрацию лейкоцитов - на 9,3%. В лейкограммах опытных животных отслеживается динамика нормализации процентного соотношения дифференциальных клеток белой крови.
Применение бентонитов повышает фагоцитарную активность у телят на 30-й день на 6,6%, через два месяца - на 22,6%. Интенсивность фагоцитоза (фагоцитарный индекс) повышается в 1,53 раза относительно исходных показателей, фагоцитарное число увеличивается на 16,9%. Под влиянием бентонита лизоцимная активность возрастает в 1,6 - 1,72 раза. Процент бактериальной активности сыворотки крови у телят повышается на 8,0% - 10,1%, а концентрация гамма-глобулинов - на 12,5%.
Применение бентонитовых глин способствует увеличению содержания Т-лимфоцитов за счет снижения нулевых клеток на 15,7%, а также снижению циркулирующих иммунных комплексов на 7,3%.
Полученные данные свидетельствуют о том, что бентониты оказывают разностороннее и многоуровневое влияние на обменные процессы организма животных различных половозрастных групп, обеспечивая коррекцию морфологических и биохимических показателей крови, активизируя показатели естественной резистентности, стимулируя рост, развитие и продуктивность животных.
- 3.5. Лечебно-профилактическая эффективность бентонитов
Изучение эффективности бентонита и препаратов на его основе, проведено при ряде заболеваний неинфекционной патологии - желудочно-кишечных болезнях (диспепсия, гастроэнтерит), гипотрофии, анемии, некоторых микроэлементозах, микотоксикозах, стрессе, т.е., при болезнях, в этиологии и патогенезе которых существенную роль играют нарушения обмена веществ.
- 3.5.1.Эффективность при желудочно-кишечных заболеваниях
Профилактическая эффективность бентонитов при желудочно-кишечных заболеваниях изучалась на поросятах-сосунах и отъемышах в двух сериях опытов, в хозяйствах, благополучных по инфекционным заболеваниям.
В первой серии оценивали профилактическое действие бентонита на поросят через организм матерей, для чего, свиноматкам опытной группы с 60-го дня супоросности в рацион ежедневно вводили бентонит в количестве 1% к сухому веществу корма, а затем - 2% в течение 10 дней после опороса. Свиноматки второй группы служили контролем, находились на основном рационе и препарат не получали.
Установлено, что бентониты обладают выраженным предупреждающим действием, оказывая благоприятное влияние на свиноматок, а через их организм на приплод. Их добавление в рационы супоросных свиноматок оказало существенное влияние на заболеваемость родившихся поросят. Отсутствие мертворожденных и низкий процент павших животных в опытной группе (3,77%) по сравнению с контролем (5,76% мертворожденных и 13,46% павших) указывают на повышение жизнеспособности молодняка. При этом заболеваемость поросят диспепсией снизилась в 2,7 раза, продолжительность болезни укорачивается на 1-3 дня, протекая в более легкой форме и без терапевтического вмешательства. Применение бентонита повысило сохранность поросят на 9,7%.
Вторая серия опытов проводилась на молодняке 30-35-дневного возраста, содержащемся со свиноматками. Первой группе поросят (40 голов) бентониты подмешивали ежедневно во влажный комбикорм в количестве 1,5% до отъема и в количестве 3% в течение 10 дней после отъема. Вторая группа поросят (40 голов) служила контролем и находилась на основном хозяйственном рационе.
Ежедневное добавление бентонитов в корма оказало позитивное влияние на заболеваемость гастроэнтеритом и сохранность опытных животных (12,5% при 100% сохранности), а также на динамику изменения гематологических и биохимических показателей крови, проявившуюся повышением уровня эритроцитов (на 18,4%), гемоглобина (на 20,3%), общего белка (на 14,7%), глюкозы на (9,5%). Их применение позволило ослабить воспалительную реакцию, снизив уровень -глобулинов опытных поросят на 18,6%, мочевины - на 12,4%. Профилактическая эффективность от применения природных минералов при профилактике гастроэнтерита составила 19,8%.
Бентониты, наряду с профилактическим, оказали и ростостимулирующее действие, способствуя лучшему усвоению питательных веществ корма. Среднесуточный прирост массы тела в опытных группах превысил показатель контроля на 39,1%.
Терапевтическая эффективность при гастроэнтеритах
Для изучения эффективности применения бентонитов в комплексной терапии гастроэнтеритов было проведено две серии опытов на поросятах 14-дневного и 30-40 - дневного возраста. На фоне соблюдения всех зоогигиенических требований были испытаны дозы бентонита, подобранные из расчета 2 и 3% от сухого вещества рациона.
В первой серии эксперимента изучали влияние бентонитовых глин на поросят-сосунов, содержащихся с матерями. С этой целью были отобраны станки со свиноматками, в помете которых находились поросята с признаками гастроэнтерита. Животных разделили на две группы: опытную (20 поросят) и контрольную (22 поросенка). При постановке диагноза были исключены инфекционные и инвазионные болезни, сопровождающиеся поражением желудочно-кишечного тракта, в связи с чем, лечение поросят осуществлялось по следующей схеме:
- контроль - голодная диета 12-18 часов, затем диетическое кормление и противомикробные средства (тетрациклин по 0,015 г/кг массы тела, фуразолидон в разведении 1:4000 по 1-2 мл/кг). Опытной группе поросят дополнительно к схеме лечения в корма вводили бентонит в терапевтической дозе (2%).
Вторая серия опытов проводилась на поросятах 30-35 - дневного возраста. Отобранных по клиническим признакам животных (36 поросят) разделили на две равные группы. Лечение больных поросят осуществляли по предыдущей схеме, лишь в опытной группе количество бентонита было увеличено до 3%.
Для оценки терапевтического эффекта схем лечения учитывали клиническую эффективность, сроки лечения, нормализацию метаболических процессов в организме. Выздоровление животных от начала применения лечения (полная ликвидация явлений интоксикации, нормализация актов дефекации), расценивали как клинический эффект.
Применение бентонитов дополнительно к схеме лечения, принятой в хозяйстве, оказало положительное влияние на клеточный состав крови за счет снижения уровня эритроцитов на 8,2% (в контроле - на 3,3%), количества эозинофилов на 26,1%, палочкоядерных нейтрофилов в 1,73 раза и возрастания числа лимфоцитов на 19,1%.
При этом среднее содержание гемоглобина, напротив, достоверно (Р 0,05) повысилось на 25,3%, тогда как в контрольной группе повышение этого показателя находилось в пределах 14,7%. Разница по группам составила 10,6%. Это свидетельствует о выраженном антианемическом действии бентонитов.
Уровень белка увеличился на 17,0%, альбуминов - на 25,2% глюкозы в 1,6 раза, концентрация -глобулинов уменьшилась на 17,9%, количество билирубина снизилось до физиологических значений (на 33,1%), в то время как в контроле снижение составило 15,6%. Наблюдалось заметное увеличение концентрации мочевины в опытных группах (в1,86 раза), что может служить подтверждением антитоксической функции бентонита, существенно облегчающей работу печени и почек. Активность ферментов - (ALT и AST) снизилась по отношению к исходным данным, полученным в начале эксперимента.
Применяемые схемы лечения способствовали стимуляции как клеточного, так и гуморального звеньев иммунитета, однако в опытной группе животных прослеживалась тенденция в их большей активизации. Количество Т-лимфоцитов у опытных поросят увеличилось на 9,4% (с 32,4% до 41,8%), а у контрольных - на 8,2%, В-лимфоцитов - соответственно в 2,06 и 1,79 раза.
Фагоцитарная активность лейкоцитов возросла на 13,2% (опыт) и 9,5% (контроль). Аналогичная динамика выявлена и в отношении лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови поросят,
Кроме того, позитивное действие бентонитов проявилось и в ослаблении перистальтики кишечника поросят. Их применение в комплексной терапии стабилизировало перистальтику кишечника, снизило болевые ощущения при пальпации живота, способствовало устойчивости организма животных к неблагоприятным факторам среды и стрессам. Срок выздоровления поросят сократился на 3,2 дня.
Введение бентонитов с первыми симптомами диареи повысило терапевтический эффект по сравнению с традиционным лечением на 9,1%.
3.5.2. Эффективность бентонитов при гипотрофии поросят
Введение в рационы супоросных свиноматок бентонита из расчета 3% к сухому веществу корма за 30 дней до опороса и до 26-дня подсосного периода оказало положительное влияние на качество и количество полученного приплода и развитие поросят в подсосный период. Количество поросят, родившихся с признаками гипотрофии у свиноматок, снизилось в 1,8 раза.
Его применение подсосным свиноматкам положительно сказалось на приросте массы тела поросят, как гипотрофиков, так и нормотрофиков. Разница между этими поросятами по среднесуточному приросту составила 15,8%. Бентонит способствовал нормализации обменных процессов, повышению сохранности (на 16,6%) и улучшению здоровья поросят.
Добавление бентонита в дозе 3% к корму в течение 20 дней поросятам-гипотрофикам 26-ти дневного возраста с массой тела 3,2-3,8 кг (что ниже нормальной технологической массы на 36,3%), отставшим в росте в подсосный период позволило увеличить среднесуточные приросты массы тела животных на 32,03%, сохранность - на 16,6% (таблица 4).
Анализ динамики изменения общего белка и глюкозы показал, что у опытных животных их уровень был на 25,3% и в 1,47 раза выше в сравнении с показателями поросят контрольной группы.
Таблица 4 - Влияние бентонита на массу тела и сохранность при гипотрофии поросят (Mm; n=24)
Показатели | Контрольная группа | Опытная группа |
Количество животных при постановке опыта, гол. | 12 | 12 |
Продолжительность опыта, дней | 20 | 20 |
Масса тела в начале опыта, кг | 3,49±0,16 | 3,43±0,21 |
Масса тела в конце опыта, кг | 5,85±0,28 | 6,55±0,43* |
Среднесуточный прирост, г | 118,0 | 155,8 |
В % к контролю | - | 32,03 |
Падеж, гол. | 3 | 1 |
Сохранность, % | 75,0 | 91,6 |
Примечание: * - степень достоверности Р0,01
3.5.3. Использование бентонитов для профилактики анемии поросят
Эксперименты по применению бентонитов для профилактики алиментарной железодефицитной анемии поросят-сосунов, рожденных от свиноматок, которые на протяжении 30-40 дней (в зависимости от сроков супоросности) дополнительно к основному рациону получали алюмосиликаты (1,5% от сухого вещества рациона), показали, что их использование оказывает благоприятное воздействие на процессы эритро- и гемопоэза. Применение бентонитов подсосным свиноматкам снижает тяжесть течения болезни у поросят и нивелирует клинические признаки анемии. Уровень гемоглобина у экспериментальных животных повысился на 17,9%, эритроцитов - на 16,0%, железа - на 51,8%, меди - на 32,9%.
Результаты исследования крови опытных поросят, проведенные на фоне однократного применения ферроглюкина, показали, что все показатели, характеризующие течение и степень развития анемии, возрастают в следующих процентных соотношениях: эритроциты - на 18,12%, гемоглобин - на 24,7%, железо - на 13,5% в сравнении с аналогами, не получающими добавки бентонита.
Следовательно, применение бентонитов супоросным свиноматкам со второй половины супоросности оказывает положительное влияние на организм поросят в период внутриутробного развития, нормализуя морфологический и биохимический состав крови, активизируя процессы кроветворения и восполняя недостаток железа и меди в организме животных на фоне применения ферродекстрановых препаратов.
3.5.4. Эффективность применения бентонитов для коррекции
минерального обмена
В ряде опытов на свиньях и крупном рогатом скоте испытана эффективность применения природных бентонитов для коррекции минерального обмена у животных.
Начальная стадия дефицита микроэлементов протекает почти без видимых клинических изменений в состоянии животного, однако проведенными скрининговыми исследованиями установлено, что у внешне здоровых животных в содержании макро- и микроэлементов отслеживается следующая тенденция: уровень железа снижен до 100%; цинка - от 70% до 100%; меди - до 50% соответственно. Нарушено Са:Р соотношение (от 40 до 100%), при этом, дисбаланс связан с пониженной концентрацией кальция и высокими значениями фосфора.
Однако введение в рационы свиноматок бентонитов в дозе 1,5% к сухому веществу рациона показало, что уже через месяц их применения концентрации меди, цинка и железа в сыворотке крови повысились на 13,9%, 42,3% и 21,4% соответственно. В обмене макроэлементов регистрировали повышение концентрации кальция на 22,2%. Уровень фосфора, напротив, снизился.
Эксперименты, проведенные на глубокостельных коровах, которым за 60 дней до отела ежедневно скармливали по 50 г бентонита, показали, что уже на 30-й день их применения у животных было отмечено увеличение концентрации железа на 19,5%, цинка - на 11,7%, меди - на 9,7% (рисунок 1). Последующее скармливание природных минералов подтвердило положительную динамику в содержании уровней микроэлементов в крови опытных коров, которые к концу исследований составили по железу 29,22,1 мкмоль/л против 22,11,9 мкмоль/л фоновых показателей (при достоверности Р0,01), по меди - 15,20,8 мкмоль/л против 13,40,56 мкмоль/л и цинку - 17,02,4 мкмоль/л против 14,51,6 мкмоль/л соответственно. Разница между опытной и контрольной группами на 60-й день исследований составила по железу - 39,7%, меди - 10,9%, цинку - 23,1% соответственно.
Рисунок 1
При этом установлено, что наиболее существенно происходило возрастание количества сывороточного железа, которое с наибольшими значениями отмечалось в первый месяц опытного периода.
3.5.5. Влияние бентонитов на организм животных при
технологическом стрессе
Использование бентонитов в рационах животных оказывает благоприятное влияние на организм в период стрессовых ситуаций. Исследования в этом направлении проведены на поросятах 35-40-дневного возраста, которым в течение 20 дней в корма основного рациона вводили бентониты в дозе 2%. После чего, животных перевозили автотранспортом на ферму по доращиванию молодняка. Применение бентонитовых глин в такой период способствовало лучшей мобилизации организма за счет активизации обменных процессов и повышения уровня клеточной и гуморальной защиты организма. Биохимическими и гематологическими исследованиями крови установлено, что после транспортировки у опытных животных в гомеостазе отмечались значительные изменения в сравнении с контрольными аналогами.
Бентонит оказал нормализующее влияние на содержание в крови свиней лейкоцитов (отмечено снижение количества лейкоцитов на 19,7-27,7% относительно контрольной группы). Уровень эритроцитов, напротив, повысился на 7,4% при снижении количества клеток красной крови в контроле на 9,2%. Концентрация белка возросла на 13,4%-15,5%. Диспротеинемия, возникшая на фоне транспортного стресса, исчезла. Уровень -глобулиновой фракции снизился на 36,2%-40,6%, количество альбуминов повысилось на 17,6%-18,5%. Отмечена тенденция к возрастанию иммуноглобулинов (на 2,7-5,8%).
Гипергликемия, сопровождающая транспортную стресс-реакцию организма, к 15 дню исследований исчезла. Концентрация сахара в сыворотке крови опытных поросят возросла в 1,7 раза.
Бентонит оказал влияние на уровень естественной резистентности организма. У поросят опытных групп соотношение Т - и В - клеток оптимизировалось и составило 1,93-1,96. Уровень Т-лимфоцитов увеличился на 14,0-20,9%, уровень лизоцимной активности сыворотки крови повысился на 8,1%, бактерицидной активности - в 1,7 раза.
Применение бентонита при транспортном стрессе свиней снизило потери массы тела животных на 4,1-5,3%. В двухнедельный период постстрессовой адаптации приросты массы тела поросят были выше на 11,1%-14,3%.
3.5.6. Лечебно-профилактическое действие бентонитов при
микотоксикозах животных
Эффективность применения бентонитов при микотоксикозах была испытана как на лабораторных животных (белые крысы), так и в промышленных условиях на курах-несушках и свиньях.
Перед постановкой экспериментов было проведено предварительное изучение кормовых рационов, установившее различную степень токсичности кормов (от слабой до средней). В результате микологических и микотоксикологических исследований проб комбикормов были выделены микроскопические грибы родов Aspergillius, Fusarium, Mucor, Penicillium, а также продуцируемые ими токсины - афлатоксин, Т-2 токсин, охратоксин и зеараленон.
Полученные результаты свидетельствуют, что ежедневное введение бентонитов в корма, пораженные плесневыми грибами и их токсинами в дозах от 1 до 3% к сухому веществу рациона, снижает признаки токсикоза, улучшает общее клиническое состояние животных, оказывает благоприятное действие на течение физиологических процессов организма.
Установлено, что введение 2 и 3% бентонита в пораженный микотоксинами корм, у лабораторных животных снижает тяжесть интоксикации, вызывая заметные изменения, как в клиническом статусе, так и в анатомо-морфологических показателях внутренних органов. У крыс, получавших бентониты, не наблюдалось угнетение эритропоэза, подтверждением чего явилось отсутствие патологических форм эритроцитов в мазках крови (в отличие от животных (негативный контроль), схема опыта которым не предусматривала применение бентонитов, в крови регистрировали микроциты (анизоцитоз) с грушевидной или неопределенной формой (пойкилоцитоз); отмечалась полихроматофилия; размеры эритроцитов колебались в широких пределах - от 4 до 12 микрон). Содержание гемоглобина было на уровне контрольных животных, получавших нетоксичные корма. Кроме того, в опытных группах отмечали возрастание гематокритной величины на 19,0% и 22,3%.
Ежесуточное скармливание бентонита в составе комбикормов курам-несушкам, находящимся на пике яйцекладки в условиях промышленного технологического производства, оказывает позитивное влияние на физиологическое состояние и биохимические процессы, протекающие в организме птиц, что проявляется повышением их сохранности и яйценоскости. Средняя масса яйца от кур-несушек увеличивается на 1,2-1,6%, в основном, за счет желтка. Значительно улучшается качество скорлупы, снижается количество боя яиц на 13,2% - 14,0%. Концентрация белка и глюкозы возрастает на 14,0-16,6% и 19,4-22,0%. Уровень альбуминов повышается на 6,9-10,4%, с одновременным снижением - глобулиновой фракции на 6,4-10,8% соответственно. В сыворотке крови кур опытных групп отмечается тенденция к снижению уровня активности аминотрасфераз (аланинаминотрансферазы - на 20,9-26,8% по сравнению с фоновыми показателями, и на 18,4- 26,8% по сравнению с контролем; аспартатаминотрансферазы - на 9,3-12,6% и на 15,6-23,8% соответственно). Уровень мочевой кислоты у кур-несушек снижается на 18,5%.
В свиноводстве проблему токсикозов также возможно решать с помощью бентонитов, скармливая последние вместе с кормами. В этом случае, уже через 20 дней после их применения, у животных наблюдаются значительные позитивные сдвиги в морфологических и биохимических показателях, характеризующиеся повышением уровня гемоглобина и количества эритроцитов на 14,8-15,2% и 29,7-40,0% соответственно. Одновременно наблюдаются изменения лейкограмм крови поросят, проявляющиеся снижением количества лимфоцитов и возрастанием числа сегментоядерных нейтрофилов.
Уровень общего белка повышается на 7,6-10,4%. Меняется соотношение в белковых фракциях в сторону увеличения альбуминов. Количество -глобулинов снижается на 17,4%. Отмечается нормализация уровня глюкозы и билирубина.
У свиноматок сокращается количество абортов, повышается физиологическая и хозяйственная оплодотворяемость на 3-4%. У поросят повышается сохранность на 5-6%, среднесуточные привесы возрастают на 15-20 гр. Приросты массы тела свиней на откорме увеличиваются с 450,0 до 510,0 граммов (в среднем, на 13,3%). Количество активной спермы у хряков-производителей повышается до 92%.
Применение бентонита экономически выгодно, при этом экономическая эффективность от его использования составляет от 3,0 до 5,1 рубля на 1 рубль затрат.
Обобщая результаты опытов по изучению влияния бентонитов на животных и птицу, можно утверждать, что наиболее типичным проявлением их фармакологического действия является интенсификация обменных процессов, а именно, способность поддерживать на физиологическом уровне гомеостаз организма. Введение в рационы животных различных доз бентонитов оказывает позитивное влияние на интенсивность их роста и развития; возрастает жизнеспособность не только у животных, получавших природные минералы, но и у полученного от них потомства.
Проведенные исследования показали высокую биологическую и лечебно-профилактическую эффективность бентонита при ряде заболеваний крупного рогатого скота, свиней, птицы и свидетельствуют о необходимости их использования в ветеринарной практике.
- ВЫВОДЫ
1. Бентониты представляют собой смесь природных алюмосиликатных минералов, основу которых составляет монтмориллонит Al2O3.4SiO2n.H2O (60-70%) и характеризуются высоким (более 54%) содержанием SiO2; и Al2O3 (13,7-18,3%). Они обогащены солями щелочных и щелочноземельных металлов и включают в себя большой набор макро- и микроэлементов, жизненно-важных для организма - Cu, Zn, Mn, Co, Ag, Ca, Mg, Cr, J, Fe и др.
Уровень радионуклеидов и тяжелых металлов ниже показателей, предусмотренных нормативными документами.
2. Бентониты малотоксичны для теплокровных животных и птиц (как в острых, так и в хронических опытах). Для данной группы веществ не установлены среднесмертельная доза (LD50) и доза, вызывающая появление клинической картины токсикоза, что по ГОСТ 12.1.007-76 Вредные вещества позволяет их отнести к 4-му классу опасности (незначительно опасные вещества).
Длительное применение бентонитов в дозах, превышающих терапевтические в 3-5 раз, не влияет отрицательно на общее состояние животных и показатели их клинического статуса, не оказывает раздражающего и аллергизирующего действия на кожу и слизистые. Бентониты не оказывают токсического действия на жизненно важные системы, органы и ткани организма, не обладают эмбриотоксическим и тератогенным действием, а также не изменяют физико-химических и вкусовых качеств мяса.
3. Бентониты обладают выраженной фармакологической активностью, оказывая значительное влияние на морфологические и биохимические показатели крови, стимулируя эритро- и гемопоэз, увеличивая при этом концентрацию эритроцитов и уровень гемоглобина на 8,6 -11,7% и 12,4 - 16,1% соответственно. Использование бентонитов способствует активизации белкового обмена (за счет повышения уровня общего белка на 14,0- 16,0%, и нормализации его фракционного состава); углеводного - за счет увеличения концентрации глюкозы в 1,4-1,8 раза.
Обогащение рационов бентонитами способствует оптимизации минеральной составляющей кормов и ведет к повышению в крови животных показателей кальция на 26,5%, железа на 39,9 - 46,5%, меди на 11,2 - 12,5% и цинка на 22,2 - 24,5%.
Использование бентонитовых глин в составе комбикормов в рационах оказывает влияние на энергию роста животных и их продуктивность, позволяя достигнуть преимущество в приросте массы тела телят на 3,9-6,0%, поросят на 4,6-5,8%. При этом применение бентонитов обеспечивает снижение затрат корма на единицу продукции на 4,1-6,4%.
4. Бентониты положительно действуют на показатели неспецифической резистентности животных за счет повышения фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов на 6,6-22,6%, их поглотительной и переваривающей способности, что проявляется возрастанием интенсивности фагоцитоза в 1,53 раза, увеличением фагоцитарного числа на 16,9%. Уровень лизоцимной активности за 60 дней применения бентонитов увеличивается в 1,6 - 1,72 раза. Процент бактериальной активности сыворотки крови повышается на 8,0% - 10,1%. Концентрация гамма-глобулинов повышается на 12,5%. Применение алюмосиликатов способствует возрастанию содержания Т-лимфоцитов за счет снижения нулевых клеток (0K - лимфоцитов) на 15,7%, а также снижению циркулирующих иммунных комплексов на 7,3%.
5. Бентониты обладают высокой сорбционной способностью в отношении веществ как органического, так и неорганического происхождения (красителей, условно-патогенной микрофлоры, микотоксинов). Их применение способствует снижению количества колониеобразующих единиц E. Сoli и St. aureus в 15-30 раз, а Т-2, охратоксина, зеараленона и фумонизина В1 - от 3,0% до 66,0% (в зависимости от токсина и концентрации рН).
6. Бентониты обладают выраженной профилактической активностью при диспепсиях и гастроэнтеритах поросят, что проявляется снижением заболеваемости (в 2,7 раза) и продолжительности болезни на 1-3 дня, а также повышением сохранности на 9,7%. Эффективность от применения природных минералов для профилактики гастроэнтеритов у поросят-отъемышей возрастает на 19,8%.
Применение бентонитов в дозе 2-3% в комплексной терапии гастроэнтеритов у поросят различного возрастного периода (от 14 до 40 дней) с первыми симптомами диареи оптимизирует иммуно-биохимический статус организма животных, повышает терапевтический эффект по сравнению с традиционным лечением на 9,1%, сокращает срок выздоровления на 3,2 дня.
7. Бентониты эффективны при гипотрофии поросят. Их введение в рационы супоросных свиноматок из расчета 3% к сухому веществу корма за 30 дней до опороса и до 26-дня подсосного периода оказывает положительное влияние на качество и количество полученного приплода и развитие поросят в подсосный период. Количество поросят, родившихся с признаками гипотрофии, снижается в 1,8 раза, сохранность повышается на 16,6%, нормализуются обменные процессы, возрастает темп прироста массы тела на 32,02%.
8. Применение бентонитов свиноматкам в дозе 1,5% на протяжении всего срока супоросности оказывает выраженное влияние на профилактику анемии поросят, нормализуя и поддерживая морфологический и биохимический состав крови, активизируя процессы кроветворения (эритро- и гемопоэз) и восполняя недостаток железа и меди в организме. Уровень гемоглобина повышается на 17,9%, эритроцитов - на 16,0%, железа - на 51,8%, меди - на 32,9%.
9. Введение в рационы крупного рогатого скота и свиней бентонитов в дозе 1,5% к сухому веществу рациона способствует коррекции минерального обмена, обеспечивая повышение усвоения животными цинка, железа и меди на 19,5-42,3%, на 11,7-21,4% и 9,7% соответственно.
10. Использование бентонитов в рационах животных оказывает благоприятное влияние в период стрессовых ситуаций, в частности, при транспортировке - за счет лучшей мобилизации организма, активизации обменных процессов, повышения уровня клеточной и гуморальной защиты, а также снижения потерь массы тела животных в послеадаптационный период на 4,1-5,3%.
11. В экспериментах выявлена высокая эффективность бентонитов при хронических смешанных микотоксикозах животных и птицы. Ежесуточное скармливание бентонитовых глин в составе комбикормов курам-несушкам, находящимся на пике яйцекладки в условиях промышленного технологического производства, оказывает позитивное влияние на физиологическое состояние и биохимические процессы, протекающие в организме птиц, что проявляется повышением их сохранности и яйценоскости. Средняя масса яйца от кур-несушек увеличивается на 1,2-1,6%. Значительно улучшается качество скорлупы, снижается количество боя яиц на 13,2% - 14,0%. Концентрация белка и глюкозы возрастает на 14,0-16,6% и 19,4-22,0%. Уровень альбуминов повышается на 6,9-10,4%. Снижаются признаки токсикоза, улучшается общее клиническое состояние. У поросят повышается сохранность на 5-6%, приросты массы тела свиней на откорме увеличиваются на 13,3%. Количество активной спермы у хряков-производителей повышается до 92%.
12. Производственными испытаниями подтверждена высокая экономическая эффективность применения бентонитов в животноводстве и ветеринарии, которая складывается из оптимизации гематологического, биохимического и физиологического статуса организма, повышения перевариваемости и сбалансированности кормов по минеральным веществам, увеличения продуктивности и сохранности животных. Экономический эффект от его использования составляет 3,1-5,1 рубля на 1 рубль затрат.
- ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ
На основании полученных результатов разработаны показания к применению и схемы использования бентонитов в животноводстве и ветеринарии.
Для практического применения в качестве лечебно-профилактических средств рекомендуется применять бентониты при желудочно-кишечных заболеваниях неинфекционной этиологии, гипотрофии, анемии, коррекции минерального обмена, смешанных микотоксикозах, стрессовых нагрузках, нормализации и оптимизации иммуно-биохимического статуса, интенсификации обменных процессов, а также в качестве средств, повышающих продуктивность животных.
Полученные результаты могут быть использованы на курсах повышения квалификации зоотехнических и ветеринарных специалистов, при чтении лекций, проведении практических занятий со студентами по клинической фармакологии, фармакотерапии и профилактике заболеваний сельскохозяйственных животных и птицы.
Результаты исследований нашли отражение в документах, утвержденных (согласованных) Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства и перерабатывающей промышленности Российской Федерации:
- Наставление по применению бентонита кормового и технические условия на серийное производство, утвержденные Департаментом ветеринарии МСХП РФ 04.10.99 г., регистрационный № 13-5-2/1747;
- Временное наставление № 13-5-2/1620 по применению моренита в ветеринарии, одобренное Ветфармбиосоветом и, в установленном порядке, утвержденное Депаратментом ветеринарии МСХП РФ 01.06.99 г.;
- Методические рекомендации по эффективным зооветеринарным технологиям повышения воспроизводства, сохранности и продуктивности животных (утверждены заместителем главы администрации Краснодарского края 12 апреля 2005 года);
- Методические рекомендации по комплексной этиопатогенетической фармакотерапии и профилактики болезней молодняка сельскохозяйственных животных в условиях Краснодарского края (утверждены начальником управления Федеральной службы по ветеринарному надзору по Краснодарскому краю и Республике Адыгея 11 ноября 2005 года;
- Методические рекомендации по применению бентонитов в животноводстве (утверждены заместителем руководителя Федеральной службы по ветеринарному и фитосанитарному надзору, Москва, 2007);
Производство препаратов освоено ОАО Ильский завод Утяжелитель - НПО Бурение (Краснодарский край) и ОАО Журавский охровый завод Воронежская область.
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ
- Антипов В.А., Семененко М.П., Соколовский С.Л. Медикаментозные премиксы в животноводстве и ветеринарии. // Матер. Международного координац. Совещания Экологические проблемы патологии, фармакологии и терапии животных. - Воронеж, 1997. - С. 176.
- Антипов В.А., Семененко М.П., Соколовский С.Л. Медикаментозные премиксы - новые высокоэффективные лечебно-профилактические препараты при заболевании животных. // Ассоциативные инфекции сельскохозяйственных животных и новые подходы к их ликвидации и профилактике. Тезисы докладов научной конференции, посвященной 50-летию Алтайской НИВС 30-31 июля 1997 г. - Барнаул, 1997. - С.72-73.
- Семененко М.П. Эффективность кормовой добавки моренит. //Матер. Всероссийской научно-практической конф. Академии естествознания Человек и ноосфера. Краснодар - Геленджик., 1999. - С. 62-64.
- Антипов В.А., Семененко М.П. Влияние монтмориллонитовых глин Краснодарского края на прирост и физиологический статус организма поросят. // Матер. Первого междунар. Симпозиума Современные проблемы ветеринарной диетологии и нутрициологии. - Санкт-Петербург, 2001. - С.73-74.
- Семененко М.П. Лечебно-профилактическое действие монтмориллонита при гастроэнтеритах поросят. // Матер. научно-практ. конф. Новые фармакологические средства для животноводства и ветеринарии. - Краснодар, 2001 - Т.II. - С.118.
- Матюшевский Л.А., Семененко М.П. Результаты исследований биологической эффективности бентонитов. // Матер. научно-практ. конф. Новые фармакологические средства для животноводства и ветеринарии. - Краснодар, 2001 - Т.II. - С.
- Семененко М.П., Соколовский С.Л., Антипов В.А. Разработка и исследование лечебно-профилактического (медикаментозного) премикса Фармикс при заболеваниях молодняка свиней. // Матер. научно-практ. конф. Новые фармакологические средства для животноводства и ветеринарии. - Краснодар, 2001 - Т.II. - С.116.
- Семененко М.П., Трунов М.А. Применение природных алюмосиликатов с целью снижения токсичности кормов, контаминированных простейшими грибами и их метаболитами. // Матер. научно-практ. конф. Новые фармакологические средства для животноводства и ветеринарии. - Краснодар, 2001 - Т.I. - С. 133-135.
- Трунов М.А., Семененко М.П., Якимов Г.В. Влияние кормового микотоксикоза на организм белых крыс в условиях эксперимента. . // Матер. научно-практ. конф. Новые фармакологические средства для животноводства и ветеринарии. - Краснодар, 2001 - Т.I. - С. 157-158.
- Семененко М.П., Антипов В.А. Использование бентонитовых глин в ветеринарии. - Краснодар: Кубанский агроуниверситет, 2002.
- Семененко М.П. Эффективность моренита при гипотрофии поросят. // Матер. междунар. научно-практ. конф. Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях. - Воронеж, 2002. С. 667-669.
- Семененко М.П. Определение сорбционной способности моренита в отношении условно-патогенной микрофлоры. // Матер. научно-производств. конф. Состояние и перспективы внедрения достижений ветеринарной науки и практики в сельскохозяйственное производство. - Вологда, 2002. С. 88-89.
- Семененко М.П. Премикс - адсорбент токсинов для животных и птиц (ПАТ). Агровестник Кубани.- № 12 (41). - Краснодар, 2003. С. 3.
- Семененко М.П. Профилактическая эффективность моренита при желудочно-кишечных заболеваниях свиней. // Матер. Всероссийской научно-практ. конф. и XIII Межвузовского координационного Совета СВИНИНА. - пос. Персиановский, 2004. С. 142-143.
- Семененко М.П., Антипов В.А., Кузьминова Е.В. К фармакодинамике природных бентонитов. //Матер. междунар. научно-практической конф. - Воронеж, 2004. С. 446-448.
- Антипов В.А., Семененко М.П., Фонтанецкий А.С., Матюшевский Л.А. Бентониты: применение в животноводстве и ветеринарии. - Краснодар, 2004. - 64 с.
- Семененко М.П., Басанкин А.В., Кузьминова Е.В. Влияние биологически активных препаратов на рост и развитие молодняка телят // Матер. Всероссийской науч.-практ. конф. Производство пищевых продуктов в соответствии с требованиями концепции здорового питания и другие вопросы.- Волгоград: РПК Политехник.- 2004.- С.209-211.
- Антипов В.А., Меньшенин А.Н, Турченко А.Н., Семененко М.П.. Эффективные зооветеринарные технологии по повышению воспроизводства, сохранности и продуктивности животных // Методические указания.- Краснодар.- 2005.- 79 с.
- Семененко М.П., Кузьминова Е.В., Шипицын А. Г. Использование бентонитовых глин в составе премиксов и их влияние на репродуктивные и продуктивные функции коров. // Матер. III международной науч.-практ. конф. Современные технологические и селекционные аспекты развития животноводства России 18-21 октября 2005 г.- Научные труды ВИЖа.- Вып.- 63.- С. 53-54.
- Кузьминова Е.В., Семененко М.П., Кудинова С.П. Биологически активные препараты в животноводстве. Там же.- С. 54-55.
- Фонтанецкий А.С. Семененко М.П. Фармакологическая активность бентонитов. Информационный листок № 05-54 - Краснодарский ЦНТИ.- Краснодар, 2005.
- Антипов В.А., Шипицын А.Г., Басова Н.Ю., Семененко М.П. Комплексная этиопатогенетическая фармакотерапия и профилактика болезней молодняка сельскохозяйственных животных в условиях Краснодарского края // Методические рекомендации.- Краснодар.- 2005.- 24 с.
- Семененко М. Бентониты: и подкормка, и лекарство.- М: Животноводство России.- № 3.- 2006.-С. 34-35.
- Семененко М.П. Эффективность использования моренита при экспериментальном микотоксикозе крыс. // Матер. Международной научной конференции Токсикозы животных и актуальные проблемы болезней молодняка. - Казань. - 2006.- С. 179-181.
- Семененко М.П., Кузьминова Е.В. Сравнительная эффективность препаратов на основе природных минералов.// Материалы межд. научн.-практ. конференции, посв. 60-летию Краснодарского НИВИ Актуальные проблемы ветеринарии в современных условиях.- 2006.- С.71-74.
- Семененко М.П., Антипов В.А. Роль кремния в организме животных. Там же.- С. 70-71.
- Семененко М.П. Физико-химическая характеристика моренита. Там же.- С. 77-75.
- Кузьминова Е.В., Семененко М.П., Ермакова Т.И. Применение антиоксидантов в птицеводстве. Там же.- С. 299-301.
- Семененко М.П., Матюшевский Л.А., Кузьминова Е.В. Биотехнологические приемы повышения продуктивности свиней. Там же.- С. 315-316.
- Семененко М. Оценка профилактической эффективности моренита при антенатальной гипотрофии поросят.- М: Свиноводство.- науч.-произв. журнал.- № 3.- 2006.- С. 29-30.
- Семененко М., Кузьминова Е., Шипицын А. Влияние препаратов карсел и моренит на биохимический статус скота.- М: Молочное и мясное скотоводство.-№ 6.-2006.- С. 35-36.
- Фонтанецкий А.С., Семененко М.П. Влияние природных минералов на функциональное состояние печени. Информационный листок № 06-38 - Краснодарский ЦНТИ.- Краснодар, 2006.
- Семененко М.П. Влияние препарата моренит на физиологические и биохимические показатели свиноматок.- Труды Кубанского государственного аграрного университета.- Выпуск 3.- Краснодар.-2006.- С. 134-140.
- Семененко М.П. Токсикологическая оценка препарата моренит.- М: Ветеринарная патология.- Международный научно-практич. журнал по фунд. и прикл. вопросам ветеринарии.- № 3 (18).- 2006.- С. 161-164.
- Семененко М. Антипов В. Влияние природных алюмосиликатов на организм птицы.- М: Птицеводство.- № 12.- 2006.- С.11-12.
- Кузьминова Е.В., Семененко М.П., Антипов В.А. Карсел и моренит для профилактики послеродовой патологии у коров.- М: Ветеринария.- № 12.-2006.-С. 38-41.
- Гулов Д.С., Семененко М.П., Соловьев В.С. Применение биологически активных веществ и иммуностимуляторов для профилактики иммунодепрессивного состояния у телят.- Материалы VIII Региональной научно-практич. конф. молодых ученых Научное обеспечение агропромышленного комплекса.- Краснодар, 7-8 декабря 2006 г. С. 255-256.
- Семененко М.П. Влияние природных алюмосиликатных минералов на состояние естественной резистентности организма телят.- Научное обеспечение ветеринарного обслуживания животноводства в условиях реформирования сельскохозяйственного производства.- Материалы научно-произв. конф., посвященной 75-летию Вологодской НИВС, г. Вологда, 19-20 апреля 2007 г. С. 109-112.
- Семененко М.П., Кузьминова Е.В., Шипицын А Г. Физиологическое состояние поросят при использовании моренита.- М: Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук.- № 2.- 2007.- С. 68-69.
- Семененко М.П., Антипов В.А., Фонтанецкий А.С. Возможности практического использования природных минералов в ветеринарии и животноводстве. - Достижения ветеринарной науки - на вооружение практическому животноводству. Матер. первого съезда ветеринарных фармакологов России, 21-23 июня 2007 года, Воронеж, 2007. - С. 551-553.
- Семененко М.П., Кузьминова Е.В. Научные основы применения премиксов и их биологическое значение в кормлении животных.- Агроснаб форум.- Информ.-аналит. сельскохоз. журнал (Спец. приложение - Эффективное животноводство), Краснодар.- № 4 (17).- 2007.- С. 18-19.
- Антипов В.А., Семененко М.П., Фонтанецкий А.С., Матюшевский Л.А. Перспективы применения природных алюмосиликатных минералов в ветеринарии.- М: Ветеринария.- № 8.-2007.-С. 54-57.
- Семененко М.П., Антипов В.А., Кузьминова Е.В. Средство для повышения продуктивности и сохранности сельскохозяйственных животных и птицы // Решение о выдаче патента на изобретение, № 2006 115511/13 (016847) от 03.09.2007, МПК А 61 К 67/02.
- Антипов В.А., Семененко М.П., Кузьминова Е.В., Матюшевский Л.А., Фонтанецкий А.С. Применение бентонитов в животноводсте // Методические рекомендации - Москва.- 2007.- 22 с.
- Семененко М.П., Антипов В.А., Кузьминова Е.В. Способ профилактики железодефицитной анемии у поросят. Патент на изобретение № 2316323 РФ от 10.02.2008.
- Семененко М.П., Антипов В.А., Кузьминова Е.В. Средство для лечения и профилактики желудочно-кишечных болезней сельскохозяйственных животных // Решение о выдаче патента на изобретение, № 2006 119285/15 (020951) от 02.11.2007.
- Семененко М.П., Ферсунин А.В. Использование медикаментозных премиксов в профилактике желудочно-кишечных заболеваний молодняка животных.- Материалы научно-практ. конф. фармакологов Росс. Федерации Фармакологические и экотоксикологические аспекты ветеринарной медицины, Троицк, 2007 г.- с. 284-287.
- Семенцов В.И., Семененко М.П., Антипов В.А., Васильев В.Ф. и др. Средство для профилактики и лечения токсикозов сельскохозяйственных животных и птицы // Решение о выдаче патента на изобретение, № 2006 145616/15 (049834) от 15.11.2007.
- Кузьминова Е.В., Семененко М.П., Фонтанецкий А.С. Лечебно-профилактические премиксы.- М: Животноводство России.- № 1.- 2008.-С. 61-62.