На правах рукописи

ИДИЕВ КИЕМИДИН УСМОНОВИЧ

КОМПЛЕКСНАЯ ИММУНИЗАЦИЯ ОВЕЦ

ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА, САЛЬМОНЕЛЛЕЗА

И ПАСТЕРЕЛЛЕЗА

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук

Душанбе - 2006

Работа выполнена в лаборатории по изучению бруцеллеза сельскохозяйственных животных Таджикского научно-исследовательского ветеринарного института Таджикской академии сельскохозяйственных наук.

Ведущая организация: Республиканская ветеринарная лаборатория.

Защита диссертации состоится 29 декабря 2006 г. в 10 ч на заседании диссертационного совета Д 050.001.01 при Таджикском научно-исследовательском ветеринарном институте Таджикской академии сельскохозяйственных наук по адресу: 734005, г. Душанбе, ул. Каххорова, 43.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Таджикского научно-исследовательского ветеринарного института по адресу: 734005, г. Душанбе, ул. Каххорова, 43.

Автореферат разослан 29 ноября 2006 г.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Одним из факторов, сдерживающих развитие овцеводства в Республике Таджикистан (РТ), являются инфекционные болезни, среди которых особое место занимают бруцеллез, сальмонеллез и пастереллез, протекающие как раздельно, так и в ассоциации и наносящие огромный экономический ущерб отрасли.

Из-за постоянной угрозы заражения людей бруцеллезом и сальмонеллезом решение вопросов профилактики и ликвидации этих болезней имеет важное медико-ветеринарное значение.

При смешанной инфекции затрудняется диагностика и существенно снижается эффективность раздельных профилактических прививок (Панкратов А. Я. с соавт., 1960; Аветисян А. В., 1970; Антюков М. А., 1977; Земчик В. П. с соавт., 1988), что обусловливает изыскание способов комплексной (одновременной) иммунизации и использование ассоциированных вакцин, позволяющих заметно повысить эффективность специфической профилактики (Ганиев М. К. с соавт., 1968; Безбородкин Н. С., 1970; Бояхгян А. Б. с соавт., 1972, 1980).

Во многих странах профилактическую и вынужденную иммунизацию крупного (КРС) и мелкого рогатого скота (МРС) проводят одновременно против двух и более болезней, так как раздельная вакцинация не обеспечивает своевременного формирования иммунитета к ним из-за растянутости сроков между прививками (Бояхгян А. Б. с соавт., 1970). По этой причине эффективность вакцинации и противоэпизоотических мероприятий резко снижается, что определяет научно-практическую актуальность поиска комплексного метода применения существующих моно- и разработки ассоциированных вакцин (Иванов М. М., 1965; Притулин П. И. с соавт., 1968).

В ряде случаев отдельные компоненты, входящие в состав ассоциированных биологических препаратов, повышают их иммуногенность (Иванов М. М. с соавт., 1968; Грязин В. И. с соавт., 1970; Махмадшоев А. Н., 1998; Махмудов К. Б., 2000; Муминов А. М., 2002).

Одновременная вакцинация против нескольких болезней сокращает материальные и трудовые затраты, особенно в условиях отгонно-пастбищного введения овцеводства.

В настоящее время иммунизация МРС против бруцеллеза (сухой живой вакциной из штамма Brucella melitensis Рев-1), сальмонеллеза и пастереллеза (ассоциированной формолвакциной против сальмонеллеза и пастереллеза сельскохозяйственных животных, производства Таджикского научно-исследовательского ветеринарного института) проводится раздельно с соблюдением интервала между введением препаратов согласно действующим наставлениям по применению.

В связи с вышеизложенным целью исследований явилась разработка метода комплексной иммунизации МРС против бруцеллеза (сухой живой вакциной из штамма Brucella melitensis Рев-1), сальмонеллеза и пастереллеза (ассоциированной формолвакциной против сальмонеллеза и пастереллеза сельскохозяйственных животных).

Для достижения поставленной цели решены следующие задачи:

1. Изучить распространение бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза в овцеводческих хозяйствах районов республиканского подчинения (РРП) Таджикистана.

2. В экспериментальных и производственных условиях определить эффективность одновременной иммунизации лабораторных животных и молодняка овец против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза.

3. Провести производственные испытания разработанного метода вакцинации.

4. Разработать рекомендации по комплексной иммунизации МРС против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза.

Научная новизна. Изучено распространение бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза в РРП Таджикистана. Установлено, что указанные инфекции широко распространены в этих районах и протекают как в виде моноинфекций, так и ассоциаций в разных сочетаниях.

Впервые экспериментально в сравнительном аспекте на лабораторных и сельскохозяйственных животных изучена возможность одновременной прививки МРС против бруцеллеза (сухой живой вакциной из штамма Brucella melitensis Рев-1), сальмонеллеза и пастереллеза (ассоциированной формолвакциной против сальмонеллеза и пастереллеза сельскохозяйственных животных). Определено, что комплексное применение этих препаратов безвредно, эффективно и предохраняет привитых животных от заражения соответствующими инфекциями.

Научная новизна проведенных исследований подтверждена:

Патентом РТ (TJ 42) Способ дифференциации поствакцинальных реакций от реакции при естественном бруцеллезе (2006 г.);

Патентом РТ (TJ 50) Комплексная иммунизация овец против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза (2006 г.).

Практическая значимость работы. Для ветеринарной практики разработан комплексный метод вакцинации овец против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза, прошедший производственные испытания, результаты которых свидетельствуют, что предложенный метод по эффективности не уступает существующим методам иммунизации. Следует отметить, что одновременная вакцинация овец и коз против этих инфекций сокращает материальные и трудовые затраты, стимулирует выработку клеточного и гуморального иммунитета, предотвращает повторный стресс при раздельной прививке против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза.

Материалы диссертации вошли в нормативную документацию:

1. Система профилактических и оздоровительных мероприятий против бруцеллеза мелкого рогатого скота и инфекционного эпидидимита баранов с применением вакцины из штамма Brucella melitensis Рев-1 (утв. Главным управлением ветеринарии с государственной ветеринарной инспекцией Министерства сельского хозяйства РТ 28.05.2005 г.).

2. Рекомендации по применению комплексной иммунизации мелкого рогатого скота против бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза (утв. ГУВ МСХ РТ 28.11.2006 г.).

3. Инструкция о мероприятиях по профилактике и ликвидации бруцеллеза животных (рассмотрена и одобрена ученым советом ТаджНИВИ, протокол №4 от 8.07.2005 г.).

4. Наставление по диагностике бруцеллеза животных (рассмотрено и одобрено ученым советом ТаджНИВИ, протокол №4 от 8.07.2005 г.).

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:

1. Результаты изучения особенностей распространения бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза в овцеводческих хозяйствах РРП Таджикистана.

2. Результаты изучения в экспериментальных и производственных условиях эффективности одновременной вакцинации лабораторных животных и молодняка овец и коз против этих болезней.

3. Результаты производственных испытаний разработанного метода.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на заседаниях ученого совета ТаджНИВИ (2001 - 2006); республиканских конференциях и семинарах-совещаниях (Душанбе, 2001 - 2006); Международной научно-практической конференции Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях (Воронеж, 2002); Международной научной конференции Состояние и перспективы развития ветеринарной науки и практики, посвященной государственной программе Аул (Алматы, 2003); Международной научно-практической конференции Актуальные проблемы болезней животных в современных условиях, посвященной 60-летию ТаджНИВИ (Душанбе, 2003); II Международной конференции Актуальные вопросы диагностики болезней животных (Алматы, 2005); III Международной конференции Состояние и перспективы развития производства ветеринарных биопрепаратов (Алматы, 2006).

Публикации. По результатам исследований опубликованы 9 научных работ, получены 2 патента РТ.

Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения.

Диссертация изложена на 124 страницах текста, набранного на компьютере, иллюстрирована 27 таблицами и 15 рисунками. Список литературы включает 187 наименования. В приложение включены материалы, подтверждающие внедрение результатов исследования в практику.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Работа выполнена в 2001 - 2005 гг. в лаборатории по изучению бруцеллеза сельскохозяйственных животных ТаджНИВИ в соответствии с республиканской научно-технической программой Разработать и внедрить научно-обоснованную систему мероприятий по оздоровлению животноводческих хозяйств от бруцеллеза животных с учетом новых методов хозяйствования на 2001 - 2005 гг., зарегистрированной в НПИЦентре РТ (№ госрегистрации 000000966).

Научно-производственные опыты, апробация и производственная проверка полученных результатов проведены в трех хозяйствах РРП (производственный кооператив (ПК) им. Л. Муродова, дехканские хозяйства (д/х) им. К. Маркса Гиссарского и Таджикистан Варзобского районов) и частных хозяйствах Шахринавского района.

В ряде комплексных исследований принимали участие сотрудники лаборатории вирусологии ТаджНИВИ К. Б. Махмудов, Н. Р. Сатторов, Р. М. Юсупов, которым автор выражает искреннюю признательность за оказанную помощь и сотрудничество.

Исследование распространения бруцеллеза, сальмонеллеза и пастереллеза овец и коз проводили путем анализа и обобщения данных лабораторий по изучению бруцеллеза сельскохозяйственных животных и вирусологии ТаджНИВИ, статистических материалов ГУВ МСХ РТ.

Бруцеллез, сальмонеллез и пастереллез диагностировали на основании результатов эпизоотологических, бактериологических и серологических исследований с учетом клинических признаков болезни, руководствуясь при этом общепринятыми методами.

Бактериологические посевы из подчелюстных, шейных, аксиллярных, паховых, парааортального лимфатических узлов, печени, селезенки и костного мозга проводили в две пробирки с мясопептонным печеночно-глюкозно-глицериновым агаром (МППГГА) и соевым агаром и одну пробирку с мясопептонным печеночно-глюкозно-глицериновым бульоном (МППГГБ). Посевы инкубировали при температуре 37оС в течение 30 суток.

Индекс инфицированности (ИИ) определяли по формуле:

где Квк - количество выделенных культур,

Кж - количество животных в опыте,

Ко - количество объектов, из которых проводили высевы.

Иммунологическую реактивность животных и антигенную активность культур бруцелл вакцинного штамма определяли в реакциях агглютинации (РА), связывания комплемента (РСК), а антитела к антигенам возбудителей сальмонеллеза и пастереллеза в сыворотках крови овец - в РА.

Бактериологические и серологические исследования проводили на базе Гиссарской ветеринарной лаборатории и лабораторий по изучению бруцеллеза сельскохозяйственных животных и вирусологии ТаджНИВИ.

Эксперименты проводили на 70 морских свинках (массой 350 - 400 г), 24 кроликах породы шиншилла (массой 2,0 - 2,3 кг), 110 ярках (в возрасте 2 - 6 месяцев, гиссарской породы); производственные испытания - на 212 овцах (гиссарской породы) разного возраста.

В работе использовали:

1) сухую живую вакцину из штамма Br. melitensis Рев-1 (далее вакцина из штамма Рев-1), производства НПП Антиген (Республика Казахстан);

2) ассоциированную формолвакцину против сальмонеллеза и пастереллеза сельскохозяйственных животных (далее ассоциированная вакцина против сальмонеллеза и пастереллеза), изготовленную ТаджНИВИ.

Перед применением вакцины культуры бруцелл вакцинного штамма изучали на диссоциацию и определяли количество живых микробных клеток (м.к.) в препарате. Для этого взвесь культуры засевали в чашки Петри на соевый агар с таким расчетом, чтобы получить большое количество изолированных друг от друга колоний.

Жизнеспособность бруцелл в каждой серии вакцины, которую разводили до концентрации 10 м.к./мл, определяли путем посева на поверхность агара в чашки Петри. После определения количества жизнеспособных бруцелл в растворе каждой ампулы вычисляли средний арифметический показатель данной серии препарата.

Для оценки напряженности иммунитета морских свинок (через 90 суток после вакцинации) и кроликов (через 30 дней после прививки) подкожно в область паха заражали вирулентной культурой Br. melitensis в объеме 1 мл (100 м.к. - 10-кратная заражающая доза); кроликов также заражали культурами вирулентных штаммов Salmonella dublin и Рasteurella multocida в объеме по 3 мл (500 млн м.к.).

За подопытными и контрольными животными проводили клиническое наблюдение с измерением температуры тела в течение 10 дней.